專利名稱：提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物，尤其是涉及一種可有效提高畜禽免疫力的中藥組合
物的制備方法及其應(yīng)用。背景技術(shù)：
目前，隨著畜禽生產(chǎn)規(guī)?；彤a(chǎn)業(yè)化，養(yǎng)殖集約化程度越來越高，應(yīng)激綜合癥發(fā)生率不斷上升。在畜禽生產(chǎn)過程中，轉(zhuǎn)群、運(yùn)輸、捕捉、接種免疫等工作中都難免會出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)、免疫力下降。 如蛋雞在夏季高溫季節(jié)是養(yǎng)雞生產(chǎn)最困難的時(shí)期，氣溫高于33t:時(shí)，蛋雞的正常生產(chǎn)受到嚴(yán)重影響，產(chǎn)蛋率下降，死亡率和雞蛋破損率上升。 再如仔豬斷奶是一個(gè)復(fù)合應(yīng)激過程，包括仔豬與母豬隔離、新群體的形成、從吃母乳轉(zhuǎn)為飼料、環(huán)境小氣候改變等因素。斷奶引起的應(yīng)激較強(qiáng)，常常伴有消化系統(tǒng)紊亂、免疫功能下降、嚴(yán)重腹瀉、生長停滯、甚至死亡，給生產(chǎn)上造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。所以研究克服上述問題成為制藥行業(yè)和飼養(yǎng)戶的專注方向之一。 中草藥剌五加為五加科植物，剌五加的干燥根、根莖或莖，具有益氣健脾，補(bǔ)腎安神的功能?，F(xiàn)代藥理表明剌五加總苷具類似人參皂苷的生物活性，可改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疲勞狀態(tài)，調(diào)節(jié)機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)水平；剌五加多糖能增強(qiáng)小鼠對SRBC(羊紅細(xì)胞)的特異性體液免疫的反應(yīng)性，表現(xiàn)為脾抗體分泌細(xì)胞明顯增加；能特異地增強(qiáng)小鼠的細(xì)胞免疫功能，表現(xiàn)為遲發(fā)型超敏反應(yīng)性增強(qiáng)，藥物對自溶空斑實(shí)驗(yàn)(PFC)的免疫增強(qiáng)作用，在12. 5 100mg/kg劑量范圍內(nèi)，隨劑量增加而增強(qiáng)能增強(qiáng)小鼠體液免疫及細(xì)胞免疫的功能。
中草藥黃芪，豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，具有補(bǔ)氣固表，托毒排膿，斂瘡生肌，利尿的功能?，F(xiàn)代藥理表明黃芪多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗病毒的作用。黃芪多糖可用作雞疫苗的免疫佐劑提高雞的免疫力，黃芪多糖對雞傳染性喉氣管炎具有明顯的預(yù)防和治療效果。 目前含有剌五加、黃芪組方主要是針對其中的多糖類成分，多采用水煮醇沉的方法獲取其中的多糖類成分，應(yīng)用于免疫增強(qiáng)、抗病毒、抗腫瘤等方面；而其中的剌五加總苷在提取的過程中由于工藝的原因會損失大部分，甚至?xí)霈F(xiàn)一點(diǎn)也未提取出來的現(xiàn)象；所以未能充分利用其中的藥效成分，造成了資源的浪費(fèi)。中國專利CN1424057A公開了剌五加和黃芪兩者藥材的組合經(jīng)過水提醇沉，僅獲取了剌五加和黃芪粗多糖，而具有抗應(yīng)激作用的剌五加總苷未得到利用。中國專利CN1285344C公開了剌五加藥材利用醇水雙提法分別提取剌五加的總苷成分和多糖成分，對總苷類成分采用大孔吸附樹脂柱純化精制，提取物采用水溶解、離心后的上清液經(jīng)過大孔樹脂柱純化，雖然解決了上提取液中的微粒污染和堵塞大孔樹脂柱的問題，但是容易導(dǎo)致部分溶水性較小的苷類成分的損失。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服背景技術(shù)中的不足，本發(fā)明提出一種提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法及其應(yīng)用，本發(fā)明所述方法采用醇提法和水提法相結(jié)合的技術(shù)方案提取剌五加總
苷、剌五加多糖和黃芪多糖，醇提物利用大孔吸附樹脂純化得剌五加總苷類成分；水提醇沉
法獲取剌五加及黃芪總多糖類成分；將剌五加總苷、剌五加及黃芪總多糖加入賦形劑，經(jīng)過
常規(guī)工序或加入藥物可接受的賦形劑制成臨床可接受的劑型。 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案 —種提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，包含如下步驟①取剌五加，粉碎過10-20目，加8 12倍量60-80%乙醇動(dòng)態(tài)浸漬1小時(shí)，回流
提取3小時(shí)，提取液放置過夜，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加低濃度乙醇制成lg生藥/
ml，離心，上清液加于大孔吸附樹脂柱上，先用水洗脫至Molisch反應(yīng)陰性，依次用2 4倍
量柱體積的20 % -40 %乙醇、用4 8倍量柱體積的70 % -80 %乙醇洗脫，收集20 % -40 %
乙醇、70% _80%乙醇洗脫部位，合并得剌五加總苷； ②取黃芪，切片，連同乙醇提取后剌五加藥渣混合，加8 12倍量水動(dòng)態(tài)浸漬2小時(shí)，60 8(TC真空動(dòng)態(tài)提取4小時(shí)，收集提取液，將提取液與步驟①水洗脫液合并濃縮至相對密度1.05-1. 1(70°C )，在攪拌下加乙醇，使含醇量達(dá)85%，攪拌均勻后于4t:冷藏12至24小時(shí)，濾過，沉淀加2-3倍量水溶解，濾過，濾液在攪拌下加乙醇使含醇量達(dá)50% ，攪拌均勻后于4t:冷藏12至24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇得總多糖； ③將步驟①剌五加總苷與步驟②總多糖合并，加入0. 01 3%防腐劑，加純化水至全量10kg，混勻，4t:冷藏12-24小時(shí)，濾過，灌裝，滅菌制成口服液；或?qū)⒉襟E①、②合并，加入蔗糖、糊精，攪拌均勻，用沸騰干燥制粒機(jī)制成10kg顆粒；或?qū)⒉襟E①剌五加總苷與步驟②總多糖合并，加入蔗糖、糊精，攪拌均勻，制粒，加入0. 5 5%硬脂酸鎂，壓片；或?qū)⒉襟E②得到的總多糖加3 10倍量注射用水沉淀，濾過，濾液與步驟①剌五加總苷合并，加注射用水至約全量，加注射用水至全量10kg，加活性炭0. 2 %煮沸20min，濾過，灌裝，滅菌制成注射液。 本發(fā)明提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其所述的剌五加總苷的制備采用醇提后，利用大孔吸附樹脂分離，所采用的大孔樹脂為AB-8、 HPD-IOO、 HPD-300、 D101等非極性或弱極性大孔吸附樹脂。 本發(fā)明提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其所述的總多糖的制備采用水提法，提取液與剌五加提取物過大孔樹脂柱水洗脫液合并后醇沉，收集沉淀得總多糖。
本發(fā)明提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，在制備剌五加總苷時(shí)，上大孔樹脂柱是樣品用低濃度乙醇溶解，離心后再上樣，所述的低濃度乙醇為濃度小于10%。
本發(fā)明提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，所述制備組合物顆粒、片劑時(shí)，蔗糖與糊精的用量比為2 1 : 1。 本發(fā)明所述具有免疫增強(qiáng)功能的中藥組合物的應(yīng)用。 本發(fā)明所述具有免疫增強(qiáng)功能的中藥組合物的應(yīng)用為注射液。 本發(fā)明所述具有免疫增強(qiáng)功能的中藥組合物的應(yīng)用適用于肉蛋雞、仔豬、鴨及畜禽類。 本發(fā)明所述具有免疫增強(qiáng)功能的中藥組合物的應(yīng)用為口服液用量為l 2g兌lkg水、顆粒用量為為1 2g兌lkg水、片劑用量為1片/羽，注射液豬用量為0. lml/kg、鴨0. 1 0. 2ml/kg。
由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明具有如下有益效果 1.醇提法和水提法相結(jié)合的技術(shù)方案，將剌五加中增強(qiáng)免疫作用的成分剌五加總苷、剌五加多糖同時(shí)提取出來。 2.本發(fā)明純化剌五加總苷時(shí)提取物用低濃度乙醇溶解，解決了上提取液中的微粒污染和堵塞大孔樹脂柱的問題，減少溶水性較小的苷類成分的損失。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1 ①取剌五加5kg，粉碎過10目，加10倍量60%乙醇動(dòng)態(tài)浸漬1小時(shí)，回流提取3小時(shí)，提取液放置過夜，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加10%乙醇制成lg生藥/ml，離心，上清液加于大孔吸附樹脂柱上，先用水洗脫至Molisch反應(yīng)陰性，依次用2倍量柱體積的20%乙醇、4倍量柱體積的80%乙醇洗脫，收集20、80%乙醇洗脫部位，合并得剌五加總苷；
②取黃芪3kg，切片，連同乙醇提取后剌五加藥渣混合，加10倍量水動(dòng)態(tài)浸漬2小時(shí)，7(TC真空動(dòng)態(tài)提取4小時(shí)，收集提取液，將提取液與剌五加過大孔樹脂柱水洗脫液合并后濃縮至相對密度1. 05 (70°C )，在攪拌下加乙醇，使含醇量達(dá)85% ，攪拌均勻后于4t:冷藏12至24小時(shí)，濾過，沉淀加2-3倍量水溶解，濾過，濾液在攪拌下加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪拌均勻后于4。C冷藏12小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇得總多糖； ③合并剌五加總苷及總多糖，加入山梨酸鉀15g，加純化水至全量10kg，混勻，4t:冷藏12小時(shí)，濾過，灌裝，滅菌制成口服液。
實(shí)施例2 ①取剌五加7kg，粉碎過20目，加10倍量70%乙醇動(dòng)態(tài)浸漬1小時(shí)，回流提取3小時(shí)，提取液放置過夜，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加5%乙醇制成lg生藥/ml，離心，上清液加于大孔吸附樹脂柱上，先用水洗脫至Molisch反應(yīng)陰性，依次用4倍量柱體積的30X乙醇、8倍量柱體積的80%乙醇洗脫，收集30、80%乙醇洗脫部位，合并得剌五加總苷；
②取黃芪4kg，切片，連同乙醇提取后剌五加藥渣混合，加10倍量水動(dòng)態(tài)浸漬2小時(shí)，《7(TC真空動(dòng)態(tài)提取4小時(shí)，收集提取液，將提取液與剌五加過大孔樹脂柱水洗脫液合并后濃縮至相對密度1. 10(70°C )，在攪拌下加乙醇，使含醇量達(dá)85X，攪拌均勻后于4t:冷藏12至24小時(shí)，濾過，沉淀加2-3倍量水溶解，濾過，濾液在攪拌下加乙醇使含醇量達(dá)50X，攪拌均勻后于4。C冷藏24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇得總多糖； ③合并剌五加總苷及總多糖，加入蔗糖-糊精(1 : 1)，攪拌均勻，制成10kg顆粒。
實(shí)施例3 ①取剌五加6kg，粉碎過20目，加12倍量80%乙醇動(dòng)態(tài)浸漬1小時(shí)，回流提取3小時(shí)，提取液放置過夜，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加10%乙醇制成lg生藥/ml，離心，上清液加于大孔吸附樹脂柱上，先用水洗脫至Molisch反應(yīng)陰性，依次用2倍量柱體積的30%乙醇、6倍量柱體積的70%乙醇洗脫，收集30、70%乙醇洗脫部位，合并得剌五加總苷；
②取黃芪2kg，切片，連同乙醇提取后剌五加藥渣混合，加12倍量水動(dòng)態(tài)浸漬2小時(shí)，《7(TC真空動(dòng)態(tài)提取4小時(shí)，收集提取液，將提取液與剌五加過大孔樹脂柱水洗脫液合并后濃縮至相對密度1.08(70°C )，在攪拌下加乙醇，使含醇量達(dá)85X，攪拌均勻后于4t:冷藏12至24小時(shí)，濾過，沉淀加2-3倍量水溶解，濾過，濾液在攪拌下加乙醇使含醇量達(dá)50X，攪拌均勻后于4。C冷藏12小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇得總多糖； ③合并剌五加總苷及總多糖，加入蔗糖-糊精(2 : 1)，攪拌均勻，制粒，加入2% 硬脂酸鎂，壓片，lg/片，制成10kg。
實(shí)施例4 ①取剌五加7kg，粉碎過10目，加8倍量80%乙醇動(dòng)態(tài)浸漬1小時(shí)，回流提取3小 時(shí)，提取液放置過夜，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加5%乙醇制成lg生藥/ml，離心，上 清液加于大孔吸附樹脂柱上，先用水洗脫至Molisch反應(yīng)陰性，依次用2倍量柱體積的40X 乙醇、4倍量柱體積的80%乙醇洗脫，收集40、80%乙醇洗脫部位，合并得剌五加總苷；
②取黃芪3kg，切片，連同乙醇提取后剌五加藥渣混合，加8倍量水動(dòng)態(tài)浸漬2小 時(shí)，《7(TC真空動(dòng)態(tài)提取4小時(shí)，收集提取液，將提取液與剌五加過大孔樹脂柱水洗脫液合 并后濃縮至相對密度1.05(70°C )，在攪拌下加乙醇，使含醇量達(dá)85X，攪拌均勻后于4t: 冷藏12至24小時(shí)，濾過，沉淀加2-3倍量水溶解，濾過，濾液在攪拌下加乙醇使含醇量達(dá) 50%，攪拌均勻后于4。C冷藏12小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇得總多糖； ③合并剌五加總苷及總多糖，加注射用水至約全量，加注射用水至全量10kg，加活 性炭0. 2%煮沸20min，濾過，灌裝，滅菌制成注射液。
權(quán)利要求
一種提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其特征在于；所述制備方法包含如下步驟①、取刺五加，粉碎過10-20目，加8～12倍量60-80％乙醇動(dòng)態(tài)浸漬1小時(shí)，回流提取3小時(shí)，提取液放置過夜，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加低濃度乙醇制成1g生藥/ml，離心，上清液加于大孔吸附樹脂柱上，先用水洗脫至Molisch反應(yīng)陰性，依次用2～4倍量柱體積的20％-40％乙醇、用4～8倍量柱體積的70％-80％乙醇洗脫，收集20％-40％乙醇、70％-80％乙醇洗脫部位，合并得刺五加總苷；②、取黃芪，切片，連同乙醇提取后刺五加藥渣混合，加8～12倍量水動(dòng)態(tài)浸漬2小時(shí)，60～80℃真空動(dòng)態(tài)提取4小時(shí)，收集提取液，將提取液與步驟①水洗脫液合并濃縮至相對密度1.05-1.1(70℃)，在攪拌下加乙醇，使含醇量達(dá)85％，攪拌均勻后于4℃冷藏12至24小時(shí)，濾過，沉淀加2-3倍量水溶解，濾過，濾液在攪拌下加乙醇使含醇量達(dá)50％，攪拌均勻后于4℃冷藏12至24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇得總多糖；③、將步驟①刺五加總苷與步驟②總多糖合并，加入0.01～3％防腐劑，加純化水至全量10kg，混勻，4℃冷藏12-24小時(shí)，濾過，灌裝，滅菌制成口服液；或?qū)⒉襟E①、②合并，加入蔗糖、糊精，攪拌均勻，用沸騰干燥制粒機(jī)制成10kg顆粒；或?qū)⒉襟E①刺五加總苷與步驟②總多糖合并，加入蔗糖、糊精，攪拌均勻，制粒，加入0.5～5％硬脂酸鎂，壓片；或?qū)⒉襟E②得到的總多糖加3～10倍量注射用水沉淀，濾過，濾液與步驟①刺五加總苷合并，加注射用水至約全量，加注射用水至全量10kg，加活性炭0.2％煮沸20min，濾過，灌裝，滅菌制成注射液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其特征在于；所 述的剌五加總苷的制備采用醇提后，利用大孔吸附樹脂分離，所采用的大孔樹脂為AB-8、 HPD-IOO、 HPD-300、 D101等非極性或弱極性大孔吸附樹脂。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其特征在于；其 所述的總多糖的制備采用水提法，提取液與剌五加提取物過大孔樹脂柱水洗脫液合并后醇 沉，收集沉淀得總多糖。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其特征在于；在 制備剌五加總苷時(shí)，上大孔樹脂柱是樣品用低濃度乙醇溶解，離心后再上樣，所述的低濃度 乙醇為濃度小于10%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，其特征在于；所 述制備組合物顆粒、片劑的蔗糖與糊精的用量比為2 1 : 1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的應(yīng)用。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的應(yīng)用，其特征在于；所述中 藥組合物為注射液。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的應(yīng)用，其特征在于；所述中 藥組合物適用于肉蛋雞、仔豬、鴨及畜禽類。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的提高畜禽免疫力的中藥組合物的應(yīng)用，其特征在于；口服液 用量為1 2g兌lkg水、顆粒用量為為1 2g兌lkg水、片劑用量為1片/羽，注射液豬 用量為0. lml/kg、鴨0. 1 0. 2ml/kg。
全文摘要
一種提高畜禽免疫力的中藥組合物的制備方法，涉及一種中藥組合物；所述制備方法包含如下步驟取刺五加經(jīng)過粉碎過目，加乙醇動(dòng)態(tài)浸漬，回流提取，上清液減壓回收乙醇至無醇味，加低濃度乙醇制成生藥，離心，上清液加于大孔吸附樹脂柱上，用水洗脫反應(yīng)陰性，依次乙醇乙醇洗脫，收集乙醇、乙醇洗脫部位，合并得刺五加總苷；取黃芪，連同乙醇提取后刺五加藥渣混合，濾過，濾液回收乙醇得總多糖；將刺五加總苷與總多糖合并，灌裝，滅菌制成注射液；本發(fā)明采用醇提法和水提法相結(jié)合的技術(shù)方案提取刺五加總苷、刺五加多糖和黃芪多糖；將刺五加總苷、刺五加及黃芪總多糖加入賦形劑，經(jīng)過常規(guī)工序或加入藥物可接受的賦形劑制成臨床可接受的劑型。
文檔編號A61P37/04GK101703567SQ20091017230
公開日2010年5月12日 申請日期2009年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月28日
發(fā)明者劉興金, 李興國 申請人:洛陽惠中獸藥有限公司