專利名稱：Saha的胺堿鹽和其多晶型物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了 SAHA的胺堿鹽、其多晶型物和藥物組合物。本發(fā) 明提供了通過給予藥物組合物來治療癌癥的方法。本發(fā)明還提供了包 含胺堿和SAHA的晶體組合物。本發(fā)明還提供了獲得胺堿鹽和晶體組 合物的方法。
背景技術(shù)：
通過括號內(nèi)的阿拉伯?dāng)?shù)字來參考貫穿本申請的各種出版物。在說 明書的最后、權(quán)利要求之前可以找到這些出版物的完整引用。
癌癥是一種病癥，在這種病癥中，細胞數(shù)目在不同程度上對通常 調(diào)節(jié)增殖和變異的控制機理沒有應(yīng)答。多年來，癌癥的化學(xué)療法有兩 個主要策略a)利用性激素的產(chǎn)生或外圍作用來進行干擾，從而阻滯 激素依賴性腫瘤細胞增殖；和b)使癌細胞接觸細胞毒素物質(zhì)，從而直 接將癌細胞殺死，細胞毒素物質(zhì)可損害腫瘤和正常細胞群體。
還嘗試通過誘導(dǎo)肺瘤細胞的終末分化來治療癌癥(1)。在細胞培養(yǎng) 模型中，已經(jīng)報道的是，使細胞與各種刺激物接觸可以產(chǎn)生分化，刺 激物包括環(huán)化AMP和一見黃酸(2, 3),阿柔比星及其它蒽環(huán)類抗生素 (4)。
盡管在腫瘤學(xué)領(lǐng)域發(fā)展了許多，但大部分實質(zhì)固態(tài)瘤在晚期仍然 是不能治愈的。在大多數(shù)情況下使用細胞毒素治療，然而，其對患者 常常導(dǎo)致顯著的發(fā)病率，沒有顯著的臨床益處。人們正在探索治療和 控制晚期惡性肺瘤的毒性更小且更特定的藥劑。
有大量的證據(jù)表明，致瘤性轉(zhuǎn)化不 一定破壞癌細胞分化的潛力(1, 5, 6)。有許多腫瘤細胞的例子，它們不對正常的增殖調(diào)節(jié)劑作出反應(yīng)， 似乎在其分化程序的表達方面受到了阻滯，但仍然可能誘導(dǎo)其分化和 停止復(fù)制。各種藥劑可以誘導(dǎo)各種轉(zhuǎn)化的細胞系和初期的人腫瘤外植 體，以表達更多的分化特征，各種藥劑包括一些相對筒單的極性化合 物(5, 7-9)，維生素D和視黃酸的衍生物(10-12),甾體激素(13),生長 因子(6, 14)，蛋白酶類(15， 16),胂瘤促進劑(17， 18)和DNA或RNA
4合成的抑制劑(4, 19-24)。
組蛋白脫乙?；敢种苿├缧炼１桨樊惲u肟酸(hydroxamide acid) (SAHA)屬于這種類別的藥劑，其具有誘導(dǎo)腫瘤細胞生長抑制、 分化和/或細胞程序死亡的能力(25)。這些化合物針對腫瘤細胞變成惡 性細胞能力的固有機制作為輩巴向，因為以抑制動物腫瘤生長的有效劑 量來使用它們似乎不具有毒性(26)。有一系列證據(jù)表明，組蛋白乙?；?作用和脫乙酰作用是在細胞中實現(xiàn)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的機理(27)。認為這些效果 是通過染色質(zhì)結(jié)構(gòu)中的變化(通過改變組蛋白對核小體中的螺旋DNA 的親合性)而出現(xiàn)的。在核小體中已經(jīng)鑒別了五種類型的組蛋白(稱為 Hl, H2A， H2B, H3和H4)。每個核小體在其核內(nèi)包含各個組蛋白類 型中的兩種，除H1以外，Hl單獨存在于核小體結(jié)構(gòu)的外面部分中。 人們相信，當(dāng)組蛋白被低乙?；瘯r，組蛋白對于DNA磷酸鹽骨架具有 更大的親合性。這種親合性導(dǎo)致DNA緊密地與組蛋白結(jié)合，并且使得 DNA難以成為轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)元件和工具。乙?；癄顟B(tài)的調(diào)節(jié)是通過兩種 酶配合物(組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙?；?HDAC))之 間的活性平衡而出現(xiàn)的。人們認為低乙?；癄顟B(tài)可抑制相關(guān)DNA的轉(zhuǎn) 錄。這種低乙酰化狀態(tài)是由大多蛋白復(fù)合物(其包括HDAC酶)催化 的。尤其是，已經(jīng)證明HDACs可催化從染色質(zhì)核組蛋白中除去乙?；?。
已經(jīng)證明，SAHA(ZOLINZATM(vormostat))可用于治療癌癥、選擇 性地誘導(dǎo)腫瘤細胞的終末分化、誘導(dǎo)細胞生長抑制和/或誘導(dǎo)細胞程序 死亡。由X-射線晶體衍射研究的證明可知，SAHA對HDAC的抑制是 通過直接與酶的催化部位相互作用發(fā)生的(28)。人們不認為HDAC抑 制的結(jié)果對基因組具有普遍影響，而是認為僅僅影響基因組的少量亞 型(29)。使用HDAC抑制劑培養(yǎng)的惡性細胞系，由DNA微陣列提供的 證據(jù)表明，只有有限數(shù)量(1-2%)的基因產(chǎn)物發(fā)生了改變。例如，在含有 HDAC抑制劑的培養(yǎng)物中治療的細胞表明了依賴細胞周期蛋白的激酶 抑制劑p21的穩(wěn)定誘導(dǎo)(30)。這種蛋白在細胞周期停滯中起重要作用。 人們認為，在p21基因的區(qū)域中，通過擴展組蛋白的高乙?；癄顟B(tài)， HDAC抑制劑可提高p21的轉(zhuǎn)錄速度，由此使該基因成為可行的轉(zhuǎn)錄 工具。在區(qū)域性相關(guān)組蛋白的乙酰化過程中，表達不受HDAC抑制劑 影響的基因沒有顯示變化(31)。本發(fā)明積無述
本發(fā)明提供了 SAHA的胺堿鹽、其多晶型物和藥物組合物。在一 個實施方案中，本發(fā)明提供了 SAHA鹽，其得自于選自下列的胺堿 苯明(benethamine(N-千基苯乙胺))，甜菜堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基 氨基)乙醇，二乙醇胺，乙二胺，哈胺(Hydrabamine), lH-咪唑，4-(2-羥乙基)嗎啉，嗎啉，哌咬，艱。秦，氨基丁三醇(Tromethamme)和賴 氨酸。在一個實施方案中，鹽是SAHA的賴氨酸鹽。本發(fā)明還提供了 包含胺堿和SAHA的晶體組合物。本發(fā)明提供了通過給予該藥物組合 物來治療癌癥的方法。本發(fā)明還提供了獲得胺堿鹽和晶體組合物的方 法。
附圖的簡要說明


圖1:圖1表明了包含L-賴氨酸和SAHA的晶體組合物的X射線
衍射圖。
圖2:圖2表明了包含L-賴氨酸和SAHA的晶體組合物的差示掃 描量熱圖。
本發(fā)明的詳細說明
術(shù)語"可藥用載體"包括任何和所有的溶劑、分散介質(zhì)、涂層、
抗菌和抗真菌劑、等滲的和延遲吸收劑，等等，其與藥學(xué)給藥相適合。
合適的載體描述在Remington's Pharmaceutical Sciences的最近版本中,
其是本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)參考文獻，本文將其引入作為參考。還可以使用脂 質(zhì)體和非水賦形劑例如不揮發(fā)油。藥學(xué)活性物質(zhì)的這種介質(zhì)和試劑的
用途在本領(lǐng)域是眾所周知的。除非常規(guī)介質(zhì)或試劑與本發(fā)明的組合物
不相容，其都可用在在組合物中。還可以在組合物中結(jié)合進輔助的活
性化合物。
對本發(fā)明來說，對于X射線粉末衍射圖，根據(jù)校正、樣品或儀器， 在2 6處的峰可能在一個方向上移動至多±0.3度(偏差)，例如X射線 粉末衍射圖中所有的峰移動至多+0.3度，或至多-0.3度。認為在該偏 差內(nèi)的X射線粉末衍射圖或峰是相同或基本上類似的。
SAHA的賴氨酸鹽
作為一種弱酸，SAHA可以與堿(例如下列堿)形成可藥用鹽a)
6無機堿，例如形成堿金屬鹽(例如鋰鹽，鈉鹽，鉀鹽，等等)，堿土金屬 鹽(例如釣鹽，鎂鹽，等等)，或餒鹽；b)有機堿，例如形成有機胺鹽(例
如吡啶鹽，甲基吡啶鹽，普魯卡因鹽，哌啶鹽，苯明(Benethamme)(N-千基-2-苯乙胺)鹽，甜菜堿鹽(亦稱三甲基甘氨酸，N-三甲基甘氨酸，甘 氨酸甜菜堿，甘氨酸甜菜堿，甜菜堿，枸杞堿，l-羧基-N,N,N-三甲基 曱銨內(nèi)鹽)，膽堿鹽，丹醇((2-(二甲基氨基)乙醇))鹽，乙二胺鹽，哈胺 (Hydrabamine)鹽，lH-咪唑鹽，2-嗎啉乙醇(4-(2-羥乙基)嗎啉)鹽，嗎啉 鹽，哌嗪鹽，氨基丁三醇(三羥甲基氨基甲烷(THAM),三(TRIS), 2-氨基-2(羥甲基)丙烷-l,3-二醇，緩血酸胺(trometamol))鹽，乙醇胺 (2-氨基乙醇)鹽，二乙醇胺(2,2'-亞氨基二(乙醇))鹽，三乙醇胺鹽，二環(huán) 己基胺鹽，苯乍生(N,N'-二千基乙二胺)鹽，葡曱胺(N-曱基-D-葡糖胺) 鹽，異丙胺鹽，二甲胺鹽，二乙胺鹽，三乙胺鹽，三曱胺鹽，2-乙胺基 乙醇鹽，2-(二乙基氨基)乙醇鹽等等)；c)堿性氨基酸(例如精氨酸，組 氨酸，賴氨酸)等等，形成氨基酸鹽。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了胺堿SAHA鹽，其選自苯明(N-千基苯乙胺)(Benethamme),甜菜堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基氨基)乙醇， 二乙醇胺，乙二胺，哈胺(Hydrabamine), lH-咪嗤，4-(2-羥乙基)嗎啉， 嗎啉，哌啶，哌。秦，氨基丁三醇或賴氨酸。在另一個實施方案中，本 發(fā)明提供了胺堿SAHA鹽，其選自苯明(N-千基苯乙胺)(Benethamine)， 甜菜堿，膽堿，丹醇，乙二胺，哈胺(Hydrabamine), 1H-咪唑，4-(2-羥乙基)嗎啉，嗎啉，哌啶，哌溱，氨基丁三醇或賴氨酸。在進一步的 實施方案中，本發(fā)明提供了胺石成SAHA鹽，其選自甜菜堿，口合胺 (Hydrabamine),氨基丁三醇或賴氨酸。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了 SAHA的賴氨酸鹽。在另一個 實施方案中，本發(fā)明提供了 SAHA的L-賴氨酸鹽。在另一個實施方案 中，本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含SAHA的賴氨酸鹽和可藥用 載體。在一個實施方案中，賴氨酸與SAHA的比例是1:2或1:1。在一
個實施方案中，賴氨酸與SAHA的比例是1:1。
SAHA的鹽可以是非晶態(tài)的。SAHA的鹽可以是晶體，微粉化的， 或可以是聚集物，顆粒，粉末，油，油性懸浮液或任何其它形式的固 體。SAHA的鹽可以是任何結(jié)晶形式。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了晶體組合物，其包含賴氨酸和
7SAHA,其特點在于X射線粉末衍射圖(銅Ka輻射)與圖1所顯示 的基本上相似。在另一個實施方案中，晶體組合物的特點在于X射 線粉末衍射圖(銅Koc輻射)在6.8、 20.1和23.2度26處包括特征峰。 在進一步的實施方案中，晶體組合物的特點在于X射線粉末衍射圖 (銅Kcc輻射)在6.8、 12.6、 18.7、 20.1 、 23.2和24.0度2 6處包括特 征峰。在進一步的實施方案中，晶體組合物的特點在于X射線粉末 衍射圖(銅Ka輻射)在6.8、 12.0、 12.6、 16.4、 18.7、 20.1、 23.2、 24.0和29.3度26處包括特征峰。在另一個實施方案中，利用差示掃 描量熱法，晶體組合物的吸熱線顯示了大約182。C的外延起始溫度。在 一個實施方案中，包含SAHA和賴氨酸的晶體組合物可以在SAHA晶 才各的溶劑通道中具有賴氨酸。SAHA和賴氨酸之間的相互作用可以通 過氳鍵鍵合。在另一個實施方案中，晶體組合物包含SAHA的賴氨酸 鹽，其中SAHA和賴氨酸之間的相互作用是靜電相互作用。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含胺堿和SAHA的晶體組合 物。在一個實施方案中，包含SAHA和胺石咸的晶體組合物可以在SAHA 晶才各的溶劑通道中具有胺石咸。SAHA和胺石咸之間的相互作用可以通過 氬4建進行。在另一個實施方案中，晶體組合物包含SAHA的胺石咸鹽， 其中SAHA和胺堿之間的相互作用是靜電相互作用。
本發(fā)明還包括藥物組合物，其包含SAHA的胺堿鹽的水合物或溶 劑化物。術(shù)語"水合物"包括但不局限于半水合物、 一水合物、二水 合物、三水合物等等。
藥物組合物
藥物組合物中的可藥用載體可以是固體顆粒形式。通常用作載體 或稀釋劑的任何惰性賦形劑可以在本發(fā)明的制劑中使用，例如膠質(zhì)、 淀粉、糖、纖維素材料、丙烯酸酯或其混合物。在一個實施方案中， 稀釋劑是微晶纖維素。組合物可以進 一 步包含崩解劑(例如交聯(lián)羧甲纖 維素鈉)和潤滑劑(例如^f更脂酸4美)，此外可以包含一或多種添加劑，添 加劑選自結(jié)合劑、緩沖液、蛋白酶抑制劑、表面活性劑、增溶劑、增 塑劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、增粘劑、甜味劑、成膜劑或其任何組合。此 外，本發(fā)明的組合物(即SAHA的胺堿鹽，晶體組合物)可以是控制釋放 或立即釋放制劑的形式。在一個實施方案中，本文描述的藥物組合物可以進一步包含微晶 纖維素、交聯(lián)羧甲纖維素鈉和硬脂酸鎂。在制劑中，本發(fā)明組合物和 各種賦形劑的百分比可以變化。例如，藥物組合物可以包含大約20和
90%、大約50-80%或大約60-70%重量的本發(fā)明組合物。此外，藥物組 合物可以包含大約10-70%、大約20-40%、大約25-35%重量的微晶纖 維素作為載體或稀釋劑。此外，藥物組合物可以包含大約1-30%、大約 1-10%、大約2-5%重量的交聯(lián)羧曱纖維素鈉作為崩解劑。此外，藥物 組合物可以包含大約0.1-5%或大約0.5-1.5%重量的硬脂酸鎂作為潤滑 劑。
在一個實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物含有大約50-80%重量的 本發(fā)明組合物；大約20-40%重量微晶纖維素；大約1-10%重量交聯(lián)羧 甲纖維素鈉；和大約0.1-5%重量硬脂酸鎂。在另一個實施方案中，本 發(fā)明的藥物組合物含有大約60-70%重量的本發(fā)明組合物；大約25-35% 重量微晶纖維素；大約2-5%重量交聯(lián)羧甲纖維素鈉；和大約0.5-1.5% 重量硬脂酸鎂。在一個實施方案中，所描述的藥物組合物包含大約 50-200 mg或50-600 mg的本發(fā)明組合物。
本發(fā)明的 一 個具體實施方案是固體劑型的本發(fā)明組合物，其在膠 嚢中包含微晶纖維素、NF(Avicd Ph 101)、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、 NF(AC-Di-Sol)和硬脂酸鎂、NF。進一步的實施方案是包含大約100 mg 本發(fā)明組合物、大約44.3 mg微晶纖維素、大約4.5 mg交聯(lián)羧曱纖維 素鈉、大約1.2mg硬脂酸鎂的藥物組合物。
在一個實施方案中，藥物組合物是口服給予的，由此配制為適合 于口服的形式，即固體或液體形式。適宜的固體口服劑型包括例如片 劑、膠嚢、丸劑、顆粒、小丸等等。適宜的液體口服劑型包括例如乳 化液、油等等。在本發(fā)明的一個實施方案中，將組合物配制在膠嚢中。 按照該實施方案，除了本發(fā)明的組合物和惰性載體或稀釋劑之外，本 發(fā)明的藥物組合物還包括硬明膠嚢。
固體載體/稀釋劑包括但不局限于膠質(zhì)，淀粉(例如，玉米淀粉，
預(yù)膠凝淀粉)，糖(例如，乳糖，甘露糖醇，蔗糖，葡萄糖)，纖維素材 料(例如，微晶纖維素)，丙烯酸酯(例如，聚曱基丙烯酸酯)，碳酸鈣， 氧化鎂，滑石粉，或其混合物。
對于液體制劑，可藥用載體可以是非水溶液、懸浮液、乳4b液或油類。
非水溶劑的例子是丙二醇、聚乙二醇和注射有機酯，例如油酸乙酯。油類的例子是石油、動物、植物或合成來源，例如，花生油，大豆油，礦物油，橄欖油，向日葵油和魚肝油。懸浮液還可以包4舌下列
組分不揮發(fā)油，聚乙二醇，丙三醇，丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑例如苯曱醇或?qū)αu基苯甲酸曱酯；抗氧化劑例如抗環(huán)血酸或亞>5危酸氫鈉；螯合劑例如乙二胺四乙酸(EDTA)。
此外，藥物組合物可以進一步包含結(jié)合劑(例如，阿拉伯月交，玉米淀粉，凝膠，卡波姆，乙基纖維素，瓜爾豆膠，羥丙基纖維素，羥基丙基曱基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮)，崩解劑(例如，玉米淀粉，馬鈴薯淀粉，海藻酸，二氧化硅，交聯(lián)羧曱纖維素鈉，聚乙烯聚吡咯烷酮，瓜爾豆膠，羧曱(glycolate)淀粉鈉，Primogel),凈洗劑(例如，Tween20, Tween80, PluronicF68,膽汁酸鹽)，蛋白酶抑制劑，表面活性質(zhì)(例如，十二烷基硫酸鈉)，滲透增強劑，增溶劑(例如，丙三醇，聚乙烯丙三醇)，助流劑(例如，膠體二氧化硅)，抗氧化劑(例如，抗環(huán)血酸，焦亞硫酸鈉，丁羥茴醚)，穩(wěn)定劑(例如，羥丙基纖維素，羥基丙基甲基纖維素)，增粘劑(例如，卡波姆，膠體二氧化硅，乙基纖維素，瓜爾豆膠)，甜味劑(例如，蔗糖，阿斯巴甜，枸櫞酸)，調(diào)味劑(例如，薄荷，水楊酸曱酯，或橙調(diào)味劑)，防腐劑(例如，硫汞撒，苯甲醇，對羥基苯曱酸酯)，潤滑劑(例如，硬脂酸，硬脂酸鎂，聚乙二醇，十二烷基硫酸鈉)，流動助劑(例如，l交體二氧化硅)，增塑劑(例如，鄰苯二甲酸二乙酯，檸檬酸三乙酯)，乳化劑(例如，卡波姆，羥丙基纖維素，十二烷基硫酸鈉)，聚合物涂層(例如，泊洛沙姆或其乙二胺衍生物(poloxammes)，涂層和成膜劑(例如，乙基纖維素，丙烯酸酯，聚曱基丙烯酸酯)和/或佐劑。
在一個實施方案中，與載體一起制備本發(fā)明的組合物，載體可使組合物避免從身體中快速排出，例如控釋制劑，包括植入片和微嚢密封的遞送系統(tǒng)?？梢?吏用可生物降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯-乙酸乙烯共聚物，聚酐，聚乙二醇酸，膠原，聚原酸酯和聚乳酸。制備這種制劑的方法對本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。該物質(zhì)還可以商業(yè)上從Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals, Inc獲得。月旨質(zhì)體懸浮液(包括脂質(zhì)體，其靶向被病毒抗原的單克隆抗體感染的細胞)也可以用作可藥用載體。這些可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備，
例如U.S.專利No. 4,522,811中描述的方法。
包含活性組分的藥物組合物的制備在本領(lǐng)域是眾所周知的，例如利用混合、造?；蛑破に嚒τ诳诜?，將活性劑與通常用于這種目的的添加劑混合，例如賦形劑、穩(wěn)定劑或惰性稀釋劑，利用常規(guī)方法將其轉(zhuǎn)化為適宜的給藥形式，例如片劑、糖衣片劑、硬或軟膠嚢、水溶液、醇或油溶液等等，如上面所詳述。
在一個實施方案中，將口服組合物配制為劑量單位形式，以便于給藥和劑量的均勻性。本文使用的劑量單位形式是指適合作為所治療患者的單元劑量的物理離散單位；每個單位包含經(jīng)計算預(yù)定數(shù)量的、適于產(chǎn)生所需要的治療效果的本發(fā)明組合物與所需藥學(xué)載體。通過并直接根據(jù)本發(fā)明組合物的獨特特征和所達到的具體治療效果、和混配這種用于治療個體的活性化合物領(lǐng)域所固有的限制，確定本發(fā)明的劑量單位形式的規(guī)才各。在某些實施方案中，劑量單位包含大約600 mg、550 mg、 500 mg、 450 mg、 400 mg、 350 mg、 300 mg、 250 mg、 200 mg、150 mg、 110 mg、 105 mg、 100 mg、 95 mg、 90 mg、 85 mg、 80 mg、75 mg、 70 mg、 65 mg、 60 mg、 55 mg、 50 mg、 45 mg或40 mg本發(fā)明的組合物。在一個實施方案中，本發(fā)明組合物中的SAHA的量為大約100 mg。
可以將藥物組合物與給藥說明書一起包含在容器、包裝或分配器中。在一個實施方案中，藥物組合物是單個膠嚢，其中在本發(fā)明組合物中的SAHA的量是大約100 mg。在一個實施方案中，藥物組合物是兩個膠嚢，其中在每個膠嚢中的SAHA的量是大約50mg。
獲得SAHA的賴氨酸鹽和結(jié)晶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明還提供了獲得SAHA的胺堿鹽的方法，包括將SAHA和胺堿加入反應(yīng)介質(zhì)中的步驟。在一個實施方案中，胺堿是賴氨酸。在另一個實施方案中，胺堿是苯明(benethamme(N-千基苯乙胺))，甜菜堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基氨基)乙醇，二乙醇胺，乙二胺，哈胺(Hydrabamme), lH-咪唑，4-(2-羥乙基)嗎啉，嗎啉，哌啶，哌。秦，氨基丁三醇或賴氨酸。在一個實施方案中，反應(yīng)介質(zhì)是有機溶劑或有機溶劑和水的混合物。在一個實施方案中，有沖幾溶劑是乙醇。
ii本發(fā)明還提供了獲得包含SAHA和胺堿的晶體組合物的方法，包 括將胺堿鹽在有機溶劑或有機溶劑和水的混合物中結(jié)晶的步驟。在一 個實施方案中，胺堿是賴氨酸。在另一個實施方案中，胺堿是苯明
(benethamme(N-千基苯乙胺))，甜菜堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基氨基) 乙醇，二乙醇胺，乙二胺，哈胺(Hydrabamine), lH-咪唑，4-(2-羥乙基) 嗎啉，嗎啉，哌啶，哌溱，氨基丁三醇或賴氨酸。
在一個具體實施方案中，SAHA的胺堿鹽晶體是從有機溶劑中結(jié) 晶的。有機溶劑可以是醇，例如曱醇、乙醇或異丙醇。在一個實施方 案中，有機溶劑是曱醇、乙醇、乙腈和異丙醇中的一種或多種。在一 個實施方案中，有機溶劑是乙醇。在一個具體實施方案中，反應(yīng)介質(zhì) 中使用的有機溶劑與結(jié)晶中使用的有機溶劑相同。
在另 一個實施方案中，有機溶劑和水的混合物包含大約1 -99%的有 才幾溶劑和大約99-1%的水。在另一個實施方案中，混合物包含40-99% 乙醇和60%-1%水。在一個實施方案中，混合物包含大約15-85%有機 溶劑和大約1-15%水。在一個具體實施方案中，混合物包含大約85% 有機溶劑和大約15%水。在另一個具體實施方案中，混合物包含1:1 乙醇和水。在又一個具體實施方案中，混合物包含9:1乙醇和水。這里 所描述的有機溶劑與水的比例或百分數(shù)是以體積計算。
在一個實施方案中，有機溶劑是醇(例如甲醇、乙醇、異丙醇等等)。 然而，應(yīng)該對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，本文所描述的結(jié)晶或反 應(yīng)可以在任何適宜的溶劑或溶劑混合物中進行，有機合成領(lǐng)域的技術(shù) 人員可以容易地選擇。本文使用的這種適宜的有機溶劑可以包括(例 如但不限于)氯化溶劑，烴溶劑，醚溶劑，極性質(zhì)子溶劑和極性非質(zhì) 子溶劑。適宜的囟化溶劑包括但不局限于四氯化碳，溴二氯甲烷，二 溴氯曱烷，三溴甲烷，氯仿，溴氯甲烷，二溴甲烷，丁基氯，二氯曱 烷，四氯乙烯，三氯乙烯，l,l,l-三氯乙烷，1,1,2-三氯乙烷，1,1-二氯 乙烷，1,2-二氯乙烷，異丙基氯，六氟苯，1,2，4-三氯苯，鄰二氯化苯， 氯苯，氟苯， 一氟三氯甲烷，氯三氟曱烷，溴三氟曱烷，四氟化碳， 二氯氟甲烷，氯二氟曱烷，三氟曱烷，1,2-二氯四氟乙烷和六氟乙烷。 適宜的烴溶劑包括但不局限于苯，環(huán)己烷，戊烷，己烷，甲苯，環(huán)庚 烷，曱基環(huán)己烷，庚烷，乙苯，間、鄰或?qū)Χ醣剑镣?，茚滿，壬 烷。適宜的醚溶劑包括但不局限于二曱氧基曱烷，四氫呋喃，1,3-二ff惡烷，1,4-二ff惡烷，呋喃，二乙醚，甘醇二曱醚，乙二醇二乙醚，二甘醇 二曱醚，二乙二醇二乙醚，三乙二醇二異丙醚，苯曱醚或甲基叔丁基醚。
適宜的極性質(zhì)子溶劑包括但不局限于曱醇，乙醇，2-硝基乙醇，2-氟乙醇，2,2,2-三氟乙醇，乙二醇，l-丙醇，2-丙醇，2-曱氧基乙醇，1-丁醇，2-丁醇，異-丁醇，，權(quán)丁醇，乙二醇單乙醚，2-乙氧基乙醇，l-、 2-或3-戊醇，新戊基醇，叔戊醇，二乙二醇一曱醚，二甘醇單乙醚， 環(huán)己醇，苯甲醇，酚和丙三醇。適宜的極性非質(zhì)子溶劑包括但不局限 于二甲基甲酰胺(DMF), 二甲基乙酰胺(DMAC)， 1，3-二甲基-3,4,5,6-四 氪-2(lH)-嘧啶酮(DMPU), 1,3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMI)， N-甲基吡咯 烷酮(NMP),曱酰胺，N-甲基乙酰胺，N-曱基甲酰胺，乙腈(ACN), 二 甲亞砜，丙腈，甲酸乙酯，乙酸甲酯，六氯丙銅，丙酮，乙基曱基酮， 乙酸乙酯，乙酸異丙酯，乙酸叔丁酯，環(huán)丁砜，N,N-二曱基丙酰胺， 硝基甲烷，硝基苯，六甲基磷酰胺。
治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明進 一 步提供了治療癌癥的方法，包括給予患者治療有效量 的SAHA的胺堿鹽或包含胺堿和SAHA的晶體組合物的步驟。本發(fā)明 還提供了 SAHA的胺堿鹽或包含胺石咸和SAHA的晶體組合物在藥物制 備中的用途，該藥物用于治療癌癥。在一個實施方案中，胺石咸是賴氨 酸。在另一個實施方案中，胺堿是苯明(benethamine(N-千基苯乙胺))， 甜菜堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基氨基)乙醇，二乙醇胺，乙二胺，哈胺 (Hydrabamme), 1H-咪唑，4-(2-羥乙基)嗎啉，嗎啉，。底口定，哌。秦，氨 基丁三醇或賴氨酸。
本發(fā)明還提供了治療患有腫瘤的患者的方法，腫瘤以腫瘤細胞增 殖為特征，該方法包括給予患者有效量的SAHA的胺堿鹽或包含胺石咸 和SAHA的晶體組合物，即有效地選擇性誘導(dǎo)這種胂瘤細胞的終末分 化，并由此抑制它們的增殖。
本發(fā)明的方法用于治療患有癌癥的人類患者。然而，該方法也可 以在其它哺乳動物中有效治療癌癥。癌癥包括但不局限于由腫瘤細胞 增殖所引起的任何癌癥，例如肺癌，急性淋巴骨髓瘤，Hodgkms淋巴 瘤，非Hodgkms淋巴瘤，膀胱黑素瘤，腎癌，乳房癌，前列腺癌，卵巢癌或結(jié)腸癌。按照本發(fā)明，藥物組合物可以用于治療多種癌癥，包 括但不局限于實質(zhì)固態(tài)瘤(例如，頭和頸、肺、乳房、結(jié)腸、前列腺、 膀胱、直腸、腦、胃組織、骨骼、卵巢、甲狀腺、或子宮內(nèi)膜腫瘤)， 血液學(xué)的惡性肺瘤(例如，白血病，淋巴瘤，骨髓瘤)，癌(例如膀胱癌， 腎癌，乳房癌，結(jié)腸癌)，神經(jīng)母細胞瘤，或黑素瘤。這些癌癥的非限
制性例子包括擴散性大B細胞淋巴瘤(DLBCL), T細胞淋巴瘤或白 血病，例如，皮膚T細胞淋巴瘤(CTCL),非皮膚周圍性的T-細胞淋巴 瘤，與人類T細胞淋巴病毒相關(guān)的淋巴瘤(HTLV)，成人T-細胞白血病 /淋巴瘤(ATLL)，以及急性淋巴細胞性白血病，急性非淋巴細胞白血病， 急性的骨髓性白血病，慢性淋巴細胞性白血病，慢性粒性白血病，淋 巴肉芽腫病，非Hodgkm淋巴瘤，骨髓瘤，多重骨髓癌，間皮瘤，兒 童實質(zhì)固態(tài)瘤，腦神經(jīng)母細胞瘤，成視網(wǎng)膜細胞瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，維 耳姆斯瘤，骨癌和軟組織肉瘤，成人的普通實質(zhì)固態(tài)瘤，例如頭和頸 癌(例如，口腔、喉和食道癌)，泌尿生殖器癌癥(例如，前列腺、膀胱、 腎、子宮、卵巢、陰嚢、直腸和結(jié)腸癌)，肺癌(例如，小細胞癌和非小 細胞肺癌，包括鱗狀細胞癌和腺癌)，乳腺癌，胰腺癌，黑素瘤及其它 皮膚癌，皮膚基底細胞癌，轉(zhuǎn)移性的皮膚癌，潰爛和乳突類型的鱗狀 細胞癌，胃癌，腦癌，肝癌，腎上腺癌，腎癌，曱狀腺癌，髓樣癌， 骨肉瘤，軟組織肉瘤，尤因氏肉瘤，veticulum細胞肉瘤，和皮膚多發(fā) 性出血性肉瘤。還包括本文所描述的任何癌癥的兒科形式。
給藥方法
在本文所描述的所有方法中，藥物組合物可以在月交嚢中口Jl給予。 按照本文所描述方法，可以用單位劑量給藥，每天一次、每天兩次或 每天三次。
然后連續(xù)重復(fù)每日給藥，持續(xù)幾天至幾年?？诜委熆梢赃B續(xù)一 周至患者一生。在一個實施方案中，給藥進行五個連續(xù)日，而后可以 評價患者，確定是否需要進一步給藥。給藥可以是連續(xù)或周期性的， 即連續(xù)治療幾天，而后進入休息期。
本發(fā)明的藥物組合物可以口月l給藥，合計日劑量在25至4000 mg/m2之間，例如大約25至1000 mg， 50-1000 mg, 100 mg， 200 mg, 300 mg, 400 mg, 600 mg, 800 mg, 1000mg等等。典型地，當(dāng)給予患者至多400mg時，以單一劑量形式給予化合物。對于較高的總劑量(即 大于400mg),將總劑量分成若干劑量，例如每日兩次，每日三次等等， 或分配于一天相等的時間周期內(nèi)。例如，在一天中，可以給予兩個劑 量，例如每個500 mg， 12小時間隔，以達到1000 mg的總劑量。
在一個實施方案中，給予患者的SAHA的胺堿鹽的合計日劑量是 200 mg。在另一個實施方案中，給予患者的SAHA的胺堿鹽的合計曰 劑量是400 mg。在另一個實施方案中，給予患者的SAHA的胺堿鹽的 合計日劑量是600 mg。
在一個實施方案中，給予患者的SAHA的胺堿鹽的量少于可在患 者中導(dǎo)致難控制毒性的數(shù)量。在某些實施方案中，給予患者的SAHA 的胺堿鹽的量少于可在患者血漿中導(dǎo)致化合物濃度等于或超過化合物 毒性水平的數(shù)量。在一個實施方案中，患者血漿中的SAHA的胺堿鹽 的濃度保持在大約10 nM至大約5000 nM之間。在本發(fā)明的實踐中， 應(yīng)該給予患者的SAHA的胺堿鹽的最佳數(shù)量取決于所使用的具體化合 物和所治療的癌癥類型。
組合治療
本發(fā)明的方法還可以包括最初給予患者抗癌劑，以便使患者中 的肺瘤細胞對抗癌劑有耐受性，和隨后給予有效量的本發(fā)明的任何組 合物，即以便有效地選擇性誘導(dǎo)這種細胞的終末分化、細胞生長抑制 和/或細胞程序死亡。
抗癌劑可以是許多化學(xué)治療劑的一種，例如烷基化劑，拮抗代謝 劑，激素試劑，抗生素，秋水仙堿，長春花生物堿，L-門冬酰胺酶， 普魯千肼，羥基脲，米托坦，亞硝基脲或咪唑羧酰胺。適宜的藥劑是 那些可促進微管蛋白的去極化的藥劑。在一個實施方案中，抗癌劑是 秋水仙堿或長春花生物》成；長春花-咸或長春花新堿。在其中抗癌劑是 長春花新堿的實施方案中，優(yōu)選，使所治療的細胞可以耐受大約5 mg/ml濃度的長春花新堿。使細胞對于抗癌劑具有耐受性的細胞治療， 可以通過細胞與藥劑接觸至少3至5天而發(fā)生效力。使產(chǎn)生的細胞與 上面的任何化合物進行接觸，如先前所描述。除了上述化學(xué)治療藥劑 之外，化合物還可以與放射治療一起給予。烷基化劑
使烷基化劑與親核的殘基，例如在DNA產(chǎn)物的核苷酸前體物上的
化學(xué)實體反應(yīng)。通過使這些核苷酸烷基化，并防止它們裝配到DNA中，
它們影響細胞分裂過程。
烷基化劑的例子包括但不局限于二氯乙胺(氮芥，例如，苯丁酸 氮芥，環(huán)磷酰胺，異環(huán)磷酰胺，二氯曱二乙胺，苯丙氨酸氮芥，尿嘧 咬氮芥)，氮丙啶(例如，硫替派)，烷基酮磺酸酯(例如，白消安)，亞硝 基脲(例如，卡莫司汀，環(huán)己亞硝脲，鏈脲霉素)，非典型烷基化劑(六 曱蜜胺，達卡巴嗪，和普魯,肼)，鉑化合物(卡鉑和順鉑)。這些化合 物與磷酸根、氨基、羥基、sulfihydryl、羧基和咪唑基反應(yīng)。
在生理條件下，這些藥物離子化并產(chǎn)生陽離子，陽離子附著于敏 感核酸和蛋白，導(dǎo)致細胞周期停滯和/或細胞死亡。烷基化劑是細胞周 期階段非特異性的試劑，因為它們可獨立地施加它們在細胞周期的特 定階段的活性。在Gl或M期，氮芥和烷基酮磺酸酯對細胞是最有效的。 亞硝基脲、氮芥和氮丙啶可削弱從Gl和S期至M期的進展。Chabner和 Collins編(1990) "Cancer Chemotherapy: Principles and Practice", Philadelphia: JB Lippincott。
烷基化劑對多種肺瘤疾病具有活性，在白血病和淋巴瘤以及實質(zhì) 固態(tài)瘤的治療中具有顯著的活性。臨床上，在治療下列疾病的過程中 通常使用這類藥物急性和慢性白血?。涣馨腿庋磕[?。环荋odgkm 淋巴瘤；多重骨髓癌；初期腦腫瘤；乳房癌，卵巢癌，睪丸癌，肺癌， 膀胱癌，宮頸癌，頭和頸癌，和惡性黑色素瘤。
所有烷基化劑共有的主要毒性是骨髓抑制。另外，通常出現(xiàn)嚴重 程度不定的胃腸不良影響，各種器官毒性與具體化合物有關(guān)。Black和 Livingston (1990) Drugs 39: 489-501;和39: 652-673。
抗生素
抗生素(例如細胞毒素抗生素)是通過直接抑制DNA或RNA合成來 起作用的，并且在整個細胞周期都是有效的?？股氐睦影ㄝ飙h(huán) 類抗生素(例如，多柔比星，柔紅霉素，表柔比星，伊達比星和蒽二酮)， 絲裂霉素C,博來霉素，》文線菌素，plicatomycin。這些抗生素通過輩巴 向不同的細胞組分來妨礙細胞生長。例如，通常認為蒽環(huán)類抗生素可
16妨礙DNA拓樸異構(gòu)酶II在轉(zhuǎn)錄活性DNA的區(qū)域中的作用，導(dǎo)致DNA
鏈斷裂。
通常認為，博來霉素與鐵螯合，形成活化絡(luò)合物，然后其與DNA 的堿基結(jié)合，導(dǎo)致鏈斷裂和細胞死亡。
抗生素已經(jīng)作為一系列胂瘤疾病的療法使用，包括乳房癌，肺癌， 胃癌和甲狀腺癌，淋巴瘤，粒細i包性白血病，骨髓瘤和肉瘤。該組中 蒽環(huán)類抗生素的初期毒性是骨髓抑制，尤其是粒性白細胞減少癥。粘 膜炎常常伴隨著粒性白細胞減少癥，并且嚴重程度與骨髓抑程度有關(guān)。 還有顯著的心臟毒性，其與高劑量給予蒽環(huán)類抗生素有關(guān)。
抗代j射劑
抗代謝劑(即代謝拮抗劑)是一組妨礙代謝過程的藥物，而代謝過程 對癌細胞的生理機能和增殖是不可缺少的。增殖活躍的癌細胞需要連 續(xù)合成大量核酸、蛋白、脂質(zhì)及其它重要的細胞組成部分。
許多代謝拮抗劑抑制嘌呤或嘧啶核苷的合成，或抑制DNA復(fù)制的 酶。 一些代謝拮抗劑還妨礙核糖核苷和RNA的合成，同時/或妨礙氨基 酸代謝和蛋白質(zhì)合成。通過干擾重要細胞組成部分的合成，代謝拮抗 劑可以延遲或抑制癌細胞的生長?？勾x劑的例子包括但不局限于 氟尿嘧。定(5-FU),氮尿苷(5-FUdR),氨甲喋呤，亞葉酸，羥基脲，硫鳥 噤呤(6-TG),巰基噪呤(6-MP),阿糖胞苷，噴司他丁，氟達拉濱磷酸鹽，
克拉屈濱(2-CDA), n冬酰胺酶和吉西他濱。
抗代謝劑已經(jīng)廣泛地用于治療一些普通形式的癌癥，包括結(jié)腸癌， 直腸癌，乳房癌，肝癌，胃癌和胰腺癌，惡性黑色素瘤，急性和慢性 白血病和毛細胞白血病。代謝拮抗劑治療的許多不良影響起因于在核 分裂活躍組織例如骨髓或胃腸粘膜中抑制細胞增殖。用這些藥劑治療 的患者通常會出現(xiàn)骨髓抑制、口腔炎、腹瀉和脫發(fā)。Chen和Grem(1992) Curr. Opin. Oncol. 4: 1089-1098。
激素藥劑
激素藥劑是調(diào)節(jié)其目標(biāo)器官的生長發(fā)育的 一組藥物。大部分激素 藥劑是性甾體和它們的衍生物和其類似物，例如雌激素，孕激素，抗 雌激素，雄激素，抗雄激素和孕酮。這些激素藥劑可以充當(dāng)性甾體的受體的拮抗劑，下調(diào)受體表達和重要基因的轉(zhuǎn)錄。這種激素藥劑的例 子是合成雌激素(例如，己烯雌酚)，抗雌激素藥(例如，它莫西芬，枸
櫞酸托瑞米芬，氟曱睪酮(fluoxymesterol)和雷諾昔酚)，抗雄激素(比卡 魯胺，尼魯米特，氟他胺)，芳香酶抑制劑(例如，氨魯米特，阿那曲唑 和四唑)，促黃體生成激素釋放激素(LHRH)類似物，酮康唑，醋酸性瑞 林，亮丙瑞林，曱地孕酮和美服培酮。
激素藥劑用于治療乳腺癌、前列腺癌、黑素瘤和腦膜瘤。因為激 素的主要作用是通過甾體受體介導(dǎo)的，60%受體陽性的乳腺癌對一線激 素治療作出反應(yīng)；少于10%的受體陰性胂瘤產(chǎn)生應(yīng)答。與激素藥劑有 關(guān)的主要副作用是潮紅(flare )。時常發(fā)生的現(xiàn)象是急劇增加的骨疼痛、 皮膚病變周圍的紅斑和引起高鈣血癥。
具體地說，孕激素用于治療子宮內(nèi)膜癌，這是由于這些癌發(fā)生在 與高水平雌激素接觸的女性中(無孕激素防護)。
抗雄激素基本上用于治療前列腺癌，前列腺癌是激素依賴性的。 它們用于降低睪酮的水平，由此抑制肺瘤的生長。
激素治療乳腺癌涉及降低腫瘤乳房細胞中的雌激素受體的雌激素-依賴性活化的水平?？勾萍に赝ㄟ^與雌激素受體結(jié)合來起作用，并且 妨礙共活化劑的補充，由此抑制雌激素信號。
LHRH類似物用于治療前列腺癌，降低睪酮的水平，因此降低腫 瘤的生長。
芳香酶抑制劑通過抑制激素合成需要的酶來起作用。在絕經(jīng)后女 性中，雌激素的主要來源是通過雄烯二酮的轉(zhuǎn)化(利用芳香酶)。
植物-起源的藥劑
植物來源的藥劑是來源于植物的 一組藥物，或基于該藥劑的分子 結(jié)構(gòu)進行改進的藥物。它們通過妨礙細胞分裂所必需的細胞組分的組 裝來抑制細胞復(fù)制。
植物來源的藥劑的例子包括長春花生物堿(例如，長春花新堿，長 春花堿，去乙酰長春酰胺，長春利定和長春瑞賓)，鬼臼霉素(例如，依 托泊苷(VP-16)和表鬼臼毒噻吩糖苷(VM-26)),紫杉烷(taxane)(例如， 太平洋紫杉醇和多西他賽)。這些植物來源的藥劑通常充當(dāng)與微管蛋白 結(jié)合并抑制有絲分裂的抗有絲分裂劑。認為鬼臼霉素例如依托泊苷通過與局部異構(gòu)酶ii相互作用而妨礙DNA合成，導(dǎo)致DNA鏈斷裂。
植物來源的藥劑用于治療許多形式的癌。例如，長春花新堿用于 治療白血病，Hodgkin和非Hodgkm淋巴瘤，和兒童期腫瘤神經(jīng)母細胞 瘤，橫紋肌肉瘤和維耳姆斯瘤。長春花堿用于治療淋巴瘤，陰嚢癌， 腎細胞癌，蕈樣真菌病和皮膚多發(fā)性出血性肉瘤。多西他賽(doxetaxel) 表明針對晚期乳腺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌具有期望的活 性。
依托泊苷針對許多瘤具有活性，其中小細胞肺癌、陰嚢癌和NSCLC 最具響應(yīng)性。
植物來源的藥劑對所治療的患者具有顯著的副作用。長春花生物 堿顯示了不同范圍的臨床毒性。長春花生物堿的副作用包括神經(jīng)毒性、 改變血小板功能、骨髓抑制和白血球減少癥。太平洋紫杉醇導(dǎo)致劑量 限制性中性白細胞減少，同時其它造血細胞系的相對貧乏。鬼臼素 (epipophyllotoxins)的主要毒性是血液毒性(中性白細l包減少和血小澤反減 少)。
其它副作用包括暫時的肝臟酶異常、脫發(fā)、過敏性反應(yīng)和周圍神 經(jīng)病。
生物藥劑
生物藥劑是當(dāng)單獨使用或與化學(xué)治療和/或放射治療組合使用時可 引起癌/肺瘤衰退的生物分子。生物藥劑的例子包括免疫調(diào)節(jié)蛋白例如 細胞因子、針對腫瘤抗原的單克隆抗體、抑癌基因和癌癥疫苗。
細胞因子具有極大的免疫調(diào)節(jié)活性。 一些細月包因子例如白細胞介 素-2(IL-2，阿地白介素)和干擾素-oc(IFN-a)表明了抗癌活性，并且 已經(jīng)允許用于治療患有轉(zhuǎn)移性腎細胞癌和轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤的患 者。IL-2是T細胞生長因子，其是T細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的核心。人 們認為，IL-2的對于一些患者的選擇性抗癌效果，是在自身和非自身 之間區(qū)分的細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的結(jié)果。
干擾素-a包括23個以上具有重疊活性的相關(guān)亞型。已經(jīng)表明， IFN-a針對許多實體和血液惡性肺瘤具有活性，后者似乎是尤其敏感。
干擾素的例子包括干擾素-oc ，干擾素-P (纖維母細胞干擾素)和干 擾素-Y(纖維母細胞干擾素)。其它細胞因子的例子包括紅細胞生成素(epoietm- oc),粒細胞-CSF(filgrastm)和粒細胞，巨噬細胞-CSF(沙格司 亭)。除細胞因子以外的其它免疫調(diào)節(jié)藥劑包括卡介苗、左旋四咪唑和 奧曲肽(模擬天然存在的激素抑生長素的效果的長效八肽)。
此外，抗癌治療可以包4舌用肺瘤接種方法中〗吏用的抗體和試劑 進行免疫治療的處理。在這種治療中，初期藥物是抗體，其單獨或攜 帶例如針對癌細胞的毒素或化學(xué)治療劑/細胞毒素類。針對肺瘤抗原的 單克隆抗體是針對被腫瘤表達的抗原所引起的抗體，優(yōu)選腫瘤特異性 抗原。例如，單克隆抗體HERCEPTIN⑧(曲妥珠單抗)是針對人類表皮 生長因子受體2(HER2)(其在一些乳房腫瘤包括轉(zhuǎn)移性乳腺癌中過度表 達)產(chǎn)生的。HER2蛋白的超表達與更具侵害性的疾病有關(guān)，并且臨床 4艮難診斷。HERCEPTIN⑧用作單一藥劑，用于治療患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌 的患者(其腫瘤過度表達HER2蛋白)。
針對腫瘤抗原的單克隆抗體的另 一 個例子是RITUXAN (美羅 華)，其是針對淋巴瘤細胞上的CD20產(chǎn)生的，并且其選擇性地消耗正 常和惡性的CD20+成熟前B細胞(pre-B )和成熟B細胞。
RITUXAN用作單一藥劑，用于治療患有復(fù)發(fā)性或難治療的輕度或 濾泡性的CD20+ 、 B纟田月包非Hodgkin's淋巴瘤的患者。MYELOTARG (吉 妥珠單抗奧哇米星(gemtuzumab ozogamicm》和CAMPATH⑧(阿侖單抗 (Alemtuzumab))是可以4吏用的、針對腫瘤抗原的單克隆抗體的進一 步例子。
抑癌基因是具有抑制細胞生長和分裂周期功能的基因，由此妨礙 腫瘤形成的進展。抑癌基因的突變可導(dǎo)致細胞忽略抑制信號網(wǎng)絡(luò)的一 或多個組成部分，克服細胞周期關(guān)卡，并導(dǎo)致受控細胞的高速生長， 形成癌。抑癌基因的例子包括Duc-4， NF-l, NF-2, RB, p53, WT1, BRCA1和BRCA2。
DPC4與胰腺癌有關(guān)，并且參與可抑制細胞分裂的胞質(zhì)路徑。NF-1 編碼抑制Ras的蛋白，其是一種胞質(zhì)抑制蛋白。NF-1與神經(jīng)系統(tǒng)的纖 維神經(jīng)瘤和腎上腺髓質(zhì)瘤以及骨髓性白血病有關(guān)。NF-2將參與神經(jīng)系 統(tǒng)的腦膜瘤、神經(jīng)鞘瘤和室管膜瘤的核內(nèi)蛋白編碼。RB編碼pRB蛋白、 核內(nèi)蛋白，后者是細胞周期的主要抑制劑。RB與成視網(wǎng)膜細胞瘤以及 骨癌、膀胱癌、小細胞肺癌和乳腺癌有關(guān)。P53將調(diào)節(jié)細胞分裂并可引 起細胞程序死亡的p53蛋白編碼。在許多癌中可發(fā)現(xiàn)p53的突變和/或
20不活躍。WTI與腎的維耳姆斯瘤有關(guān)。BRCA1與乳房和卯巢癌有關(guān)， BRCA2與乳腺癌有關(guān)。胂瘤抑制基因可以轉(zhuǎn)移到肺瘤細胞中，在其中， 其發(fā)揮它的腫瘤抑制功能。
癌疫苗是引起身體對腫瘤產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的一組藥劑。處于 研究與開發(fā)和臨床試驗中的大部分癌疫苗是腫瘤相關(guān)的抗原(TAAs)。 TAAs是存在于腫瘤細力包上、并且在正常細力包上相對缺乏或減少的結(jié)構(gòu) (即蛋白、酶或碳水化合物)。由于對胂瘤細胞具有相當(dāng)?shù)莫毺匦?，TAAs 為免疫系統(tǒng)提供耙向，以便辨別它們并致使它們消除。TAAs的例子包 括神經(jīng)節(jié)苷脂(GM2),前列腺特異性抗原(PSA), oc-胎兒球蛋白(AFP), 癌胚抗原(CEA)(由結(jié)腸癌及其它腺癌例如乳房、肺、胃和胰腺癌產(chǎn)生)， 黑素瘤相關(guān)的抗原(MART-l, gap 100, MAGE 1,3酪氨酸酶)，乳頭狀 瘤病毒E6和E7片段，自體同源肺瘤細胞和異源肺瘤細胞的全部細胞 或部分/溶胞產(chǎn)物。
其它治療
最新發(fā)展已經(jīng)介紹了 ，除了用于治療癌的傳統(tǒng)細胞毒素和激素治 療之外，用于癌的治療的其它治療。例如，許多形式的基因治療正在 進行臨床前的或臨床試一驗。
此外，目前基于抑制腫瘤血管形成(血管生成)，開發(fā)了各種方法。 這種原理的目標(biāo)是從新成型肺瘤血管系統(tǒng)所提供的營養(yǎng)和供氧方面隔 斷腫瘤。
此外，還嘗試通過誘導(dǎo)腫瘤細胞的終末分化來治療癌癥。適宜的 分化藥劑包括在一個或多個下列參考文獻中公開的化合物。
a) 極性化合物(Marks等人(1987); Friend, C， Scher, W.， Holland, J. W.，和Sato, T. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)68: 378-382; Tanaka, M., Levy, J., Terada, M., Breslow, R., Rifkind, R. A.， 和Marks, P. A. (1975) Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)72: 1003-1006; Reuben, R. C， Wife, R. L., Breslow, R., Rifkmd, R. A.，和Marks， P. A. (1976) Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)73: 862-866);
b) 維生素D和視黃酸的衍生物(Abe, E., Miyaura, C, Sakagami， H., Takeda, M., Konno, K. ， Yamazaki, T., Yoshika, S., 和Suda, T.(1981)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)78: 4990-4994; Schwartz, E. L，Snoddy, J. R., Kreutter, D., Rasmussen， H.，和Sartorelli, A. C.(1983)Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 24: 18; Tanenaga, K., Hozumi, M.,和Sakagami, Y.(1980)CancerRes. 40: 914-919);
c) 甾體激素(Lotem, J.和Sachs, L. (1975) hit. J. Cancer 15:731-740);
d) 生長因子(Sachs, L. (1978)Nature(Lond.)274: 535, Metcalf, D. (1985) Science, 229: 16-22);
e) 蛋白酶類(Scher, W., Scher, B. M.,和Waxman, S. (1983) Exp. Hematol. 11: 490-498; Scher， W., Scher, B. M.,和Waxman, S. (1982) Biochem. & Biophys. Res. Comm. 109: 348-354》
f) 肺瘤促進劑(Huberman, E.和Callaham, M. F. (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 76: 1293-1297; Lottem, J.和Sachs, L. (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 76: 5158-5162);和
g) DNA或RNA合成的抑制劑(Schwartz, E. L.和Sartorelli, A. C. (1982) Cancer Res. 42: 2651-2655, Terada, M., Epner, E., Nudel, U., Salmon, J., Fibach， E., Rifkind, R. A.,和Marks, P. A. (1978) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 75: 2795-2799; Morin， M. J.和Sartorelli, A. C. (1984) Cancer Res. 44: 2807-2812; Schwartz, E. L., Brown， B. J., Nierenberg, M.， Marsh, J. C,和Sartorelli, A. C. (1983) Cancer Res. 43: 2725-2730; Sugano， H., Furusawa， M., Kawaguchi, T., 和Hcawa, Y. (1973) Bibl. Hematol. 39: 943-954; Ebert, P. S., Wars, L,和Buell, D. N. (1976) Cancer Res. 36: 1809-1813; Hayashi, M., Okabe， J.，和 Hoz麗，M. (1979)Gann 70: 235-238)。
本發(fā)明藥物組合物與上述任何抗癌劑的聯(lián)合和其用途在本發(fā)明的 范圍之內(nèi)。
在后面的實驗細節(jié)部分的實施例中舉例說明本發(fā)明。列出該部分 是為了幫助理解本發(fā)明，但不是并且不應(yīng)該將其解釋為以任何方式來 限制本發(fā)明，本發(fā)明如后面的權(quán)利要求中所列出。
實一驗細節(jié)部分 實施例1
包含L-賴氨酸和SAHA的晶體組合物的制備
將SAHA溶液(O.IO g,在6.0 ml乙醇中，0.38 mmol)和L-賴氨酸溶液(3.78 ml, 0.1 M水溶液，0.38 mmol)力口入至'j 20.0 ml管瓶中?？梢?按照U.S.專利公開2004/0072735公開的方法合成SAHA。將得到的混 合物在40。C攪拌4小時，冷卻至環(huán)境溫度，進一步攪拌12小時。此后， 減壓除去所有的溶劑，將殘余物接納在乙醇(3.0 ml)中。在環(huán)境溫度下 攪拌該漿液24小時，然后過濾收集固體，在真空烘箱中干燥。
實施例2
包含L-賴氨酸和SAHA的晶體組合物的X射線粉末衍射分析 使用從2至40度2 6的連續(xù)掃描，在PANanalytical X'Pert Pro X 射線粉末衍射儀上產(chǎn)生晶體組合物的X射線粉末衍射圖(圖1)。銅K-al(Kocl)和K-a2(Ka2)輻射用作輻射源。在環(huán)境條件下進4亍實-瞼。 晶體組合物的特點在于X射線粉末衍射圖(XRPD)在6.8、 20.1和 23.2度(2 6)處具有峰。晶體組合物的進一步的特點在于在12.6、 18.7 和24.0度(2 6 )處具有峰。在12.0、 16.4和29.3度(2 6 )處觀察到表征晶 體組合物的其它峰。
實施例3
晶體組合物的差示掃描量熱
DSC曲線(圖2)是利用TA Instruments Q1000差示掃描量熱計產(chǎn)生 的，加熱速率1(TC/分鐘，從室溫至300。C,在巻邊的鋁盤中，具有氮 氣氛圍。吸熱線顯示了大約182。C的外延起始溫度。
實施例4 患者研究
口服給予患者藥物組合物，藥物組合物包含胺堿SAHA鹽或包含 胺堿和SAHA的晶體組合物。給予患有皮膚T細胞淋巴瘤或周圍T細 胞淋巴瘤的患者藥物組合物，每日 一次，連續(xù)給予，其中所給予的SAHA 的量是400 mg。給予患有皮膚T細胞淋巴瘤或周圍T細胞淋巴瘤的患 者藥物組合物，每日兩次，每周給予三至五天，其中每個劑量所給予 的SAHA的量是300 mg。 口服(po)給予患有晚期白血病和骨髓增生異 常綜合癥(MDS)的患者藥物組合物， 一天三次(tid),給予14天，而后 休息l周，進行3周，其中每個劑量所給予的SAHA的量是100mg、150 mg、 200 mg或250 mg。
盡管參考本發(fā)明的實施方案詳細說明和描述了本發(fā)明，但本領(lǐng)域 技術(shù)人員應(yīng)該理解，可以在不背離所描述的本發(fā)明的意思的條件下， 進行形式和細節(jié)上的各種變化。本發(fā)明的范圍是由下述權(quán)利要求定義的。
參考文獻
1. Sporn, M. B.， Roberts, A. B., andDriscoll, J. S.(1985)in Cancer: Principles and Practice of Oncology, eds. Hellman, S., Rosenberg, S.A.， andDeVita， V T., Jr., Ed. 2, (J. B. Lippmcott, Philadelphia), P. 49.
2. Breitman, T. R., Selonick, S. E., and Collins, S. J.(1980)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 2936-2940.
3. Olsson, I. L. and Breitman, T. R.(1982)Cancer Res. 42: 3924-3927.
4. Schwartz, E. L. and Sartorelli, A. C.(1982)Cancer Res. 42: 2651-2655.
5. Marks, P. A., Sheffery, M., andRifkmd, R. A.(1987)Cancer Res. 47: 659.
6. Sachs, L.(1978)Nat腦(Lond.)274: 535.
7. Fnend， C, Scher, W., Holland, J. W., and Sato, T.(1971)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)68: 378-382.
8. Tanaka， M., Levy, J., Terada, M. ， Breslow, R.， Rifkmd, R. A., andMarks, P. A.(1975)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)72: 1003-1006.
9. Reuben, R. C， Wife, R. L., Breslow, R., Rifkmd, R. A., and Marks, P. A.(1976)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)73: 862-866.
10. Abe ， E., Miyaura, C, Sakagami, H., Takeda, M., Konno， K., Yamazaki, T., Yoshika, S., and Suda， T.(1981)Proc. Natl, Acad, Sci.(USA)78: 49卯-4994.
11. Schwartz, E. L., Snoddy, J. R. ， Kreutter, D., Rasmussen, H., and Sartorelli, A. C.(1983)Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 24: 18.
12. Tanenaga, K., Hozumi, M., andSakagami， Y.(1980)Cancer Res. 40: 914-919.
13. Lotem, J. and Sachs, L.(1975)Int. J. Cancer 15: 731-740.14. Metcalf， D.(1985)Science, 229: 16-22.
15. Scher， W., Scher, B. M., andWaxman, S.(1983)Exp. Hematol. 11: 490-498.
16. Scher, W., Scher, B. M., and Waxman， S.(1982)Biochem. & Biophys. Res. Comm. 109: 348-354.
17. Huberman, E. and Callaham, M. F.(1979)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)76: 1293-1297.
18. Lottem, J. and Sachs, L.(1979)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)76: 5158-5162.
19. Terada, M., Epner, E., Nudel, U., Salmon, J., Fibach, E.， Rifkmd， R. A., and Marks, P. A.(1978)Proc. Natl. Acad. Sci.(USA)75: 2795-2799.
20. Morm, M. J. and Sartorelli, A. C.(1984)Cancer Res. 44: 2807-2812.
21. Schwartz, E. L. ， Brown, B. J., Nierenberg， M., Marsh, J. C， and Sartorelli, A. C.(1983)Cancer Res. 43: 2725-2730.
22. Sugano ， H., Fumsawa, M., Kawaguchi, T. ， and Ikawa, Y(1973)Bib1. Hematol. 39: 943-954.
23. Ebert, P. S., Wars, L, andBuell, D. N.(1976)Cancer Res. 36: 1809-1813.
24. Hayashi, M.， Okabe, J., and Hozumi, M.(1979)Gann 70: 235-238.
25. Richon, VM., Webb, Y., Merger, R., et al.(1996)PNAS 93: 5705-8.
26. Cohen, L.A., Amin, S., Marks, RA., Rifkmd, R.A.， Desai, D., and Richon, V.M.(1999)Anticancer Research 19: 4999-5006.
27. Grunstem, M.(1997)Nature 389: 349-52.
28. Fmmn， M.S., Domgian, JR., Cohen, A., et al.(1999)Nat腦401: 188-193.
29. Van Lint, C， Emiliani, S., Verdin, E.(1996)Gene Expression 5: 245-53.
30. Archer, S. Shufen, M. Shei， A., Hodm, R.(1998)PNAS 95: 6791-96.
2531. Dressel, U., Renkawitz, R., Baniahmad, A.(2000)Anticancer Research 20(2A): 1017-22.
32. Parker, Vigoroux, Reed, AIChE J.(2000)pp. 1290-99.
33. Nunez， Espiell, Chem.Eng.Sci.(1986) p p.2075-83.
34. O. Levenspiel: Chemical Reaction Engineering, 2nd Ed., p. 373.
35. M. Va匪:J. of Colloid and Interface Sci.(2000)pp. 143-160.
36. P. J. Hill and K. M. Ng， AIChE J.(1995)pp. 1204-1216.
權(quán)利要求
1.辛二酰苯胺異羥肟酸(SAHA)的賴氨酸鹽或其水合物或溶劑化物的組合物。
2. 權(quán)利要求1的組合物，其中賴氨酸與SAHA的化學(xué)計量比是1:1。
3. 權(quán)利要求2的組合物，其是SAHA的L-賴氨酸鹽。
4. 包含賴氨酸和SAHA的晶體組合物。
5. 權(quán)利要求4的晶體組合物，包含L-賴氨酸和SAHA。
6. 權(quán)利要求5的晶體組合物，其特征在于銅Ka輻射的X射 線粉末衍射圖在6.8、 20.1和23.2度2 6處包括特征峰。
7. 權(quán)利要求5的晶體組合物，其特征在于銅Koc輻射的X射 線粉末衍射圖在6.8、 12.6、 18.7、 20.1、 23.2和24.0度2 6處包括特征 峰。
8. 權(quán)利要求5的晶體組合物，其特征在于銅Ka輻射的X射 線粉末衍射圖在6.8、 12.0、 12.6、 16.4、 18.7、 20.1、 23.2、 24.0和29.3 度2 6處包括特征峰。
9. 權(quán)利要求8的晶體組合物，其是SAHA的L-賴氨酸鹽。
10. —種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的組合物、或權(quán)利要求4 或8的晶體組合物和可藥用載體。
11. 治療癌癥的方法，包括給予患者治療有效量的權(quán)利要求1或4 的組合物的步驟。
12. —種SAHA鹽，其由選自下列的胺石成配制苯明(benethamme ), 甜菜堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基氨基)乙醇，二乙醇胺，乙二胺，哈胺 (Hydrabamme), lH-咪唑，4-(2-羥乙基)嗎淋，嗎啉，哌啶，派漆，氨 基丁三醇和賴氨酸，或其水合物或溶劑化物。
13. —種晶體組合物，其包含SAHA和苯明(benethamme),甜菜 堿，膽堿，丹醇，2-(二乙基氨基)乙醇，二乙醇胺，乙二胺，哈胺 (Hydrabamme), lH-咪唑，4-(2-羥乙基)嗎淋，嗎啉，哌啶，哌漆，氨 基丁三醇或賴氨酸。
14. 一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求12的SAHA鹽、或權(quán)利要 求13的晶體組合物和可藥用載體。
15. 治療癌癥的方法，包括給予患者治療有效量的權(quán)利要求14的藥物組合物的步驟。
16. 獲得包含SAHA和胺堿的晶體組合物的方法，包括將SAHA和胺堿在有機溶劑或有機溶劑和水的混合物中結(jié)晶的步驟。
17. 獲得SAHA的胺堿鹽的方法，包括在反應(yīng)介質(zhì)中加入SAHA和胺堿的步驟。
全文摘要
本發(fā)明提供了SAHA的胺堿鹽、其多晶型物和藥物組合物。本發(fā)明提供了通過給予藥物組合物來治療癌癥的方法。本發(fā)明還提供了包含胺堿和SAHA的晶體組合物。本發(fā)明還提供了獲得胺堿鹽和晶體組合物的方法。
文檔編號A61K31/185GK101516191SQ200780035105
公開日2009年8月26日 申請日期2007年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月28日
發(fā)明者A·E·麥克奧恩, F·-R·察 申請人:默克公司