專利名稱：：皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥制劑的質(zhì)量控制方法領(lǐng)域，具體涉及皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法。二
背景技術(shù)：
：皮膚病血毒制劑原料藥由中藥材茜草、桃仁、荊芥穗(炭)、蛇蛻(酒炙)、赤芍、當歸、白茅根、地膚子、蒼耳子(炒)、地黃、連翹、金銀花、苦地丁、土茯苓、黃柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防風、赤茯苓、白芍、蟬蛻、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鮮皮、熟地黃、大黃(酒炒)、忍冬藤、紫草、土貝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荊皮、雞血藤、浮萍、紅花等組成，為了有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們建立了制劑的質(zhì)量控制方法，該方法采用照薄層色譜法對黃柏、大黃、赤芍、白芍、牡丹皮、連翹、白茅根、桔梗、牛蒡子進行鑒別，并照高效液相色譜法以鹽酸小檗堿為指標進行含量測定，該質(zhì)量控制方法保證了皮膚病血毒制劑質(zhì)量檢測標準的準確性和先進性，能夠有效確保皮膚病血毒制劑的質(zhì)量，使該制劑在工業(yè)化大生產(chǎn)中質(zhì)量得以有效控制。三
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于公開皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的質(zhì)量控制方法包括以下鑒別和/或含量測定方法。本發(fā)明的鑒別方法是以下方法的一種或幾種①.取皮膚病血毒制劑7.2g，研細，加甲醇1535ml，置水浴上加熱回流10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃柏對照藥材0.1g，.加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(5~7:2~4:13:1~2:0.15-0.45)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。②.取皮膚病血毒制劑4.8g,研細，加甲醇525ml，超聲處理1030分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水515ml使溶解，加鹽酸0.51.5ml，置水浴上加熱20-40分鐘，取出，立即冷卻，加乙醚提取13次，每次515ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.1g，加甲醇同法制成對照藥材^液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4(^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，,以石神醚'(石油醚3060。0-甲酸乙酯-甲酸(1446:4~6:0.5-1.5)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈G65nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，M相同的五個相同顏色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色。10③.取皮膚病血毒制劑21.6g，研細，加甲醇2040ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取茜草對照藥材lg，加甲醇1030ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60卯。C)-丙酮(3~5:0.5-1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。④.取皮膚病血毒制劑14.4g，研細，加甲醇2040ml，置水浴上加熱回流20~40分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各l(Htl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇一乙酸乙酯(79:35:0.5-1.5)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于IOO'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。⑤.取皮膚病血毒制劑28.8g，研細，加乙醚2575ml，水浴上低溫回流0.5-1.5小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚lml使溶解，作為供試品溶液；另取白茅根對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1(^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點。(D.取皮膚病血毒制劑21.6g，研細，加甲醇2575ml，置水浴上加熱回流0.5~1.5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇46ml使溶解，加活性炭0.51.5g，振搖5~15分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲垸-甲苯-甲醇(4~6:2~4:4~6:2~4)為展開劑，預(yù)飽和20-40分鐘后展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的斑點。⑦.取皮膚病血毒制劑7.2g，研細，加鹽酸24ml與三氯甲烷2575ml，置水浴上加熱回流0.5-1.5小時，濾過,濾液蒸干,殘渣加乙醇lml使溶解,作為供試品溶液；另取桔梗對照藥材0.2g，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上,以石油醚(3060。C)-乙酸乙酯-冰醋酸(1535:6~8:0.25~0.75)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8%香草醛乙醇溶液與硫酸溶液(7—10)的混合溶液(0.51.5:911)，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。11⑧.取皮膚病血毒制劑28.8g，研細，加乙酸乙酯5070ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取牛蒡子對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸-甲醇-水(30~50:9~11:0.5~1.5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。本發(fā)明的含量測定方法是以下方法照高效液相色譜法測定；以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(40-45:55~60，每1000ml溶液中加入十二烷基磺酸鈉1.7g)為流動相，檢測波長為265i2nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于6000;對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取皮膚病血毒制劑，研細，取細粉約1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇-鹽酸(100:1)25~75ml，稱定重量，超聲處理2040分鐘，取出，放涼，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取上清液用微孔濾膜(0.45pm)濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10pl，注入液相色譜儀，測定，即得。本發(fā)明提供了黃柏、大黃、赤芍、白芍、牡丹皮、連翹、白茅根、桔梗、牛蒡子的薄層色譜鑒別，選擇了黃柏中有效成分鹽酸小檗堿作為含量測定指標，建立了皮膚病血毒制劑的含量測定方法；經(jīng)過多次重復(fù)試驗，確認方法簡便、重復(fù)性良好、結(jié)果準確可靠，可以作為皮膚病血毒制劑質(zhì)量控制指標。本發(fā)明實驗例中供試品所用制劑采用實施例1所述的皮膚病血毒片，也可用與實施例所述的皮膚病血毒片具有相同原料組成的其他制劑。實驗例鹽酸小檗堿的含量測定皮膚病血毒片為一大復(fù)方制劑，方中藥材用量均較少，其成分的含量也較低。經(jīng)試驗研究，皮膚病血毒片中芍藥苷的含量較高，但由于芍藥苷在赤芍、白芍和牡丹皮中均含有，專屬性不強，不宜選作含量測定的指標成分；皮膚病血毒片中鹽酸小檗堿的含量亦較高，小檗堿成分為本方中黃柏所獨有，專屬性較強。黃柏其功在清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡。是本方中的主藥，因此，可作為含量測定的指標成分。據(jù)文獻資料報道，黃柏中小檗堿成分的含量差異較大，不同產(chǎn)地黃柏中的小檗堿含量范圍為0.8~5.0%。為了更好地控制藥材和成品藥質(zhì)量，我們采用高效液相色譜法對其中的小檗堿進行含量測定，并確定以鹽酸小檗堿(C2()H17NCVHC1)計為皮膚病血毒片的含測指標成分。該方法具有靈敏度高，取樣量少，測定結(jié)果準確，重現(xiàn)性好，回收率高等優(yōu)點。以下為其方法學研究總結(jié)。1.儀器與試藥儀器TSP型高效液相色譜儀，P2000型泵，UV1000型紫外檢測器。試藥乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。對照品鹽酸小檗堿，由中國藥品生物制品檢定所購得。供試品皮膚病血毒片，規(guī)格每片重0.6g，由實施例l制得。2.色譜條件色譜柱KromasilC-18柱，100A，250x4.6mm;流動相乙腈一0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(42:58，每100ml溶液中加入十二垸基磺酸鈉1.7g)。檢測波長取鹽酸小檗堿對照品溶液(Cz0.0105mg/ml)，用紫外分光光度計從200400nm進行連續(xù)波長掃描。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿對照品在230.0nm、265.0nm和350.0nm波長處有3個吸收峰，我們參照文獻報導(dǎo)和分析認為，230.0nm處的光吸收雖強，但其波長較短，樣品中在此波長下很多物質(zhì)都有強吸收，干擾嚴重。在350.0nm波長處的吸收稍弱。故選用^265nm作為檢測波長。在上述分析條件下，鹽酸小檗堿峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度大于1.5以上，理論板數(shù)大于6000。3.對照品純度檢査配制一定濃度(C=0.0105mg/ml)的鹽酸小檗堿對照品，注入液相色譜儀，依法測定，按面積歸一化法計算，其含量為99.8%。4.提取條件選擇及提取完全性考察(1)提取溶劑的選擇鹽酸小檗堿在熱水中溶解，在水或乙醇中微溶，在甲醇中溶解，在氯仿中極微溶解，在乙醚中不溶。因此，我們設(shè)計了以甲醇、酸性甲醇回流，甲醇、酸性甲醇超聲提取等方法進行對比試驗。稱取同一批樣品，同法制成同體積的樣品溶液，按上述色譜條件依法測定，試驗結(jié)果請見表l表l提取溶劑的選擇試驗及結(jié)果試驗號溶劑系統(tǒng)取樣量(g)峰面積值含量(mg/g)1甲醇回流1.4903479753.80.33212酸性甲醇回流1.4803553317.50.3850、3甲醇超聲1.4937489194.70.33504酸性甲醇超聲1.4882566296.80.3931試驗結(jié)果表明，酸性甲醇(鹽酸-甲醇l:100)溶劑系統(tǒng)超聲處理的測定結(jié)果較高，故選擇酸性甲醇溶劑系統(tǒng)作為本方法的提取溶劑。選擇超聲處理作為本方法的提取方法。(2)提取完全性考察稱取同一批樣品約1.5g，精密加甲醇-鹽酸(100:1)各50ml，分別超聲處理IO、20、30、40分鐘，按正文方法依法測定，試驗結(jié)果請見表2表2提取完全性試驗及結(jié)果試驗號1234超聲時間(分鐘)10203040取樣量(g)1.51101.50921.52011.4912峰面積值505264.2571576.9727276.0697066.4含量(mg/g)0.29120.33130.41770,4091試驗結(jié)果表明，超聲處理提取30分鐘以后，其含量測定結(jié)果增加不明顯，說明己基本提取完全，故選擇酸性甲醇溶劑系統(tǒng)超聲處理30分鐘作為本方法的超聲提取時間。5.方法學考察(1)線性關(guān)系及范圍的考察精密吸取濃度為0.0105mg/ml的對照品溶液4、8、12、16、2(^1，分別注入液相色譜儀，依法測定。結(jié)果請見表3。以進樣量為橫坐標，峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線，并進行直線回歸，回歸方程為Y=3598052.9X+8655.14，r=0.9996。試驗結(jié)果表明，本方法進樣量在0.0420.21(ag范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。表3線性關(guān)系考察結(jié)果試驗號進樣體積(W)進樣量(Hg)峰面積積分值140.042152632.1280細313889.63120.126471240.04160.168614238.65200.21758048.7(2)精密度試驗精密吸取濃度為C=0.0105mg/ml的對照品溶液10^1，連續(xù)重復(fù)進樣5次，測定峰面積積分值，試驗結(jié)果請見表4表4精密度試驗及結(jié)果試驗號峰面積積分值平均值RSD(%)1388705.02389751.73387712.2389325.70.294389861.15390598.5試驗結(jié)果表明，鹽酸小檗堿對照品重復(fù)進樣5次，測得峰面積積分值的相對標準偏差RSD<2.0%，故認為本方法具有良好的精密度。(3)陰性空白對照試驗取除去黃柏的模擬處方，制成不含黃柏的空白樣品，按供試品溶液制法制成空白對照溶液。另取供試品溶液及對照品溶液(C=0.0105mg/ml)，按正文方法注入液相色譜儀，依法測定。試驗結(jié)果表明，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的保留時間位置上，有一對應(yīng)的單一色譜峰，而空白對照液色譜中，在該保留時間相應(yīng)位置處無相對應(yīng)的峰出現(xiàn)。說明陰性空白對其測定無干擾，其方法的專屬性較好。(4)穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液及同一濃度(C=0.0105mg/ml)的鹽酸小檗堿對照品溶液各10pl，分別按O、0.5、1、2、4、小時時間間隔，分別注入液相色譜儀中，依法進14行測定，試驗結(jié)果請見表5__表5穩(wěn)定性考察試驗及結(jié)果^!j試驗號放置時間(h)~~峰面積積分值平均值RSD(%)試驗結(jié)果表明，對照品及樣品中鹽酸小檗堿經(jīng)本方法測定，在4小時內(nèi)相當穩(wěn)定，其相對標準偏差分別為RSD-1.23。/。和RSD=1.78%。(5)重復(fù)性試驗精密稱取樣品細粉約1.5g，重復(fù)5份，按正文含量測定方法依法分別進行測定，試驗結(jié)果請見表6表6樣品重現(xiàn)性試驗及結(jié)果試驗號取樣量峰面積樣品含量平均含量RSD11.6039449737.90.229821.5984448339.80.229931.6236456480.50.23040.22910.9741.6118452539.50.230151.6034440285.40.2251試驗結(jié)果表明，5次重復(fù)測得該批樣品的平均含量為0.2291mg/片，經(jīng)統(tǒng)計其相對標準偏差為RSD=0.97%。結(jié)果說明本方法的重現(xiàn)性較好。(6)加樣回收試驗采用加樣回收試驗法。精密稱取同一批(批號20020901)己知含量(0.229lmg/片，平均片重為0.6019g，折合0.3806mg/g)的皮膚病血毒片樣品細粉約0.75g，分別精密加入鹽酸小檗堿對照品約0.20.3mg，按正文含量測定方法依法進行測定，試驗結(jié)果請見表7表7加樣回收試驗及結(jié)果試驗取樣量樣品中含加入對照品測得總含回收率平均回收RSD號(g)量(mg)量(mg)量(mg)(%)率(％)(%)10.64590.24580.30.540998.3720,60540.23040.30.523597.700駕70.23170.30.522496.卯98.921.8540.87590.33340.20.530798.6550.78530.29890.20.5031102.1060.83040.31610.20.515799.80試驗結(jié)果表明，本方法具有較高的回收率，其平均回收率為98.92%，相對標準偏差為1.85%。150359657.10.5357833.51351014.3354804.441.232355995.7_349521.6_"5435825.90.5438533.21435378.4433876.341.782420370.44439273.81234寸県n口又伊口口1234供試品6.樣品中鹽酸小檗堿含量測定<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>下述實施例均能達到上述實驗例的效果。具體實施例方式實施例1:處方茜草16g、桃仁16g、荊芥穗(炭)16g、蛇蛻(酒炙)8g、赤芍16g、當歸16g、白茅根32g、地膚子16g、蒼耳子(炒)16g、地黃16g、連翹16g、金銀花16g、苦地丁16g、土茯苓16g、黃柏8g、皂角刺16g、桔梗16g、益母草16g、苦杏仁(去皮炒)16g、防風8g、赤茯苓32g、白芍16g、蟬蛻8g、牛蒡子(炒)16g、牡丹皮16g、白鮮皮16g、熟地黃16g、大黃(酒炒)16g、忍冬藤16g、紫草8g、土貝母16g、川芎(酒炙)8g、甘草16g、白芷8g、天葵子16g、紫荊皮8g、雞血藤16g、浮萍8g、紅花8g制法以上三十九味，粉碎成細粉，過篩，混勻，用單糖漿適量制粒，干燥，加滑石粉，混勻，壓制成1000片，包衣，干燥，即得。鑒別(1)取本品12片，研細，加甲醇25ml，置水浴上加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃柏對照藥材0.1g，加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2ni，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6:3:2:1.5:0.3)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(2)取本品8片，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30分鐘，取出，立即冷卻，加乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材O.lg，加甲醇同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(石油醚3060。C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個橙色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色。(3)取本品36片，研細，加甲醇30ml，超聲處理.30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取茜草對照藥材lg，加甲醇20ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60~90°C)-丙酮(4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4)取本品24片，研細，加甲醇30ml，置水浴上加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各1(^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯(8:4:1)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍紫色斑點。(5)取本品48片，研細，加乙醚50ml，水浴上低溫回流1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚lml使溶解，作為供試品溶液。另取白茅根對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點。(6)取本品36片，研細，加甲醇50ml，置水浴上加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，加活性炭lg，振搖約10分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為供試品溶液。另取連翹苷對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各1(^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己垸-三氯甲烷-甲苯-甲醇(5:3:5:3)為展開劑，預(yù)飽和30分鐘后展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點。(7)取本品12片，研細，加鹽酸3ml與三氯甲垸50ml，置水浴上加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取桔梗對照藥材0.2§，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚G060'C)-乙酸乙酯-冰醋酸(25:7:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8%香草醛乙醇溶液與硫酸溶液(7—10)的混合溶液(1:10)，在105t加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(8)取本品48片，研細，加乙酸乙酯60ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取牛蒡子對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。檢查應(yīng)符合片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄ID)。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(43:57，每1000ml溶液中加入十二烷基磺酸鈉1.7g)為流動相，檢測波長為265nm。理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于6000。對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品10片，研細，取細粉約1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇-鹽酸(100:1)50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，取出，放涼，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取上清液用微孔濾膜(0.45nm)濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l(Hil，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含黃柏以鹽酸小檗堿(C2QH17N04，HC1)計，不得少于0.2mg。實施例2:處方茜草16g、桃仁16g、荊芥穗(炭)16g、蛇蛻(酒炙)8g、赤芍16g、當歸16g、白茅根32g、地膚子16g、蒼耳子(炒)16g、地黃16g、連翹16g、金銀花16g、苦地丁16g、土茯苓16g、黃柏8g、皂角刺16g、桔梗16g、益母草16g、苦杏仁(去皮炒)16g、防風8g、赤茯苓32g、白芍16g、蟬蛻8g、牛蒡子(炒)16g、牡丹皮16g、白鮮皮16g、熟地黃16g、大黃(酒炒)16g、忍冬藤16g、紫草8g、土貝母16g、川芎(酒炙)8g、甘草16g、白芷8g、天葵子16g、紫荊皮8g、雞血藤16g、浮萍8g、紅花8g制法以上三十九味，粉碎成細粉，過篩，混勻，用單糖漿適量制粒，干燥，加滑石粉，混勻，裝膠囊，即得。該藥物的質(zhì)量控制方法同實施例1。18權(quán)利要求1、皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法，其中所述的制劑由中藥材茜草、桃仁、荊芥穗(炭)、蛇蛻(酒炙)、赤芍、當歸、白茅根、地膚子、蒼耳子(炒)、地黃、連翹、金銀花、苦地丁、土茯苓、黃柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防風、赤茯苓、白芍、蟬蛻、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鮮皮、熟地黃、大黃(酒炒)、忍冬藤、紫草、土貝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荊皮、雞血藤、浮萍和紅花組成，其特征在于該方法中鑒別方法是以下方法的一種或幾種①.取皮膚病血毒制劑7.2g，研細，加甲醇15～35ml，置水浴上加熱回流10～30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃柏對照藥材0.1g，加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(5～7∶2～4∶1～3∶1～2∶0.15～0.45)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；②.取皮膚病血毒制劑4.8g，研細，加甲醇5～25ml，超聲處理10～30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水5～15ml使溶解，加鹽酸0.5～1.5ml，置水浴上加熱20～40分鐘，取出，立即冷卻，加乙醚提取1～3次，每次5～15ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.1g，加甲醇同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(石油醚30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(14～16∶4～6∶0.5～1.5)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個相同顏色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色；③.取皮膚病血毒制劑21.6g，研細，加甲醇20～40ml，超聲處理20～40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取茜草對照藥材1g，加甲醇10～30ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-丙酮(3～5∶0.5～1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；④.取皮膚病血毒制劑14.4g，研細，加甲醇20～40ml，置水浴上加熱回流20～40分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯(7～9∶3～5∶0.5～1.5)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，于100℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑤.取皮膚病血毒制劑28.8g，研細，加乙醚25～75ml，水浴上低溫回流0.5～1.5小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚1ml使溶解，作為供試品溶液；另取白茅根對照藥材1g，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；⑥.取皮膚病血毒制劑21.6g，研細，加甲醇25～75ml，置水浴上加熱回流0.5～1.5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇4～6ml使溶解，加活性炭0.5～1.5g，振搖5～15分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-甲苯-甲醇(4～6∶2～4∶4～6∶2～4)為展開劑，預(yù)飽和20～40分鐘后展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的斑點；⑦.取皮膚病血毒制劑7.2g，研細，加鹽酸2～4ml與三氯甲烷25～75ml，置水浴上加熱回流0.5～1.5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取桔梗對照藥材0.2g，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯-冰醋酸(15～35∶6～8∶0.25～0.75)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8％香草醛乙醇溶液與硫酸溶液(7→10)的混合溶液(0.5～1.5∶9～11)，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑧.取皮膚病血毒制劑28.8g，研細，加乙酸乙酯50～70ml，超聲處理20～40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取牛蒡子對照藥材1g，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30～50∶9～11∶0.5～1.5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。2、如權(quán)利要求1所述的皮膚病血毒片的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的鑒別方法是以下方法的一種或幾種①.取皮膚病血毒片12片，研細，加甲醇25ml，置水浴上加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃柏對照藥材O.lg，加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6:3:2:1.5:0.3)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；②.取皮膚病血毒片8片，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30分鐘，取出，立即冷卻，加乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材O.lg，加甲醇同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(石油醚30~60°0-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個相同顏色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色；③.取皮膚病血毒片36片，研細，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液u另取茜草對照藥材lg，加甲醇20ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60卯'C)-丙酮(4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈G65nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；④.取皮膚病血毒片24片，研細，加甲醇30ml，置水浴上加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一乙酸乙酯(8:4:1)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(D.取皮膚病血毒片48片，研細，加乙醚50ml，水浴上低溫回流l小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚lml使溶解，作為供試品溶液；另取白茅根對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；(g).取皮膚病血毒片36片，研細，加甲醇50ml，置水浴上加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，加活性炭lg，振搖10分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己垸-三氯甲烷-甲苯-甲醇(5:3:5:3)為展開劑，預(yù)飽和30分鐘后展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；⑦.取皮膚病血毒片12片，研細，加鹽酸3ml與三氯甲烷50ml，置水浴上加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取桔梗對照藥材0.2§，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚G060'C)-乙酸乙酯-冰醋酸(25:7:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8%香草醛乙醇溶液與硫酸溶液(7—10)的混合溶液(1:10)，在105r加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑧.取皮膚病血毒片48片，研細，加乙酸乙酯60ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取牛蒡子對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5nl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。3、皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法，其中所述的制劑由中藥材茜草、桃仁、荊芥穗(炭)、蛇蛻(酒炙)、赤芍、當歸、白茅根、地膚子、蒼耳子(炒)、地黃、連翹、金銀花、苦地丁、土茯苓、黃柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防風、赤茯苓、白芍、蟬蛻、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鮮皮、熟地黃、大黃(酒炒)、忍冬藤、紫草、土貝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荊皮、雞血藤、浮萍和紅花組成，其特征在于該方法中的含量測定方法是以下方法照高效液相色譜法測定；以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(40~45:55~60，每1000ml溶液中加入十二烷基磺酸鈉1.7g)為流動相，檢測波長為265i2nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于6000;對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取皮膚病血毒制齊U，研細，取細粉約1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇-鹽酸(100:1)2575ml，稱定重量，超聲處理2040分鐘，取出，放涼，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取上清液用微孔濾膜(0.45nm)濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10^1，注入液相色譜儀，測定，即得。4、如權(quán)利要求3所述的皮膚病血毒片的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的含量測定方法是以下方法照高效液相色譜法測定；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(43:57，每1000ml溶液中加入十二垸基磺酸鈉1.7g)為流動相，檢測波長為265nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于6000;對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取皮膚病血毒片10片，研細，取細粉約1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇-鹽酸(100:1)50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，取出，放涼，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取上清液用微孔濾膜(0.45nm)濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10^1，注入液相色譜儀，測定，即得。5、皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法，其中所述的制劑由中藥材茜草、桃仁、荊芥穗(炭)、蛇蛻(酒炙)、赤芍、當歸、白茅根、地膚子、蒼耳子(炒)、地黃、連翹、金銀花、苦地丁、土茯苓、黃柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防風、赤茯苓、白芍、蟬蛻、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鮮皮、熟地黃、大黃(酒炒)、忍冬藤、紫草、土貝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荊皮、雞血藤、浮萍和紅花組成，其特征在于該方法包括以下方法鑒別①.取皮膚病血毒制劑7.2g，研細，加甲醇1535ml，置水浴上加熱回流10~30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃柏對照藥材0.1g，加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2nl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(57:2~4:1~3:1~2:0.15~0.45)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，置紫外光燈G65nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；②.取皮膚病血毒制劑4.8g，研細，加甲醇525ml，超聲處理1030分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水515ml使溶解，加鹽酸0.51.5ml，置水浴上加熱20~40分鐘，取出，立即冷卻，加乙醚提取13次，每次515ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.1g,加甲醇同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(石油醚306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(1416:4~6:0.5~1.5)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365rnn)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個相同顏色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色；③.取皮膚病血毒制劑21.6g，研細，加甲醇2040ml，超聲處理2040分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取茜草對照藥材lg，加甲醇1030ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60~90°C)-丙酮(3~5:0.5-1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈G65nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；④.取皮膚病血毒制劑14.4g，研細，加甲醇2040ml，置水浴上加熱回流20~40分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10|il，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一乙酸乙酯(7~9:3~5:0.5-1.5)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑤.取皮膚病血毒制劑28.8g，研細，加乙醚2575ml，水浴上低溫回流0.5-1.5小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚lml使溶解，作為供試品溶液；另取白茅根對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各l(Hil，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；⑥.取皮膚病血毒制劑21.6g，研細，加甲醇2575ml，置水浴上加熱回流0.5~1.5小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇46ml使溶解，加活性炭0.51.5g，振搖515分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己垸-三氯甲烷-甲苯-甲醇(4~6:24:46:2~4)為展開劑，預(yù)飽和2040分鐘后展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的斑點；⑦.取皮膚病血毒制劑7.2g，研細，加鹽酸24ml與三氯甲烷2575ml，置水浴上加熱回流0.5-1.5小時,濾過,濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取桔梗對照藥材0.2g,按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5^1，分別點于同一硅膠G薄層板上,以石油醚(3060。C)-乙酸乙酯-冰醋酸(1535:6~8:0.25~0.75)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8%香草醛乙醇溶液與硫酸溶液(7—10)的混合溶液(0.51.5:911)，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑧.取皮膚病血毒制劑28.8g，研細，加乙酸乙酯5070ml，超聲處理2040分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取牛蒡子對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(30-50:9~11:0.5~1.5)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；噴以10%硫酸乙醇溶液，在105"C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定照高效液相色譜法測定；以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(40~45:55~60，每1000ml溶液中加入十二垸基磺酸鈉1.7g)為流動相，檢測波長為265i2nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于6000;對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.01mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取皮膚病血毒制劑，研細，取細粉約1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇-鹽酸(100:1)25:75ml，稱定重量，超聲處理20:40分鐘，取出，放涼，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取上清液用微孔濾膜(0.45pni)濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l(Htl,注入液相色譜儀，測定，即得。6、如權(quán)利要求5所述的皮膚病血毒片的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括以下方法鑒別①.取皮膚病血毒片12片，研細，加甲醇25ml，置水浴上加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸千，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃柏對照藥材0.1g，加甲醇5ml，同法制成對照藥材溶液；再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6:3:2:1.5:0.3)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；②.取皮膚病血毒片8片，研細，加甲醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30分鐘，取出，立即冷卻，加乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材O.lg，加甲醇同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各化l，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(石油醚30~60°0-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈.(365nm)..下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個相詞顏色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色；③.取皮膚病血毒片36片，研細，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取茜草對照藥材lg，加甲醇20ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5nl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60~90°C)-丙酮(4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；④.取皮膚病血毒片24片，研細，加甲醇30ml，置水浴上加熱回流30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各l(Hd，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇一乙酸乙酯(8:4:1)為展開劑，在氨蒸氣飽和下展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于IO(TC加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑤.取皮膚病血毒片48片，研細，加乙醚50ml，水浴上低溫回流l小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚lml使溶解，作為供試品溶液；另取白茅根對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各lOpl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105卩加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；⑥.取皮膚病血毒片36片，研細，加甲醇50ml，置水浴上加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，加活性炭lg，振搖約10分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為供試品溶液；另取連翹苷對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1(^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-三氯甲烷-甲苯-甲醇(5:3:5:3)為展開劑，預(yù)飽和30分鐘后展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；.⑦.取皮膚病血毒片12片，研細，加鹽酸3ml與三氯甲烷50ml，置水浴上加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取桔梗對照藥材0.2g，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5jxl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚G060。C)-乙酸乙酉旨-冰醋酸(25:7:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8%香草醛乙醇溶液與硫酸溶液(7—10)的混合溶液(1:10)，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；⑧.取皮膚病血毒片48片，研細，加乙酸乙酯60ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取牛蒡子對照藥材lg，按供試品溶液制法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干；噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點;含量測定照高效液相色譜法測定；以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(43:57，每1000ml溶液中加入十二垸基磺酸鈉1.7g)為流動相，檢測波長為265nm;理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于6000;對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每lml含O.Olmg的溶液，即得；供試品溶液的制備取皮膚病血毒片10片，研細，取細粉約1.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇-鹽酸(100:1)50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，取出，放涼，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取上清液用微孔濾膜(0.45pm)濾過，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10^1，注入液相色譜儀，測定，即得。全文摘要本發(fā)明公開了皮膚病血毒制劑的質(zhì)量控制方法，其中所述的制劑由中藥材茜草、桃仁、荊芥穗(炭)、蛇蛻(酒炙)、赤芍、當歸、白茅根、地膚子、蒼耳子(炒)、地黃、連翹、金銀花、苦地丁、土茯苓、黃柏、皂角刺、桔梗、益母草、苦杏仁(去皮炒)、防風、赤茯苓、白芍、蟬蛻、牛蒡子(炒)、牡丹皮、白鮮皮、熟地黃、大黃(酒炒)、忍冬藤、紫草、土貝母、川芎(酒炙)、甘草、白芷、天葵子、紫荊皮、雞血藤、浮萍和紅花組成，該方法采用照薄層色譜法對黃柏、大黃、赤芍、白芍、牡丹皮、連翹、白茅根、桔梗、牛蒡子進行鑒別，并照高效液相色譜法以鹽酸小檗堿為指標進行含量測定。該方法保證了皮膚病血毒制劑質(zhì)量檢測的準確性和先進性，為本制劑工業(yè)化大生產(chǎn)的質(zhì)量起到控制作用，從而確保該制劑的臨床療效。文檔編號A61K35/58GK101513467SQ20081001752公開日2009年8月26日申請日期2008年2月19日優(yōu)先權(quán)日2008年2月19日發(fā)明者趙朝群申請人:趙朝群