專利名稱：：預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：抑郁癥是由各種原因引起的以抑郁為主要癥狀的一組心境障礙或情感性障礙。按照世界衛(wèi)生組織的估計(jì)，全世界有5億人正患著各種各樣的精神疾病，也就是說，每10個(gè)人中有1個(gè)人有精神疾病。因此，抑郁癥作為現(xiàn)代社會(huì)中的一種常見病和多發(fā)病，是精神衛(wèi)生界研究和服務(wù)的重點(diǎn)。"更年期綜合癥"是指由于卵巢和睪丸功能減退，性激素分泌量日益減少，內(nèi)分泌功能發(fā)生暫時(shí)性失調(diào)，導(dǎo)致某些人因適應(yīng)不良而發(fā)生多種生理和心理功能障礙的綜合病癥。根據(jù)2002年《女性健康》雜志的調(diào)查，我國(guó)婦女患重大疾病與更年期綜合癥有關(guān)，每年約有120萬婦女死于更年期綜合癥引發(fā)的重大疾病。男性更年期常常出現(xiàn)多種生理和身體上的不良反應(yīng)癥狀，因此更年期綜合癥已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)越來越重視的問題。片劑作為傳統(tǒng)的婦科良藥也具有治療抗婦女更年期綜合癥的作用，在2001年第6期的《黑龍江醫(yī)藥科學(xué)》刊登了"片劑治療婦女更年期綜合癥90例臨床觀察"一文，文中提到了片劑可以治療婦女更年期綜合癥，并且不會(huì)產(chǎn)生副作用。傳統(tǒng)的片劑是柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草、薄荷和姜八味藥通過煎煮制備而成的。申請(qǐng)?zhí)枮?00510019033.1題為"一種抗抑郁癥的中藥及其制備方法"的專利申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N抗抑郁癥的中藥及其制備方法，它是通過以下方法制備而成的取當(dāng)歸1/2、白術(shù)1/2、白芍1/2及其茯苓的全量，干燥粉碎后過100目篩，細(xì)篩備用，粗渣與當(dāng)歸l/2、白術(shù)1/2、白芍1/2以及其它味(柴胡、黃芩、桃仁、梔子、丹皮、川紅和甘草)藥一起煎煮，第一次為2小時(shí)，第二次、三次各45分鐘，水和藥物的比例為2.5-3.5:1，過濾，合并濾液，濃縮至稠膏狀，與細(xì)粉混合，再干燥，粉碎過篩，制成顆粒，壓片制備而成。申請(qǐng)?zhí)枮?00410079950.4題為"一種抗抑郁癥的藥物"公開了藥物的組成，包括柴胡5%-15%、當(dāng)歸10%-15%、川芎5%-10%、茯苳15%-20%、鉤藤15%_20%、首烏藤15%-20%、白術(shù)15%-20%、甘草5%-10%。該藥物是通過以下方法制備而成的取鉤藤、柴胡各半量，粉碎成細(xì)粉，過篩備用，取鉤藤、柴胡的另一半與其余的茯苓、白術(shù)、當(dāng)歸、甘草、川芎、首烏藤六味中藥加水煎煮2-3次，每次60-180分鐘，合并煎液，過濾，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.2-1.4的清膏，加入上述鉤藤、柴胡粉末混勻，制成顆粒，患者服用該藥后并輔以精神治療，經(jīng)檢測(cè)有效率達(dá)90%，治愈率達(dá)80%。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物，以及該藥物組合物的制備方法和該藥物組合物的劑型。本發(fā)明的一方面提供了一種預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物，該藥物組合物包含柴胡細(xì)粉、當(dāng)歸提取物、白芍提取物、白術(shù)提取物、茯苓提取物、甘草提取物和薄荷提取物。優(yōu)選地，所述的藥物組合物以1重量份計(jì)，包含0.40-0.70重量份柴胡細(xì)粉、0.05-0.17重量份當(dāng)歸提取物、0.015-0.06重量份白芍提取物、0.035-0.085重量份白術(shù)提取物、0.003-0.Oil重量份茯苓提取物、0.045-0.085重量份甘草提取物和0.005-0.03重量份薄荷提取物。優(yōu)選地，所述的藥物組合物包含柴胡總皂苷、芍藥苷和多糖。更優(yōu)選地，所述的柴胡總皂苷包含柴胡皂苷a和柴胡皂苷d。柴胡皂苷a分子式C42H68013，分子量780.98，cas號(hào)20736-09-8，結(jié)構(gòu)式如下:柴胡皂苷d分子式(:421168013，分子量780.98，cas號(hào)20874-52-6，結(jié)構(gòu)式如下優(yōu)選地，所述的藥物組合物中含有該藥物組合物總重量0.1%-0.5%的柴胡皂苷a、0.08%-0.45%的柴胡皂苷d、0.45%-0.2%的芍藥苷和剩余量的多糖。優(yōu)選地，所述的多糖包含當(dāng)歸多糖、白芍多糖、白術(shù)多糖、茯苓多糖和甘草多糖中的一種或幾種。本發(fā)明的再一方面還提供了一種制備所述組合物的方法，該方法包括以下步驟a.首先將當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草和薄荷分別或共同用水浸泡；b.將含有中藥材的浸泡液進(jìn)行煎煮，得到揮發(fā)物和煎煮液，收集所述的揮發(fā)物；c.過濾所述的煎煮液，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，向所述的稠膏中加入乙醇；d.將加入乙醇的稠膏進(jìn)行過濾，得到濾液II，回收濾液II中的乙醇，得到去除乙醇的濾液III;e.將步驟b得到的揮發(fā)物與步驟d得到的濾液III混合，得到混合物；f.將柴胡粉碎為細(xì)粉，將步驟e得到的混合物和所述的細(xì)粉混合，干燥脫水，得到藥物組合物中的活性成分；g.在加入或不加入藥學(xué)上可接受輔料的情況下，將所述的活性成分制成所述的藥柴胡皂苷a和柴胡皂苷d互為同分異構(gòu)體物組合物。在上述的步驟a中，當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草和薄荷可以分別用水浸泡，也可以共同用水浸泡。當(dāng)這六味藥分別用水浸泡時(shí)，得到各自的浸泡液，接著進(jìn)行的步驟b、c、d、e也是每種分別進(jìn)行的，只是在步驟f中將得到的所有混合物和柴胡細(xì)粉混合，得到藥物組合物中的活性成分。優(yōu)選地，所述細(xì)粉為80-300目。優(yōu)選地，在所述的步驟a中，用中藥材重量5-10倍的水在室溫條件下浸泡所述中藥材10-60分鐘。優(yōu)選地，在所述的步驟b中，所述的含有中藥材的浸泡液連續(xù)沸騰兩次，共進(jìn)行l(wèi)-4小時(shí)煎煮。優(yōu)選地，在所述的步驟c中，所述的煎煮液在室溫下進(jìn)行過濾，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，在室溫下，向所述的稠膏中加入稠膏體積2-6倍的70%_100%濃度的乙醇。優(yōu)選地，該藥物組合物的劑型為片劑、膠囊劑、丸劑或顆粒劑。優(yōu)選地，所述的丸劑為水丸、蜜丸或濃縮丸。優(yōu)選地，所述的丸劑是滴丸劑。與現(xiàn)有技術(shù)不同的是，采用本發(fā)明技術(shù)方案制備的預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物一共采用了七味中藥，并且當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草和薄荷采用煎煮方式提取獲得的有效成分與粉碎的柴胡進(jìn)行混合，烘干獲得。與傳統(tǒng)的逍遙丸相比，本發(fā)明的藥物組合物中的柴胡以細(xì)粉形式而不是它提取物的形式存在，該藥物組合物不僅可以預(yù)防和/或治療抑郁癥，還可以預(yù)防和/或治療更年期綜合癥。更年期綜合癥和抑郁癥是兩種不同的病癥，但在情緒癥狀方面又存在著相似的表現(xiàn)。女性在更年期，隨著卵巢功能的逐漸退化和體內(nèi)女性激素的日趨減少，會(huì)出現(xiàn)一些生理和心理方面的癥狀，主要的表現(xiàn)有潮熱、出汗、疲乏、骨質(zhì)疏松、焦慮緊張、失眠多夢(mèng)、情緒波動(dòng)、注意力差、憂愁抑郁等，臨床上稱之為"更年期綜合癥"。而抑郁癥除了有情緒低落、悲觀失望、自我評(píng)價(jià)低之外，還伴有焦慮、疲倦、失眠、記憶力下降等與更年期綜合癥類似的情緒癥狀。更年期綜合癥多由肝腎虧虛、陰陽(yáng)失調(diào)所致，臨床表現(xiàn)為急躁易怒、心煩失眠、潮熱汗出，常兼有肝郁化火、氣滯不舒之病變。異病同治是中醫(yī)的優(yōu)勢(shì)所在。以上兩病雖病種不同，但同屬肝郁脾虛兼有郁熱之癥，故用舒肝理脾清熱法治療，以本發(fā)明的藥物組合物治療均能取效。此外，用本發(fā)明技術(shù)方案獲得的藥物組合物相對(duì)于傳統(tǒng)的逍遙丸在治療更年期綜合癥上具有達(dá)到相同的治療效果時(shí)，服用量少的優(yōu)點(diǎn)，更適合臨床長(zhǎng)期使用。與
背景技術(shù)：
中提到的治療抑郁癥的藥物組合物相比，本發(fā)明藥物組合物的制備方法簡(jiǎn)單，原料種類少，易于獲得，并且無論在預(yù)防和/或治療抑郁癥還是在更年期綜合癥上都具有良好的效果。另外，本發(fā)明的藥物組合物與抗抑郁劑的西藥相比，沒有依賴性及副作用。圖1是柴胡標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜圖。圖2是柴胡細(xì)粉的高效液相色譜圖。圖3是芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜圖。圖4是芍藥苷制得的濾液III的高效液相色譜圖。圖5是濾液III混合液的粗多糖紫外_可見光測(cè)定圖譜。圖6是小鼠的站立次數(shù)和時(shí)間的關(guān)系圖。圖7是不同組別小鼠自主活動(dòng)站立次數(shù)平均數(shù)值圖。圖8是不同組別小鼠自主活動(dòng)總路程圖。圖9是不同組別小鼠轉(zhuǎn)輪次數(shù)和時(shí)間的關(guān)系圖。圖10是不同組別小鼠強(qiáng)迫游泳轉(zhuǎn)輪次數(shù)圖。圖11是不同組別小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間圖。圖12是單胺類神經(jīng)遞質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品電化學(xué)檢測(cè)器測(cè)定圖譜，其中上圖表示+450mV電壓下各神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定圖，下圖表示+350mV電壓下各神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定圖。圖13是小鼠血漿樣品神經(jīng)遞質(zhì)電化學(xué)檢測(cè)器測(cè)定圖譜。具體實(shí)施方式實(shí)施例1當(dāng)歸藥材10Kg、白芍藥材10Kg、白術(shù)藥材10Kg、茯苳藥材10Kg、甘草藥材8Kg、薄荷藥材2Kg，各自以水浸泡10min，煎煮2次，每次1小時(shí)，收集得到的揮發(fā)物。煎煮液室溫過濾，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，向稠膏中加6倍量95%乙醇沉淀24小時(shí)，過濾，得到濾液II，回收濾液II的乙醇，得到濾液III，濾液III共六份，其中得到的當(dāng)歸的干提取物1.9Kg、白芍干提取物0.75Kg、白術(shù)干提取物1.1Kg、茯苓干提取物0.045Kg、甘草干提取物1.0Kg、薄荷干提取物0.07Kg。柴胡藥材10Kg粉碎為80目細(xì)粉，與以上合并的六份濾液III和揮發(fā)物混合，加輔料制顆粒，烘干，壓片，制成片劑約20Kg。實(shí)施例2當(dāng)歸藥材10Kg、白芍藥材10Kg、白術(shù)藥材10Kg、茯苳藥材10Kg、甘草藥材8Kg、薄荷藥材2Kg，混和藥材并用水浸泡藥材混和物30min，將含有中藥材混合物的浸泡液連續(xù)煎煮2次，第一次1小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，收集得到的揮發(fā)物。煎煮液室溫過濾，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，向稠膏中加4倍量80%乙醇沉淀24小時(shí)，過濾，得到濾液II，回收濾液II的乙醇，得到濾液III。柴胡藥材10Kg粉碎為200目細(xì)粉，與以上濾液III和揮發(fā)物混合，烘干，得混合的藥物粉末約16Kg，裝膠囊。實(shí)施例3當(dāng)歸藥材10Kg、白芍藥材10Kg、白術(shù)藥材10Kg、茯苳藥材10Kg、甘草藥材8Kg、薄荷藥材2Kg，混和藥材并用水浸泡藥材混和物60min，煎煮2次，每次1小時(shí)，收集得到的揮發(fā)物。煎煮液室溫過濾，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，向稠膏中加3倍量95%乙醇沉淀24小時(shí)，過濾，得到濾液II，回收濾液II的乙醇，得到濾液III。柴胡藥材10Kg粉碎為300目細(xì)粉，與以上濾液III和揮發(fā)物混合，加輔料制丸，烘干，得到丸劑21Kg。實(shí)施例4當(dāng)歸藥材10Kg、白芍藥材10Kg、白術(shù)藥材10Kg、茯苳藥材10Kg、甘草藥材8Kg、薄荷藥材2Kg，各自用水浸泡30min，煎煮2次，每次1小時(shí)，分別收集得到的每種揮發(fā)物。所有的煎煮液室溫過濾，得到濾液I，共六種，將每種濾液I濃縮為稠膏，分別向每種稠膏中加2倍量95%乙醇沉淀24小時(shí)，過濾，得到濾液II，回收濾液II的乙醇，得到濾液III。濾液III共六份，其中得到的當(dāng)歸的干提取物1.7Kg、白芍干提取物0.60Kg、白術(shù)干提取物0.85Kg、茯苓干提取物0.11Kg、甘草干提取物0.85Kg、薄荷干提取物0.03Kg。柴胡藥材5.5Kg粉碎為80目細(xì)粉，與以上合并的六份濾液III和揮發(fā)物混合，加輔料制顆粒，烘干，壓片，制成片劑約20Kg。柴胡藥材5.5Kg粉碎為160目細(xì)粉，與上述濾液III和揮發(fā)物混合，加輔料制顆粒，烘干，壓片，制成片劑約22Kg?；钚猿煞值暮繙y(cè)定1、HPLC法測(cè)定柴胡皂苷將柴胡標(biāo)準(zhǔn)品和粉碎的柴胡細(xì)粉溶解于甲醇中，進(jìn)行測(cè)定。固定相C18柱(5iim，250mmX4.6mm);流動(dòng)相甲醇_水(68:32);流速1.OOOmL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)204nm;柱溫26。C。柴胡標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)結(jié)果見附圖1，圖中的1峰為柴胡皂苷a，2峰為柴胡皂苷d。柴胡細(xì)粉的高效液相色譜圖見附圖2，圖中的1峰是柴胡皂苷a，5峰為柴胡皂苷d。2、HPLC法測(cè)定芍藥苷分析成品中的白芍含量固定相:〇18柱(5iim，250mmX4.6mm);流動(dòng)相:乙腈-O.1%磷酸溶液(15:85v/v);檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，檢測(cè)結(jié)果見附圖3和附圖4，其中附圖3表示芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜圖，附圖4表示含白芍成品的高效液相色譜圖，圖中的4號(hào)峰為芍藥苷。3、硫酸-苯酚法測(cè)定多糖在上面得到的濾液III和揮發(fā)物混和后的樣品測(cè)定液2.Oml置于25ml比色管中，加入苯酚溶液2.Oml，在旋轉(zhuǎn)混合器上混勻后，小心加入濃硫酸10.Oml后于旋轉(zhuǎn)混合器上混勻后，置于水浴中煮沸10min，冷卻至室溫，用分光光度計(jì)在490nm波長(zhǎng)處，以試劑空白為參比，比色皿測(cè)定吸光度值。從葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程計(jì)算樣品中粗多糖含量，見附圖5。每個(gè)樣品需按回歸方程計(jì)算得到含量值。實(shí)施例5當(dāng)歸藥材10Kg、白芍藥材10Kg、白術(shù)藥材10Kg、茯苳藥材10Kg、甘草藥材8Kg、薄荷藥材2Kg，水浸泡30min，煎煮2次，每次1小時(shí)，同時(shí)提取揮發(fā)物。煎液室溫過濾，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，加3倍量95%乙醇沉淀24小時(shí)，過濾，得到濾液II，回收濾液II的乙醇，得到濾液III。柴胡藥材10Kg粉碎為160目細(xì)粉，與以上濾液III和揮發(fā)物混合，加輔料制顆粒，烘干，壓片，制成片劑約22Kg。藥效實(shí)驗(yàn)1:對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)方法40只雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為5組，每組8只，再將小鼠分為空白組(C)、陽(yáng)性對(duì)照組(百憂解P)和本發(fā)明藥物組合物的高、中、低劑量組，各組劑量及陽(yáng)性藥百憂解劑量見表l，補(bǔ)充劑量表見表1。表l給藥劑量表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>空白組小鼠口服同量水溶液O.lmL/10g。實(shí)驗(yàn)前三天連續(xù)灌胃給藥，第4天給藥30分鐘后，將小鼠放入小動(dòng)物自主活動(dòng)測(cè)定儀中(model麗3002系統(tǒng)，小鼠Digbehv-LM4動(dòng)物自主行為檢測(cè)系統(tǒng))適應(yīng)3分鐘后，觀察60分鐘內(nèi)小鼠的活動(dòng)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后通過攝影回放軌跡識(shí)別統(tǒng)計(jì)小鼠站立次數(shù)及活動(dòng)路徑長(zhǎng)度，從而判斷動(dòng)物自主活動(dòng)能力強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)于9:00-17:00之間，在室溫25t:的安靜專用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖6，小鼠的站立次數(shù)和時(shí)間的關(guān)系圖；圖7表示不同組別小鼠自主活動(dòng)站立次數(shù)圖(**p<0.01，*p<0.05)，圖8表示不同組別小鼠自主活動(dòng)總路程(**p<0.01，*p<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論各給藥組對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)量的影響如圖6、圖7、圖8所示。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，小鼠對(duì)于新環(huán)境的探索性運(yùn)動(dòng)降低，自主活動(dòng)量顯示明顯的下降趨勢(shì)。連續(xù)給藥三天以后，陽(yáng)性對(duì)照藥百憂解組小鼠的自主活動(dòng)總路程和站立次數(shù)下降趨勢(shì)均低于空白對(duì)照組，總路程和站立次數(shù)與空白組相比有顯著性差異，說明百憂解能夠在一定程度上增加小鼠自主活動(dòng)量，緩解了小鼠的抑郁狀態(tài)。與空白對(duì)照組的站立次數(shù)相比，采用本發(fā)明藥物組合物高劑量、中劑量(P<0.01)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與空白對(duì)照組的活動(dòng)總路程相比，本發(fā)明藥物組合物高劑量(P<0.01)、中劑量(P<0.05)具顯著意義。因此給予本發(fā)明藥物組合物的高劑量、中劑量的小鼠自主活動(dòng)總路程和站立次數(shù)分別在30分鐘和40分鐘后有上升的趨勢(shì)，說明本發(fā)明藥物組合物的高劑量、中劑量能夠在一定程度上增加小鼠自主活動(dòng)量，具有明顯的抗抑郁癥作用。藥效實(shí)驗(yàn)2:小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法50只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白組(C)、陽(yáng)性對(duì)照組(P)和本發(fā)明藥物組合物的高、中、低劑量組。空白組給蒸餾水O.lmL/10g。實(shí)驗(yàn)前連續(xù)5天灌胃給藥，第6天給藥后30分鐘進(jìn)行試驗(yàn)。小鼠的強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)所用儀器包括5個(gè)7X25X24cm的水箱和一部多通道計(jì)數(shù)器。在水箱中放水至轉(zhuǎn)籠的中部并調(diào)節(jié)水溫至2223°C。正式實(shí)驗(yàn)前2天對(duì)小鼠進(jìn)行訓(xùn)練，即將小鼠單獨(dú)放置水箱中，強(qiáng)迫游泳10分鐘，然后放回鼠籠中。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，小鼠的游泳時(shí)間為15分鐘。計(jì)數(shù)器每1分鐘統(tǒng)計(jì)一次輪轉(zhuǎn)次數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后讀出數(shù)據(jù)，以此判斷片劑對(duì)小鼠抑郁癥狀的改善情況。實(shí)驗(yàn)在安靜，室溫25°C房間內(nèi)，于9:00-17:00之間進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖9，小鼠的輪轉(zhuǎn)次數(shù)和時(shí)間之間的關(guān)系圖，圖10不同試驗(yàn)組和強(qiáng)迫游泳輪轉(zhuǎn)次數(shù)的關(guān)系圖(**p<0.01，*p<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論在強(qiáng)迫游泳引起小鼠絕望行為實(shí)驗(yàn)中(圖10)，灌胃給予本發(fā)明藥物組合物的高、中劑量均能夠顯著增加轉(zhuǎn)輪旋轉(zhuǎn)的圈數(shù)(P<0.01)，即認(rèn)為這些給藥組均能不同程度增加小鼠積極活動(dòng)能力，在給藥劑量下明顯延長(zhǎng)小鼠逃逸行為的維持時(shí)間。陽(yáng)性對(duì)照藥百憂解的增加作用稍低于這些組，與空白對(duì)照組相比仍具顯著性意義。藥效實(shí)驗(yàn)3:小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)(tailsuspensiontest)實(shí)驗(yàn)方法50只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白組(C)、陽(yáng)性對(duì)照組(P)和本發(fā)明藥物組合物高、中、低劑量組?？瞻捉M給蒸餾水O.lmL/10g。實(shí)驗(yàn)前連續(xù)3天灌胃給藥，第4天給藥30分鐘后，固定小鼠尾端，使其倒掛，頭離地約5cm，以檔板隔離動(dòng)物視線，動(dòng)物為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)，但活動(dòng)一段時(shí)間后出現(xiàn)間斷性不動(dòng)，顯示絕望狀態(tài)。記錄6分鐘內(nèi)小鼠不動(dòng)時(shí)間為絕望時(shí)間(以持續(xù)3s以上不動(dòng)為有效不動(dòng)時(shí)間)。以此判斷片劑對(duì)小鼠抑郁的抑制強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)在安靜，室溫25t:房間內(nèi)，于9:00-17:00之間進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖ll，不同劑量組與懸尾不動(dòng)的關(guān)系圖(**P<0.01，*p<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論從圖11的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出，與空白組相比，陽(yáng)性藥百憂解可以顯著縮短懸尾不動(dòng)時(shí)間(25.20±7.49vs78.1±9.42s)，同時(shí)我們也注意到提取物中劑量、高劑量組也能顯著縮短不動(dòng)尾時(shí)間，且顯示與百憂解相當(dāng)?shù)乃幮ё饔?43.8士12.57vs25.20±7.49s，33.2±7.58vs25.20±7.49s)。藥效實(shí)驗(yàn)4:對(duì)大鼠活動(dòng)轉(zhuǎn)輪應(yīng)激模型(activitystress)實(shí)驗(yàn)方法56只雄性Wister大鼠隨即分為8組，每組7只，分別為正常對(duì)照組、禁食禁水對(duì)照組、應(yīng)激模型組、陽(yáng)性藥組(P)、空白組(C)和本發(fā)明藥物組合物的高、中、低劑量組。空白組給蒸餾水lmL/100g。實(shí)驗(yàn)第l天9:00將大鼠放入轉(zhuǎn)籠裝置，并將滑動(dòng)門打開時(shí)期自由活動(dòng)，第二天9:00開始將大鼠關(guān)入轉(zhuǎn)籠一側(cè)，并鎖好滑動(dòng)門，開始正式紀(jì)錄大鼠運(yùn)動(dòng)狀態(tài)。每天18:00灌胃給予大鼠受試藥物，完畢后將其放入休息室進(jìn)食飲水，20:00再將其關(guān)入轉(zhuǎn)籠一側(cè)，持續(xù)14天。第15天將轉(zhuǎn)籠應(yīng)激大鼠取出用乙醚麻醉，下腔靜脈取血后立即斷頭，迅速在冰盤上取出全腦，剝離出大腦皮層。中樞單胺類神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定方法所取大腦皮層稱重后置于2mL圓底離心管中，按照重比容l:1比例加入3X高氯酸去蛋白，冰浴中組織勻漿機(jī)研磨成勻漿，4t:10000rpm離心10分鐘。血漿1:1加入6%高氯酸去蛋白，41:10000rpm離心10分鐘，上清液均經(jīng)0.2iim濾膜過濾后-S(TC冰箱冷凍保存待測(cè)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的水平。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的HPLC-ECD分析美國(guó)ESA公司高效液相庫(kù)侖陣列電化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，流動(dòng)相一水合檸檬酸15g，檸檬酸三鈉20.2g，EDTANa20.036g，八烷基磺酸鈉0.18g，用色譜純水18MQ)900mL超聲溶解，加入甲醇定容至1000mL，超聲脫氣，0.2ym過膜備用。柱溫38tV流速0.8mL/min。庫(kù)侖陣列電化學(xué)檢測(cè)器設(shè)定三個(gè)通道電極電勢(shì)通道1:-150mV(還原電勢(shì))；通道2:+350mV;通道3:+450mV。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制本實(shí)驗(yàn)組對(duì)去甲腎上腺素(NE)、3，4二羥基苯乙酸(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羥噴哚乙酸(5-HIAA)、5-羥色胺(5-HT)和高香草酸(HVA)6種單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝物進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了指標(biāo)在102000ng/mL范圍內(nèi)呈良好的線性相關(guān)。其HPLC色譜圖、標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別見圖12和表2，圖12的上圖表示+450mV電壓下各神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定圖，下圖表示+350mV電壓下各神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定圖。圖中各峰為6種標(biāo)準(zhǔn)品NE、D0PAC、DA、5-HIAA、5-HT和HVA。圖13表示不同劑量組與轉(zhuǎn)籠大鼠單胺類神經(jīng)遞質(zhì)量含量之間的關(guān)系圖，與對(duì)照組比較，#P<0.05;與模型組比較Zp<0.05。表26種神經(jīng)遞質(zhì)及代謝產(chǎn)物的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)r<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)驗(yàn)結(jié)論一般認(rèn)為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量與抑郁程度成負(fù)相關(guān)。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量越低，抑郁程度越明顯。單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量升高越接近正常水平，抑郁程度越輕。由圖13的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，與空白對(duì)照組相比，大鼠轉(zhuǎn)籠應(yīng)激負(fù)荷14天后，應(yīng)激模型組血漿中神經(jīng)遞質(zhì)含量顯著降低，禁食禁水組大鼠單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量略低于空白組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與應(yīng)激負(fù)荷模型組大鼠相比，給予百憂解能顯著改善應(yīng)激負(fù)荷造成的神經(jīng)遞質(zhì)下降的趨勢(shì)(NE:20.96±5.46vs14.21±5.71，5_HT:217.49±17.37vs182.28±25.26)，DA水平未表現(xiàn)顯著差異，但仍顯示一定的改善趨勢(shì)(66.76±7.17vs53.87±10.16)。提取物高劑量組療效與陽(yáng)性對(duì)照藥百憂解相當(dāng)(NE:22.11±5.15，DA:72.66±6.01，5—HT:217.76±17.83)，與模型組相比，NE、DA和5-HT含量分別上升34.5%、26.2%和18.6%，表明可通過改善部分神經(jīng)遞質(zhì)起到一定的療效，顯示抗抑郁良好的藥效。此外，各組均對(duì)轉(zhuǎn)籠應(yīng)激造成的血漿神經(jīng)遞質(zhì)下降趨勢(shì)有不同程度的改善作用。綜上，通過對(duì)血漿神經(jīng)遞質(zhì)的測(cè)定，我們發(fā)現(xiàn)，與空白組與禁食禁水組相比，應(yīng)激模型組的3個(gè)指標(biāo)含量均顯著下降，表明該模型設(shè)置合理。其中陽(yáng)性對(duì)照藥百憂解能顯著改善NE、DA和5-HT三個(gè)神經(jīng)遞質(zhì)的含量，顯示一定的抗抑郁作用；本發(fā)明的藥物組合物的高劑量組能顯著升高除DA外的神經(jīng)遞質(zhì)含量水平，顯示與百憂解類似的藥效，對(duì)DA下降的趨勢(shì)也有所改善。另外，提取物各劑量組對(duì)應(yīng)激負(fù)荷引起的血漿神經(jīng)遞質(zhì)水平下降在不同程度上顯示改善作用。權(quán)利要求一種預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物，該藥物組合物包含柴胡細(xì)粉、當(dāng)歸提取物、白芍提取物、白術(shù)提取物、茯苓提取物、甘草提取物和薄荷提取物，優(yōu)選地，所述的藥物組合物以1重量份計(jì)，包含0.40-0.70重量份柴胡細(xì)粉、0.05-0.17重量份當(dāng)歸提取物、0.015-0.06重量份白芍提取物、0.035-0.085重量份白術(shù)提取物、0.003-0.011重量份茯苓提取物、0.045-0.085重量份甘草提取物和0.005-0.03重量份薄荷提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述的藥物組合物包含柴胡總皂苷、芍藥苷和多糖，優(yōu)選地，所述的柴胡總皂苷包含柴胡皂苷a和柴胡皂苷d。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其中所述的藥物組合物中含有該藥物組合物總重量O.1%-0.5X的柴胡皂苷a、0.08%-0.45%的柴胡皂苷(1、0.45%-0.2%的芍藥苷和剩余量的多糖。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述的多糖包含當(dāng)歸多糖、白芍多糖、白術(shù)多糖、茯苓多糖和甘草多糖中的一種或幾種。5.—種制備權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述藥物組合物的方法，該方法包括以下步驟a.首先將當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草和薄荷分別或共同用水浸泡；b.將含有中藥材的浸泡液進(jìn)行煎煮，得到揮發(fā)物和煎煮液，收集所述的揮發(fā)物；c.過濾所述的煎煮液，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，向所述的稠膏中加入乙醇；d.將加入乙醇的稠膏進(jìn)行過濾，得到濾液II，回收濾液II中的乙醇，得到去除乙醇的濾液III;e.將步驟b得到的揮發(fā)物與步驟d得到的濾液III混合，得到混合物；f.將柴胡粉碎為細(xì)粉，優(yōu)選地，所述細(xì)粉為80-300目，將步驟e得到的混合物和所述的細(xì)粉混合，干燥脫水，得到藥物組合物中的活性成分；g.在加入或不加入藥學(xué)上可接受輔料的情況下，將所述的活性成分制成所述的藥物組合物。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中在所述的步驟a中，用中藥材重量5-10倍的水在室溫條件下浸泡所述中藥材10-60分鐘。7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其中在所述的步驟b中，所述的含有中藥藥材的浸泡液連續(xù)沸騰兩次，共進(jìn)行1-4小時(shí)煎煮。8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一項(xiàng)所述的方法，其中在所述的步驟c中，所述的煎煮液在室溫下進(jìn)行過濾，得到濾液I，將濾液I濃縮為稠膏，在室溫下，向所述的稠膏中加入稠膏體積2-6倍的70-100%濃度的乙醇。9.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中該藥物組合物的劑型為片劑、膠囊劑、丸劑或顆粒劑，優(yōu)選地，所述的丸劑為水丸、蜜丸或濃縮丸。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于所述的丸劑是滴丸劑。全文摘要本發(fā)明提供了一種預(yù)防和/或治療抑郁癥和更年期綜合癥的藥物組合物，其中的藥物組合物中包含柴胡細(xì)粉、當(dāng)歸提取物、白芍提取物、白術(shù)提取物、茯苓提取物、甘草提取物和薄荷提取物。本發(fā)明還提供了這種藥物組合物的制備方法。所述的藥物組合物的劑型為片劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑的形式。本發(fā)明的藥物組合物制備方法簡(jiǎn)單，原料種類少，易于獲得，并且無論在預(yù)防和/或治療抑郁癥還是在更年期綜合癥上都具有良好的效果。文檔編號(hào)A61K9/20GK101732427SQ20081018083公開日2010年6月16日申請(qǐng)日期2008年11月24日優(yōu)先權(quán)日2008年11月24日發(fā)明者李楚源,林青,王德勤,肖曉麗,陳薇,黃琳申請(qǐng)人:廣州白云山和記黃埔中藥有限公司