專利名稱：具有抑制hiv-1衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物、制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列新的苯磺酰胺類化合物和其藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽；本發(fā) 明也涉及這一系列新化合物的制備方法及生產(chǎn)方法；本發(fā)明還涉及這一系列化合物在制造 抗病毒藥物上的用途。
背景技術(shù)：
人類免疫缺陷病毒(HIV)具有變異快、缺乏有效的治療藥物的特點(diǎn)，致使艾滋病 在全世界范圍內(nèi)迅速蔓延，于是開(kāi)發(fā)有效治療HIV感染藥物已成為世界范圍內(nèi)最具挑戰(zhàn)性 的難題。目前用于臨床和研究的抗HIV藥物多是以逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)、蛋白酶(PR)和整合酶 (IN)等為靶點(diǎn)的酶抑制劑藥物。由于酶的結(jié)構(gòu)的突變，HIV病毒對(duì)這類藥物易產(chǎn)生耐藥性， 從而對(duì)治療措施和疾病的結(jié)果造成明顯的不良影響。這些都說(shuō)明開(kāi)發(fā)抗HIV藥物的新靶點(diǎn) 是非常必要的。近期的研究揭示，在人類免疫缺陷病毒(HIV)復(fù)制周期的組裝階段，幾千個(gè)病毒 Gag多聚蛋白副本在細(xì)胞膜聯(lián)合，出芽形成一個(gè)不成熟的、無(wú)感染力的病毒粒子。隨后Gag 被蛋白酶裂解，釋放衣殼蛋白(CA)。衣殼蛋白組裝成為衣殼，即成熟病毒中央核微粒的多聚 蛋白殼。衣殼的形成和穩(wěn)定性對(duì)于病毒的感染性是至關(guān)重要的，抑制衣殼組裝的衣殼蛋白 變化是致死性的，改變衣殼的穩(wěn)定性會(huì)嚴(yán)重的減弱病毒復(fù)制，致使衣殼蛋白成為頗具吸引 力的潛在的抗病毒靶點(diǎn)。據(jù)石if 究(Chun Tang, Erin Loeliger, Isaac Kinde, Samson Kyere. Antiviral Inhibition of theHIV Capsid protein. J. Mol. Bio. 327,1013-1020(2003)),化合物 N- (3-氯-4-甲基苯基)-N，- {2- [({5- [(二甲氨基)-甲基]-2-呋喃}-甲基)-硫基]乙 基}脲(CAP-I)能與HIV-I衣殼蛋白N-末端結(jié)構(gòu)域的一個(gè)頂端位點(diǎn)結(jié)合，體外抑制衣殼組 裝。并且細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)該化合物良好耐受，所以對(duì)其進(jìn)行體內(nèi)抗病毒及機(jī)制研究是可行的。 CAP-I以濃度依賴的方式抑制HIV-I感染。在CAP-I作用下，病毒表現(xiàn)出明顯不一致的尺寸 及反常的核形態(tài)，并且病毒組裝和成熟階段的衣殼蛋白-衣殼蛋白作用被抑制。這些發(fā)現(xiàn) 為發(fā)展組裝抑制劑成為一類新的艾滋病(AIDS)治療制劑奠定了基礎(chǔ)。為此，我們根據(jù)CAP-I的結(jié)構(gòu)，以電子等排原理及計(jì)算機(jī)模擬小分子與CA結(jié)合所 得數(shù)據(jù)為依據(jù)，設(shè)計(jì)并合成了一系列苯磺酰胺類化合物，并就其對(duì)衣殼蛋白聚合的影響、對(duì) HIV病毒復(fù)制的抑制進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果表明該類化合物具有較明顯的抑制衣殼蛋白聚合活性 和抗HIV-I體外復(fù)制的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明確切地講涉及式(I)的化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受 的酸或堿的鹽。
其中 R1, R2, R3, R4代表氫、烴基、鹵素、烷氧基的一種或幾種基團(tuán)，R1^ R2> R3> R4代表的基
團(tuán)可以相同也可以不同。本專利包括以上所代表的化合物及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或 堿的鹽?！盁N基”被定義為c「c6的直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的基團(tuán)；c「c6的環(huán)狀 基團(tuán)；苯環(huán)基團(tuán)?！胞u素”被定義為氟、氯、溴、碘、砹。——“烷氧基”被定義為氧的末端連有烷基的基團(tuán)。這里烷基被定義為C1-C6的直 鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)?！巴榛北欢x為C「C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。在藥學(xué)上可接受的酸的鹽是指鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸、碳酸、甲酸、乙酸、檸檬 酸、乳酸、富馬酸、酒石酸以及葡萄糖酸形成的含結(jié)晶水或不含結(jié)晶水的鹽。在藥學(xué)上可接受的堿的鹽是指氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺形成的含結(jié)晶 水或不含結(jié)晶水的鹽。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素,R2=烴基、鹵素、烷 氧基，R3 =烴基、鹵素、烷氧基，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷 基和烯基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取 代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、 溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以 是C1-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = H，R2 =烴基、鹵素、烷氧基，R3 =烴基、鹵素、烷氧基，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯 基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以 及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、 砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素、烷氧基，R2 = H，R3 =烴基、鹵素、烷氧基，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯 基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以 及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、 砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素、烷氧基，R2 =烴基、 鹵素、烷氧基，R3 = H，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯 基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、 砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素、烷氧基，R2 =烴基、 鹵素、烷氧基，R3 =烴基、鹵素、烷氧基，R4 = H。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯 基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以 及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、 砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = H，R2 = H，R3 =烴基、鹵素、烷 氧基，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支 鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜 環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是 氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽 和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = H，R2 =烴基、鹵素、烷氧基，R3 =H，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支 鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜 環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是 氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽 和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = H，R2 =烴基、鹵素、烷氧基，R3 =烴基、鹵素、烷氧基，R4 = H。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支 鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜 環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是 氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽 和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素、烷氧基，R2 = H，R3 =H，R4 =烴基、鹵素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支 鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜 環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是 氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽 和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素、烷氧基，R2 =烴基、 鹵素、烷氧基，R3 = H，R4 = H。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支 鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜 環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是 氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽 和的基團(tuán)。
作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 =烴基、鹵素、烷氧基，R2 = H，R3 =烴基、鹵素、烷氧基，R4 = H。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支 鏈的烷氧基、C1-C6直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜 環(huán)取代基的C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是 氧的末端連有C1-C6的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽 和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = HjR2 = H，R3 = H，R4 =烴基、鹵 素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6 直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6 的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = H，R2 =烴基、鹵素、烷氧基，R3 =HjR4 = H。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、(^-(；直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6 直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6 的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。作為一種優(yōu)化，本發(fā)明涉及的取代基團(tuán)變化為R1 = HjR2 = H，R3 = H，R4 =烴基、鹵 素、烷氧基。烴基可以是C1-C6的直鏈或支鏈烷基和烯基、C1-C6直鏈或支鏈的烷氧基、C1-C6 直鏈或支鏈的氨基烷基、含苯基和取代苯基取代基以及含雜環(huán)和取代雜環(huán)取代基的C1-C6 的直鏈或支鏈烷基和烯基。鹵素可以是氟、氯、溴、碘、砹。烷氧基可以是氧的末端連有C1-C6 的直鏈或支鏈的飽和基團(tuán)的基團(tuán)。烷基可以是C1-C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)。按照本發(fā)明，對(duì)于式(I)優(yōu)選的化合物是是Rl = H ;R2 = H ;R3 = H ;R4 =氟(化合物 Dl)是Rl = H ；R2 =溴；R3 = H ;R4 = H(化合物 D2)是Rl = H ;R2 =氯；R3 =氯；R4 = H(化合物 D3)是Rl = H ;R2 = H ；R3 =甲氧基；R4 = H(化合物 D4)是Rl = H ;R2 = H ；R3 =甲基；R4 = H(化合物 D5)是Rl = H ;R2 = H ;R3 = H ;R4 =氯(化合物 D6)這些化合物以及這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。優(yōu)選化合物以及它們與藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽構(gòu)成本發(fā)明的完 整內(nèi)容的一部分。
具體實(shí)施例方式按照本發(fā)明，對(duì)于式(I)化合物的制備方法，其特征在于以式(II)的化合物和式 (III)化合物為原料 式(II)式(III) 式(IV)該制備包括如下過(guò)程以式(IV)的化合物為原料，以二硫化碳、三乙烯二胺、三聚光氣為催化劑，制備式 (II)的化合物。以式(II)的化合物、式(III)的化合物為原料，在乙醇溶劑中，制備N_(取代氨 基)-N’ -(5-甲基-3-異惡唑基)苯磺酰胺。本發(fā)明還涉及藥物組合物，包含至少一種式(I)化合物或這些化合物所形成的在 藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽作為活性成分，單獨(dú)或結(jié)合一種或幾種藥學(xué)上可接受的、惰性 的、無(wú)毒的賦形劑或載體。在按照本發(fā)明的藥物組合物中，可以特別提到適用于口服、胃腸外(靜脈內(nèi)、肌肉 或皮下)、經(jīng)皮或透皮、經(jīng)鼻、直腸、經(jīng)舌的那些，特別是片劑或糖衣丸、膠囊劑、錠劑、栓劑、 皮膚凝膠、可注射制劑。本發(fā)明化合物具有明顯的抑制HIV-I衣殼蛋白聚合活性。含有至少一種式(I)化 合物或這些化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽作為活性成分化合物的藥物組 合，因此可以用于病毒的治療，特別是用于HIV病毒的治療?；衔锝?jīng)體外抑制HIV-I衣殼蛋白聚合實(shí)驗(yàn)和抑制HIV-I病毒復(fù)制活性篩選試 驗(yàn)，結(jié)果表明化合物具有一定的抑制HIV-I衣殼蛋白聚合以及抑制病毒復(fù)制的活性。下列實(shí)施例用來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明而不是用來(lái)限制本發(fā)明。所用原料和(或)試劑均為已知的產(chǎn)品，或者是按照已知操作制備的產(chǎn)品。實(shí)施例和合成步驟中所述化合物的結(jié)構(gòu)是按照常規(guī)的檢測(cè)(NMR、MS)測(cè)定的。實(shí)施例1 4-溴-異硫氰酸苯酯的制備在電磁攪拌下，將1. 9g的4-溴苯胺和7. 3g的六水合三乙烯二胺溶于50ml乙醇 中，緩慢滴入二硫化碳2. 0ml，反應(yīng)12小時(shí)，生成大量沉淀。過(guò)濾出沉淀，并紅外烘干。將烘 干的沉淀物懸浮于50ml氯仿中，冰浴條件下，緩慢滴入溶有1. Og三聚光氣的氯仿10ml，滴 完后常溫?cái)嚢?小時(shí)后，加熱回流1小時(shí)使反應(yīng)完全，冷卻至室溫，過(guò)濾除去不溶物，濾液減 壓蒸干，得4-溴-異硫氰酸苯酯粗品，然后經(jīng)減壓柱層析(石油醚乙酸乙酯=10 1洗 脫)，得液狀4-溴-異硫氰酸苯酯，收率89%，ESI-MS :m/z = 213,215。實(shí)施例2 4-[[[(4_溴苯基)氨基]硫代甲基]氨基]-N_(5-甲基_3_異惡唑 基)“苯磺酰胺的制備(化合物D2)
將4-溴基異硫氰酸苯酯0. 169克(Immol)和磺胺甲惡唑0. 253克(Immol) 分別加入到50ml反應(yīng)瓶中，25ml乙醇溶解，電磁攪拌下滴入0. 2ml三乙胺，常溫?cái)嚢?過(guò)夜，12小時(shí)，析出白色沉淀，抽濾，甲醇重結(jié)晶，得白色粉狀晶體，熔點(diǎn)190-192攝 氏度。1H-NMR(300MHz, DMS0-d6) δ 2. 307 (s，3H)，6. 166 (s，1H)，7. 435-7. 550 (m，4H)， 7. 712-7. 811(m，4H)，10. 217-10. 258(d，2H)，11. 415 (s，1H) ； ESI-MS :m/z = 466. 0。實(shí)施例3 4-[[[(3-甲氧苯基)氨基]硫代甲基]氨基]-N-(5-甲基_3_異惡唑 基)“苯磺酰胺的制備(化合物D4)將3-甲氧基異硫氰酸苯酯0.213克(Immol)和磺胺甲惡唑0.253克(Immol) 分別加入到50ml反應(yīng)瓶中，25ml乙醇溶解，電磁攪拌下滴入0. 2ml三乙胺，常溫?cái)嚢柽^(guò) 夜，12小時(shí)，析出白色沉淀，抽濾，甲醇重結(jié)晶，得白色粉狀晶體，熔點(diǎn)169-170攝氏度。 1H-NMR (300MHz, DMS0_d6) δ 2. 303(s，3H)，δ 3. 773(s，3H)6. 158 (s，1H)，7· 274-7. 358 (m， 2Η)，7· 422-7. 446 (m，1Η)，7· 453-7. 817(m，5H)，10. 141 — 10. 157(d，2H) ,11. 395 (s，1H)； ESI-MS :m/z = 418. 0。實(shí)施例4 4-[[[(3-甲基苯基)氨基]硫代甲基]氨基]-N-(5-甲基_3_異惡唑 基)“苯磺酰胺的制備(化合物D5)將3-甲基異硫氰酸苯酯0. 183克(Immol)和磺胺甲惡唑0. 253克(Immol) 分別加入到50ml反應(yīng)瓶中，25ml乙醇溶解，電磁攪拌下滴入0. 2ml三乙胺，常溫?cái)嚢?過(guò)夜，12小時(shí)，析出白色沉淀，抽濾，甲醇重結(jié)晶，得白色粉狀晶體，熔點(diǎn)168-170攝氏 度。1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2· 290-2. 306 (d，6H)，6· 165 (s，1H)，7· 248-7. 264 (t，2H)， 7. 689 (s，1H)，7· 715-7. 798 (m, 5H)，10. 104-10. 138(d，2H) ,11. 411 (s, 1H) ；EI-MS :m/z = 402。本發(fā)明化合物的藥理研究。實(shí)施例5抑制HlV-I衣殼蛋白聚合體外實(shí)驗(yàn)由于衣殼蛋白單體在體外磷酸緩沖液中會(huì)自發(fā)進(jìn)行二聚及多聚化。而二聚和多聚 化形成的復(fù)合物不溶于緩沖液而析出形成沉淀。檢測(cè)緩沖液中衣殼蛋白濃度的變化可以用 以檢測(cè)衣殼蛋白的裝配速度。因此，抑制劑在緩沖液中抑制衣殼蛋白的裝配功能就可以改 變衣殼蛋白的裝配速度。通過(guò)檢測(cè)不同抑制劑對(duì)緩沖液中衣殼蛋白單體裝配速度的影響能 力就可以評(píng)價(jià)化合物對(duì)衣殼蛋白裝配功能的抑制能力。將2ml 5mol/L NaCl 禾口 Iml 200mmol/L NaH2P04 (ρΗ8· 0)混合(2 1 體積比混
合)，作為聚合反應(yīng)的儲(chǔ)備液。在含60 μ 1的聚合反應(yīng)液的500 μ 1 Ep管中，加入40 μ 1 35 μ mol/L的HIV-1衣 殼蛋白水溶液，加樣槍快速吹打使溶液混合均勻并起始反應(yīng)(約5秒)，吸取聚合反應(yīng)混合 液轉(zhuǎn)移到紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的樣品池中，350nm下間隔5秒記錄聚合反應(yīng)液的吸光度值 變化，直到反應(yīng)終止(10分鐘)。在測(cè)定化合物對(duì)衣殼蛋白聚合活性的影響時(shí)，化合物使用DMSO溶解并稀釋成 lmmol/L的儲(chǔ)液。在聚合體系中，60μ 1聚合反應(yīng)液中加入1. 4μ 1化合物儲(chǔ)液，混合均勻 后，再加入40 μ 135 μ mol/L的衣殼蛋白水溶液，使聚合體系中的衣殼蛋白終濃度等于化合 物終濃度，同樣記錄體系的吸光度值變化。在衣殼蛋白聚合的起始階段，使用線性擬合估算衣殼蛋白以及加入不同抑制劑后的聚合反應(yīng)速率，以衣殼蛋白的抑制劑CAP-I作為標(biāo)準(zhǔn)，優(yōu)選的化合物抑制衣殼蛋白聚合的
數(shù)據(jù)如下表所示 實(shí)施例6抑制HIV-I復(fù)制體外實(shí)驗(yàn)。將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的MT4細(xì)胞配成濃度為40xl05個(gè)/毫升的細(xì)胞懸液，每孔100微 升加入96孔板。待測(cè)藥物過(guò)濾除菌，用RPMI1640培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋(1. 0μΜ、0. 5μΜ、 0. 25 μ Μ、0· 125 μ Μ、0· 0625 μ Μ、0· 03125 μ Μ)，每孔50 μ L加入96孔板中。再加滴度分別是 IOOTCID5q 和 1000TCID5(I (tissue cultured infection dose)的 HIV-150 μ L，每種藥物濃 度和病毒滴度組合做4復(fù)孔。設(shè)陽(yáng)性對(duì)照(AZT+MT4細(xì)胞+HIV-1)、陰性對(duì)照(水+MT4細(xì)胞 +HIV-1)、藥物毒性對(duì)照(藥物+MT4細(xì)胞)和空白對(duì)照(MT4細(xì)胞+HIV-1)。在37°C>5% CO2 條件下培養(yǎng)7天。每天定時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，培養(yǎng)第三天每孔補(bǔ)加50 μ L新鮮培養(yǎng)基，第 六天觀察細(xì)胞病變(CPE)。全部實(shí)驗(yàn)按照操作規(guī)程在生物安全3級(jí)(BSL-3)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，重復(fù)兩次。計(jì)算 抑制率和IC5Q。
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權(quán)利要求
具有抑制HIV 1衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征在于式(I)的化合物以及這些化合物在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽式(I)其中R1、R2、R3、R4代表氫、烴基、鹵素、烷氧基的一種或幾種基團(tuán)，R1、R2、R3、R4代表的基團(tuán)可以相同也可以不同；——“烴基”被定義為C1 C6的直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的基團(tuán)；C1 C6的環(huán)狀基團(tuán)；苯環(huán)基團(tuán)；——“鹵素”被定義為氟、氯、溴、碘、砹；——“烷氧基”被定義為氧的末端連有烷基的基團(tuán)。這里烷基被定義為C1 C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)；——“烷基”被定義為C1 C6的直鏈或支鏈的飽和的基團(tuán)；所有化合物及其在藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽；藥學(xué)上可接受的酸的鹽是指鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸、碳酸、甲酸、乙酸、檸檬酸、乳酸、富馬酸、酒石酸以及葡萄糖酸形成的含結(jié)晶水或不含結(jié)晶水的鹽；藥學(xué)上可接受的堿的鹽是指氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺形成的含結(jié)晶水或不含結(jié)晶水的鹽。F2009100848236C0000011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抑制HIV-I衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征 在于式⑴化合物中RI = H ;R2 = H ；R3 = H ;R4 =氟。這些化合物以及這些化合物所形 成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抑制HIV-I衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征 在于式⑴化合物中Rl = H ；R2 =溴；R3 = H ;R4 = H。這些化合物以及這些化合物所形 成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抑制HIV-I衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征 在于式(I)化合物中Rl = H ；R2 =氯；R3 =氯；R4 = H。這些化合物以及這些化合物所形 成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抑制HlV-I衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征 在于式⑴化合物中Rl = H ;R2 = H ；R3 =甲氧基；R4 = H。這些化合物以及這些化合物 所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抑制HIV-I衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征 在于式⑴化合物中Rl = H ;R2 = H ；R3 =甲基；R4 = H。這些化合物以及這些化合物所 形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抑制HIV-I衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物，其特征 在于式⑴化合物中Rl = H ;R2 = H ；R3 = H ;R4 =氯。這些化合物以及這些化合物所形 成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽。
8.按照本發(fā)明，對(duì)于式(I)化合物的制備方法，其特征在于以式(II)的化合物和式2(III)化合物為原料 該制備包括如下過(guò)程以式(IV)的化合物為原料，以二硫化碳、三乙烯二胺、三聚光氣為催化劑，制備式(II) 的化合物。以式(II)的化合物、式(III)的化合物為原料，在乙醇溶劑中，制備N-(取代氨 基)-N’ "(5-甲基-3-異惡唑基)苯磺酰胺。
9.藥物組合物，包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至7任意一項(xiàng)的式(I)化合物或這些化 合物所形成的在藥學(xué)上可接受的酸或堿的鹽作為活性成分，單獨(dú)或結(jié)合一種或幾種藥學(xué)上 可接受的、惰性的、無(wú)毒的賦形劑或載體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的藥物化合物，其特征在于是用于抗病毒治療的組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有抑制HIV-1衣殼蛋白活性的苯磺酰胺類化合物、制備方法及用途。本發(fā)明提供了式(I)的化合物其中，R1、R2、R3、R4代表氫、烴基、鹵素、烷氧基的一種或幾種基團(tuán)，R1、R2、R3、R4代表的基團(tuán)可以相同也可以不同。本發(fā)明還提供了這些化合物的制備方法。這些化合物對(duì)HIV-1衣殼蛋白聚合和HIV-1病毒具有優(yōu)良的抑制效果。式(I)
文檔編號(hào)A61K31/635GK101899017SQ20091008482
公開(kāi)日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2009年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月25日
發(fā)明者姚小建, 龐瑞芳, 李介博, 楊銘, 諶侃, 譚志武 申請(qǐng)人:北京大學(xué)