專利名稱：：微波促進(jìn)固相合成苦瓜mc-jj62多肽類似物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及MC-JJ62多肽類似物及其微波促進(jìn)固相合成方法。
背景技術(shù)：
：糖尿病是當(dāng)今危害人類健康的重要疾病，目前全世界約有5%-7%的人受糖尿病困擾，被認(rèn)為是繼心腦血管疾病、惡性腫瘤之后，導(dǎo)致人類傷殘、死亡的第三大殺手。糖尿病分為I型和II型，I型糖尿病是一種自身免疫疾病，患者的存活需要注射胰島素。11型糖尿病占眾多糖尿病患者總數(shù)的95%左右。II型糖尿病的原因是胰島細(xì)胞代謝發(fā)生障礙，胰島素分泌不足，或者產(chǎn)生胰島素抵抗，是以胰島素抵抗為主伴胰島素分泌相對(duì)不足，或者以胰島素分泌相對(duì)不足為主伴胰島素抵抗導(dǎo)致的代謝性疾病。胰島素分泌不足，或者產(chǎn)生胰島素抵抗都可造成血液中葡萄糖過量，當(dāng)血糖含量超過腎閾時(shí)，葡萄糖就轉(zhuǎn)移到尿中排出，從而產(chǎn)生葡萄糖尿。目前臨床應(yīng)用的幾種藥物均不能夠治愈糖尿病，主要是通過不同的作用機(jī)制，降低患者的血糖水平。糖尿病患者必須終生服藥，藥物本身對(duì)人體的毒副作用同樣威脅著糖尿病人的健康。在中國(guó)，目前使用藥物能夠控制血糖達(dá)到正常標(biāo)準(zhǔn)的，還不到糖尿病患者總數(shù)的20%(鄒大進(jìn)，2型糖尿病的禍?zhǔn)?-胰島素抵抗，大眾醫(yī)學(xué)，2002，(6):17)，直接導(dǎo)致了許多糖尿病患者的并發(fā)癥發(fā)生早，進(jìn)展快。顯然，除了篩選更加安全有效的新型藥物之外，尋找其它的輔助治療手段有效控制血糖水平，對(duì)于提高糖尿病人的健康水平同樣是十分重要的。苦瓜(Momordicacharantia)是一種人類有長(zhǎng)期安全食用歷史的蔬菜。近二十年來，人們?cè)诳喙系墓麑?shí)中發(fā)現(xiàn)了許多具有降血糖活性的成分，一些苦瓜果實(shí)的提取物，或者直接用苦瓜果實(shí)干燥后制成的茶飲料，已經(jīng)推薦給糖尿病人使用，某些苦瓜成分已經(jīng)被申請(qǐng)作為治療糖尿病藥物的專利。但是，從科技文獻(xiàn)中介紹以及已有的專利或產(chǎn)品，主要是基于對(duì)苦瓜諸多降血糖活性成分中對(duì)某個(gè)已知成分的認(rèn)識(shí)，并沒有意識(shí)到，苦瓜中具有降血糖活性的成分已知的就有多種，并且化學(xué)性質(zhì)各不相同，此外，苦瓜中還有某些具有降血糖的活性成分是未知的。所以，已有的文獻(xiàn)、專利或產(chǎn)品，其局限性也是明顯的。美國(guó)專利(US6391854B1)和中國(guó)專利(CN98805001，苦瓜中的口服活性成分，其活性肽，及它們治療糖尿病的用途；<申請(qǐng)人>美國(guó)卡里克斯治療公司)提供了苦瓜的一種水溶性提取物稱為MC6，MC6的特征中它含有三種肽，它的制備方法的特征是離心澄清的苦瓜汁依次通過30kDal，10kDal及3kDal的超濾膜。MC6分子量小于10kDal，能夠通過10kDal超濾膜，而為3kDal濾膜截留。有活性的MC6的特征是在SDS-PAGE凝膠電泳上以單一條帶形式遷移，分子量小于10kDal，包含三種肽。同時(shí)提供的還有MC6的肽成分，稱為MC6.1，以及MC6.1的衍生物和模擬物?；钚訫C6，MC6.1，MC6.2，MC6.3有降血糖作用，尤其是糖尿病，其中優(yōu)選口服給予這些活性藥物。在這一專利中，所利用的苦瓜降血糖活口服給藥后也有這種活性。同時(shí)提供的還有利用這些活性藥物治療高血糖疾病的方法性成分僅僅是夠透過超濾膜的水溶性蛋白(多肽)。專利申請(qǐng)者描述，MC6沒有提高模型動(dòng)物血漿中胰島素水平的活性?！?jiǎng)t國(guó)際專利申請(qǐng)(PCT/IN99/000521999.9.28)的發(fā)明，提供了一種高效降血糖多肽-k，它提取自苦瓜。專利申請(qǐng)者介紹的多肽-k制備方法是用非極性溶劑處理苦瓜種子(或果實(shí))，去除不需要的油脂、黃酮類和皂苷配基，然后用含水80%的丙酮提取殘留物中的蛋白質(zhì)，最后選擇性地結(jié)晶分離出多肽-k。申請(qǐng)者描述，多肽-k不溶于水，其降血糖的作用機(jī)理是激活血液中無活性的胰島素。很明顯，MC6與多肽-k都是苦瓜中具有降血糖活性的蛋白質(zhì)，但是，MC6溶于水，而多肽-k不溶于水，按照MC6的制備方法，則損失了苦瓜中的多肽-k;而按照多肽-k的制備方法，同樣損失了苦瓜中的MC6。還有一些中國(guó)專利公開了從苦瓜中提取降糖物質(zhì)或制成中藥的內(nèi)容1、<申請(qǐng)?zhí)?gt;99115925<發(fā)明名稱>一種苦瓜降糖膠囊及其制備工藝，該發(fā)明是以新鮮苦瓜為原料，經(jīng)清洗冷凍，低溫制漿，壓濾，將濾渣經(jīng)烘干過IOO目篩，制成苦瓜渣粉；濾液澄清再過濾，經(jīng)酸性(pH3.0)乙醇在15t:條件下攪拌3小時(shí)，靜置沉淀12小時(shí)，過濾后將沉淀物經(jīng)低溫干燥，過100目篩，制成苦瓜蛋白；過濾液經(jīng)6(TC真空濃縮，加2倍水溶解，加2倍乙醚脫脂，5(TC真空濃縮回收乙醚，6(TC真空回收乙醇制成粗苦瓜總皂苷，再經(jīng)無水丙酮在4t:條件下沉淀洗滌數(shù)次，3(TC以下真空濃縮制成苦瓜總皂苷，最后將總皂苷，苦瓜蛋白粉和苦瓜渣按IO:2:88重量比經(jīng)混勻，裝入膠囊制成苦瓜降糖膠囊。具有原料來源廣泛，工藝簡(jiǎn)單，服用方便，價(jià)格便宜，無毒副作用的優(yōu)點(diǎn)，可做為治療糖尿病的輔助制劑。2、<申請(qǐng)?zhí)?gt;98110802<授權(quán)公告日>2001年08月15日<發(fā)明名稱>天然苦瓜素降糖藥及其制備方法，發(fā)明公開了一種天然苦瓜素降糖藥的制作方法，包括下述步驟a.將成熟苦瓜切成片，并進(jìn)行干燥處理；b.把干燥的苦瓜片浸泡于水中，并提取浸液；C.把苦瓜浸液濃縮成濃縮液；d.將濃縮液進(jìn)行生物酶解，得高活性降解液；e.把降解液進(jìn)行恒溫干燥噴粉制粒；f.將顆粒裝入膠囊成藥；該方法工藝設(shè)備簡(jiǎn)單，符合大規(guī)模生產(chǎn)要求，產(chǎn)品得率高，治療效果好，無毒副作用。3、<申請(qǐng)?zhí)?gt;95103732<發(fā)明名稱>治療糖尿病的中藥及其生產(chǎn)方法，該發(fā)明是一種治療糖尿病的中藥，該中藥的主要成分是動(dòng)物胰臟、苦瓜、南瓜、黃芪，山藥，生產(chǎn)方法是動(dòng)物胰臟粉碎千燥，與用水提法或醇析法得到的苦瓜、南瓜、黃芪提取物混合再加入山藥粉得到，該藥物具有益氣生津，健脾潤(rùn)燥，滋陰降火功率效，并有提高機(jī)體免疫功能，促進(jìn)胰島素分泌，降低血糖作用。4、〈申請(qǐng)?zhí)枴?3119351.6〈發(fā)明名稱〉植物降血糖活性蛋白新組份PA及其制備，該發(fā)明涉及生物制藥領(lǐng)域。從植物材料苦瓜中提取降血糖活性蛋白新組分PA，制備工藝中材料凈化處理-低溫冰凍-破碎-酸醇浸漬-高速勻漿-酸醇提取-抽濾-離心凈化-沉淀-重新溶解-Sephadex凝膠過柱-紫外檢測(cè)分部收集-濃縮-干燥的苦瓜降血糖活性蛋白新組份PA的制備方法，其特點(diǎn)是采用了等電點(diǎn)沉淀和凝膠過柱、紫外檢測(cè)分部收集的方法。發(fā)明人認(rèn)為該物質(zhì)具有分離提取簡(jiǎn)便、消耗有機(jī)溶劑少、得率高等優(yōu)點(diǎn)，經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)證明降血糖效果明顯。5、<申請(qǐng)?zhí)?gt;02102754<發(fā)明名稱>一種快速高效提取植物類胰島素的方法，苦6瓜種子含有較豐富的植物類胰島素，是目前治療糖尿病的一種有效成分。發(fā)明技術(shù)特征是苦瓜種子脫殼，種仁粉碎過60或100目篩，然后采用酸性乙醇進(jìn)行萃取，離心取上清液，加入NaCl占體積3%5%，用15Mol/LNaOH調(diào)節(jié)溶液至pH值7.0±7.5溶液變渾濁、離心、去上液，用丙酮洗滌沉淀部分三次，真空干燥，得到植物類胰島素粗品。用0.1MTris.cl溶液(pH7.5)溶解進(jìn)行凝膠親和層析，收集洗脫峰溶液，用丙酮或乙醇濃縮真空干燥得到植物類胰島素精品。該方法可以提取制備高純度的植物類胰島素成分，可用于糖尿病的治療。6、<申請(qǐng)?zhí)?gt;98102198.0<發(fā)明名稱>一種苦瓜含片及其制備方法，該發(fā)明為一種苦瓜含片及其制備方法。本苦瓜含片主要含有苦瓜粉、糊精、檸檬酸和甘露醇等，制備時(shí)，先將鮮苦瓜經(jīng)榨汁、過濾、冷凍干燥制得苦瓜凍干粉，再與其它成分進(jìn)行混合，并壓制成片。采用本發(fā)明的制備方法科學(xué)合理，充分保留了苦瓜中的多種營(yíng)養(yǎng)成分，所制含片常溫下不失苦瓜的活性，具有清熱解毒、寬胸利氣、生津止渴、降低血糖、提高免疫力、抑制癌細(xì)胞等功效，是日常生活，特別是在災(zāi)區(qū)救援、軍事行動(dòng)、以及旅游、探險(xiǎn)活動(dòng)中，可迅速補(bǔ)充體力，提高免疫力的方便必需品。主權(quán)項(xiàng)(A61K35/78)要求是一種苦瓜含片，其特征是含有苦瓜粉、糊精、甘露醇、香料、色素及硬脂酸鎂。已有的研究表明，苦瓜中除蛋白質(zhì)之外，皂苷也是一種極為有效的降血糖活性的成分。—些科技文獻(xiàn)報(bào)道，苦瓜皂苷為四環(huán)三菇類化合物，有多個(gè)不同成分，均難溶于水，可用乙醇從干燥的苦瓜果實(shí)中提取出(常鳳崗苦瓜化學(xué)成分研究，中草藥，1995，26(10)507-510)?？喙显碥詹⒉挥绊懯茉噭?dòng)物模型血漿中胰島素含量，主要是促進(jìn)增加肌糖原和肝糖原的合成(王先遠(yuǎn)，金宏，許志勤等苦瓜皂苷降血糖作用及機(jī)制初探，氨基酸和生物資源，2001，23(3):42-45)，因而具有顯著的降血糖作用(孫淑卿，苦瓜的藥理和臨床研究概況，中藥材，1997，(8):428-429)，動(dòng)物試驗(yàn)證明，其血糖降低幅度甚至優(yōu)于"優(yōu)降糖"(孫寶瑩等，苦瓜皂苷的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，河南中醫(yī)藥學(xué)刊，1994，9(6):19—21)。水溶多肽MC6、水不溶的多肽-k及苦瓜皂苷，由于它們化學(xué)性質(zhì)的差異，因而屬于彼此不同的物質(zhì)。并且，苦瓜降血糖活性成分并不僅僅是已知的皂苷和蛋白質(zhì)。從新鮮苦瓜的水煮液中分離出了可溶于乙醚和不溶于乙醚的兩個(gè)未知的成分，已經(jīng)鑒定不為皂苷、黃酮和生物堿，這兩種成分都表現(xiàn)出明顯的降血糖活性(王勇慶苦瓜降血糖作用研究，湖南中醫(yī)藥雜志，1998，C6):51-52)。由此證明，苦瓜中降血糖成分除皂苷和植物蛋白之外，還有其它的降糖活性化合物。將苦瓜的幾種不同方法提取物對(duì)四氧嘧啶誘導(dǎo)的化學(xué)性糖尿病模型小鼠的降糖效果進(jìn)行比較，結(jié)果表明，苦瓜的未被加熱的直接壓榨的果汁較其它方法提取的有效部位的降血糖效果更好，并推斷其降血糖活性物可能為水溶性的受熱易被破壞的成分(范玉玲；崔福德，苦瓜有效部位降糖活性的比較研究，沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)2001，18(1):50-52)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，鮮苦瓜汁能使能使四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病小鼠已經(jīng)受損傷的胰島P細(xì)胞得到修復(fù)，并再生出新的13細(xì)胞，提高了血漿中的胰島素含量(Ahmed，I.，7Adeghate，E，Sharma，A.K.，Pallot，D丄etal.EffectsofMomordicacharantiafruitjuiceonisletmorphologyinthepancreasofthestreptozotocin-diabeticrat.Diabetesresearchandclinicalpractice.1998，40，145-151)。體內(nèi)和離體的進(jìn)一步研究表明，鮮苦瓜汁的這種作用機(jī)理是減輕了糖尿病小鼠的胰腺，RIN細(xì)胞及胰島的脂質(zhì)過氧化，并降低了RIN細(xì)胞中四氧嘧啶誘導(dǎo)的apoptosis，從而對(duì)RIN細(xì)胞，胰島及胰腺13細(xì)胞的起保護(hù)作用(Sitasawad，S丄.，Shewade.Ye，Bhonde，Ro，Roleofbittergourdfruitjuiceinstz-induceddiabeticstateinvivoandinvitro.JournalofEthno-pharmacology，2000，73(1):71-79)。而在苦瓜的已知降糖活性化合物中，尚未能確定具有這種修復(fù)或再生胰島細(xì)胞，提高胰島素水平的生物活性。由上述事實(shí)可知，苦瓜的降血糖功能活性物，有已知的，也還有屬于未知的，苦瓜的降血糖功能，實(shí)際是其中所含的多種具有降血糖活性的成分協(xié)同作用的結(jié)果。就已知的活性成分而言，因其化學(xué)性質(zhì)不同，很難用一種溶劑將它們同時(shí)提取出來。此外，在苦瓜的降血糖活性物中，包含有不耐熱的成分，其提取的過程不應(yīng)當(dāng)受熱。用磨漿的辦法將新鮮的苦瓜果肉組織細(xì)胞充分破碎，細(xì)胞的所有內(nèi)含物，包括溶于水與難溶于水的降血糖活性成分，都將被釋放到果漿中。將果漿中的粗纖維(來自于果肉細(xì)胞壁)濾去，然后冷凍干燥，這種苦瓜汁的凍干制品無疑包含了比較全面的降血糖活性成分。但是，苦瓜汁中降血糖活性物的含量其實(shí)很低，直接凍干成本昂貴，另一方面，苦瓜汁中存在的糖類物質(zhì)極易潮解，使這種凍干制品根本無法在正常條件下分裝、貯藏和使用。加入大量的干燥助劑或防潮劑雖然可以解決苦瓜汁的凍干制品的潮解問題，但將無法制得高含量的苦瓜降血糖制品。綜上所述，文獻(xiàn)和專利公開的苦瓜有效成分的制備，基本上是采用物理法和化學(xué)法提取某個(gè)或若干個(gè)明確的化學(xué)成分為主，或者是苦瓜在加熱條件下的某種溶媒(如水，乙醇或其混合物)的總提取物，它們或者未提及如何利用苦瓜中那些化學(xué)性質(zhì)未知的降血糖活性成分，或者未明確苦瓜中某些熱敏性降血糖活性物的受熱破壞問題。99115925號(hào)中國(guó)發(fā)明專利，一種苦瓜降糖膠囊及其制備工藝提出了苦瓜蛋白與苦瓜皂苷的利用，但在制備過程使用了乙醇，丙酮，乙醚等有機(jī)溶劑。98110802號(hào)專利，天然苦瓜素降糖藥及其制備方法中提到將苦瓜濃縮液進(jìn)行生物酶解，得高活性降解液，但未提及生物酶解中采用的是什么酶。98102198.0號(hào)專利，一種苦瓜含片及其制備方法中使用的是冷凍干燥苦瓜汁工藝，但它沒有考慮去除苦瓜中已知的不具有降血糖活性的成分的問題。基于上述原因，開發(fā)一套能全面利用苦瓜中理化性質(zhì)不同的各類降血糖活性物，并且活性成分含量高，所以對(duì)于充分而合理地利用并開發(fā)苦瓜資源，也是十分必要的。多肽可以通過基因工程的方法或者化學(xué)合成的方法得到?；蚬こ痰姆椒ㄔ讷@取長(zhǎng)肽(氨基酸殘基長(zhǎng)度大于50)或蛋白質(zhì)上比化學(xué)方法有優(yōu)勢(shì)，但是多肽的化學(xué)合成方法尤其是在固相合成策略出現(xiàn)后，在制備氨基酸殘基長(zhǎng)度小于40的多肽或小肽上有基因工程方法難以比擬的靈活性、多樣性和高效性等。1963年Merrifield創(chuàng)立并開發(fā)了固相合成多肽的方法。固相多肽合成一般有兩種策略即Boc/Bzl正交保護(hù)固相合成策略和Fmoc/tBu正交保護(hù)固相合成策略，Merrifield創(chuàng)立的固相合成法即為Boc/Bzl正交保護(hù)固相合成策略。但是，Boc/Bzl正交保護(hù)固相合成策略中存在一些缺點(diǎn)，如副反應(yīng)多、條件苛刻以及在延長(zhǎng)肽鏈的過程中多肽鏈會(huì)從固相上丟失等。而隨后出現(xiàn)的Fmoc/tBu正交保護(hù)固相合成策略則反應(yīng)條件溫和的多。當(dāng)近年來微波技術(shù)運(yùn)用于多肽的固相合成中后，使多肽的合成技術(shù)產(chǎn)生了一個(gè)飛躍。微波促進(jìn)化學(xué)反應(yīng)是由于其使極性分子在微波場(chǎng)中快速旋轉(zhuǎn)，使得一些反應(yīng)速率較常規(guī)加熱方法快10到1000倍，而且產(chǎn)率大大提高。1986年Gedye等人首次報(bào)道了將微波應(yīng)用于有機(jī)合成中，微波可以促進(jìn)許多化學(xué)反應(yīng)，如Diels-Alder反應(yīng)，皂化反應(yīng)等，可以顯著地加快反應(yīng)速率并提高收率。在1992年，Hui-mingYu等首先報(bào)道了將微波應(yīng)用于多肽固相合成領(lǐng)域中，他們完成了?；d體蛋白片斷十肽(acylcarrierprotein,ACP6574)的合成。如何高效的合成長(zhǎng)肽在世界上仍然是一個(gè)挑戰(zhàn)，因?yàn)槎嚯碾S著肽鏈的增加，其合成難度成倍增加。用傳統(tǒng)的固相方法合成長(zhǎng)肽，其收率往往很低雜質(zhì)較多純化困難，從而從實(shí)用的角度上說失去了合成的意義。其次合成周期長(zhǎng)，在中間不出現(xiàn)困難肽序的情況下10肽一般需要近一個(gè)星期時(shí)間才能完成合成周期，如果出現(xiàn)困難肽序，往往就無法合成得到目標(biāo)多肽。而使用微波促進(jìn)固相合成多肽，可以克服困難肽序，合成傳統(tǒng)固相方法無法得到的多肽，而且合成時(shí)間大大縮短，且顯著提高多肽粗品純度及收率，使得產(chǎn)品的純化大大方便，只要經(jīng)過一次制備型HPLC就能得到純度較高的產(chǎn)品；此外還可以非常方便的用D型氨基酸及非天然氨基酸等對(duì)多肽進(jìn)行定點(diǎn)修飾，去尋找活性更高、生物半衰期更長(zhǎng)的多肽，這更是基因工程技術(shù)無法做到的。因此，我們?cè)诳喙辖笛?MC-JJ62)多肽類似物的合成中采用此種方法快速高效的合成得到MC-JJ62系列類似物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明有兩個(gè)目的第一個(gè)目的是從具降血糖活性的藥食同源植物苦瓜中得到多肽進(jìn)行修飾得到降血糖活性更高的MC-JJ62多肽類似物。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供了MC-JJ62多肽衍生物的固相制備方法，本發(fā)明采用微波促進(jìn)Fmoc/tBu正交保護(hù)固相合成策略高效快速地合成得到系列MC-JJ62多肽類似物。其特征在于采用微波促進(jìn)Fmoc/tBu正交保護(hù)固相合成策略，于固相載體上先合成得到載有第一個(gè)Fmoc保護(hù)氨基酸的樹脂，茚三酮法檢測(cè)為陰性后脫去Fmoc保護(hù)基得到載有第一個(gè)氨基酸殘基的樹脂；再進(jìn)入下一個(gè)偶聯(lián)循環(huán)，按照相應(yīng)的肽序用不同的保護(hù)氨基酸重復(fù)偶聯(lián)和脫保護(hù)的步驟，依次延長(zhǎng)所需的氨基酸序列，合成得到載有相應(yīng)多肽的樹脂，最后用裂解劑將多肽從樹脂上切割下來得到多肽粗品。粗品經(jīng)制備級(jí)高效液相色譜純化，凍干得多肽純品。載有第一個(gè)Fmoc保護(hù)氨基酸的樹脂的制備方法，其特征是通過在微波照射條件下Fmoc保護(hù)氨基酸先經(jīng)活化劑活化后再與固相載體偶合得到，反應(yīng)中加入1-羥基-苯并三氮唑(HOBT)或其衍生物抑制消旋，并使用有機(jī)堿中和反應(yīng)的酸性。載有第一個(gè)Fmoc保護(hù)氨基酸的樹脂所使用的固相載體是Rink樹脂、Wang樹脂或2-氯三苯甲基氯樹脂?；罨瘎┦嵌h(huán)己基碳二亞胺(DCQ、N，N'-二異丙基碳二亞胺(DIC)、N，N〃-羰基二咪唑(CDI)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HC1)、2-(7-偶氮苯并9三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或使用的1-羥基-苯并三氮唑(HOBT)衍生物為N-羥基琥珀酰亞胺(HOSU)、l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)或3-羥基-l，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮(HOOBT)。有機(jī)堿為三乙胺(TEA)、N-甲基嗎啉(NMM)或二異丙基乙胺(DIEA);微波促進(jìn)條件是微波頻率2450MHz，反應(yīng)溫度20100°C，反應(yīng)時(shí)間為515min。Fmoc保護(hù)基的脫除是通過使用含有O.lmolL—1的1-羥基-苯并三氮唑(HOBT)的六氫吡啶溶液在微波促進(jìn)下反應(yīng)，選用二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亞砜(DMSO)、或N-甲基吡咯烷酮(NMP)為反應(yīng)溶劑。微波促進(jìn)條件是微波頻率2450MHz，反應(yīng)溫度20100°C，反應(yīng)時(shí)間為1lOmin。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1.提出的一種MC-JJ62多肽類似物可以在保留降糖活性的基礎(chǔ)上，提高M(jìn)C-JJ62的穩(wěn)定性，延長(zhǎng)作用時(shí)間。2.微波促進(jìn)固相合成MC-JJ62多肽類似物大大的提高了偶合反應(yīng)速率，常規(guī)固相合成方法充分偶合一個(gè)氨基酸到樹脂上去，往往需要2小時(shí)到20小時(shí)不等，甚至更長(zhǎng)。而微波促進(jìn)則平均只需要10分鐘左右；常規(guī)固相合成方法脫Fmoc保護(hù)基，往往需要30分鐘到1小時(shí)不等，而微波促進(jìn)則平均只需要5分鐘左右，這極大的提高了多肽合成的效率，縮短了合成周期。3.微波促進(jìn)固相合成MC-JJ62多肽類似物合成得到的粗品的純度大于60%，較常規(guī)固相合成方法大大提高，這方便了后續(xù)的純化工作，只需要經(jīng)過一次制備液相純化，凍干即可得到目標(biāo)純品。4.微波促進(jìn)固相方法合成MC-JJ62多肽類似物，其成本低，由于偶合效率較高，所需要保護(hù)氨基酸平均只需要2倍過量，較常規(guī)固相合成方法需要4到5倍過量大為降低。5.微波促進(jìn)固相合成MC-JJ62多肽類似物方法易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、大規(guī)模化，這使其更適合工業(yè)化生產(chǎn)。因此用本發(fā)明提供的微波促進(jìn)固相合成技術(shù)制備的MC-JJ62多肽類似物，收率高、合成周期短、粗品純化容易，生產(chǎn)成本低、易于工業(yè)自動(dòng)化生產(chǎn)。制備得到的MC-JJ62多肽類似物，比天然MC-JJ62更加穩(wěn)定，適合作為治療糖尿病藥物的活性成分。具體實(shí)施例方式在本說明書全文中采用以下縮寫Et3N:三乙胺；NMM:N-甲基嗎啉；DIEA:N，N'-二異丙基乙胺；DMF:二甲基甲酰胺；DMSO:二甲亞砜；DCM:二氯甲烷；Fm0C:N-9荷甲氧羰基；DIC:N，N，-二異丙基碳二亞胺；CDI:N，N，-羰基二咪唑；DMAP:4-二甲氨基吡啶；HOSU:N-羥基琥珀酰亞胺；EDC.HC1:1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽；HATU:2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯；HBTU:苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯；HCTU:6-氯苯并三氮唑-l，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯；HOAT:l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑；HOBT:1-羥基-苯并三氮唑；PyBOP:六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷；HPLC:高效液相色譜；ESI-MS:電噴霧質(zhì)譜；Gly:甘氨酸；Ser:絲氨酸；Ala:丙氨酸；Thr:蘇氨酸；Val:纈氨酸；lie:異亮氨酸；Leu:亮氨酸；Tyr:酪氨酸；Phe:苯丙氨酸；His:組氨酸；Pro:脯氨酸；Asp:天門冬氨酸；Met:蛋氨酸；Glu:谷氨酸；Trp:色氨酸；Lys:賴氨酸；Arg:精氨酸。Asn:天冬酰胺；Gin:谷氨酰胺。本發(fā)明是通過下列實(shí)施列來進(jìn)行說明的，但這些實(shí)施例不做任何限制本發(fā)明的解釋。實(shí)施例1(D-Lys)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:2)的微波促進(jìn)固相合成(1)樹脂的溶脹稱取Fmoc-AlaResin50mg(取代量0.4mmol/g)，經(jīng)7mLDCM溶脹30min，抽濾去DCM，再用10mLNMP溶脹30min，最后分別用NMP，DCM，NMP7mL沖洗干凈。(2)微波促進(jìn)Fmoc保護(hù)基的脫除將溶脹好的樹脂放入反應(yīng)器中，加入7mL含0.1MHOBT的25%哌啶/NMP(V/V)溶液，在微波反應(yīng)器中反應(yīng)lmin，微波功率為15W，反應(yīng)溫度控制在5(TC以內(nèi)，使用空氣壓縮機(jī)壓縮空氣冷卻，反應(yīng)結(jié)束后濾去溶液；再加入7mL含0.1MHOBT的25%哌啶/NMP(V/V)溶液在微波反應(yīng)器中再反應(yīng)4min，微波功率為25W，反應(yīng)溫度控制在5(TC，使用空氣壓縮機(jī)壓縮空氣冷卻。反應(yīng)結(jié)束后濾去溶液，用NMP洗滌干凈。得到脫去初始連接的Fmoc保護(hù)基的樹脂。(3)微波促進(jìn)Fmoc-Ala-rinkamide-MBHAResin的合成將Fmoc-Ala-rink(0.04mmo1)，HBTU(0.04mmo1)，HOBT(0.04mmo1)和DIPEA(0.08mmol)溶于10mLNMP中，再將此溶液加入上面的樹脂中，在微波反應(yīng)器中反應(yīng)7min，微波功率為25W，反應(yīng)溫度控制在5(TC，使用空氣壓縮機(jī)壓縮空氣冷卻。反應(yīng)結(jié)束后濾除反應(yīng)液，用DCM和NMP各7mL洗滌樹脂3次。[OOM](4)偶合效率的檢測(cè)用茚三酮法或者溴酚蘭法定性檢測(cè)樹脂的偶合效率，顯色反應(yīng)為陰性即可進(jìn)入下一個(gè)偶合循環(huán)。茚三酮法取少量樹脂顆粒用乙醇洗滌，放入透明小瓶中加入5%茚三酮乙醇、KCN吡啶溶液(2ml0.001MKCN稀釋于98ml吡啶中)、80%苯酚乙醇溶液各2滴，于10(TC加熱5分鐘，如果樹脂顯藍(lán)色即為陽性。溴酚蘭法取少量樹脂顆粒用二甲酰乙酰胺洗滌，放入透明小瓶中加入3滴1%的溴酚藍(lán)二甲基乙酰胺溶液，常溫下振搖3分鐘，如果樹脂顯藍(lán)色即為陽性。(5)肽鏈的延長(zhǎng)按照Ala3-MC-JJ62-(ll1)-NH2的序列，重復(fù)上述脫保護(hù)和偶合的步驟依次連接上相應(yīng)的氨基酸，偶合微波促進(jìn)反應(yīng)時(shí)間520min不等。得到連有Ala3-MC-JJ62-(lll)-NH2的樹脂。(6)樹脂上多肽的裂解將上述得到的連有Ala3-MC-JJ62-(lll)-NH2的樹脂放入反應(yīng)瓶中，各加入裂解劑ReagentK(TFA/苯甲硫醚/水/苯酚/EDT，82.5:5:5:5:2.5，V/V)10mL，先在Ot:下振搖30min，再在常溫下反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后抽濾，加少量TFA和DCM洗滌三次，合并濾液。將濾液加入大量的冰乙醚中析出白色絮狀沉淀，冷凍離心得到目標(biāo)多肽的粗品。最終得到Ala3-MC-JJ62-(lll)-NH2粗品63.2mg，收率為94.3%。(7)Ala3-MC-JJ62-(ll1)-NH2-NH2粗品的純化將上面得到的Ala3-MC-JJ62-(lll)-NH2粗品，溶于少量的水中，用島津制備型反相HPLC純化粗品。純化中采用C18反相制備柱(340mmX28mm，5ym);流動(dòng)相A:0.1%TFA/水(V/V)，流動(dòng)相B:0.1%TFA/乙腈(V/V);流動(dòng)相梯度流動(dòng)相B13%15%，30min;流速為6mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。收集的溶液凍干得純品，最終得到純品29.7mg。理論相對(duì)分子質(zhì)量1079.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.8，[M+4H]4+270.8，[M+5H]5+216.9;calu[M+3H]3+360.8，[M+4H]4+270.7，[M+5H]5+216.9;根據(jù)實(shí)施例l所述的方法，根據(jù)相應(yīng)的序列合成得到實(shí)施例254的多肽，通過電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)確證各自的分子量。實(shí)施例2(D-Ala)Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:3);理論相對(duì)分子質(zhì)量1022.2.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+341.7，[M+4H]4+256.6，[M+5H]5+205.4;calu[M+3H]3+341.6，[M+4H]4+256.6，[M+5H]5+205.4;實(shí)施例3(D-Val)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:4);理論相對(duì)分子質(zhì)量1050.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+351.1，[M+4H]4+263.6，[M+5H]5+211.1;calu[M+3H]3+351.1，[M+4H]4+263.6，[M+5H]5+21U;實(shí)施例4(D-Leu)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:5);理論相對(duì)分子質(zhì)量1064.2.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.8，[M+4H]4+267.1，[M+5H]5+213.9;calu[M+3H]3+355.7，[M+4H]4+267.1，[M+5H]5+213.9;實(shí)施例5(D-Ile)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:6);理論相對(duì)分子質(zhì)量1064.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.8，[M+4H]4+267.1，[M+5H]5+213.9;calu[M+3H]3+355.8，[M+4H]4+267.0，[M+5H]5+213.9;實(shí)施例6(D-Phe)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:7);理論相對(duì)分子質(zhì)量1098.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+367.1，[M+4H]4+275.6，[M+5H]5+220.7;calu[M+3H]3+367.0，[M+4H]4+275.5，[M+5H]5+220.5;實(shí)施例7(D-Pro)Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:8);理論相對(duì)分子質(zhì)量1048.2.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+350.4，[M+4H]4+263.1，[M+5H]5+210.6;calu[M+3H]3+350.4，[M+4H]4+263.0，[M+5H]5+210.6;實(shí)施例8(D-Met)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:9);理論相對(duì)12分子質(zhì)量1082.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+361.8，[M+4H]calu[M+3H]3+316.8，[M+4H]4+271.7，[M+5H]5+217.5;實(shí)施例9(D-Cys)-Thr-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1054.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+352.4，[M+4H]4+264.6，calu[M+3H]3+352.2，[M+4H]4+264.5，[M+5H]5+211.9;實(shí)施例10Lys-(D-Ala)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1049.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+350.8，[M+4H]4+263.3，calu[M+3H]3+350.6，[M+4H]4+263.8，[M+5H]5+210.8;實(shí)施例11Lys-(D-Val)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1077.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.1，[M+4H]4+270.3，calu[M+3H]3+360.0，[M+4H]4+270.3，[M+5H]5+216.5;實(shí)施例12Lys-(D-Leu)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO對(duì)分子質(zhì)量1091.4ESI-MSm/z:found[M+3H]3+364.8，[M+4H]4+273.8，calu[M+3H]3+364.8，[M+4H]4+273.7，[M+5H]5+219.1;實(shí)施例13Lys-(D-Ile)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1091.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+364.8，[M+4H]4+273.8，calu[M+3H]3+364.7，[M+4H]4+273.6，[M+5H]5+219.3;實(shí)施例14Lys-(D-Phe)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1125.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+367.1，[M+4H]4+282.3，calu[M+3H]3+367.0，[M+4H]4+282.2，[M+5H]5+226.0;實(shí)施例15Lys-(D-Pro)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1075.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+359.4，[M+4H]4+269.8，calu[M+3H]3+359.4，[M+4H]4+269.8，[M+5H]5+216.0;實(shí)施例16Lys-(D-Met)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1109.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+370.8，[M+4H]4+278.3，calu[M+3H]3+370.8，[M+4H]4+278.2，[M+5H]5+222.7;實(shí)施例17Lys-(D-Cys)-Asn-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1081.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+361.4，[M+4H]4+271.3，calu[M+3H]3+361.4，[M+4H]4+271.3，[M+5H]5+217.2;271.6，[M+5H]5+217.5:10);理論相對(duì)5+211.9;11);理論相對(duì)[M+5H]5+210.9;12);理論相對(duì)5+216.5;:13);理論相5+219.3;14);理論相對(duì)5+219.3;:15);理論相對(duì)5+226.1;16);理論相對(duì)5+216.1;:17);理論相對(duì)5+222.9;:18);理論相對(duì)5+217.3;實(shí)施例17Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:19);理論相對(duì)分子質(zhì)量1036.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+346.4，[M+4H]4+260.1，[M+5H]5+208.3;calu[M+3H]3+346.3，[M+4H]4+260.0，[M+5H]5+208.2;實(shí)施例19Lys-Thr-(D-Val)-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:20);理論相對(duì)分子質(zhì)量1064.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.8，[M+4H]4+267.1，[M+5H]5+213.9;calu[M+3H]3+355.8，[M+4H]4+267.0，[M+5H]5+213.9;實(shí)施例20Lys-Thr-(D-Leu)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:21);理論相對(duì)分子質(zhì)量1078.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.5，[M+4H]4+270.6，[M+5H]5+216.7;calu[M+3H]3+360.4，[M+4H]4+270.5，[M+5H]5+216.5;實(shí)施例21Lys-Thr-(D-Ile)-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:22);理論相對(duì)分子質(zhì)量1078.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.5，[M+4H]4+270.6，[M+5H]5+216.7;calu[M+3H]3+360.4，[M+4H]4+270.5，[M+5H]5+216.5;實(shí)施例22Lys-Thr-(D-Phe)-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:23);理論相對(duì)分子質(zhì)量1112.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+371.8，[M+4H]4+279.1，[M+5H]5+223.5;calu[M+3H]3+371.6，[M+4H]4+279.0，[M+5H]5+23.4;實(shí)施例23Lys-Thr-(D-Pro)-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:24);理論相對(duì)分子質(zhì)量1062.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.1，[M+4H]4+266.6，[M+5H]5+213.3;calu[M+3H]3+355.0，[M+4H]4+266.6，[M+5H]5+213.3;實(shí)施例24Lys-Thr-(D-Met)-Met-Lys-Gly-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:25);理論相對(duì)分子質(zhì)量1096.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+366.5，[M+4H]4+275.1，[M+5H]5+220.3;calu[M+3H]3+366.5，[M+4H]4+275.0，[M+5H]5+220.2;實(shí)施例25Lys-Thr-(D-Cys)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:26);理論相對(duì)分子質(zhì)量1068.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+357.1，[M+4H]4+268.1，[M+5H]5+214.7;calu[M+3H]3+357.0，[M+4H]4+268.0，[M+5H]5+214.5;實(shí)施例26(D-Lys)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:27);理論相對(duì)分子質(zhì)量1093.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+365.4，[M+4H]4+274.3，[M+5H]5+219.7;calu[M+3H]3+365.4，[M+4H]4+274.5，[M+5H]5+219.5;實(shí)施例27(D-Ala)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:28);理論相對(duì)分子質(zhì)量1036.2.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+365.4，[M+4H]4+274.3，[M+5H]5+219.6;calu[M+3H]3+365.4，[M+4H]4+274.2，[M+5H]5+219.7;實(shí)施例28(D-Val)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1064.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.8，[M+4H]4+267.1，calu[M+3H]3+355.7，[M+4H]4+267.0，[M+5H]5+213.9;實(shí)施例29(D-Leu)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1078.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.4，[M+4H]4+270.6，calu[M+3H]3+360.4，[M+4H]4+270.6，[M+5H]5+216.7;實(shí)施例30(D-Ile)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1078.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.4，[M+4H]4+270.6，calu[M+3H]3+360.4，[M+4H]4+270.6，[M+5H]5+216.8;實(shí)施例31(D-Phe)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1112.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+371.8，[M+4H]4+279.1，calu[M+3H]3+371.7，[M+4H]4+279.0，[M+5H]5+223.5;實(shí)施例32(D-Pro)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1062.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.1，[M+4H]4+266.6，calu[M+3H]3+355.1，[M+4H]4+266.6，[M+5H]5+213.5;實(shí)施例33(D-Met)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1096.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+366.5，[M+4H]4+275.1，calu[M+3H]3+366.5，[M+4H]4+275.0，[M+5H]5+220.3;實(shí)施例34(D-Cys)-Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO對(duì)分子質(zhì)量1068.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+357.1，[M+4H]4+268.1calu[M+3H]3+357.0，[M+4H]4+268.0，[M+5H]5+214.5;實(shí)施例35Lys-(D-Ala)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1063.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+355.4，[M+4H]4+266.8，calu[M+3H]3+355.4，[M+4H]4+266.8，[M+5H]5+213.7;實(shí)施例36Lys-(D-Val)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1091.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+364.8，[M+4H]4+273.8，calu[M+3H]3+364.8，[M+4H]4+273.8，[M+5H]5+219.3;實(shí)施例37Lys-(D-Leu)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:29);理論相對(duì)5+213.9;30);理論相對(duì)5+216.7;31);理論相對(duì)5+216.7;32);理論相對(duì)5+223.5;33);理論相對(duì)5+213.5;:34);理論相對(duì)5+220.3，:35);理論相.[M+5H]5+214.7;36);理論相對(duì)5+213.7;37);理論相對(duì)5+219.3;38);理論相對(duì)分子質(zhì)量1105.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+369.5，[M+4H]4+277.3，calu[M+3H]3+369.5，[M+4H]4+277.2，[M+5H]5+222.2;實(shí)施例38Lys-(D-Ile)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1105.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+369.5，[M+4H]4+277.3，calu[M+3H]3+369.6，[M+4H]4+277.3，[M+5H]5+222.0;實(shí)施例39Lys-(D-Phe)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1139.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+380.8，[M+4H]4+285.8，calu[M+3H]3+380.8，[M+4H]4+285.8，[M+5H]5+228.9;實(shí)施例40Lys-(D-Pro)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1089.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+364.1，[M+4H]4+273.3，calu[M+3H]3+364.0，[M+4H]4+273.3，[M+5H]5+218.9;實(shí)施例41Lys-(D-Met)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1123.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+375.5，[M+4H]4+281.9，calu[M+3H]3+375.7，[M+4H]4+281.9，[M+5H]5+225.5;實(shí)施例42Lys-(D-Cys)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1095.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+366.1，[M+4H]4+274.8，calu[M+3H]3+366.1，[M+4H]4+274.8，[M+5H]5+220.0;實(shí)施例43Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1050.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+351.1，[M+4H]4+263.6，calu[M+3H]3+351.1，[M+4H]4+263.6，[M+5H]5+211.1;實(shí)施例44Lys-Thr-(D-Val)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1078.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+360.5，[M+4H]4+270.6，calu[M+3H]3+360.5，[M+4H]4+270.6，[M+5H]5+216.7;實(shí)施例45Lys-Thr-(D-Leu)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1092.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+365.1，[M+4H]4+274.1，calu[M+3H]3+365.1，[M+4H]4+274.0，[M+5H]5+219.5;實(shí)施例46Lys-Thr-(D-Ile)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1092.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+365.1，[M+4H]4+274.1，calu[M+3H]3+365.1，[M+4H]4+274.0，[M+5H]5+219.6;實(shí)施例475+222.1;39);理論相對(duì)5+222.1;40);理論相對(duì)5+228.9;41);理論相對(duì)5+218.9;:42);理論相對(duì)5+225.7;:43);理論相對(duì)5+220.1;44);理論相對(duì)5+21U;45);理論相對(duì)5+216.7;:46);理論相對(duì)5+219.5;47);理論相對(duì)5+219.5;Lys-Thr-(D-Phe)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1126.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+376.5，[M+4H]4+282.6，calu[M+3H]3+376.6，[M+4H]4+282.7，[M+5H]5+226.3;實(shí)施例48Lys-Thr-(D-Pro)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1076.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+359.8，[M+4H]4+270.1，calu[M+3H]3+359.8，[M+4H]4+270.0，[M+5H]5+216.4;實(shí)施例49Lys-Thr-(D-Met)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1110.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+371.1，[M+4H]4+278.6，calu[M+3H]3+371.0，[M+4H]4+278.6，[M+5H]5+223.1;實(shí)施例50Lys-Thr-(D-Cys)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1082.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+361.8，[M+4H]4+271.6，calu[M+3H]3+361.7，[M+4H]4+271.7，[M+5H]5+217.6;實(shí)施例51Lys-Thr-Gly-Met-Lys-(D-His)-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1102.3.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+368.4，[M+4H]4+276.6，calu[M+3H]3+368.4，[M+4H]4+276.6，[M+5H]5+221.6;實(shí)施例52Lys-Thr-Gly-Met-Lys-(D-Lys)-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:分子質(zhì)量1093.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+365.5，[M+4H]4+274.3，calu[M+3H]3+365.6，[M+4H]4+274.2，[M+5H]5+219.7;實(shí)施例53Lys-Thr-Gly-Met-Lys-(D-Arg)-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO對(duì)分子質(zhì)量1121.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+374.8，[M+4H]4+281.3，225.3;calu[M+3H]3+347.9，[M+4H]4+281.4，[M+5H]5+225.1;實(shí)施例54Lys-Thr-Gly-Met-Lys-(D-Met)-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO分子質(zhì)量1096.4.ESI-MSm/z:found[M+3H]3+366.5，[M+4H]4+275.1，calu[M+3H]3+366.6，[M+4H]4+275.0，[M+5H]5+220.5;實(shí)施例55MC-JJ62及其類似物體內(nèi)降糖活性實(shí)驗(yàn)取IO周齡雄性昆明小鼠(體重lS22g)，隨機(jī)分組，每組6只，氧嘧啶給藥建模，給藥劑量為60mg/kg，72小時(shí)后，小鼠禁食56小時(shí)測(cè)血糖挑選血糖值范圍在1323的小鼠隨機(jī)分組，每組6只。成模后的小鼠連續(xù)10d腹腔注射MC-JJ62多肽及其類似物。在0，30，60，90，120用血糖儀測(cè)定血糖值。如表1所示，MC-JJ62多肽及其類似物的降血糖活性強(qiáng)于二甲雙胍。表1MC-JJ62及其類似物降血糖的效應(yīng)48);理論相對(duì)5+226.3;49);理論相對(duì)5+216.3;50);理論相對(duì)5+223.1;51);理論相對(duì)5+217.5;52);理論相對(duì)5+221.5;53);理論相對(duì)5+219.7;54);理論相5+55);理論相對(duì)5+220.3;尾靜脈注射四17<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>n=6，x±s.*P<0.05，"P<0.01，"*P<0.001vssaline序列表<110>中國(guó)藥科大學(xué)<120>微波促進(jìn)固相合成苦瓜MC-JJ62多肽類似物及其應(yīng)用<160>11<210>1<211>116<212>PRT<213>人工序列<220><221>合成構(gòu)建體<222>(1)..(1)<223>第1位的Xaa是Lys，D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met或D-Cys;<220><221>合成構(gòu)建體<222>(2)..(2)<223>第2位的Xaa是Thr，D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met或D-Cys;<220><221>合成構(gòu)建體<222>(3)..(3)<223>第3位的Xaa是Asn，D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met或D-Cys;<220><221>合成構(gòu)建體<222>(4)..(4)<223>第4位的Xaa是Ala或Gly<400>1<210>2<211>116<212>PRT<213>人工序列<220><221>合成構(gòu)建體<222>(1)..(1)<223>第1位的Xaa是D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met，D-Cys或Lys;<400>2(D-Lys)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>3<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>3(D-Ala)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>4<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>4(D-Val)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>5<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>5(D-Leu)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>6<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>6(D-Ile)Thi.AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>7<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>7(D-Phe)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>8<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>8(D-Pro)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>9<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>9(D-Met)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>10<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>10(D-Cys)ThrAsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>1120<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>11Lys(D-Ala)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>12<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>12Lys(D-Val)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>13<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>13Lys(D-Leu)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>14<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>14Lys(D-Ile)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>15<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>15Lys(D-Phe)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>16<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>16Lys(D-Pro)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>17<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>17Lys(D-Met)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>18<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>18Lys(D-Cys)AsnMetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>19<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>19LysThr(D-Ala)MetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>20<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>20LysThr(D-Val)MetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>21<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>21LysThr(D-Leu)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>22<211>11CN<212>PRT<213>人工序列<400>22LysThr(D-Ile)MetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>23<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>23LysThr(D-Phe)MetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>24<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>24LysThr(D-Pro)MetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>25<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>25LysThr(D-Met)MetLysGlyMetAlaGlyAlaAla1510<210>26<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>26LysThr(D-Cys)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>27<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>27(D-Lys)ThrAnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla231510<210>28<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>28(D-Ala)ThrAnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>29<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>29(D-Val)Thi.AnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>30<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>30(D-Leu)ThrAnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>31<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>31(D-Ile)ThrAnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>32<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>32(D-Phe)Thi.AnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>33<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>33(D-Pro)ThrAnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>34<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>34(D-Met)Thi.AnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>35<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>35(D-Cys)ThrAnsMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>36<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>36Lys(D-Ala)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>37<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>37Lys(D-Val)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>38<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>38Lys(D-Leu)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>39<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>39Lys(D-Ile)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>40<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>40Lys(D-Phe)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>41<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>41Lys(D-Pro)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>42<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>42Lys(D-Met)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>43<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>43Lys(D-Cys)AsnMetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>44<211>11<212>PRT<213>人工序列26<400>44LysThr(D-Ala)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>45<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>45LysThr(D-Val)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>46<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>46LysThr(D-Leu)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>47<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>47LysThr(D-Ile)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>48<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>48LysThr(D-Phe)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>49<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>49LysThr(D-Pro)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>50<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>50LysThr(D-Met)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>51<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>51LysThr(D-Cys)MetLysAlaMetAlaGlyAlaAla1510<210>52<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>52LysThrGlyMetLys(D-His)MetAlaGlyAlaAla1510<210>53<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>53LysThrGlyMetLys(D-Lys)MetAlaGlyAlaAla1510<210>54<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>54LysThrGlyMetLys(D-Arg)MetAlaGlyAlaAla1510<210>55<211>11<212>PRT<213>人工序列<400>55LysThrGlyMetLys(D-Met)MetAlaGlyAlaAla1510權(quán)利要求一種具有降血糖活性的含有式I(SEQ.IDNO1)結(jié)構(gòu)的苦瓜MC-JJ62多肽類似物，得到的苦瓜MC-JJ62多肽類似物；其特征在于其結(jié)構(gòu)具有以下形式Xaa1-Xaa2-Xaa3-Met-Lys-Xaa4-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO1)Xaa1Lys，D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met或D-Cys；Xaa2Thr，D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met或D-Cys；Xaa3Asn，D-Lys，D-Ala，D-Val，D-Leu，D-IleD-Phe，D-Pro，D-Met或D-Cys；Xaa4Ala或Gly。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽，具有如下序列(D-Lvs)-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:2)(D-AlaVThr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:3)(D-Val)-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:4)(D-Leu)-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:5)(D-Ile)-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:6)(D-Phe)Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:7)(D-ProVThr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:8)(D-MetVThr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:9)(D-Cvs)-Thr-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:10)Lys-(D-Ala)-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:11)Lvs-rD-Val)-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:12)Lvs-(D-LeuVAsn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:13)Lvs-(D-IleVAsn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:14)Lvs-(D-Phe)-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:15)Lvs-(D-Pro)-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:16)Lys-(D-Met)-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:17)Lvs-(D-Cvs)-Asn-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:18)Lvs-Thr-(D-AlaVMet-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:19)Lvs-Thr-(D-Val)-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:20)Lvs-Thr-(D-Leu)-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:21)Lvs-Thr-rD-Ile)-Met-Lvs-Glv-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:22)Lys-Thr-(D-PheVMet-Lvs-Glv-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:23)Lvs-Thr-(D-Pro)-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:24)Lvs-Thr-(D-Met)-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:25)Lvs-Thr-(D-CvsVMet-Lvs-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:26)(D-Lvs)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:27)(D-Ala)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:28)(D-Val)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:29)(D-Leu)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:30)(D-Ile)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:31)(D-Phe)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:32)(D-Pro)Thr-Ans-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:33)(D-Met)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:34)m-Cvs)Thr-Ans-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:35)Lvs-(D-Ala)-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:36)Lvs-rD-ValVAsn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:37)Lvs-rD-LeuVAsn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:38)Lys-(D-Ile)-Asn-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:39)Lvs-(D-Phe)-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:40)Lvs-rD-ProVAsn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO41)Lvs-(D-Met)-Asn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:42)Lvs-rD-CvsVAsn-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:43)Lys-Thr-(D-Ala)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:44)Lys-Thr-(D-Val)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:45)Lvs-Thr-rD-LeuVMet-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO46)Lys-Thr-(D-Ile)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala〔SEQ.IDNO:47)Lvs-Thr-rD-PheVMet-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:48)Lys-Thr-(D-Pro)-Met-Lys-Ala-Met-Ala-Gly-Ala-Ala(SEQ.IDNO:49)Lvs-Thr-rD-MeO-Met-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO50)Lvs-Thr-rD-CvsVMet-Lvs-Ala-Met-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO51)Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-(D-HisVMet-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:52)Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-①-LvsVMet-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:53)Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-rD-ArpVMet-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO54)Lvs-Thr-Glv-Met-Lvs-①-MetVMet-Ala-Glv-Ala-Ala(SEQ.IDNO:55)。3.—種藥物組合物，包括治療有效量的權(quán)利要求1中所述的MC-JJ62多肽類似物或者其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。4.權(quán)利要求1中所述的MC-JJ62多肽類似物或者其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑在制備用于治療糖尿病的藥物中的運(yùn)用。5.權(quán)利要求1中所述的MC-JJ62多肽類似物的制備方法，其特征在于采用微波促進(jìn)Fmoc/tBu正交保護(hù)固相合成策略，于固相載體上先合成得到載有第一個(gè)Fmoc保護(hù)氨基酸的樹脂，茚三酮法檢測(cè)為陰性后脫去Fmoc保護(hù)基得到載有第一個(gè)氨基酸殘基的樹脂；再進(jìn)入下一個(gè)偶聯(lián)循環(huán)，按照相應(yīng)的肽序用不同的保護(hù)氨基酸重復(fù)偶聯(lián)和脫保護(hù)的步驟，依次延長(zhǎng)所需的氨基酸序列，合成得到載有相應(yīng)多肽的樹脂，最后用裂解劑將多肽從樹脂上切割下來得到多肽粗品。粗品經(jīng)制備級(jí)高效液相色譜純化，凍干得多肽純品。6.根據(jù)權(quán)利要求5中所述微波促進(jìn)固相合成MC-JJ62多肽類似物方法，其特征是載有第一個(gè)Fmoc保護(hù)氨基酸的樹脂的制備方法，是通過在微波照射條件下Fmoc保護(hù)氨基酸先經(jīng)活化劑活化后再與固相載體偶合得到，反應(yīng)中加入1-羥基-苯并三氮唑(HOBT)或其衍生物抑制消旋，并使用有機(jī)堿中和反應(yīng)的酸性。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的載有第一個(gè)Fmoc保護(hù)氨基酸的樹脂的制備方法，其特征在于使用的固相載體是Rink樹脂、Wang樹脂或2-氯三苯甲基氯樹脂；使用的活化劑是二環(huán)己基碳二亞胺(DCQ、N，N'-二異丙基碳二亞胺(DIC)、N，N〃-羰基二咪唑(CDI)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)或6-氯苯并三氮唑-l，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU);使用的1-羥基-苯并三氮唑(HOBT)衍生物為N-羥基琥珀酰亞胺(HOSU)、l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)或3-羥基-l，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮(HOOBT);使用的有機(jī)堿為三乙胺(TEA)、N-甲基嗎啉(NMM)或二異丙基乙胺(DIEA);微波促進(jìn)條件是磁控管頻率2450MHz，反應(yīng)溫度20100°C，反應(yīng)時(shí)間為515min。8.根據(jù)權(quán)利要求5中所述微波促進(jìn)固相合成MC-JJ62多肽類似物合成方法，其特征是Fmoc保護(hù)基的脫除是通過使用含有0.1mol丄—1的1-羥基-苯并三氮唑(HOBT)的六氫吡啶溶液在微波促進(jìn)下反應(yīng)，選用二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亞砜(DMSO)、或N-甲基吡咯烷酮(NMP)為反應(yīng)溶劑；微波促進(jìn)條件是磁控管頻率2450MHz，反應(yīng)溫度20100°C，反應(yīng)時(shí)間為1lOmin。全文摘要本發(fā)明涉及新型高效降血糖苦瓜MC-JJ62多肽類似物及其微波促進(jìn)固相合成方法。通過對(duì)天然苦瓜多肽的2，4，5，8或9位點(diǎn)進(jìn)行改造得到具有更長(zhǎng)藥理作用時(shí)間的MC-JJ62多肽類似物；其化學(xué)合成是通過微波促進(jìn)固相合成方法而得以高效快速實(shí)現(xiàn)，粗品經(jīng)制備級(jí)高效液相純化，最后凍干得到MC-JJ62多肽類似物。文檔編號(hào)A61P3/10GK101691395SQ20091018332公開日2010年4月7日申請(qǐng)日期2009年9月17日優(yōu)先權(quán)日2009年9月17日發(fā)明者張惠斌,朱孝云,王敬杰,紀(jì)劍峰,金晶,錢海,陳巍,陳鑫,黃文龍申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)