專利名稱：羅莫肽注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于化療或放療引起的白細(xì)胞減少的羅莫肽注射液及其制 備方法。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤已經(jīng)成為威脅人類健康和生命的嚴(yán)重疾病之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界
每年新診斷癌癥患者1000余萬人、患者總數(shù)4000萬人、死亡710萬人，與感 染和心腦血管病列致死率前三位。我國惡性腫瘤平均每年發(fā)病200萬人、死亡 160萬人，占全國平均每年總死亡人數(shù)的18.63%,在城巿地區(qū)居各類死因之首。 抗腫瘤藥和免疫調(diào)節(jié)劑位于國內(nèi)醫(yī)院用藥銷售額第五位(占13.44%)。化療和 放療是抗癌治療的重要手段并已取得了顯著療效，但是因其毒副作用大，如抑 制骨髓造血系統(tǒng)引起白細(xì)胞和血小板減少伴有感染和出血的危險(xiǎn)，妨礙了其使 用，更多的病人因腫瘤及其治療使免疫功能下降，造成惡性循環(huán)危及生命。
羅莫肽屬于胞壁酰二肽類免疫增強(qiáng)劑，是分枝桿菌細(xì)胞壁骨架(如胞必佳) 的免疫活性成分，它能通過激活單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)產(chǎn)生造血調(diào)控因子，具有同 時(shí)升高白細(xì)胞和血小板的特點(diǎn)，在臨床上主要用于抗癌治療(化療或放療)產(chǎn)生 的繼發(fā)性骨髓抑制，促進(jìn)外周血白細(xì)胞和血小板數(shù)目的增加，可防止病人感染、 減少化療劑量、縮短化療的療程間隔，從而有效地改善化療效果，與重組細(xì)胞 因子類藥物相比，具有同時(shí)促進(jìn)白細(xì)胞和血小板生成、恢復(fù)免疫功能、分子小 結(jié)構(gòu)單一、可以大量合成、純度高、質(zhì)量穩(wěn)定容易控制、療效較高毒性低、生 物污染少等特點(diǎn)。羅莫肽同時(shí)促進(jìn)白細(xì)胞和血小板生成，對于大劑量化療也是 有效的，如有的文獻(xiàn)就是用羅莫肽治療大劑量卡鉑化療后的白細(xì)胞和血小板減 少取得了較好療效。在曰本腫瘤病人在放化療開始的同時(shí)就普遍使用羅莫肽，已經(jīng)成為常規(guī)用藥，使病人在整個(gè)治療期間比較穩(wěn)定，耐受性好。
羅莫肽由日本Shiba等首先合成，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為N2-(N-乙酰胞壁酰-L-丙氨 酰-D-異谷氨酰胺)-N 6-硬脂酰-L-賴氨酸，相當(dāng)于五肽，分子式為C43H78N6013, 分子量為887.12。其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，能夠促進(jìn)正常及骨髓損傷模型動(dòng)物(如照射 造成的豚鼠、狗或小鼠模型以及環(huán)磷酰胺或卡鉑造成的小鼠或猴)的造血作用， 升高白細(xì)胞數(shù)尤其是中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞數(shù)，同時(shí)增強(qiáng)其吞噬、趨化和分泌 活性氧等功能，也使豚鼠、狗和猴的血小板數(shù)顯著增加；對動(dòng)物的神經(jīng)肌肉、 呼吸和心血管功能無顯著影響，也沒有致突變和致畸胎作用。日本第一制藥公 司開發(fā)成功，于1991年被批準(zhǔn)上巿，其制劑注射用凍干粉針劑商品名為Nopia， 主要用于化療或放療腫瘤病人，促進(jìn)白細(xì)胞數(shù)和血小板數(shù)迅速恢復(fù)到正常水平。
但由于羅莫肽理化性質(zhì)較為特殊，在水溶液中幾乎不溶解，而且水溶液中 含有極其微量的羅莫肽后非常容易轉(zhuǎn)化成凝膠體系，因此目前曰本上巿的劑型 為注射用凍干粉針，但該制劑注射時(shí)必須使用特殊的溶酶先行溶解，溶解過程 很長，而且獲得的羅莫肽注射液外觀并不能完全呈澄明狀態(tài)，帶有一定的乳光， 到目前為止還沒有個(gè)人和機(jī)構(gòu)將上述問題加以解決。目前日本上巿的羅莫肽注 射用凍干粉針其臨床使用需要用特殊的溶劑進(jìn)行復(fù)溶,復(fù)溶時(shí)間長給使用帶來 不便，溶解后有乳光且易引起二次污染，因此使用臨床上能接受的合適的注射 用溶酶制成穩(wěn)定、澄明的羅莫肽注射液具有重要意義。本發(fā)明現(xiàn)已解決這些問 題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了 一種最適合臨床應(yīng)用的羅莫肽注射液。 為實(shí)現(xiàn)發(fā)明目的，本發(fā)明釆用以下技術(shù)方案
羅莫肽注射液，該注射液包含有效量的作為活性成分的羅莫肽，與羅莫凍干粉針一致。
所述注射液為無菌注射液。
所述注射液還包含溶劑、pH調(diào)節(jié)劑和緩沖溶劑。
所述的溶劑為有機(jī)溶劑。如乙醇、甘油、1，2-丙二醇、低分子量聚乙二 醇或它們的混合物。優(yōu)選乙醇。在實(shí)驗(yàn)過程中我們驚訝地發(fā)現(xiàn)羅莫肽先用少量 乙醇或含有乙醇的混合物溶解羅莫肽后，再將該溶液溶解在合適的水溶液體系 中，即能完全解決發(fā)明背景中所表述的所有問題，除甲醇外，我們尚未發(fā)現(xiàn)可 以替代乙醇的溶劑，但甲醇有毒性，不能用作注射液的溶劑。
所述緩沖液亦為溶劑。如醋酸-醋酸鈉緩沖液、枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液、 乳酸-乳酸鈉緩沖液、酒石酸-酒石酸鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、 磷酸氫二鉀-磷酸二氫鉀緩沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液。優(yōu)選磷酸氫二鈉-磷 酸二氫鈉緩沖液。
所述pH調(diào)節(jié)劑為有機(jī)酸或無機(jī)酸。pH調(diào)節(jié)劑選自不同濃度的無機(jī)酸或有機(jī) 酸，如鹽酸、乳酸、枸櫞酸、丙酸、甲酸、碳酸、鹽酸、酒石酸、偏磷酸、硫 酸、硝酸、硼酸、丁酸、依地酸、山梨酸、水楊酸、月桂酸、苯甲酸。
所述pH調(diào)節(jié)劑為有機(jī)堿或無機(jī)堿。pH調(diào)節(jié)劑選自不同濃度的有機(jī)堿或無機(jī) 堿，如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、乙二胺、二乙胺、三乙醇胺、三乙胺。
所述pH調(diào)節(jié)劑為飽和鹽溶液。如磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、 磷酸氫二鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、醋酸鈉、醋酸鉀、酒石酸鈉、酒石酸鉀、枸 櫞酸鈉、枸櫞酸鉀。
所述溶劑的用量為總體積的5%~50%,優(yōu)選10%。
所述溶劑緩沖液的用量為總體積的50%~95%。 所述溶液的pH值為6. 5 ~ 8.0。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種羅莫肽注射液的制備方法，該方法包括如 下步驟
(1) 緩沖液的配制；
(2) 溶解羅莫肽、加緩沖液、調(diào)pH值、除熱原；
(3) 分裝。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是與注射粉針相比，注射液無需溶解，解決了包裝和運(yùn)輸 成本；所獲得的注射液溶液完全呈澄明狀態(tài)，而現(xiàn)行日本的制劑用特殊溶酶溶 解后帶有一定的乳光，因此本發(fā)明制劑使用更方便、安全，且避免了二次污染 的可能，可以節(jié)約時(shí)間，提高醫(yī)護(hù)人員的工作效率。
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明并不受這些實(shí)施例 的限制。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l:制備羅莫肽注射液 制劑配方
羅莫肽 0.20g 乙醇 100ml 磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液 .加至1000ml 制成 1000支
(1) 緩沖液的配制分別稱取無水磷酸氫二鈉8.31g, 二水磷酸二氫鈉 2.24g，加水至1000ml，加0.2% (g/v)活性炭，攪拌均勻，靜置15分鐘，濾 過除炭，溶液備用。
(2) 將羅莫肽按處方比例溶于乙醇中，然后加入磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉 緩沖液，加熱至45。C，攪拌30分鐘，調(diào)節(jié)pH值至6.5-8.0,然后用超濾器除熱原，濾液用0，22jum微孔濾膜過濾除菌，測定溶液中羅莫肽的含量，確定準(zhǔn) 確裝量，分裝，充入氮?dú)夂蠓饪凇?實(shí)施例2:制備羅莫肽注射液 制劑配方
羅莫肽 0.20g 1，2-丙二醇 50ml
乙i
磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液
50ml
加至1000ml
制成 1000支
(1) 緩沖液的配制分別稱取無水磷酸氫二鈉8. 31g，磷酸二氫鉀1.95g， 加水至lOO(kl,加0.2% (g/v)活性炭，攪拌均勻，靜置15分鐘，濾過除炭， 溶液備用。
(2) 將羅莫肽按處方比例溶于乙醇和1，2-丙二醇的混合溶劑中，然后加入 磷酸鹽緩沖液，加熱至45'C，攪拌30分鐘，調(diào)節(jié)pH值至6.5-8.0,然后用超 濾器除熱原，濾液用0.22nm微孔濾膜過濾除菌，測定溶液中羅莫肽的含量， 確定準(zhǔn)確裝量，分裝，充入氮?dú)夂蠓饪凇?br> 實(shí)施例3:制備羅莫肽注射液
制劑配方:
羅莫肽 乙醇
醋酸-醋酸鈉緩沖液
0. 20g
200ml 加至1000ml
制成 1000支
(1)緩沖液的配制分別稱取醋酸鈉6. 8g,醋酸適量，加水至1000ml，使其PH為6. 5-8. 0,加O. 2% (g/v)活性炭，攪拌均勻，靜置15分鐘，濾過 除炭，溶液備用。
(2)將羅莫肽按處方比例溶于乙醇中，然后加入醋酸-醋酸鈉緩沖液，加 熱至45'C，攪拌30分鐘，調(diào)節(jié)pH值至6.5 8. 0,然后用超濾器除熱原，濾液 用0.22Mm微孔濾膜過濾除菌，測定溶液中羅莫肽的含量，確定準(zhǔn)確裝量，分 裝，充入氮?dú)夂蠓饪凇?實(shí)施例4:制備羅莫肽注射液 制劑配方
羅莫肽 0.20g 聚乙二醇200 100ml 乙醇 100ml 醋酸-醋酸鈉緩沖液 加至1000ral
制成 1000支
(1) 緩沖液的配制分別稱取醋酸鈉6. 8g,醋酸適量，加水至1000ml, 使其pH為6. 5-8. 0，加0.2% (g/v)活性炭，攪拌均勻，靜置15分鐘，濾過 除炭，溶液備用。
(2) 將羅莫肽按處方比例溶于乙醇和聚乙二醇200的混合溶劑中，然后加 入醋酸-醋酸鈉緩沖液，加熱至45'C，攪拌30分鐘，調(diào)節(jié)pH值至6. 5~8. 0， 然后用截流分子量5000的超濾器除熱原，濾液用0.22/im微孔濾膜過濾除菌，
測定溶液中羅莫肽的含量，確定準(zhǔn)確裝量，分裝，充入氮?dú)夂蠓饪凇?實(shí)施例5:羅莫肽注射液穩(wěn)定性試驗(yàn) 一、放置條件
將羅莫肽溶液分別置60。C、 40°C、 30°C、 25°C、 COOLX光照條件下放置10天，于第5、 IO天取樣測定。
二、 檢測方法
1. 外觀目測
2. 有關(guān)物質(zhì):HPLC法.
儀器曰本島津高效液相色譜儀 色譜柱018柱(150mm x 4. 6mm, 5pm)
流動(dòng)相甲醇_乙腈-0. 02mol/L乙酸銨緩沖液(用冰醋酸調(diào)pH4. 8 ) =18: 60: 22
檢測波長220nm
測定法取本品樣品溶液作為供試品溶液；精密量取供試品溶液lml，用流 動(dòng)相稀釋至100ml，搖勻，作為對照溶液。精密量取對照溶液20yl注入液相色 譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分峰的峰高為滿量程的15%，再量取供試品溶液 20yl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的3倍，計(jì)算有關(guān)物質(zhì)。
3. 含量
色譜條件同有關(guān)物質(zhì)
測定法取本品樣品溶液作為供試品溶液；另精密稱取羅莫肽對照品適量， 用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每亳升含200 ng的溶液作為對照品溶液，分別量取20
jal注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法，以峰面積計(jì)算含量。
三、 檢測結(jié)果
表l:高溫試驗(yàn)結(jié)果 . 1￥ il ^F1 含量(％)~
^ 無色澄明液體 ^71
5天 無色澄明液體 67.810天無色澄明液體31. 2
40。C5天 IO天無色澄明液體 無色澄明液體98. 6 95. 3
30。C5天 10天無色澄明液體 無色澄明液體98.5 96.9
25。C5天 IO天無色澄明液體 無色澄明液體99. 2 99. 4
表2:光照試驗(yàn)結(jié)果時(shí)間外觀有關(guān)物質(zhì)(％)含量(°/ )
o天無色澄明液體4. 3699. 3
5天無色澄明液體4. 3399. 1
10天無色澄明液體4. 3899. 2
結(jié)果6(TC條件下放置10天，樣品外觀無明顯變化，有關(guān)物質(zhì)明顯增加，含 量明顯下降；40。C條件下條件下放置10天，樣品外觀無明顯變化，有關(guān)物質(zhì) 略有增加含量沒有發(fā)生明顯變化；30。C條件下放置10天，樣品外觀無明顯變 化，有關(guān)物質(zhì)略有增加，含量略有下降；25'C條件下放置10天，樣品各項(xiàng)檢 測指標(biāo)均無明顯變化，與0天一致。說明本品對高溫不穩(wěn)定，應(yīng)在陰涼處密封 保存，且在制備過程中也應(yīng)避免長時(shí)間45。C以上的高溫。
10
權(quán)利要求
1、羅莫肽注射液，包含有效量的作為活性成分的羅莫肽、溶劑、pH調(diào)節(jié)劑和緩沖溶劑。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述的溶劑選自含有 乙醇或含有乙醇與甘油、1,2-丙二醇、低分子量聚乙二醇的混合物。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述的溶劑優(yōu)選乙醇。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述溶劑的用量為總 體積的5%~50%。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述溶劑的用量優(yōu)選10%。
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述的緩沖溶劑選自 醋酸-醋酸鈉緩沖液、枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液、乳酸-乳酸鈉緩沖液、酒石酸-酒石酸鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鉀-磷酸二氫鉀緩 沖液、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液。
7、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述的緩沖溶劑優(yōu)選磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液。
8、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅莫肽注射液，其特征在于所述溶液的PH值為 6. 5 ~ 8.0。
9、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅莫肽注射液的制備方法，該方法包括如下步驟:(1) 緩沖液的配制；(2) 溶解羅莫肽、加緩沖液、調(diào)pH值、除熱原；(3) 分裝。
全文摘要
本發(fā)明提供一種羅莫肽注射液，包含有效量的作為活性成分的羅莫肽、溶劑、pH調(diào)節(jié)劑和緩沖溶劑。上述羅莫肽注射液的制備方法是將處方量的羅莫肽置適宜的容器內(nèi)，加入處方量的溶劑溶解，然后加緩沖液至總量，水浴，攪拌溶解，然后用超濾器除熱原、微孔濾膜過濾除菌，分裝，封口。
文檔編號A61K38/08GK101549146SQ20081010333
公開日2009年10月7日 申請日期2008年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月3日
發(fā)明者浩 丁, 溫守明, 陳小平 申請人:北京嘉事聯(lián)博醫(yī)藥科技有限公司