專利名稱：新穎的博安霉素組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新穎的組合物，特別涉及一種新穎的博安霉素組合物以及該組合物的制備方法。

背景技術(shù)：
惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命的重大疾病，其發(fā)病率無論國內(nèi)國外都呈逐年上升的趨勢。近年來，全球范圍內(nèi)抗腫瘤藥一直維持著快速增長的良好勢頭。
博安霉素(Boanmycin)為中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所首創(chuàng)開發(fā)的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的新抗腫瘤抗生素，其鹽酸鹽已于2004年通過國家藥品監(jiān)督管理局審批，獲得國家一類新藥證書和生產(chǎn)批文。
博安霉素是輪枝鏈霉素平陽新變種(Streptomyces verticilus Var.Pingyangensis n.sp)所產(chǎn)生，屬于博萊霉素族。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，博安霉素具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用，抗瘤譜廣，除對頭頸部、鱗癌、食道癌、鼻咽癌、惡性淋巴瘤、乳腺癌、絨癌有效外，還對發(fā)病率高、且無有效藥物的肝癌、結(jié)腸癌等有良好的療效，對肝癌細(xì)胞的殺傷作用較阿霉素(ADM)和絲裂霉素(MMC)強(qiáng)，對結(jié)腸癌HT-29的抑制率明顯高于MMC和氟尿嘧啶(5-FU)。給藥途徑多(肌肉注射、靜脈注射、靜脈插管等)，未見骨髓抑制作用，肺毒性低于其它同類產(chǎn)品。
博安霉素的給藥途徑較多，如肌肉注射、靜脈注射、靜脈插管等。但臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，博安霉素的鹽酸鹽肌肉注射給藥后，藥物迅速進(jìn)入組織，5min即可測得血藥濃度，血漿中的藥物呈二室模型分布，t1/2α為(14.036±4.409)min，t1/2β為(39.160±5.599)min，平均血藥濃度在用藥后18.6min達(dá)高峰，平均濃度為0.20μg/ml，4小時(shí)后降至為零(＞0.01μg/ml)，藥物半衰期短，清除速度快。
因此，本領(lǐng)域仍然需要有為克服博安霉素上述缺陷的新方法，特別是需要有可克服上述問題的包含安博霉素的新穎組合物。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是一種可改善藥物體外和/或體內(nèi)釋放行為的博安霉素組合物，特別是可延緩藥物在體外和/或體內(nèi)釋放速度，使得藥物在體內(nèi)用藥時(shí)的半衰期延長，提高療效，降低不良反應(yīng)。
本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，使博安霉素與特定的凝膠材料制成溶液組合物后，在特定的溫度范圍內(nèi)例如大約在人體體溫的溫度下，該溶液組合物可以發(fā)生凝結(jié)反應(yīng)而形成凝膠，從而可以使得藥物在可控速率下從該凝膠中釋放，進(jìn)而可以克服現(xiàn)有博安霉素制劑體內(nèi)行為特征不理想的問題。本發(fā)明基于上述發(fā)現(xiàn)而得以完成。
發(fā)明概述 本發(fā)明第一方面提供博安霉素組合物，其包含治療有效量的博安霉素或其可藥用鹽、泊洛沙姆、膠凝輔助劑、水，以及任選的滲透壓調(diào)節(jié)劑和/或pH調(diào)節(jié)劑。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含0.01～2.0g的博安霉素或其可藥用鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含0.02～1.8g、0.04～1.6g、0.05～1.5g、0.05～1.2g、或0.05～1.0g的博安霉素或其可藥用鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含0.05～1.0g、0.06～1.0g、0.07～1.0g、0.08～1.0g、0.09～1.0g、或0.1～1.0g的博安霉素或其可藥用鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含0.06～0.5g、0.06～0.4g、0.06～0.3g、0.06～0.2g、或0.08～0.2g的博安霉素或其可藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含10～30g的泊洛沙姆。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含12～28g、13～27g、14～26g、15～25g、或18～23g的泊洛沙姆。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含10～28g、10～27g、10～26g、或10～25g的泊洛沙姆。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含12～30g、14～30g、16～30g、或18～30g的泊洛沙姆。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含0.1～5.0g的膠凝輔助劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含0.2～5.0g、0.3～5.0g、0.4～5.0g、或0.5～5.0g的膠凝輔助劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含0.2～4.5g、0.2～4.0g、0.2～3.5g、或0.2～3.0g的膠凝輔助劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，該組合物中包含0.2～4.5g、0.3～4.0g、0.4～3.5g、0.5～3.0g、或0.5～2.5g的膠凝輔助劑。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含0～6.0g的滲透壓調(diào)節(jié)劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，該滲透壓調(diào)節(jié)劑的用量可以根據(jù)具體處方不同以及所用的具體滲透壓調(diào)節(jié)劑不同而可以有所不同，但是一般來說，其用量足以使組合物的最終滲透壓在人體正常滲透壓的約0.5-2倍。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含適量的pH調(diào)節(jié)劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，該pH調(diào)節(jié)劑的用量可以根據(jù)具體處方不同以及所用的具體pH調(diào)節(jié)劑不同而可以有所不同，但是一般來說，其用量足以使組合物的最終pH值調(diào)節(jié)到pH4-9(例如pH5-8、pH5.5-7.5、pH6-7.5)的范圍內(nèi)。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含 博安霉素或其可藥用鹽 0.01～2.0g， 泊洛沙姆 10～30g， 膠凝輔助劑 0.1～5.0g， 滲透壓調(diào)節(jié)劑 0～6.0g， pH調(diào)節(jié)劑 適量，和 水 加至100ml。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含 博安霉素或其可藥用鹽 0.05～1.5g， 泊洛沙姆 12～28g， 膠凝輔助劑 0.2～4.5g， 滲透壓調(diào)節(jié)劑 0～6.0g， pH調(diào)節(jié)劑 適量，和 水 加至100ml。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含 博安霉素或其可藥用鹽 0.08～1.2g， 泊洛沙姆 15～25g， 膠凝輔助劑 0.3～4.0g， 滲透壓調(diào)節(jié)劑 0～6.0g， pH調(diào)節(jié)劑 適量，和 水 加至100ml。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含 博安霉素或其可藥用鹽0.1～1.0g， 泊洛沙姆18～23g， 膠凝輔助劑 0.5～3.0g， 滲透壓調(diào)節(jié)劑0～6.0g， pH調(diào)節(jié)劑適量，和 水 加至100ml。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述博安霉素的可藥用鹽選自鹽酸博安霉素、硫酸博安霉素、磷酸博安霉素、酒石酸博安霉素和枸櫞酸博安霉素、醋酸博安霉素、富馬酸博安霉素、馬來酸博安霉素。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述博安霉素的可藥用鹽是鹽酸博安霉素。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述泊洛沙姆是一種或多種分子量范圍為5000～20000的泊洛沙姆。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述泊洛沙姆是一種或多種分子量范圍為5000～18000、5000～15000、5000～12000、6000～20000、8000～20000、10000～20000、12000～20000、6000～18000、7000～15000、或8000～12000的泊洛沙姆。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述泊洛沙姆是一種或多種氧乙基與氧丙基比例范圍為(0.2～4)∶1的泊洛沙姆。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述泊洛沙姆是一種或多種氧乙基與氧丙基比例范圍為(0.25～4)∶1、(0.5～4)∶1、(0.75～4)∶1、(1～4)∶1、(0.25～3.5)∶1、(0.25～3.0)∶1、(0.25～2.5)∶1、(0.25～2)∶1、(0.3～3.5)∶1、(0.4～3.0)∶1、(0.5～2.5)∶1、(0.5～2)∶1、或(0.5～1.5)∶1的泊洛沙姆。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述泊洛沙姆是一種或多種選自以下型號的泊洛沙姆泊洛沙姆P407(即F127)、泊洛沙姆P188(即F68)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述泊洛沙姆是泊洛沙姆P407(即F127)、泊洛沙姆P188(即F68)、或此二者以任意比例的組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述泊洛沙姆是泊洛沙姆P188(即F68)與泊洛沙姆P407(即F127)的(0.01～0.5)∶1比例的組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述泊洛沙姆是泊洛沙姆P188(即F68)與泊洛沙姆P407(即F127)的(0.015～0.4)∶1、(0.02～0.2)∶1、(0.02～0.15)∶1、(0.02～0.1)∶1、或(0.025～0.1)∶1比例的組合。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述膠凝輔助劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)丙二醇、甘油、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、海藻酸鈉及其衍生物、阿拉伯膠、西黃耆膠、瓜爾豆膠、卡波姆、植物凝集素、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、糊精及衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述膠凝輔助劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、丙二醇、聚乙二醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述羥丙基甲基纖維素選自HPMC K4M、E4M、F4M、R15M。一個(gè)實(shí)施方案中，所述聚乙二醇是分子量200-600的PEG。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述聚乙二醇選自PEG200、PEG300、PEG400、PEG600、PEG4000、PEG4000。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述博安霉素或其可藥用鹽是鹽酸博安霉素，所述泊洛沙姆是泊洛沙姆P407(即F127)、泊洛沙姆P188(即F68)、或此二者以任意比例的組合，膠凝輔助劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、丙二醇、聚乙二醇。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，其中包含17～23g的泊洛沙姆P407和0～3g的泊洛沙姆P188。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，以100ml計(jì)，其中包含0.1～1.0g的博安霉素或其可藥用鹽、17～23g的泊洛沙姆P407、0～3g的泊洛沙姆P188、0.5～3.0g的膠凝輔助劑、0～6.0g的滲透壓調(diào)節(jié)劑、適量的pH調(diào)節(jié)劑、和加至100ml的水。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述滲透壓調(diào)節(jié)劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)甘露醇、山梨醇、氯化鈉、葡萄糖。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述pH調(diào)節(jié)劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)鹽酸、氫氧化鈉、磷酸及其鹽、醋酸及其鹽、枸櫞酸及其鹽、硼酸及其鹽、以及它們的水溶液。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其是可注射的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物是可通過肌肉注射、肌內(nèi)注射、皮下注射、瘤體注射的組合物。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其在25±0.5℃下呈透明或基本上透明的、可流動(dòng)的液體，并且其在37±0.5℃下呈凝膠狀的半固體。
根據(jù)本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其包含本發(fā)明實(shí)施例的處方組成。
本發(fā)明第二方面提供制備本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述組合物的方法，其包括以下步驟 i)稱取膠凝輔助劑，加入適量水，充分?jǐn)嚢?，使全部溶解? ii)稱取泊洛沙姆，加入到步驟i)的溶液中，攪拌和/或靜置使全部溶解； iii)將博安霉素或其藥用鹽、任選的滲透壓調(diào)節(jié)劑溶于適量水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾； iv)將步驟iii)的濾液與步驟ii)的溶液合并，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液的pH值為5.5～8.5，加水至全量，攪拌均勻，靜置，得到透明或基本透明的液體，即得。
本發(fā)明第三方面提供一種博安霉素的藥物制劑，其包含本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述組合物，以及任選的藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥學(xué)可接受的載體或賦形劑可以是注射用水、氯化鈉注射液、葡萄糖注射液等。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物制劑是注射液。
本發(fā)明第四方面提供一種博安霉素的即用型注射針，其包括包含針頭的注射器，以及貯存在該注射器中的本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述即用型注射針是在無菌狀態(tài)下保存。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述即用型注射針包含單劑量的博安霉素或其可藥用鹽。
本發(fā)明第五方面提供本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述組合物在制備治療腫瘤和/或癌癥的藥物中的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的腫瘤和/或癌癥是博安霉素或其可藥用鹽可治療的腫瘤和/或癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的腫瘤和/或癌癥選自頭頸部癌、鱗癌、食道癌、鼻咽癌、惡性淋巴瘤、乳腺癌、絨癌、肝癌、結(jié)腸癌。
本發(fā)明第六方面提供治療腫瘤和/或癌癥的方法，其包括給受試者施用治療有效量的本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的腫瘤和/或癌癥是博安霉素或其可藥用鹽可治療的腫瘤和/或癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的腫瘤和/或癌癥選自頭頸部癌、鱗癌、食道癌、鼻咽癌、惡性淋巴瘤、乳腺癌、絨癌、肝癌、結(jié)腸癌。
本發(fā)明第七方面提供可用于治療腫瘤和/或癌癥的組合物，該組合物具有本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)所述組合物的特征。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的腫瘤和/或癌癥是博安霉素或其可藥用鹽可治療的腫瘤和/或癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的腫瘤和/或癌癥選自頭頸部癌、鱗癌、食道癌、鼻咽癌、惡性淋巴瘤、乳腺癌、絨癌、肝癌、結(jié)腸癌。
本發(fā)明任一方面或該任一方面的任一項(xiàng)所具有的特征同樣適用于其它任一方面或該其它任一方面的任一項(xiàng)。在本發(fā)明中，例如，提及“本發(fā)明第一方面任一項(xiàng)”時(shí)，該“任一項(xiàng)”是指本發(fā)明第一方面的任一子方面，在其它方面以類似方式提及時(shí)，亦具有相同含義。
發(fā)明詳述 下面對本發(fā)明的各個(gè)方面和特點(diǎn)作進(jìn)一步的描述。
本發(fā)明所引述的所有文獻(xiàn)，它們的全部內(nèi)容通過引用并入本文，并且如果這些文獻(xiàn)所表達(dá)的含義與本發(fā)明不一致時(shí)，以本發(fā)明的表述為準(zhǔn)。此外，本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義，即便如此，本發(fā)明仍然希望在此對這些術(shù)語和短語作更詳盡的說明和解釋，提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。
在本文的上下文中，提及物質(zhì)的百分?jǐn)?shù)(％)時(shí)，除非另有說明，是指某物質(zhì)在某體系中所占的百分?jǐn)?shù)。對于該體系是液態(tài)的情況下，該百分?jǐn)?shù)(％)可以是重量/體積(w/v)百分?jǐn)?shù)(對于溶質(zhì)為固體時(shí)是優(yōu)選的)或者是體積/體積(w/v)百分?jǐn)?shù)(對于溶質(zhì)為液體時(shí)是優(yōu)選的)。對于該體系是固態(tài)的情況下，該百分?jǐn)?shù)(％)優(yōu)選是重量/重量(w/w)百分?jǐn)?shù)。
就本發(fā)明的組合物而言，優(yōu)選的情況是，本發(fā)明中的“百分?jǐn)?shù)(％)”是指重量/體積(w/v)百分比，并且在本發(fā)明的一個(gè)具體組合物的實(shí)施方案中，活性成分和各輔料的重量/體積百分比之和等于100％；或者以其中的某一基礎(chǔ)賦形劑進(jìn)行平衡，例如根據(jù)處方總組成，在配制時(shí)采用一種基礎(chǔ)賦形劑例如水(例如注射用水)進(jìn)行平衡(例如以該水加至理論處方的全重量或全體積來平衡)。
如本文使用的，術(shù)語“可藥用鹽”一般是指生理學(xué)上可接受地鹽。
如本文使用的，術(shù)語“膠凝輔助劑”是指能夠調(diào)節(jié)膠凝溫度，改善膠凝強(qiáng)度，調(diào)節(jié)藥物釋放的物質(zhì)或試劑。本發(fā)明令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，對于本發(fā)明活性成分博安霉素或其可藥用鹽而言，在與本發(fā)明膠凝輔助劑配合使用的情況下，包含泊洛沙姆的溶液在低于人體溫的溫度下(例如0～30℃)為透明或基本上透明的、可流動(dòng)的液體；而在人體溫附近溫度下(例如37±7℃)時(shí)為凝膠狀的半固體，并且在此時(shí)具有一定的膠凝強(qiáng)度和緩釋作用。使得本發(fā)明組合物成為一種具有緩釋性能的、溫度敏感型的、可注射用的凝膠劑特別是原位凝膠劑。
如本文使用的，術(shù)語“水”，在制備本發(fā)明組合物特別是可注射用組合物時(shí)，通常是指注射用水。
如本文使用的，術(shù)語“包含”、“包括”等，是指一種開放式的含義。例如在描述本發(fā)明組合物組成時(shí)采用的“包含”，是指除了所羅列的物質(zhì)以外還可以含有其它未羅列的物質(zhì)。例如在本發(fā)明組合物中，還可以含有抑菌劑或防腐劑等。
在本文中，提及“其中包含0.01～2.0g的博安霉素或其可藥用鹽”時(shí)，該0.01～2.0g的量可以以博安霉素游離堿計(jì)，也可以以其鹽計(jì)。通常可以以博安霉素游離堿計(jì)。
在本文中，提及“水加至100ml”時(shí)，是指以水為基礎(chǔ)溶劑，即用水加至該組合物的全量，或者是用水加至最終體積進(jìn)行平衡調(diào)節(jié)。
如本文使用的，術(shù)語“即用型注射針”是指一種包括針頭和注射器的無需配藥即可隨時(shí)使用的注射針，其中的針筒中已經(jīng)預(yù)先分裝有一定劑量的本發(fā)明第一方面的組合物。
如本文使用的，術(shù)語“組合物”可以與“藥物組合物”互換使用二者可以具有相同含義。
本發(fā)明提供的組合物，可以作為原位凝膠使用。所謂的原位凝膠(in situ gel)是指一類能以溶液狀態(tài)給藥后，立即在用藥部位發(fā)生相轉(zhuǎn)變，由液態(tài)轉(zhuǎn)化形成非化學(xué)交聯(lián)半固體凝膠的一類制劑。形成機(jī)制是利用高分子材料對外界刺激(如溫度、離子強(qiáng)度或pH等)的響應(yīng)，使聚合物在生理?xiàng)l件下發(fā)生分散狀態(tài)或構(gòu)象的可逆變化，完成由溶液狀態(tài)向半固體凝膠狀態(tài)的相轉(zhuǎn)化。這種由水溶性高分子材料制備的原位凝膠具有高度親水性的三維網(wǎng)格結(jié)構(gòu)及良好的組織相容性、生物黏附性和獨(dú)特的溶液-半固體凝膠轉(zhuǎn)變性質(zhì)，兼有制備工藝簡便、應(yīng)用方便、在用藥部位(如注射部位、鼻黏膜、口腔黏膜、眼黏膜、直腸黏膜及陰道黏膜等)滯留時(shí)間長及良好的緩釋作用等優(yōu)點(diǎn)。
注射用原位凝膠制劑是近年來緩控釋型注射劑領(lǐng)域的研究新熱點(diǎn)，它是將藥物和聚合物溶于適宜的溶劑中，局部注射，在給藥部位，聚合物在生理?xiàng)l件下凝固而形成凝膠型半固體藥物貯庫。原位凝膠克服了普通乳劑、脂質(zhì)體、微球和膠束的缺點(diǎn)，具有可用于病變部位的局部給藥、延長釋藥周期、降低給藥劑量和藥物不良反應(yīng)、避免植入劑開刀植入時(shí)的痛苦、工藝相對簡單等優(yōu)點(diǎn)。
將博安霉素制備成注射用原位凝膠制劑，與該藥物的普通注射劑相比，具有普通注射劑的優(yōu)點(diǎn)，流動(dòng)性好，使用方便，注射入人體后，受人體溫度的影響，在局部凝固而形成凝膠型的半固體藥物貯庫，可以延長釋藥周期，降低給藥劑量，減少生產(chǎn)成本，增強(qiáng)患者的順應(yīng)性，提高對腫瘤的治療作用，同時(shí)拓寬該藥物的臨床適應(yīng)癥。
泊洛沙姆(poloxamer)是一種溫度敏感型的凝膠材料，是由聚環(huán)氧乙烷PEO(A)結(jié)構(gòu)單元和聚環(huán)氧丙烷PPO(B)結(jié)構(gòu)單元組成的嵌段共聚物(ABA型)，達(dá)到一定濃度后能夠形成熱可逆凝膠。泊洛沙姆溶液凝膠化的機(jī)制與膠束的交聯(lián)方式有關(guān)，當(dāng)溫度超過臨界膠束溫度時(shí)，PPO鏈脫水導(dǎo)致膠束形成，隨著溫度的升高，膠束化作用更為重要，當(dāng)達(dá)到某一特定溫度時(shí)，膠束間相互接觸并且不再移動(dòng)。因此，膠束間的包裹與纏結(jié)可能是泊洛沙姆溶液隨溫度升高形成凝膠的主要原因。泊洛沙姆制劑通常可增加藥物在應(yīng)用部位的滯留時(shí)間，從而改善生物利用度和療效。
在初期的研究中，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明博安霉素的組合物中，如果單獨(dú)使用泊洛沙姆而不同時(shí)使用輔助膠凝劑，則在膠凝時(shí)容易出現(xiàn)膠凝機(jī)械強(qiáng)度差、快速溶蝕(即自表面的溶解)、PEO-PPO-PEO鏈的非生物降解。令人驚奇的是，通過使輔助膠凝劑與泊洛沙姆組合使用，可以形成性能優(yōu)良的原位凝膠系統(tǒng)，并且由于該組合物中的各種輔料均是可吸收或可生物降解的，這為該原位凝膠系統(tǒng)經(jīng)注射給藥成為可能。從而，本發(fā)明獲得的包含博安霉素的原位凝膠組合物可以有效延長藥物釋放時(shí)間，從而延長藥物在體內(nèi)的滯留時(shí)間、改善生物利用度、提高療效，克服了現(xiàn)有博安霉素注射劑體內(nèi)存留時(shí)間短的缺點(diǎn)。
因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了是一種博安霉素的體內(nèi)給藥體系，即原位凝膠制劑，具體地說，本發(fā)明提供了一種抗腫瘤抗生素博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽注射用溫度敏感原位凝膠制劑及其制備方法。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物是鹽酸博安霉素注射用溫度敏感原位凝膠制劑，其中包含0.01～2.0％鹽酸博安霉素、10～30％泊洛沙姆、0.1～5.0％膠凝輔助劑、0～6.0％滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑適量，和加至100％的注射用水。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物中，所述的泊洛沙姆分子量范圍為5000～20000，氧乙基與氧丙基比例范圍為4∶1～1∶4。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物中，所述的泊洛沙姆為泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188，或二者的混合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物中，所述膠凝輔助劑為丙二醇、甘油、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素、甲基纖維素(MC)、羧甲基纖維素、海藻酸鈉及其衍生物、阿拉伯膠、西黃耆膠、瓜爾豆膠、卡波姆、植物凝集素、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、糊精及衍生物，一種或幾種的混合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物中，所述膠凝輔助劑優(yōu)選為羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、丙二醇、聚乙二醇。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物中，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為甘露醇、山梨醇、氯化鈉、或葡萄糖中的任意一種。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物中，所述的pH調(diào)節(jié)劑為鹽酸、氫氧化鈉、磷酸及其鹽、醋酸及其鹽、枸櫞酸及其鹽、硼酸及其鹽，或它們的混合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明提供的組合物是通過包括如下步驟的方法制備的按比例稱取膠凝輔助劑，加入注射用水，充分?jǐn)嚢?，放置至全部溶解；再按比例稱取泊洛沙姆，加入到上述溶液中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置至全部溶解；將鹽酸博安霉素、滲透壓調(diào)節(jié)劑溶于注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與上述溶液合并，以pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液的pH值為5.5～8.5，加注射用水至全量，攪拌均勻，靜置，得到透明或接近透明的凝膠液體。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供的組合物在室溫條件下(25℃左右，＜30℃)性狀為透明或接近透明的液體，具有一定的流動(dòng)性，在人體溫度(37℃左右)性狀為凝膠型的半固體。
本發(fā)明提供了一種鹽酸博安霉素注射用原位凝膠制劑，它通過熱敏凝膠基質(zhì)泊洛沙姆與適宜高分子材料的復(fù)合使用形成雙系統(tǒng)，調(diào)節(jié)其相轉(zhuǎn)變溫度在30～37℃之間，注射于人體或直接注射于腫瘤部位后，能夠使博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽緩慢釋放，延長半衰期，提高生物利用度和降低毒副作用。
本發(fā)明還提供了博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽的組合物即注射用原位凝膠制劑的制備方法。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽的組合物注射用原位凝膠，其中包含0.01～2.0％鹽酸博安霉素、10～30％泊洛沙姆、0.1～5.0％膠凝輔助劑、0～6.0％滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑適量，和加至100％的水。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明博安霉素組合物，其在25±0.5℃下放置10min或20min的時(shí)間后，或者充分平衡后，呈透明或基本上透明的、可流動(dòng)的液體；并且其在37±0.5℃下放置10min或20min的時(shí)間后，或者充分平衡后，呈凝膠狀的半固體；當(dāng)溫度降低后，又可以從凝膠狀態(tài)恢復(fù)到溶液狀態(tài)，此過程具有可逆性。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽的組合物注射用原位凝膠，其中作為熱敏凝膠基質(zhì)的本發(fā)明組合物中所用的泊洛沙姆的分子量范圍為5000～20000，氧乙基與氧丙基比例范圍為4∶1～1∶4，優(yōu)選的為泊洛沙姆P407(即F127)、泊洛沙姆P188(即F68)，或二者一定比例的混合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽的組合物注射用原位凝膠，為了調(diào)節(jié)藥物的釋放速度，延長藥物的作用時(shí)間，改善凝膠體系的流變學(xué)性質(zhì)，凝膠中加入了不超過5％的膠凝輔助劑，如丙二醇、甘油、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、海藻酸鈉及其衍生物、阿拉伯膠、西黃耆膠、瓜爾豆膠、卡波姆、植物凝集素、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、糊精及衍生物等，一種或幾種的混合物。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、丙二醇、聚乙二醇等是優(yōu)選的膠凝輔助劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為甘露醇、山梨醇、氯化鈉、葡萄糖中的任意一種。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的pH調(diào)節(jié)劑為鹽酸、氫氧化鈉、磷酸及其鹽、醋酸及其鹽、枸櫞酸及其鹽、硼酸及其鹽，或它們的混合物，以及這些物質(zhì)的水溶液。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的博安霉素或其可藥用鹽例如鹽酸鹽的組合物注射用原位凝膠，其制備方法可包括如下步驟 (1)按比例稱取膠凝輔助劑，加入注射用水，充分?jǐn)嚢?，放置至全部溶解? (2)再按比例稱取泊洛沙姆，加入到溶液(1)中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置至全部溶解； (3)將博安霉素或其鹽、滲透壓調(diào)節(jié)劑溶于注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液(2)合并，攪拌均勻； (4)用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液的pH值為5.5～8.5，加注射用水至全量，攪拌均勻，靜置，得到透明或接近于透明的凝膠溶液。
本發(fā)明制備的鹽酸博安霉素注射用原位凝膠具有適宜的相轉(zhuǎn)變溫度，在室溫條件下呈液體狀態(tài)，以溶液的形式方便注射給藥，易于準(zhǔn)確控制劑量，既具有普通注射劑的優(yōu)點(diǎn)，流動(dòng)性好，使用方便，可注射于人體局部或直接注射入腫瘤部位，受人體溫度的影響，溫度升高到接近體溫時(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z，形成凝膠型的半固體藥物貯庫，與該藥物的普通注射劑相比，可以顯著延長釋藥周期，降低不良反應(yīng)，減少給藥劑量，降低生產(chǎn)成本，增強(qiáng)患者的順應(yīng)性，提高對腫瘤的治療作用，拓寬該藥物的臨床適應(yīng)癥。
本發(fā)明組合物的是特別適用通過注射例如肌肉注射或瘤內(nèi)注射的方式使用的。對于本發(fā)明組合物的使用劑量，可以參考現(xiàn)有的博安霉素注射液的劑量使用，但優(yōu)選可以適當(dāng)降低劑量或者可以延長給藥間隔，這對于本發(fā)明組合物而言是相當(dāng)有利的。當(dāng)然，具體的劑量范圍，取決于患者大小、病情的嚴(yán)重性、給藥途徑、醫(yī)生判斷等因素。一般地說，在本發(fā)明一個(gè)單位劑量的制劑中，可以含有博安霉素或其鹽的量為0.1～100mg、0.5～80mg、1～50mg、或1～25mg等的范圍內(nèi)


圖1顯示了不同濃度泊洛沙姆P407的膠凝溫度 圖2顯示了不同處方的溫度-粘度曲線圖 圖3顯示了不同處方凝膠質(zhì)構(gòu)特性圖 圖4顯示了不同處方的掃描電鏡圖片 圖5顯示了透析袋法藥物的釋放曲線 圖6顯示了無膜釋放法藥物釋放與凝膠溶蝕曲線(處方20％P407+1.2％P188+0.3％HPMC)，n＝3。

具體實(shí)施例方式 通過下面的實(shí)施例可以對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的描述，然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以對本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。
本發(fā)明對試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。在下文試驗(yàn)例中，如未特別說明，所述的博安霉素是指其鹽酸鹽，當(dāng)然在相同的試驗(yàn)條件下，其它的鹽型亦有望獲得類似結(jié)果，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解的。
實(shí)施例部分 實(shí)施例1本發(fā)明組合物-P407/P188/丙二醇原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.1g P40720g P1880.5g 丙二醇 2g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取丙二醇，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，使混合均勻，作為溶液I；稱取P407和P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和/或1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例2本發(fā)明組合物-P407/P188/丙二醇/HPMC原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.1g P407 20g P188 0.8g 丙二醇 2g HPMC K4M 0.3g 1mol/L的NaOH和/或磷酸適量 注射用水 至100ml 根據(jù)處方，稱取丙二醇、HPMC，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407和P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例3本發(fā)明組合物-P407/P188/HPMC原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.1g P407 20g P188 1.2g HPMC K4M 0.3g 氯化鈉 0.9g 1mol/L的NaOH和/或磷酸適量 注射用水 至100ml 根據(jù)處方，稱取HPMC，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407和P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素、氯化鈉于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例4本發(fā)明組合物-P407/P188/PEG原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.1g P40720g P1880.5g PEG400 1.0g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取PEG400，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，使混合均勻，作為溶液I；稱取P407和P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例5本發(fā)明組合物-P407/P188/PEG/MC原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.1g P40720g P1882.0g PEG400 2.0g 甲基纖維素 0.5g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取PEG400、甲基纖維素(MC)，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407和P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例6本發(fā)明組合物-P407/P188/PEG/HPMC原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.1g P40720g P1881.5g PEG400 0.5g HPMC F4M1.0g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取PEG400、HPMC，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407和P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例7本發(fā)明組合物-P407/PEG/HPMC原位凝膠系統(tǒng) 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.1g P407 20g PEG400 2.0g HPMC R15M1.5g 1mol/L的NaOH和/或磷酸適量 注射用水 至100ml 根據(jù)處方，稱取PEG400、HPMC，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例8本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.1g P407 20g P188 1.5g HPMC K4M 0.5g NaCl 0.9g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水 至100ml 制備過程同實(shí)施例3。
實(shí)施例9本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.1g P40720g P1882.0g HPMC K4M0.8g NaCl 0.9g 1mol/L的NaOH和/或磷酸適量 注射用水 至100ml 制備過程同實(shí)施例3。
實(shí)施例10本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.05g P407 18g 丙二醇 1.0g MC 2.5g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水 至100ml 根據(jù)處方，稱取MC，丙二醇加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例11本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.05g P40715g MC 3.5g 氯化鈉 0.9g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取MC，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素、氯化鈉于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例12本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.03g P407 12g 阿拉伯膠 1.0g 黃原膠 3.0g 氯化鈉 0.9g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水 至100ml 根據(jù)處方，稱取阿拉伯膠、黃原膠，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素、氯化鈉于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例13本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素0.01g P40710g 黃原膠 5.0g 葡萄糖 5.0g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取黃原膠，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素、葡萄糖于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例14本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 0.5g P407 22g P188 2.0g HPMC E4M 0.2g 葡萄糖 5.0g 1mol/L的NaOH和/或磷酸適量 注射用水 至100ml 根據(jù)處方，稱取HPMC K4M，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407、P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素、葡萄糖于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
實(shí)施例15本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素 1.0g P407 25g P188 5g HPMC K4M 0.1g 葡萄糖5g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水 至100ml 制備過程同實(shí)施例14 實(shí)施例16本發(fā)明組合物 組合物處方(按100ml計(jì)) 鹽酸博安霉素1.5g P40728g P1882.0g 阿拉伯膠3.0g 葡萄糖 5.0g 1mol/L的NaOH和/或磷酸 適量 注射用水至100ml 根據(jù)處方，稱取阿拉伯膠，加入注射用水適量，充分?jǐn)嚢?，放置，至全部溶解，作為溶液I；稱取P407、P188加入到溶液I中，攪拌使部分溶解，于冰箱冷藏室中放置過夜，至全部溶解，作為溶液II；稱取鹽酸博安霉素、葡萄糖于適量注射用水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，將濾液與溶液II合并，用1mol/L氫氧化鈉溶液和(或)1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，加注射用水至全量，攪拌均勻，即得。
試驗(yàn)例部分 以下通過試驗(yàn)例考察原位凝膠的各種性能，如膠凝溫度、流變學(xué)特性、膠凝質(zhì)構(gòu)性能、電鏡掃描、藥物釋放特性等，可依據(jù)以上指標(biāo)對系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化，篩選最優(yōu)化處方。
試驗(yàn)例1、原位凝膠的相轉(zhuǎn)變溫度測定。
取凝膠樣品10ml和小轉(zhuǎn)子(1.5cm×0.6cm)放入一小燒杯中，將小燒杯置于冷水浴中，溫度計(jì)末端浸入溶液中，開啟電磁攪拌100轉(zhuǎn)/min，水浴升溫速度約0.5℃/min。磁力攪拌子完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)的溫度即為膠凝溫度，每一溶液平行測定3次，取平均值。配制一系列濃度的P407溶液(見表1)，測定膠凝溫度，結(jié)果見圖1。
由圖1可見，P407型原位凝膠的膠凝溫度具有濃度依賴性。較低濃度的P407溶液升溫到40℃仍未出現(xiàn)膠凝現(xiàn)象，19％P407溶液在32℃左右開始出現(xiàn)膠凝現(xiàn)象，并隨著P407濃度的增大，膠凝溫度逐漸下降。通常采用較高的P407濃度來制備原位凝膠以確保其對溫度變化敏感，但高濃度膠凝溫度就低，給原位凝膠的制備、儲存和使用都帶來了問題和困難。因此，處方中需加入其他輔料以獲得適宜的膠凝溫度，同時(shí)還可以達(dá)到調(diào)節(jié)膠凝強(qiáng)度，增加黏附性，改善藥物釋放度等目的。
設(shè)計(jì)不同組份不同比例的處方，以膠凝溫度為指標(biāo)，進(jìn)行單因素考察，篩選出具有適宜膠凝溫度(35℃±2℃)的處方。部分試驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1篩選得到的部分具有適宜膠凝溫度(35℃±2℃)的處方(n＝3) ＊各處方中還包含0.1％的鹽酸博安霉素，并按實(shí)施例1處方方法制備(包括步驟和相應(yīng)輔料)。另外，需要指出的是，雖然上表中各處方的膠凝溫度未達(dá)到人體通常體溫的大約37℃，但這并不影響它們實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，因?yàn)榭紤]到個(gè)體差異性以及生理狀態(tài)，人體的溫度也有一個(gè)范圍，必須使處方實(shí)際的膠凝溫度略低于人體體溫，在臨床上使用時(shí)，才能夠確保常溫下的藥液在注射到人體內(nèi)后呈現(xiàn)膠凝狀態(tài)，并且通常溫度也有一個(gè)緩慢上升的過程，可見上述膠凝溫度是適用于臨床實(shí)踐的。
試驗(yàn)例2、原位凝膠流變學(xué)性質(zhì)研究。
用粘度計(jì)測定(DV-II+數(shù)顯粘度計(jì)，Brookfield，USA)。利用與粘度計(jì)接觸的循環(huán)水浴將不同的處方樣品(見表1)從20℃升溫至37℃，升溫速度1℃/分，測定不同溫度下的各處方粘度。試驗(yàn)結(jié)果見圖2。
由圖2的溫度-粘度曲線圖可見，各處方粘度隨溫度的變化曲線呈現(xiàn)S形。在30℃以下，各處方粘度較小，呈現(xiàn)出液態(tài)特性，粘度隨著溫度的升高緩慢增大，從圖上看近似一條平線，隨著溫度的繼續(xù)升高，在某一個(gè)臨界溫度粘度開始急劇上升，流動(dòng)性顯著下降，出現(xiàn)突躍，發(fā)生溶液-凝膠轉(zhuǎn)變過程，轉(zhuǎn)化成凝膠后粘度可高達(dá)幾百萬厘泊，顯示固態(tài)特征。之后，粘度繼續(xù)小幅度增大，可能是溫度升高使膠束纏結(jié)加劇的結(jié)果，粘度隨溫度的增大趨于平穩(wěn)。
試驗(yàn)例3、膠凝質(zhì)構(gòu)性能研究 采用CT3質(zhì)構(gòu)分析儀(Brookfield，美國)進(jìn)行分析，測定參數(shù)如下探頭TA5，夾具TA-SBT，觸發(fā)點(diǎn)負(fù)載0.2g，測試速度0.5mm/s，返回速度0.5mm/s，循環(huán)1次，溫度37℃。
不同處方的膠凝質(zhì)構(gòu)參數(shù)見表2。其中，硬度第一個(gè)壓縮循環(huán)的正峰峰值；凝膠強(qiáng)度壓縮總正峰面積；粘性壓縮的負(fù)峰面積，代表探頭從樣品中離開時(shí)的難易程度；粘滯力第一次壓縮負(fù)峰的峰值。
表2不同處方膠凝質(zhì)構(gòu)參數(shù) ＊各處方中還包含0.1％的鹽酸博安霉素，并按實(shí)施例1處方方法制備(包括步驟和相應(yīng)輔料)。
不同處方的質(zhì)構(gòu)特性圖見圖3。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，單用P188來調(diào)節(jié)P407的膠凝時(shí)間的處方，膠凝后的硬度、強(qiáng)度、粘性以及粘滯力等各項(xiàng)數(shù)值最低。處方中加入丙二醇和HPMC都可增大膠凝強(qiáng)度，隨著生物粘附性高分子聚合物HPMC加入量的增大，膠凝的強(qiáng)度和粘度反而有所下降，這可能是HPMC和P188綜合作用的結(jié)果，二者相互制約?？梢娨@得膠凝溫度和膠凝強(qiáng)度均適宜的處方，必須將具有溫度上調(diào)機(jī)制的附加劑(如P188)和溫度下調(diào)機(jī)制的附加劑(如HPMC)進(jìn)行合理配比。
試驗(yàn)例4、電鏡掃描 采用掃描電子顯微鏡(S-4800，HITACHI，日本)觀察各處方(各處方中還包含0.1％的鹽酸博安霉素，并按實(shí)施例1處方方法制備，包括制備步驟和使用的相應(yīng)輔料)膠凝后的三維結(jié)構(gòu)，結(jié)果見圖4。
由掃描電鏡圖片可見，具有凝膠轉(zhuǎn)化性質(zhì)的處方在膠凝后形成三維網(wǎng)絡(luò)狀空間結(jié)構(gòu)。
試驗(yàn)例5、實(shí)施例樣品的體外釋放試驗(yàn) ①透析袋法 方法精密取5.0mL原位凝膠于自制的溶出小杯中，底端采用透析袋封口，進(jìn)行體外釋放實(shí)驗(yàn)。釋放介質(zhì)為pH7.4磷酸鹽緩沖液100ml，循環(huán)水溫控制在(37.0±0.1)℃，轉(zhuǎn)速為100r·min-1，分別于一定的時(shí)間取樣5mL，并及時(shí)補(bǔ)充等溫度及等量的釋放介質(zhì)。取出的釋放溶液經(jīng)孔徑0.45μm濾膜過濾，用UV法測定。計(jì)算累積釋放百分率。
實(shí)施例1、2、3、9、鹽酸博安霉素等滲溶液(含鹽酸博安霉素1mg/ml)的釋放度考察結(jié)果見圖5。
由圖5可見，實(shí)施例1、2、3、9中主藥鹽酸博安霉素能夠緩慢釋放，釋放速度明顯慢于該藥物的普通等滲溶液，具有顯著的緩釋作用。
②無膜溶出法 方法精密取10.0mL原位凝膠置于預(yù)先已稱重的平底帶塞玻璃管中，將該玻璃管置于37℃的控溫?fù)u床中預(yù)熱10min，使溶液完全膠凝，加入5ml 37℃的pH7.4的PBS，作為釋放介質(zhì)，在50rpm的轉(zhuǎn)速下震蕩，每隔一段時(shí)間，傾出全部釋放介質(zhì)，將玻璃管外壁擦干凈，稱重并記錄，然后重新放入控溫?fù)u床中，補(bǔ)充37℃的釋放介質(zhì)5ml，如此反復(fù)操作，直至試驗(yàn)結(jié)束，相鄰時(shí)間點(diǎn)的樣品重量差異即為此期間凝膠溶蝕量。在考察凝膠溶蝕的同時(shí)測定藥物釋放度。將每次溶蝕試驗(yàn)得到的釋放液轉(zhuǎn)全部移至25ml容量瓶中，用pH7.4的PBS稀釋至刻度，測定吸收度值，計(jì)算藥物濃度，并計(jì)算累積釋放百分率。
實(shí)施例3的無膜溶出結(jié)果見圖6。
無膜溶出法模擬人體環(huán)境，比透析袋法更易于揭示原位凝膠藥物可能的體內(nèi)釋放，體內(nèi)體外相關(guān)性好。由圖6可見，本發(fā)明組合物中鹽酸博安霉素的釋放時(shí)間可延長至12小時(shí)以上，溶蝕是控制藥物釋放的主要因素。將凝膠累積溶蝕量與藥物累積釋放度分別對時(shí)間回歸，呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，顯示為零級動(dòng)力學(xué)特征。
上文“實(shí)施例部分”中的各實(shí)施例制備的本發(fā)明組合物，根據(jù)以上“試驗(yàn)例部分”的各試驗(yàn)例進(jìn)行測試，均得到了令人滿意的結(jié)果。例如，各實(shí)施例的組合物根據(jù)“試驗(yàn)例1”測定，開始發(fā)生膠凝的溫度均在32至37℃之間；膠凝質(zhì)構(gòu)性能和電鏡掃描以及體外釋放結(jié)果均獲得了與上面各試驗(yàn)例中測定的結(jié)果基本一致。
雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進(jìn)，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
權(quán)利要求
1.博安霉素組合物，其包含治療有效量的博安霉素或其可藥用鹽、泊洛沙姆、膠凝輔助劑、水，以及任選的滲透壓調(diào)節(jié)劑和/或pH調(diào)節(jié)劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的博安霉素組合物，其特征在于以下a)至e)的任一項(xiàng)或多項(xiàng)
a)以100ml計(jì)，其中包含0.01～2.0g的博安霉素或其可藥用鹽；
b)以100ml計(jì)，其中包含10～30g的泊洛沙姆；
c)以100ml計(jì)，其中包含0.1～5.0g的膠凝輔助劑；
d)以100ml計(jì)，其中包含0～6.0g的滲透壓調(diào)節(jié)劑；
e)其中包含適量的pH調(diào)節(jié)劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以100ml計(jì)，其中包含
博安霉素或其可藥用鹽0.01～2.0g，
泊洛沙姆10～30g，
膠凝輔助劑 0.1～5.0g，
滲透壓調(diào)節(jié)劑0～6.0g，
pH調(diào)節(jié)劑適量，和
水 加至100ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其特征在于以下a)至e)的任一項(xiàng)或多項(xiàng)
a)所述博安霉素的可藥用鹽選自鹽酸博安霉素、硫酸博安霉素、磷酸博安霉素、酒石酸博安霉素和枸櫞酸博安霉素、醋酸博安霉素、富馬酸博安霉素、馬來酸博安霉素；
b)所述泊洛沙姆是一種或多種分子量范圍為5000～20000的泊洛沙姆；
c)所述泊洛沙姆是一種或多種氧乙基與氧丙基比例范圍為(0.2～4)∶1的泊洛沙姆；
d)所述泊洛沙姆是一種或多種選自以下型號的泊洛沙姆泊洛沙姆P407(即F127)、泊洛沙姆P188(即F68)；
e)所述膠凝輔助劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)丙二醇、甘油、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、海藻酸鈉及其衍生物、阿拉伯膠、西黃耆膠、瓜爾豆膠、卡波姆、植物凝集素、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、糊精及衍生物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其中所述博安霉素或其可藥用鹽是鹽酸博安霉素，所述泊洛沙姆是泊洛沙姆P407(即F127)、泊洛沙姆P188(即F68)、或此二者以任意比例的組合，膠凝輔助劑是一種或多種選自以下的物質(zhì)羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、丙二醇、聚乙二醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)的博安霉素組合物，其在25±0.5℃下呈透明或基本上透明的、可流動(dòng)的液體，并且其在37±0.5℃下呈凝膠狀的半固體；和/或，該組合物包含本發(fā)明實(shí)施例的處方組成。
7.制備權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的博安霉素組合物的方法，其包括以下步驟
i)稱取膠凝輔助劑，加入適量水，充分?jǐn)嚢?，使全部溶解?br> ii)稱取泊洛沙姆，加入到步驟i)的溶液中，攪拌和/或靜置使全部溶解；
iii)將博安霉素或其藥用鹽、任選的滲透壓調(diào)節(jié)劑溶于適量水中，攪拌使其溶解，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾；
iv)將步驟iii)的濾液與步驟ii)的溶液合并，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液的pH值為5.5～8.5，加水至全量，攪拌均勻，靜置，得到透明或基本透明的液體，即得。
8.一種博安霉素的藥物制劑，其包含權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的博安霉素組合物，以及任選的藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。
9.一種博安霉素的即用型注射針，其包括包含針頭的注射器，以及貯存在該注射器中的權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的博安霉素組合物。
10.權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的博安霉素組合物在制備治療腫瘤和/或癌癥的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及新穎的博安霉素組合物及其制備方法。具體地說，本發(fā)明涉及一種博安霉素組合物，其包含治療有效量的博安霉素或其可藥用鹽、泊洛沙姆、膠凝輔助劑、水，以及任選的滲透壓調(diào)節(jié)劑和/或pH調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明還涉及制備所述組合物的方法，包含所述組合物的藥物制劑和即用型注射針，以及所述組合物在制備治療腫瘤和/或癌癥的藥物中的用途。本發(fā)明組合物體內(nèi)和/或體外行為優(yōu)良。
文檔編號A61M3/00GK101816777SQ201010156908
公開日2010年9月1日 申請日期2010年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月27日
發(fā)明者丁維明, 李眉, 李桂玲, 許鴻章, 陳汝賢 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所