專利名稱：：一種巖白菜素、鹽酸西替利嗪復(fù)方口服劑型的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方口服劑型，尤其是涉及一種胃滯留漂浮型緩釋片。
背景技術(shù)：
：慢性支氣管炎和支氣管哮喘是臨床上常見的呼吸系統(tǒng)疾病，我國患病率高達(dá)14%。隨著年齡增長，患病率增加，50歲以上人群的患病率高達(dá)15%或更多。臨床表現(xiàn)為長期反復(fù)咳嗽、咳痰，并伴有氣喘、氣促、呼吸困難等癥狀。若不能及時(shí)控制，反復(fù)遷延，可惡化發(fā)展為慢性阻塞性肺氣腫、肺源性心臟病等，嚴(yán)重危害人類健康，甚至導(dǎo)致死亡。巖白菜素具有良好的鎮(zhèn)咳祛痰作用，可提高免疫力?！吨腥A人民共和國藥典》2005年版將其收載為鎮(zhèn)咳祛痰藥，是治療慢性支氣管炎的常用藥(中國藥典2005年版，一部)。巖白菜素對(duì)咳嗽中樞有選擇性抑制作用，不良反應(yīng)小，且連續(xù)使用不產(chǎn)生耐藥性，同時(shí)還具有護(hù)肝、抗病毒、促進(jìn)病變組織恢復(fù)等作用(夏從龍等，巖白菜素的研究進(jìn)展，時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006，17(3)432433)。目前，巖白菜素的劑型有普通片劑、滴丸、口含片、分散片等，但本品為一種親脂性較弱的有機(jī)弱酸，進(jìn)入胃腸道后不易透過脂質(zhì)雙分子層，并在中性和堿性條件下易分解，月旨溶性低，透膜性差(李鳳等，巖白菜素理化性質(zhì)的研究，中國藥學(xué)雜志，2009，44(2):9295)。文獻(xiàn)報(bào)道狗和人口服巖白菜素后，吸收快但不完全，口服Ih后尿中即出現(xiàn)原形藥物。犬肌注大劑量后14h出現(xiàn)血藥濃度高峰，27h出現(xiàn)尿藥濃度高峰(王剛、麻兵繼，巖白菜素的研究概況，安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，21(6):5961)。造成巖白菜素口服生物利用度低的原因主要與其溶解度低、透膜性差、腸內(nèi)不穩(wěn)定及體內(nèi)代謝迅速有關(guān)。針對(duì)其吸收的理想部位在胃和小腸上部這一特征，可設(shè)想將巖白菜素制成能在胃內(nèi)滯留，或加入適宜的穩(wěn)定劑制成在胃腸道內(nèi)緩慢釋放的劑型，再加入冰片、卵磷脂等有效的吸收促進(jìn)劑，則能大大提高生物利用度(論文巖白菜素的生物藥劑學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)研究)。目前上市的巖白菜素復(fù)方普通制劑中添加了第一代Hl受體拮抗劑_馬來酸氯苯那敏，其具有較強(qiáng)的Hl受體阻斷作用，可減輕過敏引起的呼吸道癥狀。近年來研究證明對(duì)某些哮喘病人有滿意療效，可增強(qiáng)哮喘性支氣管炎和毛細(xì)支氣管炎的治療效果，改善喘憋、促進(jìn)哮鳴音消失和縮短病程。但該藥物脂溶性較強(qiáng)，易透過血腦屏障，對(duì)中樞神經(jīng)有抑制作用，從而產(chǎn)生一定的鎮(zhèn)靜、嗜睡、乏力等副作用。同時(shí)，馬來酸氯苯那敏口服后血藥濃度36h達(dá)峰值，作用持續(xù)時(shí)間46h，主要在肝臟代謝，首過效應(yīng)較明顯，需多次給藥(李明華，抗過敏藥物的種類、藥理學(xué)和臨床應(yīng)用，中國臨床醫(yī)生，2003，31(9):1518)。因此，巖白菜素現(xiàn)有復(fù)方普通制劑的療效仍存在一些不盡如人意之處一方面是巖白菜素生物利用度低的缺點(diǎn)；另一方面，馬來酸氯苯那敏因同時(shí)兼具抗膽堿及較強(qiáng)的中樞神經(jīng)抑制作用，易引起嗜睡、眩暈、頭痛等不良反應(yīng)。且兩藥均存在服藥次數(shù)多的缺點(diǎn)，顯然不能滿足慢性支氣管炎和支氣管哮喘患者的長期用藥要求。尋找合適的劑型，同時(shí)，尋找平喘作用佳、作用時(shí)間長、對(duì)中樞鎮(zhèn)靜作用小的Hl受體拮抗劑也勢(shì)在必行。本發(fā)明經(jīng)過研究，選擇對(duì)慢性支氣管炎具有良好鎮(zhèn)咳、祛痰作用的巖白菜素，輔以平喘作用佳、作用時(shí)間長、對(duì)中樞鎮(zhèn)靜作用小的第二代Hl受體拮抗劑鹽酸西替利嗪，提出了巖白菜素\鹽酸西替利嗪藥物組合，并將其制成胃滯留漂浮型緩釋片，較傳統(tǒng)組合的普通劑型更有效、更安全，患者的順應(yīng)性高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明選擇對(duì)慢性支氣管炎具有良好鎮(zhèn)咳、祛痰作用的巖白菜素，輔以平喘作用佳、作用時(shí)間長、對(duì)中樞鎮(zhèn)靜作用小的第二代Hl受體拮抗劑鹽酸兩替利嗪，提出了巖白菜素\鹽酸西替利嗪藥物組合。鹽酸西替利嗪為羥嗪的羧酸衍生物，其克服了第一代Hl受體拮抗劑(如馬來酸氯苯那敏、苯海拉明、異丙嗪等)藥效持續(xù)時(shí)間短(46h)、需多次給藥、有鎮(zhèn)靜、嗜睡及抗膽堿能副作用等缺點(diǎn)。與第二代Hl受體拮抗劑相比，該藥的優(yōu)勢(shì)在于一、有效地預(yù)防哮喘的急性發(fā)作和改善支氣管哮喘的慢性炎癥。鹽酸西替利嗪不僅具有較強(qiáng)的抗組胺作用，還可通過抑制粘附因子來阻斷及抑制氣道反應(yīng)性炎癥中的嗜酸性粒細(xì)胞浸潤和τ淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞的趨化及活化。Wood-Baker和Holgate比較了阿司咪唑、西替利嗪、特非那定對(duì)組胺或乙酰膽堿吸入引起的哮喘病人支氣管痙攣的抑制作用。結(jié)果顯示，所有的抗組胺藥對(duì)組胺誘發(fā)的支氣管收縮都有顯著的保護(hù)作用，西替利嗪和特非那定的作用最強(qiáng)(Wood-BakerR,HolgateST.ThecomparativeactionsandadverseeffectprofileofsingledosesofHl—receptorantihistaminesintheairwaysandskinofsubjectswithasthma.JAllergyClinImmunol.1993May91(5):100514)。Richard等給不吸煙的氣喘病志愿者單劑量口服IOmg西替利嗪、撲爾敏、特非那丁、阿司咪唑、溴苯那敏、賽庚啶、氯馬斯汀和安慰劑等對(duì)抗組胺和乙酰甲膽堿引發(fā)的支氣管阻塞，發(fā)現(xiàn)給予任一組胺藥后其1秒用力呼氣量(FEVl)基線都高于安慰劑，給予西替利嗪后FEVl為9.28%，而溴苯那敏僅2.58%。研究劑量下西替利嗪比特非那丁更有效。作者認(rèn)為西替利嗪有望在哮喘治療方面有重要貢獻(xiàn)，包括抑制細(xì)胞介質(zhì)釋放和嗜酸性細(xì)胞在皮膚的募集現(xiàn)象。二、在改善流涕、鼻癢、打噴嚏、流淚、咳嗽等癥狀方面較氯雷他定、特非那定、阿司咪唑的作用更為持久和顯著。(DayJH,BriscoeMP,ClarkRH,EllisAK,GervaisP,Onsetofactionandefficacyofterfenadine,astemizole,cetirizine,andloratadineforthereliefofsymptomsofallergicrhinitis.AnnAllergyAsthmaImmunol.1997Aug79(2):16372.)。與第二代抗組胺藥比較，該藥的安全性優(yōu)勢(shì)在于(1)在安全性方面，西替利嗪不同于阿司咪唑和特非那定，在其建議給藥劑量或更高的劑量下沒有心臟毒性，如QT間期延長現(xiàn)象。如果將藥動(dòng)學(xué)考慮在內(nèi)，則西替利嗪是僅有的幾個(gè)不經(jīng)肝臟代謝的藥物。(2)西替利嗪的Vd非常低，因此不會(huì)在肌肉組織中聚集。三、耐受性好，適于孕婦和兒童的使用。美國FDA將西替利嗪列為孕婦用藥的B類(較安全)。已有研究表明西替利嗪可作為一個(gè)基本的干預(yù)藥物，用于抑制高敏感、高危險(xiǎn)嬰兒的哮喘發(fā)作。(WarnerJO,Adouble-blinded，randomized,placebo-controlledtrialofcetirizineinpreventingtheonsetofasthmainchildrenwithatopicdermatitis18months'streatmentand18months'posttreatmentfollow-up.JAllergyClinImmunol.2001Dec108(6):92937.)。1998年5月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)西替利嗪可用于25歲兒童?，F(xiàn)國內(nèi)已應(yīng)用于12歲以下兒童。我們通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，巖白菜素\鹽酸西替利嗪組合物有顯著的鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用，且顯著降低了巖白菜素\馬來酸氯苯那敏組合的嗜睡、疲倦、鎮(zhèn)靜等副作用。本發(fā)明的目的是提供一種巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方口服胃滯留漂浮型緩釋片。胃滯留緩釋制劑是利用制劑的物理化學(xué)性質(zhì)以及胃腸道局部pH、胃腸道酶、制劑在胃腸道的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制等生理學(xué)特性，使藥物在胃內(nèi)特定部位釋放的給藥系統(tǒng)。目前，根據(jù)藥物制劑在體內(nèi)的大小、比重及作用機(jī)制分為漂浮型胃內(nèi)滯留系統(tǒng)、生物粘附型胃內(nèi)滯留系統(tǒng)和阻塞型胃內(nèi)滯留系統(tǒng)等。胃滯留漂浮型緩釋制劑是根據(jù)流體動(dòng)力學(xué)平衡原理設(shè)計(jì)，口服后制劑與胃液接觸，所含有的親水膠體成分開始產(chǎn)生水化作用，在制劑周圍形成一種凝膠屏障，防止凝膠骨架水化速度進(jìn)一步加快，維持骨架的密度小于胃內(nèi)容物的密度而漂浮于胃液上，使其受胃排空的影響小，從而延長了藥物在胃內(nèi)滯留時(shí)間。開發(fā)胃內(nèi)滯留漂浮型制劑的技術(shù)已基本成熟。至2000年，國外已經(jīng)上市的胃內(nèi)漂浮劑品種有羅氏(Roche)公司開發(fā)的左旋多巴和芐絲胼胃漂浮膠囊MadoparHBS，安定漂浮膠囊Valrelease，以及商品名為Valium的安定漂浮片，Topalkan和AlmagateFlotcoat兩種抗胃酸漂浮制劑。印度Ranbaxy公司開發(fā)了環(huán)丙沙星胃漂浮型緩釋片，用于治療尿路感染。國內(nèi)先后有硫酸慶大霉素和鹽酸地爾硫卓的胃漂浮制劑上市。而生物粘附型胃內(nèi)滯留系統(tǒng)和阻塞型胃內(nèi)滯留系統(tǒng)由于胃液流量、黏度、PH、電解質(zhì)成分易變，以及胃黏膜相對(duì)較厚且總處于更新之中，該兩種給藥系統(tǒng)的給藥尚處在研究階段，少有產(chǎn)品上市。因此，本發(fā)明經(jīng)過艱辛的研究得出采用胃內(nèi)滯留漂浮型技術(shù)更利于本發(fā)明的巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方制劑。有研究報(bào)道，鹽酸西替利嗪口服后70%被胃腸道吸收，血藥濃度Ih達(dá)峰值，半衰期7llh，作用持續(xù)時(shí)間24h(梁月晴、肖踐麗、徐敬，5種第二代抗組胺藥物的比較，中國藥師，2002，5(6):368369)。因此，該藥物適合于制成口服后迅速釋放的制劑。同時(shí)實(shí)驗(yàn)階段發(fā)現(xiàn)，巖白菜素所占處方比重較大，將鹽酸西替利嗪設(shè)計(jì)制成胃滯留漂浮型緩釋片的速釋包衣層，巖白菜素設(shè)計(jì)制成胃滯留漂浮型緩釋片的緩釋片芯層，更有利于漂浮緩釋片的起漂和持漂，且進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)了鹽酸西替利嗪快速釋放，巖白菜素在胃中滯留并緩慢釋放。本發(fā)明的目的是提供一種含巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方口服劑型，其優(yōu)選是胃滯留漂浮型緩釋片制劑。本發(fā)明的巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方的胃滯留漂浮型緩釋片包含125375重量份的巖白菜素和210重量份的鹽酸西替利嗪。本發(fā)明的胃滯留漂浮型緩釋片由緩釋片芯層和速釋包衣層組成。本發(fā)明的胃滯留漂浮型緩釋片的緩釋片芯層主要包含巖白菜素、親水凝膠骨架材料、釋放調(diào)節(jié)劑和發(fā)泡劑，其重量份數(shù)為巖白菜素125375份，親水凝膠骨架材料2060份，釋放調(diào)節(jié)劑3075份和發(fā)泡劑2590份。本發(fā)明的胃滯留漂浮型緩釋片的親水凝膠骨架材料選自羥丙基甲基纖維素HPMC、甲基纖維素MC、乙基纖維素EC、羥丙基纖維素HPCJi乙基纖維素HEC和羧甲基纖維素鈉SCMC中的一種或多種；釋放調(diào)節(jié)劑選自乳糖、甘露醇和聚丙烯酸樹脂II或III的的一種或多種；發(fā)泡劑選自碳酸氫鈉、碳酸鈣、碳酸鈉和碳酸鎂中的一種或多種。本發(fā)明的胃滯留漂浮型緩釋片的速釋包衣層主要包含210重量份的鹽酸西替利嗪和110重量份的胃溶性包衣材料。本發(fā)明的所述胃溶性包衣材料選自纖維素類胃溶性包衣材料，進(jìn)一步地優(yōu)選自羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉的一種或多種。本發(fā)明的常見的如商品名為歐巴代、易釋麗等胃溶性包衣材料均可用于本發(fā)明的胃滯留漂浮型緩釋片，但是通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，胃溶性包衣材料內(nèi)烯酸樹脂類如EudragitElOO不適于用作該緩釋片的包衣材料，因片劑密閉久置后表面發(fā)粘，且顯著延長片劑的起漂時(shí)間。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備胃滯留漂浮型緩釋片的方法，包括以下步驟(1)將原輔料過80100目篩，按所需份數(shù)稱取巖白菜素、親水凝膠骨架材料、釋放調(diào)節(jié)劑以等量遞加法混勻，備用；(2)將上述粉末加入510%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液適量制備軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥，整粒后備用；(3)按所需份數(shù)稱取發(fā)泡劑以510%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液適量制軟材，過2024目篩制粒，4050°C干燥，整粒后備用；(4)將上述兩種顆粒按等量遞加法混勻后加入硬脂酸鎂，混勻，壓片，控制片劑硬度46kg，即得緩釋片芯；(5)將鹽酸西替利嗪和胃溶性包衣材料溶于醇水溶液中制得包衣液，對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含所需份數(shù)鹽酸西替利嗪，控制包衣增重33.25%，即得成PΡΠO胃滯留漂浮型緩釋制劑的制備關(guān)鍵在于片劑遇胃液后能否達(dá)到預(yù)期的漂浮效果，我們發(fā)現(xiàn)除制劑處方組成外，緩釋片芯的硬度以及包衣層的包衣增重對(duì)本發(fā)明制劑的漂浮狀態(tài)和藥物的釋放亦有顯著影響。測定硬度的方法采用78X-2片劑四用測定儀測定片芯的硬度。測定包衣增重的方法包衣增重％=(包衣后片重-包衣前片重)/包衣前片重X100%通過以下實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，控制片芯硬度46kg和包衣增重33.25%，既能達(dá)到較好的片劑漂浮狀態(tài)，且能夠保證藥物釋放完全；同時(shí)，亦可達(dá)到本品對(duì)鹽酸西替利嗪符合含量均勻度的要求。以具體實(shí)施方式中的實(shí)施例1為例(一)硬度對(duì)緩釋片芯的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本發(fā)明的復(fù)方制劑口服后，鹽酸西替利嗪速釋包衣層在胃中迅速釋放藥物，維持有效血藥濃度；巖白菜素緩釋片芯層漂浮于胃中緩慢釋放藥物，增加巖白菜素的體內(nèi)吸收，從而增強(qiáng)巖白菜素復(fù)方制劑治療慢性支氣管炎、支氣管哮喘的療效，降低鎮(zhèn)靜、嗜睡、疲倦等副作用。本發(fā)明的復(fù)方口服制劑每天只需服用1次或2次，極大地提高了患者的順應(yīng)性。圖1表示巖白菜素釋放曲線圖。圖2表示實(shí)施例1和對(duì)比例1巖白菜素釋放曲線圖。具體實(shí)施例方式藥效學(xué)試驗(yàn)受試藥物復(fù)方組成如下復(fù)方I組成巖白菜素馬來酸氯苯那敏=62.51復(fù)方II組成巖白菜素鹽酸西替利嗪=62.51復(fù)方III組成巖白菜素鹽酸西替利嗪=62.51.7根據(jù)臨床用藥劑量及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本實(shí)驗(yàn)各復(fù)方高、中、低劑量設(shè)計(jì)如下復(fù)方I組(巖白菜素/馬來酸氯苯那敏)62.5mg/l.Omg,15.625mg/0.25mg，3.81mg/0.0625mg。復(fù)方II組(巖白菜素/鹽酸西替利嗪)62·5mg/l.Omg,15.625mg/0.25mg，3.81mg/0.0625mg。復(fù)方III組(巖白菜素/鹽酸西替利嗪)62.5mg/l.7mg,15.625mg/0.425mg,3.81mg/0.106mg。受試動(dòng)物昆明種小鼠，SPF級(jí)，四川省中藥研究所動(dòng)物中心提供；英國種豚鼠，健康一級(jí)，四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場提供。主要儀器YC_Y800型醫(yī)用霧化器(北京亞都環(huán)境科技有限公司)；UV-2120C型紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯上海儀器有限公司)；YLS-IA多功能小鼠自主活動(dòng)記錄儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站)。主要試劑0.磷酸組胺，上海伯奧生物科技有限公司，批號(hào)090206；25%氨水，成都市露澄化工試劑廠，批號(hào)20090304；苯酚紅，成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)080329；臨用前，配制5%生理鹽水溶液使用。1.對(duì)小鼠氨水引咳試驗(yàn)的影響取SPF級(jí)昆明小鼠70只，體重1822g，雌雄各半，隨機(jī)分為7組，按表1劑量灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg，給藥Ih后將動(dòng)物置于噴霧箱內(nèi)，用醫(yī)用噴霧器恒速噴入25%的氨水5s，盲法記錄2min內(nèi)小鼠的咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)。采用SPSS13.0軟件對(duì)組間差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表1。表1各復(fù)方對(duì)小鼠氨水引咳試驗(yàn)的影響(η=10，χ士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>與生理鹽水比較，**Ρ<0.01與本復(fù)方中劑量比較，##Ρ<0.01表1表明，與生理鹽水組比較，3個(gè)復(fù)方的中、高劑量組的咳嗽潛伏期均非常顯著增加(P<0.01)，而咳嗽次數(shù)均有非常明顯減少(P<0.01)；此外，三個(gè)復(fù)方的中、高劑量對(duì)小鼠氨水引咳反應(yīng)的抑制作用呈現(xiàn)一定量效關(guān)系，其中復(fù)方ι和復(fù)方2的高劑量組的咳嗽次數(shù)均明顯少于同復(fù)方的中劑量組(P<0.01)。2.對(duì)小鼠苯酚紅排出試驗(yàn)的影響取雄性SPF級(jí)昆明小鼠70只，體重2024g，隨機(jī)分為7組，按表2劑量灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg，給藥0.5h后，腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液10ml/kg，半小時(shí)后處死動(dòng)物、取出氣管，置1.5ml生理鹽水中，加lmol/LNaOH堿化，浸泡0.5h后，取其上清液離心后用分光光度計(jì)546nm波長測定OD值，根據(jù)酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酚紅含量。采用SPSS13.0軟件對(duì)組間差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表2。酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線測定用5%碳酸氫鈉配制100μg/ml的酚紅溶液，再低比稀釋為10、5、3、1、0·7、0·5、0·3及0.1μg/ml酚紅溶液，于分光光度計(jì)546nm處測定OD值，制備酚紅的標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.126x+0.0101，R2=0.999。表2各復(fù)方對(duì)小鼠苯酚紅排出試驗(yàn)的影響(η=10，χ士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與生理鹽水比較，**P<0.01本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與生理鹽水比較，3個(gè)復(fù)方的中、高劑量呈現(xiàn)劑量依賴性增加小鼠氣管苯酚紅排出量，其中3個(gè)復(fù)方的高劑量組均有非常明顯的作用(P<0.01)。3.對(duì)豚鼠組胺性支氣管哮喘的影響取英國種幼年豚鼠，體重150200g，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)前1天，將豚鼠分別放入噴霧箱內(nèi)，恒速噴入0.磷酸組織胺液15s，記錄豚鼠藥前的引喘潛伏期(從噴霧開始到哮喘發(fā)作)，如超過120s則不予選用。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，取合格豚鼠80只，隨機(jī)分為10組，按照表3劑量分別灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg，對(duì)照組給予等體積生理鹽水。藥后lh，同前恒速噴入0.磷酸組胺液，盲法記錄豚鼠藥后引喘潛伏期，觀察時(shí)程6min。按照下式計(jì)算各組哮喘潛伏期延長百分率。采用SPSS13.0軟件對(duì)組間差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。潛伏期延長百分率=(藥前值-藥后值)/藥前值X100%表3.各復(fù)方對(duì)豚鼠組胺性支氣管哮喘的影響(η=8，χ士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與同期生理鹽水比較，**Ρ<0.Ol與同期復(fù)方3的中劑量比較，##Ρ<0.01表3結(jié)果顯示，3個(gè)復(fù)方對(duì)組胺引起的豚鼠哮喘具有劑量相關(guān)的拮抗作用，3個(gè)復(fù)方的低、中、高劑量均可明顯延長組胺引喘的潛伏期(P<0.01)，并具有明顯的量效關(guān)系；此外，復(fù)方3的中劑量組的引喘潛伏期非常顯著長于復(fù)方1和復(fù)方2的中劑量組(P<0.01)。4.對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響取雌性SPF昆明種小鼠，體重1822g，實(shí)驗(yàn)前1天，將小鼠放入自主活動(dòng)記錄儀中，測試小鼠藥前IOmin內(nèi)自主活動(dòng)次數(shù)，隨機(jī)分為10組，按照表1劑量分別灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg，對(duì)照組給予等體積生理鹽水。給藥Ih后，同前盲法測試小鼠藥后自主活動(dòng)次數(shù)。按照下式計(jì)算各組IOmin內(nèi)自主活動(dòng)次數(shù)減少百分率。采用SPSS13.O軟件對(duì)組間差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。自主活動(dòng)減少百分率=(藥前值-藥后值)/藥前值X100%表4.各復(fù)方對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響(η=10，χ士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>與同期生理鹽水比較，**P<0.Ol表4結(jié)果表明，復(fù)方1的中、高劑量可明顯減少小鼠自主活動(dòng)次數(shù)(P<0.01)，而復(fù)方2和復(fù)方3的三個(gè)劑量組的藥前與藥后的自主活動(dòng)次數(shù)未見明顯改變(P>0.05)。由藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)可知，巖白菜素\鹽酸西替利嗪組合物的鎮(zhèn)靜、嗜睡等副作用明顯小于巖白菜素\馬來酸氯苯那敏組合物，且平喘作用更強(qiáng)；同時(shí)巖白菜素\鹽酸西替利嗪組合物亦有顯著的鎮(zhèn)咳、祛痰作用，可用于慢性支氣管炎、支氣管哮喘疾病的治療。巖白菜素原位灌注實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法選實(shí)驗(yàn)前禁食12h(自由飲水)的健康大鼠(Wistar，雄性)15只，體重200士20g，隨機(jī)分為三組，分別給予低(71.27μg·ml-1)、中(143.93μg·ml-1)、高(209.15μg-πιΓ1)三個(gè)濃度灌注液，腹腔注射戊巴比妥鈉40mg·kg—1，麻醉后固定。沿腹中線切開腹腔，暴露胃，在賁門和幽門處各切一小口，用玻璃管插入幽門并結(jié)扎，用人工胃液將胃洗凈，再排凈殘留液體，然后結(jié)扎賁門。用注射器吸取胃灌注液4ml，注射到胃內(nèi)，結(jié)扎幽門。將胃放回腹腔，保持體溫37°C。胃灌注液中的藥物濃度為初始濃度。2h后將胃剪下，將胃內(nèi)藥液完全轉(zhuǎn)移至IOml容量瓶中，用人工胃液少量多次洗滌胃內(nèi)部，洗滌液一并轉(zhuǎn)入容量瓶中，最后用人工胃液定容，搖勻，測定巖白菜素的濃度，計(jì)算單位時(shí)間內(nèi)的吸收百分?jǐn)?shù)(P%)，結(jié)果見表5。表5.巖白菜素在大鼠胃中吸收百分?jǐn)?shù)(n=5，x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>209.153.95士0·29_結(jié)果表明，不同濃度藥液在胃中單位時(shí)間內(nèi)的吸收百分?jǐn)?shù)(P%)不同。低、中、高三個(gè)濃度下的分別為6.83%,4.51%,3.95%0巖白菜素在體腸吸收實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法選實(shí)驗(yàn)前禁食12h(自由飲水)的健康大鼠(Wistar，雄性)15只，體重200士20g，隨機(jī)分為三組，分別給予低(71.27μg·ml-1)、中(143.93μg·ml-1)、高(209.15μg-πιΓ1)三個(gè)濃度灌注液，腹腔注射戊巴比妥鈉40mg·kg—1，麻醉后固定。沿腹中線切開腹腔，在實(shí)驗(yàn)?zāi)c段兩端各切一小口，在上、下兩端小口處各插入玻璃管并用手術(shù)線固定。用37°C的生理鹽水緩緩注入腸管，洗凈腸段內(nèi)容物。將腸段兩端的玻璃管與蠕動(dòng)泵的膠管連接，形成回路，開動(dòng)蠕動(dòng)泵。以5ml^irT1流速循環(huán)IOmin后，將流速調(diào)節(jié)為2ml^irT1,立即自灌注液瓶中取樣(0.5ml共2份)，分別作為測定零時(shí)間藥物濃度和酚紅濃度的樣品，另向錐形瓶中補(bǔ)加酚紅液1ml，其后每隔15min亦按同法取樣并補(bǔ)加酚紅液，循環(huán)2h后中止。取樣品液0.5ml置潔凈試管中，8X103r·mirT1離心5min，取上清液10μ1進(jìn)樣，測定BN含量。計(jì)算單位時(shí)間內(nèi)的吸收百分?jǐn)?shù)(Ρ%)，結(jié)果見表6。表6.巖白菜素在大鼠小腸的吸收百分?jǐn)?shù)(η=5，χ士s)_濃度(yg.mr1)P%_71.273.37士0.66143.933.14士1.47209.153.78士0.72_結(jié)果表明，低、中、高三個(gè)濃度的BN溶液在小腸中的卩％分別為3.37、3.14、3.78%。由巖白菜素的原位灌注實(shí)驗(yàn)和在體腸吸收實(shí)驗(yàn)可知，巖白菜素單位時(shí)間內(nèi)的吸收百分?jǐn)?shù)(P%)在胃中均較小腸高，即表明胃為巖白菜素的理想吸收部位。以下實(shí)施例用以進(jìn)一步闡述本發(fā)明，而不起任何限制作用。實(shí)施例1緩釋片芯巖白菜素187.5g羥丙基甲基纖維素K4M27g乳糖39g碳酸氫鈉45g5%PVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂1.5g_制成1000片速釋包衣鹽酸西替利嗪5g易釋麗4g_制成1000片分別將原輔料過80或100目篩，將巖白菜素、乳糖、HPMC按等量遞加法混勻后，以5%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥1.52h，整粒后備用。將碳酸氫鈉以5%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，4050°C干燥1.52h，整粒后備用。將兩種顆粒按等量遞加法混勻后加入硬脂酸鎂混合后壓片，控制壓片硬度46kg。將鹽酸西替利嗪和易釋麗分別溶于醇水溶液中制得包衣液。對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含5mg鹽酸西替利嗪，且包衣增重3%，即得。一、巖白菜素體外釋放度測定1.檢測波長的確定精密稱取適量巖白菜素于25ml容量瓶中，人工胃液溶解定容，取此液Iml稀釋10倍，于200SOOnm處紫外掃描得到最大吸收波長為275nm。2.色譜條件色譜柱DiamonsilC18(250X4.6mm，5μm)；以甲醇-水(3565，磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.5)為流動(dòng)相；檢測波長為275nm；流速1.Oml/min；柱溫室溫；進(jìn)樣量20μ1。3.釋放度測定方法采用中國藥典2005年版二部附錄XD釋放度測定法第二法槳法，以0.lmol/L鹽酸溶液900ml為釋放介質(zhì)，溫度37士0.5°C，轉(zhuǎn)速75r/min；分別于1、2、4、6、8、10、12h取液3ml，同時(shí)補(bǔ)加相同條件下的人工胃液，0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液稀釋后取20μIHPLC測定。分別計(jì)算每片在不同時(shí)間的釋放量，計(jì)算累積釋放百分率，并繪制釋放度曲線(見圖1巖白菜素釋放曲線圖)。二、鹽酸西替利嗪溶出度測定1.檢測波長的確定精密稱取適量鹽酸西替利嗪于25ml容量瓶中，人工胃液溶解定容，取此液Iml稀釋10倍，于200800nm處紫外掃描得到最大吸收波長為230nm。2.色譜條件色譜柱DiamonsilC18(250X4.6mm，5μm)；以甲醇-水(6535，磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.7)為流動(dòng)相；檢測波長為230nm；流速1.Oml/min；柱溫室溫；進(jìn)樣量20μ1。3.溶出度測定方法采用中國藥典2005年版二部附錄XD釋放度測定法第二法槳法，以0.lmol/L鹽酸溶液900ml為釋放介質(zhì)，溫度37士0.5°C，轉(zhuǎn)速75r/min；于45min取液3ml，同時(shí)補(bǔ)加相同條件下的人工胃液，0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液20μIHPLC測定；分別計(jì)算每片在45min的溶出量。本品每片45min的溶出度應(yīng)為標(biāo)示量的75%以上，均應(yīng)符合規(guī)定。表7.速釋包衣鹽酸西替利嗪溶出度時(shí)間溶出量(％)平均RSD(%)(min)123456值(％)_45100.8693.7996.3398.5496.39100.5897.752.57三、體外漂浮性評(píng)價(jià)取6片漂浮緩釋片以釋放度測定試驗(yàn)的條件，采用直接觀察法評(píng)價(jià)每個(gè)片劑的漂浮行為。自漂浮片置入人工胃液起觀察起漂時(shí)間及持漂時(shí)間。起漂是指片劑置入人工胃液起至漂浮于液面上的時(shí)間，持漂是指片劑漂浮于人工胃液之上的維持時(shí)間；視5min內(nèi)起漂，且持漂8h以上為漂浮行為良好。表8.實(shí)施例1中6片包衣片的漂浮時(shí)間_J_23_456起漂時(shí)間(min)<1<1<1<1<1<1持漂時(shí)間(h)>8>8>8>8>8>8本發(fā)明的巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方口服胃滯留漂浮型緩釋片經(jīng)以上體外釋放度、溶出度試驗(yàn)和體外漂浮性表明，該制劑完全能夠達(dá)到速釋部分藥物迅速釋放；緩釋部分遇胃液后迅速起漂，并滯留胃中緩慢釋放藥物。實(shí)施例2:緩釋片芯巖白菜素375g羥丙基甲基纖維素K4M40g羥丙基甲基纖維素E5020g乳糖75g碳酸氫鈉90gPVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂3g_制成1000片速釋包衣鹽酸西替利嗪IOg歐巴代9g_制成1000片分別將乳糖、HPMC、巖白菜素過80或100目篩，按等量遞加法將上述原輔料混合均勻，以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥23h，整粒后備用。將碳酸氫鈉以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，4050°C干燥1.52h，整粒后備用。將兩種顆粒按等量遞加法混勻后加入硬脂酸鎂混合后壓片，控制硬度46kg。將鹽酸西替利嗪和歐巴代分別溶于醇水溶液中制得包衣液，對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含IOmg鹽酸西替利嗪，包衣增重33.25%，即得。實(shí)施例3:緩釋片芯巖白菜素125g羥丙基甲基纖維素K4M20g甘露醇30g碳酸鈉25gPVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂Ig_制成1000片速釋包衣鹽酸兩替利嗪2g易釋麗4g_制成1000片分別將甘露醇、HPMCK4M、巖白菜素過80或100目篩，按等量遞加法將上述原輔料混合均勻，以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥12h，整粒后備用。將碳酸鈉以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，4050°C干燥1.52h，整粒后備用。將兩種顆粒按等顯遞加法混勻后加入硬脂酸鎂混合后壓片，控制壓片硬度46kg。將鹽酸西替利嗪和易釋麗分別溶于醇水溶液中制得包衣液，對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含2mg鹽酸西替利嗪，包衣增重33.25%，即得。實(shí)施例4:緩釋片芯巖白菜素200g羥丙基甲基纖維素K15M15g乙基纖維素15g乳糖35g碳酸氫鈉35gPVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂Ig_制成1000片速釋包衣鹽酸西替利嗪5g易釋麗4g制成1000片分別將HPMCK15M、乙基纖維素、乳糖、巖白菜素過80或100目篩，按等量遞加法將上述原輔料混合均勻，以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥12h，整粒后備用。將碳酸氫鈉以510%PVPk30醇溶液為粘合劑制軟材，4050°C干燥1.52h，整粒后備用。將兩種顆粒按等量遞加法混勻后加入硬脂酸鎂混合后壓片，控制壓片硬度46kg。將鹽酸西替利嗪和易釋麗分別溶于醇水溶液中制得包衣液，對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含5mg鹽酸西替利嗪，包衣增重33.25%，即得。實(shí)施例5:緩釋片芯巖白菜素250g羥丙甲基纖維素K15M25g羥丙甲基纖維素E505g甲基纖維素30g乳糖65g碳酸氫鈉50gPVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂Ig_制成1000片速釋包衣鹽酸西替利嗪5g歐巴代8g_制成1000片分別將甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、乳糖、巖白菜素過80或100目篩，按等量遞加法將上述原輔料混合均勻，以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥12h，整粒后備用。將碳酸氫鈉以510%PVPk30乙醇溶液為粘合劑制軟材，4050°C干燥1.52h，整粒后備用。將兩種顆粒按等量遞加法混勻后加入硬脂酸鎂混合后壓片，控制壓片硬度46kg。將鹽酸西替利嗪和歐巴代分別溶于醇水溶液中制得包衣液，對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含5mg鹽酸西替利嗪，控制包衣增重33.25%，即得。對(duì)比例1緩釋片芯巖白菜素187.5g羥丙甲基纖維素K100M27g乳糖39g碳酸氫鈉45gPVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂1.5g_制成1000片速釋包衣鹽酸西替利嗪5g易釋麗4g_制成1000片對(duì)比例2:緩釋片芯巖白菜素187.5g羥丙甲基纖維素K4M27g乳糖39g碳酸氫鈉45gPVPk30乙醇溶液適量硬脂酸鎂1.5g_制成1000片速釋包衣鹽酸西替利嗪5gEudragitElOO4g_制成1000片實(shí)施例15和對(duì)比例12的巖白菜素體外釋放度測定、鹽酸西替利嗪溶出度測定和胃滯留漂浮緩釋片體外漂浮性評(píng)價(jià)的比較。1、巖白菜素體外釋放度測定。由圖2可知，對(duì)比例1緩釋片芯中巖白菜素12小時(shí)釋放不完全；實(shí)施例1巖白菜素釋放完全且達(dá)到符合中國藥典2005年版二部附錄XIXD緩釋、控釋和遲釋制劑指導(dǎo)原則對(duì)釋放度的要求。2、鹽酸西替利嗪溶出度測定時(shí)間_溶出量(％)_<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實(shí)施例15和對(duì)比例12的鹽酸兩替利嗪溶出度測定結(jié)果表明，以EudragitElOO為包衣材料時(shí)，鹽酸西替利嗪在45min溶出不完全，不適合本發(fā)明(對(duì)比例2)。3、體外漂浮性評(píng)價(jià)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實(shí)施例15和對(duì)比例12的胃滯留漂浮緩釋片體外漂浮性測定結(jié)果表明，包衣材料EudrgitElOO顯著延長片的起漂時(shí)間且減少持漂時(shí)間，不適用于本發(fā)明(對(duì)比例2)。因此，以上結(jié)果進(jìn)一步說明，本發(fā)明的活性成分及各種具體賦形劑的選擇并非任意的，是本發(fā)明人創(chuàng)造性勞動(dòng)的結(jié)果。權(quán)利要求一種含巖白菜素\鹽酸西替利嗪的復(fù)方口服劑型，其特征在于含125～375重量份的巖白菜素和2～10重量份的鹽酸西替利嗪。2.權(quán)利要求1所述的復(fù)方口服劑型，其特征在于該劑型為巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方的胃滯留漂浮型緩釋片。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的胃滯留漂浮型緩釋片，其特征在于所述緩釋片包含緩釋片芯層和速釋包衣層兩部分。4.根據(jù)權(quán)利要求2-3任一項(xiàng)所述的胃滯留漂浮型緩釋片，其特征在于緩釋片芯層主要包含巖白菜素、親水凝膠骨架材料、釋放調(diào)節(jié)劑和發(fā)泡劑；其重量份數(shù)分別為巖白菜素125375份、親水凝膠骨架材料2060份、釋放調(diào)節(jié)劑3075份和發(fā)泡劑2590份。5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的胃滯留漂浮型緩釋片，其特征在于所述親水凝膠骨架材料選自羥丙基甲基纖維素HPMC、甲基纖維素MC、乙基纖維素EC、羥丙基纖維素HPCJi乙基纖維素HEC和羧甲基纖維素鈉SCMC中的一種或多種；所述釋放調(diào)節(jié)劑選自乳糖、甘露醇和聚丙烯酸樹脂II或III的一種或多種；所述發(fā)泡劑選自碳酸氫鈉、碳酸鈣、碳酸鈉和碳酸鎂中的一種或多種。6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一項(xiàng)所述的胃滯留漂浮型緩釋片，其特征在于所述速釋包衣層主要包含210重量份的鹽酸西替利嗪和110重量份的胃溶性包衣材料。7.根據(jù)權(quán)利要求2-6任一項(xiàng)所述的胃滯留漂浮型緩釋片，其特征在于所述胃溶性包衣材料選自纖維素類胃溶性包衣材料。8.根據(jù)權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)所述的胃滯留漂浮型緩釋片，其特征在于所述胃溶性包衣材料優(yōu)選自羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉的一種或多種。9.一種制備權(quán)利要求2-8任一項(xiàng)所述的胃滯留漂浮型緩釋片的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將原輔料過80100目篩，按所需份數(shù)稱取巖白菜素、親水凝膠骨架材料、釋放調(diào)節(jié)劑以等量遞加法混勻，備用；(2)將上述粉末加入510%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液適量制備軟材，過2024目篩制粒，4560°C干燥，整粒后備用；(3)按所需份數(shù)稱取發(fā)泡劑以510%聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液適量制軟材，過2024目篩制粒，4050°C干燥，整粒后備用；(4)將上述兩種顆粒按等量遞加法混勻后加入硬脂酸鎂，混勻，壓片，控制壓片硬度46kg，即得緩釋片芯；(5)將鹽酸西替利嗪和胃溶性包衣材料溶于醇水溶液中制得包衣液，對(duì)緩釋片芯進(jìn)行包衣，至每片包衣層中包含所需份數(shù)鹽酸西替利嗪，控制包衣增重33.25%，即得成品。10.權(quán)利要求28所述的胃滯留漂浮型緩釋片在制備治療慢性支氣管炎、支氣管哮喘的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種包含巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方的口服劑型，尤其是一種胃滯留漂浮型緩釋片，主要是由包含鹽酸西替利嗪的速釋包衣層和包含巖白菜素的緩釋片芯層組成。進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)了鹽酸西替利嗪快速釋放和巖白菜素在胃中滯留并緩慢釋放，提高了巖白菜素\鹽酸西替利嗪復(fù)方口服劑型的療效。藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明該藥物組合有顯著的鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用，且副作用小，可用于慢性支氣管炎、支氣管哮喘的治療。文檔編號(hào)A61K9/36GK101797253SQ20101012701公開日2010年8月11日申請(qǐng)日期2010年3月18日優(yōu)先權(quán)日2010年3月18日發(fā)明者張志榮,李鳳,黃園申請(qǐng)人:四川大學(xué)