專利名稱：聚合物、抗血管生成劑和靶向部分的綴合物及其在治療骨相關(guān)血管生成狀況中的用途的制作方法
聚合物、抗血管生成劑和靶向部分的綴合物及其在治療骨 相關(guān)血管生成狀況中的用途政府利益的聲明
本發(fā)明是在由國(guó)立衛(wèi)生研究院授予的GM069847下，由政府支持做出的。政府享有本發(fā) 明的一些權(quán)利。發(fā)明領(lǐng)域和背景
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及化學(xué)綴合物及其在治療和診斷中的用途，更特別地，但 非排他性地，涉及聚合物、抗血管生成劑和靶向部分的化學(xué)綴合物，其用于例如治療和監(jiān)測(cè) 骨相關(guān)疾病和病癥比如骨癌和骨轉(zhuǎn)移。骨肉瘤是原發(fā)性骨癌的最常見類型，歸類為其中腫瘤直接產(chǎn)生缺損的類骨質(zhì)(未 成熟骨)的惡性間質(zhì)腫瘤。其是一種最通常在長(zhǎng)骨的干骺端出現(xiàn)的血管多且非常有害的惡 性腫瘤。在過去的二十年中，由侵襲性化療與根治性外科切除術(shù)組成的綜合治療已經(jīng)成為 骨肉瘤控制的主要方式，目前沒有出現(xiàn)轉(zhuǎn)移性疾病的患者中50%至70%獲得了 5年存活率。 提出了一些策略，比如基于免疫的治療、腫瘤抑制劑或自殺基因治療或通常不用于骨肉瘤 的抗癌藥[Quan 等人，Cancer Metastasis Rev 2006; 10: 707-713]。然而，仍然有三分之 一的患者死于這一毀滅性的癌癥，對(duì)于患有不能切除的疾病的患者，沒有治愈性全身治療。前列腺癌是工業(yè)化國(guó)家中最常見的男性癌癥，并且是男性癌癥死亡的第二個(gè)主要 原因。這些患者的死亡不是由于原發(fā)腫瘤生長(zhǎng)，而是由于向生命器官的轉(zhuǎn)移引起的并發(fā)癥。 前列腺癌主要轉(zhuǎn)移到骨骼，但是其它器官部位也受到影響，包括肺、肝和腎上腺。乳腺癌通常也轉(zhuǎn)移到骨骼。在患有晚期轉(zhuǎn)移性疾病的患者中，骨轉(zhuǎn)移的發(fā)病率為約70 %。骨轉(zhuǎn)移與相當(dāng)大量 的骨胳病癥(skeletal morbidity)相關(guān)，包括嚴(yán)重的骨痛、病理性骨折、脊髓或神經(jīng)根壓迫 和惡性腫瘤的高血鈣癥?；焺?、激素剝奪(hormonal deprivation)和二膦酸鹽是晚期轉(zhuǎn) 移性疾病的常見治療方式。然而，隨時(shí)間逝去，疾病發(fā)展至標(biāo)準(zhǔn)治療不能控制該惡性腫瘤的 階段和進(jìn)一步發(fā)展至高度化療耐受性狀態(tài)的階段。腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移高度取決于新血管供應(yīng)的氧和營(yíng)養(yǎng)物，所述新血管的形成受到 腫瘤本身及其環(huán)境的刺激。抗血管生成治療劑與常規(guī)治療的組合對(duì)于骨肉瘤控制和降 低轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)具有極大的可能性。血管生成抑制劑，比如TNP-470[Folkman，J. Apmis 2004; 112: 496-507]，其無毒的N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)共聚物-綴 合形式，caplostatin[Satchi-Fainaro 等人，Cancer Cell 2005; 7: 251-261],和 Avastin [Hurwitz 等人，N Engl J Med 2004; 350: 2335-2342]作為新形態(tài)的抗癌藥出 現(xiàn)。目前存在八種批準(zhǔn)的具有公認(rèn)抗血管生成性質(zhì)的抗癌治療劑。這些試劑中斷參 與腫瘤血管生成和生長(zhǎng)的關(guān)鍵性細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑，其可以分成兩個(gè)主要的種類(1)單 克隆抗體，針對(duì)特定的促血管生成因子和/或其受體；(Avastin，Erbitux, Vectibix, Herceptin)和(2)多種促血管生成生長(zhǎng)因子受體的小分子酪氨酸激酶抑制劑(TKIs) (Tarveca, Nexavar, Sutent)。mT0R(雷帕霉素的哺乳動(dòng)物靶點(diǎn))的抑制劑代表第三個(gè)較小
7種類的抗血管生成治療劑，具有只有一個(gè)批準(zhǔn)的試劑(Torisel)。另外，至少兩種其它批準(zhǔn) 的抗血管生成劑可以經(jīng)由還未完全理解的機(jī)制間接地抑制血管生成(Velcade，Celgene) 0第一種FDA批準(zhǔn)的血管生成抑制劑貝伐單抗(Avastin，Genentech)，一種血管內(nèi) 皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的單克隆抗體，最近被批準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)化療聯(lián)合用于轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌治療。阻斷血管生成的最大類型的藥物是靶向VEGF受體(VEGFR)的多靶點(diǎn)酪氨酸激 酶抑制劑(TKIs)。這些藥物比如 sunitinib (Sutent, Pfizer)、Sorafenib (Nexavar, Bayer/Onyx Pharmaceuticals)禾口 Erlotinib (Tarveca, Gennentech/OSI/Roche)具有攻 擊多個(gè)靶點(diǎn)、方便口服給藥和經(jīng)濟(jì)有效的優(yōu)點(diǎn)。雖然這些藥物顯示出有希望的功效，它們的 使用受到缺少靶特異性的限制，其導(dǎo)致預(yù)想不到的毒性[Cabebe等人，Curr Treat Options Oncol 2007; 8:15—27]。因此，尋求與或不與其它抗腫瘤劑使用的新靶向血管生成抑制劑。這一努力的主 要障礙是不能確定治療效果、缺乏腫瘤血管生成的可靠代用品標(biāo)記物和參與腫瘤血管生成 的多個(gè)宿主細(xì)胞和惡性細(xì)胞之間相互作用的復(fù)雜性，其可能限制單個(gè)抗血管生成劑的使 用。另一個(gè)顯著的障礙是大多數(shù)臨床使用的抗癌和抗血管生成藥物是小分子，其顯示出在 血流中半衰期短和總清除率高。這些低分子量藥物快速擴(kuò)散到健康組織中，并均勻地分布 在體內(nèi)。因此，相對(duì)少量的藥物到達(dá)靶部位，治療的功效低且副作用嚴(yán)重。TNP-470是一種煙曲霉素的低分子量合成類似物，其在體外能夠選擇性地抑制內(nèi) 皮生長(zhǎng)。在臨床試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)在患有轉(zhuǎn)移性癌癥的許多患者中，當(dāng)與常規(guī)化療組合使用時(shí)， 該藥物減緩腫瘤生長(zhǎng)，顯示出有希望的功效。然而，在腫瘤消退所需的劑量下，許多患者經(jīng) 歷神經(jīng)毒性。由于其劑量限制性神經(jīng)毒性，對(duì)于使用TNP-470本身，沒有進(jìn)行進(jìn)一步的臨床 研究。已經(jīng)推斷出應(yīng)當(dāng)利用TNP-470與靶向腫瘤組織的試劑的臨床應(yīng)用，以便增加其部位 特異性和減少副作用。水溶性聚合物比如N-(2_羥丙基)甲基丙烯酰胺共聚物(HPMA)是生物相容的、 非免疫原性的且無毒的載體，其能夠特定地遞送到腫瘤組織中[Satchi-Fainaro等人，Nat Med 2004; 10: 255-261]。這些大分子不會(huì)擴(kuò)散通過正常血管，而是因?yàn)樘岣邼B透和滯留 (EPR)效應(yīng)，其選擇性地聚集在腫瘤部位。在許多實(shí)體瘤中，對(duì)于大分子試劑和脂質(zhì)，觀察 到經(jīng)由高滲透性(hyperpermeable)新血管系統(tǒng)的被動(dòng)擴(kuò)散和定位在腫瘤間質(zhì)的這一現(xiàn)象。 抗癌藥物比如TNP-470與共聚物比如HPMA的綴合將能夠?qū)⑦@些藥物選擇性地靶向至腫瘤 組織，因此減少了副作用。而且，與游離藥物相比，通過將細(xì)胞暴露于循環(huán)中的綴合藥物較 長(zhǎng)的時(shí)間，這樣的共聚物_藥物綴合物將限制穿過血腦屏障，延長(zhǎng)藥物的循環(huán)半衰期，因而 抑制腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)。Satchi-Fainaro等人在WO 03/086382中已經(jīng)描述了通過將抗血管生成試劑比 如TNP-470綴合至HPMA獲得的有利特征的一個(gè)實(shí)例。該專利申請(qǐng)教導(dǎo)了水溶性聚合物和 TNP-470的綴合物及其作為抗腫瘤劑的用途，特別是其作為TNP-470進(jìn)入腫瘤血管的載體 的用途，及其對(duì)于TNP-470神經(jīng)毒性的作用。根據(jù)WO 03/086382的教導(dǎo)，與單獨(dú)的TNP-470 相比，一個(gè)示例性的這種綴合物HPMA-(TNP-470)綴合物(caplostatin)顯示出較好的抗癌 活性和降低水平的毒性。WO 03/086382進(jìn)一步提出結(jié)合靶向配體比如R⑶或抗體。HPMA-TNP-470綴合物用于治療血管生成相關(guān)狀況的用途還描述在WO 03/086178中。通過將抗腫瘤藥物綴合至水溶性聚合物獲得活性增加而毒性減少的另一個(gè)實(shí)例 列出在美國(guó)專利No. 6，884，817中。Meerum Terwogt等人已經(jīng)描述了一種紫杉醇的HPMA共聚物綴合物[Anticancer drugs 2001; 12 315-323]。該綴合物旨在改善藥物溶解性和提供紫杉醇的控制釋放。在該 綴合物中，紫杉醇經(jīng)由酯鍵連接HPMA共聚物，因此，通過酯鍵的非組織特異性水解或酶(酯 酶)降解從聚合物中釋放，從而誘導(dǎo)通常觀察到的紫杉醇毒性。二膦酸鹽(BPs)比如阿侖膦酸鹽是具有類似于無機(jī)焦磷酸(PPi)的化學(xué)結(jié)構(gòu)的化 合物，無機(jī)焦磷酸是一種內(nèi)源性的骨礦化調(diào)節(jié)劑。一些二膦酸鹽被證實(shí)作為臨床病癥比如 骨質(zhì)疏松癥、骨的佩吉特病、骨髓瘤、和骨轉(zhuǎn)移的有效治療劑。二膦酸鹽比如唑來膦酸顯示 出抑制血管生成[Wood 等人，J Pharmacol Exp Ther 2002; 302: 1055-1061]。在生理?xiàng)l 件下顯示出對(duì)骨礦物的強(qiáng)親和力、低毒性和抗血管生成活性的二膦酸鹽的藥代動(dòng)力學(xué)特征 對(duì)于靶向至限制于骨組織的腫瘤是有利的。阿侖膦酸鹽被認(rèn)為對(duì)于治療骨相關(guān)疾病和癌癥伴隨的高血鈣癥有效。在幾種體 內(nèi)癌癥模型中，其顯示出具有通過幾個(gè)不同機(jī)制的抗癌作用[Tuomela等人，2008，BMC Cancer 8:81; Molinuevo 等人，2007， Eur J Pharmacol 562:28—33; Hashimoto 等人， 2005，Cancer Res 65: 540-545]。另外，發(fā)現(xiàn)阿侖膦酸鹽具有抗血管生成活性，其通過 如下方式⑴在卵巢癌癥模型中，抑制VEGF誘導(dǎo)的Rho活化[Hashimoto等人，2007， Biochem Biphys Res Commun 354: 478-484]，(ii)在甲羥戊酸途徑中，抑制焦磷酸法 呢酯合酶[Russell RG 2007, Pediatrics 119 Suppl 2: S150-162]；和(iii)在骨 肉瘤細(xì)胞系中，調(diào)節(jié)MMP-2表達(dá)的細(xì)胞水平[Cheng等人，2004，Pediatr Blood Cancer 42;410-415]。其它的骨靶向試劑是天門冬氨酸的寡聚肽。Wang等人描述了熒光素標(biāo)記的骨靶向 模型綴合物，用于在HPMA共聚物上載有1 %負(fù)載量的D-Asp8的檢測(cè)目的[Wang等人，2003 Bioconjug Chem 14:853-859]。在體外和體內(nèi)測(cè)試了該綴合物的骨靶向潛能，發(fā)現(xiàn)其在骨 組織中選擇性地聚集[Wang等人，2006，Mol Pharm 3:717-725]。WO 2004/062588教導(dǎo)了用于骨靶向藥物遞送的水溶性聚合綴合物，其具有改善的 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和較好的負(fù)載藥物的水溶解性。該申請(qǐng)教導(dǎo)的聚合藥物遞送系統(tǒng)是基于骨 靶向藥物比如阿侖膦酸鹽和D-Asp8與骨相關(guān)治療劑組合的羥丙基甲基丙烯酰胺(HPMA)綴 合物。阿侖膦酸鹽和D-Asp8在HPMA共聚物上的負(fù)載量分別是0.494 mmol/gram和0. 762 mmol/gram。PK2 (FCE28069)是一種HPMA共聚物-多柔比星-半乳糖胺綴合物，其設(shè)計(jì)作為 肝細(xì)胞癌或繼發(fā)性肝病的治療劑。[Seymour等人，Journal of Clinical Oncology 2002; 20:1668-1676]。多柔比星是一種在生理溶液中具有有限溶解度的蒽環(huán)類抗生素，并且是一 種熟知的抗腫瘤藥物。半乳糖胺結(jié)合肝臟的無唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)，因此充當(dāng)特定的 肝靶向部分。這些組分經(jīng)由酶可生物降解的連接基連接HPMA聚合物，其允許在肝臟內(nèi)釋放 游離的多柔比星，因而升高了其作用部位的藥物濃度。所述酶可降解的連接基是四肽間隔 基(Gly-Phe-Leu-Gly)，設(shè)計(jì)由溶酶體組織蛋白酶切割。0，hare 等人，[Journal of Drug Targeting 1993; 1:217-229]合成了包含多柔比星和作為黑素瘤特異性靶向部分的促黑素細(xì)胞激素(MSH)的HPMA共聚物。多柔比星和 促黑素細(xì)胞激素都經(jīng)由酶可生物降解的連接基連接HPMA聚合物。Hruby 等人，[Journal of Applied Polymer Science 2006; 101: 3192 - 3201] 基于生物相容性HPMA共聚物制備合成了新的聚合藥物遞送系統(tǒng)，該系統(tǒng)設(shè)計(jì)用于骨靶向 和抗腫瘤，所述相容性HPMA共聚物包含羥基二膦酸鹽靶向部分和模型藥物放療劑1251、顯 影劑mIn或抗癌藥物多柔比星。在HPMA共聚物上負(fù)載的羥基二膦酸鹽的百分?jǐn)?shù)在1. 3-4 mol %范圍之內(nèi)。發(fā)明簡(jiǎn)述
在獲得抗腫瘤活性的劑量下，用于治療骨相關(guān)癌癥及其它血管生成相關(guān)狀況的目前已 知試劑的特征在于毒性高，其限制了它們的應(yīng)用。在改良目前已知的抗血管生成劑的模式， 以便能夠獲得更高治療效果和降低的副作用水平的探索中，本發(fā)明人設(shè)計(jì)并成功地制備和 實(shí)踐了 N-(2-羥丙基)_甲基丙烯酰胺(HPMA)共聚物、TNP-470和骨靶向試劑阿侖膦酸鹽 (ALN)的新的聚合綴合物，其中所述TNP-470和阿侖膦酸鹽分子經(jīng)由可生物降解的連接基 綴合至HPMA聚合主鏈的主鏈單元，在該HPMA聚合主鏈上負(fù)載的阿侖膦酸鹽的百分?jǐn)?shù)高于 目前已知的阿侖膦酸鹽聚合物綴合物(例如，大于聚合綴合物的3 mol %)。本發(fā)明人進(jìn)一步設(shè)計(jì)并成功地實(shí)踐了制備本文描述的綴合物的新方法，同時(shí)獲得 了阿侖膦酸鹽在聚合物中的高負(fù)載量以及該聚合物的均勻尺寸分布，即低多分散性。該方 法可以在30°C下，以控制的方式有利地進(jìn)行。本發(fā)明人設(shè)計(jì)并成功地制備和實(shí)踐了聚合物(例如N-(2_羥丙基)甲基丙烯酰胺 (HPMA)共聚物)、抗血管生成劑(例如TNP-470)和骨靶向試劑D-Asp8的新綴合物。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案的一個(gè)方面，提供一種包括具有連接在其上的 TNP-470和阿侖膦酸鹽的N- (2-羥丙基)甲基丙烯酰胺)-衍生聚合主鏈的綴合物，其中阿 侖膦酸鹽在該聚合物中的負(fù)載量大于3 mol %。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，阿侖膦酸鹽在所述聚合物中的負(fù)載量為大于5 mol%。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，阿侖膦酸鹽在所述聚合物中的負(fù)載量為約7 mol %。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，TNP-470和阿侖膦酸鹽中至少一種經(jīng)由連接基連接 至所述聚合物。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，TNP-470和阿侖膦酸鹽中每種都經(jīng)由連接基連接至 所述聚合物。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述連接基是可生物降解的連接基。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述可生物降解的連接基選自PH-敏感性連接基和 酶可切割的連接基。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述可生物降解的連接基是酶可切割的連接基。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述酶可切割的連接基為由在腫瘤組織中表達(dá)的酶 切割的。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述酶可切割的連接基為由在腫瘤組織中過表達(dá)的 的酶切割的。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述酶選自組織蛋白酶B、組織蛋白酶K、組織蛋白酶D、組織蛋白酶H、組織蛋白酶L、legumain, MMP-2和MMP-9。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述酶是組織蛋白酶K。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述連接基包括含有2至10個(gè)氨基酸殘基的寡聚肽基團(tuán)。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述寡聚肽是-[Gly-Gly-Pro-Nle]-。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，TNP-470經(jīng)由間隔基連接所述聚合物或所述連接基。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述間隔基具有式G-(CH2)n-K,其中η為1至4的整 數(shù)，G和K各自獨(dú)立地選自ΝΗ、0和S。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，G和K各自為ΝΗ，η為2。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，阿侖膦酸鹽經(jīng)由包括_ [Gly-Gly-Pro-Nle]-的連 接基連接至所述聚合物。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述綴合物具有如本文描述的通式II。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述綴合物具有結(jié)構(gòu)
根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，χ為等于70-99. 9的整數(shù)，y和w各自獨(dú)立地為等于 0.01-15的整數(shù)。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述綴合物進(jìn)一步包括標(biāo)記試劑。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述標(biāo)記試劑選自熒光劑、放射性試劑、磁性試劑、 生色團(tuán)、生物發(fā)光劑、化學(xué)發(fā)光劑、發(fā)磷光的試劑和重金屬簇。根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，所述標(biāo)記試劑是異硫氰酸熒光素。這樣的綴合物具有例如下述結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.聚合綴合物，包括具有連接在其上的TNP-470和阿侖膦酸鹽的(N-(2-羥丙基)甲基 丙烯酰胺)聚合主鏈，其中所述阿侖膦酸鹽在聚合綴合物中的負(fù)載量大于3 mol %。
2.權(quán)利要求1的聚合綴合物，其中所述聚合主鏈包括多個(gè)甲基丙烯酰胺主鏈單元，而 所述TNP-470連接至所述主鏈單元的一部分，所述阿侖膦酸鹽連接至所述主鏈單元的另一 部分。
3.權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述阿侖膦酸鹽的所述負(fù)載量大于5mol%。
4.權(quán)利要求3的綴合物，其中所述阿侖膦酸鹽的所述負(fù)載量為約7mol %。
5.權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述TNP-470和所述阿侖膦酸鹽中至少一 個(gè)經(jīng)由連接基連接至所述聚合主鏈。
6.權(quán)利要求5的綴合物，其中所述連接基為可生物降解的連接基。
7.權(quán)利要求6的綴合物，其中所述可生物降解的連接基為酶可切割的連接基。
8.權(quán)利要求7的綴合物，其中所述酶可切割的連接基被組織蛋白酶K切割。
9.權(quán)利要求8的綴合物，其中所述連接基包括-[Gly-Gly-Pro-Nle]-寡聚肽。
10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述TNP-470經(jīng)由間隔基連接所述聚合主鏈 或所述連接基。
11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的綴合物，其具有通式II B為所述TNP-470 ； D為所述阿侖膦酸鹽；所述L1和L2的每個(gè)都獨(dú)立地為所述連接基；
12.權(quán)利要求11的綴合物，其具有結(jié)構(gòu)
13.權(quán)利要求11和12中任一項(xiàng)的綴合物，其中χ為具有使得x/(x+y+w)乘以100在70至99. 9范圍內(nèi)的值的整數(shù)； y為具有使得y/(x+y+ )乘以100在0. 01至15范圍內(nèi)的值的整數(shù)；和 w為具有使得w/(X+y+w)乘以100在5至20范圍內(nèi)的值的整數(shù)。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的綴合物，其進(jìn)一步包括連接在其上的標(biāo)記試劑。
15.權(quán)利要求14的綴合物，其中所述標(biāo)記試劑為異硫氰酸熒光素。
16.權(quán)利要求15的綴合物，其具有結(jié)構(gòu)
17.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的綴合物，其具有的多分散指數(shù)為1至1.4。
18.權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)的綴合物，其具有的平均尺寸分布低于150nm。
19.藥物組合物，其包括作為活性成分的權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的綴合物和可藥用載體。
20.權(quán)利要求19的藥物組合物，其包裝在包裝材料中，并且在所述包裝材料中或其上 的印刷中被鑒定用于治療骨相關(guān)疾病或病癥。
21.權(quán)利要求19的藥物組合物，其中所述綴合物包括標(biāo)記試劑，所述組合物包裝在包 裝材料中，并且在所述包裝材料中或其上的印刷中被鑒定用于監(jiān)測(cè)骨相關(guān)疾病或病癥。
22.—種治療需要其的受試者中的骨相關(guān)疾病或病癥的方法，所述方法包括向受試者 給藥治療有效量的權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的綴合物。
23.—種監(jiān)測(cè)受試者中骨相關(guān)疾病或病癥的方法，所述方法包括 向受試者給藥權(quán)利要求14-18中任一項(xiàng)的綴合物；和使用成像技術(shù)監(jiān)測(cè)綴合物在身體或其部分內(nèi)的分布。
24.權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的綴合物作為藥物的用途。
25.權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的綴合物在制備用于治療骨相關(guān)疾病或病癥的藥物中的 用途。
26.權(quán)利要求14-18中任一項(xiàng)的綴合物作為診斷試劑的用途。
27.權(quán)利要求14-18中任一項(xiàng)的綴合物在制備用于監(jiān)測(cè)骨相關(guān)疾病或病癥的診斷試劑 中的用途。
28.權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的化合物，被鑒定用于治療骨相關(guān)疾病或病癥。
29.權(quán)利要求14-18中任一項(xiàng)的化合物，被鑒定用于監(jiān)測(cè)骨相關(guān)疾病或病癥。
30.權(quán)利要求20、22、23、25和27-29中任一項(xiàng)的化合物、方法、用途或組合物，其中所述 疾病或病癥與血管生成相關(guān)。
31.權(quán)利要求30的化合物、方法、用途或組合物，其中所述疾病或病癥選自骨轉(zhuǎn)移和骨癌。
32.—種合成權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的綴合物的方法，所述方法包括(a)將阿侖膦酸鹽偶合至N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺單體單元，從而得到包含阿侖 膦酸鹽的甲基丙烯酰胺單體單元；(b)共聚N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺單體單元，和/或((N-(2-羥丙基)甲基丙烯 酰胺)寡聚或聚合單元與所述包含阿侖膦酸鹽的甲基丙烯酰胺單體單元和端接第一反應(yīng) 基團(tuán)的甲基丙烯酰胺單體單元，從而得到包括多個(gè)甲基丙烯酰胺主鏈單元的聚合主鏈，其 中所述主鏈單元的一部分具有連接在其上的阿侖膦酸鹽，所述主鏈單元的另一部分具有所 述反應(yīng)基團(tuán)，所述第一反應(yīng)基團(tuán)能夠偶合TNP-470 ；和(c)經(jīng)由所述第一反應(yīng)基團(tuán)偶合所述TNP-470和所述聚合主鏈，從而得到聚合綴合物。
33.權(quán)利要求32的方法，其中所述共聚是經(jīng)由可逆的加成-裂解鏈轉(zhuǎn)移(RAFT)技術(shù)進(jìn) 行的。
34.聚合綴合物，其包括具有連接在其上的抗血管生成劑和骨靶向部分的聚合主鏈，所 述骨靶向部分為包括2至100個(gè)天門冬氨酸殘基的寡聚肽。
35.權(quán)利要求34的聚合綴合物，其中所述聚合主鏈包含多個(gè)主鏈單元，其中所述多個(gè) 主鏈單元的一部分具有連接在其上的所述抗血管生成劑，所述多個(gè)主鏈單元的另一部分具有連接在其上的所述天門冬氨酸寡聚肽。
36.權(quán)利要求34和35中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述寡聚肽包括2到20個(gè)天門冬氨酸殘基。
37.權(quán)利要求36的綴合物，其中所述寡聚肽包括8個(gè)天門冬氨酸殘基。
38.權(quán)利要求34-37中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述天門冬氨酸為D-天門冬氨酸。
39.權(quán)利要求34-38中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述抗血管生成劑和所述寡聚肽的至少 一個(gè)經(jīng)由連接基連接至所述聚合主鏈。
40.權(quán)利要求34-39中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述聚合主鏈來源于選自下述的聚合物 葡聚糖、水溶性聚氨基酸、聚乙二醇(PEG)、聚谷氨酸(PGA)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-共-乙 醇酸(PLGA)、聚(D，L-丙交酯-共-乙交酯)(PLA/PLGA)、聚(羥基烷基甲基丙烯酰胺)、 聚甘油、聚酰胺胺(PAMAM)和聚乙烯亞胺(PEI)。
41.權(quán)利要求34-39中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述聚合主鏈來源于(N-(2-羥丙基)甲 基丙烯酰胺)。
42.權(quán)利要求34-41中任一項(xiàng)的綴合物，其中所述抗血管生成劑為TNP-470。
43.權(quán)利要求34-42中任一項(xiàng)的綴合物，其進(jìn)一步包括連接在其上的標(biāo)記試劑。
44.權(quán)利要求43的綴合物，其中所述標(biāo)記試劑為異硫氰酸熒光素。
45.權(quán)利要求44的綴合物，其具有結(jié)構(gòu)
46.藥物組合物，其包含作為活性成分的權(quán)利要求34-45中任一項(xiàng)的綴合物和可藥用 載體。
47.權(quán)利要求46的藥物組合物，其包裝在包裝材料中，并且在所述包裝材料中或其上 的印刷中被鑒定用于治療骨相關(guān)疾病或病癥。
48.權(quán)利要求46的藥物組合物，其中所述綴合物包含標(biāo)記試劑，所述組合物包裝在包 裝材料中，并且在所述包裝材料中或其上的印刷中被鑒定用于監(jiān)測(cè)骨相關(guān)疾病或病癥。
49.一種治療需要其的受試者中的骨相關(guān)疾病或病癥的方法，所述方法包括向受試者 給藥治療有效量的權(quán)利要求34-45中任一項(xiàng)的綴合物。
50.一種監(jiān)測(cè)受試者中骨相關(guān)疾病或病癥的方法，所述方法包括向受試者給藥權(quán)利要求43-45中任一項(xiàng)的綴合物；和使用成像技術(shù)監(jiān)測(cè)綴合物在身體或其部分內(nèi)的分布。
51.權(quán)利要求34-45中任一項(xiàng)的綴合物作為藥物的用途。
52.權(quán)利要求34-45中任一項(xiàng)的綴合物在制備用于治療骨相關(guān)疾病或病癥的藥物中的 用途。
53.權(quán)利要求43-45中任一項(xiàng)的綴合物作為診斷試劑的用途。
54.權(quán)利要求43-45中任一項(xiàng)的綴合物在制備用于監(jiān)測(cè)骨相關(guān)疾病或病癥的診斷試劑 中的用途。
55.權(quán)利要求34-45中任一項(xiàng)的綴合物，被鑒定用于治療骨相關(guān)疾病或病癥。
56.權(quán)利要求43-45中任一項(xiàng)的綴合物，被鑒定用于監(jiān)測(cè)骨相關(guān)疾病或病癥。
57.權(quán)利要求47、48、49、50、52和54-56中任一項(xiàng)的綴合物、方法、組合物或用途，其中 所述疾病或病癥與血管生成相關(guān)。
58.權(quán)利要求57的綴合物、方法、組合物或用途，其中所述疾病或病癥選自骨轉(zhuǎn)移和骨癌。
59.一種合成權(quán)利要求34-45中任一項(xiàng)的綴合物的方法，所述方法包括(a)共聚所述聚合主鏈的多個(gè)單體單元，其中所述多個(gè)的一部分包括端接第一反應(yīng) 基團(tuán)的單體單元，所述多個(gè)的另一部分包括端接第二反應(yīng)基團(tuán)的單體單元，從而得到包括 含有多個(gè)主鏈單元的聚合主鏈的共聚物，其中所述主鏈單元的一部分具有所述第一反應(yīng)基 團(tuán)，所述主鏈單元的另一部分具有所述第二反應(yīng)基團(tuán)，所述第一反應(yīng)基團(tuán)能夠與所述抗血 管生成劑反應(yīng)，所述第二反應(yīng)基團(tuán)能夠與所述骨靶向部分反應(yīng)；(b)經(jīng)由所述第一反應(yīng)基團(tuán)將所述骨靶向部分偶合至所述共聚物，從而得到包含骨靶 向部分的共聚物；和(c)經(jīng)由所述第二反應(yīng)基團(tuán)將所述抗血管生成劑偶合至所述共聚物，從而得到所述綴 合物。
60.權(quán)利要求59的方法，其中所述共聚是經(jīng)由可逆的加成-裂解鏈轉(zhuǎn)移(RAFT)技術(shù)進(jìn) 行的。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有連接在其上的TNP-470和高負(fù)載量(例如，高于3mol%)的阿侖膦酸鹽(ALN)的羥丙基甲基丙烯酰胺(HPMA)衍生共聚物的綴合物和制備其的方法。本發(fā)明進(jìn)一步公開了具有連接在其上的抗血管生成劑和寡聚天門冬氨酸骨靶向劑的聚合物或共聚物的綴合物及其制備方法。本發(fā)明還公開了包含這些綴合物的藥物組合物及其在治療和監(jiān)測(cè)骨相關(guān)病癥中的用途。
文檔編號(hào)A61K31/787GK102105157SQ200980128588
公開日2011年6月22日 申請(qǐng)日期2009年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月22日
發(fā)明者E·塞加爾, J·科佩塞克, P·科佩克科瓦, R·薩奇-法伊納羅, 潘懷忠 申請(qǐng)人:特拉維夫大學(xué)拉莫特有限公司, 猶他州大學(xué)研究基金會(huì)