專利名稱：過敏原脫敏方法
過敏原脫敏方法本申請(qǐng)涉及對(duì)過敏患者進(jìn)行脫敏的方法。更具體來說，涉及適用于任何類型的過 敏原和患者的表皮脫敏方法。本發(fā)明的方法基本上是非侵入性的，并且不需要使用佐劑。此 外，它可以由實(shí)際患者容易地使用和進(jìn)行。過敏在日常醫(yī)療實(shí)踐中占據(jù)越來越大的比例。它是世界范圍的公共衛(wèi)生現(xiàn)象，被 WHO分類為全世界第四普遍的病患。在法國(guó)，每三個(gè)法國(guó)人中有一個(gè)過敏，呼吸和食物過敏 二者影響越來越多的成年和兒童人群。脫敏方法是一種技術(shù)，根據(jù)這種技術(shù)，通過給藥極少量的過敏原，可能或多或少地 抑制過敏現(xiàn)象。從21世紀(jì)初起，WHO已經(jīng)認(rèn)識(shí)到脫敏方法是根治過敏的唯一方法。已經(jīng)確立，脫敏方法從第一步起就影響對(duì)致敏原的免疫應(yīng)答(Tij等，2004)，這意 味著它不僅減輕與短期過敏反應(yīng)有關(guān)的癥狀，而且也修改過敏性疾病的自然史，并且既防 止對(duì)新過敏原發(fā)生過敏，也防止癥候?qū)W向更嚴(yán)重的臨床征象發(fā)展，例如過敏性鼻炎轉(zhuǎn)變成 哮喘。免疫療法已證明在患有嚴(yán)重的IgE依賴性過敏、對(duì)有限數(shù)量的過敏原過敏的患者 中有效。盡管對(duì)于免疫治療療法的作用機(jī)制還不完全理解，但它可能通過下述方面起作 用 增加體外阻斷IgEs的生物學(xué)效應(yīng)的抗體IgGs、特別是IgG4級(jí)份，盡管這些效應(yīng) 在體內(nèi)的重要性仍有待評(píng)估，·改變TH1/TH2平衡，促進(jìn)THl應(yīng)答， 生產(chǎn)產(chǎn)生白介素IO(IL-IO)的T細(xì)胞。后者對(duì)肥大細(xì)胞、某些T淋巴細(xì)胞和嗜酸 性細(xì)胞具有許多抗過敏性質(zhì)，并且也促進(jìn)IgG4的生產(chǎn)。通過皮下途徑的免疫療法，是大多數(shù)變態(tài)反應(yīng)學(xué)家的標(biāo)準(zhǔn)途徑，仍然廣泛使用。盡 管昂貴并且在每次注射時(shí)需要專業(yè)醫(yī)師的參與，但目前它仍被當(dāng)作兒童中的標(biāo)準(zhǔn)脫敏途徑 (Pajno等，2005)。但是，它不是沒有風(fēng)險(xiǎn)的，因?yàn)閾?jù)估計(jì)死亡率是250萬次注射中1次，平 均每年死亡3. 4人。某些具有高危反應(yīng)的致過敏過敏原不用于皮下脫敏治療的范圍內(nèi)。這是落花生和 大多數(shù)食物過敏原的情況。現(xiàn)在，舌下免疫療法被WHO當(dāng)作經(jīng)皮下途徑的免疫療法的令人滿意的替代方案。 它正在許多國(guó)家進(jìn)行評(píng)估。第一種打算用于公眾的商業(yè)化舌下給藥片劑制劑，正在某些歐 洲國(guó)家銷售，并在美國(guó)試銷。據(jù)許多作者報(bào)道，舌下免疫療法的患者耐受性好得多，并且與其他給藥途徑相比， 成本效果比更好，因?yàn)樗恍枰t(yī)生的參與，可以由患者自己給藥，使他們更愿意采用它而 不是其他途徑(Pajno等，2005)。經(jīng)舌下途徑的治療中副作用少見，據(jù)估計(jì)為1000個(gè)給藥劑量0. 1到0.2次反應(yīng)。 反應(yīng)大部分輕微，影響口腔或舌下區(qū)域或胃腸區(qū)域(LaRosa等，1999)。然而，就有效性來說，某些人認(rèn)為舌下途徑不如皮下途徑有效；它需要使用較大量的過敏原，并且不能被批準(zhǔn)用于所有過敏原，盡管通過這條途徑對(duì)落花生和牛奶進(jìn)行脫敏 的試驗(yàn)正在進(jìn)行之中。該技術(shù)用于食物過敏原的安全性仍有待評(píng)估。鼻內(nèi)免疫療法，在18項(xiàng)受控研究中的17項(xiàng)中，已被證明有效。因此，至少在過敏 性鼻炎中，這是有效安全的途徑。但是，它一般不易被患者耐受，從而增加了其臨床應(yīng)用的 限制。在比較不同脫敏途徑的研究中，在接近50%的病例中，經(jīng)鼻途徑的治療在不到1年 內(nèi)提前中斷，而通過皮下或舌下途徑治療的兒童中，只有不到10%提前終止了(Pajno等， 2005)。這些脫敏方法的有利的替代方案，在于通過表皮途徑進(jìn)行免疫治療的可能性，即 通過在皮膚上反復(fù)施用過敏原，典型情況下導(dǎo)致過敏原擴(kuò)散到皮膚的表層中，一般沒有任 何明顯的透皮通過。長(zhǎng)期以來，已經(jīng)在動(dòng)物中證實(shí)了在皮膚上反復(fù)施用過敏原，能夠引起動(dòng)物對(duì)所述 過敏原的敏化(Golovanoff，1926)。獲得的反應(yīng)是系統(tǒng)性的，影響整個(gè)身體，因此完全超出 了僅僅皮膚區(qū)域。更近些時(shí)候，開發(fā)了經(jīng)表皮途徑對(duì)牛奶致敏的小鼠模型(Chang)。已經(jīng)顯示，在這 些情況下，引發(fā)的免疫應(yīng)答涉及不同細(xì)胞群體，導(dǎo)致了 TH2淋巴細(xì)胞的活化，促進(jìn)了過敏原 的特異性IgE類型抗體的產(chǎn)生。某些研究能夠確定，如果皮膚在刺激條件下的自發(fā)應(yīng)答實(shí)際上是TH2類型的，那 么有可能通過向皮膚施加下列不同刺激而改變應(yīng)答的免疫情況·通過物理因子例如紫外線攻擊·通過改變角質(zhì)層結(jié)構(gòu)的反復(fù)的剝層對(duì)皮膚進(jìn)行機(jī)械攻擊·通過微生物因子例如霍亂毒素的攻擊·改變皮膚通透性。對(duì)過敏原接觸產(chǎn)生的免疫應(yīng)答的類型可以通過這些不同的因子而改變，導(dǎo)致優(yōu)選 活化THl淋巴細(xì)胞，促進(jìn)了 IgG4類型抗體的產(chǎn)生。表皮途徑由變態(tài)反應(yīng)學(xué)家在50年代期間使用。它由一周幾次滴加過敏原在皮膚 上進(jìn)行劃破構(gòu)成(Pautrizel等，1957)。該技術(shù)由有經(jīng)驗(yàn)的變態(tài)反應(yīng)學(xué)家執(zhí)行，提供了有效 性和安全性。但是，由于僅在非常小的規(guī)模下進(jìn)行，并且不是非常標(biāo)準(zhǔn)化，這種方法傳播不 廣。最后，由反復(fù)劃破導(dǎo)致的痛苦通常非常廣泛，毀傷無疑是該方法今天被廢棄的原因。專利申請(qǐng)EP 1031346提出了含有透皮裝置和抗原或過敏原、以便獲得脫敏的疫 苗，專利申請(qǐng)WO 2007/122226提出了用于對(duì)過敏對(duì)象進(jìn)行脫敏的皮膚裝置的使用。但是， 在這些文獻(xiàn)中描述的方法使用了誘導(dǎo)細(xì)胞因子活性的化合物(例如佐劑)，不是靶向允許 對(duì)過敏對(duì)象進(jìn)行有效脫敏的致耐受性類型的炎性反應(yīng)。本發(fā)明在于開發(fā)有效的表皮脫敏方法，使用這種脫敏方法可以克服現(xiàn)有技術(shù)的缺 點(diǎn)和限制。更具體來說，本發(fā)明部分在于證明了由過敏原的皮膚施加所引起的特異性炎性反 應(yīng)，極大地影響并參與了免疫細(xì)胞在耐受性意義上的反應(yīng)。本發(fā)明包括以反復(fù)和長(zhǎng)期的方式在皮膚上施用過敏原以便引起炎性反應(yīng)，該炎性 反應(yīng)由施用的時(shí)間長(zhǎng)度和重復(fù)度所導(dǎo)向的情況是致耐受性類型的。因此，本發(fā)明不僅涉及 弓丨發(fā)炎性反應(yīng)，而且涉及對(duì)它進(jìn)行導(dǎo)向。
本申請(qǐng)顯示，控制該炎性反應(yīng)的條件和獲得的耐受性的程度，代表了表皮脫敏方 法的基本要素。本發(fā)明顯示，反復(fù)地引發(fā)這種特異性炎性反應(yīng)，對(duì)于使免疫應(yīng)答的耐受性逐 漸轉(zhuǎn)向是重要的，這使得即使在不存在任何佐劑或皮膚的預(yù)處理的情況下，也可能進(jìn)行表 皮脫敏。因此，本發(fā)明第一次提出了一種皮膚脫敏方法，包括在允許由在皮膚上施用過敏 原所產(chǎn)生炎癥在治療過程中得以維持的條件下，在對(duì)象的皮膚上反復(fù)地皮膚施用過敏原。 有利情況下，方法包括至少一個(gè)用于監(jiān)測(cè)和/或評(píng)估由在皮膚上施用過敏原而產(chǎn)生的炎癥 的程度的步驟，該反應(yīng)的引發(fā)、維持和/或控制，為引導(dǎo)身體對(duì)過敏原在耐受性意義上的反 應(yīng)，提供了可能性。因此，本發(fā)明的目的在于使用過敏原來制備通過在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的皮 膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)所述對(duì)象進(jìn)行表皮脫敏的組合物，其特征在于過敏原在允許炎 性反應(yīng)在治療過程中得以維持的條件下施用在皮膚上。本發(fā)明事實(shí)上顯示出，這種炎性反 應(yīng)的持續(xù)，促進(jìn)了免疫系統(tǒng)針對(duì)過敏原的致耐受性類型的應(yīng)答。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于使用過敏原來制備通過在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的 皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)所述對(duì)象進(jìn)行表皮脫敏的組合物，其特征在于在治療過程中， 優(yōu)選在每次施用過敏原的過程中，它包含用于控制和/或維持由在皮膚上施用過敏原而產(chǎn) 生的炎性反應(yīng)的步驟。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于使用過敏原來制備通過在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的 皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)所述對(duì)象進(jìn)行表皮脫敏的組合物，其特征在于在治療過程中， 它包含控制和/或維持由在皮膚上施用過敏原而產(chǎn)生的炎性反應(yīng)。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于使用過敏原來制備用于在耐受性的意義上改變對(duì)所述 過敏原過敏的對(duì)象的免疫應(yīng)答的組合物，包括在允許炎性反應(yīng)在治療過程中維持的條件 下，在對(duì)象的皮膚上反復(fù)地施用過敏原。本發(fā)明還涉及通過在對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)對(duì)象進(jìn) 行表皮脫敏，其特征在于在允許炎性反應(yīng)在治療過程中維持的條件下，在皮膚上施用過敏原。正如隨后將在本申請(qǐng)中詳細(xì)描述的，有利情況下，通過控制或調(diào)節(jié)治療過程中過 敏原的劑量或頻率或施用時(shí)間和/或其本性，來維持炎性反應(yīng)。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于對(duì)過敏原過敏的個(gè)體的表皮脫敏方法，其特征在于它包 含至少一個(gè)用于在治療過程中評(píng)估由在皮膚上施用過敏原所產(chǎn)生的炎癥的程度的步驟。通 過評(píng)估炎性反應(yīng)的程度，如果需要，可以調(diào)整脫敏的條件。本發(fā)明還涉及通過在對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)對(duì)象進(jìn) 行脫敏的方法，其特征在于在每次施用過敏原時(shí)，它包含控制炎性反應(yīng)的步驟。本發(fā)明還涉及通過在對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)對(duì)象進(jìn) 行脫敏的方法，其特征在于在治療過程中，它包含維持由在皮膚上施用過敏原所產(chǎn)生的炎 性反應(yīng)。本發(fā)明還涉及使用由在患者的皮膚上施用過敏原所產(chǎn)生的炎性反應(yīng)作為標(biāo)志物， 以便調(diào)整所述患者的治療，用于對(duì)所述過敏原的表皮脫敏。正如隨后將在申請(qǐng)中描述的，本發(fā)明可應(yīng)用于任何類型的過敏原，可以使用任何皮膚給藥裝置進(jìn)行施用。它不需事先對(duì)患者的皮膚進(jìn)行處理就允許有效的脫敏。此外，它 不需共同給藥佐劑化合物。使用沉積在過敏對(duì)象皮膚上的過敏原是非常安全的，正如由診斷領(lǐng)域中使用過敏 斑貼試驗(yàn)而積累的經(jīng)驗(yàn)所證明的。根據(jù)我們?cè)诜▏?guó)使用Diallertest 、從2004年開始銷售 的第一種即用型過敏斑貼試驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)，沒有報(bào)道有不利效應(yīng)，無論是嚴(yán)重的局部作用還是 全身類型的一般化反應(yīng)。在將過敏原施用到皮膚上之后，免疫系統(tǒng)可能不與也可能與系統(tǒng)性免疫反應(yīng)的局 部(皮膚)炎性反應(yīng)進(jìn)行反應(yīng)。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，在對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上施用所述過敏原， 誘導(dǎo)了皮膚反應(yīng)、特別是炎性類型的皮膚反應(yīng)，這是通過過敏原與皮膚表面上存在的角質(zhì) 細(xì)胞和朗格漢斯細(xì)胞的接觸而觸發(fā)的。在通過本發(fā)明的方法進(jìn)行的表皮免疫治療中，這種由在對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的皮 膚上施用所述過敏原所引起的反應(yīng)，在治療過程中被維持和/或控制。本發(fā)明事實(shí)上顯示， 這種反應(yīng)的維持和控制，導(dǎo)致了免疫應(yīng)答在對(duì)象對(duì)所述過敏原的耐受性的意義上的逐步定 向定向。這種應(yīng)答在臨床上體現(xiàn)為皮膚反應(yīng)性的逐漸降低或完全消失，以及對(duì)所述過敏原 的耐受閾值的增加。上面陳述的機(jī)制適用于任何過敏原，尤其是作用于消化區(qū)域(食物過敏，例如卵 清蛋白、落花生、貝類等)，作用于肺部區(qū)域(呼吸過敏例如對(duì)花粉)或皮膚區(qū)域的過敏原。因此，本發(fā)明方法所基于的、并由后文中討論的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)所充分說明的原理，在于 通過皮膚途徑，有可能誘導(dǎo)以前對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的耐受性。這種效應(yīng)是通過將過敏原 維持在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上，并由此引起、維持和控制對(duì)過敏原的炎性反應(yīng)， 以在耐受性的意義上指導(dǎo)身體對(duì)過敏原的反應(yīng)，來獲得的。因此，本發(fā)明的表皮免疫療法是用于過敏的治療性方法，由使皮膚的免疫細(xì)胞 (例如朗格漢斯細(xì)胞，肥大細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，白細(xì)胞)與過敏原在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象 中相接觸，以及通過特異性的、受控的和持續(xù)性的細(xì)胞炎性反應(yīng)引發(fā)免疫應(yīng)答的轉(zhuǎn)變，導(dǎo)致 過敏患者對(duì)所述過敏原的耐受。在本發(fā)明的方法中，與所有現(xiàn)有的脫敏手段不同，脫敏過程 在患者的炎性反應(yīng)的性質(zhì)和程度方面受到監(jiān)測(cè)和引導(dǎo)。這種方法提供了可以根據(jù)每個(gè)患者 的需要和特征進(jìn)行調(diào)節(jié)的有效的脫敏方法，并且不需要使用佐劑化合物或?qū)ζつw進(jìn)行預(yù)先 的穿孔或磨損處理。總的來說，本發(fā)明的方法包括以反復(fù)、長(zhǎng)期和受控的方式，在允許特異性針對(duì)過敏 原的炎性反應(yīng)在治療過程中得以維持的條件(例如劑量和/或頻率和/或施用時(shí)間條件) 下，將過敏原施用在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上。在有利的實(shí)施方案中，不使用任何 佐劑化合物和/或在健康皮膚上，就可以實(shí)現(xiàn)施用。一般來說，本發(fā)明的方法包括下列階段a.任選地選擇患者和/或過敏原(劑量，本質(zhì)，劑型等)；b.向患者施用過敏原；以及c.控制炎性反應(yīng)；在治療過程中，有利情況下，步驟b.和C.重復(fù)一次或幾次，在 治療過程中調(diào)整過敏原的條件(劑量，本質(zhì)，劑型，施用頻率，暴露時(shí)間等)，以便維持炎性 反應(yīng)。
由于本發(fā)明是基于對(duì)炎性反應(yīng)的控制，因此重要的是進(jìn)行治療的過敏患者，在第 一次在皮膚上施用過敏原的過程中具有這樣的應(yīng)答。為此，有利情況下，進(jìn)行第一次(一系 列)過敏原施用，以便確定過敏原制備物在治療開始時(shí)給出最適合的反應(yīng)性。為此，在有利情況下，以預(yù)定的形式和單個(gè)劑量進(jìn)行第一次過敏原施用。如果對(duì)象發(fā)生了適合的炎性反應(yīng)，可以在該過敏原劑量/形式的基礎(chǔ)上進(jìn)行治 療。適合的反應(yīng)是指例如可以通過肉眼觀察到的炎性反應(yīng)，典型情況下作為浸潤(rùn)性紅斑損 傷，帶有或不帶有丘疹或可能的濕疹型特點(diǎn)。如果確定的反應(yīng)強(qiáng)度很強(qiáng)，包括了囊泡或甚至水皰，或者廣泛傳播到附近的皮膚 區(qū)域，或強(qiáng)烈引起癢疹，那么用于引發(fā)治療的過敏原濃度將被降低，以便獲得適合的應(yīng)答， 或可選地減少過敏原在皮膚上的施用時(shí)間。相反，當(dāng)確定的反應(yīng)強(qiáng)度太低時(shí)，過敏原的劑量和/或施用時(shí)間和/或同時(shí)使用的 裝置的數(shù)量將被增加，以便獲得如上定義的顯著的初始反應(yīng)。在這種情況下，測(cè)試其他形式 的過敏原，以便鑒定能夠給出更好的對(duì)象反應(yīng)性的制備物，也是可能的。因此，過敏原可以 在不同形式下存在(完整食品，蛋白提取物，肽，重組或合成產(chǎn)品等)，這些形式可以在過敏 患者中引起不同炎性應(yīng)答。因此，該治療的第一個(gè)階段允許確定最適合形式的過敏原，以開 始治療。就此而言，在具體實(shí)施方案中，在治療開始時(shí)，給患者使用一系列含有不同濃度和 /或形式的過敏原的裝置。通過該第一次治療，有可能在患者的基礎(chǔ)上確定劑量和/或最適 形式，用作開始治療的參照。如果需要，可以在治療過程中反復(fù)使用這些具有不同濃度和/ 或形式的裝置，以便根據(jù)對(duì)象反應(yīng)性的變化調(diào)整在治療過程中使用的劑量/形式。當(dāng)初始劑量/形式已被確定時(shí)，可以進(jìn)行表皮免疫治療。該治療包括在皮膚上反 復(fù)地施用過敏原。有利情況下，施用在對(duì)象背部的上方部分或手臂或前臂的內(nèi)側(cè)面進(jìn)行。在 已經(jīng)事先檢查過針對(duì)過敏原的局部反應(yīng)性的優(yōu)選條件下，它也可以在身體的任何其他區(qū)域 進(jìn)行。應(yīng)該理解，在治療過程中，過敏原可以施用在身體的不同區(qū)域上。施用以可變的頻率 更新，這取決于使用的治療程序(典型的程序包括大約6到72小時(shí)之間的初始施用時(shí)間)。 它們可以連續(xù)或分批施用，在施用之間觀察可變的時(shí)間間隔(可以在例如1天到三周的范 圍內(nèi))。反復(fù)和長(zhǎng)期施用幾個(gè)月過敏原，導(dǎo)致炎性介導(dǎo)物的局部釋放以及炎性細(xì)胞的流入， 這在耐受性的意義上影響了免疫細(xì)胞的反應(yīng)。典型的程序包括在對(duì)對(duì)象進(jìn)行脫敏所需的時(shí) 間跨度內(nèi)，該跨度可以超過幾個(gè)月，反復(fù)地施用過敏原，每次施用時(shí)間為大約6到72小時(shí)， 間隔大約5-15天。本發(fā)明證明，為了確保適合的脫敏，重要的是在治療過程中控制和維持(通過調(diào) 整劑量或暴露于過敏原的時(shí)間或頻率，或其形式)局部炎性反應(yīng)。因此，本發(fā)明的方法包括 定期評(píng)估由反復(fù)地在皮膚上施用過敏原所產(chǎn)生的炎癥的程度。因此，在治療過程中，過敏原 劑量和/或時(shí)間，和/或同時(shí)使用的裝置的數(shù)量，將根據(jù)皮膚反應(yīng)性的程度進(jìn)行調(diào)整。治療 過程中皮膚反應(yīng)的強(qiáng)度的降低，導(dǎo)致施用頻率和/或同時(shí)使用的裝置的數(shù)量和/或過敏原 劑量的增加，和/或?qū)е缕湫问降母淖?。相反，皮膚反應(yīng)強(qiáng)度的增加，導(dǎo)致施用頻率和/或 同時(shí)使用的裝置的數(shù)量和/或所述裝置中過敏原的濃度，和/或其形式的降低。炎性反應(yīng)、特別是皮膚反應(yīng)的強(qiáng)度的評(píng)估，可以由醫(yī)生和/或?qū)嶋H的患者進(jìn)行。該 評(píng)估可以通過任何方法進(jìn)行，通常是通過目測(cè)檢查或通過接觸，例如通過使用EAACI的經(jīng)雙方同意的評(píng)估網(wǎng)格(參見Allergy 61(2006) 1377-1384)。因此，皮膚炎性反應(yīng)存在不同 的程度紅斑_(dá)紅斑和浸潤(rùn)_紅斑和幾個(gè)丘疹_紅斑伴有許多丘疹_紅斑和囊泡。適合的 炎性反應(yīng)典型為III型炎性反應(yīng)，即含有紅斑和幾個(gè)丘疹。只要可能，這是人們?cè)谥委熤性?圖維持的反應(yīng)類型。當(dāng)然，當(dāng)患者從開始就發(fā)生不太強(qiáng)的反應(yīng)時(shí)，參比反應(yīng)將必然不太強(qiáng)， 并且它將在患者的基礎(chǔ)上進(jìn)行調(diào)整。此外，在治療過程中，由于對(duì)象的脫敏，炎性反應(yīng)將會(huì) 降低。為了使用本發(fā)明，通過炎性標(biāo)志物例如細(xì)胞因子或干擾素的定劑量來評(píng)估炎性反 應(yīng)，也是可能的。為了盡可能好地調(diào)整治療，在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，在治療過程中通過使對(duì) 象與一定劑量范圍的過敏原相接觸，對(duì)炎性反應(yīng)性進(jìn)行一次或幾次評(píng)估，以允許為后續(xù)治 療選擇最適合的劑量。炎性反應(yīng)的評(píng)估可以都伴隨著治療，即在每次新施用過敏原時(shí)進(jìn)行。僅在某些間隔時(shí)間而不是每次施用時(shí)進(jìn)行這種評(píng)估，也是可能的。此外，如果優(yōu)選在整個(gè)治療過程中維持炎性反應(yīng)，但這并不是強(qiáng)制性的，并且當(dāng)?shù)?一次已建立免疫接觸，而且當(dāng)特異性級(jí)聯(lián)反應(yīng)(有免疫能力的細(xì)胞的活化和細(xì)胞因子與抗 體的產(chǎn)生)已經(jīng)被足夠地引發(fā)時(shí)，也可以獲得有效的脫敏。因此，在實(shí)踐中，當(dāng)炎性反應(yīng)已 經(jīng)達(dá)到足夠的水平，例如表現(xiàn)出所需強(qiáng)度的皮膚反應(yīng)時(shí)，可以移除裝置，然后在確定時(shí)間的 延遲后，在另一個(gè)皮膚區(qū)域上放置另一個(gè)裝置。在本發(fā)明的可選方案中，至少在炎性反應(yīng)達(dá)到參比的程度之前，將過敏原(或施 用裝置)維持在皮膚上。當(dāng)這種程度達(dá)到時(shí)，可以移除過敏原(或裝置)，經(jīng)過一段等待時(shí) 間后進(jìn)行新的施用。參比反應(yīng)典型地是可以通過肉眼觀察到的反應(yīng)，例如作為浸潤(rùn)性紅斑 損傷，或具有濕疹型特點(diǎn)。過敏原(或裝置)也可以維持在皮膚上，以便維持炎性反應(yīng)。典型地，在這種情況 下，當(dāng)所有過敏原都已經(jīng)擴(kuò)散，或如果炎性反應(yīng)達(dá)到太強(qiáng)的強(qiáng)度時(shí)，移除施用裝置。應(yīng)該理解，在治療過程中，這些可選方案可以輪流使用。在實(shí)施方案中，留給裝置的設(shè)置之間的間隔時(shí)間是1到21天之間。當(dāng)對(duì)過敏原的任何皮膚反應(yīng)性都已消失或已經(jīng)非常明顯地降低時(shí)，治療被認(rèn)為已 經(jīng)完成并成功地進(jìn)行。治療的成功可以用過口服引發(fā)試驗(yàn)或任何其他在變態(tài)反應(yīng)學(xué)中承認(rèn) 的手段來驗(yàn)證。因此，治療的時(shí)間長(zhǎng)度是可變的，取決于皮膚對(duì)過敏原的反應(yīng)性的演變。本 發(fā)明方法的脫敏治療的目的，是使對(duì)過敏原的局部皮膚反應(yīng)在長(zhǎng)期接觸后完全消失，或使 反應(yīng)性降低，以便估計(jì)出對(duì)象對(duì)過敏原的反應(yīng)性已經(jīng)被表皮免疫治療顯著地降低了，在意 外接觸過敏原的過程中發(fā)生過敏性休克的風(fēng)險(xiǎn)顯著地降低了。本發(fā)明可以使用任何確保皮膚與過敏原接觸的皮膚給藥裝置來實(shí)行。它們優(yōu)選為 貼片類型的裝置、貼片或繃帶，優(yōu)選為貼片，例如封閉性(occlusive)貼片。這樣的裝置典型地包含支持物，其上固定有過敏原，和/或包含含有過敏原的儲(chǔ) 存器或腔室。使用的裝置典型為具有被動(dòng)擴(kuò)散的透皮性質(zhì)，即它不含任何能夠引起皮膚穿孔或 磨損的手段。事實(shí)上，獲得的數(shù)據(jù)顯示，即使不預(yù)先進(jìn)行皮膚處理，本發(fā)明的方法也允許誘 導(dǎo)表皮脫敏。但是，使用提供有旨在利用物理、化學(xué)或生物學(xué)手段增加皮膚的表面層對(duì)過敏原的通透性，和/或旨在增加皮膚反應(yīng)性的性質(zhì)的裝置，也是可能的。因此，在一個(gè)可選方 案中，施用裝置可以利用微針或電學(xué)手段對(duì)通透性起作用，促進(jìn)過敏原通過，遠(yuǎn)達(dá)表皮的基 底層。此外，盡管不是必需的，但可以在每次施用裝置之前對(duì)皮膚進(jìn)行預(yù)處理(例如通過磨 損處理)，以便進(jìn)一步促進(jìn)脫敏治療。在優(yōu)選實(shí)施方案中，使用了封閉性貼片類型的裝置，例 如在專利申請(qǐng)W002/071950中描述的靜電貼片Viaskin 。此外，在優(yōu)選實(shí)施方案中，裝置被提供有確保其維持在皮膚上的手段。為此目的， 可以使用任何黏附性手段，包括具有強(qiáng)的黏附性的膠、聚合物或塑料類型的材料。也可以使 用提供有腕帶(bracelet)的裝置，如同在例如專利申請(qǐng)No. FR0753787中描述的，或具有剝 落頁(yè)片的裝置，如同在例如專利申請(qǐng)NO.FR0753265中描述的。應(yīng)該理解，裝置的具體性質(zhì)和形式可以由本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員進(jìn)行改造，所必 需的性質(zhì)是確保過敏原與施用位點(diǎn)處皮膚的接觸。在具體實(shí)施方案中，治療通過提供有至少部分透明的背襯的裝置(例如 VIASKIN 裝置)來進(jìn)行，以便可以通過透明的膜直接觀察到炎性反應(yīng)(例如紅斑的出 現(xiàn))。裝置的背襯甚至可以被改造，以便幫助患者確定皮膚反應(yīng)的閾值水平，從該水平他/ 她能夠移除裝置。因此，在特別有利的實(shí)施方案中，使用了背襯具有透明區(qū)域，其上印有監(jiān) 測(cè)圖案例如紅色網(wǎng)格或紅色同心圓的裝置。當(dāng)皮膚沒有反應(yīng)時(shí)，圖案可以很好地觀察到，而 當(dāng)獲得皮膚反應(yīng)時(shí)，它們被擦除。采用透明背襯系統(tǒng)具有許多優(yōu)點(diǎn)，尤其是-這避免了與過敏原不必要的延長(zhǎng)的接觸，增加了皮膚耐受性，最小化了瘙癢類型 的令人不悅的次級(jí)效應(yīng)，事實(shí)上提高了接受性和遵從性；-這增加了方法在安全性方面的性能，并進(jìn)一步最小化了系統(tǒng)性反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，這種 系統(tǒng)性反應(yīng)對(duì)于許多過去用于對(duì)落花生進(jìn)行脫敏的方法來說是致命的；-這提供了一種解決方案，由此可以將暴露于過敏原的時(shí)間可變的觀念整合到工 業(yè)過程中。在這種情況下，本發(fā)明的一個(gè)目的涉及用于將過敏原施用到對(duì)象皮膚上的皮膚裝 置，其特征在于包含提供有透明區(qū)域的背襯，通過背襯可以觀察到由過敏原施用在皮膚上 所引發(fā)的炎性皮膚反應(yīng)。有利情況下，裝置是封閉類型的和/或具有被動(dòng)擴(kuò)散的裝置。裝 置典型為貼片。此外，本發(fā)明的另一個(gè)目標(biāo)涉及含有幾種用于過敏原的皮膚施用的裝置的試劑 盒，裝置含有不同劑量的過敏原和/或不同形式的過敏原。在本發(fā)明的范圍內(nèi)使用的過敏原可以是各種不同的本質(zhì)、形式和來源。因此，它可 以是例如食物、呼吸或皮膚過敏原。它們可以是蛋白(或多肽或肽)，脂類，糖等，可以為提 取產(chǎn)物的形式，重組體的形式，和/或合成來源的，例如如果需要，進(jìn)行化學(xué)或免疫學(xué)修飾 以便改變它們的性質(zhì)。過敏原可以是整體的、天然的形式，或采取片段化的、變性的形式等。 典型使用的制備物含有幾種致敏性抗原的組合，和/或作為偶聯(lián)物或復(fù)合物的過敏原。應(yīng) 該理解，本發(fā)明的方法基本上不依賴于過敏原的本質(zhì)，因此可以適用于任何含有過敏原的 制備物，例如食物過敏原(例如落花生，貝類，牛奶，蛋，魚，小麥，大豆等)或皮膚或呼吸過 敏原(螨，花粉，動(dòng)物毛發(fā)等)。有利情況下，過敏原與任何適合于藥用的賦形劑或載體一起進(jìn)行配制。施用的致 敏性制備物可以不同的形式出現(xiàn)，例如液體或固體的形式出現(xiàn)。在優(yōu)選實(shí)施方案中。過敏原采取干燥形式，即脫水的形式，尤其是粉末、顆粒、聚集物、干膠片、干燥形式等。干燥形式 可以通過冷凍干燥，通過簡(jiǎn)單的蒸發(fā)獲得。在具體實(shí)施方案中，過敏原采用粉末形式。正如前面指出的，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，使用它，即使不共同給藥佐劑也可能獲得對(duì) 過敏原的脫敏。此外，在優(yōu)選實(shí)施方案中，施加到患者皮膚上的致敏性制備物不含任何添 加的佐劑化合物。在本發(fā)明的意義上，術(shù)語佐劑是指任何對(duì)皮膚行使生理化學(xué)和/或生物 學(xué)作用，促進(jìn)抗原透入到皮膚中，以及增加針對(duì)抗原的免疫應(yīng)答的化合物。就生理化學(xué)和/ 或生物學(xué)作用而言，正如上面定義的，佐劑是通過擾亂角質(zhì)層而改變表皮的通透性，從而允 許抗原通過及其與表皮的免疫活性細(xì)胞接觸的化合物。佐劑化合物的例子尤其是霍亂毒素 (CT)或大腸桿菌的熱不穩(wěn)定毒素(LT)。其他的例子是Paul等(Paul A, Cevc G, Bachhawat BK. Transdermal immunization with large proteins byultradeformabIe drug carriers.(通過超級(jí)可變形藥物載體使用大蛋白進(jìn)行透皮免疫)Eur. J. Immunol. 1995， 25(12) 3521-4)所描述的傳遞體，它允許將抗原運(yùn)輸?shù)侥ぶ小Ｈ欢?，在一種可選方案中，過敏原可以與佐劑化合物組合使用，和/或提供有用于 擴(kuò)大對(duì)所述過敏原的炎性反應(yīng)的性質(zhì)，例如與佐劑或具有免疫調(diào)節(jié)活性的化合物組合，所 述具有免疫調(diào)節(jié)活性的化合物例如為細(xì)胞因子、化合物、Toll受體配體等。表述“組合使 用”表示將過敏原與化合物給藥到同一對(duì)象，以便在體內(nèi)誘導(dǎo)協(xié)同效應(yīng)。但是，它們可以根 據(jù)不同的程序和途徑給藥。因此，它們可以都通過表皮途徑施用，或化合物通過另一種途徑 施用。此外，它們不是必需在同時(shí)施用，而是可以相繼地施用，重復(fù)或不重復(fù)，以類似的頻率 或不以類似的頻率施用。典型情況下，佐劑化合物在過敏原之前或同時(shí)施用。在通常的實(shí)施方案中，裝置包含的過敏原的量在0. 1到1，000μ g/cm2裝置表面積 之間，優(yōu)選在20到500 μ g每cm2裝置表面積之間，更優(yōu)選在20到200 μ g每cm2裝置表面積 之間。應(yīng)該理解，該量可以由本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員根據(jù)治療的目標(biāo)、病理學(xué)和時(shí)間長(zhǎng)度、 對(duì)象等進(jìn)行調(diào)整。下面的實(shí)驗(yàn)實(shí)施例顯示了這種反應(yīng)性的降低可以通過使用本發(fā)明的劑量控制來 獲得。本發(fā)明的表皮免疫治療方法與現(xiàn)有技術(shù)狀態(tài)相比，包含了許多優(yōu)點(diǎn)。這是一種原創(chuàng)方法，旨在通過定期、長(zhǎng)期地在對(duì)過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上施用 所述過敏原，來引發(fā)和控制炎性反應(yīng)，目的在于將身體對(duì)該過敏原的反應(yīng)導(dǎo)向耐受。這是一種非常安全的方法，正如由特應(yīng)性斑貼試驗(yàn)領(lǐng)域中積累的經(jīng)驗(yàn)，以及自從 在法國(guó)引入DIALLERTEST 、分發(fā)了超過100，000份的第一種即用型的特應(yīng)性斑貼試驗(yàn) 后收集的數(shù)據(jù)所證實(shí)的。由于本發(fā)明的方法的這種極大的使用安全性，有可能用于脫敏對(duì) 過敏原例如落花生或貝類過敏的對(duì)象，由于招致的風(fēng)險(xiǎn)，這些過敏原不能使用標(biāo)準(zhǔn)的脫敏 方法進(jìn)行處理。免疫治療可以在任何時(shí)間通過移除施加在皮膚上的裝置來終止，這對(duì)于在其過程 中抗原被給藥到體內(nèi)的傳統(tǒng)脫敏方法來說是不可想象的。在方法的第一步中，一方面可以證實(shí)對(duì)象對(duì)表皮免疫療法的合格性(具有皮膚反 應(yīng)的對(duì)象是合格的)，另一方面可以測(cè)量對(duì)象對(duì)過敏原的皮膚反應(yīng)的程度，以便最好地指導(dǎo) 表皮免疫治療的進(jìn)行。因此，有可能選擇最適合于患者的程序，以便最適化皮膚耐受性并維 持最好的效能水平。
在治療過程中，可以根據(jù)連續(xù)測(cè)量到的皮膚反應(yīng)性的演變，調(diào)整給藥的劑量和/ 或頻率。因此，可以在整個(gè)治療過程中永久性地最適化治療作用并維持最高的效能水平。治療的時(shí)間長(zhǎng)度取決于在治療開始時(shí)設(shè)定的治療目標(biāo)，以及針對(duì)過敏原的皮膚反 應(yīng)性的演變。當(dāng)在皮膚上獲得了確定的降低對(duì)過敏原的反應(yīng)性的目標(biāo)，并通過引發(fā)試驗(yàn)或 任何其他的變態(tài)反應(yīng)學(xué)手段證實(shí)時(shí)，或當(dāng)確定皮膚反應(yīng)性完全消除時(shí)，治療被認(rèn)為已經(jīng)完 成。在閱讀了下面的實(shí)施例后，本發(fā)明的其他特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)將變得明顯，這些實(shí)施例應(yīng) 該被當(dāng)作是說明性的而不是限制性的。


圖1 對(duì)鴨茅屬植物的花粉脫敏8周(a)或16周(b)后獲得的體積描記術(shù)結(jié)果。 C 對(duì)照，ND 未脫敏，S⑶皮下脫敏，EPD 表皮脫敏。圖2 對(duì)卵清蛋白脫敏8周(a)或16周(b)后獲得的體積描記術(shù)結(jié)果。C 對(duì)照， ND 未脫敏，S⑶皮下脫敏，EPD 表皮脫敏。圖3 使用落花生蛋白脫敏之前和脫敏8周后監(jiān)測(cè)的抗體水平。左圖IgE特異性， 右圖=IgGl和IgG2a特異性。EP 表皮，ID 真皮內(nèi)，ND 未脫敏。圖4 引發(fā)試驗(yàn)后釋放的組胺。EP 表皮，ID 真皮內(nèi)，ND 未脫敏。結(jié)果用nM表示。圖5 特異性IgEs比率的演變(V0，初始樣品，VI，第一個(gè)月時(shí)的樣品，V3，第三個(gè) 月時(shí)的樣品)。圖6 在治療過程中觀察皮膚炎性反應(yīng)。A 顯著的；B 中等的；C 減弱的。圖7Α 使用VIASKIN 施用過敏原24小時(shí)和48小時(shí)后朗格漢斯細(xì)胞的活化和 炎性細(xì)胞的流入。在施用24小時(shí)后，朗格漢斯細(xì)胞細(xì)胞被活化并開始它們向淋巴結(jié)的遷 移。48小時(shí)后，炎性細(xì)胞活躍，炎性肉芽腫可以很好地觀察到。圖7Β 使用VIASKIN 施用過敏原(卵清蛋白)不同時(shí)間后局部細(xì)胞應(yīng)答的演 變。在施用6小時(shí)后，不能察覺細(xì)胞應(yīng)答。24小時(shí)后，炎性細(xì)胞的局部比率的升高在移除 VIASKIN 后繼續(xù)。在施用48小時(shí)后，這種演變更強(qiáng)。圖8 在用VIASKIN 敏化的動(dòng)物的皮膚上長(zhǎng)期施用(6和12周)過敏原后局部 應(yīng)答情況的演變。在反復(fù)施用24小時(shí)后，應(yīng)答主要是TH2類型的。在反復(fù)施用48小時(shí)后， 應(yīng)答是混合的，隨后主要是THl類型的。
實(shí)施例實(shí)施例1.對(duì)卵清蛋白和花粉的脫敏1. 1.方法在OVA和POL的情況下，通過連續(xù)兩周(DO和D7)皮下注射10 μ g過敏原聯(lián)合氫 氧化鋁，對(duì)BALB/c小鼠進(jìn)行致敏。在D14時(shí)，對(duì)小鼠進(jìn)行單獨(dú)的10 μ g過敏原鼻部滴注。從D21起，對(duì)小鼠進(jìn)行脫敏處理或不進(jìn)行脫敏處理。處理的小鼠在8周時(shí)間 內(nèi)，每周一次接受IOOyg過敏原給藥，給藥在確保皮膚炎性反應(yīng)得以維持的條件下利用 VIASKIN 系統(tǒng)通過表皮途徑進(jìn)行，或者通過皮下途徑與氫氧化鋁聯(lián)合進(jìn)行(陽(yáng)性對(duì) 照)。未脫敏的小鼠維持在動(dòng)物房的正常條件下。
使用在脫敏8周和16周后取樣的、冰冷的血清，跟蹤了抗體(IgE和IgG特異性) 水平的演化。也通過能夠評(píng)估脫敏或未脫敏小鼠的支氣管高反應(yīng)性的體積描記術(shù)測(cè)量，研究了 OVA和POL脫敏治療的效能。1.2.結(jié)果對(duì)用VIASKIN 處理或未處理的小鼠測(cè)量了支氣管高反應(yīng)性(圖1和2)。在確保皮膚炎性反應(yīng)得以維持的條件下使用VIASKIN 處理的小鼠的支氣管高 反應(yīng)性，與未處理小鼠相比，明顯降低了 3. 7到2. 6倍。皮下處理的小鼠的支氣管高反應(yīng)性， 與用VIASKIN 處理的小鼠相比，沒有明顯差異。實(shí)施例2.對(duì)落花生的脫敏2. 1.方法對(duì)于ARA(落花生)來說，在6周時(shí)間內(nèi)，通過每6天(Dl，D7，D13，D19，D25，D33) 胃內(nèi)給藥Img ARA蛋白聯(lián)合10 μ g霍亂毒素，對(duì)小鼠進(jìn)行致敏。脫敏步驟在D75開始，為期8周。在確保皮膚炎性反應(yīng)得以維持的條件下，每周一 次通過給藥IOOyg ARA制劑對(duì)小鼠進(jìn)行脫敏，給藥通過真皮內(nèi)途徑或使用VIASKIN 系 統(tǒng)通過表皮途徑進(jìn)行。未脫敏小鼠在致敏后不進(jìn)行任何特別處理。通過在口服引發(fā)試驗(yàn)后測(cè)量抗體(IgE、IgGl和IgG2a特異性)水平以及通過測(cè)量 組胺的釋放，追蹤了脫敏的效能。組胺是肥大細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞類型的免疫細(xì)胞脫粒過程 中釋放的介導(dǎo)物。這種脫粒作用是誘導(dǎo)過敏性應(yīng)答的標(biāo)志。2.2.結(jié)果通過分析小鼠中特異性抗體的水平，驗(yàn)證了 ARA脫敏處理的分析(圖3)。通過表 皮途徑或通過真皮內(nèi)途徑脫敏的小鼠具有降低的特異性IgE (對(duì)ARA過敏的標(biāo)志物)水平 和升高的特異性IgG2a水平。在未脫敏小鼠中可以檢測(cè)到的特異性IgE水平保持較高，特 異性IgG2a水平低于脫敏小鼠中的。在表皮和真皮內(nèi)脫敏途徑之間沒有觀察到顯著差異。對(duì)于脫敏或未脫敏小鼠進(jìn)行了 口服引發(fā)試驗(yàn)。通過真皮內(nèi)途徑或通過表皮途徑脫 敏的小鼠與未脫敏小鼠相比具有較低的組胺釋放。該結(jié)果顯示出脫敏小鼠過敏反應(yīng)性的降 低。碰通過不同的研究模型和所研究的不同過敏原，顯示出_基于維持炎性應(yīng)答的表皮免疫治療方法能夠觸發(fā)全身類型的臨床和生物學(xué)應(yīng) 答；-在通過口服或皮膚途徑預(yù)先致敏后，獲益于基于維持炎性應(yīng)答的表皮免疫治療 方法的動(dòng)物，與通過皮下或真皮內(nèi)途徑進(jìn)行免疫治療的動(dòng)物相比，對(duì)引發(fā)試驗(yàn)具有減弱的 應(yīng)答；-獲得的血清學(xué)響應(yīng)證實(shí)通過表皮免疫療法誘導(dǎo)了耐受過程。實(shí)施例3.臨床數(shù)據(jù)患者的特征兒童，年齡6歲5個(gè)月，體重18.3kg。慢性腹瀉，嘔吐，全身性濕疹。 對(duì)牛奶針刺試驗(yàn)陽(yáng)性。總IgE 486IU。牛奶特異性IgE 32. 7IU。0.6mL牛奶引發(fā)試驗(yàn)陽(yáng)性(咽喉瘙癢，咳嗽，腹痛，蕁麻疹)。
追遷在確保與過敏原接觸后的皮膚反應(yīng)得以維持的條件下，施用含有130yg牛 奶蛋白的VIASKIN ,每?jī)商旄鼡Q，持續(xù)3個(gè)月。MM 結(jié)果顯示在圖5和6中。與治療過程中對(duì)炎性反應(yīng)的監(jiān)測(cè)相關(guān)聯(lián)，它們說 明對(duì)牛奶的耐受性閾值非常顯著地增加了。在免疫治療結(jié)束時(shí)，皮膚反應(yīng)的減弱是確定的。 在3個(gè)月時(shí)進(jìn)行的口服引發(fā)試驗(yàn)顯示，耐受閾值高達(dá)64. 6mL而沒有任何臨床反應(yīng)。實(shí)施例4.在致敏小鼠中施用過敏原后細(xì)胞應(yīng)答的演化在事先致敏的小鼠的皮膚上施用過敏原，活化了朗格漢斯細(xì)胞及其朝向淋巴結(jié)的 遷移(圖7A)。同時(shí)，活化的細(xì)胞產(chǎn)生例如前炎性細(xì)胞因子，它們吸引炎性細(xì)胞朝向皮膚的表面 層。這種“第一階段”反應(yīng)發(fā)生在致敏對(duì)象中，因?yàn)樗哂嗅槍?duì)過敏原的記憶細(xì)胞和特異性 IgEs0因此，在與過敏原接觸后，它們發(fā)生了排斥過敏原的初始反應(yīng)。在第二階段中，出現(xiàn)了局部炎性反應(yīng)，其特征為急性炎性細(xì)胞(肥大細(xì)胞，巨噬細(xì) 胞)和慢性細(xì)胞(白細(xì)胞)的流入(圖7A和7B)。在事先致敏的小鼠中，使用Viaskin 在 皮膚上施用過敏原(卵清蛋白)，在接觸24小時(shí)后表現(xiàn)出輕微的炎性反應(yīng)，另一方面，在接 觸24小時(shí)后，隨著皮膚區(qū)域被多核細(xì)胞侵入，表現(xiàn)出顯著的炎性反應(yīng)。治療所靶向的正是 這種更復(fù)雜的反應(yīng)。在致敏小鼠中進(jìn)行的研究中，施用過敏原6小時(shí)、24小時(shí)和48小時(shí)，確定了炎性反 應(yīng)(在這里體現(xiàn)為局部巨噬細(xì)胞水平的增加)在施用48小時(shí)后更明顯(圖7B)。討論在表皮脫敏治療過程中，目的是再生炎性細(xì)胞反應(yīng)，其作用在耐受過程中是必不 可少的。事實(shí)上，隨時(shí)間改變的不是炎性反應(yīng)的強(qiáng)度，而特別是其本質(zhì)。免疫熒光研究證實(shí)了炎性的中心作用，以及炎性反應(yīng)的情況依賴于施用時(shí)間的完 全不同的特點(diǎn)。過敏原的施用時(shí)間是用于引發(fā)細(xì)胞反應(yīng)的基本因素。實(shí)施例5.在長(zhǎng)期施用過敏原后局部應(yīng)答情況的演化施用時(shí)間不是獲得所需治療(產(chǎn)生耐受性的)反應(yīng)類型的充分條件。在小鼠中， 在皮膚上反復(fù)給藥過敏原，不論施用是“短的”(24小時(shí))還是“長(zhǎng)的”(48小時(shí))，都引起該 過敏原的特異性抗體的升高。在接受Viaskin 48小時(shí)的對(duì)象中，當(dāng)施用是連續(xù)的(多達(dá) 88天)時(shí)，抗體的水平仍然還高，但是Thl/Th2淋巴細(xì)胞的相對(duì)比例朝向Thl淋巴細(xì)胞升高 的方向變化(圖8)。討論實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)，本發(fā)明的方法旨在誘導(dǎo)反應(yīng)，其特征與通常情況下通過將過敏原 簡(jiǎn)單地沉積在過敏人員的皮膚上而獲得的反應(yīng)不同。它是在利用Viaskin “長(zhǎng)期”施用后 獲得的唯一反應(yīng)，使用它可以獲得“致耐受性”效應(yīng)，體現(xiàn)為Thl淋巴細(xì)胞的活化，而在“短 期”施用后獲得的反應(yīng)是Th2類型的。在通過Viaskin 進(jìn)行的脫敏治療過程中，將過敏原反復(fù)施用到事先致敏的患者 的完整皮膚上，引發(fā)了炎性細(xì)胞反應(yīng)，與目前使用特應(yīng)性斑貼試驗(yàn)在臨床上觀察到的相同。通過反復(fù)地長(zhǎng)期施用過敏原而引發(fā)和維持炎性反應(yīng)，產(chǎn)生了特異性的局部炎性條件。在該反應(yīng)過程中，平衡移向有利于Thl淋巴細(xì)胞。 因此，似乎長(zhǎng)期和反復(fù)地在皮膚上施用過敏原，不僅能夠引起炎性反應(yīng)，而且能夠 對(duì)該反應(yīng)進(jìn)行定向。
權(quán)利要求
過敏原在制備通過在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)所述對(duì)象進(jìn)行表皮脫敏的組合物中的應(yīng)用，其特征在于在允許治療過程中維持炎性反應(yīng)的條件下將過敏原施用在皮膚上。
2.過敏原在制備通過在對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的皮膚上反復(fù)地施用過敏原，對(duì)所述 對(duì)象進(jìn)行表皮脫敏的組合物中的應(yīng)用，其特征在于在治療過程中，優(yōu)選在每次施用過敏原 后，包含用于控制和/或維持由在皮膚上施用過敏原而產(chǎn)生的炎性反應(yīng)的步驟。
3.過敏原在制備用于在耐受性的意義上改變對(duì)所述過敏原過敏的對(duì)象的免疫應(yīng)答的 組合物中的應(yīng)用，包括在允許治療過程中維持炎性反應(yīng)的條件下，在對(duì)象的皮膚上反復(fù)地 施用過敏原。
4.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于通過在治療過程中控制或調(diào)節(jié)過敏原的劑 量或頻率或施用時(shí)間，來維持炎性反應(yīng)。
5.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于炎性反應(yīng)的程度通過目測(cè)來評(píng)估。
6.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于當(dāng)治療過程中炎性反應(yīng)降低時(shí)，增加過敏 原的劑量和/或頻率和/或施用時(shí)間。
7.權(quán)利要求1到5任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于當(dāng)治療過程中炎性反應(yīng)增加時(shí)，降低過敏 原的劑量和/或頻率和/或施用時(shí)間。
8.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原施加在對(duì)象的完整皮膚上。
9.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原采用粉末形式。
10.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于施用無任何佐劑化合物的過敏原。
11.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原通過確保過敏原與皮膚之間的接 觸的裝置來施用。
12.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原通過皮膚裝置來施用，優(yōu)選具有被 動(dòng)擴(kuò)散的皮膚裝置，更優(yōu)選為皮膚封閉性裝置來施用。
13.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原或裝置至少在炎性反應(yīng)達(dá)到參比 的程度之前維持在皮膚上。
14.權(quán)利要求13的應(yīng)用，其特征在于參比的程度是能通過肉眼觀察到的炎性反應(yīng)，例 如作為浸潤(rùn)性紅斑損傷，或具有濕疹型特點(diǎn)。
15.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原或裝置維持在皮膚上，以便維持炎 性反應(yīng)。
16.權(quán)利要求11到15任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于裝置的背襯包含允許對(duì)炎性反應(yīng)進(jìn)行 觀察的透明區(qū)域。
17.權(quán)利要求16的應(yīng)用，其特征在于在透明區(qū)域上印有網(wǎng)格，能夠使用它評(píng)估炎性反 應(yīng)的程度。
18.權(quán)利要求11到15任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于裝置是可移除的，以便允許觀察炎性反應(yīng)。
19.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于它包含用于確定對(duì)預(yù)定濃度的過敏原過 敏的對(duì)象的初始炎性反應(yīng)的預(yù)備步驟。
20.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于它包含用于確定對(duì)象對(duì)不同劑量的過敏 原或?qū)Σ煌问降倪^敏原的炎性反應(yīng)的步驟，以便選擇劑量或治療形式。
21.權(quán)利要求20的應(yīng)用，其特征在于確定步驟在治療開始時(shí)和/或其過程中進(jìn)行。
22.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于過敏原是食物、呼吸或皮膚過敏原。
23.由在患者皮膚上施用過敏原所產(chǎn)生的炎性皮膚反應(yīng)作為標(biāo)志物，以便調(diào)整所述患 者對(duì)所述過敏原的表皮脫敏步驟的應(yīng)用。
24.用于在對(duì)象的皮膚上施加過敏原的皮膚裝置，其特征在于它包含提供有透明區(qū)域 的背襯，所述透明區(qū)域允許觀察由在皮膚上施用過敏原所引發(fā)的炎性皮膚反應(yīng)。
25.含有幾種用于過敏原的皮膚施用的裝置的試劑盒，所述裝置包含不同劑量的過敏 原和/或不同形式的過敏原。
全文摘要
本發(fā)明涉及對(duì)過敏患者進(jìn)行脫敏的方法。更具體來說，它涉及適用于任何類型的過敏原和患者的表皮脫敏方法。本發(fā)明的方法基本上是非侵入性的，并且不需要使用佐劑。此外，它可以由實(shí)際患者容易地使用和監(jiān)控。
文檔編號(hào)A61K9/70GK101883584SQ200880119073
公開日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2008年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月3日
發(fā)明者克里斯托弗·杜邦, 皮埃爾-亨利·本哈穆, 貝特朗·杜邦 申請(qǐng)人:Dbv技術(shù)公司