專利名稱：采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種安絡痛菌粉的生產(chǎn)方法，具體的說是涉及一種用固體培養(yǎng)基生產(chǎn) 安絡痛菌粉的方法。
背景技術：
安絡痛具有通經(jīng)活絡和活血止痛的作用，用于治療坐骨神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、風濕 關節(jié)痛等疾病，其化學成分有甘露醇、氨基酸、對羥基肉桂酸、麥角留醇。近年來的研究表明 安絡小皮傘菌藥用和保健價值都很高，是對人體安全、無毒副作用的鎮(zhèn)痛和抗風濕藥物。安 絡痛粉是生產(chǎn)安絡痛的主要成分，安絡痛是采用白磨科皮傘屬安絡小皮傘菌經(jīng)菌種培養(yǎng)， 再經(jīng)固體培養(yǎng)基培養(yǎng)干燥、提取、混合所得。目前所用固體培養(yǎng)基的組分是用麥麩、瓊脂、蔗 糖、稻谷殼和水。該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時間長，菌絲收得率低，因此生產(chǎn)時間長，制造成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服上述不足提供一種采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的 方法，該方法培養(yǎng)時間短、菌絲收得率高、生產(chǎn)時間短，節(jié)約了生產(chǎn)成本。本發(fā)明的技術方案是一種采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，由以下步驟制備而成①.滅菌采用固體培養(yǎng)基，將固體培養(yǎng)基裝袋或裝入培養(yǎng)瓶，經(jīng)118°C _125°C滅 菌2-4h，所述固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩50-80份，稻谷殼20-30份，口服 葡萄糖5-20份，磷酸二氫鉀0. 05-0. 2份，硫酸鎂0. 025-0. 1份，加水至100份；②.接種培養(yǎng)常溫接種，接白蘑科安絡小皮傘菌菌種；③.培養(yǎng)23°C -27°C培養(yǎng)1. 5-2個月，55°C _65°C干燥12_24h得含水量3-5%的 安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取分兩次加入共6倍物料重量的95%乙醇，分兩次提取，第一次加4倍量 的乙醇，第一次煮沸1. 5-2. 5h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸l(wèi)_2h ；⑤.濃縮合并提取液，濃縮成含水20-30%的稠膏，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及 其培養(yǎng)基乙醇提取物；⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物(按干燥品計 算)安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉=0.8-1. 2 0.8-1.2。上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，所述步驟①中固體培養(yǎng)基由以下重 量份的組分組成麥麩60份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂 0. 05份，加水至100份。上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，所述步驟①中固體培養(yǎng)基由以下重 量份的組分組成麥麩65份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂 0. 05份，加水至100份。
上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，所述步驟①中固體培養(yǎng)基由以下重 量份的組分組成麥麩75份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂 0. 05份，加水至100份。上述采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，所述步驟③25°C培養(yǎng)1. 8個月；步 驟④60°C干燥18h至含水量25%，加入6倍物料重量的95份乙醇，分兩次提取，第一次加 4倍量的乙醇，第一次煮沸2h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸1. 5h。在安絡小皮傘菌粉的生產(chǎn)過程中人們通常用的固體培養(yǎng)基是麥麩、瓊脂、蔗糖、稻 谷殼和水，從安絡小皮傘菌粉問世以來，人們都認為用這種固體培養(yǎng)基生產(chǎn)是最好的方法， 在這個領域內(nèi)人們的思維已經(jīng)固定在用麥麩、瓊脂、蔗糖、稻谷殼和水作為固體培養(yǎng)基原 料，而且認為用這種固體培養(yǎng)基效果最好。本發(fā)明克服了本領域的這種技術偏見，在固體培 養(yǎng)基中加入了磷酸二氫鉀、硫酸鎂無機鹽和微量元素，這些無機鹽和微量元素在小皮傘菌 在生長、繁殖的過程中以作為生理活性物質的組成或生理活性作用的調(diào)節(jié)物。這些物質在 低濃度時對小皮傘菌生長有促進作用。磷磷在菌體生長、繁殖和代謝活動中起著極其重要 的作用。一方面磷是構成核酸、磷脂、許多輔酶或輔基以及高能磷酸化合物的重要原料，另 一方面磷在代謝調(diào)節(jié)方面也起著很重要的作用。磷能促進糖代謝的進行，促進小皮傘菌的 生長。硫硫是菌體細胞蛋白質的組成部分，是參與合成含硫氨基酸的元素，一些酶的活性 基，如輔酶A、生物素輔基，在生理作用上它是僅次于磷的一種重要元素，微生物從含硫無機 鹽或有機硫化物中得到硫，以硫酸鎂的形式人為提供硫元素。鉀鉀不參與生物細胞結構物 質的組成，但它是細胞中重要的陽離子之一，它是許多酶的激活劑，還與原生質體的特性和 細胞膜的通透性有關。各種無機鉀鹽，尤其是磷酸鉀鹽可作為鉀源。這些物質對小皮傘菌 生長有促進作用，使得培養(yǎng)時間短，菌絲收得率高，從而縮短了生產(chǎn)時間，本發(fā)明固體培養(yǎng) 基各組分原料便宜、易得，使得成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。下表是安絡小皮傘菌傳統(tǒng)處方和本發(fā)明處方的組合考察 上表中處方5不在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，處方6是傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)基，處方1-4 是本發(fā)明所用的固體培養(yǎng)基，從表中可以看出用本發(fā)明固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時間短，菌絲收得 率高，從而縮短了生產(chǎn)時間。
具體實施例方式實施例1 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅菌2h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)23°C培養(yǎng)45天，55°C干 燥12h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次提 取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1. 5h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸Ih ；⑤.濃 縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； ⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均 勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉=0.8 1，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。實施例2 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼
521kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg，硫酸鎂0. 03kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例1制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實施例1。實施例3 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg，硫酸鎂0. 04kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。實施例4 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. Ikg,硫酸鎂0. 05kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅菌 2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。實施例5 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。實施例6 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。實施例7 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量3. 5 %的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例1。實施例8 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。實施例9 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. Ikg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅菌 2h ;步驟 231培養(yǎng)45天，551干燥1211得含水量4.5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。
實施例10 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C 滅菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例1。實施例11 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)118°C滅 菌2h ；步驟③23°C培養(yǎng)45天，55°C干燥12h得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步 驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； 其他步驟同實施例1。實施例12 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅菌2. 5h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)24°C培養(yǎng)50天，58°C 干燥14h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1. 8h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 3h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及 其培養(yǎng)基粉=1 1，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。實施例13 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg，硫酸鎂0. 03kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例14 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg，硫酸鎂0. 04kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例15 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例16 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。
實施例17 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例18 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例19 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C 滅菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例20 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施 例12。實施例21 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C滅 菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例22 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)119°C 滅菌2. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例12制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例12。實施例23 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅菌2.8h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)25°C培養(yǎng)51天，59°C 干燥16h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1. 9h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 4h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及 其培養(yǎng)基粉=1.2 1，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。
實施例24 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例25 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例26 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例27 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例28 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0.05kg，加水至100 kg，裝袋，經(jīng)120 °C 滅菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例29 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. 1kg，硫酸鎂0.05kg，加水至100 kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例30 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C 滅菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例31 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物；其他步驟同實施例23。實施例32 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C滅 菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例33 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)120°C 滅菌2. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例23制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27 %，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例23。實施例34 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅菌3h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)25°C培養(yǎng)52天，60°C干 燥18h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次提 取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 5h ；⑤.濃 縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； ⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均 勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉=1.2 0.8，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。實施例35 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg，硫酸鎂0. 03kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例36 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg，硫酸鎂0. 04kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實施例34。實施例37 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例38 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121 °C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物；其他步驟同實施例34。實施例39 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121 °C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實施例34。實施例40 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121 °C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例41 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C 滅菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例42 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C滅 菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例43 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C 滅菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例44 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)121°C 滅菌3h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例34制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例34。實施例45 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅菌3. 5h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)26°C培養(yǎng)54天，62°C 干燥20h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2. 2h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 7h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉=0.8 1.2，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。實施例46 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例47 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例48 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例49 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例50 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例51 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30 %，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例52 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C 滅菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例53 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例54 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C滅 菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例55 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)122°C 滅菌3. 5h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例45制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例45。實施例56 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅菌3.8h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)27°C培養(yǎng)55天，64°C 干燥22h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次 提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2. 4h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1. 9h ； ⑤.濃縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉 混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及 其培養(yǎng)基粉=0.8 1.2，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。實施例57 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例58 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例59 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例60 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基
13粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例61 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例62 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例63 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C 滅菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例64 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例65 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C滅 菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例66 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)123°C 滅菌3. 8h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例56制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例56。實施例67 采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，包括以下步驟①.滅菌稱 取麥麩50kg，稻谷殼20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氫鉀0. 05kg,硫酸鎂0. 025kg,加水至 100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅菌4h;②.接種培養(yǎng)常溫接種；③.培養(yǎng)27°C培養(yǎng)60天，65°C干 燥24h得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95%的乙醇分兩次提 取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2. 5h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸2h ；⑤.濃 縮合并提取液，濃縮至含水量20%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物； ⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物安絡小皮傘菌及其培養(yǎng) 基粉=1 1，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物是按干燥品計算。實施例68 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩51kg，稻谷殼 21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氫鉀0. 06kg,硫酸鎂0. 03kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。實施例69 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩55kg，稻谷殼 23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氫鉀0. 08kg,硫酸鎂0. 04kg,加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量22%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實施例67。實施例70 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩58kg，稻谷殼 24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量24%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。實施例71 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩60kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量25 %，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實施例67。實施例72 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩65kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量3%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉； 步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取 物；其他步驟同實施例67。實施例73 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩75kg，稻谷殼 25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氫鉀0. lkg，硫酸鎂0. 05kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅 菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量3. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量30%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。實施例74 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩79kg，稻谷殼 29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氫鉀0. 15kg，硫酸鎂0. 09kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C 滅菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量4%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。實施例75 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩80kg，稻谷殼 30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氫鉀0. 2kg，硫酸鎂0. 1kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C滅
15菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量26%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。實施例76 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩64kg，稻谷殼 26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氫鉀0. 12kg，硫酸鎂0. 08kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C 滅菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量4. 5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27%，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。實施例77 本實施例中步驟①固體培養(yǎng)基取以下原料稱取麥麩74kg，稻谷殼 28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氫鉀0. 18kg，硫酸鎂0. 07kg，加水至100kg，裝袋，經(jīng)125°C 滅菌4h ；步驟③培養(yǎng)溫度和時間同實施例67制得含水量5%的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基 粉；步驟⑤合并提取液，濃縮至含水量27 %，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提 取物；其他步驟同實施例67。上述實施例中的各原料在市場上容易買到。本發(fā)明還可以將固體培養(yǎng)基裝瓶滅菌，都可以實現(xiàn)本發(fā)明的目的。
1權利要求
一種采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，由以下步驟制備而成①.滅菌采用固體培養(yǎng)基，將固體培養(yǎng)基裝袋或裝入培養(yǎng)瓶，經(jīng)118℃-125℃滅菌2-4h，所述固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩50-80份，稻谷殼20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氫鉀0.05-0.2份，硫酸鎂0.025-0.1份，加水至100份；②.接種培養(yǎng)常溫接種，接白蘑科安絡小皮傘菌種；③.培養(yǎng)23℃-27℃培養(yǎng)1.5-2個月，55℃-65℃干燥12-24h得含水量3-5％的安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉；④.提取加入95％的乙醇，分兩次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1.5-2.5h，第二次加2倍物料重量的乙醇，煮沸1-2h；⑤.濃縮合并提取液，濃縮成含水20-30％的稠膏，回收乙醇，得安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物；⑥.成粉加入安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物和安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉混合均勻，即得安絡痛菌粉，其中安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基乙醇提取物∶安絡小皮傘菌及其培養(yǎng)基粉＝0.8-1.2∶0.8-1.2。
2.根據(jù)權利要求1所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，其特征是所述步 驟①中固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩60份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份， 磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂0. 05份，加水至100份。
3.根據(jù)權利要求1所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，其特征是所述步 驟①中固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩65份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份， 磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂0. 05份，加水至100份。
4.根據(jù)權利要求1所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，其特征是所述步 驟①中固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩75份，稻谷殼25份，口服葡萄糖10份， 磷酸二氫鉀0. 1份，硫酸鎂0. 05份，加水至100份。
5.根據(jù)權利要求2、3或4中任一項所述的采用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，其 特征是所述步驟③25°C培養(yǎng)1. 8個月；步驟④60°C干燥18h至含水量25%，加入6倍物 料重量的95份乙醇，分兩次提取，第一次加4倍量的乙醇，第一次煮沸2h，第二次加2倍量 的乙醇，第二次煮沸1.5h。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，屬于生物發(fā)酵領域，為菌種培養(yǎng)提供了豐富的營養(yǎng)物質，解決了培養(yǎng)時間長，菌絲收得率低問題。一種采用優(yōu)化固體培養(yǎng)基生產(chǎn)安絡痛菌粉的方法，由固體培養(yǎng)基滅菌、接種培養(yǎng)、提取、濃縮、成粉幾個步驟，其中所述固體培養(yǎng)基由以下重量份的組分組成麥麩50-80份，稻谷殼20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氫鉀0.05-0.2份，硫酸鎂0.025-0.1份，加水至100份。各種無機鉀鹽，尤其是磷酸鉀鹽可作為鉀源。這些物質對小皮傘菌生長有促進作用，使得培養(yǎng)時間短，菌絲收得率高，從而縮短了生產(chǎn)時間，本發(fā)明固體培養(yǎng)基各組分原料便宜、易得，使得成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P25/02GK101879189SQ20091006477
公開日2010年11月10日 申請日期2009年5月4日 優(yōu)先權日2009年5月4日
發(fā)明者張秀芬 申請人:漯河市方匯藥業(yè)有限公司