專利名稱::含雌馬酚的提取物、其制備方法、雌馬酚的提取方法及含雌馬酚的食品的制作方法
技術領域:
:本發(fā)明涉及通過從含雌馬酚(equol)的大豆胚軸發(fā)酵物提取有效成分而獲得的含雌馬酚的提取物及其制備方法。本發(fā)明還涉及有效地.純化含雌馬酚的物質以獲得高純度雌馬酚的方法。本發(fā)明進一步涉及含雌馬酚的食品材料和含雌馬酚的食品。
背景技術:
:大豆中包含的異黃酮(大豆異黃酮大豆黃酮(daidzein)、染料木黃酮(genistein)、黃豆黃素(glycitein))具有與雌二醇類似的結構,并具有與雌激素受體(下面稱為ER)的結合相關的抗雌激素作用和雌激素樣作用。曾經進行的流行病學研究和大豆異黃酮的干預研究表明,它們由于其抗雌激素作用而對乳腺癌、前列腺癌和其它激素依賴性癌癥具有預防效果,且由于其雌激素樣作用而對更年期障礙、絕經后骨質疏松癥和高脂血癥具有改善效果。最近,已經指出,這些大豆異黃酮生理效應的活性成分可能是大豆黃酮的代謝產物,即雌馬酚。更具體地說,已經才艮道,雌馬酚具有比大豆異黃酮更高的與ER(特別是ER(3)結合的能力且具有顯著高的過渡能力而以如乳腺和前列腺組織的器官為靶標(非專利文獻1-4)。此外,病例對照研究報道,在乳腺癌和前列腺癌患者中產生雌馬酚的患者明顯要少。改善骨密度和脂質代謝的大豆異黃酮的效應通過將絕經后婦女分成兩組進行檢驗產生雌馬酚的婦女和不產生雌馬酚的婦女。在產生雌馬酚的婦女中觀察到顯著的改善。雌馬酚通過腸細菌對大豆黃酮的代謝產生。產生雌馬酚的能力在個體之間存在差異,且產生雌馬酚的日本人的百分比據報道為大約50%。也就是說,大約50%的日本人不能產生雌馬酚(非雌馬酚產生個體)。這種個體即使食用大豆和加工的大豆食品也不能受益于基于雌馬酚作用的任何有利生理效應。因此,為了在非雌馬酚產生個體中獲得基于雌馬酚作用的有益生理效應,據認為攝取雌馬酚本身也是有效的。非專利文獻1:MoritoK,HiroseT,KinjoJ,HirakawaT,OkawaM,NoharaT,OgawaS,InoueS,MuramatsuM,MasamuneY.Interactionofphytoestrogenswithestrogenreceptorsaand(3.BiolPharmBull24(4):351-356,2001非專利文獻2:MaubachJ,BrackeME,HeyerickA,DepypereHT,SerreynRF,MareelMM,KeukeleireDD.Quantitationofsoy-derivedphytoestrogensinhumanbreasttissueandbiologicalfluidsbyhigh-performanceliquidchromatography.JChromatographyB784:137-144,2003非專利文獻3:MortonMS,ChanPSF,ChengC,BlacklockN,Matos-FerreiraA,Abranches-MonteiroL,CorreiaR,LloydS,GriffithsK.Lignansandisoflavonoidsinplasmaandprostaticfluidinmen:SamplesfromPortugal,HongKong,andtheUnitedKingdom.Prostate32:122-128,1997非專利文獻4:TammyEH,PaulDM,PaulGF,RobertD,StephenB,KennethJ,RayM,LorraineGO,KristiinaW,HollyMS,KarenJG.Long-termdietaryhabitsaffectsoyisoflavonemetabolismandaccumulationinprostaticfluidinCaucasianmen.JNutr135:1400-1406,2005。
發(fā)明內容本發(fā)明要解決的問題本發(fā)明人現發(fā)現,通過用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的大豆胚軸發(fā)酵物可用作含雌馬酚的食品材料。大豆胚軸發(fā)酵物不僅包含雌馬酚,而且包含異黃酮、皂苷和類似的源自大豆的有益成分。大豆胚軸發(fā)酵物可由于這些有益成分而獲得這類有效的生理效應,并因此可用作功能材料。本發(fā)明人還發(fā)現,大豆胚軸發(fā)酵物可作為變應原降低材料使用,因為可歸因于其中的大豆胚軸的變應原降低。本發(fā)明人發(fā)現大豆胚軸發(fā)酵物由于所述有益成分而表現出生理效應,且是低變應原性的,因此其可用作功能性食品材料。相反,大豆胚軸發(fā)酵物中雌馬酚的含量隨著用于制備大豆胚軸發(fā)酵物的大豆胚軸類型、產生雌馬酚的微生物的類型等發(fā)生變化,但一般是大約1重量%。如果可以提供具有提高的雌馬酚含量的材料,則可很容易地針對食品的多樣性提供各種不同類型的含雌馬酚的食品。但是,大豆胚軸發(fā)酵物本身不是已知的產品,且從大豆胚軸發(fā)酵物有效地提取有用成分的有效方法也還沒有找到。大豆胚軸發(fā)酵物(其是通過如上所述發(fā)酵方法獲得的含雌馬酚的物質)比通過化學合成方法獲得的物質更安全,并適于工業(yè)生產。但是,通過所述發(fā)酵方法獲得的含雌馬酚的物質包含雌馬酚以外的代謝產物和其中殘留的源自原料的各種成分。取決于用于發(fā)酵的原料類型,通過發(fā)酵方法獲得的含雌馬酚的物質可以包含可能變成變應原的材料。因此,為了使用雌馬酚作為食品或藥品的添加劑,需要一種不僅產生雌馬酚而且純化含雌馬酚的物質以獲得高純度雌馬酚的技術。但是,并沒有報道很多精制雌馬酚的技術,目前需要建立可工業(yè)應用的且可以方^f更和有效地純化雌馬酚的纟支術。大豆胚軸發(fā)酵物由于大豆胚軸或雌馬酚而具有苦味。因此,當大豆胚軸發(fā)酵物用作食品材料時,必須充分注意制成的食品的風味。大豆胚軸發(fā)酵物是先前沒有報道過的新型的食品材料,且不知道哪種方法對于改善其風味有效。特別是,當大豆胚軸發(fā)酵物用作用于烘焙甜食的材料時,其在經歷烘焙步驟之后傾向于發(fā)生風味變壞的問題。因此,表現出良好的風味是非常困難的技術目標。本發(fā)明的目的是提供包含有用的含雌馬酚的成分且源自含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的提取物,和用于制備這種提取物的方法。本發(fā)明提供用于純化含雌馬酚的物質以有效地獲得高純度雌馬酚的方法。7本發(fā)明的另一目的是提供通過用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物獲得的食品材料,其中風味得到改善。本發(fā)明的再另一目的是提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物并表現極佳的風味的食品(特別是,烘焙的甜食)。本發(fā)明的再另一目的是提供各種形式的包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食品。解決本發(fā)明問題的手段本發(fā)明人進行了深入的研究以達到上述目的,并且發(fā)現,通過使用乙醇水溶液作為拔:耳又劑對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取,可以有效地從大豆胚軸發(fā)酵物提取有用的含雌馬酚的成分。本發(fā)明人進一步發(fā)現,通過4吏用乙醇水溶液和乙醇順序地對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取,可以在有效提取雌馬酚和黃豆黃素的同時降低引起濕味、苦味、辣味和類似不良味道的皂苷含量。本發(fā)明人還發(fā)現,可以通過將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮于具有2-6的pH值的水溶液中,收集不溶性物質,然后使用乙醇水溶液對得到的不溶性殘留物進行提取而獲得高純度雌馬酚。本發(fā)明人進一步發(fā)現,高純度雌馬酚可以通過進行以下步驟(1)-(5)而有效和方便地獲得步驟(l):使用乙醇水溶液對含雌馬酚的物質進行提?。徊襟E(2):使用乙醇對得到的提取物進行進一步提??;步驟(3):使用己烷對得到的提取物進行提取;步驟(4):使用己烷和醚的混合液對得到的不溶性殘留物進行提??;和步驟(5):對得到的液體提取物進行硅膠柱層析處理,并獲得含雌馬酚的流份。本發(fā)明人進一步發(fā)現,高純度雌馬酚可以通過進行以下步驟(i)-(iii)有效和方^f更地獲得(i)使用特定的有機溶劑或有機溶劑水溶液對含雌馬酚的物質進行提取,并濃縮得到的液體提取物;(ii)對得到的雌馬酚濃縮物進行硅膠柱層析處理,并獲得含雌馬酚的流^f分;和(iii)從得到的含雌馬酚的流份中除去溶劑,并重結晶得到的殘留物。本發(fā)明人還發(fā)現,在通過將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物分散于可可糖膏中而獲得的食品材料中,可以減輕由于含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物導致的苦味并可以表現出極佳的風味。本發(fā)明人還發(fā)現,所述食品材料可用于各種食品中(包括烘焙的甜食)而不對風味造成負面影響。本發(fā)明人成功地開發(fā)了其中加入含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的各種食品?;谶@些發(fā)現完成了本發(fā)明并對其進行了某些改進。本發(fā)明提供用于獲得含雌馬酚的提取物的方法。1-1項.一種用于制備含雌馬酚的提取物的方法,包括步驟I-1:使用乙醇水溶液作為提取劑對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取,并收集得到的液體提取物。1-2項.按照l-l項所述的方法,其進一步包括步驟I-2:從步驟1-1獲得的液體提取物中除去提取劑;使用乙醇作為提取劑進行提取;并收集液體提取物。1-3項.按照l-l項的方法,其中步驟I-1中使用的乙醇水溶液的乙醇濃度是20-98體積%。1-4項.按照1-1至1-3項中任意一項的方法,其中含雌馬酚的大1-5項.一種用于從含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物制備含雌馬酚的提取物的方法,包括步驟II-l和II-2:步驟II-1:將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮于水中,加入酸以調節(jié)pH值至2-6,并收集不溶性殘留物;和步驟II-2:使用乙醇水溶液作為提取劑對步驟II-l中獲得的不溶性殘留物進行提取,然后收集得到的液體提取物。1-6項.l-5項的方法,其中步驟n-i中使用的酸是乙酸。本發(fā)明提供以下的含雌馬酚的提取物。2-1項.通過使用乙醇水溶液作為提取劑對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取而獲得的含雌馬酚的提取物。2-2項.通過4吏用乙醇水溶液和乙醇順序地對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取而獲得的含雌馬酚的提取物。2-3項.通過1-1至l-6項中任意一項的方法獲得的含雌馬酚的提取物。本發(fā)明提供以下的精制雌馬酚的方法。3-1項.一種用于純化含雌馬酚的物質以獲得雌馬酚的方法,包括下面的步驟1-1至1-5:步驟1-1:使用乙醇水溶液作為提取劑對含雌馬酚的物質進行提取,并收集得到的液體提取物;步驟1-2:從步驟1-1中獲得的液體提取物中除去溶劑,使用乙醇作為提取劑對殘留物進行提取,并收集液體提取物;步驟1-3:從步驟1-2中獲得的液體提取物中除去溶劑,將得到的殘留物懸浮于己烷中,然后收集不溶性殘留物;步驟1-4:使用己烷和醚的混合液作為提取劑對步驟1-3中獲得的不溶性殘留物進行提取,然后收集液體提取物;和步驟1-5:對步驟1-4中獲得的液體提取物進行硅膠柱層析處理,并獲得含雌馬酚的流份。3-2項.按照3-l項的方法,其中含雌馬酚的物質是包含雌馬酚的發(fā)酵物。3-3項.按照3-2項的方法,其中包含雌馬酚的發(fā)酵物是通過用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。3-4項.按照3-1至3-3項中任意一項的方法,其中步驟l-4中使用的提取劑是己烷和乙醚的混合液。3-5項.按照3-1至3-4項中任意一項的方法,其中步驟l-4中使用的提取劑是體積比為10:90-20:80的己烷和醚的混合液。3-6項.按照3-1至3-5項中任意一項的方法,其中步驟l-l中使用的乙醇水溶液具有20-98體積%的乙醇濃度。3-7項.一種用于純化含雌馬酚的物質的方法,包括下面步驟2-l至2-3:步驟2-l:4吏用選自乙酸乙酯、醇、丙酮、二氧雜環(huán)己烷、乙腈、乙醚和甲苯中的至少一個成員的有機溶劑或有機溶劑水溶液作為#是取劑對含雌馬酚的物質進行提取,并收集得到的液體提取物;步驟2-2:對步驟2-l中獲得的液體提取物進行硅膠柱層析處理,并荻得含雌馬酚的流Y分;和步驟2-3:從步驟2-2獲得的含雌馬酚的流份中除去溶劑,重結晶得到的殘留物,并收集析出的晶體。3-8項.按照3-7項的方法,其中步驟2-3包括在使用乙酸乙酯和己烷混合液的重結晶之后使用醇的水溶液進行重結晶。本發(fā)明提供下面的食品材料和使用這類食品材料的食品。4-1項.一種通過將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物分散于可可糖膏中獲得的食品材料。4-2項.按照4-l項的食品材料,該食品材料包含10-2000重量份可可糖膏/100重量份含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物。4-3項.按照4-1或4-2項的食品材料,其中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物是通過用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的。4-4項.按照4-3項的食品材料,其中產生雌馬酚的微生物是可以代謝選自大豆黃酮糖苷、大豆黃酮和二氫大豆黃酮的至少一種大豆黃酮化合物以產生雌馬酚的農i生物。ii4-5項.按照4-1至4-4項中任意一項的食品材料,其采取粒狀形式、切片狀形式或盤狀形式。4-6項.一種包含4-l至4-5項中任意一項的食品材料的含雌馬酚食品。4-7項.按照4-6項的含雌馬酚食品,其為烘焙的甜食。品:o口本發(fā)明提供下面的食,5-1項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食,5-2項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提耳又物的飲料。5-3項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的膳食補充劑。食品。5-5項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的甜點。5-6項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的小吃。5-7項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的調味口cr5-8項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的殺菌袋裝食品(retort隱packedfood)。5-9項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提耳又物的加工肉制品。5-10項,(fishpaste)。5-11項,蛋制品。5-12項食,口-口P5-13項,一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的魚醬一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的加工一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的罐頭一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其揭^又物的面包食。125-14項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提:f又物的冷凍甜點。5-15項.一種包含含肚偉馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其纟是取物的加工大豆食品。5-16項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的烹制的大米制品。5-17項.一種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的湯。5-18項.按照5-1至5-17項中任意一項的食品,其中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物是通過用產生雌馬酚的孩i生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的。5-19項.按照5-18項的食品,其中所述微生物具有代謝選自大豆黃酮糖苷、大豆黃酮和二氫大豆黃酮的至少一種大豆黃酮化合物以產生雌馬酚的能力。本發(fā)明的效果用于制備本發(fā)明的含雌馬酚的提取物的方法可以通過從含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物有效地提取包含雌馬酚的有用成分而制備可用作功能性食品材料的含雌馬酚提取物。通過使用乙醇水溶液和乙醇順序地對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取,可獲得包含高濃度雌馬酚和黃豆黃素的含雌馬酚的提取物,其具有降低量的引起不良味道的皂苷。因此,含雌馬酚的提取物可以添加到食品中而不對味道產生負面影響。本發(fā)明的純化方法使得能夠從含雌馬酚的物質方便和高效地獲得高純度的雌馬酚。特別是,本發(fā)明的純化方法使得甚至能夠在含雌含雌馬酚的發(fā)酵物獲得雌馬酚。此外,通過將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物分散于可可糖膏中獲得的食品材料具有減輕的苦味并表現出極的風味,雖然它含有含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物。本發(fā)明的食品材料可用于各種食品中而不對其風味產生負面影響。當常規(guī)食品材料以粒狀形式或切片狀形式添加到烘焙點心中時,這些成分在烘焙步驟中傾向于擴散到整個烘焙點心中,因而不能獲得理想的風味。在本發(fā)明的食品材料中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物被可可糖膏掩蓋。因此,甚至在本發(fā)明的食品材料以粒狀形式或切片狀形式添加到烘焙點心中時,有效成分在食品材料內的擴散可以受亞U抑制,因而可以獲得理想的風味。本發(fā)明食品的有益生理效應可基于含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的有益生理活性而獲得。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物具有減少的源自大豆胚軸的變應原,并因此本發(fā)明的食品材料和各種食品可以安全地由患有大豆過敏癥的人食用或施用于患有大豆過敏癥的人。具體實施例方式下面對本發(fā)明進行詳細說明。1.含雌馬酚的提取物的制備方法
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:本發(fā)明提供使用含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物作為原料制備含雌馬酚的提取物的方法。本發(fā)明的含雌馬酚的提取物的制備方法分成下面的制備方法I和II。下面詳細說明用作本發(fā)明方法的原料的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物并詳細描述制備方法I和II。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物在按照本發(fā)明的含雌馬酚的提取物的制備方法中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物用作原料。下面描述含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物是通過使用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵大豆胚軸而產生的一種大豆胚軸發(fā)酵物。自具有通過代謝選自大豆黃酮糖苷、大豆黃酮和二氫大豆黃酮的至少一種大豆黃酮化合物產生雌馬酚的能力(代謝活性)的微生物。在這里,大豆黃酮糖苷的例子包括大豆苷(daidzin)、丙二酰大豆香和乙酰大豆苷。產生雌馬酚的微生物沒有限制,且可以是具有前述能力的任何微生物。例如,可以使用任何公眾已知的樣i生物或任何通過一般篩選方法獲得的微生物。已知這類產生雌馬酚的微生物存在于屬于乳球菌屬(丄a"ococcw力的孩丈生物如力口氏乳J求菌CLa"ococcwsgarw'eae)、屬于4連J求菌屬(5Yreptococcw力的微生物如中間鏈球菌(i5V"/^ococcws/w&rmeJ^《)或星座纟連-求菌(5Yre/^ococcM51co""e〃a^s1)、或屬于4以^f干菌屬(Sacfera^fesO的^鼓生物如卵形擬桿菌C8"〃^wW^ovWw力中。在各種不同種類的產生雌馬酚的微生物中,本發(fā)明優(yōu)選屬于乳球菌屬或鏈球菌屬的乳酸菌,更優(yōu)選屬于乳球菌屬的乳酸菌,且特別是屬于加氏乳球菌的乳酸菌。產生雌馬酚的微生物可以基于產生雌馬酚特性的存在指數從例如人糞便中分離。本發(fā)明的發(fā)明人保藏了可提供用作產生雌馬酚的微生物的、從人糞便中分離的一些鑒別的細菌,即乳球菌20-92(FERMBP畫10036)、鏈球菌E-23-17(FERMBP-6436)、鏈球菌A6G225(FERMBP-6437)和擬桿菌E-23-15(FERMBP-6435)。其中,本發(fā)明特別優(yōu)選乳^^菌20-92。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物使用大豆胚軸作為發(fā)酵材料制備。大豆胚軸指的是對應于大豆萌發(fā)時的胚芽或胚根的部分,且已知包含大量的大豆黃酮化合物如大豆黃酮糖苷或大豆黃酮。用于本發(fā)明中的大豆胚軸不限制大豆的產區(qū)或是否經過加工,只要其內部的大豆黃酮化合物沒有顯著丟失。例如,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物可以是未處理的胚軸,或者可以是從加熱的、干燥的或蒸煮的大豆分離的胚軸,或者通過加熱、干燥或蒸煮從未處理的大豆分離的胚軸而獲得的胚軸。另外,大豆胚軸可以通過脫脂或脫蛋白進行處理。大豆胚軸的形式沒有特別限制,且可以是粉末、大塊或者粉碎或破碎的顆粒的形式。粉末狀的大豆胚軸是特別優(yōu)選的,因為它能夠有效地制備雌馬酚。大豆胚軸的發(fā)酵通過首先添加適當量的水而調節(jié)大豆胚軸的水含量,然后接種產生雌馬酚的微生物到胚軸中來完成。加入大豆胚軸中的水量根據產生雌馬酚的微生物的類型或發(fā)酵罐的類型進行調整。在發(fā)酵開始時水與大豆胚軸的比例是每100重量份(干重)的大豆胚軸400-4000重量份,優(yōu)選500-2000重量份,更優(yōu)選600-1000重量份的水。另外,如果必要,某些添加劑可以加入到作為發(fā)酵中的原料的大豆胚軸中以提高發(fā)酵效率或改善產品風味。添加劑的例子包括氮源(如酵母提取物、多蛋白胨(polypeptone)或肉膏)、碳源(如葡萄糖或蔗糖)、無機鹽(如磷酸鹽、碳酸鹽或硫酸氫鹽)、維生素和營養(yǎng)成分(如氨基酸)。特別地,當使用將精氨酸轉化成鳥氨酸的產生雌馬酚的微生物(下面稱作"產生鳥氨酸/雌馬酚的微生物"),精氨酸在發(fā)酵前加入到大豆胚軸中從而使得發(fā)酵物質包含鳥氨酸。在這種情況中,精氨酸的量基于100重量份(干重)的大豆胚軸是例如大約0.5-3重量份。產生鳥氨酸/雌馬酚的微生物可以利用產生雌馬酚的能力和精氨酸-鳥氨酸轉化能力的指數通過公眾已知的篩選方法獲得。產生鳥氨酸/雌馬酚的微生物可以選自加氏乳球菌的組,其以乳球菌20-92(FERMBP-10036)為代表。生物生長的范圍內沒有特別限;j,但是為確保產生雌馬酚的i:生物的良好增殖,發(fā)酵材料的pH值優(yōu)選在大約6-7內,更優(yōu)選在約6.3-6.8。另外,包含上述大豆黃酮化合物的異黃酮可以添加到發(fā)酵材料(包含大豆胚軸的物質)中。這樣在發(fā)酵材料中包含異黃酮提高了大豆胚軸發(fā)酵物的雌馬酚含量,從而改善了大豆胚軸發(fā)酵物的可用性。大豆胚軸的發(fā)酵按照產生雌馬酚的微生物的生長特性在適宜的條件下進行。例如,當使用上面所列的產生雌馬酚的微生物時,大豆胚軸的發(fā)酵在厭氧條件下進行。發(fā)酵溫度在產生雌馬酚的微生物生長的適宜范圍內沒有限制。溫度一般是20-4(TC,優(yōu)選35-40。C,更優(yōu)選36-38。C。16發(fā)酵時間根據希望的雌馬酚產生量、大豆黃酮化合物的殘余量、產生雌馬酚的微生物的類型等確定。發(fā)酵時間一般是1-10天,優(yōu)選2-7天,更優(yōu)選3-5天。在通過前述條件下的發(fā)酵獲得的大豆胚軸發(fā)酵物中,產生的雌馬酚被累積,從而可以表現有益的雌馬酚生理活性。大豆胚軸發(fā)酵物中的雌馬酚含量隨產生雌馬酚的微生物的類型或發(fā)酵條件發(fā)生變化。大豆胚軸發(fā)酵物中的雌馬酚含量一般是每克(千重)大豆胚軸發(fā)酵物1-20mg,優(yōu)選2畫12mg,更優(yōu)選5-8mg。除雌馬酚外,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物還包含各種異黃酮,例如大豆黃酮化合物,包括大豆苷、丙二酰大豆苷、乙酰大豆苷、大豆黃酮或二氫大豆黃酮(在下面,這些化合物被稱為"大豆黃酮化合物,,),染料木黃酮化合物,包括丙二酰染料木苷、乙酰染料木苷、染料木黃酮、二氫染料木黃酮(在下面,這些化合物被稱為"染料木黃酮化合物"),或者黃豆黃素化合物,包括黃豆黃苷、丙二酰黃豆黃苷、乙酰黃豆黃苷、黃豆黃素、二氫黃豆黃素(在下面,這些化合物被稱為"黃豆黃素化合物,,)。異黃酮也表現有益的生理活性。大豆胚軸發(fā)酵物中各種異黃酮(包括雌馬酚)的含量一般是每克(干重)含雄馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物含5-20mg,優(yōu)選5-15mg,更優(yōu)選8-15mg。另外,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物在雌馬酚以外的異黃酮的組成方面也與一般的大豆胚軸不同。特別地,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物中染料木黃酮化合物的總含量優(yōu)選不超過15重量%,更優(yōu)選不超過12重量%。由于這種低的染料木黃酮化合物含量,含雌馬酚的大豆意,染料木黃酮是異黃酮的種類且是懷疑破壞內分泌的化學物質,因而需要降低食品中的染料木黃酮化合物濃度(YoungHJ,JodiF,KimberlyFA,DanielRD,WilliamGH.Effectsofdietarydaidzeinanditsmetabolite,equol,atphysiologicalconcentrationsonthegrowthofestrogen-dependenthumanbreastcancer(MCF-7)tumorsimplantedinovariectomizedathymicmice.SeeCarcinogenesis127(4》856-863,2006)。下面是含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的異黃酮組成實例(單位"mg"表示每克(干重)大豆胚軸發(fā)酵物的各異黃酮的總量)。雌馬酚1-20mg,優(yōu)選2-12mg大豆黃酮化合物0.1-30mg,優(yōu)選0.1-1.5mg染料木黃酮化合物0.05-2.5mg,優(yōu)選0.05-2mg黃豆黃素化合物0.1-4mg,優(yōu)選2-3.5mg。下面是含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物中異黃酮的組成比率實例(單位"重量%"表示含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物中相對于異黃酮總量的比率)。雌馬酚30-75重量%,優(yōu)選40-70重量%,更優(yōu)選45-70重量大豆黃酮化合物1-20重量%,優(yōu)選2-15重量%,更優(yōu)選4-12重量%染料木黃酮化合物0.1-20重量%,優(yōu)選1-15重量%,更優(yōu)選1-10重量%黃豆黃素化合物10-50重量%,優(yōu)選15-35重量%,更優(yōu)選25-35重量%。發(fā)現的特殊異黃酮組成,它可以定義為通過前述異黃酮組成確定的含異黃酮的物質。乳球菌20-92(FERMBP-10036)在制備具有前述異黃酮組成的含酚的大豆胚軸發(fā)酵物一般包含每克(干重)含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物10-80mg,優(yōu)選20-50mg,更優(yōu)選30-40mg量的皂苷。另外,如上所述,鳥氨酸包含在向大豆胚軸添加精氨酸后用產生酚的大豆胚軸發(fā)酵物的鳥氨酸含量是每克(干重)含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物5-20mg,優(yōu)選8-15mg,更優(yōu)選9-12mg。通過在前述條件下發(fā)酵獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物可以在發(fā)酵后作為本發(fā)明制備方法的材料直接使用,或者可以在發(fā)酵后用作本發(fā)明制備方法的材料之前千燥成干燥固體。另外,通過在前述條件下發(fā)酵獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物可以在下面的步驟1-1之前進行加工,例如脫脂。脫脂可以通過使用己烷作為提取劑的方法進行。1-1.制備方法I在制備方法I中,含雌馬酚的提取物的制備通過進行下面描述的步驟1-1完成。歩驟1-1用于制備含雌馬酚的提取物的制備方法I包括使用乙醇水溶液作為提取劑提取含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物和收集液體提取物的步驟1-1。步驟1-1中使用的乙醇水溶液(乙醇和水的混合溶液)的乙醇濃度一般是20-98體積%,優(yōu)選是45-95體積%,且更優(yōu)選是65-85體積%。符合這一濃度范圍,從含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物提取有用的成分(包括雌馬酚)成為可能。步驟1-1中的提取使用例如每重量份(干重)的含雌馬酚大豆胚軸發(fā)酵物1-1000重量份,優(yōu)選2-500重量份,更優(yōu)選5-20重量份的量的乙醇水溶液。步驟1-1的提取條件沒有特別的限制,且可以使用暖或冷浸提取方法、滲濾方法等。更具體地說,乙醇水溶液加入含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物,且在室溫下使得混合物靜置或攪拌至少一分鐘,優(yōu)選在室溫下5分鐘至48小時。在這種提取之后,液體提取物進行分離以獲得含雌馬酚的提取物。液體4是耳又物的收集通過/>眾已知的方法如過濾或離心進4亍。19在步驟1-1中如此分離的液體提取物包含有用的成分(包括雌馬酚和黃豆黃素),且油的量低于含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物中的油的量。在步驟1-1中如此獲得的液體提取物可以作為含雌馬酚的液體提取物直接加入食品或藥品中,或可以通過在加入食品或藥品之前除去提取劑而固化。另外,在步驟I-1中如此獲得的液體提取物可以(以液體或固體含雌馬酚的提取物的形式)進行雌馬酚精制。在步驟I-1中分離的液體提取物包含雌馬酚、黃豆黃素和皂苷(其可能引起不良的澀味、苦味或辣味)。因此優(yōu)選對在步驟I-1中分離的液體提取物進行下面的步驟1-2以除去皂苷和提高有用的成分(包括雌馬酚)的濃度。步驟1-2步驟1-2包括從步驟1-1中獲得的液體提取物中除去提取劑,使用乙醇作為提取劑進行另一次提取,和收集提取物。在步驟I-2中,從步驟I-1中獲得的提取物中除去提取劑可以通過公眾已知的方法如干燥進行。通過從步驟1-1中獲得的提取物中除去提取劑獲得的固體(這一固體下面也可以稱為"固體材料")使用乙醇作為提取劑進行提取。在步驟I-2中用作提取劑的乙醇可以是無水乙醇,但該無水乙醇可能不可避免地包含水汽。步驟1-2中的提取使用例如每重量份(干重)固體材料1-1000重量份,優(yōu)選5-500重量份,且更優(yōu)選5-20重量份的乙醇。步驟1-2中提取的條件沒有特別限制,且可以通過暖或冷浸提取方法、滲濾方法等進行。更具體地說,乙醇加入固體材料中且使得混合物在室溫下靜置或攪拌至少一分鐘,優(yōu)選在室溫下5分鐘至48小時。步驟1-2的提取可以與超聲處理結合以提高雌馬酚回收率。在這種提取之后,提取物進行分離以獲得含雌馬酚的提取物。提取物的收集通過公眾已知的方法如過濾或離心進行。在步驟I-2中如此分離的提取物包含更大量的有用成分(包括雌馬酚和黃豆黃素)和更少量的急香。因此這一提取物的有效性高于步驟1-1中獲得的提取物。在步驟1-2中如此獲得的提取物可以作為液體的含雌馬酚的提取物直接加入食品或藥品中,或者可以通過在加入食品或藥品之前除去提取劑而固化。在步驟I-2中如此獲得的提取物可以(以液體或固體含雌馬酚的提取物的形式)進行雌馬酚精制。注意,為了改善含雌馬酚的提取物的保存穩(wěn)定性,更優(yōu)選的是通過除去提取劑固化液體提取物。通過制備方法I獲得的含雌馬酚的提取物的組成和用途在步驟I-1或步驟1-2中獲得的液體提取物的雌馬酚含量是基于干燥固體產物的總量(100重量%)的0.2-40重量%,優(yōu)選0.4-24重量%,且更優(yōu)選1-16重量%。在步驟1-1或步驟1-2中獲得的液體提取物的黃豆黃素含量是基于千燥固體產物的總量的0.01-8重量%,優(yōu)選0.08-5重量%,且更優(yōu)選0.2-3重量%。在步驟I-1或步驟1-2中獲得的含雌馬酚的提取物包含高濃度的雌馬酚,并表現出基于雌馬酚的有益活性。更具體地說,在步驟I-1或步驟1-2中獲得的含雌馬酚的提取物具有預防或治療各種疾病或癥狀的效果,包括更年期障礙、骨質疏松癥、前列腺肥大和代謝綜合征;或者用于血液膽固醇水平降低、皮膚增白、丘疹、腸控制(intestinalcontrol)、肥胖癥和多尿。由于有益活性是如此表現的,在步驟I-1或步驟1-2中獲得的含雌馬酚的提取物可以加入食品或藥品中。當用于食材時,在步驟I-1或步驟I-2中獲得的含雌馬酚的提取物通常加入飲料、粒料、細粒料、膠嚢、片材、粉末、乳制品、膠質、膠糖、布丁、酒巴食品(bars)和其它各種干性食品中。包含含雌馬酚的提取物的食品可以用作普通食品,也可以用作特定的健康食品、營養(yǎng)補充劑、功能食品、病弱者食品等等。特別是,任何包含本發(fā)明的大豆胚軸發(fā)酵物的食品可用作營養(yǎng)補充劑。請注意,包含步驟I-1或步驟1-2中獲得的含雌馬酚的提取物的食材的細節(jié)在后面描述。當在步驟1-1或步驟1-2中獲得的含雌馬酚的提取物加入食材中時,食品中含雌馬酚的提取物的比例隨食品的類型、雌馬酚含量、消21費者的年齡和性別、希望的效果等進行變化。通常,含雌馬酚的提取物的總量(干重)是每100g食品0.1-90g。當用于醫(yī)用產品時,在步驟I-1或步驟I-2中獲得的含雌馬酚的提取物經常加入片劑、丸劑、粉末、液體、懸浮液、乳劑、顆粒、膠嚢或栓劑中。這種包含含雌馬酚的提取物的醫(yī)用產品具有預防或治療各種疾病或癥狀的效果,包括更年期障礙(不定性的更年期病(indefinitemenopausalcomplaint)、骨質疏+〉癥、高脂血癥)、骨質疏松癥、前列腺肥大和代謝綜合征;或者用于血液膽固醇水平降低、皮膚增白、丘滲、腸控制、肥胖癥和多尿。特別是,包含含雌馬酚的提取物的醫(yī)用產品適合于預防或治療中年婦女的不定性病(indefinitecomplaint)或絕經后綜合征(例如骨質疏松癥、更年期障礙)。包含步驟I-1或步驟1-2中獲得的含雌馬酚的提取物的醫(yī)用產品的劑量不能一律地限定,因為它隨含雌馬酚的提取物中雌馬酚的含量、對象的年齡、體重、癥狀或給藥次數而變化。每日的成人劑量通常相當于1-2000mg,優(yōu)選5-1000mg,且更優(yōu)選40-50mg的含雌馬酚的提取物的量(干重)。特別優(yōu)選的是含雌馬酚的提取物的劑量確定為使得每日施用2-30mg的雌馬酚。I-2.制備方法II制備方法II通過進行下面的步驟II-1和步驟II-2制備含雌馬酚的提取物。下面詳細描述制備方法II。歩驟制備方法II首先將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮在水中,向懸浮液中加入酸以調節(jié)pH值到2-6的范圍,并分離不溶性殘留物(步驟II-l)。換言之,在步驟II-1中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮在含酸的水溶液(pH2-6)中,隨后收集不溶性殘留物。在步驟II-1中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮在水中,且酸加入到懸浮液中以調節(jié)pH值到2-6的范圍。在步驟II-1中使用的酸可以是有機酸或無機酸。對有才幾酸沒有限制,只要它可調節(jié)到前述的pH值范圍。有機酸的例子包括檸檬酸、L-酒石酸、富馬酸、L-抗壞血酸、葡糖酸、乙酸、乳酸、DL-蘋果酸、草酸、曱酸、丙酸、丁酸和曱磺酸(methanesulfoneacid)。類似地,對無機酸也沒有限制,只要它可調節(jié)到前述的pH值范圍。無機酸的例子包括鹽酸、硫酸、硝酸和磷酸。其中,乙酸、鹽酸和硫酸是優(yōu)選的。在步驟n-i中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮于其中的水的量是例如每重量份(千重)含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物3-30重量份,更優(yōu)選5-20重量份。在步驟II-l中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物在pH2-6的水溶液中混合,且在室溫下攪拌該溶液或使其靜置至少30分鐘,更優(yōu)選2-24小時。這種處理使雌馬酚成為不溶性殘留物的一部分,且雌馬酚可以通過使用公眾已知的方法如過濾或離心收集不溶性殘留物而獲得。然后在步驟II-1中如此獲得的不溶性殘留物進行下面的步驟II-2。歩驟II-2在步驟II-1中如此獲得的不溶性殘留物使用乙醇水溶液作為提取劑進行另一次提取。所得到的液體提取物進行分離(步驟11-2)。在步驟II-1中獲得的不溶性殘留物可以進行步驟11-2,不論它是千產物還是濕產物。但是,當不溶性殘留物是濕產物時,優(yōu)選考慮不溶性物質中測得的水含量來調節(jié)乙醇水溶液(后面描述)的水含量。在步驟II-l中使用的乙醇水溶液(乙醇和水的混合溶液)的乙醇濃度是例如50-95體積%,更優(yōu)選70-90體積%。在這一濃度范圍內,在步驟II-2中從不溶性殘留物得到的雌馬酚提取可以高效地進行。在步驟II-2中的提取使用例如每重量份(干重)步驟II-l中獲得的不溶性殘留物2-30重量份,更優(yōu)選4-10重量份的量的乙醇水溶液。在步驟II-2中提取的條件沒有特別限制,且可以使用暖或冷浸提取方法、滲濾方法等。更具體地說,乙醇水溶液加入到步驟n-i中獲得的不溶性殘留物中,并使混合物在室溫下靜置或攪拌至少30分鐘,優(yōu)選在室溫下1至50小時。在這種提取之后,液體提取物進行分離以獲得含雌馬酚的部分。提取物的收集通過公眾已知的方法如過濾或離心進行。因為包含濃縮的雌馬酚,在步驟II-2中如此分離的液體提取物包含高濃度的雌馬酚和有用的成分如黃豆黃素化合物,所以該提取物比含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物更有用。在步驟II-2中獲得的液體提取物可以作為液體的含雌馬酚的提取物直接加入食品或藥品中,或者可以通過在加入食品或藥品之前除去提取劑而加工成粉末。在步驟II-2中式)進行雌馬酚精制。請注意,、為了;文善含雌馬酚^提取物的保存穩(wěn)定性,更優(yōu)選通過除去提取劑固化液體提取物。的步驟1-2中相同的條件下進行;但是,除去步驟優(yōu)選通過噴霧千燥進行。通過制備方法II獲得的含雌馬酚的提取物的組成和用途通過使在方法ii中獲得的液體提取物(在前述步驟n-2中獲得的液體提取物)干燥,有可能分離具有90%或更高回收率的雌馬酚。如此獲得的是包含比所述含雌馬酚大豆胚軸發(fā)酵物中的雌馬酚多十倍的雌馬酚的含雌馬酚粉末。通過這一高雌馬酚含量,含雌馬酚粉末更有效地表現出源自雌馬酚的有益活性。使用方法II中獲得的含雌馬酚粉末的目的或方法與方法I中獲得的含雌馬酚粉末相同。2.雌馬酚純化方法
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:本發(fā)明還提供用于純化含雌馬酚的物質以獲得雌馬酚的方法。本發(fā)明的雌馬酚純化方法被分成以下純化方法1和2。下面詳細描述將通過本發(fā)明的純化方法精制的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物并詳細地描述純化方法1和2。含jt準馬g^的物質在本發(fā)明的純化方法中,將進行純化處理的含雌馬酚的物質沒有限制,只要它包含雌馬酚。例如,用于該方法的含雌馬酚的物質可以是包含通過化學合成產生的雌馬酚的反應產物或通過發(fā)酵產生的含雌馬酚的發(fā)酵物質。通過發(fā)酵產生的含雌馬酚發(fā)酵物質包含許多種與雌馬酚結構類似的異黃酮。但是,由于本發(fā)明的方法可以有利地以有效的方式將雌馬酚與異黃酮分離,因此含雌馬酚的發(fā)酵物質適合作為本發(fā)明的純化方法的含雌馬酚的物質。下面解釋含雌馬酚的發(fā)酵物質。含雌馬酚的發(fā)酵物質使用產生雌馬酚的微生物通過公眾已知的發(fā)酵方法產生。更具體地說,具有通過代謝選自大豆黃酮糖苷、大豆黃酮和二氫大豆黃酮的至少一種大豆黃酮化合物產生雌馬酚的能力進行發(fā)酵的材料)中。然后該樣品在適合微生物生長的條件下發(fā)酵(培養(yǎng))。所得到的發(fā)酵物質包含雌馬酚。產生雌馬酚的微生物選自在"1.含雌馬酚的提取物的制備方法"章節(jié)中的"含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物"部分的列表中。包含大豆黃酮化合物的發(fā)酵材料沒有其它因素的限制;但是,優(yōu)選該材料對于作為食品材料的安全性獲得批準。包含大豆黃酮化合物的發(fā)酵材料的例子包括大豆、大豆胚軸、大豆胚軸提取物、豆腐、油炸豆腐、豆奶、發(fā)酵的大豆、醬油、豆醬、印尼豆豉及紅三葉草(redclove)或其提取物、紫花苜蓿或其提取物。合適的包含大豆黃酮化合物的發(fā)酵材料是大豆胚軸,因為它具有高大豆黃酮含量。含大豆黃酮化合物的發(fā)酵材料中。通過額外添加異黃酮到發(fā)酵材料中,所得到的發(fā)酵物質的雌馬酚含量提高。另外,如果需要,某些添加劑可以用在包含大豆黃酮化合物的發(fā)酵材料中以提高發(fā)酵效率等。添加劑的例子包括氮源(如酵母提取物、多蛋白胨或肉膏)、碳源(如葡萄糖或蔗糖)、無機鹽(如磷酸鹽、碳酸鹽或硫酸氬鹽)、維生素和營養(yǎng)成分(如氨基酸)。25制備含雌馬酚的發(fā)酵物質的各種發(fā)酵條件(包括水含量、時間、溫度、氣氛)根據產生雌馬酚的微生物的類型、發(fā)酵材料的類型、雌馬酚的產量、殘留的大豆黃酮化合物量等等確定。對于用于本發(fā)明的純化方法的含雌馬酚的物質,在"1.含雌馬酚的提取物的制備方法"章節(jié)中描述的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物是特別優(yōu)選的。2-1.純化方法1純化方法1通過進行下面的步驟1-1至l-5精制雌馬酚。歩驟1-1本發(fā)明的方法使用乙醇水溶液作為提取劑對于含雌馬酚的物質進行提取,然后收集得到的液體提取物(步驟1-1)。步驟1-1中使用的乙醇水溶液的典型乙醇濃度是20-98體積%,優(yōu)選45-95體積%,且更優(yōu)選45-60體積%。通過確保這一乙醇濃度,有可能高效地從含雌馬酚的物質提取雌馬酚。步驟1-1中的提取使用例如每重量份(干重)含雌馬酚的物質1-1000重量份,優(yōu)選2-500重量份,更優(yōu)選5-20重量份的量的乙醇水溶液。步驟1-1中提取的條件沒有特別限制,且可以使用暖或冷浸提取方法、滲濾方法等。更具體地說,乙醇水溶液加入到含雌馬酚的物質中,且使得混合物在室溫下靜置或攪拌至少一分鐘,更優(yōu)選在室溫下5分鐘至48小時。在這一提取之后,液體提取物進行分離以荻得含雌馬酚的部分。液體提取物的收集通過公眾已知的方法如過濾或離心進行。在步驟1-1中如此分離的液體提取物包含在含雌馬酚的物質中減少量的油,并包含異黃酮(包括黃豆黃素和皂苷),以及雌馬酚。在步驟1-1中如此獲得的液體提取物進行下面的步驟1-2。步驟1-2在從步驟1-1獲得的液體提取物中除去提取劑后,殘留物使用乙醇作為提取劑進行提取,并分離液體提取物(步驟1-2)。26在步驟1-2中,從步驟1-1獲得的液體提取物中除去提取劑,和使用乙醇對如此獲得的殘留物進行另一次提取,和收集液體提取物按照"1.含雌馬酚的提取物的制備方法"章節(jié)中制備方法I的步驟1-2中相同的條件進行。在步驟1-2中收集的液體提取物包含降低量的皂苷,并包含異黃酮(包括黃豆黃素化合物)以及雌馬酚。在步驟1-2中如此獲得的液體提取物進行下面的步驟1-3。歩驟1-3在從步驟1-2獲得的液體提取物中除去提取劑后,殘留物懸浮在己烷中以分離不溶性物質(步驟1-3)。在步驟1-3中,從步驟1-2獲得的液體提取物除去提取劑可以通過公眾已知的方法如減壓蒸餾、干燥等進行。從步驟1-2獲得的液體提取物中除去提取劑,并且己烷加入殘留物(下面有時候稱為"第二材料殘留物")中以在己烷中懸浮該殘留物。步驟1-3中的提取使用每重量份(干重)第二材料殘留物1-50重量份,且更優(yōu)選5-10重量份的量的己烷。步驟1-3中提取的條件沒有特別限制。例如,可以采用暖或冷浸提取方法。更具體地說,己烷加入到第二材料殘留物中,并使得混合物在室溫下靜置或攪拌至少5分鐘,優(yōu)選在室溫下3分鐘至1小時。在使用己烷的這一懸浮之后,提取到作為不溶性物質的雌馬酚。因此,通過收集不溶性物質獲得含雌馬酚的提取物。不溶性殘留物的收集通過>眾已知的方法如過濾或離心進行。通過步驟1-3,脂溶性的雜質從步驟1-2獲得的液體提取物中除去。在步驟1-3中獲得的不溶性殘留物進行下面的步驟1-4。歩驟1-4步驟1-4包括使用己烷和醚的混合液作為提取劑對步驟1-3獲得的不溶性殘留物進行提取,并收集所得到的液體提取物(步驟1-4)。作為步驟1-4中使用的提取劑的成分之一的醚沒有特別限制。醚的例子包括二甲醚、曱乙醚和乙醚,且它們可以單獨或組合使用。其中,乙醚由于其雌馬酚精制效率而是特別優(yōu)選的。步驟1-4中使用的己烷和醚的混合溶液的混合比例沒有特別限制;但是,為獲得具有希望純度的雌馬酚,己烷與醚的體積比是10:90至20:80,且優(yōu)選是30:70至25:75。步驟1-4中的提取使用每重量份(干重)步驟1-3中獲得的不溶性殘留物50-5000重量份,更優(yōu)選200-1000重量份的量的己烷和醚的混合溶液。用于步驟1-4中的提取的條件沒有特別的限制。例如,可以采用暖或冷浸提取方法或滲濾方法。更具體地說,己烷和醚的混合溶液加入到步驟1-3獲得的不溶性物質中,并使得混合物在室溫下靜置或攪拌至少10分鐘,優(yōu)選在室溫下15分鐘至30小時。在這種提取之后,液體提取物進行分離以獲得雌馬酚。液體提取物的收集通過7>眾已知的方法如過濾或離心進^亍。步驟1-5步驟1-4中獲得的液體提取物進行硅膠層析以獲得含雌馬酚的流份(步驟1-5)。步驟1-5可以采用任何種類的使用分離柱(各包含硅膠作為填充劑)的硅膠層析。硅膠柱層析的例子包括通過重力下降使溶劑流動的開放柱層析、利用泵使溶劑流動的快速柱層析和高效液相層析。開放柱層析和快速柱層析是特別優(yōu)選的,因為它們可以方便地以工業(yè)方式完成。當進行硅膠柱層析時,優(yōu)選使用己烷和醚的混合溶液作為流動相(展開溶劑)以進一步提高雌馬酚精制程度。對用于流動相的醚沒有限制。醚的例子包括二曱醚、甲基醚(methylether)和乙醚,且它們可以單獨或組合使用。為提高雌馬酚精制程度,醚優(yōu)選與用于步驟1-4中的己烷和醚的混合溶液的相同。在步驟1-5中利用硅膠柱層析的雌馬酚洗脫中,優(yōu)選使用其組成與步驟1-4中的己烷和醚的混合溶液相同的己烷和醚的混合溶液作為初始流動相,且醚的比率按照梯度方法逐步提高。流動相中醚比率的這種提高使得雌馬酚連同流動相(其中己烷與醚按40:60至20:80,更優(yōu)選30:70至25:50的比例混合)一起與其它雜質分離。之后,對已通過硅膠柱層析洗脫的包含雌馬酚的流份進行分離以獲得高純度的雌馬酚。然后,通過公眾已知的方法如減壓蒸餾、干燥等從含雌馬酚的流份除去提取劑。這從該流份中除去了大部分的雜質,從而留下高純度的雌馬酚固體。2-2.純化方法2步驟2-1本發(fā)明的純化方法2^f吏用選自乙酸乙酯、醇、丙酮、二氧雜環(huán)己烷、乙腈、乙醚和曱苯中的至少一個成員的有機溶劑或有機溶劑水溶液作為提取劑對含雌馬酚的物質進行提取,然后濃縮液體提取物有機溶劑(步驟2-1)。在步驟2-l中,提取劑可以是選自乙酸乙酯、醇、丙酮、二氧雜環(huán)己烷、乙腈、乙醚和曱苯中的至少一個成員的有機溶劑。但是,為確保高效的雌馬酚提取,更優(yōu)選使用通過將水加入到前述有機溶劑中獲得的有機溶劑水溶液。用作提取劑的醇的例子包括甲醇、乙醇、異丙醇和正丙醇。有機溶劑水溶液的典型濃度是80-99體積%,優(yōu)選90-97體積%。確保這一濃度,有可能獲得具有高雌馬酚含量的液體提取物。在步驟2-1中使用的一種優(yōu)選的提取物是乙酸乙酯水溶液。對提取條件沒有特別限制,且可以使用暖或冷浸提取方法等。更具體地說,提取劑加入到含雌馬酚的物質中,并使得混合物在室溫下靜置或攪拌至少30分鐘,更優(yōu)選在室溫下1小時至50小時。步驟2-1提取的條件也沒有特別限制,且可以使用暖或冷浸提取方法、;參濾方法等。在這種提取之后,在液體提取物中析出的雌馬酚通過公眾已知的固-液分離方法如過濾或離心進行分離。然后,獲得的液體提取物例如在減壓條件下濃縮以獲得雌馬酚濃縮物。如此獲得的雌馬酚濃縮物進行下面的步驟2-2。歩驟2-2步驟2-1中獲得的雌馬酚濃縮物進行硅膠柱層析以獲得含雌馬酚的流份(步驟2-2)。在步驟2-2中,步驟2-1中荻得的雌馬酚濃縮物可以直接進行硅膠柱層析。另外,如果步驟2-1中的提取使用包含醇的水性溶劑進行,體積是濃縮的液體提取物5-10倍的相等量的乙酸乙酯和水加入到濃縮物中,且乙酸乙酯部分進行分離和濃縮以進行柱層析。步驟2-2中的這一柱層析可以是使用各包含硅膠作為填充劑的分離柱的任何種類的層析。硅膠柱層析的例子包括通過重力下降使溶劑流動的開放柱層析、利用泵使溶劑流動的快速柱層析和高效液相層析。開放柱層析和快速柱層析是特別優(yōu)選的,因為它們可以方便地以工業(yè)方式完成。在步驟2-2的硅膠柱層析中,優(yōu)先使用乙醚或乙酸乙酯溶液(下面稱為溶液A)和正己烷、石油醚或正庚烷溶液(下面稱為溶液B)的混合溶液作為流動相。混合溶液中溶液B的比率是2-50體積份,更優(yōu)選3-10體積4分每體積4分:容液A。因此,步驟2-1中獲得的液體提取物進行硅膠柱層析以分離含雌馬酚的部分。步驟2-2中獲得的含雌馬酚的部分進行步驟2-3。歩驟2-3從步驟2-2獲得的含雌馬酴的部分中除去溶劑,且所得到的殘留物進行重結晶。然后沉淀的晶體進行分離(步驟2-3)。溶劑除去方法如減壓濃縮進行。用于步驟2-3中的重結晶的溶劑沒有特別限制,只要它可以用于雌馬酚的重結晶。典型的溶劑是乙醇和水的混合溶液(乙醇水溶液)、乙酸乙酯、乙酸乙酯和己烷的混合溶液或乙醇和己烷的混合溶液。乙酸乙酯與己烷的混合溶液和乙醇水溶液是特別優(yōu)選的。更具體地說,乙酸乙酯和己烷的混合溶液通常包含10:1至1:10的體積比的乙酸乙酯和己烷。用于重結晶的乙醇水溶液的乙醇濃度通常是30-90體積%,優(yōu)選40-70體積%。通過使用乙酸乙酯和己烷的混合溶液或調節(jié)到前述濃度的乙醇水溶液進行重結晶,所得到的雌馬酚的純度進一步提高。步驟2-3中的重結晶可以使用常規(guī)的方法進行。例如,用于重結晶的溶劑加入由從步驟2-2獲得的含雌馬酚的部分除去溶劑而產生的殘留物中,且殘留物通過加熱溶解于溶劑中。然后溶液冷卻以沉淀雌馬酚晶體。為進一步促進或加速雌馬酚結晶,雌馬酚晶種可以接種到樣品中。結晶的溫度條件按照溶劑的沸點和凝固點確定。一般,殘留物在大約溶劑的沸點下溶解,且晶體在大約0-25。C沉淀。3.食品材料本發(fā)明進一步提供其中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物分散于可可糖膏中的食品材料。下面描述本發(fā)明的食品材料的細節(jié),如成分。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物及其一是取用于本發(fā)明的食品材料的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物與在上面"1.含雌馬酚的提取物的制備方法"章節(jié)中描述的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物相同。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物可以在發(fā)酵后立即用于本發(fā)明的食品材料,或者在按照需要干燥成干固體之后用于本發(fā)明的食品材料。為提高含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的保存穩(wěn)定性,更優(yōu)選通過熱空氣干燥等使含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物固化??諝飧稍锏暮岂R酚的大豆胚軸發(fā)酵物可以進一步按照需要加工成粉末。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的提取物指的是從含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行溶劑提取獲得的含雌馬酚的提取物。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的提取物沒有特別限制;但是,提取物優(yōu)選是通過上面"1.含雌馬酚的提取物的制備方法"章節(jié)中描述的方法獲得的含雌馬酚的提取物,更優(yōu)選含雌馬酚的提取物是通過上述的制備方法I獲得的。本發(fā)明的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的提取物可以以液體狀態(tài)使用;但是,更優(yōu)選通過除去提取劑固化液體提取物。本發(fā)明的食品材料可以包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物;但是,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物在營養(yǎng)上是優(yōu)選的??煽商歉嗫煽商歉嗍侵饕米髑煽肆Τ煞值氖称凡牧稀?煽商歉嗍峭ㄟ^用發(fā)酵、烘焙和研磨加工可可豆獲得的。用作本發(fā)明的食品材料的可可糖膏沒有特別限制,只要它作為食品材料的安全性得到認可。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物和可可糖膏的比例在本發(fā)明的食品材料中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物與可可糖膏的比例沒有限制;但是,為改善食品的風味,更優(yōu)選可可糖膏的比例一般是,基于100重量份的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物,10-2000重量份(干重),優(yōu)選20-900重量份,更優(yōu)選20-400重量份。特別地,當使用含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物時,可可糖膏的比例一般是,基于100重量份的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物,100-2000重量份(干重),優(yōu)選200-900重量份,且更優(yōu)選200-400重量份。本發(fā)明的食品材料可以僅由含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物和可可糖膏組成,但也可以包含如下面詳述的其它成分。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物和可可糖膏的總比例是基于本發(fā)明的食品材料總量的40-100重量%,優(yōu)選60-95重量%,且更優(yōu)選70-95重量%。通過如此調節(jié)所述成分的比例,源自含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的有益生物活性可有效的表現,且食品將具有良好的風味。任選的成分只要本發(fā)明的效果不受影響,本發(fā)明的食品材料除(a)含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物和(b)可可糖膏之外還可以包含各種成分。用于本發(fā)明的食品材料的合適的成分包括甜味劑如糖、海藻糖、安賽蜜(acesulfamK)、木糖醇、三氯蔗糖(scralose)、赤蘚糖醇、糖精(aspartame)和淀粉糖漿;油和脂肪如可可油脂或植物油;乳化劑如大豆磷脂;香料;香料制劑;奶和水。食品材料的形式本發(fā)明的食品材料的形狀沒有特別限制,且可以是粉末、顆粒、切片或盤狀的形式,取決于食品的目標產品的形式。為在產品中良好地利用本發(fā)明的食品材料的質地特征,食品材料優(yōu)選地加工成顆?;蚯衅男问剑貏e優(yōu)選顆粒或每片30-1000mg的切片形式。本發(fā)明的食品材料的制備方法
技術領域:
:本發(fā)明的食品材料通過在可可糖膏中的可可油脂溶解的溫度(優(yōu)選30-50。C)下混合含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物、可可糖膏和其它必要成分,然后冷卻和固化該混合物而制備。結果,制備出其中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物分散于可可糖膏中的本發(fā)明的食品材料。如果需要,本發(fā)明的食品材料可以進行粉碎、研磨、篩分等以形成需要的形狀?;蛘?,本發(fā)明的食品材料可以在制備過程中使用擠壓造粒(extrusiongranulation)成型。食品材料的用途本發(fā)明的食品材料可以作為含雌馬酚的食品的原料或作為食品添加劑加入各種類的食材中。本發(fā)明還提供由上述食品材料制成的這類含雌馬酚的食品。本發(fā)明的含雌馬酚的食品沒有特別限制,并包括烘焙的點心和冷凍的甜點。烘焙的點心的例子包括各種糯米餅干、小麥餅干(如薄餅或華夫餅)、餅干、小甜餅、蘇打餅干、派、蛋糕、炸面圈和面包。冷凍的甜點的例子包括冰洪淋、刨水和冰才奉(icepops)。其中,烘焙的點心是含雌馬酚的食品的適宜形式之一。特別地,由大豆粉制成的烘焙的點心不僅包含雌馬酚而且包含其它源自大豆的有用成分;因此,烘焙的點心是非常有利的,提供了優(yōu)良的養(yǎng)生效果。33由大豆粉制成的烘焙的點心的一個優(yōu)選的例子包含大豆粉、蛋和黃油,但不包含小麥。用于這種類型的餅干的大豆粉優(yōu)選通過加熱等進行處理以滅活或減少脂氧合酶并除去或減輕大豆腥味。這種烘焙的點心可以通過例如使用每100重量份大豆粉0-35重量份的蛋、10-65重量份的黃油、0.1-50重量份的本發(fā)明的食品材料和其它成分制備。這些成分與適量的水混合以制成面團。然后面團形成預定的形狀并在大約60-250。C烘烤2-60分鐘。本發(fā)明的食品材料在含雌馬酚的食品中的比例沒有特別限制,并根據本發(fā)明的食品材料中的雌馬酚含量、含雌馬酚的食品的形式等進行調節(jié)。本發(fā)明的食品材料的比例一般是基于含雌馬酚食品的材料總量的3-30重量%,優(yōu)選5-20重量%,且更優(yōu)選5-8重量%。另外,含雌馬酚的食品中雌馬酚的比例一般是基于含雌馬酚食品的材料總量的0.002-0.1重量%,優(yōu)選0.004-0.05重量%,且更優(yōu)選0.005-0.03重量%。通過確保本發(fā)明的食品材料的這一比例,源自含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的有益生物活性在食品中表現,而同時保持含雌馬酚的食品的良好風味。含雌馬酚的食品通過混合本發(fā)明的食品材料和預定量的其它成分,并根據食品產品的目標形式使混合物成型、烘烤、冷卻等而制備。含雌馬酚的食品由含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物制成,且包含各種有用的生物活性材料(包括雌馬酚),從而表現出各種生物活性或藥理活性。因此,含雌馬酚的食品不僅可用作一般食品也可用作用于特定保健用途的食品、營養(yǎng)補充劑、功能食品、病弱者食品等。包含本發(fā)明的大豆胚軸發(fā)酵物的食品特別可用作營養(yǎng)保健產品。例如,含雌馬酚的食品具有預防或治療各種疾病或癥狀的效果,包括更年期障礙、骨質疏松癥、前列腺肥大和代謝綜合征;或者用于血液膽固醇水平降低、皮膚增白、丘疹、腸控制、肥胖癥和多尿。特別是,含雌馬酚的食品適用于預防和治療中年婦女的不定性病或絕經后綜合征(例如,骨質疏松癥、更年期障礙)。34含雌馬酚的食品的每日攝入量根據食品中的雌馬酚含量、消費者的年齡、體重、癥狀或服用次數確定。4,各種形式的食品本發(fā)明進一步提供各種形式的包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食品。本發(fā)明的食品的例子包括飲料、膳食補充劑、奶油食品、甜點、點心、調味品、殺菌袋裝食品、加工肉制品、魚醬、加工蛋制品、罐頭食品、面包、冷凍甜點、加工大豆食品、烹制的大米制品和湯。下面詳細解釋含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物及其提取物和本發(fā)明提供的各形式的食品。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物及其提取物用于本發(fā)明的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物與在"3.食品材料"章節(jié)中使用的相同。本發(fā)明的食品可以包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的前述列表中的任何一項。本發(fā)明的食品優(yōu)選包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。食品的形式疾病或癥狀,包括更年期障礙、骨質疏松癥、前列腺肥大和代謝綜合征;或者用于血液膽固醇水平降低、皮膚增白、丘疹、腸控制、肥胖癥和多尿。特別是,含雌馬酚的食品適合于預防或治療中年婦女的不定性病或絕經后綜合征(例如,骨質疏松癥、更年期障礙)。因此,各種形式的本發(fā)明的食品可以作為對那些疾病或癥狀有效的功能食品。更具體地說,包含大豆胚軸發(fā)酵物的本發(fā)明的食品不僅可用作一般食品,而且也用作用于特定保健用途、營養(yǎng)補充劑、功能食品、病弱者飲食食品等的食品。包含大豆胚軸發(fā)酵物的本發(fā)明的食品特別用作營,才卜A劑。下面解釋本發(fā)明的食品的特定實施例。(1)飲料本發(fā)明的飲料可以是任何種類的飲料;但是,它適用于含果汁的飲料、含蔬菜汁的飲料、碳酸飲料(如汽水、可樂、含果汁碳酸飲料、姜汁汽水(gingerale)、蘇打水)、軟飲料(如運動飲料、咖啡飲料如咖啡或牛奶咖啡)、茶(如英國茶、綠茶或烏龍茶)、可可飲料、乳酸菌飲料、乳制飲料(如牛奶、果味奶或酸奶飲料)、酒精飲料(如啤酒、曰本清酒(蒸餾酒)、威士忌、雞尾酒或與蘇打水混合的日本清酒。含量沒有限制,并按照大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、飲料的類型、預期的效果等個別地確定。例如,飲料中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.02-15重量%,優(yōu)選0.1-1重量%,且更優(yōu)選0.2-0.5重量%(干重)。(2)膳食補充劑本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的膳食才卜充劑。本發(fā)明的膳食補充劑的形式沒有限制,且包括軟凝膠(softgel)、片劑、粉末等,其中軟凝膠是特別優(yōu)選的。軟凝膠或粉末優(yōu)選以預定量包含在膠嚢中。本發(fā)明的軟凝膠的一種適宜的實施方式是包含明膠、水和甘油及進一步包含其它添加劑如大豆油、蜂蠟、卯磷脂或P-胡蘿卜素。在本發(fā)明的各膳食補充劑中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的雌馬酚含量、補充劑的類型、預期的效果等個別地確定。例如,膳食補充劑中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量是2-100重量%(干重)。(3)奶油食品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的奶油食品。36本發(fā)明的奶油食品沒有特別限制并可以包括生奶油(whippedcream)、乳蛋糕乳脂(custardcream)、加糖奶油漿(buttercream)、新鮮4乃〉'由(freshcream)牙口人造牙希奶〉'由(coffeewhitener)。本發(fā)明的各奶油食品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、奶油食品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,奶油食品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-5重量%,優(yōu)選0.15-1重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(4)甜點本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的甜點。甜點沒有特別限制并可以包括酸乳酪、果凍、布丁、奶油凍等。本發(fā)明的各甜點中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、甜點的類型、預期的效果等個別地確定。例如,甜點中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-5重量%,優(yōu)選0.15-1重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(5)小吃本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的小吃。小吃沒有特別限制并可以包括任何西式或日式糖果,包括烘焙的或蒸的點心。本發(fā)明的小吃的例子包括糖果、棒棒糖、太妃糖、椒鹽巻餅(pretzel)、片形小吃(tablet)、口香糖、巧克力、小甜餅、豆制點心、薄餅、奶酪餅干、橡皮糖、普通大米餅干、和Suhama(日本傳統(tǒng)點心)、干點心、和Yokan(赤小豆果凍)、蒸豆醬點心(bean-jambun)、蕨淀粉餃子、磅餅、蘋果餅餡、香草(savory)小吃和糯米餅干。其中,小吃的一種適宜的實施方式是包含大豆面粉的烘焙的點心。本發(fā)明的各小吃中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、小吃的類型、預期的效果等個別地確定。例如,小吃中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.01-99重量%,優(yōu)選0.04-36重量%,且更優(yōu)選0.08-18重量%(干重)。(6)調味品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的調味口口調味品沒有特別限制并可以包括烤肉醬、燒鰻魚(Kabayaki)(燒烤的海鮮)的調味醬、魷魚珍味(squid-chinmi)的調味品、番茄醬、tsuyu(湯)、調料、芝麻蘸醬(sesarnedippingsauce)、小吃調味品和醬油。本發(fā)明的各調味品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、調味品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,調味品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.04-40重量%,優(yōu)選0.2-8重量%,且更優(yōu)選0.4-4重量%(干重)。(7)殺菌袋裝食品袋裝食品(軟罐頭食品)。殺菌袋裝食品沒有特別限制并可以包括各種調味材料,包括用于咖鬼沙司、石卒米沙司(hashedricesauce)、燉菜、肉羹(meatsauce)或白汁沙司的預混合料;用于中式蓋飯(donburi)、牛肉蓋飯及雞肉和蛋蓋飯的預混合料;用于麻婆豆腐(帶有辣椒和豆醬的豆腐)的預混合料和用于釜飯(Kamameshi)(用各種類的肉、海鮮和蔬菜烹制的日本大米菜肴)的預混合料。本發(fā)明的各殺菌袋裝食品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、殺菌袋裝食品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,殺菌袋裝食品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.003to4重量%,優(yōu)選0.01-0.8重量%,且更優(yōu)選0.03-0.4重量%(干重)。(8)加工的肉制品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的加工肉制品。本發(fā)明的加工肉制品沒有特別限制并可以包括香腸(干、半干、博洛尼亞香腸、維也納香腸、薰腸)、肝醬、咸豬肉、肩咸豬肉(shoulderbacon)、火腿、漢堡牛排和肉丸子。本發(fā)明的各加工肉制品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、肉制品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,加工肉制品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.02-0.4重量%,優(yōu)選0.1-0.8重量%,且更優(yōu)選0.2-0.4重量%(千重)。(9)魚醬制品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的魚醬制品。本發(fā)明的魚醬制品沒有特別限制并可以包括煮的魚醬和魚餅巻(fishcaketube)。本發(fā)明的魚醬制品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、魚醬制品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,魚醬制品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-5重量%,優(yōu)選0.1-1重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(10〗加工的蛋制品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的加工蛋制品。本發(fā)明的加工蛋制品沒有特別限制并可以包括日式巻煎蛋巻、厚曰式煎蛋巻、西式煎蛋巻和攤雞蛋。本發(fā)明的各加工蛋制品中的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、加工蛋制品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,加工蛋制品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-5重量%,優(yōu)選0.1-重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(11)罐頭食品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的罐頭食品。本發(fā)明的罐頭食品沒有特別限制并可以包括水果罐頭如桔子罐頭或桃罐頭、海鮮罐頭如金槍魚罐頭或沙丁魚罐頭、果醬罐頭、湯罐頭和沙司耀頭。本發(fā)明的各罐頭食品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、罐頭食品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,罐頭食品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-5重量%,優(yōu)選0.1-1重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(12)面包本發(fā)明的面包沒有特別限制并可以包括條形面包、法式面包、加餡面包、甜瓜面包(melonbread)、豆醬面包、奶油面包、果醬面包、面包巻和羊角面包。量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、面包的類型、預期的效果等個別地確定。例如,面包中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.01-50重量%,優(yōu)選0.05-0.6重量%,且更優(yōu)選0.1-0.3重量%(干重)。(13〗冷凍甜點甜點。本發(fā)明的冷凍甜點沒有特別限制并可以包括水淇淋和果汁凍(sherbet)。40本發(fā)明的各冷凍甜點中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、冷凍甜點的類型、預期的效果等個別地確定。例如,冷凍甜點中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-5重量%,優(yōu)選0.1-1重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(14)加工大豆食品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的加工大豆食口t。本發(fā)明加工大豆食品沒有特別限制并可以包括豆腐、厚油炸豆腐、與蔬菜混合的油炸豆腐、豆奶皮、發(fā)酵大豆和豆奶。本發(fā)明的各加工大豆食品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、加工大豆食品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,加工大豆食品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.03-0.5重量%,優(yōu)選0.1-1重量%,且更優(yōu)選0.3-0.5重量%(干重)。(15)烹制的大米制品本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的烹制的大米制品。本發(fā)明的烹制大米制品沒有特別限制并可以包括炸大米、肉飯(pilaf)、米粥、帶有栗子的蒸糯米飯、煮白米飯、紅豆米飯和與肉和蔬菜一起蒸的米飯。本發(fā)明的各烹制的大米制品中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、烹制的大米制品的類型、預期的效果等個別地確定。例如,烹制的大米制品中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.01-2.5重量%,優(yōu)選0.02-0.5重量%,且更優(yōu)選0.04-0.25重量%(干重)。(16)湯本發(fā)明提供包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的湯。本發(fā)明的湯沒有特別限制并可以包括玉米奶油湯(corncreamsoup)、清燉肉湯(consomm6)、Hb菜5農湯(minestrone)、洋蔥湯和肉汁濃湯(potage)。本發(fā)明的各湯中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量沒有限制,且根據大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物中的雌馬酚含量、湯的類型、預期的效果等個別地確定。例如,湯中大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的含量一般是0.02-15重量%,優(yōu)選0.1-1重量%,且更優(yōu)選0.2-0.5重量%(干重)。實施例下面參照參考實施例、實施例等更具體地解釋本發(fā)明。但是本發(fā)明不限于這些實施例。參考實施例1-1至1-3含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的制備大豆胚軸粉末、精氨酸和水混合以制備具有表1中所示的組成的大豆胚軸溶液(材料)。乳球菌20-92菌林(FERMBP-10036)接種于5ml的這一大豆胚軸溶液中,且樣品在厭氧條件下37°C溫度下進行靜止培養(yǎng)(stationaryculture)96小時。之后,所得到的發(fā)酵溶液(培養(yǎng)物溶液)通過在100。C加熱1分鐘滅菌,接著在80。C干燥。干燥的產物使用均質器加工成粉末以獲得大豆胚軸發(fā)酵物粉末。表1顯示了96小時培養(yǎng)后的活細胞計數和培養(yǎng)物pH值、收集的大豆胚軸發(fā)酵物粉末的量及大豆胚軸發(fā)酵物粉末的雌馬酚含量。這些數據中顯示,使用產生雌馬酚的細菌發(fā)酵大豆胚軸粉末以高效率產生雌馬酚。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>各實施例使用三批大豆胚軸粉末(N二3)進行。在表中異黃酮組成的分析中,左邊的值表示每克大豆胚軸發(fā)酵物的各異黃酮含量(mg),(100重量%)的比率(重量%)。"n.d."表示未進行測量且括號中的"-"表示未進行計算。參者實施例1=4含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的制備乳球菌20-92菌抹(FERMBP-10036)接種到含有10重量%大豆胚軸粉末和0.1重量%精氨酸的5ml大豆胚軸溶液,且樣品通過在厭氧條件下37。C進行靜止培養(yǎng)96小時而進行發(fā)酵。之后,得到的發(fā)酵溶液(培養(yǎng)物溶液)通過在100。C加熱1分鐘滅菌,接著在80。C干燥。干燥的產物使用均質器加工成粉末以獲得大豆胚軸發(fā)酵物的粉末。分析大豆胚軸粉末(表2和表3中的"發(fā)酵前")和大豆胚軸發(fā)酵物粉末(表2和表3中的"發(fā)酵后")的各個成分。表2顯示關于大豆異黃酮的分析,且表3顯示關于營養(yǎng)成分的分析。這些表顯示,通過使用乳球菌20-92菌抹的大豆胚軸的發(fā)酵獲得的大豆胚軸發(fā)酵物具有高雌馬酚含量。另外,如棉子糖或水蘇糖的寡糖的寡糖含量在發(fā)酵后基本保持相同,這表明發(fā)酵不影響寡糖含量。同時,這些表表明精氨酸通過發(fā)酵轉化為鳥氨酸。因此,通過在使用乳球菌20-92菌抹發(fā)酵之前向大豆胚軸加精氨酸,得到的發(fā)酵物質不僅包含雌馬酚而且包含鳥氨酸。44<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>糖類膳食纖維能'蔗糖棉子糖水蘇糖反式脂肪酸磷脂(作為硬脂酰酰_和卵磷脂:游離精氨酸游離鳥氨酸大豆甾醇A大豆甾醇B大豆皂苷油則g10.5g414kcal7.95g1.37g9.04gN.D."3g881mgN.D.N.D.N.D.3.6g26.8g10.2g411kcal.42g1.34g8.38gN.D.2.92g12mgl掘gN.D.N.D.3.8gN.D.指"未檢測"參者實施例1-5至1-11含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的制備在這些實施例中,大豆胚軸發(fā)酵物粉末(參考實施例1-5至1-11)與參考實施例1-3中相同的方式制備,除了使用與參考實施例1-3中的三批大豆胚軸粉末不同的七批大豆胚軸粉末。獲得的大豆胚軸發(fā)酵物中異黃酮的組成如表4中所示進行分析。這一結果也表明參考實施例l-5至1-11的各大豆胚軸發(fā)酵物具有高雌馬酚含量及未被任何已知技術達到的異黃酮比例。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>上一行中的值代表每克大豆胚軸發(fā)酵物中各異黃酮的含量(mg),而下一行中的值代表各異黃酮與大豆胚軸發(fā)酵物中的總異黃酮量(100重量%)的比率(重量%)。參考實驗實施例1變應原確認試驗已知大豆胚軸包含變應原,包括Gym4、Gm30K、Gm28K、7S球蛋白混合物(卩-伴大豆球蛋白(conglycine))、油質蛋白(oleosin)和胰蛋白酶抑制劑。在參考實施例1-1制備的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物中變應原的存在使用下面的試驗進行檢驗。首先,參考實施例1-1獲得的適當量的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物加入提取緩沖液(TrisHCl,pH7.5,含1MEDTA和適當量的蛋白酶抑制劑)中。樣品充分攪拌以提取水溶性成分。得到的溶液進行過濾以除去固體內容物而獲得液體提取物。這一液體提取物中的所有蛋白質使用蛋白質分析系統(tǒng)(Bio-Rad)進行檢測。另外,液體提取物包含的主要變應原(Gym4、Gm30K、Gm28K、7S球蛋白混合物、油質蛋白和胰蛋白酶抑制劑)使用蛋白質印跡進行檢測。另外,為進行比較,以相同的方法用大豆子葉粉末和大豆胚軸粉末替代大豆胚軸發(fā)酵物進行總蛋白質和變應原的#r測。圖1至3顯示了結果。圖1顯示總蛋白質檢測的結果;圖2顯示Gym4、Gm30K和Gm28K檢測的結果;且圖3顯示7S球蛋白混合物、油質蛋白和胰蛋白酶抑制劑檢測的結果。這些結果表明大豆或大豆胚軸的主要變應原含量在含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物中降低。實施例1:含雌馬酚的提取物的制備實施例1-1:通過制備方法I制備含雌馬酚的提取物在參考實施例1至3的相同條件下制備的1克含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末添加到20ml按照表5的提取劑中;并室溫下進行120分鐘振搖。隨后,殘留物(下面稱為"殘留物l")通過離心除去以分離液體提取物(下面稱為"液體提取物l-l")。接著,液體提取物1-1使用蒸發(fā)器蒸餾至千,向其中加入5ml乙醇,并在室溫下進行10分鐘振搖。隨后,殘留物(下面稱為"殘留物2")通過離心除去以分離液體提取物(下面稱為"液體提取物l-2")。然后液體提取物l-2使用蒸發(fā)器蒸餾至干以獲得固體提取物。另外,相同組成的另外20ml的提取劑加入到殘留物1中,并在室溫下進行120分鐘振搖。隨后,殘留物通過離心除去以分離液體提取物(下面稱為液體提取物2-1)。然后液體提取物2-1使用蒸發(fā)器蒸餾至干。向其中加入5ml乙醇,并在室溫下進行IO分鐘振搖。隨后,殘留物通過離心除去以分離提取物(下面稱為"液體提取物2-2")。液體提取物2-2使用蒸發(fā)器蒸餾至干以獲得固體提取物。表5提取劑名稱提取劑組成25Et含25體積%乙醇和75體積%凈化水的乙醇溶液48<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>液體沖是取物l-l和1_2、液體提取物2-1和2-2及殘留物2進行薄層層析(TLC)分析(作為流動相,己烷:氯仿乙酸乙酯=1:1:1(體積比)用于雌馬酚檢測;且乙酸乙酉旨丙醇:氯仿甲醇:0.9。/oKC卜25:25:25:10:9(體積比)用于急苷檢測)以測量急苷含量和雌馬酚含量。測量從液體提取物l-2獲得的固體提取物的重量及其雌馬酚濃度。圖4至7和表6顯示了結果。圖4顯示液體提取物1-2和2-2中雌馬酚含量的TLC分析的結果;圖5顯示液體提取物1-2和2-2中皂苷含量的TLC分析的結果;圖6顯示液體提取物1-2和殘留物2中雌馬酚含量的TLC分析的結果;和圖7顯示液體提取物l-2和殘留物2中皂苷含量的TLC分析的結果。如圖中所示,可以發(fā)現,當含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物使用乙醇進行提取時,提取物包含大量的油,且雌馬酚回收率低。相反,當含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物使用乙醇水溶液進行提取時,油的含量降低,且雌馬酚回收率提高。特別是,很清楚,使用具有75體積%乙醇濃度的乙醇水溶液顯著提高雌馬酚回收率。另外,還發(fā)現使用具有75體積%的乙醇進行提取使脂肪成分的提取最小化。另外,基于在殘留物2中檢測到濃縮量的皂苷的事實,皂苷可以通過使用乙醇對殘留物(其通過從體提取物1-1除去溶劑獲得)進行提取除去而不降低雌馬酚量。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>EQL代表雌馬酚。"濃縮率"代表當假定含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物的EQL濃度為1時固體提取物的EQL濃縮率。實施例1-2通過制備方法I制備含雌馬酚的提取物在這一實施例中,在如參考實施例1-3中的相同條件下制備含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末,除了使用不同批的大豆胚軸粉末。30g含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末加入到150ml的70體積%乙醇水溶液(由乙醇和30ml水組成的100ml)或150ml的90體積%乙醇水溶液(由乙醇和10ml水組成的100ml);并在室溫下進行八小時攪拌。在通過過濾除去殘留物后,殘留物用具有與提取劑相同的組成的20ml乙醇水溶液洗滌。收集濾液和洗滌后的液體以獲得液體提取物。液體提取物減壓濃縮以獲得固體提取物。測量所獲得的固體提取物的重量和其中包含的雌馬酚的重量及大豆黃酮、二氬大豆黃酮、染料木黃酮、二氫染料木黃酮、黃豆素黃酮、二氫黃豆素黃酮的濃度,如表7和8中所示。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>EQL代表雌馬酚;DZN代表大豆黃酮;DHD代表二氫大豆黃酮;GNT代表染料木黃酮;DHG代表二氫染料木黃酮;GLY代表黃豆素黃酮(glystein);和DHG代表二氬黃豆素黃酮(dihydroglystein)。異黃酮含量(mg)表示含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料30g)中或所獲得的分離提取物(8000mg)中包含的各異黃酮總重;和異黃酮濃度(重量%)表示含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料)或所獲得的分離提取物中包含的各異黃酮的比例。"濃縮率"代表當假定含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物中的成分的濃度為1時固體提取物中各成分的濃縮率。表890體積%乙醇溶液的提取結果含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物收集的固體提取物重量提取量(g)30干重(mg)4100EQLEQL含量(mg)EQL濃度(重量%)EQL含量(mg)EQL濃度(重量%)EQL回收率(%)EQL濃縮率161.400.54158.133.8998.07.2DZNDZN含量(mg)DZN濃度(重量%)DZN含量(mg)DZN濃度(重量%)DZN回收率(%)DZN濃縮率(%)6.000.020.000.000.00.0DHDDHD含量(mg)DHD濃度(重量%)DHD含量(mg)DHD濃度(重量%)DHD回收率(%)DHD濃縮率(%)9.000.030.120.001.30.1GNTGNT含量(mg)GNT濃度(重量%)GNT含量(mg)GNT濃度(重量%)GNT回收率(%)GNT濃縮率(%)6.900.020.340.014.90.452DHGDHG含量(mg)DHG濃度/殺吝0/、主里DHG含量(mg)DHG濃度(重量%)DHG回jj+套^0/—人DHG濃縮率(°/。)32.70.116.890.172U1.4GLYGLY含量(mg)GLY濃度(重量%)GLY含量(mg)GLY濃度(重量%)GLY回收率(%)GLY濃縮率(%)62.700.2132.640.8052.13.8DHGDHG含量(mg)DHG濃度(重量%)DHG含量(mg)DHG濃度(重量%)DHG回收率(%)DHG濃縮率(%)0.90.000.000.000.000.00EQL代表雌馬酚;DZN代表大豆黃酮;DHD代表二氫大豆黃酮;GNT代表染料木黃酮;DHG代表二氫染料木黃酮;GLY代表黃豆素黃酮;和DHG代表二氫黃豆素黃酮.異黃酮含量(mg)表示含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料30g)中或所獲得的分離提取物(4100mg)中包含的各異黃酮總重;且異黃酮濃度(重量%)表示含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料)中或所獲得的分離提取物中包含的各異黃酮的比例。"濃縮率"代表當假定含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物中的成分的濃度為1時固體提取物中各成分的濃縮率。表中顯示,通過使用乙醇水溶液對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取,雌馬酚回收率提高且還收集黃豆素黃酮。同時,其它異黃酮的濃度在該提取物中也非常低。實施例1-3通過制備方法I制備含雌馬酚的提取物在這一實施例中,在如參考實施例1-3中的相同條件下制備含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末,除了使用不同批的大豆胚軸粉末。50g含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末與7ml凈化水混合,然后進一步與250ml正己烷混合;并在室溫下進行七小時攪拌。不溶性殘留物通過過濾分離,并在60。C進行七小時干燥以獲得脫脂的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末。5320g脫脂的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末到100ml的80體積%乙醇水溶液(100mi由乙醇和20ml水組成)或100ml的90體積°/0乙醇水溶液(IOOml由乙醇和10ml水組成),并在室溫下進行十四小時攪拌。在通過過濾除去殘留物后,使用具有與提取劑相同組成的10ml乙醇水溶液洗滌殘留物。分離濾液和洗滌后的液體以獲得液體提取物.液體提取物在60°C干燥六小時以獲得固體提取物。測量所獲得的固體提取物的重量和其中包含的雌馬酚的重量及大豆黃酮、二氫大豆黃酮、染料木黃酮、二氫染料木黃酮、黃豆素黃酮、二氫黃豆素黃酮的濃度,如表9和10中所示表980體積%乙醇溶液的提取結果<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table>EQL代表雌馬酚;DZN代表大豆黃酮;DHD代表二氫大豆黃酮;GNT代表染料木黃酮;DHG代表二氫染料木黃酮;GLY代表黃豆素黃酮;和DHG代表二氫黃豆素黃酮.異黃酮含量(mg)表示脫脂的含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料20g)中或收集的提取物(4000mg)中包含的各異黃酮的重量;和異黃酮濃度(重量%)表示脫脂的含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料)中或收集的提取物中包含的各異黃酮的比例。"濃縮率"代表當假定脫脂的含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物的成分的濃度為1時固體提取物中各成分的濃縮率。表1090體積%乙醇溶液的提取結果<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table>EQL代表雌馬酚;DZN代表大豆黃酮;DHD代表二氫大豆黃酮;GNT代表染料木黃酮;DHG代表二氫染料木黃酮;GLY代表黃豆素黃酮;和DHG代表二氫黃豆素黃酮.異黃酮含量(mg)表示脫脂的含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料20g)中或收集的提取物(2200mg)中包含的各異黃酮的總重;和異黃酮濃度(重量%)表示脫脂的含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物(材料)中或收集的提取物中包含的各異黃酮的比例。"濃縮率"代表當假定脫脂的含EQL的大豆胚軸發(fā)酵物中的成分的濃度為1時固體提取物中各成分的濃縮率。表中顯示,實施例1-2中獲得的高雌馬酚回收率甚至在預先使含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物脫脂時也能確保。實施例1-4通過制備方法II制備含雌馬酚的提取物在這一實施例中,含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物壽分末(雌馬酚濃度=6.2mg/g)在如參考實施例1-3中的相同條件下制備,除了使用不同批的大豆胚軸粉末。80g含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末懸浮在900ml水中。在懸浮液進行攪拌的同時將5ml乙酸加入,直到pH變成大約4.0。室溫下靜置24小時后,不溶性殘留物通過過濾收集,并干燥。因此獲得50.33g不溶性殘留物。然后,250ml乙醇水溶液(乙醇濃度=75體積%)加入到50.33g不溶性殘留物中,并在室溫下進行兩天的攪拌。在通過減壓過濾除去殘留物后,收集濾液。濾液用蒸發(fā)器蒸餾至干燥成固體以獲得7.53g含雌馬酚的粉末。所獲得的含雌馬酚的粉末的雌馬酚濃度是60.0mg/g,這是用作起十倍。雌馬酚回收率是91%。實施例2:J難馬酚純化實施例2-1:雌馬酚純化方法1含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末(雌馬酚濃度=6.2mg/g)在如參考實施例1-3中的相同條件下制備,除了使用不同批的大豆胚軸粉末。10g含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末加入50ml的50體積%乙醇水溶液,并在室溫下進行兩小時的攪拌。隨后,殘留物(下面稱為"殘留物l")通過離心(2500rpm,25分鐘)除去以分離液體揭^又物(下面稱為"液體提取物A-l,,)。接著,50ml的50體積%乙醇水溶液加入殘留物1中,并在室溫下進行一小時的攪拌。隨后,殘留物通過離心(2500rpm,25分鐘除去以分離液體提取物(下面稱為"液體提取物A-2")?;旌咸崛∥顰-l和A-2,然后使用蒸發(fā)器蒸餾至干以獲得殘留固體(下面稱為"殘留固體1")。然后,10ml乙醇加入殘留固體1中,并在超聲處理條件下在室溫下進行30分鐘的攪拌。隨后,殘留物通過離心(1000rpm,10分鐘)除去以分離液體提取物(下面稱為"液體提取物B")。液體提取物B使用蒸發(fā)器蒸餾至干以獲得大約1g殘留固體(下面稱為"殘留固體2")。接著,10ml己烷加入該ig殘留固體2中,并在室溫下進行30分鐘的攪拌。然后,液體提取物通過離心(1000rpm,IO分鐘)除去以收集0.3g不溶性殘留物。向獲得的0.3mg不溶性殘留物中加入2ml己烷和二曱醚的混合溶液(己烷:二曱醚=2:3(體積比)),并在室溫下進行30分鐘的攪拌。然后,殘留物通過離心(1000rpm,10分鐘)除去以收集液體提取物。所獲得的液體提取物在以下條件下進行硅膠層析。柱2cm內徑的柱,填充有硅膠.流動相順序提供200ml己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚==40:60(體積比));200ml己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=30:70(體積比));200ml己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=25:75(體積比));200ml己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=20:80(體積比));和200ml己烷。收集來自柱的每50ml洗脫液。由己烷和乙醚的混合溶液(己烷:乙醚=40:60(體積比))和己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=25:75(體積比))洗脫的流份包含40mg雌馬酚(回收率=80%),且雌馬酚的純度按干固體計為99.9%。圖8顯示使用硅膠層析洗脫的流份的TLC分析。如圖中所示,由己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=30:70(體積比))和己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=25:75(體積比))洗脫的流份包含高純度的雌馬酚。表11詳細描述了圖8的道提供的樣品。表11圖8中的道樣品細節(jié)道1雌馬酚標準品道2己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=40:60(容量比))的洗脫量在0至50ml范圍內時獲得的洗脫流份道3在己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=40:60(容量比))的洗脫量在50至100ml范圍內時獲得的洗脫流份道4在己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=30:70(容量比))的洗脫量在0至50ml范圍內時獲得的洗脫流份道5在己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=30:70(容量比))的洗脫量在50至100ml范圍內時獲得的洗脫流份道6在己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=25:75(容量比))的洗脫量在0至50ml范圍內時獲得的洗脫流份道7在己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=25:75(容量比))的洗脫量在50至100ml范圍內時獲得的洗脫流份道8在己烷和乙醚的混合溶液(己烷乙醚=20:80(容量比))的洗脫量在0至50ml范圍內時獲得的洗脫流份實施例2-2:雌馬酚純化方法2含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末(雌馬酚濃度=6.2mg/g)在如參考實施例1-3中的相同條件下制備,除了使用不同批的大豆胚軸粉末。59100g含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物粉末加入到500ml的95體積%乙酸乙酯水溶液中,并在室溫下進行四小時的攪拌。隨后,不溶性殘留物通過過濾除去以收集l是耳又物。分離的不溶性殘留物用80ml乙酸乙酯洗滌,且洗滌后的液體與濾液混合,混合物經減壓濃縮以收集12g油狀物質。該油狀物質進行硅膠層析。柱2cm內徑的柱,使用己烷填充70g硅膠。流動相供應500ml己烷,隨后供應乙酸乙酯和己烷(乙酸乙酉旨:己烷=l:5(體積比))的混合溶液。溶劑從如此獲得的含雌馬酚的洗脫溶劑中蒸餾掉,因而獲得630mg黃色結晶固體。結晶固體加入2ml乙酸乙酯中并通過在80。C加熱進行溶解。向其中加入8ml己烷并進行30分鐘攪拌,同時用冰冷卻該混合物以沉淀雌馬酚晶體。所獲得的雌馬酚晶體通過過濾收集,并用己烷洗滌。然后晶體進行干燥以獲得530mg含雌馬酚的固體(淺黃色晶體)。另外,530mg含雌馬酚的固體加入到4ml乙醇水溶液(乙醇濃度=62.5體積%)中,并加熱到80。C以溶解在該溶液中。使溶液在10。C靜置12小時以重結晶雌馬酚,然后過濾和干燥。結果,獲得390mg白色針狀雌馬酚晶體。在25。C乙醇中所獲得的雌馬酚晶體的旋轉角[a]D"是-21.6。。熔點是188-190。C。確認所獲得的雌馬酚接近100%純。實施例3:包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食品材料,和包含該食品材料的食品實施例3-1制備包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物和可可糖膏的食品材料在如參考實施例1-3中的相同條件下制備的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物與通過加熱溶解的可可糖膏以l:3(重量比)的比率混合?;旌衔镞M行冷卻以獲得食品材料,其中含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物分散于可可糖膏中。如此制備的食品材料的味道由10名小組成員進行評價,由所有小組成員的結果得出結論,由含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物產生的苦味受到抑制,且該食品材料具有令人滿意的風味。實施例3-2包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物的提取物的食品材料通過蒸發(fā)實施例1-1中用75Et制備的液體提取物2-1而獲得的固體提取物(下面稱為"75Et提取物")與通過加熱溶解的可可糖膏以l:24(重量比)的比率混合?;旌衔镞M行冷卻以獲得食品材料,其中75Et提取物分散于可可糖膏中。如此制備的食品材料的味道由IO名小組成員進行評價,由所有小組成員的結果得出結論,由75Et提取物產生的苦味受到抑制,且該食品材料具有令人滿意的風味。實施例3-3烘焙的點心混合表12中所示的成分,且混合物成形為矩形(大約1.5cmxl.5cmxl0cm)并在180。C的烤箱中烘烤以產生烘焙的點心。如此制備的烘焙的點心的味道由IO名小組成員進行評價,由所有小組成員的結果得出結論,由含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物產生的苦味受到抑制,且烘焙的點心具有令人滿意的巧克力風味和原有的令人滿意的風味。<table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>如實施例3-3中的相同條件下制備烘焙的點心,除了包含實施例3-2中獲得的相同量的切片形的食品材料替代實施例3-1獲得的切片形的食品材料。如此制備的烘焙的點心的口木道由IO名小組成員進行評價,由所有小組成員的結果得出結論,由75Et提取物產生的苦味受到抑制,且該烘焙的點心具有令人滿意的巧克力風味和原始的令人滿意的風味。實施例4包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食品實施例4-A飲料下面,給出按照本發(fā)明的飲料的特定制備實施例。實施例4-A-l汽水汽水通過制備具有以下組成的薄荷風味的糖漿,并以3:1的體積比混合所得到的薄荷風味的糖漿和碳酸水(carbonatedwater)而獲得。薄荷風味的糖漿的組成含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.27(kg)糖0.60檸檬酸(晶體)0.01食鹽0.012氯化鉀0.005乳酸4丐0.008薄荷提取物0.03薄荷香料0.20Zt_余量總計100.00L實施例4-A-2汽水如在實施例4-A-l中的相同條件下制備汽水,除了薄荷風味的糖漿通過加入實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0,034kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物而制備。實施例4-A-3不含桔子汁的桔子風味的碳酸飲料不含桔子汁的桔子風味的碳酸飲料通過制備具有以下組成的桔子風味的糖漿,并以9:11的體積比混合所得到的桔子風味的糖漿和碳酸水而獲得。桔子風味的糖漿的組成含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)020(kg)糖10.00檸檬酸(晶體)0.03DL-蘋果酸0.07食用色素0.05香料0.10ZJS_余量總計45.00L實施例4-A-4不含桔子汁的桔子風味的碳酸飲料在如實施例4-A-3中的相同條件下制備不含桔子汁的桔子風味的碳酸飲料,除了桔子風味的糖漿通過加入實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.025kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物而制備。實施例4-A-5低熱量可樂無糖可樂通過制備具有以下組成的可樂;瞎?jié){,并以8:12的體積比混合所得到的可樂糖漿和碳酸水獲得??蓸诽菨{的組成含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例I-2)020(kg)三氯蔗糖0.02磷酸0.05檸檬酸(晶體)0.07咖啡因0.10焦糖色素0.20香料(可樂風味)0.10ZlS_余量總計40.00L實施例4-A-6低熱量可樂在如實施例4-A-5中的相同條件下制備低熱量可樂,除了可樂糖漿通過加入實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.03kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物而制備。實施例4-A-7碳酸蘋果飲料13:7的體積比混合所得到的蘋果風味的糖漿和碳酸水獲得。蘋果風味的糖漿的組成含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.20(kg)5倍濃縮的蘋果汁11.00果糖/葡萄糖糖漿5.00檸檬酸(晶體)0.10食用色素0,05香料0.10ZlS_余量總計65.00L實施例4-A-8碳酸蘋果飲料在如實施例4-A-7中的相同條件下制備碳酸蘋果飲料,除了蘋果風味的糖漿通過加入實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.03kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物而制備。實施例4-A-9碳酸葡萄飲料碳酸葡萄飲料通過制備具有以下組成的葡萄風味的糖漿,并以9:11的體積比混合所得到的葡萄風味的糖漿和碳酸水獲得。葡萄風味的糖漿的組成含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.20(kg)5倍濃縮的澄清葡萄汁4.40檸檬酸(晶體)0.25食用色素0.05香料0.20ZJi_余量總計45.00L實施例4-A-10碳酸葡萄飲料在如實施例4-A-9中的相同條件下制備碳酸葡萄飲料,除了葡萄風味的糖漿通過加入實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.03kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物而制備。實施例4-A-11含蘋果汁的飲料制備具有以下組成的含蘋果汁的飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)5倍濃縮的蘋果汁22.00香料0.05z!i_余量總計100.00L實施例4-A-12含蘋果汁的飲料在如實施例4-A-11中的相同條件下制備含蘋果汁的飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-13含桔子汁的飲料制備具有以下組成的含桔子汁的飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)濃縮的巴倫西亞桔汁(Brix:55度)4.40糖5.00檸檬酸(晶體)0.16原始結冷膠0.025維生素C0.03果膠0.0025桔子香精0.25水余量總計100.00L實施例4-A-14含桔子汁的飲料在如實施例4-A-13中的相同條件下制備含桔子汁的飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-15含果汁的低熱量飲料制備具有以下組成的含果汁的低熱量飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(kg)5倍濃縮的柑橘汁(citmsjuice)4.40三氯蔗糖0.009檸檬酸(晶體)0.18L-抗壞血酸0.03結冷膠0.024香料0.10水余量總計100.00L實施例4-A-16含果汁的低熱量飲料在如實施例4-A-15中的相同條件下制備含果汁的低熱量飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et荻得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體才是取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-17無糖近似水(SugarlessNearWater)(類似于水的軟々大料)制備具有以下組成的無糖近似水(類似于水的軟飲料水)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)三氯蔗糖0細聚葡萄糖2.205倍濃縮的柚子汁0.44檸檬酸(晶體)0.53乳酸4丐0.06氯化鉀0.01L-抗壞血酸0.03二苯甲酰鹽酸硫胺素0.0002鹽酸吡口多醇0.00015煙酰胺0.0015香料0.10Zt_余量總計100.00L實施例4-A-18無糖近似水(類似于水的軟飲料)在如實施例4-A-17中的相同條件下制備無糖近似水(類似于水的軟飲料),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-19運動々大料制備具有以下組成的運動飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)澄清檸檬汁0.50三氯蔗糖0.02乳礦物質(Lacticminerals)1.00維生素混合物0.25L-抗壞血酸鈉0.05檸檬酸0.125Zt_余量總計100.00L實施例4-A-20運動々欠料在如實施例4-A-19中的相同條件下制備運動飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-21粉末綠茶-奶飲料制備具有以下組成的粉末綠茶-奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)牛奶10.00脫脂奶3.50粉末綠茶(RS-20,由ITOEN,LTD.生產)0.50糖7.00乳化劑0.70食用色素0.03香料0.20碳酸氫鈉用于調節(jié)pH至6.8Zli_余量總計100.00L實施例4-A-22粉末綠茶-奶々欠料在如實施例4-A-21中的相同條件下制備粉末綠茶-奶飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體拔:取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-23無糖奶酪々欠料制備具有以下組成的無糖奶酪飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)發(fā)酵奶(SNF20%)40.00水溶性大豆多糖0.20果膠0.20香料0.20乳酸用于調節(jié)pH至4.2ZlS_余量總計100.00L實施例4-A-24無糖奶酪飲料在如實施例4-A-23中的相同條件下制備無糖奶酪飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-25巴氏滅菌消毒的乳酸菌飲料制備具有以下組成的巴氏滅菌消毒的乳酸菌飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)發(fā)酵奶(SNF20%)15.00水溶性大豆多糖0.40糖8.00香料0.10乳酸用于調節(jié)pH至3.8Zli_余量總計100.00L實施例4-A-26巴氏滅菌消毒的乳酸菌飲料在如實施例4-A-25中的相同條件下制備巴氏滅菌消毒的乳酸菌飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-27低熱量酸奶4t料制備具有以下組成的低熱量酸奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)脫脂奶3.50水溶性大豆多糖0.40糖5.00三氯蔗糖0.0006果糖/葡萄糖糖漿(75%)5.00檸檬酸(晶體)0.45香料0.10乳酸用于調節(jié)pH至3.8Zli_余量總計100.00L實施例4-A-28低熱量酸奶々大料在如實施例4-A-27中的相同條件下制備低熱量酸奶飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0,05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-29草莓風味的奶飲料制備具有以下組成的草莓風味的奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)脫脂奶2.80全脂奶粉3.00糖12.00乳化劑0.06食用色素0.05香料(草莓香精)0.10Zli_余量總計100.00L實施例4-A-30草莓風味的奶飲料在如實施例4-A-29中的相同條件下制備草莓風味的奶飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-31無脂奶制備具有以下組成的無脂奶。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(kg)脫脂奶12.00i^丐(Eggcalcium)1.00乳化劑0.06香料0.10水余量總計100.00L實施例4-A-32無脂奶在如實施例4-A-31中的相同條件下制備無脂奶,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-33加香草飲料(CreamSoda)制備具有以下組成的加香草飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.20(kg)脫脂甜煉奶3.00檸檬酸(晶體)0.04糖15.0074食用色素0.60香料0.10Zli_余量總計40.00L實施例4-A-34加香草飲料在如實施例4-A-33中的相同條件下制備加香草飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.025kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-35粉末綠茶-奶飲料制備具有以下組成的粉末綠茶-奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)脫脂奶3.50牛奶10.00乳化劑0.70糖6.00£JS_余量總計100.00L實施例4-A-36粉末綠茶-奶々欠料在如實施例4-A-29中的相同條件下制備粉末綠茶-奶飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體一是取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-37紅茶制備具有以下組成的紅茶。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例l-2)0.40(kg)大吉嶺茶提取物(40倍)20.00糖5.00香料0.05^_余量總計100.00L實施例4-A-38紅茶在如實施例4-A-37中的相同條件下制備紅茶,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-39含蘋果汁的飲料制備具有以下組成的含蘋果汁的飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)5倍濃縮的澄清蘋果汁2.20寡糖1.00還原性麥芽糖糖漿1.50維生素C0.05檸檬酸0.10水溶性膳食纖維8.00ii_余量總計100.00L實施例4-A-40含蘋果汁的飲料在如實施例4-A-39中的相同條件下制備含蘋果汁的飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-41軟飲料制備具有以下組成的軟飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)果糖3.70果糖/葡萄糖糖漿8.00糖0.30DL-蘋果酸0.07檸檬酸鈉0.03乳化劑0.052香料0.22^_余量總計100.00L實施例4-A-42軟飲料在如實施例4-A-41中的相同條件下制備軟飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-43含桔子汁的飲料制備具有以下組成的含桔子汁的飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)果糖/葡萄糖糖漿2.50甜菜寡糖0.026糖4.00濃縮的桔子汁4.40檸檬酸0.026一寧才蒙酸鈉0.003L-抗壞血酸0.01香料0.10Zt_余量總計100.00L實施例4-A-44含桔子汁的飲料在如實施例4-A-43中的相同條件下制備含桔子汁的飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-45含蘋果汁的飲料制備具有以下組成的含蘋果汁的飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)濃縮的蘋果汁4.40糖8.00檸檬酸0.15香料0.12Zli_余量總計100.00L實施例4-A-46含蘋果汁的飲料在如實施例4-A-.45中的相同條件下制備含蘋果汁的飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-47-l蔬菜汁制備具有以下組成的蔬菜汁。78含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)蔬菜汁20.00Zli_余量總計100.00L實施例4-A-47-2蔬菜汁在如實施例4-A-47-l中的相同條件下制備蔬菜汁,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-48-l運動4t料制備具有以下組成的運動飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)乳礦物質(lacticminerals)1.00維生素混合物0.25檸檬酸0.125抗壞血酸鈉0.05檸檬汁0.50糖12.00Zt_余量總計100.00L實施例4-A-48-2運動飲料在如實施例4-A-48-l中的相同條件下運動飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體^是取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-49烏龍茶制備具有以下組成的烏龍茶。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)烏龍茶提取物3.00抗壞血酸鈉0.01香料0.20Zt_余量總計100.00L實施例4-A-50烏龍茶在如實施例4-A-49中的相同條件下制備烏龍茶,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-51加檸檬茶制備具有以下組成的加檸檬茶。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)紅茶提取物6.00還原性麥芽糖糖漿粉末3.00糖3.00檸檬汁0.50L-抗壞血酸0.02香料0.10水余量總計100.00L實施例4-A-52加檸檬茶在如實施例4-A-51中的相同條件下制備加檸檬茶,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-53加奶茶制備具有以下組成的加奶茶。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)牛奶7.00全脂奶粉0.25糖4.00茶提取物35.00乳化劑0.05香料0.10Zli_余量總計100.00L實施例4-A-54加奶茶在如實施例4-A-53中的相同條件下制備加奶茶,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至千而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-55咖啡々欠料制備具有以下組成的咖啡飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(kg)咖啡^是取物30.00牛奶25.00乳化劑0.10成而6條妯n19''^^v工vgWVvy丄"甜菊(Stevia)0.01糖3.00L-鼠李糖0.01香料0.05Zli_余量總計100.00L實施例4-A-56咖啡飲料在如實施例4-A-55中的相同條件下制備咖啡飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-57可可奶々大并牛制備具有以下組成的可可奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(kg)牛奶10.00脫脂奶3.50果糖5.50糖0.40可可粉1.00乳化劑0.45香料0.08iS_余量總計100.00L實施例4-A-58可可奶々大沖+82在如實施例4-A-57中的相同條件下制備可可奶飲料,除了使用在實施例1-1通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-59粉末綠茶-奶飲料制備具有以下組成的粉末綠茶-奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(kg)<table>tableseeoriginaldocumentpage83</column></row><table>實施例4-A-60粉末綠茶-奶飲料在如實施例4-A-59中的相同條件下制備粉末綠茶-奶飲料,exceptforusing,insteadofthe含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物,除了4吏用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-61酸奶飲料制備具有以下組成的酸奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)脫脂奶1.50果糖2.50糖0.50濃縮的草莓汁0.22檸檬酸鈉0.32乳化劑0.40香料0.12Zt_余量總計100.00L實施例4-A-62酸奶々欠料在如實施例4-A-61中的相同條件下制備酸奶々大豐j",除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-63含維生素的飲料制備具有以下組成的含維生素的飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)糖24.00檸檬酸0.20L-抗壞血酸0.30維生素混合物0.06香料0.10碳酸水_余量總計100.00L實施例4-A-64含維生素的飲料在如實施例4-A-63中的相同條件下制備含維生素的飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-65紅豆湯制備具有以下組成的紅豆湯。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)紅豆醬10.00糖醇6.50糖24.00食鹽0.10乳化劑0.60香料0.10zli_余量總計100.00L實施例4-A-66紅豆湯在如實施例4-A-65中的相同條件下制備紅豆湯,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-67綠茶制備具有以下組成的綠茶。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(kg)綠茶提取物3.00抗壞血酸鈉0.01香料0.20zt_余量總計100.00L實施例4-A-68綠茶在如實施例4-A-67中的相同條件下制備綠茶,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-69粉末桔子汁飲料制備具有以下組成的粉末桔子汁飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)果糖/葡萄糖糖漿2.50甜菜寡糖0.026糖4.00粉狀桔子汁2.00檸檬酸0.026種檬酸鈉0.003L-抗壞血酸0.01香料0.10zis_余量總計100.00L實施例4-A-70粉末桔子汁飲料在如實施例4-A-69中的相同條件下制備粉末桔子汁飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-71氨基酸飲料86制備具有以下組成的氨基酸飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)糖15.00果糖15.00檸檬酸4.00檸檬酸鈉1.00L-纈氨酸2.00L-亮氨酸4.00L-異亮氨酸2.00L-精氨酸2.00香料0.10水余量總計100.00L實施例4-A-72氨基酸飲料在如實施例4-A-71中的相同條件下制備氨基酸飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-73豆奶々欠料制備具有以下組成的豆奶飲料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)豆奶_100.00實施例4-A-74豆奶飲料在如實施例4-A-73中的相同條件下制備豆奶飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-A-75能量飲料制備具有以下組成的能量飲料。z無、站,馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)?;撬?.00煙酰胺0.02維生素Bl0.005維生素B20.005維生素B60.005咖啡因0.05糖15,00果糖15.00檸檬酸0.10香料0.10水余量總計100.00L實施例4-A-76氨基酸飲料在如實施例4-A-75中的相同條件下制備氨基酸飲料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-B膳食補充劑下面,給出按照本發(fā)明的膳食補充劑的特定制備實施例。88實施例4-B-l軟凝膠按照已知方法使用含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)、明膠、甘油、檸檬酸、大豆油、蜂蠟、卵磷脂、P-胡蘿卜素和水制備軟凝膠。實施例4-B-2軟凝膠在如實施例4-B-l中的相同條件下制備軟凝膠,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-C奶油食品下面,給出按照本發(fā)明的奶油食品的特定制備實施例。實施例4-C-l生奶油制備具有以下組成的生奶油。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(g)椰子油(mp:35°C)27.00甘油脂肪酸酯0.10脫脂奶3.30三氯蔗糖0.012還原性淀粉糖(粉糖)25.00卵磷脂0.15乳化劑0.70偏磷酸鈉0.10水佘量總計100.00g實施例4-C-2生奶油89在如實施例4-C-l中的相同條件下制備生奶油,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-C-3人造稀奶油制備具有以下組成的人造稀奶油。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(g)純化椰子油36.00酪蛋白酸鈉4.50脫脂奶5.00卵磷脂0,05檸檬酸三鈉0.20蔗糖脂肪酸酯0.40牛奶香精0.10zli_余量總計100.00g實施例4-C-4人造^希奶油在如實施例4-C-3中的相同條件下制備人造稀奶油,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-C-5乳蛋糕制備具有以下組成的乳蛋糕。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)人造黃油20.00淀粉糖漿5.00全蛋3.00玉米淀粉4.00改性淀粉6.00乳蛋白質(Lacticprotein)2.00糖30.00z!i_余量總計100.00kg實施例4-C-6乳蛋糕在如實施例4-C-5中的相同條件下制備乳蛋糕,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-C-7乳蛋糕制備具有以下組成的乳蛋糕。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)角叉菜膠0.40明膠0.50玉米淀粉4.00淀粉糖漿干粉3.00砂糖10.00葡萄糖7.00脫脂奶4.00全蛋3.50異構化糖(Isomerizedsugar)7.00脫脂甜煉奶3.00新鮮黃油(Unsaltedbutter)6.50水50.00實施例4-C-8乳蛋糕在如實施例4-C-7中的相同條件下制備乳蛋糕,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et荻得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-D甜點下面,給出按照本發(fā)明的甜點的特定制備實施例。實施例4-D-l硬質奶酪(HardYogurt)使以下組合物的成分均質化,并向其中加入起子奶酪(starteryogurt),乂人而制備石更質奶酪。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)脫脂奶9.00新鮮黃油5.00糖6.50膠凝劑0.60ZlS_余量總計100.00kg實施例4-D-2-更質奶酪在如實施例4-D-l中的相同條件下制備硬質奶酪,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-D-3軟質奶酪(SoftYogurt)使以下組合物的成分均質化,并向其中加入起子奶酪,從而制備軟質奶酪。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)脫脂奶9.00黃油5.25糖6.50刺槐豆膠0.30ZJS_余量總計100.00kg實施例4-D-44欠質奶酪在如實施例4-D-3中的相同條件下制備軟質奶酪,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-D-5白桃果凍(whitepeachjelly)按照果凍的一般制備方法使用以下組成的成分制備白桃果凍。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)糖K-角叉菜膠白桃醬^_0.40(重量份)14.400.6020.00總計100.00重量份實施例4-D-6白桃果凍在如實施例4-D-5中的相同條件下制備白桃果凍,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-D-7柚子果凍按照果凍的一般制備方法使用以下組成的成分制備柚子果凍。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(重量份)糖18.00結冷膠0.25柚子汁20.00乳酸釣0.10檸檬酸0.20香料0.10_余量總計100.00重量份實施例4-D-8柚子果凍在如實施例4-D-7中的相同條件下制備柚子果凍,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-D-9咖啡果凍按照果凍的制備方法使用以下組成的成分制備咖啡果凍。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(重量份)還原性淀粉糖漿10.00木糖醇5.00k-角叉菜股0.50瓊脂0.20刺槐豆膠0.20糖3.00香料0.1594zli_余量總計100.00重量份實施例4-D-10咖啡果凍在如實施例4-D-9中的相同條件下制備咖啡果凍,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-D-11草莓奶果凍按照果凍的一般制備方法使用以下組成的成分制備草莓奶果凍。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(重量份)純化的椰子油30.00乳化劑0.25脫脂奶3.30糖3.50還原性淀粉糖漿20.00乳糖醇8.00穩(wěn)定劑0.70木糖醇5.00明膠0.90草莓醬5.00濃縮的草莓汁5.00檸檬酸0.10水余量總計100.00重量份實施例4-D-12草莓奶果凍在如實施例4-D-11中的相同條件下制備草莓奶果凍,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E小吃下面,給出按照本發(fā)明的小吃的特定制備實施例。實施例4-E-l硬糖按照硬糖的一般制備方法使用以下組成的成分制備硬糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(g)糖70.00淀粉糖漿40.00^_20.00實施例4-E-2硬糖在如實施例4-E-l中的相同條件下制備硬糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-3姜味糖按照糖果的一般制備方法使用以下組成的成分制備姜味糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)4.00(g)生姜漿1.50還原性乳糖60.00還原性麥芽糖糖漿56.00三氯蔗糖0.03香料0.075Zli_30.00實施例4-E-4姜味糖在如實施例4-E-3中的相同條件下制備姜味糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-5潤喉草藥糖(ThroatSoothingHerbCandy)按照糖果的一般制備方法使用以下組成的成分制備潤喉草藥糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)4.00(g)混合草藥提取物0.60糖40.00還原性麥芽糖糖漿56.00薄荷香料0.20焦糖色素0.20^_20.00實施例4-E-6潤喉草藥糖在如實施例4-E-5中的相同條件下制備潤喉草藥糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-7檸檬橡皮糖按照橡皮糖的一般制備方法使用以下組成的成分制備檸檬橡皮糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)4.00(g)酸性明膠(250blooms)7.00還原性淀粉糖漿100.004倍濃縮的檸檬汁1.25檸檬酸(晶體)1.00三氯蔗糖0.02食用色素0.02香料0.02^_12.00實施例4-E-8檸檬橡皮糖在如實施例4-E-7中的相同條件下制備檸檬橡皮糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-9飴糖(CaramelCandy)按照飴糖的一般制備方法使用以下組成的成分制備飴糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)4.00(g)甜煉乳45.00淀粉糖漿45.00植物脂肪和油3.50卵磷脂0.20軟糖料5.00香料f焦糖味)_0.10實施例4-E-10飴糖在如實施例4-E-9中的相同條件下制備飴糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。98實施例4-E-11椒鹽脆餅混合以下成分以制備生面團,其在烘箱中烘烤從而制備椒鹽脆餅。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)楊(g)強力面粉100.00發(fā)酵粉1.35新鮮黃油25.00食鹽2.00糖17.50大豆膳食纖維0.80蔗糖脂肪酸酯0.30香料0.20水40.00實施例4-E-12椒鹽脆餅在如實施例4-E-11中的相同條件下制備椒鹽脆餅,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-13薄荷片(MintTablet)按照片劑的一般制備方法使用以下組成的成分制備薄荷片。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(g)山梨糖醇90.00三氯蔗糖0.15薄荷香料5.00蔗糖脂肪酸酯_1.0099實施例4-E-14薄荷片在如實施例4-E-13中的相同條件下制備薄荷片,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-15乳酪片按照片劑的一般制備方法使用以下組成的成分制備乳酪片。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)4.00(g)海藻糖(粒狀)88.60三氯蔗糖0.08粉狀發(fā)酵奶5.00無水檸檬酸1.00乳酪香精(Yogurtflavor)0.20蔗糖脂肪酸酯_1.50實施例4-E-16乳酪片在如實施例4-E-15中的相同條件下制備乳酪片,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-17檸檬片按照片劑的一般制備方法使用以下組成的成分制備檸檬片。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)4.00(g)糖(粒狀)89.50粉狀檸檬汁2.00L-抗壞血酸3.00無水檸檬酸1.00蔗糖脂肪酸酯_1.00實施例4-E-18檸檬片在如實施例4-E-17中的相同條件下制備檸檬片,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-19薄荷口香糖按照口香糖的一4i制備方法使用以下組成的成分制備薄荷口香糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)4.00(g)樹膠基質25.00乳糖醇63.20糖醇5.00三氯蔗糖0.13甘油0.50薄荷油1.50薄荷香精0.50食用色素_0.20實施例4-E-20薄荷口香糖在如實施例4-E-19中的相同條件下制備薄荷口香糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-21蘋果泡泡糖按照口香糖的一般制備方法使用以下組成的成分制備蘋果泡泡糖。101含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)4.00(g)樹膠基質30.00Palatinit70.00三氯蔗糖0.084甘油0.50檸檬酸(晶體)1.00蘋果香精_0.80實施例4-E-22蘋果泡泡糖在如實施例4-E-21中的相同條件下制備蘋果泡泡糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-23草莓口香糖按照口香糖的一般制備方法使用以下組成的成分制備草莓口香糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(g)樹膠基質23.00粉糖62.00淀粉糖漿5.00三氯蔑糖0.001檸檬酸(晶體)1.20紅球甘藍顏料0.20草莓香精_0.20實施例4-E-24草莓口香糖在如實施例4-E-23中的相同條件下制備草莓口香糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-25巧克力按照巧克力的一般制備方法使用以下組成的成分制備巧克力。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(g)可可糖膏40.00可可油脂25.00還原性粉糖50.00三氯蔗糖0.03卵磷脂0.40香草醛_0.05實施例4-E-26巧克力在如實施例4-E-25中的相同條件下制備巧克力,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-27草莓風味的巧克力按照巧克力的一般制備方法使用以下組成的成分制備草莓風味的巧克力。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(g)可可油脂25.00硬脂(Hardbutter)7.00全脂奶粉27.00糖41.00草莓香精0.20甜菜紅0.50三氯蔗糖0.001卵磷脂0.30香草醛_0.02實施例4-E-28草莓風味的巧克力在如實施例4-E-27中的相同條件下制備草莓風味的巧克力,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5g固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-29小甜餅混合以下成分以制備生面團,其在烘箱中烘烤以制備小甜餅。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)軟質面粉48.50發(fā)酵粉0.30新鮮人造黃油24.00食鹽0.20糖12.00蛋黃4.70海藻糖22.00香料0.20水40.00實施例4-E-30小甜餅在如實施例4-E-29中的相同條件下制備小甜餅,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-31饅頭(Manju)皮(填有蒸的赤小豆餡的小圓面包)按照饅頭皮的一般制備方法使用以下組成的成分制備饅頭皮(填有蒸的赤小豆餡的小圓面包)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例I-2)4.00(重量份)軟質面粉500.00發(fā)酵粉2.50黃原膠1.00食鹽6.00糖30.00海藻糖30.00干酵母7.50豬油15.00水200.00實施例4-E-32饅頭皮(填有蒸的赤小豆餡的小圓面包)在如實施例4-E-31中的相同條件下制備饅頭皮(填有蒸的赤小豆餡的小圓面包),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-33蘋果餅餡使用以下成分制備蘋果餅餡。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0.40(重量份)蘋果200.00麥芽糖150.00三氯蔗糖0.10105檸檬汁10.00核才兆60.00葡萄干60.00蘋果香精_0.20實施例4-E-34蘋果餅餡在如實施例4-E-33中的相同條件下制備蘋果餅餡,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-35磅餅混合以下成分以制備生面團,其在烘箱中烘烤以制備磅餅。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)0,40(重量份)黃油100.00還原性麥芽糖糖漿100.00三氯蔗糖0.03甜菊0.03全蛋100.00香料0.22軟質面粉120.00發(fā)酵粉_1.50實施例4-E-36磅餅在如實施例4-E-35中的相同條件下制備磅餅,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-37蕨淀粉餃子使用以下成分制備蕨淀粉餃子。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)040(重量份)米淀粉20.00甜土豆淀粉40.00糖6.00Zli_余量總計100.00重量份實施例4-E-38蕨淀粉餃子在如實施例4-E-37中的相同條件下制備蕨淀粉餃子,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-39豆類點心使用以下成分制備豆類點心。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)6.00(重量份)Kanbaiko(磨碎的烤米餅)7.00糖53.00Kinako(烤大豆粉)4.00發(fā)酵粉q.s.香料q.s.甜味劑__總計100.00重量份實施例4-E-40豆類點心在如實施例4-E-39中的相同條件下制備豆類點心,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.75重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-41豆類點心使用以下成分制備豆類點心。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1—2)12.00(重量份)米粉13.00糖45.00Kinako(烤大豆粉)15.00粉末綠茶15.00發(fā)酵粉q.s.香料q.s,甜味劑__總計100.00重量份實施例4-E-42豆類點心在如實施例4-E-41中的相同條件下制備豆類點心,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的1.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-43豆類點心使用以下成分制備豆類點心。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-1)18.00(重量份)Kanbaiko(磨碎的烤米餅)15.00糖52.00Kinako(烤大豆粉)15.00108粉末綠茶12.00發(fā)酵粉q.s.香料q.s.甜味齊'j__總計100.00重量份實施例4-E-44豆類點心在如實施例4-E-43中的相同條件下制備豆類點心,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的2.25重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-45豆類點心使用以下成分制備豆類點心。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)6.00(重量份)淀粉20.00糖32.00Kinako(烤大豆粉)10.00黑芝麻20.00發(fā)酵粉q.s.香料q.s,甜味劑__總計100.00重量份實施例4-E-46豆類點心在如實施例4-E-45中的相同條件下制備豆類點心,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.75重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-47Nama-fu點心(新鮮面筋餅)使用以下成分制備nama-fu點心(新鮮面筋餅)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)IO.OO(重量份)面筋20.00米粉15.00Kinako(烤大豆粉)q.s.乳化劑q.s.蜂蜜q.s.山梨糖醇20.00巧克力_30.00實施例4-E-48Nama-fu點心(新鮮面筋餅)在如實施例4-E-47中的相同條件下制備nama-fu點心(新鮮面筋餅),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的1.25重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-49薄餅(濃型)按照薄餅的一般制備方法使用以下成分制備薄餅(濃型)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)小麥面4分糖脂肪和油全蛋脫脂奶碳酸氫鈉牛奶0.40(重量份)100.002.003.003.002.000.3050.00110z3^_ioo.oo實施例4-E-50薄餅(濃型)在如實施例4-E-49中的相同條件下制備薄餅(濃型),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-51薄餅(普通)按照薄餅的一般制備方法使用以下成分制備薄餅(普通)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例l-3)0.40(重量份)小麥面粉100.00脂肪和油2.50全蛋0.30碳酸銨0.40碳酸氫鈉0.30卵磷脂0.05^_150.00實施例4-E-52薄餅(普通)在如實施例4-E-51中的相同條件下制備薄餅(普通),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物材。實施例4-E-53奶酪々并千按照一般制備方法使用以下成分制備奶酪餅干。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)小麥面粉100.00脂肪和油9.00麥芽提取物1.30碳酸氬鈉0.60香辛料0.10干酪粉13.00糖80.00食鹽0.90碳酸銨0.60卯磷脂0.05水33.00實施例4-E-54奶酪餅干在如實施例4-E-53中的相同條件下制備奶酪餅干,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-55Yokan(赤小豆果凍)按照一般制備方法使用以下成分制備Yokan(赤小豆果凍)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(重量份)瓊脂7.50砂糖320.00紅豆醬620.00淀粉糖漿50.00水300.00實施例4-E-56Yokan(赤小豆果凍)在如實施例4-E-55中的相同條件下制備Yokan(赤小豆果凍),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-57松餅(SoftCookie)按照一般制備方法使用以下成分制備松餅。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(重量份)小麥面粉200.00黃油150.00糖80.00全蛋_150.00實施例4-E-58松餅在如實施例4-E-57中的相同條件下制備松餅,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-59米餅按照一般制備方法使用以下成分制備米餅。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)正常大米100.00熱7jc__實施例4-E-60米餅在如實施例4-E-59中的相同條件下制備米餅,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。113實施例4-E-61Suhama(日本傳統(tǒng)點心)按照一般制備方法使用以下成分制備Suhama(日本傳統(tǒng)點心)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(重量份)白色優(yōu)質綿白糖600.00Kinako(烤大豆粉)400.00淀粉糖漿130.00Zli_180.00實施例4-E-62Suhama(日本傳統(tǒng)點心)在如實施例4-E-61中的相同條件下制備Suhama(日本傳統(tǒng)點心),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0,5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-63干甜點按照一般制備方法使用以下成分制備干甜點。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(重量份)和三盆(Wasanbon)糖500.00Shitori(在處理過程中用于使成分濕潤)25.00Kanbaiko(磨碎的烤米餅)_75.00實施例4-E-64干甜點在如實施例4-E-63中的相同條件下制備干甜點,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-65水果橡皮糖按照一般制備方法使用以下成分制備水果橡皮糖。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(重量份)糖30.00淀粉糖漿50.00明月交7.00果汁5.00檸檬酸1.50香料_0.20實施例4-E-66水果橡皮糖在如實施例4-E-65中的相同條件下制備水果橡皮糖,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-E-67含大豆面粉的烘焙的點心1.25重量%的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例l-3)和25重量%的大豆面粉,以及葡萄干、黃油、糖、蛋、橙皮、菠蘿、難以消化的糊精、可可糖膏、杏仁片、可可粉、食鹽、發(fā)酵粉和香料以適當量混合。然后所得到的混合物(IOO重量%)使用模具成型成矩形(大約1.5cmx1.5cmx10cm)以在180。C的烤箱中烘烤,從而制備含大豆面粉的烘焙的點心。實施例4-E-68含大豆面粉的烘焙的點心含大豆面粉的烘焙的點心在如實施例4-E-67中的相同條件下制備,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.25重量份固體提取物代替含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。115實施例4-F調味品下面,給出按照本發(fā)明的調味品的特定制備實施例。實施例4-F-l烤肉醬(BarbecueSauce)制備具有以下組成的烤肉醬.含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(kg)還原性淀粉糖漿20.00海藻糖0,50米才木酒(Mirin)4.00醬油(暗)24.00蘋果漿19.00大蒜漿4.50生姜漿4.50芝麻油0.10黃原膠0.50辣祐又粉0.10黑胡椒粉0.05檸檬酸(晶體)0.20烤芝麻0.40水余量總計100.00kg實施例4-F-2烤肉醬在如實施例4-F-l中的相同條件下制備烤肉醬,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-3番茄醬制備具有以下組成的番茄醬。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)4.00(kg)番茄醬40.00酒醋18.00果糖/葡萄糖糖漿5.00醬油(暗)24.00食鹽2.50稱粉0.07洋蔥粉0.10桂皮粉0.02丁香粉0.01水總計100.00kg實施例4-F-4番茄醬在如實施例4-F-3中的相同條件下制備番茄醬,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-5Tsuyu(蘸醬)制備具有以下組成的Tsuyu(用于天麩羅,即日本干炸食品,的蘸醬)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)4.00(kg)糖7.00醬油(暗)26.00醬油(淡)10.00魚調味醬(Fishsauce)5.00米林酒10.00L-谷氨酸鈉一水合物3.00食鹽0.60zli_余量總計100.00kg實施例4-F-6Tsuyu(湯)在如實施例4-F-5中的相同條件下制備Tsuyu(湯),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-7調味品具有以下組成和水相和油相以7:3的重量比混合以制備調f朱品(分離型)。水相的組成含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(kg)糖6.00醬油(暗)20.00釀造醋(酸度10%)8.50魚調味醬3.00檸檬汁2.00^"鹽2.00L-谷氨酸鈉一水合物0.20辣椒粉0.05烤芝麻0.30黃原膠0.10水余量總計100.00kg油相的組成芝麻油玉米色-l立油調味品香料20.00(kg)79,00總計100.00kg實施例4-F-8調味品在如實施例4-F-7中的相同條件下制備調味品(分離型),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至千而制備的0.5kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-9用于日式火鍋(Shabu-shabu)(在熱水中快速煮沸薄片肉和蔬菜)的芝麻蘸醬制備具有以下組成的用于日式火鍋的芝麻蘸醬。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(kg)醬油(淡)12.00釀造醋11.00蒜粉0.10生姜粉0.10白胡椒0.10雞肉提取物3.00酵母提取物3.00芝麻油1.00果糖/葡萄糖糖漿8.00米林酒15.00白p未。曾10.00增稠劑3,50119總計100.00kg實施例4-F-10用于日式火鍋(在熱水中快速煮沸薄片肉和蔬菜)的芝麻蘸醬在如實施例4-F-9中的相同條件下制備用于日式火鍋的芝麻蘸醬,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-11烤肉醬(味噌風味)制備具有以下組成的烤肉醬(味噌風味)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)4.00(kg)醬油(暗)25.00味噌14.00D-山梨糖醇12.00食鹽3.20蒜粉3.30大蒜裝2.00牛肉提取物1.00烤芝麻0.50L-谷氨酸鈉一水合物0.50生姜漿0.40氨基酸調味品0.01增稠劑3.50糖10.008.0010.000.15備普q,_鹽料糖食香水ZJS_余量總計100.00kg實施例4-F-12烤肉醬(味噌風味)在如實施例4-F-11中的相同條件下制備烤肉醬(味噌風味),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-13小吃調p未品制備具有以下組成的小吃調味品。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)食鹽14.00磷酸三4丐3.00琥珀酸二鈉0.20L-谷氨酸鈉一水合物7.00粉末醬油3.00酵母提取物1.50洋蔥粉1.50辣椒粉1.50蒜粉6.00辣椒粉0.50雞湯21.00牛肉湯4.00甜菊0.60葡萄糖13.00香辛料0.01玉米淀粉23.00糖2.00m實施例4-F-14小吃調。未品在如實施例4-F-13中的相同條件下制備小吃調味品,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-15乳化醬油制備具有以下組成的乳化醬油。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(重量份)色拉油34.00醬油(暗)53.00阿拉伯膠1.00M_12.00實施例4-F-16乳化醬油在如實施例4-F-15中的相同條件下制備乳化醬油,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-17調料制備具有以下組成的調料(乳化型)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(重量份)色拉油35.00醋10.00糖11.00食鹽4.00黃原膠0.30ZJS_余量總計100.00重量Y分實施例4-F-18調料在如實施例4-F-17中的相同條件下制備調料(乳化型),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-19用于燒鰻魚(燒烤的海鮮)的調味醬制備具有以下組成的用于燒鰻魚(燒烤的海鮮)的調味醬。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)D-山梨糖醇10.00增稠劑0.30醬油(暗)38.00米林酒20.00鮮、味(Umami)"j是耳又物2.00食鹽1.80L-谷氨酸鈉一水合物1.45肌苷酸鈉0.025鳥苷酸鈉0.025海藻糖15.00糖6.00焦糖色素0.50洋蔥顏料0.10香料0.50水余量總計100.00重量份實施例4-F-20用于燒鰻魚(燒烤的海鮮)的調味醬在如實施例4-F-19中的相同條件下制備用于燒鰻魚(燒烤的海鮮)的調味醬,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量〗分固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-F-21用于魷魚衫、味的調味品制備具有以下組成的用于魷魚珍味的調味品。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-2)0.40(重量份)醬油(暗)20.00醬油(淡)10.00魚調味醬5.00米林酒10.00釀造醋2.00糖38.00食鹽1.00L-谷氨酸鈉一水合物2.00鮮味提取物1.40琥珀酸二鈉0.20蒜粉0.05水余量總計100.00重量份實施例4-F-22用于魷魚珍味的調味品在如實施例4-F-21中的相同條件下制備用于魷魚珍味的調味品,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-G殺菌袋裝食品下面,給出按照本發(fā)明的殺菌袋裝食品的特定制備實施例。實施例4畫G-1殺菌袋裝咖喱按照一般制備方法使用以下組合物制備殺菌袋裝咖喱。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)咖鬼粉1.80洋蔥7.00新鮮黃油4.500.60生姜漿0.50小麥面并分4.50水果酸辣醬3.00番茄醬0.50食鹽0.55L-谷氨酸鈉一水合物0.48核酸調f朱品0.015半冰沙司香料1.00豬肉提取調味品0.50肉湯香料1.00土豆7.00胡蘿卜5.00牛肉10.00水余量總計100.00kg實施例4-G-2殺菌袋裝咖喱在如實施例4-G-l中的相同條件下制備殺菌袋裝咖喱,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-G-3殺菌袋裝的中式蓋飯預混合料按照一般制備方法使用以下組合物制備殺菌袋裝的中式蓋飯預混合料。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)醬油(淡)72.00日本米酒(sake)46.00食鹽4.00L-谷氨酸鈉一水合物1.30核酸調味品0.07雞肉提取物粉1.00糖7.00水209.00豬肉200.00魷魚120.00奸80.00什塔克菇(Lentinusedodes)70.00煮竹夢160.00胡蘿卜60.00洋蔥_240.00實施例4-G-4殺菌袋裝的中式蓋飯預混合料在如實施例4-G-3中的相同條件下制備殺菌袋裝的中式蓋飯預混合料,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-H加工的肉制品下面,給出按照本發(fā)明的加工肉制品的特定制實施例。實施例4-H-l香腸按照香腸的一般制備方法使用以下組成的成分制備香腸。肉部分5mm-剁碎的豬肉(前腿)70.00(kg)5mm-剁碎的豬肉(豬油)10.00冰水_20.00總計100.00kg輔助成分含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)食鹽1.70亞硝酸鈉0.012多磷酸鹽0.30抗壞血酸鈉1.00酪蛋白酸鈉(Sodiumcasein)0.50白胡椒粉0.10山梨酸鉀0.20氨基酸調味品0.30香辛料混合物_0.50實施例4-H-2香腸在如實施例4-H-l中的相同條件下制備香腸,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-H-3薰腸分別具有以下成分的肉部分和調味品以16:1的比率混合。使用所得到的混合物,按照薰腸的一般制備方法制備薰腸。肉部分剁碎的豬肉(前腿)全蛋牛奶冰水_85,00(kg)4.003.007.00調料含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)食鹽24.00氨基酸調味品3.20香辛料8.65剁碎的洋蔥16.00糖48,00實施例4-H-4薰腸在如實施例4-H-3中的相同條件下制備薰腸,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-H-5漢堡牛排按照一般制備方法使用以下組合物制備漢堡牛排。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0A0(重量份)碎牛肉和豬肉的混合物45.00豬肉洋蔥全蛋粒狀大豆蛋白酪蛋白酸鈉角叉菜膠刺并鬼豆膠香辛料酵母提取物食鹽糖水溶性膳食纖維總計9.0012.005.009.005.001.500.500.300.201.001.201.00余量100.00重量份實施例4-H-6漢堡牛排在如實施例4-H-5中的相同條件下制備漢堡牛排,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-1魚醬下面,給出按照本發(fā)明的魚醬的特定制備實施例。實施例4-1-1炸魚糕(Kamaboko)(魚醬餅)按照一般制備方法使用以下組成的成分制備炸魚(魚醬餅)。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)碎魚塊(Surimi)50.00食鹽1.50129氨基酸調味品0.30甘氨酸0.50無水乙酸鈉0.30土豆淀粉8.00米林酒1.00冰水_余量總計100.00kg實施例4-1-2炸魚糕(魚醬餅)在如實施例4-I-l中的相同條件下制備炸魚糕(魚醬餅),除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-J加工的蛋制品下面,給出按照本發(fā)明的加工的蛋制品的特定制備實施例。實施例4-J-l厚日本煎蛋巻按照厚日本煎蛋巻的一般制備方法使用以下組成的成分制備厚日本煎蛋巻。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)全蛋70.00食鹽0.40淀粉2.00湯料2.00糖1.20乙酸鈉1.00Zli_余量總計100.00重量份實施例4-J-2厚日本煎蛋巻在如實施例4-J-l中的相同條件下制備,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-K罐頭食品下面,給出按照本發(fā)明的罐頭食品的特定制備實施例。實施例4-K-l柑桔罐頭通過裝填柑桔果肉和具有以下組成的糖漿制備柑桔罐頭。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)糖10.00果糖/葡萄糖糖漿10.00檸檬酸0.254寧碎蒙酸三鈉0.10Zt_余量總計100.00重量份實施例4-K-2柑桔罐頭在如實施例4-K-l中的相同條件下制備柑桔罐,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-L面包產品下面,給出按照本發(fā)明的面包的特定制備實施例。實施例4-L-l條形面包使用具有以下組成的面團制備條形面包。發(fā)面團強力面粉70.00(kg)酵母食品0.10活酵母2.00ZJS_40.00主要面團含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(kg)強力面粉30.00糖3.00食鹽2.00脫脂奶2.00起酥油5.00^_25.00實施例4-L-2條形面包在如實施例4-L-l中的相同條件下制備條形面包,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05kg固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-M冷凍《計點下面,給出按照本發(fā)明的冷凍甜點的特定制備實施例。實施例4-M-l冰淇淋制備具有以下組成的水淇淋。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)粗奶油8.80黃油5.00淀粉糖漿16.00脫脂奶6.50海藻糖7.00糖5,00穩(wěn)定劑0.20香料0.15_佘量總計100.00重量份實施例4-M-2冰淇淋在如實施例4-M-l中的相同條件下制備水洪淋,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至千而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-N加工大豆食品下面,給出按照本發(fā)明的加工大豆食品的特定制備實施例。實施例4-N-l發(fā)酵大豆混合99.6重量份蒸大豆和0.4重量份含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)。然后所得到的混合物接種納豆芽孢桿菌(Sa"7/wmz"o)以進行發(fā)酵;從而制備發(fā)酵大豆。實施例4-N-2發(fā)酵大豆在如實施例4-N-l中的相同條件下制備發(fā)酵大豆,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。133實施例4-N-3豆腐制備具有以下組成的豆腐。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)豆奶99.30氯化鎂0.20山梨酸鉀_0.10總計100.00重量份實施例4-N-4豆腐在如實施例4-N-3中的相同條件下制備豆腐,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-0烹制的大米制品下面,給出按照本發(fā)明的烹制的大米制品的特定制備實施例。實施例4-0-1米粥按照米粥的一般制備方法使用以下組成的成分制備米粥。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)040(重量份)大米160.00食鹽1.00^_900.00實施例4-0-2米粥在如實施例4-0-1中的相同條件下制備米粥,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物1-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-0-3帶栗子的蒸糯米飯按照一般制備方法使用以下成分制備帶栗子的蒸糯米飯。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)糯米去皮栗子湯料黑芝麻鹽溶液_4.00(重量份)1000.00300.00230.0030.006.00實施例4-0-4帶栗子的蒸糯米飯在如實施例4-0-3中的相同條件下制備帶栗子的蒸糯米飯,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.5重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。實施例4-P湯下面,給出按照本發(fā)明的湯的特定制備實施例。實施例4-P-l玉米奶油湯按照一般制備方法使用以下組成的成分制備玉米奶油湯。含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物(參考實施例1-3)0.40(重量份)牛奶180.00玉米190.00清燉肉湯20.00色拉油15.00食鹽q.s.胡椒q.s.^_360.00實施例4-P-2玉米奶油湯在如實施例4-P-l中的相同條件下制備玉米奶油湯,除了使用實施例1-1中通過蒸發(fā)用75Et獲得的液體提取物l-2至干而制備的0.05重量份固體提取物替代含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。附圖簡要說明圖1是顯示參考實施例1-1獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物、大豆子葉和大豆胚軸中包含的總蛋白質的電泳圖。圖2是顯示參考實施例1-1獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物、大豆子葉和大豆胚軸中包含的主要變應原(Gym4、Gm30K和Gm28K)的檢測結果的電泳圖。圖3是顯示參考實施例1-1獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物、大豆子葉和大豆胚軸中包含的主要變應原(7S球蛋白混合物、油質蛋白和胰蛋白酶抑制劑)的檢測結果的電泳圖。圖4顯示表明實施例1-1中液體提取物1-2和2-2的雌馬酚含量的TLC分析結果。圖5顯示表明實施例1-1中液體提取物1-2和2-2的皂苷含量的TLC分析結果。圖6顯示表明實施例1-1中液體提取物1-2和殘留物2的雌馬酚含量的TLC分析結果。圖7顯示表明實施例1-1中液體提取物l-2和殘留物2的皂苷含量的TLC分析結果。圖8顯示實施例2-1中通過硅膠柱層析洗脫的溶液的TLC分析結果。權利要求1.一種用于制備含雌馬酚的提取物的方法,包括步驟I-1使用乙醇水溶液作為提取劑對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取,并收集得到的液體提取物。2.按照權利要求1所述的用于制備含雌馬酚的提取物的方法,其中進一步包括步驟I-2:從步驟I-1中獲得的所述液體提取物中除去所述提取劑,使用乙醇作為提取劑進行提取,并收集得到的液體提取物。3.按照權利要求1所述的用于制備含雌馬酚的提取物的方法,其中步驟1-1中使用的所述乙醇水溶液的乙醇濃度是20-98體積%。4.按照權利要求1-3中任一項所述的用于制備含雌馬酚的提取物微生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的。5.—種通過使用乙醇水溶液作為^是取劑對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取獲得的含雌馬酚的提取物。6.—種通過4吏用乙醇水溶液和乙醇依次對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取獲得的含雌馬酚的提取物。7.—種通過權利要求1-4的方法中的任一種獲得的含雌馬酚的提取物。8.—種用于從含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物制備含雌馬酚的提取物的方法,包括步驟II-l和II-2:步驟II-1:將含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物懸浮于水中,加入酸以使得所得到的水溶液具有2-6的pH值,并收集不溶性殘留物;步驟II-2:使用乙醇水溶液作為提取劑對步驟II-1中獲得的不溶性殘留物進行提取,然后收集得到的液體提取物。9.按照權利要求8所述的方法,其中步驟II-l中使用的所述酸是乙酸。10.—種通過權利要求8或9的方法獲得的含雌馬酚的提取物。11.一種用于純化含雌馬酚的物質以獲得高純度雌馬酚的方法,包括步驟1-1至1-5:步驟1-1:使用乙醇水溶液作為提取劑對含雌馬酚的物質進行提取,并收集得到的液體提取物;步驟1-2:從步驟1-1中獲得的所述液體提取物中除去溶劑,使用乙醇作為提取劑對殘留物進行提取,并收集得到的液體提取物;步驟1-3:從步驟1-2中獲得的所述液體提取物中除去溶劑,將得到的殘留物懸浮于己烷中,然后收集不溶性殘留物;步驟1-4:使用己烷和醚的混合液作為提取劑對步驟1-3中獲得的所述不溶性殘留物進行提取,然后收集液體提取物;和步驟1-5:對步驟1-4中獲得的所述液體提取物進行硅膠柱層析,并獲得含雌馬酚的流份。12.按照權利要求11所述的方法,其中所述含雌馬酚的物質是含雌馬酚的發(fā)酵物。13.按照權利要求12所述的方法,其中所述含雌馬酚的發(fā)酵物是通過用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物。14.按照權利要求11-13中任一項所述的方法,其中步驟l-4中使用的所述提取劑是己烷和乙醚的混合液。15.按照權利要求11-14中任一項所述的方法,其中步驟l-4中使用的所述提取劑是體積比為10:90-20:80的己烷和醚的混合液。16.按照權利要求11-15中任一項所述的方法,其中步驟1-1中〃使用的所述乙醇水溶液具有20-98體積%的乙醇濃度。17.—種用于純化含雌馬酚的物質以獲得雌馬酚的方法,包括步驟2-1至2-3:步驟2-l:使用選自乙酸乙酯、醇、丙酮、二氧雜環(huán)己烷、乙腈、乙醚和曱苯中的至少一個成員的有機溶劑或有機溶劑水溶液作為提取劑對含雌馬酚的物質進行提取,并濃縮得到的液體提取物;步驟2-2:對步驟2-l中獲得的雌馬酚濃縮物進行硅膠柱層析,并獲得含雌馬酚的流份;和步驟2-3:從步驟2-2獲得的含雌馬酚的流份中除去溶劑,重結晶得到的殘留物,并收集析出的晶體。18.按照權利要求17所述的方法,其中步驟2-3包括在使用乙酸乙酯和己烷混合液的重結晶之后使用醇的水溶液進行重結晶。19.一種包含分散于可可糖膏中的含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食品材料。20.按照權利要求19所述的食品材料,其包含10-2000重量份可可糖膏/100重量份含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物。21.按照權利要求19或20所述的食品材料,其中所述含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物是通過用產生雌馬酚的微生物發(fā)酵大豆胚軸獲得的。22.按照權利要求21所述的食品材料,其中所述產生雌馬酚的微生物是可以代謝選自大豆黃酮糖苷、大豆黃酮和二氫大豆黃酮的至少一種大豆黃酮化合物以產生雌馬酚的微生物。23.按照權利要求19-22中任一項所述的食品材料,其呈粒狀形式、切片狀形式或盤狀形式。24.—種包含如權利要求19-23中任一項所述的食品材料的含雌馬酚食品。25.按照權利要求24所述的含雌馬酚食品,其為烘焙的點心。26.—種包含含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物或其提取物的食品。全文摘要本發(fā)明涉及通過從含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物提取包含雌馬酚的有用成分而獲得的提取物及制備該提取物的方法。本發(fā)明使得通過使用乙醇水溶液作為提取劑對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取而從大豆胚軸發(fā)酵物有效地獲得含雌馬酚的成分成為可能。本發(fā)明在有效地提取雌馬酚和黃豆黃素的同時通過使用乙醇水溶液和乙醇順序地對含雌馬酚的大豆胚軸發(fā)酵物進行提取而降低引起不良味道的皂苷的含量。文檔編號A61K31/353GK101677606SQ200880020209公開日2010年3月24日申請日期2008年6月13日優(yōu)先權日2007年6月13日發(fā)明者T·瓦爾德斯-戈恩扎爾茨,今田拓磨,內山悠子,半谷泉,只野健太郎,富永道明,岸本卓也,常石博正,松岡邦彥,松本敏明,瀧孝雄,辻真知子,龜田京子申請人:大塚制藥株式會社