專利名稱：吉馬酮的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種中藥有效成分的新用途。本發(fā)明所述HPV是指人乳頭瘤病毒。
背景技術(shù)：
中藥有效成分是其發(fā)揮藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，有效物質(zhì)的清晰與系統(tǒng)全面的質(zhì)量 控制是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵和核心，將中藥的療效物質(zhì)藥效研究清楚，從而代替中藥有效部 位或提取物，才能保障其質(zhì)量均一、療效穩(wěn)定、安全可控，成為標(biāo)準(zhǔn)有效成分，作為原料藥制 備成藥物，因此，對(duì)中藥有效成分中進(jìn)行深入的研究，具有深遠(yuǎn)的意義，有助于中藥現(xiàn)代化、 有助于中藥走向世界，更加有利于人類的身體健康。吉馬酮是中藥莪術(shù)中有效成分之一，中國(guó)專利(申請(qǐng)?zhí)枮?2125900. 3)公開(kāi)吉馬 酮用來(lái)抗腫瘤細(xì)胞，未檢索到吉馬酮單獨(dú)使用用來(lái)治療宮頸癌的文獻(xiàn)。宮頸癌的致病因素現(xiàn)今未研究清楚，現(xiàn)研究較多的認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制主要包括人乳 頭瘤病毒、皰疹病毒、人類免疫缺陷病毒(病毒致宮頸癌發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展；楊麗麗、佟 秀琴；內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志hner Mongolia Med J 2009年第41卷第8期)，衣原體、細(xì)菌性感 染、滴蟲(chóng)等(生殖道感染與宮頸癌前病變及宮頸癌的相關(guān)性分析；楊潔；中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥2010 年9月第5卷第27期)，因此，在眾多導(dǎo)致宮頸癌因素中，證明吉馬酮對(duì)什么原因?qū)е聦m頸 癌具有治療作用至關(guān)重要，而這種深入的研究，可以很好的確證吉馬酮能夠治療宮頸癌這 種疾病，為吉馬酮藥效機(jī)理的揭示，為吉馬酮在新藥研發(fā)過(guò)程中，提供了確切的、深入的理 診基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，本公司的科研人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究，從眾多宮頸癌的致病因素中，研 究并證明了吉馬酮對(duì)HPV感染具有很好的治療作用，說(shuō)明吉馬酮對(duì)HPV感染導(dǎo)致的宮頸癌 具有很好的預(yù)防和治療作用；特別是含量大于等于50%的吉馬酮，與市售莪術(shù)油比較，具 有更好的藥理作用；與含量小于50%吉馬酮比較，也具有更好的藥理作用。本發(fā)明通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。吉馬酮在制備治療HPV感染藥物中的應(yīng)用。吉馬酮在制備治療HPV感染導(dǎo)致的宮頸疾病藥物中的應(yīng)用。吉馬酮在制備治療HPV感染導(dǎo)致的宮頸癌藥物中的應(yīng)用。其中吉馬酮含量大于等于50%小于100%。其中HPV為高危型人乳頭瘤病毒亞型或低危型人乳頭瘤病毒亞型。其中HPV 類型為 16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、66、59、68、73 和 82 型中的一種或幾種。其中HPV 類型為 6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81、83 和 89 型一種或幾種。其中吉馬酮作用部位包括但不限于HPV中E6和E7蛋白。
其中吉馬酮為活性成分的藥物制劑。其中藥物制劑為口服制劑、注射制劑、陰道制劑或直腸制劑。其中口服制劑為片劑、顆粒劑、膠囊劑、滴丸劑或口服液；其中注射制劑為注射乳 劑或凍干粉針劑；其中陰道制劑為栓劑、軟膠囊、泡騰片、凝膠劑、軟膏劑、陰道片、膜劑或泡 沫劑；其中直腸制劑為栓劑或軟膠囊。本發(fā)明所述HPV是指人乳頭瘤病毒。藥理學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)1抗人乳頭瘤病毒的作用試驗(yàn)試劑HPV核酸擴(kuò)增(PCR)熒光檢測(cè)試劑盒(包括DNA提取液1、DNA提取液 2、PCR反應(yīng)液、Taq酶、UNG)。其他試劑均為分析純。試驗(yàn)藥物試驗(yàn)1組市售莪術(shù)油。試驗(yàn)2組含量為47. 4%吉馬酮。試驗(yàn)3組含量為92. 8%吉馬酮。試驗(yàn)方法樣品制備將上述試驗(yàn)1組配置成500 μ g/ml溶液；試驗(yàn)2組配置成20 μ g/ml溶 液；將試驗(yàn)3配置成300 μ g/ml溶液；試驗(yàn)3組配置成150 μ g/ml ；試驗(yàn)3組配置成50 μ g/ ml ；試驗(yàn)3組配置成20 μ g/ml ；試驗(yàn)3組配置成10 μ g/ml ；HPV感染標(biāo)本制備從醫(yī)院門(mén)診確診為HPV感染采取的離體標(biāo)本(HPV類型為16、 52,58混合型)，集中到1只離心管中，稱重30mg，用玻璃勻漿器勻漿，再加入5mL生理鹽水， 配成6mg/mL的離體混懸液，備用。樣品處理的方法用移液槍吸取25 μ L樣品液和25 μ L標(biāo)本混懸液至15mL離心管 中，振搖均勻，使樣品與標(biāo)本能充分作用，置37°C水浴箱培養(yǎng)，在樣品處理標(biāo)本ld、3d、5d、 7d后，各取1組進(jìn)行以下試驗(yàn)。HPV-DNA的提取從溫浴箱中取出經(jīng)樣品處理的標(biāo)本混懸液，按試劑盒步驟提取 DNA 加入50 μ L生理鹽水，混勻后再加入100 μ LDNA提取液，振搖均勻，1200r/min離心 IOmin,棄去上清液，再加入25 μ L DNA提取液2，充分混勻，100°C沸水煮lOmin，1200r/min 離心lOmin，上清液即為HPV-DNA模板。DNA擴(kuò)增取檢測(cè)試劑盒中的PCR反應(yīng)液37.6yL，Taq DNA聚合酶0.4yL， UNGO. 03 μ L于PCR反應(yīng)管中，再加入HPV-DNA模板2 μ L，扣嚴(yán)管蓋，置于定量PCR儀上循環(huán) 擴(kuò)增。HPV-DNA經(jīng)高溫變性、低溫退火及延伸進(jìn)行循環(huán)擴(kuò)增，循環(huán)程序設(shè)置為37°C，5min; 94°C，Imin ；95°C，5sec ；60°C，30sec，循環(huán) 40 次。量標(biāo)準(zhǔn)曲線用熒光探針檢測(cè)定量，按照檢測(cè)試劑盒要求，設(shè)立4個(gè)系列濃度的 HPV-DNA 定量陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品，依次為 5X 107/mL，5X 106/mL，5X 105/mL，5X 104/mL，經(jīng) PCR 檢測(cè) (其檢測(cè)靈敏度為1乂107!^，結(jié)果小于該濃度者判定為陰性)。以起始拷貝數(shù)的自然對(duì)數(shù) 為橫坐標(biāo)，循環(huán)閾值為縱坐標(biāo)，得到的回歸直線為標(biāo)準(zhǔn)曲線，據(jù)此對(duì)樣品的擴(kuò)增倍數(shù)進(jìn)行定量。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。表1不同試驗(yàn)藥物對(duì)HPV感染的DNA作用結(jié)果
權(quán)利要求
1.吉馬酮在制備治療HPV感染藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中吉馬酮含量大于等于50%小于100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中HPV為高危型人乳頭瘤病毒亞型或低危型人乳頭瘤病毒亞型。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中HPV類型為16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、 53、56、58、66、59、68、73和82型中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中HPV類型為6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81、 83和89型一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求4-5任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中HPV包括E6和E7蛋白。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中吉馬酮作用部位包括HPV中E6和E7蛋白。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其中藥物制劑為口服制劑、注射制劑、陰道制劑或直腸 制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其中口服制劑為片劑、顆粒劑、膠囊劑、滴丸劑或口服 液；其中注射制劑為注射乳劑或凍干粉針劑；其中陰道制劑為栓劑、軟膠囊、泡騰片、凝膠 劑、軟膏劑、陰道片、膜劑或泡沫劑；其中直腸制劑為栓劑或軟膠囊。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明公開(kāi)了吉馬酮的新用途即吉馬酮在制備治療HPV感染藥物中應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)試驗(yàn)研究，在眾多導(dǎo)致宮頸癌的因素中，確定了吉馬酮對(duì)HPV感染導(dǎo)致的宮頸癌具有很好的預(yù)防和治療作用。
文檔編號(hào)A61P15/00GK102058568SQ20101060406
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2010年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月24日
發(fā)明者馮仲異, 徐揚(yáng), 徐朗, 陳容, 黃嫻 申請(qǐng)人:海南碧凱藥業(yè)有限公司