專利名稱：一種枸杞葉黃酮的提取制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種黃酮的提取制備方法，尤其涉及一種枸杞葉黃酮的提取制備方法。
背景技術：
枸杞葉是茄科(Solanaceae)枸杞屬(Lycium Linn.)植物寧夏枸杞(Lycium barbarum L.)的葉，俗稱天精草，呈淡綠色，無毒，是一味重要的中藥材，具有補虛益精、清 熱止渴、養(yǎng)肝明目等功效。現(xiàn)代科學研究證明枸杞葉具有抗衰老、抗炎、保護心腦血管、抗 菌及抗病毒等作用，同時也是一種滋補強壯劑，具有很高的藥用和食用價值，廣泛應用于醫(yī) 藥、化工、食品及化妝品等行業(yè)。枸杞葉黃酮是一類天然黃酮類化合物，其含有豐富的黃酮類、黃酮醇類、黃酮醇苷 類、黃烷醇類等抗心腦血管疾病以及抗癌、抗氧化物質，因此枸杞葉黃酮具有較高的保護心 腦血管、抗癌、抗氧化等多種生物活性。目前，對黃酮的提取制備通常采用浸漬法、回流提取法、超聲提取法和微波提取 法。其中浸漬法是一種傳統(tǒng)的天然產物提取方法，該法是指在室溫條件下將粉碎好的原料 放入盛有適當溶劑的密閉容器中浸泡以溶出其中化學成分的方法。該方法操作過程相當費 時，提取效率差，少則幾小時，多則需數(shù)周時間。同時要達到浸漬提取完全需要消耗大量溶 劑，也可導致所提取化合物和原料的潛在丟失，如某些化合物如果在室溫下溶解性很差則 不能被有效提取。另外，浸提液易霉變，需加入適量的防腐劑如甲苯、甲醛或氯仿等。回流提取法是用易揮發(fā)的有機溶劑加熱回流提取植物成分的方法。該法主要使 用低沸點的有機溶劑如乙醇、氯仿等加熱提取天然藥物中有效成分。為減少溶劑的揮發(fā)損 失，保持與藥材持久的接觸，通過加熱浸出液，使溶劑受熱蒸發(fā)，經冷凝后變?yōu)橐后w流回浸 出器，如此反復至浸出完全的一種熱提取方法。該方法操作較麻煩、提取時間長、溶劑消耗 量較大，并且長時間的加熱回流會破壞熱不穩(wěn)定的化合物。超聲提取法是采用超聲波輔助提取溶劑進行提取的方法。主要利用超聲波的空化 作用，破壞植物藥材細胞，使溶劑易于滲入細胞內，同時由于超聲波的強烈振動能，加強了 胞內物質的釋放、擴散和溶解，加速有效成分的浸出。該方法提取溫度難以控制，對容器壁 的厚薄及放置位置要求較高，目前尚為實驗室小規(guī)模使用，大規(guī)模生產還有待于解決設備 問題。微波提取法是一種主要利用微波強烈的熱效應對天然藥物中有效成分進行提取 的方法。當被提取物和溶劑共處于快速振動的微波電磁場中時，目標組分的分子在高頻電 磁波的作用下，高速振動產生熱能，使分子本身獲得巨大能量而得以掙脫周圍環(huán)境的束縛， 實現(xiàn)分子自內向外的遷移，從而達到提取目的。該方法對儀器設備要求高，運行成本高，且 應用范圍較窄。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種以枸杞葉為原料、成本低廉、提取率高的 枸杞葉黃酮的提取制備方法。為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步 驟(1)將枸杞葉經人工挑揀除雜后，室內陰干，得到枸杞葉干樣；(2)將所述枸杞葉干樣經粉碎后，過20 320目篩，得到枸杞粉；(3)將所述枸杞粉與質量濃度為5 100%的乙醇按1 5 100的料液體積比 浸提0. 5 360h后，得到浸提液；(4)所述浸提液經膠體磨研磨1 20次后，得到膠體狀的枸杞葉浸提溶液；(5)將所述膠體狀的枸杞葉浸提溶液在1 200Mpa的壓力下進行均質后，經離心 分離，得到上清液和濾渣；(6)將所述上清液以0. 1 10t/h的流速經孔徑為0. 01 10 μ m的陶瓷膜在溫度 為15 55°C、壓力為0. 005 3Mpa的條件下除雜，得到濾液；(7)所述濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用2 50倍床層體積、質量濃度為20% 100%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃 酮，得到含有枸杞葉黃酮的洗脫液；(8)將所述含有枸杞葉黃酮的洗脫液經真空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液； 該枸杞葉黃酮濃縮液經干燥后，即得枸杞葉黃酮粉末。用下述制備方法代替上述步驟(3)制備浸提液將所述枸杞粉與質量濃度為5 100%的乙醇按1 5 100的料液體積比在10 100°C溫度下進行水浴加熱，經回流提取 0. 5 72h后過濾即得。用下述制備方法代替上述步驟(3)制備浸提液將所述枸杞粉與質量濃度為5 100%的乙醇按1 5 100的料液體積比在10 100°C溫度下進行超聲提取，0. 1 48h 后過濾即得。所述步驟(4)中的膠體磨的轉子轉速為2000r/min 20000r/min。所述步驟(5)中的離心速度為2000 20000r/min，離心時間為1 60min。所述步驟⑶中的真空減壓濃縮的條件是真空度為0. 03 0. 07MPa，溫度為20 65 "C。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有以下優(yōu)點1、由于本發(fā)明將膠體磨磨合技術、高壓均質技術及膜分離技術聯(lián)合應用，因此，不 僅有效地縮短了提取時間，減少了工藝過程中的提取溶劑消耗量及能耗，而且所得枸杞葉 黃酮性質穩(wěn)定，含量高，抗心腦血管疾病、抗癌、抗氧化等生物活性高。2、由于本發(fā)明采用陶瓷膜分離，因此，不但有效去除提取液中的鞣質、粘液質、細 菌等雜質，而且有效地降低了設備投資，降低了能耗，同時也使工藝簡單化。3、由于本發(fā)明采用資源量豐富的枸杞葉為原料，因此，有效地降低了生產成本。4、由于本發(fā)明使用膠體磨和高壓均質機，因此，不但保證了枸杞葉有效成分的均 一、性質穩(wěn)定，且所得黃酮抗心腦血管疾病、抗癌及抗氧化的活性高，而且可以顯著地縮短 提取時間和提高提取率。
5、本發(fā)明所得產品經紫外分光光度計和高效液相色譜檢測，枸杞葉總黃酮含量 ^ 60%，黃酮醇苷含量> 30%，蘆丁含量> 20%，可廣泛應用于食品、醫(yī)療、醫(yī)藥保健等行 業(yè)。6、本發(fā)明儀器設備操作簡便，技術參數(shù)易于控制，適應范圍廣，可用于工業(yè)化大規(guī) 模生產，形成生物產品產業(yè)鏈。
具體實施例方式實施例1 一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將5kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過20目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為80%的乙醇按1 5的料液體積比浸提10h，得到浸提液。(4)浸提液經轉子轉速為20000r/min的膠體磨研磨1次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在IOMpa的壓力下進行均質， IOmin后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以2000r/min的離心速度對均一的 枸杞葉浸提溶液離心分離5min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以1. 5t/h的流速經孔徑為0. 1 μ m的陶瓷膜在溫度為15°C、壓力為 0. 005Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用2倍床層 體積、質量濃度為30%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞葉 黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 03Mpa、溫度為30°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在50°C溫度下干燥后，即得 1.05kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為65. 6%，黃酮醇苷含量為32. 4%，蘆丁含量為24. 3%。實施例2 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將50kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過200目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為45%的乙醇按1 100的料液體積比浸提240h，得到 浸提液。(4)浸提液經轉子轉速為lOOOOr/min的膠體磨研磨10次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在5Mpa的壓力下進行均質， 300min后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以7200r/min的離心速度對均一 的枸杞葉浸提溶液離心分離30min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以5. 5t/h的流速經孔徑為0. 1 μ m的陶瓷膜在溫度為35°C、壓力為 3Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。
(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用20倍床 層體積、質量濃度為95%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 06Mpa、溫度為45°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在30°C溫度下干燥后，即得 9. 87kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為68. 6%，黃酮醇苷含量為35. 4%，蘆丁含量為23. 7%。實施例3 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將20kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過100目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為95%的乙醇按1 10的料液體積比浸提24h，得到浸 提液。(4)浸提液經轉子轉速為8000r/min的膠體磨研磨5次后，得到膠體狀的枸杞葉浸 提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在42Mpa的壓力下進行均質， 150min后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以3600r/min的離心速度對均一 的枸杞葉浸提溶液離心分離20min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以0. 5t/h的流速經孔徑為0. 2μπι的陶瓷膜在溫度為45°C、壓力為 2Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用40倍床 層體積、質量濃度為80%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 04Mpa、溫度為55°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在60°C溫度下干燥后，即得 4. 16kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為68. 2%，黃酮醇苷含量為36. 4%，蘆丁含量為22. 1%。實施例4 一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將IOOkg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過320目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為5%的乙醇按1 100的料液體積比浸提0. 5h，得到浸 提液。(4)浸提液經轉子轉速為2000r/min的膠體磨研磨20次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在IMpa的壓力下進行均質， Imin后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以20000r/min的離心速度對均一的 枸杞葉浸提溶液離心分離lmin，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以10t/h的流速經孔徑為0. 01 μ m的陶瓷膜在溫度為55°C、壓力為3Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用50倍床 層體積、質量濃度為20%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 07Mpa、溫度為20°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在20°C溫度下干燥后，即得 21. 24kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為65. 3 %，黃酮醇苷含量為32.1%，蘆丁含量為20. 8 %。實施例5 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將40kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過40目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為100%的乙醇按1 6的料液體積比浸提360h，得到浸 提液。(4)浸提液經轉子轉速為lOOOOr/min的膠體磨研磨3次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在200Mpa的壓力下進行均 質，300min后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以3600r/min的離心速度對均 一的枸杞葉浸提溶液離心分離60min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以0. lt/h的流速經孔徑為ΙΟμπι的陶瓷膜在溫度為30°C、壓力為 0. IMpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用5倍床層 體積、質量濃度為100%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞葉 黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 06Mpa、溫度為65°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在65°C溫度下干燥后，即得 8. 03kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為67. 4%，黃酮醇苷含量為33. 5%，蘆丁含量為21. 3%。實施例6 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將60kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過40目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為80%的乙醇按1 50的料液體積比在85°C溫度下進 行水浴加熱，經回流提取4h后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為lOOOOr/min的膠體磨研磨10次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在IOOMpa的壓力下進行均 質，4h后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以4500r/min的離心速度對均一的 枸杞葉浸提溶液離心分離30min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。
7
(6)將上清液以5t/h的流速經孔徑為0. 5μπι的陶瓷膜在溫度為40°C、壓力為 0. IMpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用10倍床 層體積、質量濃度為80%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 05Mpa、溫度為65°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在50°C溫度下干燥后，即得 11. 64kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為62. 2%，黃酮醇苷含量為31. 8%，蘆丁含量為20. 7%。實施例7 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將20kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過20目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為5%的乙醇按1 5的料液體積比在10°C溫度下進行 水浴加熱，經回流提取0. 5h后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為2000r/min的膠體磨研磨1次后，得到膠體狀的枸杞葉浸 提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在IMpa的壓力下進行均質， Ih后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以2000r/min的離心速度對均一的枸 杞葉浸提溶液離心分離lmin，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以0. lt/h的流速經孔徑為0. 01 μ m的陶瓷膜在溫度為15°C、壓力為 0. 005Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用2倍床層 體積、質量濃度為20%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞葉 黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 03Mpa、溫度為20°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在40°C溫度下干燥后，即得 3. 86kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為61. 2%，黃酮醇苷含量為30. 3%，蘆丁含量為19. 8%。實施例8 一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將40kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過320目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為100%的乙醇按1 100的料液體積比在100°C溫度下 進行水浴加熱，經回流提取72h后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為20000r/min的膠體磨研磨20次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在200Mpa的壓力下進行均 質，5h后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以20000r/min的離心速度對均一的枸杞葉浸提溶液離心分離60min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以10t/h的流速經孔徑為ΙΟμπι的陶瓷膜在溫度為55°C、壓力為 3Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用50倍床 層體積、質量濃度為100%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 07Mpa、溫度為65°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在50°C溫度下干燥后，即得 4. 04kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為63. 1%，黃酮醇苷含量為32. 7%，蘆丁含量為20. 8%。實施例9 一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將50kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過40目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為60%的乙醇按1 50的料液體積比在80°C溫度下進 行水浴加熱，經回流提取IOh后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為lOOOOr/min的膠體磨研磨5次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在IOOMpa的壓力下進行均 質，3h后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以5000r/min的離心速度對均一的 枸杞葉浸提溶液離心分離30min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以2t/h的流速經孔徑為5μπι的陶瓷膜在溫度為45°C、壓力為 0. 5Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用5倍床層 體積、質量濃度為50%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞葉 黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 05Mpa、溫度為60°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在55°C溫度下干燥后，即得 10. 12kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為64. 8%，黃酮醇苷含量為32. 4%，蘆丁含量為22. 6%。實施例10 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將50kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過30目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為60%的乙醇按1 50的料液體積比在55°C溫度下以 360W功率進行超聲提取，Ih后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為15000r/min的膠體磨研磨5次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在120Mpa的壓力下進行均質，5h后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以5000r/min的離心速度對均一的 枸杞葉浸提溶液離心分離40min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以8T/h的流速經孔徑為0. 2μπι的陶瓷膜在溫度為50°C、壓力為 0. 3Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用20倍床 層體積、質量濃度為30%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 04Mpa、溫度為60°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在55°C溫度下干燥后，即得 10. 26kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為67. 1 %，黃酮醇苷含量為34. 4 %，蘆丁含量為21.5%。實施例11 一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將20kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過20目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為5%的乙醇按1 5的料液體積比在10°C溫度下以 100W功率進行超聲提取，0. Ih后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為2000r/min的膠體磨研磨1次后，得到膠體狀的枸杞葉浸 提溶液。(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在IMpa的壓力下進行均質， Ih后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以2000r/min的離心速度對均一的枸 杞葉浸提溶液離心分離lmin，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以0. lt/h的流速經孔徑為0. 01 μ m的陶瓷膜在溫度為15°C、壓力為 0. 005Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用2倍床層 體積、質量濃度為20%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞葉 黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 03Mpa、溫度為20°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在40°C溫度下干燥后，即得 4. OOkg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為60. 5%，黃酮醇苷含量為31. 7%，蘆丁含量為19. 3%。實施例12 —種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀，去除雜質后，室內陰干，得到枸杞葉干樣。(2)將50kg枸杞葉干樣放入粉碎機中進行粉碎，粉碎后過320目篩，得到枸杞粉。(3)將枸杞粉與質量濃度為100%的乙醇按1 100的料液體積比在100°C溫度下 以360W功率進行超聲提取，48h后過濾即得。(4)浸提液經轉子轉速為20000r/min的膠體磨研磨20次后，得到膠體狀的枸杞葉
浸提溶液。
(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液放入高壓均質機中，在200Mpa的壓力下進行均 質，5h后形成均一的枸杞葉浸提溶液；然后，采用離心機以20000r/min的離心速度對均一 的枸杞葉浸提溶液離心分離60min，得到上清液和濾渣。收集上清液，棄去濾渣。(6)將上清液以10t/h的流速經孔徑為ΙΟμπι的陶瓷膜在溫度為55°C、壓力為 3Mpa的條件下除去懸浮物、鞣質及粘液質，收集滲透側的溶液，得到濾液。(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用50倍床 層體積、質量濃度為100%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得到含有枸杞 葉黃酮的洗脫液。(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液在真空度為0. 07Mpa、溫度為65°C的條件下經真 空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該枸杞葉黃酮濃縮液在60°C溫度下干燥后，即得 11. 4kg枸杞葉黃酮粉末。經高效液相色譜和紫外分光光度計檢測，該枸杞葉黃酮粉末中枸杞葉總黃酮含量 為61. 9%，黃酮醇苷含量為32. 2%，蘆丁含量為20. 7%。
權利要求
1.一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀除雜后，室內陰干，得到枸杞葉干樣；(2)將所述枸杞葉干樣經粉碎后，過20 320目篩，得到枸杞粉；(3)將所述枸杞粉與質量濃度為5 100%的乙醇按1 5 100的料液體積比浸提 0.5 360h后，得到浸提液;(4)所述浸提液經膠體磨研磨1 20次后，得到膠體狀的枸杞葉浸提溶液；(5)將所述膠體狀的枸杞葉浸提溶液在1 200Mpa的壓力下進行均質后，經離心分離， 得到上清液和濾渣；(6)將所述上清液以0.1 10t/h的流速經孔徑為0. 01 10 μ m的陶瓷膜在溫度為 15 55°C、壓力為0. 005 3Mpa的條件下除雜，得到濾液；(7)所述濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用2 50倍 床層體積、質量濃度為20% 100%的乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞葉黃酮，得 到含有枸杞葉黃酮的洗脫液；(8)將所述含有枸杞葉黃酮的洗脫液經真空減壓濃縮后，得到枸杞葉黃酮濃縮液；該 枸杞葉黃酮濃縮液經干燥后，即得枸杞葉黃酮粉末。
2.如權利要求1所述的一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，其特征在于用下述制備方 法代替權利要求1中所述步驟(3)制備浸提液將所述枸杞粉與質量濃度為5 100%的 乙醇按1 5 100的料液體積比在10 100°C溫度下進行水浴加熱，經回流提取0.5 72h后過濾即得。
3.如權利要求1所述的一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，其特征在于用下述制備方 法代替權利要求1中所述步驟(3)制備浸提液將所述枸杞粉與質量濃度為5 100%的 乙醇按1 5 100的料液體積比在10 100°C溫度下進行超聲提取，0. 1 48h后過濾即得。
4.如權利要求1所述的一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，其特征在于所述步驟(4) 中的膠體磨的轉子轉速為2000r/min 20000r/min。
5.如權利要求1所述的一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，其特征在于所述步驟(5) 中的離心速度為2000 20000r/min，離心時間為1 60min。
6.如權利要求1所述的一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，其特征在于所述步驟(8) 中的真空減壓濃縮的條件是真空度為0. 03 0. 07MPa，溫度為20 65°C。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種枸杞葉黃酮的提取制備方法，該方法包括以下步驟(1)將枸杞葉經人工挑揀除雜后，室內陰干，得到枸杞葉干樣；(2)將枸杞葉干樣經粉碎、過篩，得到枸杞粉；(3)將枸杞粉用乙醇浸提，得到浸提液；(4)浸提液經膠體磨研磨后，得到膠體狀的枸杞葉浸提溶液；(5)將膠體狀的枸杞葉浸提溶液經均質、分離，得到上清液和濾渣；(6)將上清液用陶瓷膜除雜，得到濾液；(7)濾液經弱極性大孔吸附樹脂吸附、乙醇溶液洗脫，得到含有枸杞葉黃酮的洗脫液；(8)將含有枸杞葉黃酮的洗脫液經真空減壓濃縮、干燥后，即得枸杞葉黃酮粉末。本發(fā)明成本低廉、提取率高，所得枸杞葉黃酮性質穩(wěn)定，含量高，抗心腦血管疾病、抗癌、抗氧化等生物活性高。
文檔編號A61P9/00GK102000208SQ20101054261
公開日2011年4月6日 申請日期2010年11月9日 優(yōu)先權日2010年11月9日
發(fā)明者于瑞濤, 劉增根, 梅麗娟, 王啟蘭, 邵赟, 陳晨, 陶燕鐸 申請人:中國科學院西北高原生物研究所