專利名稱：：蛇葡萄莖葉總黃酮及單一成分楊梅素的醫(yī)藥新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明是關(guān)于蛇葡萄屬植物莖葉總黃酮及單一成分楊梅素的醫(yī)藥新用途，用于預(yù)防和治療老年癡呆疾病的應(yīng)用及其藥物制劑，本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。'
背景技術(shù)：
：老年癡呆癥將是我國對人們健康危害最大的精神疾病之一。老年癡呆癥主要可分為腦血管性老年癡呆、阿爾茨海默型癡呆、混合型和其它型等。老年人因腦血管障礙而致的腦細(xì)胞老化，使思考、運(yùn)動等傳遞受阻引起的癡呆稱為腦血管性老年癡呆。腦動脈硬化、腦血栓、腦溢血以及高血壓等容易引起本病，約40%的科學(xué)家認(rèn)為，老年癡呆癥主要發(fā)病原因之一是腦血管病與某些腦神經(jīng)中樞及功能上的聯(lián)系發(fā)生了損害。隨著我國人口老齡化，老年癡呆癥患者將日益增多，且發(fā)病年齡有提前趨勢，因而老年癡呆癥將成為本世紀(jì)威脅人類健康最嚴(yán)重的疾病之一，同時也將給我們帶來沉重的社會和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，尋找治療老年性癡呆癥的有效藥物，已成為醫(yī)藥領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。并且具有良好的社會效益。蛇葡萄屬莖葉總黃酮(主要成分為二氫楊梅素、楊梅素、楊梅苷等)發(fā)現(xiàn)其有抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、保肝、發(fā)汗、促進(jìn)唾液腺分泌、改善免疫功能、解酒、興奮胃腸平滑肌、抗突變等多種生物活性，并且長期服用沒有無明顯毒副作用。楊梅素是我們從葡萄科植物蛇葡萄或同屬其他植物中得到的(專利楊梅素的制備方法、藥物制劑及醫(yī)藥新用途，申請?zhí)?00810050558.5)其含量高，毒副作用小，工藝簡單，生產(chǎn)周期短。已經(jīng)報道的藥理作用有抑制血小板聚集、楊梅素對膠原、花生四烯酸及PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集有抑制作用，具有抗PAF作用，為一新的PAF受體拈抗劑。具抗血栓、抗心肌缺血、改善微循環(huán)、降血糖、抗氧化、保肝護(hù)肝、解輕乙醇中毒、抗腫瘤、抗突變、預(yù)防齲齒、消除體內(nèi)自由基等多種藥理活性。蛇葡萄莖葉總黃酮和楊梅素用于預(yù)防和治療老年癡呆疾病未見報道，其具有廣泛的應(yīng)用前景。楊梅素(myricetin)的結(jié)構(gòu)
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一提供了單一成分楊梅素及蛇葡萄莖葉總黃酮在治療老年癡呆疾病中的應(yīng)用。具體的說楊梅素及蛇葡萄莖葉總黃酮用于制備防治老年癡呆藥物的新用途。經(jīng)動物實(shí)驗(yàn)，能夠顯著改善癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能，并能明顯提高SOD的活性，降低MDA的含量，提高腦系數(shù)，最終提供安全有效可用于預(yù)防和治療老年癡呆的藥物制劑。本發(fā)明的目的之二是提供了蛇葡萄莖葉總黃酮及單一成分楊梅素的藥物制劑，主要為口服制劑。所說的口服制劑選自于片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑中的任何一種。本發(fā)明的目的之三是藥物優(yōu)選含有1%—99%的楊梅素或總黃酮和99%—1%的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。藥物中的輔料是指常規(guī)的賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑等。本發(fā)明藥物中的其它配伍用的藥物，指的是以有效劑量的楊梅素或總黃酮為一定的藥物原料，再配伍其它已允許合用的中藥或化學(xué)藥口n卩o本發(fā)明的楊梅素是從蛇葡萄屬植物莖葉中提取而得(專利楊梅素的制備方法、藥物制劑及醫(yī)藥新用途，申請?zhí)?00810050558.5):蛇葡萄或顯齒蛇葡萄lkg，加水15000ml，加入氧化鈣20g，加熱煎煮1.5h，濾過，濾渣加水10000ml，煎煮lh，過濾，濾渣再加水10000ml，煎煮lh，過濾，合并三次濾液，濃縮至2000ml，用稀鹽酸調(diào)PH為6-7，放置過夜，離心，殘?jiān)?5%乙醇5000ml加熱溶解，放冷，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水至1000ml，放置過夜，濾過，濾渣干燥得黃色楊梅素晶體58.3g，含量為95以上％。本發(fā)明的蛇葡萄屬植物莖葉總黃酮制備方法蛇葡萄或顯齒蛇葡萄lkg，加10倍量水，加熱煎煮lh，過濾，濾渣再加8倍量水，煎煮lh，過濾，合并兩次濾液，濃縮，放置析晶，過濾，干燥得總黃酮，收率20%以上，總黃酮含量為60%以上。楊梅素、蛇葡萄屬植物莖葉總黃酮及其藥物制劑具有預(yù)防和治療老年癡呆疾病的作用，這些藥理作用，通過以下藥效學(xué)試驗(yàn)例得到證實(shí)。1、楊梅素及總黃酮對老年癡呆模型小鼠腦線粒體超氧化物歧化酶S0D活性、丙二醛(MDA)含量及腦系數(shù)的影響。取小鼠90只，隨機(jī)分為正常對照組和模型組。模型組給A1C13溶液，開始70天按400mg/kg/d灌胃，以后-一直用2000mg/LAlCl3溶液飲用；正常對照組灌胃等量的蒸餾水。將模型組隨機(jī)分為8組，按表l所示，灌胃給藥60天，正常對照組癡呆模型組灌以等量的蒸餾水。整個實(shí)驗(yàn)過程避免與鋁制品接觸。處死小鼠，于冰浴中迅速取出腦組織，并精確稱取，分別測定SOD、MDA和計(jì)算腦系數(shù)。表l楊梅素及總黃酮對老年癡呆模型小鼠腦SOD活性、MDA含量及腦系數(shù)的影響(n=10，X±S)~~i力物數(shù)(只)劑量(mg/kg)~~~SOD——MDA國—腦系f*與正常組比較，*P〈0.05，**P〈0.01;a與模型組比較，AP<0.05，aaP〈0.01模型對照組腦SOD活性降低，MDA含量增加，腦系數(shù)減少(P〈0.05)。與模型組比較，楊梅素高、中、低劑量組SOD活性升高，MDA含量降低，總黃酮高、中劑量組SOD活性升高，MDA含量降低(P〈0.05或P〈0.01)說明楊梅素及總黃酮具有明顯的抗氧化作用，改善自由基在體內(nèi)的過正常對照10300.5±60.515.8±3.60.415±0.05810223.6±55.8*24.3±4.8*0.341±0.031*10120315.6士66.9a12.6土3.8aa0.468士0.106a1060295.1土60.2a16.8土4.2a0.429土0.086a1030280.1土55.8a20.2±3.90.362±0.06610200306.8士60.8a15.2土4.0a0.435士0.078a1000286.8士48.5a17.0土3.6a0.401土0.068a1050244.8±50.922.7±4.90.359±0.05710600304.2士66,8a11.5士4.6aa0.455士0細(xì)a組素素素酮酮酮康型梅梅梅黃黃黃復(fù)模楊楊楊總總總腦量代謝。楊梅素及總黃酮高、中劑量組腦系數(shù)顯著增加(P〈0.05)，從而說明有抗腦萎縮的作用。2、楊梅素及總黃酮對老年癡呆模型乙酰膽堿含量的影響。取小鼠90只，隨機(jī)分為正常對照組和模型組。模型組給A1C13溶液，開始70天按400mg/kg/d灌胃，以后一直用2000mg/LAlCl3溶液飲用；正常對照組灌胃等容的蒸餾水。將模型組陣機(jī)分為8組，按表2所示，灌胃給藥60天，正常對照組癡呆模型組灌以等體積的蒸餾水。整個實(shí)驗(yàn)過程避免與鋁制品接觸。大鼠斷頭處死，迅速開顱剝離腦組織(去除小腦組織)，取部分腦組織生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，加入冷生理鹽水放入勻漿管在冰浴中充分研碎，制成10%的腦勻漿，離心，取上清用比色法測定腦組織乙酰膽堿酶含量。表2楊梅素及總黃酮對老年癡呆模型乙酰膽堿含量的影響(『10，X±S)^;物iT(只)""劑量;g/kg)—*與正常組比較，*P《).05，**P〈0.01;a與模型組比較，aP〈0,05，aaP〈0.01各治療組和模型組比較，AchE含量降低，并有顯著性差異。3、蛇葡萄屬莖葉總黃酮及楊梅素對A1C13致小鼠記憶障礙的影響取小鼠90只，隨機(jī)分成9組，按表3分組。第1天至第7天，對照組每天皮下注射生理鹽水，其余各組小鼠皮下注射A1C1350mg/kg。用藥組分別灌胃連續(xù)給藥2周。進(jìn)行避暗試驗(yàn)，記錄3min內(nèi)小鼠進(jìn)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>入暗室的錯誤次數(shù)，24h后以錯誤次數(shù)及錯誤百分率測驗(yàn)記憶成績。表3、蛇葡萄屬莖葉總黃酮及楊梅素對AlC13致小鼠記憶障礙的影響(n二10，X±S)ii5動物數(shù)(只)劑量(mg/kg)錯誤次數(shù)(3min)錯誤發(fā)生率(％)*與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01;a與模型組比較，aP〈0.05，aaP〈0.01說明楊梅素與蛇葡萄屬莖葉總黃酮不同計(jì)量對A1C13致記憶障礙均有不同程度的對抗效果。4、蛇葡萄屬莖葉總黃酮及楊梅素對東莨菪堿致小鼠記憶障礙的影響取小鼠90只，隨機(jī)分成9組，按表4分組。第1天至第7天，對照組及模型組給蒸餾水，其余各組按表4給藥。每天一次，連續(xù)7天，末次給藥lh后，正常組給生理鹽水0.1ml/10g，其余各組給氫溴酸東莨菪堿3mg/kg，10min后進(jìn)行跳臺實(shí)驗(yàn)，24h后進(jìn)行測試。結(jié)果見表4。表4蛇葡萄屬莖葉總黃酮及楊梅素對東莨菪堿致小鼠記憶障礙影響(n=10，X±S)組別動物數(shù)(只)~~劑量(mg/kg)錯誤次數(shù)(3min)與模型組比較，aP〈0.05，二、厶P〈0.0]正常對照100.1±0.210102.0±0.9**80**1012020a10600.4土0.5aa20a10300.5土0.7aa20a102000.4土0.6aa20a101000.4士0.5aa3010500.5士0.7aa40106000.3士0.5aa20a100.33±0.444.52±1.88101201.00土0.66aa10601.38士0.72aa10301.69土0.99aa102001.45士0.86aa101001.76士1.15aa10501.95士1.35a106001.68士0.98aa組素素素嗣鵬嗣康型梅櫞梅黃黃黃復(fù)模楊楊楊總總總腧組素素素酮酮酮康型梅梅梅黃黃黃復(fù)模楊楊楊總總總腦8氫溴酸東莨菪堿組小鼠錯誤次數(shù)較正常組顯著增加，用藥組明顯減少了小鼠的錯誤次數(shù)，對氫溴酸東莨菪堿組所致的小鼠記憶障礙有明顯的對抗作用。說明楊梅素與蛇葡萄屬莖葉總黃酮不同計(jì)量對AlCl3致記憶障礙均有不同程度的對抗效果。5、小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)以動物能耐受的最大給藥濃度(0.5g/ml)、小鼠最大給藥容積(0.4ml/10g體重)一日內(nèi)灌胃給藥l次，連續(xù)觀察7天內(nèi)有無毒性反應(yīng)及動物死亡。測得結(jié)果是小鼠7天內(nèi)動物均無一死亡，在此劑量下未觀察到明顯急性毒性反應(yīng)。其小鼠最大給藥量為20g/kg體重/d。具體實(shí)施例方式結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但本發(fā)明不受實(shí)施例的任何限制。實(shí)施例1(膠囊劑)楊梅素或總黃酮原料100g，藥用淀粉適量，混合均勻，制粒，干燥，整粒，裝入1號膠囊，制成1000粒，即得。楊梅素每次l粒、總黃酮每次2粒，每日3次。實(shí)施例2(片劑)楊梅素或總黃酮原料100g，藥用淀粉適量，糊精適量，混合均勻，制粒，干燥，整粒，干燥，加入潤滑劑適量，壓片，制成iooo片，即得。楊梅素每次l片、總黃酮每次2片。每日3次。實(shí)施例3(滴丸劑)稱取30g聚乙二醇4000，在水浴上熔化，加楊梅素或總黃酮原料10g，攪拌均勻，傾入保溫管中，調(diào)節(jié)恒溫裝置，使藥液在80_90°C下滴入冷卻過的液體石蠟中，滴完后，將藥丸傾入濾紙上吸干石蠟油，制成1000粒，即得。楊梅素每次10粒、總黃酮每次20粒。每日3實(shí)施例4(顆粒劑)楊梅素或總黃酮原料100g，糖粉400g，混合均勻，用適量乙醇制粒，干燥、整粒、分裝，制成500袋，即得。楊梅素每次0.5袋、總黃酮每次l袋。每日3次。權(quán)利要求1、葡萄科蛇葡萄屬AmpelopsisMichx植物蛇葡萄(Ampelopsissinica(Miq.)W.T.Wang)莖葉和顯齒蛇葡萄(Ampelopsisgrossedetata(Hand-Mazz)W.T.wang)莖葉總黃酮和單一成分楊梅素在預(yù)防和治療老年癡呆疾病藥物中的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的應(yīng)用其特征在于含有有效治療劑量的楊梅素單體或總黃酮和一種或多種藥學(xué)上可接受的藥用賦形劑，或可與楊梅素或總黃酮組方的其它藥物制成的制劑。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物制劑，其特征在于優(yōu)選含有1%—99%的楊梅素或總黃酮和99%—1%的藥用賦形劑或其它可組方的藥物。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物制劑，其特征在于所說的藥物是口服制劑的劑型。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物制劑，其特征在于所說的口服制劑選自于片劑、丸劑、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑當(dāng)中的任何一種。6、權(quán)利要求2所述的藥用賦形劑包括填充劑、崩解劑等，填充劑選自淀粉、乳糖、微晶纖維素、糊精、磷酸鈣等；崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)聚維酮；也可選加黏合劑、潤濕劑和潤滑劑。全文摘要本發(fā)明公開了蛇葡萄屬AmpelopsisMichx植物蛇葡萄(Ampelopsissinica(Miq.)W.T.Wang)莖葉和顯齒蛇葡萄(Ampelopsisgrossedetata(Hand-Mazz)W.T.wang)莖葉總黃酮及單一成分楊梅素藥物制劑及醫(yī)藥新用途。具體用于制備預(yù)防和治療老年癡呆疾病。制備的藥物可以只含總黃酮或楊梅素，也可以是含總黃酮或楊梅素的組合物；可以是片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑或注射劑等藥物制劑。文檔編號A61P25/28GK101297900SQ200810050829公開日2008年11月5日申請日期2008年6月16日優(yōu)先權(quán)日2008年6月16日發(fā)明者南敏倫,赫玉芳,趙全成申請人:趙全成