專利名稱：調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法
調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法 發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法，具體涉及調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
調(diào)經(jīng)祛斑片為調(diào)經(jīng)祛斑膠囊改劑型而來，處方收載于《中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)》 (外科婦科分冊)582頁，標(biāo)準(zhǔn)代號為WS-10710 (ZD-0710) -2002，具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，祛瘀 消斑的功效，用于營血不足，氣滯血瘀所致的月經(jīng)過多，黃褐斑。其處方為黃芪80g、菟 絲子40g、墨旱蓮50g、女貞子40g、枸杞子40g、當(dāng)歸40g、白芍50g、何首烏40g、地黃50g、 熟地黃60g、桃仁30g、柴胡30g、阿膠12g、手參40g、紅花10g;片劑制法為以上十五味 藥材，取女貞子、枸杞子、當(dāng)歸、白芍、柴胡、阿膠、于參、紅花粉碎成細粉，其余菟絲子 等七味藥材加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 30 1.35(50'C)的稠膏，加入上述細粉，烘干，加入磷酸氫鈣等輔料適量，混勻，制粒，干燥， 壓片，包薄膜衣，即得。粉碎，制成顆粒，裝入膠囊，即得。
原調(diào)經(jīng)祛斑膠囊標(biāo)準(zhǔn)中存在女貞子薄層鑒別中供試品色譜分離度差；枸杞子薄層鑒別中 使用了三氯甲烷，毒性較大；方中鑒別的藥味較少；含量測定方法中供試液制備時難以濾過 等問題，需要對質(zhì)控方法進行全面地優(yōu)化及補充。調(diào)經(jīng)祛斑片提取工藝與膠囊一致，但制劑 工藝和輔料不同，需制定確實可行的質(zhì)量控制方法以保證產(chǎn)品質(zhì)量和臨床療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法，進而保證產(chǎn)品質(zhì)量和臨床療效。 本發(fā)明解決了現(xiàn)有調(diào)經(jīng)祛斑制劑質(zhì)量控制方法中存在的不足，女貞子薄層鑒別中更換了
展開劑，改善了薄層分離效果；枸杞子薄層鑒別中使用了低毒性的溶劑替代了毒性較大三氯
甲烷；增加了柴胡及白芍的薄層色譜鑒別；解決了含量測定方法中供試液制備時難以濾過等
問題，使制劑質(zhì)量得到很好地控制。
調(diào)經(jīng)祛斑片質(zhì)量控制方法包括以下全部或部分內(nèi)容薄層鑒別女貞子；薄層鑒別枸杞子；
薄層鑒別當(dāng)歸；薄層鑒別白芍；薄層鑒別柴胡；測定本品中芍藥苷的含量。
調(diào)經(jīng)祛斑片質(zhì)量控制方法包括以下步驟中的一^l或多種 (1)薄層鑒別女貞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醇加熱回流，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材適量，同法制成對照藥材溶液。再 取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國 藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述三種溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當(dāng)比例為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇 溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的斑點。
(2) 薄層鑒別枸杞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加水加熱煮沸，放冷，濾過， 濾液用乙酸乙酯振搖提取，乙酸乙酯液濃縮至lml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材適 量，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液， 分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當(dāng)比 例為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(3) 薄層鑒別當(dāng)歸取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醚超聲處理，濾過，濾液揮 干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材適量，同法制成對照藥材 溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一以羧甲基纖 維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展 開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(4) 薄層鑒別白芍取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸干， 殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取正丁醇液， 蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含 2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取供試品溶液及對 照品溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸適當(dāng)比例為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(5) 薄層鑒別柴胡取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇適量，超聲處理，濾過， 濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取 正丁醇液，用氨試液適量洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水適量洗滌，棄去水洗液， 分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材適量， 加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水飽和的正丁醇使溶解，用氨試液洗滌，棄去氨 洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水適當(dāng)比例為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨 基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。
(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八院基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法包括以下步驟中的一種或多種
(1) 薄層鑒別女貞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醇10 50ml，加熱 回流10 60分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0.2 lg，同法制成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為 對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述三種溶液各2 10ul，分別點 于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2~0.8)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，100。C 12(TC加熱至斑 點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的 斑點。
(2) 薄層鑒別枸杞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加水50 200ml,加熱煮 沸10 60分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取1 3次，每次10 50ml，合并乙酸 乙酯液，濃縮至lml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5 2g，同法制成對照藥材溶 液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各2 10nl，分別點于同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2 0.8) 為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(3) 薄層鑒別當(dāng)歸取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醚20 100ml,超聲處理10 60分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照 藥材0.5 2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩 種溶液各2 10"1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚 (60 9(TC)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈G65nm)下檢 視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(4) 薄層鑒別白芍取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20 100ml，超聲處理 10 60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗中， 用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml 使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照 品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液2 10ul，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸
(35 45 : 3 7 : 8 12 : 0.1 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液， 100'C 120'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的斑點。
(5) 薄層鑒別柴胡取本品10 50片，除去薄膜衣，研細，力卩甲醇20 100ml，超聲處 理10 60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗 中，用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10~50ml，分取正丁醇液，用氨試液10 100ml 洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水10 100ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸 干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材0.2 2g,加甲醇10 50ml， 超聲處理10 60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水飽和的正丁醇10 50ml使溶解，用氨試 液10 50ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥 材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液2 10ul，分別點于同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸-甲醇-水(25 35 : 8 12 : 0.5 1.5)為展幵劑，展幵，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光 燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。
(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心5 30分鐘，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5 20ul，注入液相色譜儀，測定， 即得。
具體實施例方式
本發(fā)明的質(zhì)量控制方法是經(jīng)過大量的篩選得到的最佳方案，下面的實驗例用于進一步說 明本發(fā)明的技術(shù)方案和技術(shù)效果。
實驗例1 :為女貞子及其特征成分齊墩果酸的薄層色譜鑒別
本發(fā)明優(yōu)選了展開劑。還考察了以下展開系統(tǒng)①環(huán)己垸-丙酮-乙酸乙酯(5:2:l)②環(huán)己烷 -丙酮-乙酸乙酯-甲醇(5:2:l:0.5)③甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:4:0.5),試驗結(jié)果表明展開系統(tǒng)①② 無法將供試品和藥材各成分分離，而展開系統(tǒng)③亦可達到分離效果。
按實施例1女貞子薄層鑒別方法以調(diào)經(jīng)祛斑片試驗，結(jié)果供試品色譜中，在與對照藥材 色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點 清晰、圓整，比移值適中，重現(xiàn)性和專屬性好，陰性對照無干擾。 實驗例2:為枸杞子的薄層色譜鑒別
曾對以下提取純化方法進行了對比試驗①取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水50ml， 加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯15ml振搖提取，提取液濃縮至lml，作為供 試品溶液。(原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提取方法)②取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水50ml，加熱 煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml，提取液濃縮至lml， 作為供試品溶液。③取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水100ml，加熱煮沸15分鐘，放冷， 濾過，濾液用乙酸乙酯15ml振搖提取，提取液濃縮至lml，作為供試品溶液。 取本品16 片，除去薄膜衣，研細，加乙酸乙酯20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液濃縮至lml，作為 供試品溶液。⑤取本品16片，除去薄膜衣，研細，加乙醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過， 濾液蒸干，殘渣加水溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml，提取液濃縮至lml，作為 供試品溶液。試驗結(jié)果表明提取純化方法①和②樣品很難濾過，用乙酸乙酯提取時特別容易 乳化，斑點很弱。提取純化方法③斑點較弱。提取純化方法④和⑤雜質(zhì)斑點較多。
本發(fā)明優(yōu)選了展開劑。對展開系統(tǒng)做了對比①乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:l)②乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:0.3)③石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:3)。試驗結(jié)果表明展開系統(tǒng)①、②比移值較大，展開系統(tǒng)③比移值較小。按實施例1枸杞子薄層鑒別方法以調(diào)經(jīng)祛斑片試驗，結(jié)果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍色熒光斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點清晰、圓整，比移值適中，重現(xiàn)性和專屬性好，陰性對照無干擾。實驗例3:為當(dāng)歸的薄層色譜鑒別考察了展開系統(tǒng)石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(17:3)，結(jié)果比移值太大。按實施例1當(dāng)歸薄層鑒別方法以調(diào)經(jīng)祛斑片試驗，結(jié)果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍色熒光主斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點清晰、圓整，比移值適中，重現(xiàn)性和專屬性好，陰性對照無干擾。 實驗例4:為白芍特征成分芍藥苷的薄層色譜特征鑒別對以下提取純化方法進行了對比試驗①取本品5片，除去薄膜衣，研細，加乙醇30ml， 加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。②取本品20 片，除去薄膜衣，研細，加甲醇40ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水2ml使 溶解，加于DIOI型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1.0cm,柱髙15cm)，用水洗脫至洗脫液無色，棄 去水洗液，再用40%乙醇50ml洗脫，收集40%乙醇洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解， 作為供試品溶液。(D取本品10片，除去薄膜衣，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液蒸干，殘渣加水20m使溶解，置分液漏斗中，用乙醚振搖提取2次，每次2(tol，棄 去乙醚液，水溶液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽 和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，加中性氧 化鋁lg (100 200目)，拌勻，蒸干，加于中性氧化鋁柱(100 200目，3g，內(nèi)徑1.0cm干 法裝柱)上，用80%甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸千，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試 品溶液。結(jié)果方法①②供試品色譜中，雜質(zhì)較多，斑點不夠清晰；方法③供試品色譜中，斑 點清晰圓整，但提取步驟多，不便操作，故不采用。按實施例1白芍薄層鑒別方法以調(diào)經(jīng)祛斑片試驗，結(jié)果供試品色譜中，在與對照品色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同的藍紫色斑點。本方法薄層色譜分離效果好，斑點清晰圓整，重現(xiàn)性和 專屬性好，陰性無干擾。 實驗例5:為柴胡的薄層色譜特征鑒別對以下提取純化方法進行了對比試驗①取本品30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇50ml， 超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水30ml分次溶解，置分液漏斗中， 用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，分取10ml正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。②取本品20片，除去薄膜衣，研細，加甲醇40ml， 超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水5ml使溶解，濾過，濾液加于D101型大孔吸 附樹脂柱(內(nèi)徑1.0cm,柱高18cm)上，用水30mi洗脫，棄去水洗液，再用乙醇30ml洗脫， 收集乙醇洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；③取本品10片，除去薄 膜衣，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，置 分液漏斗中，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水溶液用水飽和的正丁醇振搖 提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，棄去水液， 正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，加中性氧化鋁lg U00 200目)，拌勻，蒸干，加 于中性氧化鋁柱Q00 200目，3g，內(nèi)徑1.0cm干法裝柱)上，用80°/。甲醇30ml洗脫，收集 洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；④取本品15片，除去薄膜衣，研 細，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸千，殘渣加2%氫氧化鈉溶液20ml使溶解， 放冷，用正丁醇20ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品 溶液；⑤取本品20片，除去薄膜衣，研細，加甲醇40ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸 干，殘渣加水2tnl使溶解，加于DIOI型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑I.0cm，柱高15cm)，用水洗 脫至洗脫液無色，棄去水洗液，再用40%乙醇5(kl洗脫，棄去4W。乙醇洗脫液，繼用70%乙醇 70ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水飽和的正丁醇20ml使溶解，用氨試液10ml洗滌， 棄去氨試液，分取正丁醇液，蒸千，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。結(jié)果方法①② ③供試品色譜中，背景較深，陰性有雜質(zhì)斑點干擾，試用多種展開系統(tǒng)，分離效果均不好； 方法④特征斑點不夠清晰；方法⑤供試品色譜中，斑點清晰圓整，效果較好，但提取步驟煩 瑣，故不采用。按實施例1柴胡薄層鑒別方法以調(diào)經(jīng)祛斑片試驗，結(jié)果，日光下檢視，供試品色譜中， 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品 色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點。本方法薄層色譜分離效果 好，斑點清晰、圓整，重現(xiàn)性和專屬性好，陰性對照無千擾。實驗例6:芍藥苷含量測定研究 1對照品及樣品溶液的制備對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品10.05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解并 稀釋至刻度，搖勻，精密量取lml置10ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，搖勻，即得(每lml含 芍藥苷100.5ug)。供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取約1.5g，精密稱定，置 具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率260W,頻率50Hz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，離心10分鐘(3000轉(zhuǎn)/分鐘)， 取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。陰性樣品溶液的制備陰性樣品溶液是按處方比例稱取除白芍外的藥味，按制法制成白 芍陰性制劑，再取此陰性制劑按上述"供試品溶液的制備"方法制備不含白芍的陰性樣品溶 液。試驗中考察了超聲處理的時間(IO分、20分、30分、40分)，結(jié)果表明超聲處理30分 鐘即可提取完全。超聲提取后的溶液難以濾過，經(jīng)離心后易濾，降低了操作難度，縮短了試驗周期。 2色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗儀器日本島津LC-10Avp高效液相色譜儀；檢測器日本島津SPD-10Atvp紫外檢測器； 色譜柱十八烷基硅垸鍵合硅膠色譜柱(島津VP-ODS柱，4.6X150mm)，保護柱YWG C18 10 X4.6咖；威瑪龍色譜工作站；流動相甲醇_水(25:75)為流動相；流速1. Oml/min,柱 溫室溫。檢測波長為230nm。分別吸取芍藥苷對照品溶液、供試品溶液及不含白芍的陰性樣品溶液各lOwl，注入液 相色譜儀，測定。此條件下芍藥苷與其它組分達到基線分離，分離度R>1.5。理論板數(shù)按芍 藥苷峰計算大于2000，芍藥苷保留時間約為16分鐘。陰性樣品溶液色譜在相應(yīng)位置無吸收峰，可見陰性無干擾。 3波長選擇精密稱取芍藥苷對照品10.05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻， 精密量取0.2ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用紫外分光光度儀掃描，結(jié)果芍藥苷 在229nm處有最大吸收，參考藥典及原劑型標(biāo)準(zhǔn)選擇230nm為測定波長。 4對照品純度檢查精密稱取芍藥苷對照品10. 05mg，置10ml量瓶中，加稀乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻， 按上述色譜條件，進樣10yl，測定，用峰面積歸一化法計算，含量為99.27%，符合含量測定要 求，計算時按100%計算。5方法學(xué)驗證精密度試驗計算得芍藥苷峰面積平均值為1181505，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.24%，表明精 密度較好；線性關(guān)系考察以峰面積積分值A(chǔ)對芍藥苷進樣量C(Ug)進行回歸分析，得回歸 方程A =1. 16X106C+1. 14X104, r=0.9999。線性范圍為0. 201 4, 02 u g，并且直線通過原 點，可用單點外標(biāo)法進行測定和計算；穩(wěn)定性試驗計算得日內(nèi)峰面積平均值為956424，相對 標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.89%，三日間峰面積平均值為953734,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.13%，表明供試品 溶液在72h內(nèi)穩(wěn)定；重復(fù)性試驗計算得芍藥苷的含量為1.084 mg/片，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1. 44%，表明方法重復(fù)性較好；加樣回收率試驗計算得平均回收率為99.81%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.74%，表明方法回收率較好。以上方法學(xué)驗證表明，該方法準(zhǔn)確，專屬性、重復(fù)性好，符合含量測定要求。具體實施例如下實施例1調(diào)經(jīng)祛斑片質(zhì)量控制方法(1)取本品16片，除去薄膜衣，研細，加乙醇20ml，加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各5ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:7:0.5)為展開齊lJ，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在ll(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(2) 取本品16片，除去薄膜衣，研細，加水100ml，加熱煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾 液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，濃縮至lml，作為供試品溶液。 另取枸杞子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附 錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:7:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm) 下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(3) 取本品16片，除去薄膜衣，研細，加乙醚40ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮 干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材lg，同法制成對照藥材溶 液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點 于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90。C)-乙酸乙酯(17 : 2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照 藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4) 取本品30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干， 殘渣加正丁醇飽和的水30ml分次溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每 次20ml，合并正丁醇液，分取10ml正丁醇液，余液留用，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解， 作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。 照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液3 ul、對照品溶液5 ul， 分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40 :5: io : 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(5)取鑒別(5)項下留用的正丁醇液，用氨試液30ml洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇 飽和的水30ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試 品溶液。另取柴胡對照藥材0.5g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣 加水飽和的正丁醇20ml使溶解，用氨試液10ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干， 殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B) 試驗，吸取上述兩種溶液各5 8ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層 板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30: 10: 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基 苯甲醛的40%硫酸溶液，105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng) 的位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈G65nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。 (6)測定本品中的芍藥苷的含量照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為 流動相；檢測波長為230run。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每ltnl含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取約1.5g，精密稱定，置 具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率260W,頻率50Hz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，離心10分鐘(3000轉(zhuǎn)/分鐘)， 取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10 Ul，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含白芍以芍藥苷(C23H280 )計，不得少于0.60mg。 實施例2調(diào)經(jīng)祛斑片質(zhì)量控制方法(1)薄層鑒別女貞子取本品30片，除去薄膜衣，研細，加乙醇50ml，加熱回流60分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2nl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25:5:0.8)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，12(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(2) 薄層鑒別枸杞子取本品30片，除去薄膜衣，研細，加水200ral，加熱煮沸60分鐘， 放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次50ml，合并乙酸乙酯液，濃縮至lml，作 為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典 2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各2 u 1,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉 為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(25:5:0.8)為展開劑，展開，取出，晾干， 置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的 熒光斑點。(3) 薄層鑒別當(dāng)歸取本品30片，除去薄膜衣，研細，加乙醚100ml，超聲處理60分 鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材2g，同 法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種 溶液各2ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供 試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4) 薄層鑒別白芍取本品30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇100ml，超聲處理60分鐘， 濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水50ml分次溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇 振搖提取3次，每次50ml，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。 另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國 藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液2ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(45:3: 12 : o.i)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，120"C加熱至斑點顯色清晰。供試 品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(5) 薄層鑒別柴胡取本品50片，除去薄膜衣，研細，加甲醇100ml，超聲處理60分鐘， 濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水50ml分次溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇 振搖提取3次，每次50ml，分取正丁醇液，用氨試液100ml洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇 飽和的水100ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供 試品溶液。另取柴胡對照藥材2g，加甲醇50ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣 加水飽和的正丁醇50ml使溶解，用氨試液50ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干， 殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B) 試驗，吸取上述兩種溶液2iil，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上， 以三氯甲垸-甲醇-水(35 : 8 : 1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的斑點；置紫外光燈G65nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心30分鐘，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測定即得。 實施例3調(diào)經(jīng)祛斑片質(zhì)量控制方法(1)薄層鑒別女貞子取本品5片，除去薄膜衣，研細，加乙醇10ml，加熱回流10分 鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0，2g，同法制成對 照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照 薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各lOlU，分別點于 同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15: 10:0.2)為展開 劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，IOO'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中， 在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(2) 薄層鑒別枸杞子取本品5片，除去薄膜衣，研細，加水50ml，加熱煮沸10分鐘， 放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯10ml振搖提取，乙酸乙酯液濃縮至lml，作為供試品溶液。另 取枸杞子對照藥材0.5，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄 VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各10 ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15: 10:0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm) 下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(3) 薄層鑒別當(dāng)歸取本品5片，除去薄膜衣，研細，加乙醚20ml，超聲處理10分鐘， 濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材0.5g，同法 制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶 液各10w，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90 °C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4) 薄層鑒別白芍取本品5片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20ml，超聲處理10分鐘， 濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水10ml分次溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇 10ml振搖提取，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥 苷對照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005 年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液lOul,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠g薄層板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(35:7:8: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，IOO'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(5) 薄層鑒別柴胡取本品10片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20ml，超聲處理10分鐘， 濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水10ml分次溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇 10ml振搖提取，分取正丁醇液，用氨試液10ml洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水10ml 洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取 柴胡對照藥材0.2g，加甲醇10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水飽和的正 丁醇10ml使溶解，用氨試液10ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml 使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上 述兩種溶液10ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷 -甲醇-水(25: 12:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫 酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏 色的斑點；置紫外光燈G65mn)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅院鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心5分鐘，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5yl，注入液相色譜儀，測定，即得。
權(quán)利要求
1.一種調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法，其特征在于，該方法包括以下全部或部分內(nèi)容薄層鑒別女貞子；薄層鑒別枸杞子；薄層鑒別當(dāng)歸；薄層鑒別白芍；薄層鑒別柴胡；測定本品中芍藥苷的含量。
2. 如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，包括以下步驟中的一個或多個(l)薄層鑒別女貞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醇加熱回流，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材適量，同法制成對照藥材溶液。再 取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法C中國 藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述三種溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G 薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當(dāng)比例為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇 溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的斑點。(2) 薄層鑒別枸杞子取本品適量，除去薄膜衣，研細，加水加熱煮沸，放冷，濾過， 濾液用乙酸乙酯振搖提取，乙酸乙酯液濃縮至lml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材適 量，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液， 分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸適當(dāng)比 例為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(3) 薄層鑒別當(dāng)歸取本品適量，除去薄膜衣，研細，加乙醚超聲處理，濾過，濾液揮 干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材適量，同法制成對照藥材 溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一以羧甲基纖 維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展 開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4) 薄層鑒別白芍取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸干， 殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取正丁醇液， 蒸千，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含 2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取供試品溶液及對 照品溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙 酯-甲醇-甲酸適當(dāng)比例為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(5) 薄層鑒別柴胡取本品適量，除去薄膜衣，研細，加甲醇適量，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水溶解，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取，分取 正丁醇液，用氨試液適量洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水適量洗滌，棄去水洗液， 分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材適量， 加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水飽和的正丁醇使溶解，用氨試液洗滌，棄去氨 洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中 國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水適當(dāng)比例為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨 基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量.-照高效液相色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
3.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，包括以下步驟中的一個或多個(1)薄層鑒別女貞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醇10 50ml，加熱回流10 60分鐘，放冷，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取女貞子對照藥材0.2 lg，同法制成對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述三種溶液各2 10nl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0,2 0.8)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，10(TC 12(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)薄層鑒別枸杞子取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加水50 200ml,加熱煮 沸10 60分鐘，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯振搖提取1 3次，每次10 50ml，合并乙酸 乙酯液，濃縮至lml,作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5 2g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各2 10yl,分別點于同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15 25:5 10:0.2 0.8) 為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(3) 薄層鑒別當(dāng)歸取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加乙醚20 100ml，超聲處 理10 60分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照 藥材0.5 2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩 種溶液各2 10ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(60 90°C)-乙酸乙酯(17:2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢 視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4) 薄層鑒別白芍取本品5 30片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20 100ml，超聲處理 10~60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗中， 用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml 使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照 品溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取供試品溶液及對照品溶液2 10ul，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(35 45 : 3 7 : 8 12 : 0.1 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液， 100'C 120'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的斑點。(5) 薄層鑒別柴胡取本品10 50片，除去薄膜衣，研細，加甲醇20 100ml，超聲處 理10 60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加正丁醇飽和的水10 50ml分次溶解，置分液漏斗 中，用水飽和的正丁醇振搖提取1 3次，每次10 50ml，分取正丁醇液，用氨試液10 100ml 洗滌，棄去氨洗液，再用正丁醇飽和的水10 100ml洗滌，棄去水洗液，分取正丁醇液，蒸 干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材0.2 2g，加甲醇10 50ml， 超聲處理10 60分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水飽和的正丁醇10 50ml使溶解，用氨試 液10 50ml洗滌，棄去氨洗液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為對照藥 材溶液。照薄層色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)試驗，吸取上述兩種溶液2 10"1，分別點于同一 以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(25 35 : 8 12 : 0.5 1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2°/。對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，加熱至斑點 顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光 燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。(6)測定本品中芍藥苷的含量 照高效液相色譜法(中國藥典相應(yīng)附錄)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25:75)為流 動相；檢測波長為230mn。理論板數(shù)按芍藥苷計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，用稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液， 即得。供試品溶液的制備取本品，除去薄膜衣，精密稱定，研細，取適量，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用稀 乙醇補足減失的重量，搖勻，離心5 30分鐘，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5 20ul，注入液相色譜儀，測定， 即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥制劑調(diào)經(jīng)祛斑片的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法包括以下步驟采用薄層色譜法鑒別女貞子、枸杞子、當(dāng)歸、白芍及柴胡，采用高效液相色譜法測定制劑中芍藥苷的含量。該質(zhì)量控制方法確實可行，可保證產(chǎn)品質(zhì)量和臨床療效。
文檔編號A61P15/00GK101574477SQ200910114069
公開日2009年11月11日 申請日期2009年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月18日
發(fā)明者偉 吳, 唐弟光, 梁山丹, 梁月釗, 莫少紅, 蒙華英, 阮碧芳, 陳曉軍 申請人:唐弟光