專利名稱：用于預(yù)防嬰兒腸道不適的包含嬰兒雙歧桿菌及低聚果糖和低聚半乳糖的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及支持在食用嬰兒配方奶粉(infant milk formula)或母乳的嬰兒的飲 食中引入固體斷奶食物的組合物。
背景技術(shù)：
Probiostart 為嬰幼兒配制以支持健康的消化力和免疫力。一包probiostart 包含10小袋，每小袋凈重1. 5g并包含低聚果糖和益生菌培養(yǎng)物(probiotic culture) (嗜酸乳酸桿菌羅塞爾-52 (Lactobacillus acidophilus Rossell-52)，嬰兒雙歧 桿菌羅塞爾-33 (Bifodobacterium infantis Rosell-33)和兩歧雙歧桿菌羅塞 爾-71(Bifodobacterium bifidum Rosell-71))。Scholtens 等(J Pediatr Ga stroenterol Nutr, 2006,42 :553_559)描述了在固 體食物中加入益生元低聚糖(prebioitic oligosaccharides)引起斷奶期腸道菌群中雙歧 桿菌的糞便比例的提高。W002/060276涉及到益生菌組合，其包含乳酸桿菌、丙酸細(xì)菌和/或雙歧桿菌的不 同組合。益生菌優(yōu)選與合適的益生元組合形成合生元(synbiotics)。本發(fā)明的組合自身可 以食用，或者可以與合適的食物或藥物產(chǎn)品組合，并且它可以治療性地例如用于刺激免疫 系統(tǒng)和用于一般的健康改善。發(fā)明概述本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在除嬰兒配方奶粉或母乳喂養(yǎng)之外引入固體和可匙(spoonable) 食物時(shí)，嬰兒腸道菌群發(fā)生顯著變化。發(fā)現(xiàn)嬰兒雙歧桿菌(B. infantis)百分比顯著下降而 其他細(xì)菌保持穩(wěn)定。另外，在引入固體食物后，多種短鏈脂肪酸(SCFA)分布發(fā)生變化。特 別地，糞便乙酸鹽百分比顯著下降而丙酸鹽百分比顯著上升，見(jiàn)實(shí)施例1。向嬰兒飲食中引入固體食物經(jīng)常會(huì)引起腸問(wèn)題。這些問(wèn)題特別地由腸道環(huán)境的變 化引起，特別地如果飲食變化突然出現(xiàn)。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在固體食物引入時(shí)，重要特征發(fā)生 變化。優(yōu)選地，在向嬰兒飲食中引入固體食物(例如除人乳或嬰兒配方奶粉之外)時(shí)，減少 和平和菌群和短鏈脂肪酸類型的變化，從而更逐漸地發(fā)生變化，并且嬰兒免受腸道不適。本 發(fā)明提供減少雙歧桿菌群和短鏈脂肪酸水平的變化、由此避免和/或減少腸道不適的方法 和組合物。本發(fā)明涉及嬰兒雙歧桿菌組合低聚半乳糖和低聚果糖的施用，以鈍化由固體斷奶 食物的攝入引起的變化。嬰兒雙歧桿菌的添加限制了在固體食物引入飲食期間觀察到的腸 道嬰兒雙歧桿菌的減少。低聚半乳糖和低聚果糖的混合物最適地增加了乙酸鹽的產(chǎn)生，同 時(shí)引起有限的丙酸鹽產(chǎn)生。嬰兒雙歧桿菌的主要代謝產(chǎn)物是乙酸鹽，乙酸鹽產(chǎn)生的減少被認(rèn)為至少部分是由 于嬰兒雙歧桿菌的減少的發(fā)生。因此，嬰兒雙歧桿菌與低聚半乳糖和低聚果糖的共施用協(xié) 同增加乙酸鹽產(chǎn)生，同時(shí)保持多余的丙酸鹽產(chǎn)生的最小化。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，低聚半乳糖和低聚果糖的混合物比其他益生原更有效地刺激乙酸
3鹽產(chǎn)生，同時(shí)引起有限的丙酸鹽產(chǎn)生，見(jiàn)實(shí)施例2。由于飲食中引入固體食物，嬰兒中丙酸鹽 產(chǎn)生已經(jīng)增加，因此有限的丙酸鹽產(chǎn)生是期望的。有利地是，嬰兒雙歧桿菌、低聚半乳糖和低聚果糖的組合加入固體斷奶食物例如 果糊或其他嬰兒食物中。本共生組合優(yōu)選施用較長(zhǎng)時(shí)間段，如2或3個(gè)月，也就是從嬰兒配方奶粉到更多固 體食物的過(guò)渡期。因此，在另一方面，本發(fā)明提供具有特定劑量的嬰兒雙歧桿菌、低聚半乳 糖和低聚果糖的容器(例如小袋)。本發(fā)明也提供包含多個(gè)容器的包裝，所述容器具有特定 劑量的嬰兒雙歧桿菌、低聚半乳糖和低聚果糖。發(fā)明詳述斷奶期是嬰兒逐漸適應(yīng)成人固體食物的時(shí)期。一般，嬰兒在4-6個(gè)月齡時(shí)進(jìn)食固 體食物。在本文中，斷奶被定義為從奶喂養(yǎng)到固體食物的過(guò)渡。如本文所用，斷奶食物是指 嬰兒在斷奶期所食用的食物組合物。本發(fā)明涉及包含嬰兒雙歧桿菌和低聚半乳糖和低聚果糖的組合物在制備用于治 療和/或預(yù)防因嬰兒飲食中引入斷奶食物而引起的該嬰兒腸道不適的食物產(chǎn)品中的用途。在本發(fā)明一實(shí)施方案中，所述食物產(chǎn)品的制備是通過(guò)將包含嬰兒雙歧桿菌和低聚 半乳糖和低聚果糖的組合物a)和作為即用食物產(chǎn)品的組合物b)組合，其中所述食物產(chǎn)品 優(yōu)選為斷奶食物。組合物b)優(yōu)選在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas的粘度。 組合物a)與組合物b)的重量比優(yōu)選為0. 005-0. 1。組合物a)的量?jī)?yōu)選為0. 5g_10g。因此，本發(fā)明也涉及用于治療和/或預(yù)防因嬰兒飲食中引入食物產(chǎn)品而引起的嬰 兒腸道不適的組合物c)，其中組合物c)通過(guò)將0. 5-10g組合物a)和組合物b)組合而制 備，其中組合物a)包含i.嬰兒雙歧桿菌；和ii.低聚半乳糖和低聚果糖；組合物b)是食物產(chǎn)品，其在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas的粘度； 所述食物產(chǎn)品優(yōu)選為斷奶食物；和組合物a)與組合物b)的重量比為0. 005-0. 1。另一方面，本發(fā)明涉及制備食物產(chǎn)品的方法，包括將組合物a)加入組合物b)來(lái)獲 得組合物c)，其中組合物a)包含i.嬰兒雙歧桿菌；和ii.低聚半乳糖和低聚果糖；組合物b)是食物產(chǎn)品，其在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas的粘度， 所述食物產(chǎn)品優(yōu)選為在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas的粘度的斷奶食物；和組合物a)與組合物b)的重量比為0. 005-0. 1。另一方面，本發(fā)明涉及包含0.5_10g粉末的包裝的粉末組合物，其包含低聚半乳 糖、低聚果糖和嬰兒雙歧桿菌。本發(fā)明也提供包含這類包裝的組合物中的至少5個(gè)的容器。雙歧桿菌本組合物優(yōu)選包含嬰兒雙歧桿菌、更優(yōu)選地嬰兒-長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacterium
4infantis-longum)。本組合物優(yōu)選包含與模式菌株嬰兒雙歧桿菌(株系LMG 8811τ種名長(zhǎng) 雙歧桿菌(Bifidobacterium longum)Reuter 1963AL，ATCC 15697)相比，具有與 16S rRNA 序列的至少95%—致性、更優(yōu)選地至少97% —致性的細(xì)菌。確定與16S rRNA的百分比一 致性的方法由Haaman禾口 Knol在Quantitative real-time PCR assays to identify and quantify fecal Bifidobacterium species in infants receiving a prebiotic infant f0rmula(使用定量實(shí)時(shí)PCR測(cè)定法鑒定并定量食用益生元嬰兒配方的嬰兒的糞便雙歧桿 菌物種)Appl. Environ. Microbiol. 2005 ；71 (5) :2318_24 中描述。上述具有 16S rRNA 序列 的至少95%、優(yōu)選地至少97%的一致性的菌株在本文中是指嬰兒雙歧桿菌。根據(jù)優(yōu)選的實(shí)施方案，本組合物包含至少一種選自B. longum spp. infantis M-63 的雙歧桿菌。本組合物a)優(yōu)選包含每克組合物干重IO2-IO13菌落形成單位(cfu)嬰兒雙歧桿 菌，每克本組合物a)干重優(yōu)選地104-1012、更優(yōu)選地IO5-IOltl嬰兒雙歧桿菌。本組合物a) 優(yōu)選包含每克總的非可消化糖104-1012、更優(yōu)選地IO5-IOltl菌落形成單位(cfu)嬰兒雙歧桿 菌。所述嬰兒雙歧桿菌優(yōu)選以每日劑量102_1013、更優(yōu)選地IO5-IO11菌落形成單位(cfu)施用。非可消化低聚糖本組合物a)優(yōu)選包含低聚半乳糖。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“低聚半乳糖”指非可消化低 聚糖，其中至少30%、優(yōu)選地至少50%、更優(yōu)選地至少60%的糖單元為半乳糖單元。乳糖被 認(rèn)為是可消化的。本組合物優(yōu)選包含DP為2-100、更優(yōu)選地DP為2-10的低聚半乳糖。低 聚半乳糖的糖優(yōu)選為連接。許多人乳低聚糖核心結(jié)構(gòu)也為連接。本組合物a)優(yōu)選包含選自反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(LNT)和乳糖_N_新四 糖(新-LNT)的低聚半乳糖。在特定優(yōu)選實(shí)施方案中，本組合物包含反式低聚半乳糖。反 式低聚半乳糖具有[半乳糖]η"葡糖糖和/或[半乳糖]η"葡萄糖-([半乳糖])m的化學(xué)結(jié) 構(gòu)，其中η和/或m是1至且包含60的整數(shù)，也就是2，3，4，5，6，. . . .，59，60 ；η優(yōu)選為2，3， 4，5，6，7，8，9和/或10。m優(yōu)選為2，3，4，5，6，7，8，9和/或10。本組合物優(yōu)選包含[半乳 糖]n_葡糖糖，其中η是1至且包含60的整數(shù)。η優(yōu)選為2，3，4，5，6，7，8，9和/或10，η更 優(yōu)選為2，3，4，5，6和/或7。反式低聚半乳糖(TOS)例如以商標(biāo)VivinalTM(B0rcul0 Domo Ingredients，荷蘭)和Oligomate 55 (養(yǎng)樂(lè)多)銷售。低聚半乳糖的糖單元優(yōu)選主要為 β-連接。本組合物a)優(yōu)選包含每IOOg干重0. 01_10g、優(yōu)選地0. l_5g、更優(yōu)選地0. 25_2g 的低聚半乳糖。本組合物a)優(yōu)選包含低聚果糖。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“低聚果糖”指非可消化多糖 碳水化合物，其包含至少2個(gè)β -連接的果糖單元的鏈，具有2-250、優(yōu)選地7-100、更優(yōu)選 地20-60的DP。優(yōu)選采用菊糖。菊糖可自商品名Raftilin HP (Orafti)獲得。本低聚果 糖的平均DP優(yōu)選為至少7、更優(yōu)選地至少10、優(yōu)選地低于100。所用低聚果糖優(yōu)選具有(占 大多數(shù)的)以β (2 — 1)鍵連接的果糖單元。用于低聚果糖的其他術(shù)語(yǔ)包括菊糖，多聚果 糖(fructopolysaccharide)，多果糖(polyfructose)，果聚糖和寡果糖(oligofructose)。 本組合物優(yōu)選包括DP為2-100、更優(yōu)選DP為7-60的低聚果糖。本組合物a)優(yōu)選包含每IOOg干重0. 01_10g、優(yōu)選地0. l_5g、更優(yōu)選地0. 25_2g的低聚果糖。因此，本組合物a)優(yōu)選包括具有不同平均聚合度(DP)的至少2種非可消化低聚 糖。優(yōu)選地，所述重量比為i. (DP 2-5的非可消化低聚糖)(DP 6，7，8和/或9的非可消化低聚糖)> 1 ； 和/或ii. (DP 10-60的非可消化低聚糖)(DP 6，7，8和/或9的非可消化低聚糖)> 1優(yōu)選地，一個(gè)或兩個(gè)重量比大于2、更優(yōu)選地大于5。這些組合提供最適乙酸鹽產(chǎn)生。為進(jìn)一步的改進(jìn)，本非可消化低聚糖優(yōu)選具有相對(duì)高含量的短鏈低聚糖，因?yàn)檫@ 些強(qiáng)烈刺激乙酸鹽產(chǎn)生。優(yōu)選地至少50wt. %、更優(yōu)選地至少75wt. %的非可消化低聚糖具 有2-9(即2，3，4，5，6，7，8和/或9)的DP。在本組合物a)中，優(yōu)選地至少75wt. %的總低 聚半乳糖具有2-7的DP，和至少75wt. %的總低聚果糖具有6-60的DP。本組合物a)優(yōu)選包含0. 01-10g、優(yōu)選地0. l_5g、更優(yōu)選地0. 25_2g的非可消化低 聚糖。每IOOg干重？？？^^本發(fā)明涉及制備食物產(chǎn)品的方法，包括將組合物a)加入組合物b)，來(lái)獲得組合物
C) O組合物a)優(yōu)選包含嬰兒雙歧桿菌和(ii)低聚半乳糖和低聚果糖。組合物a)優(yōu) 選重量低于100克、最優(yōu)選低于10克、更優(yōu)選低于5克。組合物a)優(yōu)選包裝在容器、優(yōu)選 地小袋內(nèi)。組合物a)的單個(gè)包裝能夠精確組分的給予和防止過(guò)量給予。組合物a)優(yōu)選為 粉末形式。粉末形式的細(xì)菌具有延長(zhǎng)的保存期。組合物a)的水活度(aw)優(yōu)選為低于0.5， 更優(yōu)選為低于0. 3，最優(yōu)選為低于0. 2。組合物b)優(yōu)選為重量低于IOOOg和在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas 的粘度。組合物b)在20°C和剪切速率IOOiT1下優(yōu)選具有至少200mPas的粘度、更優(yōu)選具 有至少500mPas的粘度。高粘性組合物并非優(yōu)選的，特別是對(duì)于嬰兒。因此，組合物b)優(yōu) 選為在20°C和剪切速率100s—1下粘度低于lOOOOmPas，優(yōu)選低于5000mPaS。組合物b)優(yōu) 選為果糊、可匙乳基谷類組合物或者是適合3-24月齡嬰兒的膳食。組合物b)優(yōu)選為即用 食物產(chǎn)品，優(yōu)選地組合物b)為可購(gòu)得的食物產(chǎn)品。根據(jù)本方法，組合物a)和組合物b)被組合以獲得組合物C)，例如通過(guò)將組合物 a)撒在組合物b)上并任選地后接混合。所述方法優(yōu)選對(duì)組合物b)的口味和/或稠度造 成最小的影響。因此，組合物a)相對(duì)于組合物b)優(yōu)選具有有限的量。因此，組合物a)與 組合物b)的重量比低于0. 1，更優(yōu)選低于0.05。組合物a)與組合物b)的重量比優(yōu)選高于 0. 005，更優(yōu)選高于0. 01，和是例如約0. 025。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有多個(gè)單個(gè)包裝的組合物a)的容器。本發(fā)明提 供包含至少5個(gè)包裝的粉末組合物的容器，其中每一包裝的粉末組合物包含0. 5和IOg粉 末，其包含低聚半乳糖、低聚果糖和嬰兒雙歧桿菌。所述容器優(yōu)選包含至少5個(gè)包裝的粉末 組合物、優(yōu)選地至多30個(gè)包裝的粉末組合物。健康益處
本發(fā)明涉及用于⑴治療和/或預(yù)防因嬰兒飲食中引入斷奶食物而引起的腸道不 適和/或(ii)治療和/或預(yù)防便秘和/或(iii)治療和/或預(yù)防腸痙攣的方法，其通過(guò)向 嬰兒施用組合物c)，其中組合物c)已通過(guò)將組合物a)和組合物b)組合而制備。組合物 a)和組合物b)如本文上文所述。組合物c)優(yōu)選施用于3-24月齡嬰兒，更優(yōu)選地3-12月齡嬰兒。優(yōu)選地，組合物 c)每周至少一次地施用于嬰兒，持續(xù)至少5周的時(shí)段。更優(yōu)選地，組合物c)每周至少三次 地施用于嬰兒，持續(xù)至少2周的時(shí)段。最優(yōu)選地，組合物c)每天至少一次地施用于嬰兒，持 續(xù)至少2周的時(shí)段。更頻繁的施用會(huì)導(dǎo)致腸道菌群從喂乳嬰兒至嬰兒也進(jìn)食固體食物的情 形的更為逐漸的變化。
實(shí)施例實(shí)施例1 腸道菌群的變化MM眾所周知，哺乳嬰兒的腸道菌群以雙歧桿菌和乳酸桿菌為優(yōu)勢(shì)。表明固體斷奶食 物的引入可擾亂哺乳嬰兒的腸道菌群。本研究意在觀察引入常規(guī)固體斷奶食物的完全哺乳 嬰兒中腸道菌群及其代謝活性的變化。^^本研究是觀察性研究，其中自第一次引入固體食物至其后六周跟蹤健康的4-6 月齡的完全哺乳嬰兒。采集引入固體物前、引入固體物后3周、6周的糞便樣品。對(duì)糞 便樣品采用熒光原位雜交和定量實(shí)時(shí)PCR分析雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌 (B. adolescentis)、乳酸桿菌、大腸桿菌(E. coli)、梭菌和擬桿菌(Bacteroides)物種的百 分比。另外，對(duì)糞便的短鏈脂肪酸(SCFAs)和pH水平進(jìn)行了分析。此外，每日將排便次數(shù)、 排便特征以及腸胃不適(溢奶、腹瀉、腹痛(colics)、腸胃氣脹、便秘、尿布皮炎)的信息記 錄在研究日志中。所有數(shù)據(jù)以重復(fù)測(cè)量ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。MM13名嬰兒完成了研究。研究進(jìn)入時(shí)的平均年齡為5. 0個(gè)月(s. d. 0. 6月)。喂食 了六周固體斷奶食物后，觀察到乳酸桿菌從3.3%至6.0% (P< 0. 0001)的顯著增長(zhǎng)，和青 春雙歧桿菌從0.8%至4. (P < 0.0001)的顯著增長(zhǎng)。嬰兒雙歧桿菌的百分比從35. 6% 顯著下降到28. 5% (P < 0.0001)。其他細(xì)菌在研究期間保持穩(wěn)定。多種SCFA的分布在引 入固體食物后發(fā)生變化。糞便乙酸鹽的百分比顯著降低，基線和六周后的平均百分比分別 為93%和83% (P = 0. 010)。丙酸鹽百分比從基線的4%顯著增長(zhǎng)到15% (P = 0. 002)。 未觀測(cè)到糞便PH顯著變化。在六周的研究期內(nèi)，糞便稠度從1.7 (SEM 0. 4)(似水至軟布丁 樣)顯著增長(zhǎng)到2. 7 (SEM 0. 7)(軟成型至干成型)(ρ < 0. 001)。排便頻數(shù)沒(méi)有顯著變化。表 1
第0周第6周P -值青春雙歧桿菌0. 84. 1ρ < 0. 001
權(quán)利要求
包含嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacterium infantis)及低聚半乳糖和低聚果糖的組合物在制備用于治療和/或預(yù)防因嬰兒飲食中引入斷奶食物而引起的該嬰兒腸道不適的食物產(chǎn)品c)中的用途，其中所述食物產(chǎn)品c)通過(guò)將0.5 10g的包含嬰兒雙歧桿菌及低聚半乳糖和低聚果糖的組合物a)和作為即用斷奶食物的組合物b)組合而制備，其中組合物a)與組合物b)的重量比為0.005 0.1。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中組合物b)在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少 IOOmPas的粘度。
3.制備食物產(chǎn)品的方法，包括將組合物a)加入組合物b)以獲得食物產(chǎn)品c)，其中組合物a)包含i.嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacterium infantis)；和 .低聚半乳糖和低聚果糖；組合物b)是即用的食物產(chǎn)品，其在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas的粘 度；和組合物a)與組合物b)的重量比為0. 005-0. 1。
4.如權(quán)利要求1或2所述的用途或者如權(quán)利要求3所述的方法，其中組合物b)是果 糊、可匙奶基谷類組合物或適合3-24月齡嬰兒的膳食。
5.如權(quán)利要求1或2所述的用途或者如權(quán)利要求3或4所述的方法，其中組合物a)是 粉末。
6.如權(quán)利要求1或2所述的用途或者如權(quán)利要求3-5所述的方法，其中將所述食物產(chǎn) 品c)施用于嬰兒。
7.如權(quán)利要求1或2所述的用途或者如權(quán)利要求3-6所述的方法，其中組合物a)具有 來(lái)自可消化碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的低于lOkcal/g、優(yōu)選地低于5kcal/g、更優(yōu)選地低 于lkcal/g的熱焓。
8.包含0.5g和IOg粉末的包裝的粉末組合物，其包含低聚半乳糖、低聚果糖和嬰兒雙 歧桿菌(Bifidobacterium infantis)禾口 / 或雙歧桿菌(Bifidobacterium)。
9.容器，其包含至少5個(gè)如權(quán)利要求7所述的包裝的組合物。
10.用于治療和/或預(yù)防因嬰兒飲食中引入斷奶食物而引起的該嬰兒腸道不適的組合 物c)，其中通過(guò)將0. 5-10g的組合物a)與組合物b)組合而制備組合物c)，其中組合物a)包含i.嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacterium infantis)；和 .低聚半乳糖和低聚果糖；組合物b)是在20°C和剪切速率IOOiT1下具有至少lOOmPas的粘度的食物產(chǎn)品；和組合物a)與組合物b)的重量比為0. 005-0. 1。
全文摘要
提供包含雙歧桿菌和低聚半乳糖和低聚果糖的組合物，其支持在食用嬰兒配方奶粉或母乳的嬰兒的飲食中引入固體斷奶食物。
文檔編號(hào)A61P1/00GK101945658SQ200980104967
公開(kāi)日2011年1月12日 申請(qǐng)日期2009年2月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月12日
發(fā)明者帕特洛尼拉·安娜·瑪麗亞·約翰娜·舒爾特恩斯, 馬丁·桑德拉·艾賴斯 申請(qǐng)人:荷蘭紐迪希亞公司