專利名稱：：一種治療癌癥的中藥注射制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種療癌癥的中藥注射制劑及其制備方法，屬于中藥制藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
：中藥注射制劑是以中藥材為原料，經(jīng)提取、分離、精制等步驟制成的滅菌制劑。它改變了中藥傳統(tǒng)的給藥方式，具備藥效迅速，生物利用度高，劑量更準(zhǔn)確，適用于不宜口服或急重癥的病例，并可使某些藥物發(fā)揮定向或定位給藥等特點(diǎn)，較好地發(fā)揮了中藥治療急病重癥及疑難病的作用。但是，隨著臨床應(yīng)用的日益增多，中藥注射劑引起藥物不良反應(yīng)的事件屢有發(fā)生，已引起廣大醫(yī)藥工作者的關(guān)注。中藥注射制劑發(fā)生不良反應(yīng)的主要原因在于中藥注射劑原料的化學(xué)成份十分復(fù)雜，其中一些高分子化合物，如鞣質(zhì)、動植物蛋白極易引起過敏反應(yīng)；另外，由于中藥注射劑的生產(chǎn)工藝有欠成熟，造成個(gè)別批號藥液純度欠佳，進(jìn)而引起過敏反應(yīng)。艾迪注射液是本申請人研制的中藥品種，由人參、黃芪、刺五加和斑蝥4味中藥制成，具有清熱解毒、消瘀散結(jié)的作用，臨床上主要用于原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科惡性腫瘤的治療等，收載于衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)20冊。申請人在專利號為03117114.l的《治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法》中公開了艾迪注射液的制備工藝采用人參醇、水分提，其余三味水提，石硫沉淀法處理、醇沉的方法獲取有效成分，該方法構(gòu)成簡單，有效藥物成分損失多，收率低，同時(shí)耗用了大量乙醇，能耗大，生產(chǎn)過程復(fù)雜，周期長，效率低，成本高，生產(chǎn)安全性差，對環(huán)境影響大，容易導(dǎo)致藥液中成分變化不穩(wěn)定，也使得大量具有抗腫瘤作用的多糖成分沒有得到利用。申請?zhí)枮?00410004443.4的專利文獻(xiàn)公開了一種用于治療腫瘤的中藥凍干粉針劑制備方法，采用醇提、大孔吸附樹脂除雜和水提、超濾的方法相結(jié)合，該工藝引入了藥材中所含有的大量多糖，使療效有所提高，但是其對多糖沒有有效截留，這是由于多糖的分子量范圍很大，極小分子的多糖藥用效率低，大分子量的多糖在注射給藥中又容易引起不良反應(yīng)；同時(shí)在大孔樹脂洗脫純化步驟中，樹脂的選擇、洗脫液的選擇、洗脫速度的控制都極大地影響了對有效成分的獲取。另外，藥材的常規(guī)提取方法為水提或醇提，但究竟藥材適用于水提、醇提還是醇水結(jié)合也是需要藥學(xué)工作者去研究的一個(gè)重點(diǎn)，上述專利文獻(xiàn)在藥材的提取工藝中，對單個(gè)藥材的提取研究不夠深入，容易造成制劑中單個(gè)藥材有效成分提取效率低、雜質(zhì)含量高的問題，所以探索一種可行有效的中藥注射制劑的制備方法，以提高療效，降低中藥注射制劑的不良反應(yīng)是醫(yī)藥工作者要解決的問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種治療癌癥的中藥注射制劑及其制備方法。本發(fā)明將藥材分別進(jìn)行醇、水分提，然后采用無機(jī)陶瓷膜微濾、有機(jī)膜超濾等膜分離技術(shù)結(jié)合樹脂精制處理相結(jié)合的方法對提取液進(jìn)行純化、分離和濃縮，富集有效成分，濾除雜質(zhì)，從而降低了藥品的不良反應(yīng)，提高了療效。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的一種治療癌癥的中藥注射制劑，按照重量份計(jì)算，它是用斑蝥0.9-2.l份、人參30-70份、黃芪60-140份和刺五加90-210份按下述方法制成的取人參切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材共水提取，提取液與人參提取液混合即得參芪提取液，濃縮，過濾，精制，備用；刺五加粉碎，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，濃縮，過濾，精制，備用；斑蝥粉碎，加水煎煮，煎煮液濾過，備用；將人參、黃芪和刺五加的提取液進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，加入輔料或者不加輔料，用不同的方法制成不同的注射制劑。準(zhǔn)確地說，按照重量份計(jì)算，它是用斑蝥1.5份、人參50份、黃芪100份和刺五加150份制成的。所述的注射制劑為水針制劑、輸液制劑、粉針制劑或凍干粉針制劑。本發(fā)明所述治療癌癥的中藥注射制劑的制備方法為取人參切片，用55%-75%乙醇回流提取2-4次，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材共水提取2-4次，提取液與人參提取液混合即得參芪提取液，濃縮，無機(jī)膜過濾，樹脂精制，備用；刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取2-4次，合并提取液，回收乙醇，濃縮，無機(jī)膜過濾，樹脂精制，備用；斑蝥粉碎，過40-60目篩，加水煎煮2-4次，合并煎煮液，濾過，備用；將人參、黃芪和刺五加的提取液用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，加入輔料或者不加輔料，用不同的方法制成不同的注射制劑。更具體的制備方法為取人參切片，用55%-75%乙醇浸泡10-14小時(shí)，然后回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提取0.5-2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液備用;藥渣與黃芪藥材加4-6倍量水提取2-4次，每次0.5-2小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒O.5-2ml過柱，用l-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用l-5倍柱體積0.05-0.2XNaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4-6，即得參芪提取物備用；刺五加粉碎，用60%-80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提取O.5-2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒O.5-2ml過柱，用l-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用l-5倍柱體積0.05-0.2XNaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4-6，即得刺五加提取物備用；斑蝥粉碎，過40-60目篩，加水煎煮2-4次，每次加水6-10倍量、提取0.5-2小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用；將參芪提取物和刺五加提取物用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，加入輔料或者不加輔料，用不同的方法制成不同的注射制劑。優(yōu)選的制備方法為取人參切片，用65%乙醇浸泡12小時(shí)，然后回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液；藥渣與黃芪藥材加5倍量水提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)pH至5，即得參芪提取物備用；刺五加粉碎，用70%的乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，即得刺五加提取物備用；斑蝥粉碎，過40目篩，加水煎煮3次，每次加水8倍量、提取1小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用；將參芪提取物和刺五加提取物用巻式有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，加入輔料或者不加輔料，用不同的方法制成不同的注射制劑。其中，水針制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，灌封，滅菌，即得。輸液制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入氯化鈉、氯化鈣、葡萄糖或右旋糖酐調(diào)節(jié)等滲，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，滅菌，即得。粉針制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，干燥，即得。凍干粉針制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，冷凍干燥，即得中藥材提取液的組分復(fù)雜，其中除了有效成分外還含有大量的雜質(zhì)，各組分的結(jié)構(gòu)不同，分子大小也不一樣，當(dāng)將藥液通過孔徑不同的過濾介質(zhì)時(shí)可將各組分分離，因此可采用膜分離方法純化和精制。膜科學(xué)與技術(shù)是現(xiàn)代分離
技術(shù)領(lǐng)域：
最先進(jìn)的技術(shù)之一。使用膜技術(shù)(包括超濾膜、微濾膜、半透膜、反滲透膜等)可以在原生物體系環(huán)境下實(shí)現(xiàn)物質(zhì)分離，可以高效濃縮富積產(chǎn)物，有效脫出雜質(zhì)。陶瓷膜微濾是以新型無機(jī)陶瓷膜為濾過介質(zhì)的一種高效、節(jié)能、無污染的新型分離技術(shù)，具有分離精度高，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，富集產(chǎn)物或?yàn)V除雜質(zhì)效率高，無需加熱濃縮、藥效成分不被破壞，縮短生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率等優(yōu)點(diǎn)；樹脂純化是近年來國內(nèi)外新發(fā)展的處理技術(shù)，并在醫(yī)藥領(lǐng)域特別是天然藥物精制中廣為運(yùn)用，是提取精制中草藥中水溶性有效成分的一種有效方法。因此，本發(fā)明采用無機(jī)陶瓷膜、聚酰胺樹脂和有機(jī)膜相結(jié)合的方法純化精制中藥注射制劑，其特點(diǎn)為用物理方法取代了傳統(tǒng)的化學(xué)方法，可有效除去中藥提取液中的大分子物質(zhì)，同時(shí)不引入其它的無機(jī)離子，較好地保持了中藥復(fù)方制劑的特點(diǎn)，能有效降低藥物的不良反應(yīng)。本發(fā)明所述的技術(shù)方案是申請人經(jīng)過大量試驗(yàn)研究而獲取的，主要試驗(yàn)內(nèi)容如下實(shí)驗(yàn)例l、提取工藝分析在實(shí)驗(yàn)中參照艾迪注射液的提取工藝，對艾迪提取工藝進(jìn)行多個(gè)方案的組合優(yōu)選對水提、醇提、醇水分提分別進(jìn)行研究，考察人參總皂苷的提取率；同時(shí)將人參、黃芪、刺五加分別提取進(jìn)行處理，以獲得更佳的提取方法。1.1刺五加提取工藝原艾迪注射液的工藝是將刺五加與黃芪、斑蝥及人參醇提后的藥渣共同煎煮，本發(fā)明人將刺五加單獨(dú)進(jìn)行處理，與原方法進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)將刺五加單獨(dú)提取更有利于后續(xù)工藝處理。1.1.1提取方法選擇取刺五加藥材，分別采用加水煎煮、乙醇回流兩種方法進(jìn)行提取，以含量、提取液色澤、澄明度為指標(biāo)，考察藥材的提取率。水提、醇提刺五加效果評價(jià)表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>結(jié)果表明，采用醇提工藝，提取液經(jīng)處理后澄明度較好、色澤較淺，淺棕紅色；而水提的刺五加在澄明度、色澤、含量等方面均較差，色澤較深，淺褐色。故選擇醇提。1.1.2提取工藝研究提取溶媒的加入量，提取時(shí)間和次數(shù)是影響提取工藝的重要因素，以紫丁香苷含量為指標(biāo)，對以上參數(shù)進(jìn)行考察，以優(yōu)選最佳工藝條件。a.乙醇濃度考察樣品制備取刺五加藥材50g，粉碎，按下表濃度加入乙醇溶液，加熱回流3次，每次l小時(shí)，合并回流液，濾過。乙醇濃度考察表乙醇濃度50%60%70%80%90%含量(mg/L)8531185120612171225表中數(shù)據(jù)顯示，乙醇濃度為60%-80%時(shí)紫丁香苷幾乎已經(jīng)提取完全，其中70%濃度為最佳，比較經(jīng)濟(jì)合理。b.提取時(shí)間考察取刺五加藥材50g共6份，切片，同等乙醇量分別加熱回流O.5、1、1.5、2、2.5、3小時(shí)，濾過，定容至一定體積，取樣測定。結(jié)果如下提取時(shí)間考察表提取時(shí)間0.511.522.53含量(mg/L)94510481132117411811183由表中數(shù)據(jù)可看出，提取2小時(shí)后，紫丁香苷含量無明顯改變，說明刺五加提取2小時(shí)后，物質(zhì)的溶出已趨于飽和?？紤]到實(shí)際生產(chǎn)效率，優(yōu)選提取時(shí)間為l小時(shí)。c.乙醇用量的考察樣品制備取刺五加藥材50g共3份，依下表?xiàng)l件加入不同量70%乙醇，加熱回流3次，每次1小時(shí)，濾過，收集濾液。結(jié)果如下乙醇用量考察表乙醇量為藥材重量的倍數(shù)468101214含量(mg/L)81410271156119412101212紫丁香苷含量隨乙醇量的加大而增加，但到一定程度后沒有較大變化，所以選擇乙醇用量為藥材重量的6-10倍，優(yōu)選用量為8倍量。綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，決定刺五加藥材的提取工藝為用60%-80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提取O.5-2小時(shí)。優(yōu)選為用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時(shí)。1.2人參提取工藝1.2.1提取方法選擇取人參藥材，分別采用加水煎煮、乙醇回流、乙醇回流后藥渣加水煎煮三種方法進(jìn)行提取，以人參總皂苷、提取液色澤、澄明度、過濾難易程度為指標(biāo)，考察人參總皂苷的提取率人參提取工藝表方法評價(jià)指標(biāo)總皂苷提取液量色澤過濾難易澄明度1水提240mg/L150L棕黃(略有渾濁)易澄明2醇提320mg/L100L棕紅難澄明3醇、水結(jié)合275mg/L150L色澤介于二者之間(略有渾濁)易澄明實(shí)金結(jié)果表明，水提液和醇:瞎液中均可測出人參皂苷Rgl、Rbl、Re，而采月，醇、水分提相結(jié)合的方法提取人參藥材，提取液在色澤、含量、過濾難易等方面均取得良好效果。雖然單獨(dú)采用醇提的含量比較高，但考慮下階段的精制純化工藝，優(yōu)選醇、水結(jié)合的提取方法。1.2.2提取方法驗(yàn)證分別選取紅參、生曬參，對本發(fā)明人參提取方法進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果如下:醇水結(jié)合提取紅參、生曬參外觀質(zhì)量評價(jià)表人參性狀色澤生曬參乳光、滅菌后有大量灰白色沉淀棕黃紅參乳光、滅菌后有大量灰色沉淀深棕紅1.2.3醇提工藝研究a.提取次數(shù)考察樣品制備取人參藥材50g，切片，力陽5%-75%乙醇加熱回流5次，每次1小時(shí)，分別收集每次的回流液，濾過。提取次數(shù)-人參總皂苷表提取次數(shù)12345含量(mg/L)243274292306311表中數(shù)據(jù)顯示，提取4次時(shí)，人參總皂苷幾乎已經(jīng)提取完全，因此確定人參提取次數(shù)為2-4次，其中提取3次為最佳工藝，較經(jīng)濟(jì)合理。b.乙醇用量的考察樣品制備取人參50g共3份，依下表?xiàng)l件加入不同的55%-75%乙醇，加熱回流3次，每次l小時(shí)，濾過，收集濾液。結(jié)果如下乙醇用量量-人參總皂苷表乙醇量為藥材重量的倍數(shù)468101214含量(mg/L)2536291307314318321人參總皂苷的量隨乙醇量的加大而增加，但到一定程度后沒有較大變化，所以選擇乙醇用量為藥材重量的6-10倍，優(yōu)選用量為8倍量。另外，發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，將人參藥材提取之前浸泡10-14小時(shí)，其總皂苷的提取更為完全。故綜合上述結(jié)果，決定人參藥材的提取工藝為用55%-75%乙醇浸泡10-14小時(shí)，然后回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提取O.5-2小時(shí)。優(yōu)選為用65%乙醇浸泡12小時(shí)，回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時(shí)。1.3黃芪提取工藝將人參乙醇回流提取后的藥渣與黃芪藥材共水提取。按下表加水量分別提取3次，每次l小時(shí)，以總固形物提取率為指標(biāo)，考察加水量對藥材有效成分提取率的影響。加水量-總固形物提取率評價(jià)表加水量為藥材重量的倍數(shù)345678提取率67%79%83%85%84%85%結(jié)果表明，提取率隨加水量的加大而增加，但到一定程度后沒有較大變化，所以選擇加水量為藥材重量的4-6倍，優(yōu)選加入量為5倍量，較為經(jīng)濟(jì)合理。實(shí)驗(yàn)例2、無機(jī)陶瓷膜分離純化工藝孔徑大小不同的膜，可以分別除去提取液中的懸浮物、膠體和大分子雜質(zhì)(如蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)等)，以及無機(jī)鹽類成分，同時(shí)盡量保留有效成分，以獲得高純度的澄明藥液。鑒于陶瓷膜過濾技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，首先選取無機(jī)陶瓷膜對提取后的藥液進(jìn)行微濾，對過濾前和過濾后的藥液在澄明度、沉淀、色澤、含量變化等方面作了對比，并對無機(jī)膜過濾的工藝參數(shù)進(jìn)行了2.1試驗(yàn)方法設(shè)備2#、3#、4#陶瓷膜，操作參數(shù)為(P:0.350.4MP;T:3542°C;V:1216t/h)，通量范圍為60100L.M-2.H-1。將提取后的藥液分別過2#、3#、4#膜進(jìn)行微濾，考察膜管通量的穩(wěn)定性，數(shù)據(jù)見下表。膜管通量穩(wěn)定性考察<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>2.2試驗(yàn)結(jié)果2#、3#、4tf的平均通量為74L.M-2.H-l，由于4#膜的通量異常，故排除4#膜的干擾，2#、3tf膜的平均通量為93L.M-2.H-l。據(jù)此可估測無機(jī)膜的可通量為7090L.M-2.H-1。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)用無機(jī)陶瓷膜過濾，透過液和母液中的有效成分分布濃度基本一致，母液為設(shè)備中余留的未透過的濃藥液，并且在生產(chǎn)中可加純水洗出有效成分，再用納濾濃縮可提高收得率。且每次加入水的量越小，洗脫率越高，加水量為23倍洗脫綜合效果最好，有效成分損失一般不超過5%。對此將膜過濾前后濃差視為O，建立數(shù)學(xué)模型，通過積分換算作加水洗脫模擬圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用無機(jī)膜過濾后的藥液澄明度明顯改善，較澄明且色澤明顯變淺，滅菌放置會產(chǎn)生少量沉淀。用凝膠色譜檢驗(yàn)反饋結(jié)果為經(jīng)過無機(jī)膜初濾分子量大于10000的大分子物質(zhì)已不能檢出。在微濾時(shí)可分多次加少量的水洗滌有效成分，另為提高后工段的生產(chǎn)效率，可將提取液用真空減壓適當(dāng)濃縮，再微濾時(shí)可減小過濾量，以節(jié)約時(shí)間、提高效率。實(shí)驗(yàn)例3、樹脂精制工藝在實(shí)驗(yàn)中，本發(fā)明人最初采用無機(jī)陶瓷膜處理后，用巻式有機(jī)膜超濾、巻式納濾膜濃縮的方法進(jìn)行純化精制，樣品8份，結(jié)果表現(xiàn)為只有一份澄明度符合要求，但放置l個(gè)月后出現(xiàn)沉淀。其它幾份均在兩三天就出現(xiàn)沉淀，再超濾后仍然有沉淀產(chǎn)生。因此，本發(fā)明人考慮膜分離技術(shù)結(jié)合樹脂精制的方法來達(dá)到純化分離藥液的效果。具體的工藝研究為3.l樹脂種類的選擇樹脂DlOl、D201、AB-8大孔吸附樹脂，LSA-14樹脂、ADS系列樹脂、聚酰胺樹脂、活性炭等。以含量、色澤、澄明度為指標(biāo)考察相關(guān)的工藝參數(shù)流速、洗脫劑濃度、洗脫流速等，數(shù)據(jù)及選擇工藝條件如下表樹脂種類選擇分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>由上表可知，選擇聚酰胺樹脂處理的藥液澄明度最好，在滅菌后不產(chǎn)生渾濁，故只測定了聚酰胺樹脂處理后藥液的過柱后含量和洗脫液的含量。而且聚酰胺樹脂處理的藥液能分別用薄層檢驗(yàn)和高效液相檢驗(yàn)從其中定性和定量地測出人參皂苷Rgl、Rbl、Re。3.2洗脫液的選擇研究洗脫液的種類及濃度是影響樹脂精制工藝的重要因素，本試驗(yàn)選擇經(jīng)陶瓷膜微濾后的藥液2份，直接上柱，先用2倍柱體積去離子水洗脫至無色，然后分別用2倍柱體積0.5XNaOH溶液和50%乙醇洗脫，結(jié)果表明，采用NaOH溶液收集的總皂苷含量較乙醇液高，故對NaOH溶液濃度進(jìn)一步研究。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>根據(jù)以上結(jié)果，確定樹脂純化工藝為藥液直接上柱，以每秒O.5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用l-5倍柱體積0.05-0.2^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4-6，備用。優(yōu)選工藝為藥液直接上柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，備用。實(shí)驗(yàn)例4、有機(jī)膜分離純化工藝有機(jī)膜處理分為膜濃縮和膜超濾兩個(gè)操作步驟4.1膜濃縮條件為P:0.51MPa;T:3040°C，V:S2250L/h。在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)膜濃縮有效成分有損失，透過水中總苷含量在1319mg/L。4.2有機(jī)膜超濾實(shí)驗(yàn)中所用的超濾膜為巻式超濾膜，由南京工業(yè)大學(xué)提供，截留分子量為IOOOO。操作條件為P:0.50.9MPa;T:304CTC;V:2;2250L/h。超濾過程可加適量水洗滌有效成份，其原理和洗脫情況類似于無機(jī)膜，超濾對有效成分有截留，損失率在15%20%間。分析為減少有效成分損失，應(yīng)盡量減小超濾和納濾次數(shù)，且超濾和納濾時(shí)壓力應(yīng)越小越好，在回收乙醇和濃縮時(shí)應(yīng)作經(jīng)濟(jì)價(jià)值比較，減壓加熱回收較好。實(shí)驗(yàn)例5、質(zhì)量對比研究5.1檢驗(yàn)情況及收率按照本發(fā)明所述制備方法，以人參3kg、黃芪6kg、刺五加9kg投料實(shí)驗(yàn)十批，在實(shí)驗(yàn)中對半成品和成品分別進(jìn)行定性鑒別和定量鑒別。定性鑒別項(xiàng)為黃芪甲苷、人參皂苷Rgl、Rbl、Re。在半成品和成品中均可檢出。定量鑒別項(xiàng)為人參皂苷Rgl、Rbl、Re。在半成品和成品中均可檢出，當(dāng)半成品總苷含量為330400mg/L時(shí)，Rgl、Rbl、RE三者總和在140180mg/L。小試樣品中總苷含量為310mg/L，Rgl、Rbl、Re三者總和為lOO.62mg/L。收得率情況根據(jù)最終檢驗(yàn)結(jié)果，總皂苷以3.0mg/支計(jì)算，平均收率為90%。5.2質(zhì)量對比研究本發(fā)明人針對工藝的改進(jìn)，對改進(jìn)前后的藥品質(zhì)量做了全面的比較研究。5.2.l試驗(yàn)藥品將市售的同一批藥材人參50g、黃芪100g、刺五加150g、斑蝥1.5g，按照市售艾迪注射液的制備方法制成l號藥物；再按本發(fā)明輸液制劑、水針制劑、粉針制劑、凍干粉針制劑的制備方法制成2號、3號、4號、5號藥物。5.2.2試驗(yàn)內(nèi)容成品外觀性狀、pH值、異常毒性、溶血與凝聚、含量等比較考察。5.2.3方法及結(jié)果將本發(fā)明產(chǎn)品與市售產(chǎn)品各取2份，按照已有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對上述指標(biāo)進(jìn)行檢測。結(jié)果如下本發(fā)明工藝與市售產(chǎn)品工藝比較結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注表格最后兩行中白勺"數(shù)據(jù)％"指每100mg固體制劑中含人參皂苷Re或瑰E蝥素的mg數(shù)，"%"艮卩相當(dāng)于"mg/100mg"。由以上數(shù)據(jù)可知，本發(fā)明輸液制劑、水針制劑、粉針制劑、凍干粉針制劑在成品外觀和含量方面均有較大的改善，同時(shí)其他指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求，說明本發(fā)明制備工藝路線設(shè)計(jì)合理，工藝條件符合工廠生產(chǎn)要求，成品質(zhì)量可控。實(shí)驗(yàn)例6、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)6.1實(shí)驗(yàn)材料藥物市售艾迪注射液，為陽性對照藥；按本發(fā)明制備方法制成的注射液，為本發(fā)明藥物。動物昆明種小鼠，體重18-22g。6.2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果6.2.1對小鼠移植性腫瘤S!80的影響取傳代后生長良好的Si80小鼠，無菌條件下抽取腹水，用無菌生理鹽水按l:3稀釋，顯微鏡下計(jì)數(shù)，調(diào)瘤細(xì)胞數(shù)為1.0Xl()7個(gè)/ml(置冰浴中)；然后取正常小鼠，于每只小鼠腋部皮下接種0.2ml，24小時(shí)后稱重。取實(shí)驗(yàn)藥物，注射給藥劑量為3.Og/kg，每日小鼠尾靜脈給藥一次，對照組尾靜脈給藥0.2ml生理鹽水，連續(xù)給藥十天，末次給藥后24小時(shí)，取小鼠按常規(guī)方法處死解剖腫瘤，稱重。結(jié)果見下表。對小鼠移植性腫瘤Si80的生長抑制作用組別瘤重(g)抑制率(％)對照組1.87—市售艾迪注射液組1.3328.9**本發(fā)明注射液組1.1836.9林tt注與對照組比較**P〈0.01;與市售組比較ttP〈0.05。6.2.2對移植性肝癌H22的影響取傳代后生長良好的H22小鼠，無菌條件下抽取腹水，力n4倍量生理鹽水混勻，每只小鼠腹腔接種0.2ml，24小時(shí)后隨機(jī)分組，雌、雄各半。給藥劑量同6.2.1。每日尾靜脈給藥一次，連續(xù)十天。末次給藥后24小時(shí)處死小鼠，解剖腫瘤，稱重。結(jié)果見下表。對移植性肝癌H22的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注與對照組比較**P〈0.01;與市售組比較ttP〈0.05。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本發(fā)明注射制劑與已有注射制劑比較，可以明顯提高對腫瘤的抑制效果，說明本發(fā)明注射制劑的療效更好，生物利用度更高。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明將藥材分別進(jìn)行醇、水分提，并采用無機(jī)陶瓷膜微濾、有機(jī)膜超濾等膜分離技術(shù)結(jié)合樹脂精制處理技術(shù)取代石硫法、醇沉、鹽析等工藝，用物理方法替代傳統(tǒng)的化學(xué)方法，改進(jìn)了艾迪注射液的生產(chǎn)工藝，可有效除去中藥提取液中的大分子物質(zhì)，同時(shí)不引入其它的無機(jī)離子，充分富集了有效成分，有效降低了藥物的不良反應(yīng)，提高了療效，從而提高和保證了產(chǎn)品的質(zhì)量；且本發(fā)明減少了工藝步驟，縮短了流程，將艾迪注射液的生產(chǎn)周期從180小時(shí)縮短至57天，可獲得良好的成本效益。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的實(shí)施例l:取斑蝥1.5g、人參50g、黃芪100g和刺五加150g，按以下步驟制備(1)人參切片，用65%乙醇浸泡12小時(shí)，然后回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取l小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液；藥渣與黃芪藥材加5倍量水提取3次，每次l小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1%NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)pH至5，即得參芪提取物，備用。(2)刺五加粉碎，用70%的乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，即得刺五加提取物，備用。(3)斑蝥粉碎，過40目篩，加水煎煮3次，每次加水8倍量、提取1小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用。(4)將參芪提取物和刺五加提取物用巻式有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，冷凍干燥，即得凍干粉針制劑。本發(fā)明的實(shí)施例2:取斑蝥2.lg、人參70g、黃芪140g和刺五加210g，按以下步驟制備(1)人參切片，用70%乙醇浸泡13小時(shí)，然后回流提取3次，每次加入乙醇9倍量、提取1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材加5倍量水提取3次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒1.5ml過柱，用3倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用3倍柱體積O.15^Na0H溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，即得參芪提取物，備用。(2)刺五加粉碎，用75%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇9倍量、提取1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒1.5ml過柱，用3倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用3倍柱體積0.15^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，即得刺五加提取物，備用。(3)斑蝥粉碎，過50目篩，加水煎煮3次，每次加水9倍量、提取1.5小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用。(4)將參芪提取物和刺五加提取物用巻式有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，干燥，即得粉針制劑。本發(fā)明的實(shí)施例3:取斑蝥0.9g、人參70g、黃芪60g和刺五加210g，按以下步驟制備(1)人參切片，用75%乙醇浸泡10小時(shí)，然后回流提取4次，每次加入乙醇6倍量、提取2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材加4倍量水提取4次，每次0.5小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒2ml過柱，用l倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用5倍柱體積0.05XNaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至6，即得參芪提取物，備用。(2)刺五加粉碎，用80%乙醇回流提取2次，每次加入乙醇10倍量、提取O.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒2ml過柱，用l倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用5倍柱體積0.05XNaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至6，即得刺五加提取物，備用。(3)斑蝥粉碎，過60目篩，加水煎煮2次，每次加水10倍量、提取0.5小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用。(4)將參芪提取物和刺五加提取物用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，灌封，滅菌，即得水針制劑。本發(fā)明的實(shí)施例4:取斑蝥2.lg、人參30g、黃芪140g和刺五加90g，按以下步驟制備(1)人參切片，用55%乙醇浸泡14小時(shí)，然后回流提取2次，每次加入乙醇10倍量、提取0.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材加6倍量水提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0.5ml過柱，用5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用l倍柱體積0.2XNaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4，即得參芪提取物，備用。(2)刺五加粉碎，用60%乙醇回流提取4次，每次加入乙醇6倍量、提取2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0.5ml過柱，用5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用l倍柱體積0.2XNaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至4，即得刺五加提取物，備用。(3)斑蝥粉碎，過40目篩，加水煎煮4次，每次加水6倍量、提取2小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用。(4)將參芪提取物和刺五加提取物用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入氯化鈉、氯化鈣、葡萄糖或右旋糖酐調(diào)節(jié)等滲，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，滅菌，即得輸液制劑。本發(fā)明的實(shí)施例5:取斑蝥0.9g、人參30g、黃芪60g和刺五加90g，按以下步驟制備(1)人參切片，用60%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇7倍量、提取1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材加5倍量水提取3次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪提取液，濃縮，無機(jī)膜過濾，聚酰胺柱精制，備用(2)刺五加粉碎，用65%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇7倍量、提取1.5小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮，無機(jī)膜過濾，聚酰胺柱精制，備用。(3)斑蝥粉碎，過50目篩，加水煎煮3次，每次加水7倍量、提取1.5小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用。(4)將人參、黃芪和刺五加的提取液用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，干燥，即得粉針制劑。權(quán)利要求1.一種治療癌癥的中藥注射制劑，其特征在于按照重量份計(jì)算，它是用斑蝥0.9-2.1份、人參30-70份、黃芪60-140份和刺五加90-210份按下述方法制成的取人參切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與黃芪藥材共水提取，提取液與人參提取液混合即得參芪提取液，濃縮，過濾，精制，備用；刺五加粉碎，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，濃縮，過濾，精制，備用；斑蝥粉碎，加水煎煮，煎煮液濾過，備用；將人參、黃芪和刺五加的提取液進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，加入輔料或者不加輔料，用不同的方法制成不同的注射制劑。6.按照權(quán)利要求5所述治療癌癥的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于取人參切片，用65%乙醇浸泡12小時(shí)，然后回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取l小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，得人參提取液；藥渣與黃芪藥材加5倍量水提取3次，每次l小時(shí)，合并提取液，與人參提取液混合即得參芪初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1%NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)pH至5，即得參芪提取物備用；刺五加粉碎，用70%的乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，然后用無機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過濾，過濾時(shí)分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒lml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0.1^NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調(diào)PH至5，即得刺五加提取物備用；斑蝥粉碎，過40目篩，加水煎煮3次，每次加水8倍量、提取1小時(shí)，合并煎煮液，濾過，備用；將參芪提取物和刺五加提取物用巻式有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥提取液混合，加入輔料或者不加輔料，用不同的方法制成不同的注射制劑。7.按照權(quán)利要求4、5或6所述治療癌癥的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于水針制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，灌封，滅菌，即得。8.按照權(quán)利要求4、5或6所述治療癌癥的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于輸液制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入氯化鈉、氯化鈣、葡萄糖或右旋糖酐調(diào)節(jié)等滲，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，滅菌，即得。9.按照權(quán)利要求4、5或6所述治療癌癥的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于粉針制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，干燥，即得10.按照權(quán)利要求4、5或6所述治療癌癥的中藥注射制劑的制備方法，其特征在于凍干粉針制劑是這樣制備的將超濾過后的人參、黃芪和刺五加的提取液與斑蝥提取液混合，用注射用水溶解，加入甘露醇或乳糖或山梨醇，調(diào)節(jié)pH至4.5-6.0，冷凍干燥，即得。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療癌癥的中藥注射制劑及其制備方法，它是用斑蝥0.9-2.1份、人參30-70份、黃芪60-140份和刺五加90-210份，將人參、黃芪、刺五加分別進(jìn)行醇、水分提，提取液經(jīng)濃縮，無機(jī)陶瓷膜微濾，聚酰胺樹脂精制，再用有機(jī)膜進(jìn)行超濾，然后與斑蝥的水提取液混合，制成中藥注射制劑。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明將藥材分別進(jìn)行醇、水分提，采用膜分離技術(shù)結(jié)合樹脂精制處理相結(jié)合的方法對提取液進(jìn)行純化、分離和濃縮，富集有效成分，用物理方法替代傳統(tǒng)的化學(xué)方法，可有效除去中藥提取液中的大分子物質(zhì)，同時(shí)不引入其它的無機(jī)離子，較好地保持了中藥復(fù)方制劑的特點(diǎn)，有效降低了藥物的不良反應(yīng)，提高了療效，從而提高和保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。文檔編號A61K9/08GK101306077SQ200810301949公開日2008年11月19日申請日期2008年6月4日優(yōu)先權(quán)日2008年6月4日發(fā)明者周黎亞,楊世林,帆江,軍王,竇啟玲申請人:貴州益佰制藥股份有限公司