專利名稱：用于治療腫瘤的錳卟啉-氯尼達(dá)明聯(lián)合用藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療腫瘤的聯(lián)合用藥物，尤其涉及包含有錳卟啉的用于治療腫瘤 的聯(lián)合用藥物。
背景技術(shù)：
近年來我國每年新增腫瘤患者160萬-170萬人，總數(shù)在450萬人左右。其發(fā)病率 和死亡率均呈現(xiàn)上升趨勢。國家衛(wèi)生部發(fā)布的《2009年中國衛(wèi)生統(tǒng)計提要》顯示，2008年 部分市縣前十位疾病死亡專率中，惡性腫瘤居于首位，已成為危害人類健康的頭號殺手。盡管已存在許多抗腫瘤藥物，而且有更多的化合物已被發(fā)現(xiàn)具有抗腫瘤作用，如 二氯乙酸鹽和色甘酸鈉。但是，大多數(shù)抗腫瘤藥物由于缺乏理想的選擇性，在抑制或殺傷腫 瘤細(xì)胞的同時，對人體正常組織細(xì)胞也具有抑制或損傷作用，因而具有較多的副作用，如蒽 環(huán)類抗癌抗生素阿霉素的心臟毒性、順鉬加環(huán)磷酰胺化療方案所致骨髓毒性的作用、順鉬 治療卵巢癌或睪丸癌所誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性及其腎毒性等。因此，如何在保持和提高抗腫瘤藥 物療效的同時，減小其毒性作用是抗腫瘤藥物研發(fā)的重點。金屬卟啉是目前正在研發(fā)的一類超氧化物歧化酶(SOD)模擬物，其中包括多種 錳卟啉，可催化性清除自由基，用于治療自由基過多引起的疾病。在多種錳卟啉中，錳 (111)-5，10，15，20-四-[3-[2-(2-甲氧乙氧基)乙氧基]苯基]-卟啉氯化物(公開在中 國專利CN1450066A中，
公開日2003年10月22日)作為小分子催化性抗氧化劑，可以消 除體內(nèi)過多的氧自由基，預(yù)防和治療由于有害過氧化物的存在而引起的疾病。目前，尚未有 將將錳卟啉同抗腫瘤藥物聯(lián)合使用用于治療腫瘤的報道。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了 一類用于治療腫瘤的聯(lián)合用藥物。一種用于治療腫瘤的聯(lián)合用藥物，包括錳卟啉以及色甘酸鈉且任選的可以包括一 種或多種可藥用載體，其中錳卟啉與色甘酸鈉的質(zhì)量配比以1 1 15為佳。—種用于治療腫瘤的聯(lián)合用藥物，包括錳卟啉以及二氯乙酸或其藥學(xué)上可接受 的鹽且任選的可以包括一種或多種可藥用載體，其中錳卟啉與二氯乙酸的質(zhì)量配比以 1 1 10為佳。一種用于治療腫瘤的聯(lián)合用藥物，包括錳卟啉以及任一種抗腫瘤藥物且任選的可 以包括一種或多種可藥用載體。所述抗腫瘤藥物為阿霉素或其可藥用的鹽、氯尼達(dá)明或其可藥用的鹽、鉬類抗腫 瘤藥物中的任一種。所述鉬類抗腫瘤藥物為卡鉬、雙環(huán)鉬、順鉬、奧沙利鉬中的任一種。所述抗腫瘤藥物為除氧氮磷環(huán)類藥物外的烷化劑。所述烷化劑為氮芥、卡莫司汀、尼莫司汀、丙卡巴胼、尿嘧啶氮芥、替莫唑胺、苯丙 氨酸氮芥中的任一種或其可藥用的鹽。
上述錳卟啉與阿霉素的質(zhì)量配比以1 1 6為佳，錳卟啉與氯尼達(dá)明的質(zhì)量配 比以1 7. 5 20為佳，錳卟啉與卡鉬的質(zhì)量配比以1 2 10為佳，錳卟啉與順鉬的質(zhì) 量配比以1 1 4為佳，錳卟啉與氮芥的質(zhì)量配比以1 0.5 6為佳，錳卟啉與卡莫司 汀的質(zhì)量配比以1 1 9為佳，錳卟啉與丙卡巴胼的質(zhì)量配比以1 5 12為佳，錳卟 啉與替莫唑胺的質(zhì)量配比以1 22 30為佳。所述錳卟啉為錳(III)-5，10，15，20-四-[3-[2-(2_甲氧乙氧基)乙氧基]苯 基]-卟啉氯化物。本發(fā)明還公開了錳卟啉在制備與抗腫瘤藥物一起給藥的治療腫瘤的聯(lián)合用藥物 中的用途。所述錳卟啉的有效治療劑量為0. 1 50mg/Kg體重，優(yōu)選0. 01 5mg/Kg體重。所述可藥用的鹽包括酸加成的鹽，比如鹽酸、富馬酸、馬來酸、檸檬酸、琥珀酸等。所述可藥用載體為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知和常用的，如丸劑、片劑、膠囊劑等中的 填充劑或載體物質(zhì)，這些物質(zhì)通常被保健專家認(rèn)可用于這一目的且作為藥劑的非活性成 分。所述聯(lián)合用藥物可以制成任意劑型。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明所述的聯(lián)合使用包括以下兩種方式一是將錳卟啉及可聯(lián)合使用的藥物分別制成單獨的制劑，兩種制劑的劑型可以不 同，并且可聯(lián)合使用的藥物可以采用其現(xiàn)有劑型。在使用時可以將這兩種藥物先后使用，也 可以同時服用。將兩種藥物先后使用時，錳卟啉的單獨制劑可以首先服用。依次給藥時，給 予第二種組分時第一種組分應(yīng)該還未喪失其在體內(nèi)的有效作用。二是將上述錳卟啉及可聯(lián)合使用的藥物制成單一的復(fù)方制劑，使用時同時服用。配制藥物組合物及使用時，需要產(chǎn)生作用的錳卟啉及可聯(lián)合用藥物的劑量可以改 變，且最終由醫(yī)務(wù)人員決定，所考慮的因素包括患者年齡及疾病性質(zhì)和嚴(yán)重程度。本申請的發(fā)明人做了一系列相關(guān)實驗研究，實驗證明，將錳卟啉與上述可聯(lián)合使 用的藥物聯(lián)合用藥，可以提高腫瘤治療效果，并可以降低其毒性，延長實驗動物的存活時 間。錳卟啉本身并沒有抗腫瘤的作用，但將其與抗腫瘤藥物聯(lián)合用藥后，卻可以顯著 地增強(qiáng)抗腫瘤藥物的療效，并降低其毒副作用，取得了意想不到的效果。下面通過附圖和具體實施方式
作詳細(xì)的說明。


圖1為體內(nèi)TUN-EL標(biāo)記法測定的胰腺癌細(xì)胞凋亡率示意圖(％，20X)；其中，A NS 組胰腺癌細(xì)胞凋亡率(4. 7 士 1. 5)，B色甘酸鈉組胰腺癌細(xì)胞凋亡率(10. 4士 1. 8)，C錳卟啉 +色甘酸鈉組胰腺癌細(xì)胞凋亡率(22. 1 士 3. 4)。圖2為各組裸大鼠皮下接種人肺癌A549細(xì)胞后腫瘤直徑變化曲線示意圖；圖3為錳卟啉與順鉬聯(lián)合用藥物對肺腺癌小鼠移植瘤腫瘤生長的影響示意圖。
具體實施例方式實施例1錳卟啉卡莫司汀復(fù)方注射液
配方如下錳卟啉卡莫司汀聚乙二醇注射用水_
400mg 3. 5g 150ml
加至250ml 制成
50支制備工藝西林瓶、膠塞先粗洗，后用經(jīng)0. 45 μ m微孔濾膜濾過的注射用水精洗至可見異物 合格，然后烘干備用。向配液灌中加入處方量的錳卟啉，聚乙二醇50ml，使其完全溶解，作為溶液1。在另一配液灌中加入處方量的卡莫司汀，聚乙二醇100ml，使其完全溶解，作為溶 液2。將溶液2合并加入溶液1中，80°C加熱10分鐘，冷卻加注射用水至全量，混勻。實施例2錳卟啉與色甘酸鈉聯(lián)合用藥物對小鼠胰腺癌的治療作用評價人胰腺癌MIAPaCa-2細(xì)胞懸液調(diào)整至每毫升5 X IO6個細(xì)胞，0. 2ml細(xì)胞懸液(含 IXlO6個細(xì)胞)接種于30只免疫復(fù)合缺陷雌鼠胰腺，1周后隨機(jī)分為三組，對照組(NS)每 天尾靜脈注射生理鹽水0. 2ml，色甘酸鈉組每天尾靜脈注射色甘酸鈉30mg/kg體重，錳卟啉 +色甘酸鈉組每天尾靜脈注射錳卟啉2mg/kg體重，色甘酸鈉30mg/kg體重。連續(xù)注射3周 后處死動物，解剖提取腫瘤，測定腫瘤體積(V = 1/6X π X長X高X寬)。腫瘤組織置于 4°C三聚甲醛中固定2_4h，包埋于鳥氨酸胺甲?；D(zhuǎn)移酶復(fù)合物中，液氮速凍，-80°C冷藏。 切成5 μ m厚的組織切片行⑶31免疫組化染色。增殖細(xì)胞核抗原免疫組化法測定胰腺癌細(xì)胞增殖情況腫瘤組織切片用PBS液沖 洗，采用過氧化酶標(biāo)記的鏈霉卵白素免疫組織化學(xué)法。每批染色均設(shè)陰性對照(以PBS置 換一抗作陰性對照)。光鏡下觀察結(jié)果。每片觀察5個高倍視野，統(tǒng)計陽性細(xì)胞數(shù)所占的百 分?jǐn)?shù)。增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)為顆粒型或彌漫型棕色陽性，定位于癌細(xì)胞核內(nèi)，胞漿一般 不著色。部分核分裂細(xì)胞顯示整個細(xì)胞的陽性反應(yīng)。TUNE熒光法測定胰腺癌細(xì)胞凋亡率將對照組及各實驗組的腫瘤標(biāo)本在體積測 量后取出，10%福爾馬林液固定，TUNEL標(biāo)記檢測。凋亡細(xì)胞可被dUTP標(biāo)記，熒光顯微鏡下 呈熒光陽性。分別在至少5個有代表性的100倍視野下計數(shù)500個細(xì)胞中的凋亡細(xì)胞，計
算各組凋亡率。實驗數(shù)據(jù)用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示，單因素各組間樣本均數(shù)的多重比較采用單因 素方差分析和LSD-t檢驗。用SPSS10.0軟件分析結(jié)果。實驗結(jié)果如下腫瘤體積見表1。LSD-t檢驗進(jìn)行組間的多重比較各治療組平均腫瘤體積均 顯著低于NS組(P<0. 05)，錳卟啉+色甘酸鈉組平均腫瘤體積顯著低于色甘酸鈉組(P < 0. 05)。表1錳卟啉與色甘酸鈉聯(lián)合用藥物對小鼠胰腺癌的治療作用評價(η = 10)
權(quán)利要求
1. 一種用于治療腫瘤的錳卟啉-氯尼達(dá)明聯(lián)合用藥物，其特征在于包括錳卟啉以及 氯尼達(dá)明且任選的可以包括一種或多種可藥用載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療腫瘤的錳卟啉-氯尼達(dá)明聯(lián)合用藥物，包括錳卟啉以及氯尼達(dá)明且任選的可以包括一種或多種可藥用載體。本申請的發(fā)明人做了一系列相關(guān)實驗研究，實驗證明，將不具備抗腫瘤作用的錳卟啉與氯尼達(dá)明聯(lián)合用藥后，可以顯著提高腫瘤治療效果，并可以降低其毒性，延長實驗動物的存活時間，取得了意想不到的效果。
文檔編號A61K31/416GK102000070SQ20101025538
公開日2011年4月6日 申請日期2009年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月8日
發(fā)明者厲保秋 申請人:山東弘立醫(yī)學(xué)動物實驗研究有限公司