專利名稱：一種益生菌組合物及其制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種益生菌組合物，尤其是涉及乳桿菌、雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌的聯(lián)合。
背景技術：
益生菌(Probiotics)是指投入后通過改善宿主腸道菌群生態(tài)平衡而發(fā)揮有益作 用，達到提高宿主(人和動物)健康水平和健康狀態(tài)的活菌制劑及其代謝產(chǎn)物。近年來， 國內(nèi)外研制出多種益生菌活菌制劑，其基本指導思想是用人或動物正常生理菌群(normal microbiota)的成員，經(jīng)過選種和人工繁殖，通過各種途徑和劑型制成活菌制劑，然后再以 投入方式使其回到原來環(huán)境，發(fā)揮自然的生理作用。益生菌是活的微生物，當攝入足夠數(shù)量 時，對宿主起有益健康作用。初生動物是無菌的，可作為研究益生菌調節(jié)腸道功能的模型。研究表明，將比例 為1 1 1的植物乳桿菌、乳酸片球菌和糞鏈球菌凍干粉，飼喂給初生犢牛，掃描電鏡和 透射電鏡結果顯示，益生菌可促使犢牛腸絨毛表面形成發(fā)達的環(huán)形或縱形的皺褶，有助于 小腸絨毛的發(fā)育，而且可以維持和加強犢牛十二指腸、空腸、回腸上皮細胞細胞質中線粒體 (嵴多且密集)，滑面內(nèi)質網(wǎng)和粗面內(nèi)質網(wǎng)等細胞器的數(shù)量和結構。所以，益生菌可通過對 腸道結構的直接調節(jié)作用改善腸道功能。腸道紊亂會導致腹痛、腹瀉，嚴重的甚至危及生 命。根據(jù)文獻梅龍等人《微生態(tài)調節(jié)劑對燒傷大鼠腸道菌群失調的調節(jié)作用》.西北藥學 雜志，2001. 6 :117-118公開動物試驗表明，益生菌對燒傷大鼠的腸道菌群失調有快速的調 節(jié)作用。同樣，葉虹等人的《益生菌制劑改善腸胃道功能的動物試驗研究》中國微生態(tài)學雜 志.2001. 2 19 21的動物試驗研究也表明雙歧桿菌對小鼠的胃腸道菌群失調，調整腸道 微生態(tài)系統(tǒng)具有一定的功能。根據(jù)Merger和Croitoru的研究，與腸道固有微生物耐性降 低有關的免疫系統(tǒng)功能的失調會導致慢性腸炎疾病，而這可以通過益生菌得到改善。Nanji 等的研究表明，潛在的病變(如慢性腎臟疾病)和胃酸缺乏將導致小腸細菌過度繁殖，從而 造成有害微生物大量滋生。攝入不可消化的食物(如具有乳糖不耐癥者攝入乳糖)會給腸 內(nèi)微生物生長提供發(fā)酵底物，有時會帶來有害影響。楊維軍等人《益生菌的功效及其在食品 中的應用》四川食品與發(fā)酵，2005. 1 27 30實驗表明，益生菌攝入量達IO9-IO11個/天的 水平，可起到降低某些腸道疾病的發(fā)病率、持續(xù)時間和病情嚴重性的效果。益生菌中的雙歧桿菌是健康人體腸道內(nèi)定植數(shù)量占優(yōu)勢的一類菌群，對雙歧桿菌 對人體腸道菌群的調節(jié)功效已經(jīng)進行了大量的研究。研究表明，高水平的適宜雙歧桿菌在 腸道通常可以阻止病原體的致病作用，從而就可以糾正腸菌群失調引起的腹瀉。項明潔等 研究了雙歧桿菌活菌對腸道菌群的影響.表明了雙歧桿菌活菌制劑有調節(jié)新生兒腸道菌 群的作用，使條件致病菌的生長受抑制。熊德鑫等研究說明雙歧桿菌四聯(lián)活菌可以促進腸 道原籍菌的增加，恢復腸道微生態(tài)平衡。國外學者們早在七十年代，就發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌能夠保 護腸道免受沙門菌屬、志賀菌屬和腸致病性大腸桿菌等感染引起的腹瀉。益生菌中的另一大類——乳桿菌也被廣泛用于調節(jié)人體腸道菌群、改善腸道功能的用途° Pedone 等人 Multicentric study of the effect of milk fermented by Lactobacillus caseion the incidence of diarrhea[J]. Int J Clin Pract. 2000Nov 54(9)568 71表明將傳統(tǒng)發(fā)酵的酸奶和由干酪乳桿菌發(fā)酵的牛奶提供給健康兒童進行對 比研究，結果表明干酪乳桿菌發(fā)酵奶對由于腸道菌群失調導致的兒童腹瀉的改善要比普通 酸奶好。Gismondo用包含有嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌的活菌制劑治療因幽門螺桿菌導致的 胃和十二指腸疾病的病人，發(fā)現(xiàn)這種活菌制劑能夠有效地與引起疾病的微生物競爭，提高 了調節(jié)腸道菌群的效果。Gaon 等人 DacidGaon，Hugo Garcia, Luis Winter etc. Effect of Lactobacillus Strans and accharomycesBoulardii on Persistent Diarrhea in Children [J]. MEDICINA (Buenos Aires) 2003 ；63 :293 298 中對由于腸道致病菌導致的消 化不良、持續(xù)腹瀉的兒童進行了研究，發(fā)現(xiàn)飲用同時含有干酪乳桿菌和嗜酸乳桿菌的牛奶 的兒童比用安慰劑的對照組的癥狀改善明顯，證明干酪乳桿菌和嗜酸乳桿菌對持續(xù)性腹瀉 是有效的。而且飲用含嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌和嗜溫菌的發(fā)酵乳制品可降低胃腸道有害酶 的活性水平。盡管已經(jīng)廣泛的研究了益生菌，但是大多數(shù)都是單株益生菌或者兩類益生菌聯(lián) 用，最多不超過三種，使用范圍比較狹窄，不能適應更廣泛的人群的不同腸道特征，制約了 益生菌的應用。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種新的益生菌組合物，它包括有乳桿菌、 雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌三大類益生菌，該組合物可以適應更廣泛的人群的不同腸道特征， 滿足市場上的需求，安全可靠，作用效果明顯。本發(fā)明的另一個目的是提供了含有該益生菌組合物的制劑。本發(fā)明的還有一個目的提供了該益生菌組合物及其制劑在食品工業(yè)、制藥工業(yè)、 健康保健工業(yè)或天然產(chǎn)品生產(chǎn)中的應用。本發(fā)明是通過以下方案實現(xiàn)的本發(fā)明的益生菌組合物，是由重量份的乳桿菌5-15份、雙歧桿菌2-6份和嗜熱鏈 球菌1-10份組成。優(yōu)選本發(fā)明的益生菌組合物，是由重量份的乳桿菌10份、雙歧桿菌4份和嗜熱鏈 球菌5份組成。上述的益生菌組合物中所述的乳桿菌包括但不限于嗜酸乳桿菌 Lactobacillusacidophilus、保力口 利亞乳桿菌 Lactobacillus bulgaricus、乳乳 t干 Iif Lactobacillus lactis> ^S ^ ff lif Lactobacillus ρlatarum> H ^ H L ff 菌 Lactobacillus rhamnosus> 羅伊氏學L If lif Lactobacillus reuteri、 zFIf 菌Lactobacillus casei、干酷乳桿菌干酷亞種L. casei subsp. Casei、副干酷乳桿 |if Lactobacillus paracasein ^ If lif LactobacilIusfermentum> Jfnf dr If lif Lactobacillus helvertiucs中的一種或幾種聯(lián)合使用。優(yōu)選嗜酸乳桿菌與干酪乳桿菌干 酪亞種按照重量份比為1 0.5-2聯(lián)合使用，其混合物對持續(xù)性腹瀉有明顯改善作用。優(yōu) 選嗜酸乳桿菌與干酪乳桿菌干酪亞種重量份比為1 1。本發(fā)明中所述的組合物，其中所述的雙歧桿菌包括但不限于青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolescents、長雙歧 If 菌 Bifidobacterium longum、fe 雙歧桿 菌 Bifidobacterium breve、兩歧雙歧桿菌 Bifidobacterium bifidus、乳雙歧桿菌 Bifidobacterium lactis、嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis、動物雙歧桿菌 Bifidobacteriumanimal中的一種或幾種的混合物。優(yōu)選為重量份比為1 0. 5_2為乳雙 歧桿菌和兩歧雙歧桿菌的混合物。該混合物的聯(lián)合使用能夠更好預防腸道內(nèi)傷寒沙門氏菌 感染及提高免疫力能夠達到調節(jié)腸道菌群的保健效果。優(yōu)選乳雙歧桿菌與兩歧雙歧桿菌的 重量份比為1 1。本發(fā)明中的嗜熱鏈球菌與乳桿菌有良好的共生與協(xié)同作用，因此加入嗜熱鏈球菌 以提高乳桿菌在腸道內(nèi)的增殖力。本發(fā)明最優(yōu)選的益生菌組合物，是由重量份比的嗜酸乳桿菌干酪乳桿菌干酪亞 種乳雙歧桿菌兩歧雙歧桿菌嗜熱鏈球菌為5:5:2:2:5五種益生菌組成。本發(fā)明的益生菌組合物中還可以添加可溶性膳食纖維和益生元，以促進益生菌在 腸道內(nèi)生長增殖，增強益生菌的保健功能。本發(fā)明中的膳食纖維和益生元可以為菊糖或寡 糖、特別是半乳寡糖、低聚異麥芽酮糖、大豆寡糖，龍膽寡糖，低聚木糖、非降解性淀粉、乳蔗 糖、乳果糖、乳糖醇、麥芽糖醇、聚右旋糖或類似物。優(yōu)選益生元為菊粉。本發(fā)明的藥物組合物可以制成藥學是可以接受的制劑。可以是膠囊劑、片劑、顆粒 劑、丸劑、軟膠囊劑、口崩片、散劑等。本發(fā)明的益生菌及其制劑可以在食品工業(yè)，如食品，飲料、牛奶、酸奶或糖果工業(yè) 產(chǎn)品、制藥工業(yè)、健康保健工業(yè)或天然產(chǎn)品生產(chǎn)中的用途。本發(fā)明中所涉及到的微生物菌種可以通過現(xiàn)有技術進行培養(yǎng)，或者通過市購例如 丹尼斯克公司。本發(fā)明的組合物及其制劑可以作為藥品或保健品使用，可以通過下述試驗例進行 詳細說明。試驗例一益生菌組合物調節(jié)腸道菌群功能性試驗1、樣品實施例1的樣品2、受試者的選擇2. 1受試者納入標準2. 1. 1 一個月內(nèi)未患過胃腸疾病者2. 1. 2 一個月內(nèi)未服用抗生素者2. 2受試者排除標準2. 2. 1年齡在65歲以上者，妊娠或哺乳期婦女，過敏體質及對本保健食品過敏者。2. 2. 2合并有心血管、腦血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重疾病及內(nèi)容分泌疾病。2. 2. 3停服受試樣品或中途加服其他藥物，無法判斷功效或資料不全者。2. 3試驗設計及分組要求采用自身和組間兩種對照設計，選擇符合試驗要求的100名成人志愿者，將其隨 機分成試食組和空白對照組，每組50人，男女各半。2. 4受試樣品的劑量和使用方法試食組人群每日服用樣品每日每次1袋，連續(xù)服用14天后，除此以外不改變平時 的飲食習慣。空白對照組不施加任何處理因素，也不改變平時的飲食習慣。
2. 5觀察指標2. 5. 1安全性指標2. 5. 1. 1 一般狀況受試者在試驗期間的精神、睡眠、血壓及大小便情況。2. 5. 1. 2委托三級甲等醫(yī)院對受試者進行血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)、血生化指標及 心電圖、B超和胸透檢查。2. 5. 2功效性指標雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、腸球菌、擬桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌。3試驗方法3. 1試驗步驟試食組人群試食受試物前，無菌采用受試者糞便，檢查雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、 腸球菌、擬桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌等指標。受試者每日服用益生菌每日一次每次一袋，連續(xù)14 天。于給受試者最后一次24天后，無菌采取受試者糞便，再次檢驗上述指標，空白對照組人 群試驗前后糞便的采集同上。3. 2腸道菌群檢驗方法收拾受試者新鮮糞便于便盆中，立即送檢，定量稱取標本，10倍遞增稀釋混勻后， 選擇合適的稀釋度，分別接種至各選擇性培養(yǎng)基。雙歧桿菌BBL培養(yǎng)基 37°C 48士2h厭養(yǎng)培養(yǎng)乳桿菌 MRS培養(yǎng)基 37 °C 48 士 2h兼性厭養(yǎng)培養(yǎng)腸桿菌 EMS培養(yǎng)基 37 °C 48 士 2h培養(yǎng)腸球菌 疊氮鈉-結晶紫-七葉苷培養(yǎng)基37°C 48士2h培養(yǎng)擬桿菌 改良GAM培養(yǎng)基37 °C 48 士 2h厭養(yǎng)培養(yǎng)產(chǎn)氣莢膜梭菌TSC培養(yǎng)基37°C 48士2h厭養(yǎng)培養(yǎng)3. 3實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理用SPSS11. 5軟件對各試驗原始數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理，凡自身對照資料采用配對t檢 驗，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗，后者需要進行方差齊性檢驗，對非正態(tài)分布或方差不齊 的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉換的數(shù)據(jù)進行t檢驗，若轉換數(shù)據(jù) 仍不能滿足正態(tài)方差齊研究，改用t'檢驗或軼和檢驗，但變異系數(shù)太大的資料應用軼和檢 驗。3. 4結果判斷符合以下任一項，且試食者前后自身比較及試食后試食組與對照組，差異均有顯 著性，可以判定該受試樣品具有調節(jié)腸道菌群功能的作用。3. 4. 1糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸球 菌、腸桿菌和擬桿菌無明顯變化。3. 4. 2糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿 菌、腸球菌和擬桿菌明顯增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加大的幅度。4 結果4. 1益生菌的活菌計數(shù)結果見表1表1活菌計數(shù)結果 (接種量為0. Iml) 4. 2受試者人群安全性指標受試者人群血、尿、便常規(guī)和血生化安全性指標見表2和表3。表2受試者血、尿、便常規(guī)指標(χ 士 SD) 表3受試者血生化指標(χ士 SD) 由表2和表3可見，受試人群試驗前上述安全性指標均在正常值范圍內(nèi)，受試人 群受試前精神，睡眠，飲食，大小便及血壓情況良好，心電圖，B超及胸透檢查均正常，受試期 間，部分試食組人群服用益生菌后有排氣現(xiàn)象，未觀察到對健康的不良反應，試食者試驗后 血、尿、便常規(guī)指標和血壓情況無異常改變。4. 3益生菌對人體腸道菌群影響的結果見表4、5。表4人體試食前后的組間菌數(shù)變化比較(logcfu/g χ士SD) 與空白對照組比較，**p < 0. 01，*p < 0. 05由表4可知，與空白對照組相比，試食組人群試食前各指標菌均無統(tǒng)計學意義(P > 0. 05)。服用益生菌14天后，與空白對照組相比，試食組人群的雙歧桿菌和乳桿菌的數(shù)量 增加均有統(tǒng)計學意義，腸桿菌數(shù)量減少有統(tǒng)計學意義，擬桿菌數(shù)量減少有統(tǒng)計學意義；產(chǎn)氣 莢膜梭菌和腸球菌數(shù)量變化均無統(tǒng)計學意義。表5人體試食前后各組自身菌數(shù)變化比較(logcfu/g χ士SD) 前后自身比較廣ρ <0.01由表5可知，在試驗前后自身相比中，空白對照組受試人群各指標菌標化均無統(tǒng) 計學意義，在試驗前后自身相比中，試食組人群的雙歧桿菌和乳桿菌的數(shù)量增加均有統(tǒng)計 學意義，腸桿菌和擬桿菌數(shù)量減少均有統(tǒng)計學意義，腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量變化均無 統(tǒng)計學意義。5.結論健康成人志愿者試食組人群服用益生菌14天后，試食組人群自身腸道內(nèi)的菌群 數(shù)量發(fā)生有益的變化，糞便中雙歧桿菌和乳桿菌數(shù)量增加均有統(tǒng)計學意義，腸桿菌和擬桿 菌數(shù)量減少均有統(tǒng)計學意義；腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量變化無統(tǒng)計學意義。與空白對照 組人群相比，試食組人群的雙歧桿菌和乳桿菌的數(shù)量增加均有統(tǒng)計學意義，腸球菌和產(chǎn)氣 莢膜梭菌數(shù)量變化均無統(tǒng)計學意義。試驗期間部分受試者有排氣現(xiàn)象，未觀察到對健康有 不良反應。空白對照組人群在試驗前后各指標菌數(shù)量變化均無統(tǒng)計學意義。根據(jù)上述試驗 結果可知，本發(fā)明的益生菌具有調節(jié)人體腸道菌群的作用，未觀察到受試人群的健康有不 良反應。試驗例2益生菌調節(jié)腸道菌群功能性動物試驗1、材料與方法1. 1樣品實施例1的樣品1. 2試驗動物選用健康成年清潔級BALB/c雄性小鼠，小鼠體重范圍18. 4-21. 4g，20. 0士0. Sg。1. 3劑量選擇與受試物給予方式每人(按60kg體重計)每日1包，試驗設計人體推薦量的10倍量組，即0. 33g/ kgBff,上下各設一個30倍與5倍劑量組，即0. 99g/kgBff和0. 17g/kgBff組。受試物以滅菌 水調制，0. 00g/kgBW組以滅菌水灌胃，灌受試物前及連續(xù)灌受試物14天后檢測各項調節(jié)腸 道菌群值。小鼠灌胃量未20.00ml/kgBW.1.4主要儀器與試劑超凈臺，電子天平，灑精燈、吸管、平皿、試管、培養(yǎng)箱等。培養(yǎng)基BBL培養(yǎng)基本實驗室制備
MRS培養(yǎng)基OXOID公司疊氮鈉-結晶紫-七葉苷培養(yǎng)基開封市醫(yī)學生物研究所TSC培養(yǎng)基德國默克公司稀釋液本實驗室制備
1. 5試驗方法在給予小鼠受試物前及末次給予受試物后24h，無菌采取小鼠糞便，置已稱重的裝 有玻璃珠的干燥滅菌小試管中，再稱重，計算出小鼠糞便重量，以滅菌稀釋液稀釋10倍，制 成均勻懸液，再依次進行10倍遞增稀釋，選擇合適的稀釋度，分別接種再各選擇性培養(yǎng)基 上。雙歧桿菌BBL培養(yǎng)基 37°C 48士2h厭養(yǎng)培養(yǎng)乳桿菌MRS培養(yǎng)基 37 °C 48 士 2h兼性厭養(yǎng)培養(yǎng)腸桿菌EMS培養(yǎng)基 37°C 48士2h培養(yǎng)腸球菌疊氮鈉-結晶紫-七葉苷培養(yǎng)基37°C 48士2h培養(yǎng)擬桿菌改良GAM培養(yǎng)基37°C 48士2h厭養(yǎng)培養(yǎng)產(chǎn)氣莢膜梭菌TSC培養(yǎng)基37°C 48士2h厭養(yǎng)培養(yǎng)1.6數(shù)據(jù)處理和結果判定統(tǒng)計軟件采用SPSS11. 5，資料使用方差分析，按方差分析的程序先進行方差齊 性檢驗，方差齊，計算F值，F(xiàn)值< F0. 05,結論各組均數(shù)間差異無顯著性，F(xiàn)值05，ρ < 0. 05，用組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計，對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖?量轉換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉換的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，若變量轉換后仍未達到正態(tài) 或方差齊的目的，改用軼和檢驗進行統(tǒng)計。比較試驗前后自身及組間雙歧桿菌，乳桿菌，腸球菌，腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的變 化情況，試驗組試驗前后自身比較變化有顯著性，符合一下任一項可以判定受試樣品動物 試驗結果陽性。1. 6. 1糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸球 菌、腸桿菌無明顯變化。1. 6. 2糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿 菌和/或腸球菌有明顯增加，但增加的幅度不低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。2 結果2. 1益生菌活菌計數(shù)結果見表6表6活菌計數(shù)結果 (接種量為0. Iml) 由表6可見，益生菌中含雙歧桿菌活菌數(shù)為1. 9X 109cfu/ml，含乳桿菌活菌數(shù)為 8. 8X 108cfu/ml，含嗜熱鏈球菌活菌數(shù)為2. 2X 109cfu/ml。
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2. 2益生菌對小鼠體重的影響將不同劑量的益生菌受試物經(jīng)口給予小鼠14天后，未觀察到小鼠有不良反應，小 鼠體重變化見表7表7益生菌對小鼠體重的影響 由表7可見，與0. OOg/kgBW組比較，受試物小鼠的初始體重無統(tǒng)計學意義，經(jīng)口服 給予小鼠不同劑量的受試物14天后，與0. OOg/kgBW組間比較，受試物組小鼠的終體重的變 化均無統(tǒng)計學意義。2. 3益生菌對小鼠腸道菌群的影響見表8-12表8益生菌對小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌的影響(logcfu/g χ士SD濕便) 與0. OOg/kgBW 比較，**p < 0. 01，試驗前后自身比較，#p < 0. 05，##p < 0.01由表8可知，與試驗前0. OOg/kgBW組比較，試驗前受試物組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌 數(shù)量均無統(tǒng)計學意義(P > 0. 05)。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的益生菌14天，與試驗后0. OOg/ kgBff相比較，試驗后0. 33g/kgBff和0. 99g/kgBff組雙歧桿菌增加均有統(tǒng)計學意義，0. 17g/ kgBW組受試物組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量變化無統(tǒng)計學意義。在試驗前后自身比較中，0. 00g/kg組和0. 17g/kgBff組雙歧桿菌數(shù)量變化無統(tǒng)計 學意義，0. 33g/kgBff和0. 99g/kgBff組雙歧桿菌數(shù)量增加均有統(tǒng)計學意義。表9益生菌對小鼠腸道內(nèi)乳桿菌數(shù)量響(logcfu/g χ士SD濕便) 與0. OOg/kgBW 比較，**p < 0. 01，試驗前后自身比較，#p < 0. 05，##p < 0.01由表9可知，與試驗前0. OOg/kgBW組比較，試驗前受試物組小鼠腸道內(nèi)乳桿菌數(shù) 量均無統(tǒng)計學意義(ρ >0.05)。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的益生菌14天，與試驗后0. OOg/ kgBff相比較，試驗后0. 17g/kgBW、0. 33g/kgBff和0. 99g/kgBff組乳桿菌增加均有統(tǒng)計學意 義。在試驗前后自身比較中，0. 00g/kg組乳桿菌數(shù)量變化無統(tǒng)計學意義，0. 17g/kgBff 組乳桿菌數(shù)量增加有統(tǒng)計學意義，0. 33g/kgBW和0. 99g/kgBW組乳桿菌數(shù)量增加均有統(tǒng)計
學意義。表10益生菌對小鼠腸道內(nèi)腸桿菌數(shù)量影響(logcfu/g χ士SD濕便) 試驗前后自身比較，#p < 0.05由表10可知，與試驗前0. OOg/kgBW組比較，試驗前受試物組小鼠腸道內(nèi)腸桿菌數(shù) 量均無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的益生菌14天，與試驗后0. OOg/ kgBff相比較，受試組內(nèi)腸桿菌數(shù)量變化均無統(tǒng)計學意義。在試驗前后自身比較中，0. 00g/kg組和0. 99g/kgBff組腸桿菌數(shù)量變化無統(tǒng)計學 意義，0. 17g/kgBff組和0. 33g/kgBff組腸桿菌數(shù)量增加均有統(tǒng)計學意義。表11益生菌對小鼠腸道內(nèi)腸球菌數(shù)量影響(logcfu/g χ士SD濕便) 由表11可知，與試驗前0. OOg/kgBW組比較，試驗前受試物組小鼠腸道內(nèi)腸球菌數(shù) 量均無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的益生菌14天，與試驗后0. OOg/ kgBff相比較，受試組內(nèi)腸桿菌數(shù)量變化均無統(tǒng)計學意義。在試驗前后自身比較中，0. 00g/kg組及各受試組腸球菌數(shù)量增加均無統(tǒng)計學意 義。表12益生菌對小鼠腸道內(nèi)產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量影響(logcfu/g χ士SD濕便) 由表12可知，與試驗前0. OOg/kgBW組比較，試驗前受試物組小鼠腸道內(nèi)產(chǎn)氣莢膜 梭菌數(shù)量均無統(tǒng)計學意義(P >0.05)。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的益生菌14天，與試驗后 0. 00g/kgBW相比較，受試組內(nèi)腸桿菌數(shù)量變化均無統(tǒng)計學意義。在試驗前后自身比較中，0. 00g/kg組及各受試組腸球菌數(shù)量增加均無統(tǒng)計學意 義。3、結論本發(fā)明的益生菌混合物具有調節(jié)腸道菌群的功能。不僅參與宿主的營養(yǎng)、代謝、免 疫過程及拮抗多種腸道病原微生物，對維持宿主腸道菌群平衡起重要的作用，還能夠預防 腸道內(nèi)傷寒沙門氏菌感染及提高免疫力，改善持久性腹瀉等保健功效。加入的嗜熱鏈球菌 以提高乳桿菌在腸道內(nèi)的增殖力，組合物的活性增加，功效加強，該調節(jié)適應更廣泛的人群 的不同腸道特征，滿足市場上的需求，安全可靠。本發(fā)明權利要求保護的益生菌組合物及其制劑，具體實施例所涉及的組合物均具 有上述調節(jié)腸道菌群功能的作用。為了更好的理解本發(fā)明，下面通過具體實施方式
對本發(fā)明內(nèi)容進一步解釋，但具 體實施方式不是對本發(fā)明保護范圍的限定。
具體實施例方式實施例1
取嗜酸乳桿菌5. 26g、活菌數(shù)4. OX 101(lCfU/g、干酪乳桿菌干酪亞種5. 26g、活菌 數(shù)5. 3X 101QCfu/g、乳雙歧桿菌2. Ilg,活菌數(shù)3. 2X 101QCfu/g、兩歧雙歧桿菌2. Ilg活菌 數(shù)4. 7X1010cfu/g>嗜熱鏈球菌5. 26g活菌數(shù)5. 3X1010cfu/g的益生菌組合物，再與菊粉 1040g、異麥芽670g、葡萄糖200g、草莓果粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂 IOgo以上原料充分混合制成1000袋、每袋2g。服用方法及服用量口服，每日1次，每次1 袋。實施例2取嗜酸乳桿菌8. 33g、干酪乳桿菌干酪亞種4. 17g、乳雙歧桿菌3. 33g，兩歧雙歧桿 菌1. 67g、嗜熱鏈球菌2. 50g的益生菌組合物，再與菊粉1040g、異麥芽670g、葡萄糖200g、 草莓果粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂10g，以上原料充分混合制成1000袋、 每袋2g。服用方法及服用量口服，每日1次，每次1袋。實施例3取嗜酸乳桿菌6. 45g、干酪乳桿菌干酪亞種3. 23g、乳雙歧桿菌2. 58g，兩歧雙歧桿 菌1. 29g、嗜熱鏈球菌6. 45g制成益生菌組合物20g，再與菊粉1040g、異麥芽670g、葡萄糖 200g、草莓果粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂10g，充分混合，以上原料制成 1000袋、每袋2g。服用方法及服用量口服，每日1次，每次1袋。實施例4取嗜酸乳桿菌4. 17g、干酪乳桿菌干酪亞種8. 33g、乳雙歧桿菌1. 67g，兩歧雙歧桿 菌3. 33g、嗜熱鏈球菌2. 50g的益生菌組合物，再與菊粉1040g、異麥芽670g、葡萄糖200g、 草莓果粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂10g，以上原料充分混合制成1000袋、 每袋2g。服用方法及服用量口服，每日1次，每次1袋。實施例5取嗜酸乳桿菌3. 23g、干酪乳桿菌干酪亞種6. 45g、乳雙歧桿菌1. 29g，兩歧雙歧桿 菌2. 58g、嗜熱鏈球菌6. 45g制成益生菌組合物20g，再與菊粉1040g、異麥芽670g、葡萄糖 200g、草莓果粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂10g，充分混合，以上原料制成 1000袋、每袋2g。服用方法及服用量口服，每日1次，每次1袋。實施例6取保加利亞乳桿菌5. 26g、鼠李糖乳桿菌5. 26g、嬰兒雙歧桿菌2. llg，青春雙歧桿 菌2. llg、嗜熱鏈球菌5. 26g的益生菌組合物，再與低聚異麥芽酮糖1040g、異麥芽670g、葡 萄糖200g、草莓果粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂10g。以上原料充分混合制 粒，裝入膠囊中即得膠囊劑。實施例7取羅伊氏乳桿菌5. 26g、發(fā)酵乳桿菌5. 26g、長雙歧桿菌2. llg，短雙歧桿菌2. llg、 嗜熱鏈球菌5. 26g的益生菌組合物，再與半乳寡糖1040g、異麥芽670g、葡萄糖200g、草莓果 粉40g、草莓香精10g、二氧化硅10g、硬脂酸鎂10g。以上原料充分混合制粒，壓片制成。實施例8取嗜酸乳桿菌8. 33g、保加利亞乳桿菌4. 17g、嬰兒雙歧桿菌3. 33g，兩歧雙歧桿菌 1.67g、嗜熱鏈球菌2. 50g的益生菌組合物，再與龍膽寡糖1040g、異麥芽670g、葡萄糖200g、 草莓果粉40g、草莓香精10g、交聯(lián)聚維酮10g、硬脂酸鎂10g，以上原料充分混合用適量乙醇
14溶液制成軟材后，制粒，60°C鼓風干燥，制粒，整粒，壓制成片，即得□腔崩解片。實施例9取乳乳桿菌6. 45g、植物乳桿菌3. 23g、乳雙歧桿菌2. 58g，嬰兒雙歧桿菌1. 29g、嗜 熱鏈球菌6. 45g制成益生菌組合物20g，再與奶粉1800g、充分混合，即制得含益生菌的奶 粉。
權利要求
一種益生菌組合物，其特征在于是由重量份的乳桿菌5 15份、雙歧桿菌2 6份和嗜熱鏈球菌1 10份組成。
2.如權利要求1所述的益生菌組合物，其特征在于所述的乳桿菌為嗜酸乳桿菌和干 酪乳桿菌干酪亞種的混合物。
3 .如權利要求1所述的益生菌組合物，其特征在于所述的雙歧桿菌為乳雙歧桿菌和 兩歧雙歧桿菌的混合物。
4.如權利要求2所述的益生菌組合物，其特征在于所述的嗜酸乳桿菌和干酪乳桿菌 干酪亞種的重量份比為1 0.5-2。
5.如權利要求3所述的益生菌組合物，其特征在于所述的雙歧桿菌為乳雙歧桿菌和 兩歧雙歧桿菌的重量份比為1 0.5-2。
6.如權利要求1 5所述的益生菌組合物，其特征在于所述的組合物中還可以添加 膳食纖維或益生元。
7.如權利要求6所述的益生菌混合物，其特征在于所述的膳食纖維和益生元為菊粉或寡糖。
8.權利要求1-7任一項所述的益生菌組合物制成藥學上可接受的制劑。
9.權利要求1-7任意一項所述的益生菌組合物在食品工業(yè)、制藥工業(yè)、健康保健工業(yè) 或天然產(chǎn)品生產(chǎn)中的用途。
10.如權利要求8所述的制劑在食品工業(yè)、制藥工業(yè)、健康保健工業(yè)或天然產(chǎn)品生產(chǎn)中 的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種益生菌組合物以及制劑，該組合物是由乳桿菌、雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌三大類益生菌組成，該組合物可以調節(jié)適應更廣泛的人群的不同腸道特征，滿足市場上的需求，安全可靠，作用效果明顯。
文檔編號A61P1/00GK101897729SQ20091006906
公開日2010年12月1日 申請日期2009年5月31日 優(yōu)先權日2009年5月31日
發(fā)明者徐詠全, 李長文 申請人:金士力佳友(天津)有限公司