專利名稱：一種治療肝膽濕熱證的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種中藥組合物，特別是涉及一種治療肝膽濕熱證的中藥組 合物。
背景技術(shù)：
急性病毒性肝炎主要由嗜肝的肝炎病毒A、 B、 C、 D、 E所引起；一些非特 異嗜肝的病毒，如巨細(xì)胞病毒、Epstain-Barr病毒、單純皰疹病毒等亦可引起肝 炎，但少見。我國(guó)目前發(fā)生的急性病毒性肝炎主要是甲型肝炎；病毒性肝炎可 分為腸傳性的傳染性肝炎和血傳性的血清性肝炎，腸傳性的肝炎病變自限，血 傳性的可發(fā)展為慢性肝炎。
中醫(yī)認(rèn)為，急性肝炎治療的重點(diǎn)在于祛邪。濕熱與疫毒是致病的外因，而 肝、脾、腎三臟功能的失調(diào)，或氣血兩虛是發(fā)病的主要內(nèi)因。急性肝炎大多屬 實(shí)證，雖然有臟腑功能失調(diào)和氣血變化，但其特點(diǎn)是"邪盛正未衰"。因此，治 療的重點(diǎn)在于祛邪。在臨床上，常可見到全身倦怠、乏力氣短、納呆、腰膝酸 軟等虛弱之象，然而這是由于濕熱之邪所致，乃"因病而虛"，正氣并未衰弱，切 不可一見虛象即妄投補(bǔ)劑，以免助濕助熱，造成"閉門留寇"之患，應(yīng)當(dāng)把祛邪作 為治療重點(diǎn)，"祛邪即以扶正"。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療肝膽濕熱證的中藥組合物。 本發(fā)明的另一目的是提供一種治療肝膽濕熱證的中藥組合物的制備方法。 本發(fā)明的目的還在于提供一種中藥組合物在制備治療急性甲型肝炎藥物中 的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的還在于提供一種中藥組合物在制備治療急性乙型肝炎藥物中 的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的-
本發(fā)明所述的治療肝膽濕熱證的中藥組合物，由以下重量份配比的原料藥制成
黃連30-500重量份、赤芍20-400重量份、蓮子心5-200重量份、大黃15-300 重量份。
本發(fā)明所述的治療肝膽濕熱證的中藥組合物，由以下重量份配比的原料藥 制成
黃連30-500重量份、赤芍20-400重量份、蓮子心5-200重量份、大黃15-300 重量份、海金沙5-200重量份、青黛1-300重量份。
上述中藥組合物優(yōu)選以下重量份配比的原料藥制成
黃連200-450重量份、赤芍100-300重量份、蓮子心20-150重量份、大黃 50-250重量份、海金沙10-100重量份、青黛10-200重量份。 上述中藥組合物優(yōu)選以下重量份配比的原料藥制成
黃連300-400重量份、赤芍150-250重量份、蓮子心50-100重量份、大黃 15-300重量份、海金沙30-100重量份、青黛50-150重量份。 上述中藥組合物優(yōu)選以下重量份配比的原料藥制成
黃連376重量份、赤芍200重量份、蓮子心86重量份、大黃169重量份、 海金沙56重量份、青黛113重量份。
上述中藥藥組合物的制備方法包括以下步驟
a、 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加10 16倍量水煎煮2 4次， 每次1 3小時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；
b、 大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，備用；
c、將步驟a所得干浸膏細(xì)粉與步驟b所得藥材細(xì)粉，混合均勻，按常規(guī)的制 劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、'凝膠 劑、緩釋劑、口服液。
上述步驟a優(yōu)選為將粗粉加12倍量水煎煮3次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并 煎液，濃縮至50'C時(shí)相對(duì)密度為1.08 1.14的浸膏，50 7(TC干燥。
上述步驟a優(yōu)選為噴霧干燥。
為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的輔料，例如填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、 基質(zhì)等。填充劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維 素、蔗糖等；崩解劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、 交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包 括硬脂酸鎂、十二垸基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括聚乙烯 吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀 粉槳、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括糖精鈉、阿斯帕 坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括甜味劑及各種香精；防腐劑包 括尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、 桉葉油等；基質(zhì)包括PEG6000， PEG4000，蟲蠟等。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)中 藥藥劑學(xué)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的其它輔料。
本發(fā)明還提供上述中藥組合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括如下含量 測(cè)定和/或鑒別中的一種或幾種
含量測(cè)定:照高效液相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；20-40: 60-80: 0. 1乙腈-O. 05mol/L磷酸二氫鉀-三乙胺 為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為348nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000;
對(duì)照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含4(Htg的溶 液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取組合物制劑O. lg，精密稱定，置100ml量瓶中，加 1: 100鹽酸-甲醇溶液約80ml，超聲處理20-40分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻 度，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液；
'測(cè)定法:分別精密S取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5W，注入液相色譜儀， 測(cè)定，即得；組合物制劑含黃連以鹽酸小檗堿(C20H17N04'HCL)計(jì)，不得少 于3. 6%;
鑒別A:取組合物制劑50mg，加甲醇5ml，加熱回流10-20分鐘，濾過(guò)，濾 液補(bǔ)加甲醇使成5ml，作為供試品溶液；另取黃連對(duì)照藥材，同法制成對(duì)照藥材 溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各1W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄 層板上，以5-7: 2-4: 1-3: 1-3: 0.2-0.5的甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水 為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光下 檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑 點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)；
鑒別B:取組合物制劑0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸 干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制 成lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶 液各4W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以35-50: 4-6: 8-12: 0.2三氯甲烷 -乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液， 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。
本發(fā)明上述中藥組合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法優(yōu)選包括如下含量測(cè) 定和/或鑒別中的一種或幾種
含量測(cè)定照高效液相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八垸基硅 垸鍵合硅膠為填充劑；28: 72: 0. 1乙腈_0. 05mol/L磷酸二氫鉀-三乙胺為流動(dòng) 相；檢測(cè)波長(zhǎng)為348nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000;
對(duì)照品溶液的制備精密稱取6(TC減壓干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適 量，加甲醇制成每lml含40l^g的溶液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取組合物制劑0.1g，精密稱定，置100ml量瓶中，加 1: 100鹽酸-甲醇溶液約80ml，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度， 搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液； '"\
測(cè)定法:分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5W，注入液相色譜儀， 測(cè)定，即得；組合物制劑含黃連以鹽酸小檗堿(C20H17N04*HCL)計(jì)，不得少 于3. 6%;
鑒別A:取組合物制劑50mg，加甲醇5ml，加熱回流15分鐘，濾過(guò)，濾液 補(bǔ)加甲醇使成5ml，作為供試品溶液；另取黃連對(duì)照藥材，同法制成對(duì)照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品 溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各1W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，以6: 3: 1.5: 1.5: 0.3的甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為展開劑， 置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光下檢視；供試 品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì) 照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)；
鑒別B:取組合物制劑0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸 干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制 成lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶 液各4W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以40: 5: 10: 0.2三氯甲烷-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至
斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫 色斑點(diǎn)。
本發(fā)明藥物組合物處方中黃連清熱燥濕，瀉火解毒；赤芍清熱涼血，散瘀 止痛；蓮子心清心安神，交通心腎，澀精止血；大黃瀉熱通腸，涼血解毒，逐 瘀通經(jīng)；海金沙清利濕熱，通淋止痛；青黛清熱解毒，涼血，定驚。全方共奏 清熱解毒，利濕化痰之效。用于急性甲、乙型肝炎屬于肝膽濕熱證者，癥見協(xié) 肋脹痛，煩熱口苦，惡心納呆，腕悶腹脹，神倦乏力，小便黃赤。
下述實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。 實(shí)驗(yàn)例1藥效學(xué)試驗(yàn)
一、本發(fā)明藥物對(duì)硫代乙酰胺所致急性肝損傷的保護(hù)作用
r材料與方法
1. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用SD大鼠40只，體重200~-220g，雌雄兼用，清潔級(jí)。 1. 2試驗(yàn)藥物；本發(fā)明藥物，按照實(shí)施例l成功制備的本發(fā)明中藥組合物膠囊 劑。陽(yáng)性對(duì)照藥物，市售清肝毒膠囊，由杭州靈丹王藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥 準(zhǔn)字Z20030010。
1. 3主要試劑硫代乙酰胺，由北京化學(xué)試劑公司提供；戊巴比妥鈉，北京通縣育才精細(xì)化工廠生產(chǎn)；鱟試劑盒，由上海伊化臨床醫(yī)學(xué)科技公司(上海市醫(yī)學(xué) 化驗(yàn)所)提供；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、天門冬氨酸基轉(zhuǎn)換酶(AST)試劑盒由 Roche公司提供；腫瘤壞死因子一 Ot(TNF-n)放免試劑盒由北京北方生物技術(shù)研
究所提供。
1. 4主要儀器Reicheit-Jung2040切片機(jī)德國(guó)；BH-2光學(xué)顯微鏡Olympus， 日本；Qwin圖像分析系統(tǒng)Leica，德國(guó)；752C紫外可見分光光度計(jì)；上海第 三分析儀器廠；GC-91 1放射免疫計(jì)數(shù)器中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實(shí)業(yè)總公司； 日立7170全自動(dòng)生物分析儀日本。
1.5分組及處理將40只大鼠隨機(jī)分為4組正常對(duì)照組10只、模型組10只、 本發(fā)明藥物組IO只、陽(yáng)性對(duì)照組10只。本發(fā)明藥物按照0.27g / kg體重給予 灌胃，1小時(shí)后腹腔注射硫代乙酰胺(TAA)600mg/kg體重，分別于6小時(shí)、12 小時(shí)后再次灌胃給予本發(fā)明藥物。陽(yáng)性對(duì)照藥物按照0.27 g/ kg體重給予灌胃， 1小時(shí)后腹腔注射硫代乙酰胺(TAA)600mg/kg體重，分別于6小時(shí)、12小時(shí)后 再次灌胃給予陽(yáng)性對(duì)照藥物。模型組灌胃給予同容積的蒸餾水，1小時(shí)后腹腔注 射TAA，劑量同上，分別于6小時(shí)、12小時(shí)后再次灌胃給予蒸餾水。正常對(duì)照 組腹腔注射等量的生理鹽水。注射24小時(shí)后，將各組大鼠以45mg/kg體重的 戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，于腹主動(dòng)脈無(wú)菌取血，分離血清、血漿，分別用于 ALT 、 AST、 TNF以及內(nèi)毒素含量的測(cè)定。取肝臟，用10%甲醛固定。
1. 6指標(biāo)測(cè)定①肝臟損傷情況的病理形態(tài)學(xué)觀察取肝臟，常規(guī)取材，石蠟 包埋，HE染色。光鏡下對(duì)其進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察，并用Qwin圖像分析系統(tǒng)測(cè) 定其損傷面積百分比。測(cè)定方法在200倍光鏡下，隨機(jī)選取10個(gè)視野，測(cè)定 其損傷面積百分比，取其平均值。②血清中ALT、 AST活性濃度測(cè)定用曰立 7170全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行。③血清中TNF含量測(cè)定，按照試劑盒所附說(shuō)明書， 用GC-911放射免疫計(jì)數(shù)器進(jìn)行。③血漿中內(nèi)毒素含量測(cè)定按照試劑盒所附說(shuō) 明書，用752C紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行。
2結(jié)果
2. 1病理形態(tài)學(xué)變化① 正常對(duì)照組肝臟結(jié)構(gòu)正常，被膜不增厚，小葉境界清晰，肝板以小葉中央 靜脈為中心，呈放射狀排列。肝板為一個(gè)細(xì)胞厚度。肝竇未見擴(kuò)張，亦無(wú)狹窄。 肝小葉實(shí)質(zhì)細(xì)胞未見變性及壞死。中央靜脈壁無(wú)增厚，門管區(qū)三管清晰可見， 無(wú)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，未見結(jié)締組織增生。間質(zhì)細(xì)胞不增多。
② 模型組；肝臟結(jié)構(gòu)基本正常，被膜不增厚，肝小葉境界尚清晰，肝板未見增 厚。肝實(shí)質(zhì)可見多發(fā)灶狀水泡變性及氣球樣變，并可見新鮮的點(diǎn)狀、灶狀、帶 狀及橋狀壞死。壞死灶可見細(xì)胞碎片，并見中性粒細(xì)胞、小量嗜酸性粒細(xì)胞及 淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。浸潤(rùn)之炎細(xì)胞可見退變及核碎裂。壞死灶內(nèi)可見圓形嗜酸性小 體。點(diǎn)、灶狀壞死多見于中央靜脈旁小葉下靜脈周圍，嚴(yán)重處可見小葉中心帶 呈帶狀壞死，壞死灶有時(shí)可與鄰近的中央帶或周邊帶相連，構(gòu)成橋狀壞死。
③ 本發(fā)明藥物組大鼠病理所見與模型組相似，但點(diǎn)灶狀壞死、中央帶壞死及橋 狀壞死均較模型組為輕。
④ 陽(yáng)性藥物對(duì)照組大鼠病理所見與模型組相似，但點(diǎn)灶狀壞死、中央帶壞死及 橋狀壞死均較模型組為輕。
進(jìn)一步的圖像分析結(jié)果顯示，本發(fā)明藥物組大鼠的肝臟損傷面積明顯低于 模型組，見表l。
表1各組大鼠肝臟的損傷情況
^肝臟損傷面積(％) 正常對(duì)照組 ^ 5
模型組 10 14.99±2.73
本發(fā)明藥物組 10 9.55士2.13AA
陽(yáng)性藥物對(duì)照組 10 11.37±2.32AA
與模型組比較，AAPO. 01
2. 2本發(fā)明藥物對(duì)肝損傷大鼠血清中ALT、 AST活性的影響結(jié)果見表2。 表2各組大鼠血清中ALT、 AST活性的變化(x士s) 組另lj ii~~ALT(U/L) AST(U/L)正常對(duì)照組 1054.40±12.44 165.20±50.84
模型組 10153.11±67.05** 987.78土393.47**
本發(fā)明藥物組 10 99.65±66.52 393.44±273.29*AA
陽(yáng)性藥物對(duì)照組 10123.34±68.17 520.54±301.25*AA
與正常對(duì)照組比較，~~*P<0. 05,~~**P<0. 01;與模型組比較，AAPO. 01
2. 3各組大鼠血中TNF—a、內(nèi)毒素含量變化見表3。
表3各組大鼠血中TNF-a、內(nèi)毒素含量的變化(x士s)
組別
n TNF-a (fmol/ml) 內(nèi)毒素(Ru/ml)
正常對(duì)照組 10
模型組 10
本發(fā)明藥物組 io
陽(yáng)性藥物對(duì)照組 io
3.39±9.974 5.90±0.69** 4.36±0.78*AA 4.85±0.71*AA
0.16±0.06 1.59±0,22** 0.99±0.28**AA 1.21±0.24**AA
與正常對(duì)照組比較，*P<0. 05。 **P<0. 01; 與模型組比較，AAP(O. 01
本發(fā)明藥物具有清除內(nèi)毒索、降低腫瘤壞死因子含量、保護(hù)肝細(xì)胞的顯著 作用，且其作用優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥物。 實(shí)驗(yàn)例2治療急性甲型肝炎的臨床療效 1.對(duì)象和方法
1.1對(duì)象住院急性甲型肝炎患者診斷符合1990年上海第六屆全國(guó)病毒性肝 炎會(huì)議修訂的《病毒性肝炎的防治方案》標(biāo)準(zhǔn)。甲型肝炎16例，對(duì)照 組21例，兩組在年齡、性別及病種構(gòu)成等經(jīng)x2檢驗(yàn)具有可比性。
1.2方法治療組口服本發(fā)明中藥組合物膠囊劑(0.5g/粒)， 一次2粒，一 日三次，l'個(gè)月為l療程；對(duì)照組口服清肝毒膠囊(0.5g/粒，由杭州靈 丹王藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20030010)， 一次2粒， 一日三次， l個(gè)月為l療程。
1.3療效標(biāo)準(zhǔn)①顯效療程結(jié)束時(shí)，臨床癥狀消失或明顯改善，肝脾腫大 有所回縮，ALT及Sb降至正常范圍.②有效臨床癥狀好轉(zhuǎn)，肝脾腫大無(wú)變化，ALT及Sb較治療前降低50。/。以上.③無(wú)效臨床癥狀無(wú)明顯好 轉(zhuǎn)，ALT及Sb水平較治療前降低不到50%，無(wú)變化或有所加重.總有效 率為顯效加有效。 2.結(jié)果
急性甲型肝炎16例，顯效10例(62.4%)，有效3例(18.8%)，無(wú)效3例 (18.8%)，有效率81.2%.急性甲型肝炎21例，顯效11例(52.4%)，有效3例 (14.3%)，無(wú)效7例(33.3%)，有效率66.7%.
由以上試驗(yàn)結(jié)果看出，對(duì)急性甲型肝炎本發(fā)明中藥組合物療效均顯著優(yōu) 于清肝毒膠囊。 實(shí)驗(yàn)例3治療急性乙型肝炎的臨床療效
1. 對(duì)象和方法
對(duì)象住院急性乙型肝炎患者診斷符合1990年上海第六屆全國(guó)病毒性肝炎會(huì) 議修訂的《病毒性肝炎的防治方案》標(biāo)準(zhǔn)。乙型肝炎30例，對(duì)照組25例，兩 組在年齡、性別及病種構(gòu)成等經(jīng)5C2檢驗(yàn)具有可比性。
1.2方法治療組口服本發(fā)明中藥組合物膠囊劑(0.5g/粒)， 一次2粒， 一日 三次，2個(gè)月為1療程；對(duì)照組口服清肝毒膠囊(0.5g/粒，由杭州靈丹王藥 業(yè)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20030010)， 一次2粒， 一日三次，2個(gè)月為 l療程。
1.3療效標(biāo)準(zhǔn)①顯效療程結(jié)束時(shí)，臨床癥狀消失或明顯改善，肝脾腫大有 所回縮，ALT及Sb降至正常范圍.②有效臨床癥狀好轉(zhuǎn)，肝脾腫大無(wú)變化， ALT及Sb較治療前降低50。/。以上.③無(wú)效臨床癥狀無(wú)明顯好轉(zhuǎn)，ALT及 Sb水平較治療前降低不到50%，無(wú)變化或有所加重.總有效率為顯效加有效。
2. 結(jié)果
急性乙型肝炎30例，顯效16例(53.3%)，有效12例(40.0%)，無(wú)效2例 (6.7%)，有效率為93.3%;對(duì)照組25例，顯效12例(48.0%)，有效4例(16.0%)， 無(wú)效9例(36.0%)，有效率為64.0%.乙型病毒性肝炎患者有12例HBeAg呈陽(yáng) 性，療程結(jié)束后復(fù)查8例陰轉(zhuǎn).對(duì)照組乙型病毒性肝炎患者有10例HBeAg陽(yáng)性，療程結(jié)束復(fù)查2例陰轉(zhuǎn).兩組之間的陰轉(zhuǎn)率有顯著差異。
由以上試驗(yàn)結(jié)果看出，對(duì)急性乙型肝炎本發(fā)明中藥組合物療效均顯著優(yōu) 于清肝毒膠囊。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1膠囊劑
黃連376g、大黃169g、赤芍200g、海金沙56 g 、蓮子心86 g、青黛113g 取黃連、赤芍、蓮子心三味藥加12倍水煎煮，每次l小時(shí)，共3次，過(guò)濾，合 并煎液，濃縮至比重1.08-1.14(5(TC)清膏，噴霧干燥，噴霧干燥粉備用，取大黃、 海金沙、青黛3味藥，藥材粉碎過(guò)篩，加入噴霧干燥粉，攪拌均勻，填充成1000 粒膠囊，即得。 實(shí)施例2膠囊劑
黃連150g、赤芍150g、蓮子心150g、大黃150g、海金沙150g、青黛150g。 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至5(TC時(shí)相對(duì)密度為L(zhǎng)08 1.14的浸膏，6(TC真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將 所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉,混合均勻，填充膠囊，制成1000粒，即得。 實(shí)施例3膠囊劑
黃連150g、赤芍250g、蓮子心50g、大黃80g、海金沙60g、青黛50g。 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至5(TC時(shí)相對(duì)密度為1.08 1.14的浸膏，6(TC真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將 所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉，混合均勻，填充膠囊，制成1000粒，即得。 實(shí)施例4片劑
黃連200g、赤芍250g、蓮子心50g、大黃180g、海金沙60g、青黛50g。 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至50。C時(shí)相對(duì)密度為1.08-1.14的浸膏，6(TC真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉,混合均勻，常規(guī)工藝制成iooo片，即得。
實(shí)施例5顆粒劑
黃連360g、赤芍180g、蓮子心70g、大黃170g、海金沙90g、青黛80g。 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至50'C時(shí)相對(duì)密度為1.08 U4的浸膏，6(TC真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將 所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉,混合均勻，常規(guī)工藝制成顆粒劑。 實(shí)施例6實(shí)施例l-5對(duì)肝損傷大鼠血清中ALT、 AST活性的影響
1、 材料方法
與實(shí)驗(yàn)例1藥效學(xué)試驗(yàn)方法相同。
2、 結(jié)果見表4
表4各組大鼠血清中ALT、 AST活性的變化(x士s)
組別nALT(U/L)AST(U/L)
正常對(duì)照組1052.50±10.24158.35±50.46
模型組10149.08±68.42979.87±390.25
實(shí)施例1膠囊1098.76±65.38AA**391.15±272.40**AA
實(shí)施例2膠囊10130.52±67.50490.70±279.65*A
實(shí)施例3膠囊10128.52±67.50516.70±299.68*A
實(shí)施例4片劑10110.23+55.50A*415.15±189.40A*
實(shí)施例5顆粒10115.34±57.50A*420.56±230.40A*
與正常對(duì)照組比較，*P<0. 05， **P<0. 01;與模型組比較，AAPO. 01 △P<0. 05
實(shí)施例7
黃連376g、大黃169g、赤芍200g、海金沙56 g 、蓮子心86 g、青黛113g
取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至50。C時(shí)相對(duì)密度為1.08-1.14的浸膏，60"C真空干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將 所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉,混合均勻，制粒，干燥，整粒，加入0.5%硬脂酸鎂， 壓制成1000片，即得。 實(shí)施例8
黃連376g、大黃169g、赤芍200g、海金沙56 g 、蓮子心86 g、青黛113g
取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至50。C時(shí)相對(duì)密度為1.08-1.14的浸膏，6CTC真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將 所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉,混合均勻，用水泛丸，即得。 實(shí)施例9
黃連376g、大黃169g、赤芍200g、海金沙56 g 、蓮子心86 g、青黛113g
上述原料加15倍量水煮沸，水煎2.5小時(shí)。濾過(guò)，藥渣加10倍水再煎煮1 小時(shí)，濾過(guò)。合并兩次水煎液，減壓濃縮至約1000ml，放冷。加入乙醇，使含 醇量達(dá)75%，攪勻，冷藏24小時(shí)，濾過(guò)。濾液回收乙醇至無(wú)醇味，繼續(xù)濃縮至 相對(duì)密度1.15 1.20(5(TC熱測(cè))，經(jīng)常規(guī)工藝制成口服液。 實(shí)施例10
黃連376g、赤芍200g、蓮子心86g、大黃168g、海金沙56g、青黛124g 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至5(TC時(shí)相對(duì)密度為1.08~1.14的浸膏，60'C真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將 所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉，混合均勻，制粒，干燥，整粒，加入0.5%硬脂酸鎂， 壓制成1000片，即得。 實(shí)施例11
黃連376g、赤芍200g、蓮子心86g、大黃168g、海金沙56g、青黛124g 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加12倍量水煎煮三次，每次l小 時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至50。C時(shí)相對(duì)密度為1.08 1.14的浸膏，6(TC真空干 燥，粉碎成細(xì)粉，備用；大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，過(guò)80目篩，備用；將所得干浸膏細(xì)粉與藥材細(xì)粉,混合均勻，用水泛丸，即得。 實(shí)施例12膠囊劑
黃連376g、大黃169g、赤芍200g、海金沙56 g 、蓮子心86 g、青黛113 g 取黃連、赤芍、蓮子心三味藥加12倍水煎煮，每次1小時(shí)，共3次，過(guò)濾，合 并煎液，濃縮至比重1.08-1.14(5(TC)清膏，噴霧干燥，噴霧干燥粉備用，取大黃、 海金沙、青黛3味藥，藥材粉碎過(guò)篩，加入噴霧干燥粉，攪拌均勻，填充成1000 粒膠囊，即得。
質(zhì)量檢測(cè)方法
含量測(cè)定:照高效液相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；28: 72: 0. 1乙腈_0. 05mol/L磷酸二氫鉀-三乙胺為流動(dòng) 相；檢測(cè)波長(zhǎng)為348nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000;
對(duì)照品溶液的制備精密稱取60。C減壓干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適 量，加甲醇制成每lml含40Pg的溶液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取本品O.lg，精密稱定，置100ml量瓶中，加鹽酸-甲醇(1: 100)溶液約80ml，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖 勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液；
測(cè)定法:分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5W,注入液相色譜儀， 測(cè)定，即得；本品含黃連以鹽酸小檗堿(C20H17NO4'HCL)計(jì)，不得少于3. 6%;
鑒別A:取本品50mg，加甲醇5ml，加熱回流15分鐘，濾過(guò)，濾液補(bǔ)加甲 醇使成5ml，作為供試品溶液；另取黃連對(duì)照藥材，同法制成對(duì)照藥材溶液；再 取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各1W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上， 以甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水(6: 3: 1.5: 1.5: 0.3)為展開劑，置氨蒸 氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光灑(365nm)下檢視；供試品 色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照 品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)；
鑒別B:取本品0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成lml 含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4Pl， 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40: 5: 10: 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色 清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。 實(shí)施例13膠囊劑
黃連376g、大黃169g、赤芍200g、海金沙56 g 、蓮子心86 g、青黛113g 取黃連、赤芍、蓮子心三味藥加12倍水煎煮，每次1小時(shí)，共3次，過(guò)濾，合 并煎液，濃縮至比重1.08-U4(5(TC)清膏，噴霧干燥，噴霧干燥粉備用，取大黃、 海金沙、青黛3味藥，藥材粉碎過(guò)篩，加入噴霧干燥粉，攪拌均勻，填充成1000 粒膠囊，即得。
質(zhì)量檢測(cè)方法
含量測(cè)定:照高效液相色譜法,色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；28: 72: 0. 1乙腈-0. 05mol/L磷酸二氫鉀-三乙胺為流動(dòng) 相；檢測(cè)波長(zhǎng)為348mn;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000;
對(duì)照品溶液的制備精密稱取60'C減壓千燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適 量，加甲醇制成每lml含40)^g的溶液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取本品O.lg，精密稱定，置100ml量瓶中，加鹽酸-甲醇(1: 100)溶液約80ml，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖 勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液；
測(cè)定法:分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5W,注入液相色譜儀， 測(cè)定，即得；本品含黃連以鹽酸小檗堿(C20H17NO4 *HCL)計(jì)，不得少于3. 6%。
權(quán)利要求
1、一種用于治療肝膽濕熱證的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物由以下重量份配比的原料藥制成黃連200-450重量份、赤芍100-300重量份、蓮子心20-150重量份、大黃50-250重量份、海金沙10-100重量份、青黛10-200重量份。
2、 如權(quán)利要求l所述中藥組合物，其特征在于該中藥組合物由以下重量份配比 的原料藥制成黃連300-400重量份、赤芍150-250重量份、蓮子心50-100重量份、大黃 15-300重量份、海金沙30-100重量份、青黛50-150重量份。
3、 如權(quán)利要求1所述中藥組合物，其特征在于該中藥組合物由以下重量份配比 的原料藥制成黃連376重量份、赤芍200重量份、蓮子心86重量份、大黃169重量份、 海金沙56重量份、青黛113重量份。
4、 如權(quán)利要求1所述中藥組合物，其特征在于該中藥組合物由以下重量份配比 的原料藥制成黃連360g、赤芍180g、蓮子心70g、大黃170g、海金沙90g、青黛80g。
5、 如權(quán)利要求1所述中藥組合物，其特征在于該中藥組合物由以下重量份配比 的原料藥制成黃連200g、赤芍250g、蓮子心50g、大黃180g、海金沙60g、青黛50g。
6、 如權(quán)利要求l-5所述任意一種中藥組合物的制備方法，其特征在于該包括以 下步驟-a、 取黃連、赤芍、蓮子心混合粉碎成粗粉，加10-16倍量水煎煮2-4次， 每次1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，備用；b、 大黃、青黛、海金沙藥材粉碎，備用；c、將步驟a所得干浸膏細(xì)粉與步驟b所得藥材細(xì)粉，混合均勻，按常規(guī)的 制劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、凝 膠劑、緩釋劑、口服液。
7、 如權(quán)利要求6所述制備方法，其特征在于步驟a將粗粉加12倍量水煎煮3 次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并煎液，濃縮至5(TC時(shí)相對(duì)密度為1.08-1. 14的浸 膏，50-7(TC干燥。
8、 如權(quán)利要求6所述制備方法，其特征在于步驟a中干燥方法為噴霧干燥。
9、 如權(quán)利要求1-5所述的任意一種藥物組合物在制備治療急性甲型肝炎藥物中 的應(yīng)用。
10、 如權(quán)利要求1-5所述的任意一種藥物組合物在制備治療急性乙型肝炎藥物 中的應(yīng)用。
11、如權(quán)利要求1-5所述的任意一種藥物組合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其 特征在于該方法包括如下含量測(cè)定和/或鑒別中的一種或幾種含量測(cè)定:照高效液相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；20-40: 60-80: 0. 1乙腈-0. 05mol/L磷酸二氫鉀-三乙胺 為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為348nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含40l^g的溶 液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取組合物制劑O. lg，精密稱定，置100ml量瓶中，加 1: 100鹽酸-甲醇溶液約80ml，超聲處理20-40分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻 度，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測(cè)定法:分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5W，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；組合物制劑含黃連以鹽酸小檗堿(C20H17N04 HCL)計(jì)，不得少 于3. 6%;鑒別A:取組合物制劑50mg，加甲醇5ml，加熱回流10-20分鐘，濾過(guò)，濾 液補(bǔ)加甲醇使成5ml，作為供試品溶液；另取黃連對(duì)照藥材，同法制成對(duì)照藥材 溶液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照 品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各1W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄 層板上，以5-7: 2-4: 1-3:卜3: 0.2-0.5的甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水 為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光下 檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑 點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)；鑒別B:取組合物制劑0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸 干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制 成lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶 液各4W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以35-50: 4-6: 8-12: 0.2三氯甲烷 -乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液， 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。
12、如權(quán)利要求11所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下含量 測(cè)定和/或鑒別中的一種或幾種含量測(cè)定:照高效液相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八垸基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；28: 72: 0. 1乙腈-O. 05mol/L磷酸二氫鉀-三乙胺為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為348nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備精密稱取6(TC減壓干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適 量，加甲醇制成每lml含4(Hig的溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取組合物制劑0.1g,精密稱定，置100ml量瓶中，加 1: 100鹽酸-甲醇溶液約80ml，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度， 搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測(cè)定法:分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5W，注入液相色譜儀， 測(cè)定，即得；組合物制劑含黃連以鹽酸小檗堿(C20H17N04 *HCL)計(jì)，不得少 于3. 6%;鑒別A:取組合物制劑50mg，加甲醇5ml，加熱回流15分鐘，濾過(guò)，濾液 補(bǔ)加甲醇使成5ml，作為供試品溶液；另取黃連對(duì)照藥材，同法制成對(duì)照藥材溶 液；再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品 溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各1W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，以6: 3: 1.5: 1.5: 0.3的甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為展開劑， 置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光下檢視；供試 品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì) 照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)；鑒別B:取組合物制劑0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過(guò)，濾液蒸 干，.殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液;.另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制 成lml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶 液各4W，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以40: 5: 10: 0.2三氯甲垸-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥組合物及其制備方法，該中藥組合物以黃連、赤芍、蓮子心、大黃、海金沙、青黛為原料藥組成，具有清熱解毒，利濕化痰之效。臨床用于急性甲、乙型肝炎屬于肝膽濕熱證者，癥見協(xié)肋脹痛，煩熱口苦，惡心納呆，腕悶腹脹，神倦乏力，小便黃赤等。
文檔編號(hào)A61K36/718GK101618085SQ20091011960
公開日2010年1月6日 申請(qǐng)日期2009年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月1日
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