專利名稱：甘草提取物的醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甘草的提取分離方法及應(yīng)用，特別是涉及用微波提取法分離甘草
得到甘草提取物的方法及該提取物在小鼠潰瘍性結(jié)腸炎中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
甘草是豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、脹果甘草G. inflata Bat.、或光果甘草G. glabra. L.的干燥根莖，是臨床常用的中草藥之一。其性甘、平，具有 補(bǔ)脾益氣、清熱解毒，祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥之功效。甘草始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列 為上品，為應(yīng)用歷史悠久而廣泛的最常用中藥。據(jù)現(xiàn)代研究，甘草的根及根莖含三萜皂甙 甘草酸即甘草甜素，為甘草的甜味成分，此外還含有多種黃酮成分，即甘草素、異甘草素和 甘草甙、新甘草甙、新異甘草甙、芒柄花甙、甘草西定、甘草醇、5_0-甲基甘草醇和異甘草醇 等?，F(xiàn)代藥理研究表明，甘草具有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，抑制潰瘍作用，抗炎、抗變態(tài)反應(yīng) 及解毒作用，能促進(jìn)高血壓病人脂質(zhì)代謝，增加膽汁分泌；以及鎮(zhèn)咳、鎮(zhèn)痛、抗驚厥、抗腫瘤、 抗艾滋病病毒等?，F(xiàn)代臨床主要用于治療胃、十二指腸潰瘍，阿狄森氏病，席漢氏綜合征，肺 結(jié)核，支氣管哮喘，傳染性肝炎，急性血吸蟲病，瘧疾，血小板減少性紫癜，腓腸肌痙攣，先天 性肌強(qiáng)直，血栓性脈管炎，子宮糜爛，眼科炎癥，皮膚皸裂，艾滋病等。特別是甘草酸類成分， 具有防治病毒性肝炎、高脂血癥作用，能抗癌治癌，可作干擾素誘生劑及細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)劑， 又適用于制成多種生物堿、抗生素、氨基酸的復(fù)方制劑，常具協(xié)同、增溶、增效等作用。甘草 在食用方面可以用甘草甜素作為飲料調(diào)味劑，根及根莖粉末及其提取殘?jiān)梢宰鳛楂F用飼 料。因此，甘草的用途較為廣泛，開發(fā)前景廣闊，急待進(jìn)一步開發(fā)研究。
傳統(tǒng)的甘草提取方法步驟復(fù)雜，純度低，存在一定缺陷。 本發(fā)明用微波萃取法分離甘草得到甘草提取物并確定了該提取物在小鼠潰瘍性 結(jié)腸炎中的應(yīng)用。本發(fā)明方法簡單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，產(chǎn)品純度高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明用微波萃取法分離甘草得到甘草提取物并確定了該提取物在小鼠潰瘍性 結(jié)腸炎中的應(yīng)用。本發(fā)明方法簡單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，產(chǎn)品純度高。 本發(fā)明方法的一個具體實(shí)施方式
為，甘草經(jīng)粉碎后過65目篩，細(xì)粉于烘箱中60°C 干燥4h，精密稱取樣粉lg于燒瓶中，加入80 %乙醇60ml ，將此燒瓶放入MCL 23型連續(xù)微波 反應(yīng)器中，調(diào)整功率400W，反應(yīng)時間20min。將提取液經(jīng)減壓濃縮干燥得到甘草提取物。
本發(fā)明的甘草提取物可用于制備藥物。 本發(fā)明的甘草提取物可用于制備治療人或動物潰瘍性結(jié)腸炎的藥物。 具體實(shí)施例 實(shí)施例1甘草的提取分離
1儀器、試劑及樣品
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UV 22401型分光光度計(jì)(日本島津)，MCL 23型連續(xù)微波反應(yīng)器。對照品蘆丁購 自中國藥品生物制品檢定所。試劑均為分析純。甘草購自中國藥品生物制品檢定所。
2方法與結(jié)果 2. 1測定方法依據(jù)以蘆丁為對照品測定甘草中總黃酮含量，加入鋁離子試劑，同時 控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物在可見區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。
2. 2測定方法建立 2.2.1樣品處理甘草經(jīng)粉碎后過65目篩，細(xì)粉于烘箱中6(TC干燥4h待用。
2. 2. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密稱取12(TC干燥恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 10mg，加80%乙醇溶解，定容至50ml容量瓶中，搖勻，制成濃度為0. 2mg/L的標(biāo)準(zhǔn) 品溶液。分別取標(biāo)準(zhǔn)品溶液O. O，O. 2，0. 5，1.0，2. 0，3. 0，4. Oml于10ml容量瓶中，加5%亞 硝酸鈉0. 4ml，放置6min后，加10%硝酸鋁0. 4ml，放置6min，再加4%的氫氧化鈉4ml，加 水至刻度，搖勻，放置15min，進(jìn)行全波長掃描，在510nm處均有最大吸收。以測定結(jié)果計(jì)算 得直線方程C = 79. 22A-0. 466， r = 0. 9978。 2. 2. 3供試品溶液制備精密稱取樣粉lg于燒瓶中，加入80%乙醇60ml，將此燒瓶 放入MCL 23型連續(xù)微波反應(yīng)器中，調(diào)整功率400W，反應(yīng)時間20min。將提取液轉(zhuǎn)移到100ml 容量瓶中，用85%乙醇定容，作為供試品溶液。 2. 2. 4樣品含量測定精密吸取供試品溶液2. Oml，置10ml容量瓶中，按與標(biāo)準(zhǔn)曲線
相同的方法顯色測定。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品總黃酮含量為1.821%。 2. 2. 5樣品經(jīng)減壓濃縮干燥得到甘草提取物。 實(shí)施例2甘草提取物的藥理活性。 1實(shí)驗(yàn)材料 1. 1藥品與試劑 甘草提取物，實(shí)施例1方法制備；地塞米松片，國藥準(zhǔn)字H33020822，浙江仙瓊制 藥有限公司生產(chǎn)，批號040904 ;三硝基苯磺酸鈉(TNBS)，天津市福晨化學(xué)試劑生產(chǎn)廠生
產(chǎn)，批號20041112 ;髓過氧化物酶(MPO)試劑盒，南京建成生物工程研究所提供，批號
20050428。 1. 2實(shí)驗(yàn)儀器 UV-9100型紫外分光光度計(jì)，北京瑞利分析儀器公司生產(chǎn)；BS110sartorius電子 天平，北京賽多里斯有限公司生產(chǎn)；HH. Sll-2型水浴鍋，北京長安科學(xué)儀器廠生產(chǎn)。
1. 3實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠，體質(zhì)量(20士2)g，雌雄兼用。
2方法及結(jié)果
2. 1造模和給藥 小鼠按性別、體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對照組，TNBS模型組，陽性對照組，甘草提取物 大、中、小劑量組?？瞻讓φ战M和TNBS模型組灌胃等容量生理鹽水，陽性對照組灌胃地塞米 松O. 2mg/kg，甘草提取物大、中、小劑量組分別灌胃300mg/kg、200mg/kg、100mg/kg。各組每 天給藥l次，連續(xù)給藥14d。 第ld給藥后lh，YM輕度麻醉小鼠，用直徑2mm灌腸器(蘸取少量液體石蠟)從肛 門插入結(jié)腸約4cm處灌腸造模。其中空白對照組灌腸NSO. lmL/只；TNBS模型組，陽性對照組，甘草提取物大、中、小劑量組灌腸2XTNBS(用50X乙醇作溶媒)0. lmL/只。第7d，空白 對照組灌腸NS 0. ImL/只，其余各組灌腸1 % TNBS (用50 %乙醇作溶媒)0. ImL/只。
2. 2統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS10. 0統(tǒng)計(jì)軟件包分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。
2. 3觀察指標(biāo)及結(jié)果 2. 3. 1甘草提取物對TNBS所致UC小鼠體質(zhì)量的影響 分別于造模前及造模后隔日稱小鼠體質(zhì)量，觀察各組小鼠體質(zhì)量變化。結(jié)果表明 300mg/kg、200mg/kg、 100mg/kg對TNBS所致UC小鼠體質(zhì)量下降有明顯抑制作用。
權(quán)利要求
一種甘草提取物的分離方法，其特征在于甘草經(jīng)粉碎后過65目篩，細(xì)粉于烘箱中60℃干燥4h，精密稱取樣粉1g于燒瓶中，加入80％乙醇60ml，將此燒瓶放入MCL 23型連續(xù)微波反應(yīng)器中，調(diào)整功率400W，反應(yīng)時間20min。將提取液經(jīng)減壓濃縮干燥得到甘草提取物。
2. 含有如權(quán)利要求1所述的甘草提取物的藥物組合物。
3. 如權(quán)利要求1所述的甘草提取物在制備藥物中的應(yīng)用。
4. 如權(quán)利要求3所述的甘草提取物在制備人或動物潰瘍性結(jié)腸炎藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及用微波萃取法分離甘草得到甘草提取物并確定了該提取物在小鼠潰瘍性結(jié)腸炎中的應(yīng)用。本發(fā)明方法簡單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，產(chǎn)品純度高。
文檔編號A61P1/04GK101757092SQ20081017577
公開日2010年6月30日 申請日期2008年11月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月7日
發(fā)明者張炎 申請人:南通芯迎設(shè)計(jì)服務(wù)有限公司