專利名稱：包含NF_KB抑制劑和彈性蛋白原促進劑的組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明提供了包含NFkB抑制劑和彈性蛋白原促進劑的組合物。該組合物可用于 (例如)局部施用至皮膚。
背景技術：
皮膚的老化可理解為受到內在因素和外在因素的影響。內在因素包括皮膚的自然 變化，這由基因構成(genetic makeup)調節(jié)。外在因素包括諸如紫外損害、環(huán)境因素等之 類的外源性影響。皮膚的老化會通過真皮胞外基質的兩種主要組分即膠原和彈性蛋白這兩種纖維 狀蛋白質的變化，對皮膚的彈性和強度造成不利影響。例如，彈性蛋白是由彈性蛋白的前體 蛋白質分子(例如彈性蛋白原)交聯(lián)成螺旋纖絲而形成的大的纖維狀蛋白質。膠原比彈性 蛋白更普遍存在，是另一種可形成皮膚結構網絡的纖維蛋白。某些物質因其抑制交聯(lián)彈性蛋白的降解的有益作用而為人所知。例如，已知基質 金屬蛋白酶(MMP)(其為一組能夠分解胞外基質中的大分子的酶類)在彈性蛋白降解中起 到重要作用。有許多植物提取物已被描述為多種MMP的抑制劑。例如J. L. Lamaison描述了 用選自薔薇科的植物的提取物抑制彈性蛋白酶(豬胰彈性蛋白酶)，并將該抑制作用歸因 于這些提取物所含的單寧類物質。Ann. Pharmaceutiques Francaises 1990,48, 335-340o Μ. Herrmann等人揭示，黑莓葉的水醇提取物SymMatrix顯示具有MMP-1、MMP_2和MMP-9抑 制活性。SOFff Journal (2006), 132 (4), 42-46 另外，某些天然化合物或合成化合物已知具有促進彈性蛋白前體產生和/或促進 膠原蛋白形成的有益效果。例如，類視色素能上調成纖維細胞中的彈性蛋白產生。Liu等 人，Am J Physiol. 1993 Nov ；265(5Pt 1) :L430_437。類視色素也已知可促進膠原形成。此外，已指出某些物質能積極影響彈性蛋白原的交聯(lián)。例如，賴氨酰氧化酶可 充當交聯(lián)酶并可充當支架的部件以確保彈性蛋白在確定空間沉積。Liu等人，Nature Genetics (2004)，36 ), 178-182。Valerie等人公開了可誘導賴氨酰氧化酶(LOXL)的基 因表達的蒔蘿提取物，其負責成人中的彈性蛋白交聯(lián)。Experimental Dermatology (2006), 15(8)，574-81。另夕卜，黑醋栗、小豆蔻、黑蘿卜、花竹柏(box holly)、阿魏(Asea foetida)膠、已烯酸乙酯、丁酸甲酯和癸二烯酸乙酯被公開為LOXL基因表達的促進劑。 GB2,438, 999。因此，已提出了多種途徑和試劑來積極影響彈性蛋白和膠原及與它們相關的皮膚 特性。然而，本發(fā)明人已認識到對可進一步積極影響彈性蛋白或膠原或積極影響這兩者的 新型試劑和試劑組合的需要。本發(fā)明人現(xiàn)已出乎意料地發(fā)現(xiàn)了特殊的一類抗炎化合物、試劑的有益效果，其可 抑制細胞核轉錄因子k-B (NFkB)。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，盡管NFkB抑制劑本身未必可增強彈性 蛋白原活性，但當NFkB抑制劑與彈性蛋白原促進劑組合時，所得的組合在彈性蛋白原促進 功效方面可表現(xiàn)具有不可思議地大的、令人意外的協(xié)同增強。更出乎意料地是，本發(fā)明人已
4確定先前已知其對NFkB有抑制活性的某些化合物(例如間苯二酚衍生物)為特別適于顯 著增強彈性蛋白原促進劑的彈性蛋白原活性。

發(fā)明內容
在一個方面，本發(fā)明提供了包含NFkB抑制劑和彈性蛋白原促進劑的組合物。根據另一個方面，本發(fā)明提供了處理皮膚老化跡象的方法，該方法包括給需要這 種處理的皮膚局部施用包含NFkB抑制劑和彈性蛋白原促進劑的組合物。通過本發(fā)明的具體實施方式
和權利要求書，本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點將顯而易 見。
具體實施例方式據信根據本文的描述，本領域的技術人員可最大限度地利用本發(fā)明。下面的具體 實施例應該理解為僅僅是示例性的，并且無論如何都不會以任何方式限制本公開的其余部 分。除非另有定義，否則本文使用的所有科技術語的含義與本發(fā)明所屬領域的普通技 術人員通常所理解的含義相同。另外，將本文提及的所有出版物、專利申請、專利及其他參 考文獻以引用方式并入本文中。除非另外指明，否則百分比或濃度指重量百分比或重量濃 度(即％ (W/W))。除非另有說明，否則所有范圍包括端值，例如“4至9”包括端值4和9。本文所描述的產物可任選為成品包裝形式。在一個實施例中，所述包裝為裝有所 述組合物的諸如塑料、金屬或玻璃管或廣口瓶之類的容器。該產品可另外具有用于儲存該 容器的諸如塑料或紙板盒之類的包裝。在一個實施例中，該產品包含本發(fā)明的組合物并且 具有引導使用者將該組合物施用至皮膚以治療如下文論述的皮膚老化跡象的說明書。這種 說明書可印刷在容器上、標簽插頁或任何其它包裝上。如本文所用，“局部施用”意指例如利用手或諸如擦拭物、輥或噴霧器之類的施用 裝置，直接涂抹或散布在外部皮膚、頭皮或毛發(fā)上。如本文所用，“美容上可接受的”意指該術語所描述的成分適用于與組織(例如皮 膚或毛發(fā))接觸而無不當的毒性、不相容性、不穩(wěn)定性、刺激性、變應性反應或類似癥狀。本發(fā)明的組合物適用于處理皮膚老化跡象。本文所用，“皮膚老化跡象”包括存在 細紋和皺紋、損失彈性、膚色不均、斑疤。在一個特別優(yōu)選的實施例中，老化跡象是存在細紋 和皺紋和/或損失彈性。如本文所用，“處理皮膚老化跡象”指減輕、減少、預防、改善或消除上述皮膚老化 的存在或跡象。本文所用，“皺紋”包括微細紋、微皺紋或粗皺紋。皺紋的例子包括但不限于眼睛周 圍的微細紋(例如“魚尾紋”)、前額和頰皺紋、眉心紋和嘴巴周圍的笑紋。如本文所用，“損失彈性”包括皮膚或組織的彈性或結構完整性的損失，包括但不 限于松垂、松弛和松散的組織。彈性或組織結構完整性的損失可由多種因素所致，包括但 不限于疾病、衰老、激素變化、機械創(chuàng)傷、環(huán)境損害，或者是向組織施用諸如美容品或藥物之 類的產品的結果。如本文所用，“膚色不均”是指與彌漫狀或斑駁狀色素沉著有關的皮膚狀況，所述色素沉著可分類為色素沉著過度，例如發(fā)炎后色素沉著過度。如本文所用，“斑疤”意指與發(fā)紅或紅斑相關的皮膚狀況。本文所用，“美容品”指能保持、恢復、賦予、刺激或增強體美外觀或看起來能增進 美貌或年輕的美容物質或制品，尤其是涉及組織或皮膚的外觀時。如本文所用，“美容有效量”意指足以處理一種或多種皮膚老化跡象，但低至足以 避免嚴重副作用的生理活性化合物或組合物的量?；衔锘蚪M合物的美容有效量會隨以下 因素而變所處理的具體狀況、最終使用者的年齡和身體狀況、所處理/預防的狀況的嚴重 程度、處理的持續(xù)時間、其他處理的性質、所采用的具體化合物或產品/組合物、所利用的 美容上可接受的具體載體以及類似因素。NF.B 抑制劑本發(fā)明的組合物包括NFkB抑制劑。如本文所用，“NFKB抑制劑”意指可抑制細胞轉 錄核因子k-B(NFKB)的化合物。在一個實施例中，NFkB抑制劑在根據下文定義的“NFKB抑 制測試”進行測試時，在以優(yōu)選每毫升1微克至約每毫升100微克的濃度測試時具有至少約 35%、優(yōu)選至少約55%、更優(yōu)選至少約70%、最優(yōu)選至少約90%的NFkB抑制百分比。也就 是說，該化合物以在每毫升1微克至每毫升100毫克范圍內的至少一種濃度下顯示出所列 出的NFkB抑制百分比。該化合物不必在每毫升1毫克至每毫升100毫克的所有濃度下提 供所列出的NFkB抑制百分比，而是在該范圍內的至少一種濃度下提供所列出的NFkB抑制百 分比。在一個優(yōu)選的實施例中，當以每毫升10毫克的濃度測試時，NFkB抑制劑具有至少 約35%、優(yōu)選至少約55%、更優(yōu)選至少約70%、最優(yōu)選至少約90%的NFkB抑制百分比。"NFkB抑制測試”以如下方式進行。使用FB293細胞，其為含有NF_kB的報告基因 的穩(wěn)定轉染的人上皮細胞系。它們可從例如Panomics (Fremont，CA)獲得。將以 5 X IO4個細胞/mL的密度接種于合適的培養(yǎng)基中，例如補充有10%胎牛血清(Invitrogen， San Diego, CA)的達爾伯克氏改良伊格爾培養(yǎng)基(DMEM)中。在存在測試樣品的情況下用 100ng/mL 的腫瘤壞死因子-a (TNFa，可得自 Sigma-Aldrich，M Louis, M0)刺激該 FB293 細胞。另外，測試其中沒有施加測試樣品的對照樣品。在37°C、5% CO2下孵育M小時后， 用40 μ L的報告基因裂解緩沖液(ftOmega，Madison, WI)裂解。將20 μ L的裂解產物等分 試樣用熒光素酶測定試劑盒(ftOmega)進行測定，并在Lmax發(fā)光計(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)中計數10秒，數據以相對光單位/秒表示。測試樣品的NFkB抑制百分比計 算如下NFkB 抑制=[1_(L樣品/L對照)]*100其中L#s為樣品的發(fā)光，L5iw為對照的發(fā)光。NFkB抑制劑在本發(fā)明組合物中可以任何合適的量存在，例如約0. 01重量％至約 100重量%，優(yōu)選約0. 1 %至約20 %，更優(yōu)選約0. 1 %至約5 %，甚至更優(yōu)選約0. 2 %至約
2 % ο在一個實施例中，NFkB抑制劑選自如下化合物取代的間苯二酚、(E)-3-甲基 苯磺?；?-2-丙烯腈(例如 “Bay 11-7082”，可從 Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri) 商購獲得)、四氫姜黃素(例如四氫姜黃素CG，可得自Sabinsa Corporation, Piscataway, NJ)以及它們的組合。
在一個優(yōu)選的實施例中，NFkB抑制劑是取代的間苯二酚。間苯二酚是具有如下結 構的二羥基酚化合物(即1，3 二羥基苯)
權利要求
1.一種組合物，所述組合物包含 NFkB抑制劑；和彈性蛋白原促進劑。
2.根據權利要求1所述的組合物，其中所述NFkB抑制劑選自取代的間苯二酚、 (E) -3- (4-甲基苯磺?；?-2-丙烯腈、四氫姜黃素以及它們的組合。
3.根據權利要求1所述的組合物，其中所述NFkB抑制劑是取代的間苯二酚。
4.根據權利要求3所述的組合物，其中所述取代的間苯二酚僅包含無苯基官能團的取代基。
5.根據權利要求3所述的組合物，其中所述取代的間苯二酚僅包含無酮官能團的取代基。
6.根據權利要求3所述的組合物，其中所述取代的間苯二酚包含至少一個具有5至11 個碳原子的取代基。
7.根據權利要求3所述的組合物，其中所述取代的間苯二酚包含單個取代基，所述取 代基具有5至11個碳原子。
8.根據權利要求3所述的組合物，其中所述取代的間苯二酚選自4-己基間苯二酚和4-辛基間苯二酚。
9.根據權利要求3所述的組合物，其中所述取代的間苯二酚是4-己基間苯二酚。
10.根據權利要求1所述的組合物，其中所述彈性蛋白原促進劑選自黑莓提取物、黃櫨 提取物、小白菊提取物、珍珠草(Phyllanthus niruri)的提取物以及它們的組合。
11.根據權利要求1所述的組合物，其中所述NFkB抑制劑和所述彈性蛋白原促進劑以 約0. 001至約100的重量濃度比存在。
12.根據權利要求1所述的組合物，所述組合物還包含美容上可接受的局部用載體。
13.根據權利要求1所述的組合物，其中所述NFkB抑制劑在每毫升1微克至每毫升100 微克的至少一種濃度下具有至少約35%的NFkB抑制劑百分比。
14.根據權利要求1所述的組合物，其中所述彈性蛋白原促進劑在1.0微克/毫升至 2. 5微克/毫升的至少一種濃度下具有至少約1. 25的彈性蛋白原促進劑活性。
15.一種處理皮膚老化跡象的方法，所述方法包括給需要這種處理的皮膚局部施用包 含NFkB抑制劑和彈性蛋白原促進劑的組合物。
16.根據權利要求15所述的方法，其中所述NFkB抑制劑選自取代的間苯二酚、 (E) -3- (4-甲基苯磺?；?-2-丙烯腈、四氫姜黃素以及它們的組合。
17.根據權利要求15所述的方法，其中所述NFkB抑制劑是取代的間苯二酚。
18.根據權利要求17所述的方法，其中所述取代的間苯二酚僅包含無苯基官能團的取 代基。
19.根據權利要求17所述的方法，其中所述取代的間苯二酚僅包含無酮官能團的取代基。
20.根據權利要求17所述的方法，其中所述取代的間苯二酚包含至少一個具有5至11 個碳原子的取代基。
21.根據權利要求17所述的方法，其中所述取代的間苯二酚包含單個取代基，所述取 代基具有5至11個碳原子。
22.根據權利要求17所述的方法，其中所述取代的間苯二酚選自4-己基間苯二酚和4-辛基間苯二酚。
23.根據權利要求17所述的方法，其中所述取代的間苯二酚是4-己基間苯二酚。
24.根據權利要求15所述的方法，其中所述彈性蛋白原促進劑選自黑莓提取物、黃櫨 提取物、小白菊提取物、珍珠草的提取物以及它們的組合。
25.根據權利要求15所述的方法，其中所述NFkB抑制劑和所述彈性蛋白原促進劑以約 0. 001至約100的重量濃度比存在。
26.根據權利要求15所述的方法，其中所述組合物還包含美容上可接受的局部用載體。
27.根據權利要求15所述的方法，其中所述NFkB抑制劑在每毫升1微克至每毫升100 微克的至少一種濃度下具有至少約35%的NFkB抑制百分比。
28.根據權利要求15所述的方法，其中所述彈性蛋白原促進劑以1.0微克/毫升至2. 5 微克/毫升的濃度測試時具有至少約1. 25的彈性蛋白原促進劑活性。
全文摘要
本發(fā)明涉及包含NFKB抑制劑和彈性蛋白原促進劑的組合物以及使用所述組合物處理皮膚老化跡象的方法。
文檔編號A61K8/46GK102113978SQ20101051170
公開日2011年7月6日 申請日期2010年10月8日 優(yōu)先權日2009年10月2日
發(fā)明者M·索思奧, S·特克-薩馬拉斯, S·考爾 申請人:強生消費者公司