專利名稱：：提供增強牙齒色斑消除的口腔組合物的制作方法
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：總的來說，本發(fā)明涉及有效去除牙齒表面色斑的口腔組合物(例如糖食或口香糖產品例如壓縮的口香糖)。具體來說，本發(fā)明涉及包含包被的或囊封的蛋白酶的口腔組合物，以提供有效去除牙齒色斑的口腔組合物。發(fā)明概述因此，簡而言之，本發(fā)明涉及有效去除牙齒表面色斑的口腔組合物。該口腔組合物包含囊封的蛋白酶，其中含有有效去除牙齒表面色斑的蛋白酶，以及至少部分包被蛋白酶表面的囊封劑。本發(fā)明還涉及制備有效去除牙齒表面色斑的口腔組合物的方法。該方法包括將囊封的蛋白酶與口腔組合物的一種或多種成分相接觸。被囊封的蛋白酶含有有效去除牙齒表面色斑的蛋白酶，以及至少部分包被蛋白酶表面的囊封劑。附圖簡述圖1是測試實施例42中描述的酶(即枯草桿菌蛋白酶)去除色斑的量效圖。圖2提供了實施例42中描述的酶(即枯草桿菌蛋白酶)與陰性和陽性對照的色斑去除功效的比較。圖3是實施例43中描述的活性(即枯草桿菌蛋白酶)濃度對樣品時間的圖。圖4提供了實施例42中描述的體外測試和實施例43中描述的測試的比較。優(yōu)選實施方案的詳細描述蛋白酶可通過破壞和/或除去牙齒的一層或多層蛋白部分(例如菌膜或菌斑層)并從而破壞和/或除去與這些蛋白結合的色斑，用于從牙齒表面除去色斑。不幸的是，許多或大多數本來可以有效去除色斑的酶，在各種不同的口腔護理組合物中不適合或無效，這是因為它們缺乏穩(wěn)定性，特別是它們缺乏在高溫工藝(例如擠壓口香糖的工藝)中使用的熱穩(wěn)定性。但是，按照本發(fā)明，并且如下文將進一步詳細描述的那樣，已經發(fā)現含有包被或囊封的蛋白酶的口腔組合物可有效去除牙齒的色斑，并且可以用于低溫、低水分含量的組合物中，例如壓縮的薄荷和口香糖配方，以及在本文別處提到的其它組合物。包被的或囊封的蛋白酶有效地去除牙齒的色斑，同時與未包被或未囊封的蛋白酶相比，還表現出改進的穩(wěn)定性和相容性。更具體來說，包被的或囊封的蛋白酶在通常用于制備它們作為其一部分的顆粒狀和/或低水分含量的口腔組合物的條件下表現出改進的穩(wěn)定性，并表現出與這些條件的改進的相容性。在各種不同的實施方案中，包被的或囊封的酶可以摻入到口腔組合物中，這些口腔組合物在限制或防止酶變性的相對溫和的條件下制備。具體來說，囊封的酶可以摻入到口腔組合物中，這些口腔組合物的制備方式使得該口腔組合物的一種或多種成分的混合物的溫度在向其中導入囊封的酶之前和/或之后足夠的低，以便酶的變性即便沒有被防止，也被顯著限制。此外，囊封的酶可以采用使得其中的水分含量對用于所需的口腔組合物來說足夠低的方式制備。通常，囊封的酶的水分含量少于大約6重量％、少于大約4重量％、少于大約2重量％、甚或少于大約1重量％。例如，在囊封的酶是通過噴霧干燥制備的某些實施方案中，囊封的酶的水分含量可以是大約1.5重量％。就此而言，應該注意的是，給定的口腔組合物和囊封的酶的工藝條件(例如溫度、pH、濕度等)至少部分將是所用的酶以及它將被摻入的口腔組合物的所需水分含量的函數。因此，可以使用本
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已知的方法來確定囊封的酶和口腔組合物的可接受的組合(例如口腔組合物的成分、工藝條件等)。還應該提到的是，包被的或囊封的蛋白酶的穩(wěn)定性提高可以使用本
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已知的方法來測量或測定。例如，可以使用溫度活性分布圖和/或溫度系數(例如在一個溫度下化學反應的速度(Vt)與在比第一個溫度低10°C的溫度下反應的速度的比率)來測量或測定包被的或囊封的酶相對于未包被的或未囊封的酶的穩(wěn)定性。不受任何特定理論的束縛，一般認為，蛋白酶的作用是破壞和/或除去隨時間在牙齒表面形成的菌膜/菌斑層的蛋白部分，從而除去了與這些蛋白結合的色斑。蛋白酶，也可以被稱為蛋白水解酶或蛋白質酶，具體來說是催化功能在于水解或破壞這些蛋白的肽鍵的酶。蛋白酶在水解各種不同的肽鍵的能力上不同；也就是說，每種類型的蛋白酶分裂特定類型的肽鍵。適合用于本發(fā)明的蛋白酶包括例如組織蛋白酶、胃蛋白酶、凝乳酶、嗜熱菌蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶及其組合。在各種不同的優(yōu)選實施方案中，蛋白酶包括枯草桿菌蛋白酶。適合用于本發(fā)明的蛋白酶可以表征為它們的作用方式，包括例如作為絲氨酸蛋白酶、真菌蛋白酶和/或寄生蟲蛋白酶。例如，胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶可以表征為絲氨酸蛋白酶。適合用于本發(fā)明的蛋白酶可以來自于各種不同的來源，包括植物、動物和微生物。例如，木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶可以來自植物(例如來自于植物來源諸如菠蘿、木瓜和獼猴桃)，胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶可以來自動物，而枯草桿菌蛋白酶可以來自例如黑曲霉(A.niger)和/或枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis)。一般來說，含有本發(fā)明制備的(例如通過噴霧干燥)囊封的酶的溶液(例如1重量°/。囊封的酶在水中)的pH，可以在大約3到大約10、大約4到大約9、或大約5到大約8的范圍內。更具體來說，目前相信，含有表現出相對高活性的囊封的酶的溶液的pH，通常可以表現出大約5到大約8的pH，這在本文其它地方詳細描述。此外，根據這些以及其它的實施方案，包括例如通過噴霧干燥制備囊封的酶，通常酶可以含有相對低比例的水不溶性組分。這些水不溶性組分可以包括從囊封劑衍生或是囊封劑的一部分(例如囊封基質)的組分。更具體來說，取決于所用的囊封劑，這些水不溶性組分可以包括無機礦物質化合物，包括例如磷酸鈣、滑石和/或碳酸鈣。例如，在某些實施方案中，囊封的酶可以含有少于大約5重量％、少于大約2.5重量％、少于大約1.5重量％、少于大約1重量％、或少于大約0.5重量％的水不溶性組分。l.包被或囊封的方法根據本發(fā)明，蛋白酶可以在一步或多步工藝中使用一種或多種在本
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中廣泛了解的包被或囊封方法來進行包被(即囊封)，并將在下文進一步詳細描述。具體來說，蛋白酶可以用本
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廣泛了解的并將在本文中進一步詳細描述的方法和包被物進行包被，以便獲得具有改進的加工能力、釋放性質、感覺性質和/或穩(wěn)定性的包被的酶。適合用于本發(fā)明、并且可以單獨或組合使用的本
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已知的包被或囊封方法，包括例如噴霧干燥、噴霧冷卻、噴霧激冷、冷凍干燥(即凍干)、擠出工藝、凝聚、分子包合、流化床包被、成粒、聚結、軋輥壓制以及將酶吸附到支持物上。應該理解，在本文中所稱的囊封的或包被的蛋白酶，一般是指酶至少部分被包被組合物(例如囊封劑)所包被或囊封。在一個具體的實施方案中，基本上所有的酶表面被囊封劑所包被。就此而言，應該進一步指出，在酶沒有被包被組合物或囊封劑完全包被或囊封的那些實施方案中，酶的一部分未包被的表面可以與口腔組合物的其它成分或組分直接接觸，包括例如口香糖組合物的膠基。在這樣的情況下，應該理解，根據本發(fā)明，酶的未包被表面與口腔組合物的其它成分或組分之間的這種相互作用或接觸，不代表"囊封"。應該指出，基本上任何本
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已知的囊封方法都可以用于本發(fā)明，只要該方法不涉及或使用可以造成被囊封的酶的任何顯著程度的變性或失活的步驟、條件等就行。例如，由于酶的溫度敏感性，囊封酶和將酶摻入到口腔組合物中的兩個工藝的溫度，通?？傻陀?0°C、低于60°C、低于50°C、甚或低于40°C，這取決于被囊封的酶。在一個具體的實施方案中，所采用的方法使得所獲得的囊封的或包被的酶具有至少大約25%的活性(即酶活性的至少大約25%經歷囊封/包被過程后得到了保留)、至少大約50%的活性、至少大約75%的活性、至少大約85%的活性、至少大約95%的活性或更高。還應該指出，除了活性之外，還可以控制包被或囊封方法和/或其中使用的步驟或條件，以便優(yōu)化所獲得的囊封的或包被的酶的大小，和/或控制其釋放。因此，包被的或囊封的酶的粒度可以例如被優(yōu)化，以用于口香糖組合物、壓縮的或片狀的口香糖組合物、薄荷糖等。但是，通常，包被的或囊封的酶的粒度可以為至少大約IO微米、至少大約20微米、或至少大約30微米。在各種不同的實施方案中，包括例如通過噴霧干燥制備囊封的酶的實施方案中，囊封的酶的主要部分(例如至少大約卯重量％或95重量％到100重量％)，表現出粒度小于大約250微米、小于大約200微米、小于大約150微米、或小于大約100微米。通常，囊封的蛋白酶表現出小于大約60微米、小于大約50微米或小于大約40微米的粒度，粒度落在例如大約10到大約60微米、大約20到大約50微米、或大約30到大約40微米的范圍內。但是，再次還要提到，粒度可以不是本文提到的那些，而并不背離本發(fā)明的范圍。一般來說，不論制備囊封的酶使用了何種方法，囊封的酶通?？梢跃哂?被囊封的蛋白酶的)至少大約5重量％、至少大約10重量％、至少大約15重量％、至少大約20重量％、至少大約30重量％、至少大10約40重量％、至少大約50重量％、至少大約75重量％、至少大約85重量％、至少大約95重量％或更高的酶濃度或載量，所述載量在例如(被囊封的蛋白酶的)大約5重量％到大約95重量％、大約10重量％到大約85重量％、大約10重量％到大約50重量％、大約15重量％到大約50重量％、大約25重量％到大約40重量％、或大約20重量％到大約40重量％的范圍內。囊封劑在本發(fā)明中使用的適合性，將至少部分是它與被其囊封的酶的相容性、和/或它與其作為一部分的組合物的相容性的函數。此外，囊封劑一般表現出有機溶解性、良好的成膜性質和低的水溶解性。這樣的囊封劑一般包括例如丙烯酸聚合物和共聚物、羧基乙烯基聚合物、聚酰胺、聚苯乙烯、聚乙酸乙烯酯、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮和蠟，及其組合。盡管所有這些材料都可能用于酶的囊封，但通常只有食品級的材料才被考慮。兩種標準的食品級包被材料是蟲膠和玉米蛋白，它們是好的成膜劑，并表現出相對低的水溶性。其它水溶性稍高但也是良好的成膜劑的材料是例如瓊脂、藻酸鹽、廣范圍的纖維素衍生物(例如乙基纖維素、甲基纖維素、羥甲基纖維素鈉和羥丙基甲基纖維素(HMPC))、糊精、明膠和改性淀粉，及其組合。其它的囊封劑如阿拉伯膠或麥芽糖糊精也適合單獨或與一種或多種可接受的囊封劑組合使用。應該理解，在制造各種不同的口香糖組合物和/或制造各種不同的其它口腔組合物(例如糖食)中，本
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已知的和/或本文詳細描述的各種不同的囊封劑和囊封技術，可以單獨或組合使用。制備囊封的蛋白酶的一種具體方法包括噴霧干燥，其中通過將進料(即酶和囊封劑的混合物)噴灑到干熱介質中，使進料從流體狀態(tài)轉變?yōu)楦稍锏念w粒形式。通常，噴霧干燥是一步驟連續(xù)工藝，其中進料是溶液、懸浮液、糊狀的形式或其組合。獲得的干燥產物一般是粉末、顆粒和/或聚結體的形式，干燥產物的具體形式至少部分取決于進料的物理和/或化學性質，以及干燥器的設計和操作。噴霧干燥一般包括進料的霧化(例如從大量液體形成個體液滴的噴霧)，以及噴霧與干燥介質(例如空氣)之間的接觸，以導致水分從進料和囊封的酶中揮發(fā)。噴霧的干燥一直進行到獲得干燥顆粒的所需水分含量，然后從空氣中回收產物。有利的是，噴霧干燥可以使用本
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廣泛了解的方法和設備來進行?？捎糜趪婌F干燥工藝的囊封劑可以具有下面的一種或多種性質它們可以是乳化劑；它們可以是好的成膜劑；它們可以在高固體水平下具有低粘度(例如在高于大約45%固體水平時小于大約500厘泊(cps));它們可以具有低吸濕性；當在成品食物中復原時，它們可以釋放出香料、甜味劑或酶；它們可以不昂貴；它們味道很少或沒有；以及通常它們是可商購的。水解淀粉、改性淀粉、阿拉伯樹膠、纖維素材料(例如羥丙基甲基纖維素)和多元醇是在噴霧干燥中典型使用的囊封劑。但是，應該理解，其它在本
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中廣泛知道的和/或在本文別處詳細描述的囊封劑，同樣適合用于噴霧干燥工藝中。在本發(fā)明的一個具體實施方案中，枯草桿菌蛋白酶可以用含有纖維素材料(例如羥丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素或其它在本文別處提到的纖維素材料)的囊封劑進行噴霧干燥，得到的囊封的酶具有例如大約15重量％載量、大約20重量％載量或大約25重量％載量的枯草桿菌蛋白酶(即枯草桿菌蛋白酶占被囊封的酶的大約15%、大約20%或大約25%到40%的重量比)。囊封的酶非常適合用于例如口香糖組合物例如壓縮的口香糖。噴霧冷卻和噴霧激冷囊封也適合用于本發(fā)明，并且與噴霧干燥類似，這些方法中的每種都包括將核心材料(即酶)分散到液化的包被材料或囊封劑中，并通過加熱的噴嘴將該混合物噴灑到受控的環(huán)境中。但是，與使用熱空氣從包被分散物中揮發(fā)溶劑的噴霧干燥相反，噴霧冷卻和噴霧激冷使用了冷卻到環(huán)境溫度或明顯低于囊封劑(例如融化的脂肪或蠟)的凝固點的冷凍溫度的空氣。噴霧冷卻和噴霧激冷的區(qū)別在于用于冷卻囊封劑的空氣的溫度。例如，噴霧冷卻通常使用溫度高于大約45。C到低于大約125。C的空氣。在至少一個實施方案中，噴霧冷卻在相對低的溫度(例如低于70°C、低于60°C或低于50°C)下進行，以便限制或甚至防止酶的變性。噴霧激冷通常使用溫度從大約25°C到大約40。C的空氣。因此，對于噴霧冷卻和噴霧激冷來說，可以使用多種多樣的具有落在這些指出的溫度范圍內的熔點的囊封材料。例如，對于噴霧冷卻來說，囊封劑可以是植物油或其衍生物，或可選脂肪或硬脂酸甘油酯，其熔點落在從大約45。C到大約120。C的范圍內，以及固體的甘油單酸酯和甘油二酸酯，其熔點落在大約45°C到大約65°C的范圍內。對于噴霧激冷來說，囊封劑可以是例如比噴霧冷卻中使用的油具有相對更低熔點的分級的或氫化的植物油(例如具有例如從大約30。C到大約40。C的范圍內的熔點的油)。應該指出，在一個具體的實施方案中，枯草桿菌蛋白酶可以用含有植物油的囊封劑進行噴霧冷卻，得到的囊封的酶具有例如大約35重量％載量、大約40重量％載量或大約45重量％載量的枯草桿菌蛋白酶(即枯草桿菌蛋白酶占被囊封的酶的大約35重量％、大約40重量％或大約45重量％)。囊封的酶非常適合用于例如糖食組合物的包衣層。適合囊封本發(fā)明的酶的冷凍干燥方法在本
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中是眾所周知的，被描述在例如美國專利No.5,031,336、4,797,290和4，205，132中，其全部內容出于所有相關目的在此引為參考。囊封蛋白酶的其它方法包括使用本
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已知的方法將酶和囊封劑的熔化的料團通過一系列模具擠出并成為脫水的液體。更具體來說，按照本方法，囊封劑例如水溶性聚合物與酶在纖維擠出之前被預先混合。但是，可選地，酶也可以在囊封劑已經熔化后加入到囊封劑中。當酶/囊封劑(例如聚合物)混合物被擠出時，形成了小的纖維，它們一旦與液體接觸就被冷卻，包被材料(例如囊封劑)硬化或固化，13形成截留酶的囊封基質。從液浴中分離擠壓出的細絲，干燥以限制吸濕性，并磨碎。這種囊封方法一般比本文提到的其它囊封方法(例如噴霧干燥)導致活性成分(例如酶)的更長、更延遲的釋放?？捎糜谠摲椒ǖ脑S多囊封劑包括例如乙烯基聚合物例如聚乙烯醇或聚乙烯，以及其它類型的塑性聚合物和/或纖維素材料(例如羥丙基纖維素)。這種囊封方法描述在美國專利No.4,978,537中，其全部內容出于所有相關目的在此引為參考。另一種適合制備本發(fā)明的囊封的蛋白酶的擠出方法包括將酶和囊封劑通過具有兩個室的噴嘴進行同心共擠出。具體來說，核心材料或酶通過內部噴嘴、以及囊封劑通過外部噴嘴，這樣導致由囊封劑的層或殼囊封的核心流體(例如酶)構成的囊或滴的形成。當液體流離開噴嘴時，局部的擾動、例如誘導的振動或重力、離心力或牽引力，控制了粒度。然后通過適合的方法將殼硬化，例如通過冷卻、化學交聯等。產生的囊或囊封的酶粒的大小、以及在每個囊中包含的核心材料的量，可以取決于流體的物理性質(例如密度、粘度和界面張力)、加工的條件(例如流速和溫度)、噴嘴的幾何形狀(例如內孔和外孔的直徑)、和/或系統中存在的小的振動擾動(天然的或施加的)的幅度和頻率。因為有如此多的變量，并且因為通常難以改變一個變量而不影響其它變量(例如，改變殼流體的粘度將改變它與周圍流體之間和它與核心流體之間的界面張力)，因此很難分離出單個因素的影響。因此，共擠出工藝通常是使用本
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已知的方法，根據個案情況進行設計和操作條件的確定。應該指出，在一個具體的實施方案中，胰凝乳蛋白酶與囊封劑(例如碳水化合物囊封劑例如蔗糖、麥芽糖糊精或其組合)一起被擠壓在融化物中，得到的囊封的酶具有例如大約5重量％載量、大約10重量%載量或15重量％載量的胰凝乳蛋白酶；也就是說，胰凝乳蛋白酶占14囊封的酶的大約5重量％、大約10重量％或大約15重量％，囊封性碳水化合物占囊封的酶的大約85重量％、大約90重量％或大約95重量％(例如，大約45重量％到大約55重量％的蔗糖和大約35重量％到大約45重量％)。囊封的酶非常適合用于例如壓縮的口香糖組合物。囊封酶的另一種方法包括凝聚。凝聚囊封一般包括下列步驟(1)形成顆?；蛐〉?，(2)形成凝聚壁，以及(3)分離囊。當兩個或多個帶有相反電荷的大分子膠體被用于形成凝聚體時，該過程被稱為復凝聚。帶有正電荷的膠體包括明膠和瓊脂；具有負電荷的膠體包括羥甲基纖維素和阿拉伯樹膠。根據每種膠體的等電點，為了使具體的膠體帶有相反的電荷，可能需要用水稀釋和/或調整pH。這些反應一般在高于任何一種膠體的膠凝溫度的溫度下發(fā)生；否則，膠體將不處于液相，并且不會發(fā)生凝聚。當在含有油粒的環(huán)境中發(fā)生凝聚時，油粒起到成核劑的作用，蛋白膠體在每個油粒周圍沉積成殼狀的結構。通常，蛋白被用于凝聚，包被材料藉此在被囊封的材料周圍形成微囊，并通過進一步加工與水相分開。復凝聚體的蛋白殼的交聯可以賦予蛋白囊封的油以熱穩(wěn)定性。交聯的存在也可以被極大地施加到天然蛋白結構上，使得分子對解折疊或變性具有抗性。分子包合是另一種實現囊封的方法。該技術發(fā)生在分子水平上，通常利用p-環(huán)糊精或類似的化合物作為囊封材料。p-環(huán)糊精一般具有有限的溶解度、疏水中心以及相對親水的外表面，所有這些都影響它形成復合物的能力。(3-環(huán)糊精分子與在維度適合它的中心孔的化合物形成包合復合物。這些復合物在存在水的情況下發(fā)生的反應中形成。極性比水小的分子和具有適合環(huán)糊精內部的維度適當的分子，可以被包合到環(huán)糊精分子中。環(huán)糊精復合物的組成取決于客體分子的分子量。因為一分子環(huán)糊精正常包含一個客體分子，因此載量取決于包含的化合物。另一種適合用于本發(fā)明的囊封方法是流化床加工或噴霧包被(通常被稱為"空氣懸浮包被")，這一般通過將酶的固體顆粒懸浮在向上移動的空氣流中來進行，空氣流可以被加熱或冷卻。囊封劑可以處于熔化的狀態(tài)或溶解在可揮發(fā)的溶劑中，一般從纖維素衍生物、糊精、乳化劑、脂類、蛋白衍生物和淀粉衍生物中選擇。包被物被霧化并沉積在懸浮的顆粒上。空氣柱的湍流足以維持包被的顆粒的懸浮，允許它們翻滾并從而變得被均勻地包被。一旦到達空氣流的頂部，顆粒移動到外部，向下移動的空氣柱將它們帶回到流化床，這時它們的包被物幾乎干燥和硬化。顆粒每分鐘通過包被循環(huán)多次。在每次相繼通過時，顆粒的隨機方向進一步確保了它們被均勻地包被。成粒或聚結方法也可以用于制備囊封的蛋白酶的工藝中。成?；蚓劢Y一般可以被定義為其中相對小的顆粒集中成較大的、持久的團塊的任何工藝，在團塊中最初的顆粒仍然能夠被識別。成?？捎糜谀曳饷?，以提高酶的流動性質和/或壓縮特性。成粒也可以用于誘導酶的延遲釋放。成粒的基本方法可以分類成三種總類型濕法、干法和其它。在濕法成粒方法中，成粒液體被用于促進聚結過程。將混合物制備成含有互相接觸的個體濕顆粒，以便可以施加部分包被。在除去水或溶劑后，可以將混合物碾磨，并作為粉末狀的包被產品使用。通常，在濕法過篩之前，粉末的濕法塊化在高剪切力的混合器中進行，并且經常將潮濕的顆粒在流化床設備中干燥。濕法成粒也常在流化床干燥器-成粒機中進行，其中液相被噴灑在流化的粉末上，同時熱的空氣流將顆粒干燥。主要有三種方法可以在流化床中增加粉末的大小通過重結晶聚結，成膜粘合劑，以及成層。通過重結晶聚結是對于可溶于水的材料的解決方法。一般來說，非常親水的細粉末，當放置在水中時表面很快潤濕，但是傾向于在粉末主體的周圍形成粘液狀。使用這種技術極大地增加了分散能力。通過成膜粘合劑聚結在使用不溶于水的材料時以及在顆粒強度成問題的情況下利用。顆粒的大小和強度是粘合劑的類型和濃度的函數，并且一般來說，聚結體具有比通過重結晶生產的聚結體低得多的內部孔隙度。通過成層的聚結被用于形成小的聚結體；初級粒子附著于核，并且?guī)讉€聚結體結合成較大的聚結體。這些顆粒以及通過其它技術生產的顆粒之間的區(qū)別在于內部空隙度很少。在干法成粒方法中，干粉末顆粒可以通過壓成塊或更經常通過軋輥壓制被機械地帶到一起。軋輥壓制包括在兩對反向旋轉的軋輥之間將混合的粉末均勻壓制以形成壓制的片，然后將其碾碎或成粒。軋輥壓制工藝已經被發(fā)現對于穩(wěn)定具有不同的大小和性質的顆粒混合物非常有效，這對于載體化合物、甜味劑分子、香料和其它材料的混合來說是有利的。應該指出，在一個具體的實施方案中，枯草桿菌蛋白酶與囊封劑(例如淀粉水解物)一起進行軋輥壓制，得到的囊封的酶具有例如大約45重量°/。載量、大約50重量％載量或大約55重量％載量的酶；也就是說，枯草桿菌蛋白酶占囊封的酶的大約45重量％、大約50重量％或大約55重量％的重量比。囊封的酶非常適合用于例如糖食產品。應該指出，在另一個具體的實施方案中，胰蛋白酶與固體材料(例如碳水化合物，如玉米糖漿固形物)進行聚結，得到的聚結的酶具有例如大約10重量％載量、大約15重量％載量或大約20重量％載量的酶；也就是說，胰蛋白酶占被囊封的酶的大約10重量％、大約15重量％或大約20重量％。囊封的酶非常適合用于例如壓制的薄荷糖。囊封的蛋白酶也可以通過將酶吸附到另一種多孔成分上來制備，以將酶截留在多孔成分的基質中。用于吸附蛋白酶的常用材料包括但不限于二氧化硅、硅酸鹽、聚合物、藥物吸附粘土、類海綿珠或微珠、無定形糖例如噴霧干燥的右旋糖、蔗糖、糖醇、無定形碳酸鹽和氫氧化物、包括鋁和鈣的色淀、植物膠和其它噴霧干燥的材料。根據吸附性材料的類型和它是如何制備的，吸附劑上可以荷載的蛋白酶材料的量將不同。但是，通常，酶的載量可以在從大約25重量％到大約200重量％、大約50重量％到大約150重量％、或大約75重量％到大約125重量％的范圍內(基于支持材料的總重量)。例如，基于支持材料的重量，材料例如二氧化硅和藥物吸附粘土能夠吸附大約50重量％到大約150重量％的酶。通常，將蛋白酶吸附到吸附性支持物上的程序包括在粉末混合器中混合吸附劑，例如火成二氧化硅粉末，以及在繼續(xù)混合的同時將輕微可溶的蛋白酶材料的水溶液噴灑在粉末上。一般來說，水是溶劑，但其它的溶劑例如醇，如果被批準用于食品，也可以使用。當粉末混合時，液體被噴灑在粉末上。噴灑在混合物變濕前停止。從混合器中取出仍然可以自由流動的粉末，干燥以除去水或其它溶劑，然后碾磨到特定的粒度。在將蛋白酶吸附到吸附性支持物上、或者以其它方式固定在吸附性支持物上之后，可以通過一種或多種本文詳細描述的或本
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中廣泛了解的方法將蛋白酶進行囊封。完全或部分囊封都可以使用，這取決于在工藝中使用的包被組合物。完全囊封可以通過例如使用噴霧干燥、噴霧激冷、流化床包被、凝聚或任何其它標準技術進行包被來獲得。部分囊封或包被可以通過使用上面討論的或本
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眾所周知的任何材料進行固定劑/蛋白酶混合物的聚結來達成。蛋白酶可以在結合本文詳細描述的方法之一的單步驟工藝中被包被，或在結合了超過一種的本文詳細描述的方法的多步驟工藝中被包被。例如，蛋白酶可以用任何上面描述的材料進行囊封，然后可以將囊封的蛋白酶也按照前面的描述進行聚結，以獲得囊封的/聚結的蛋白酶產品，它們可用于口腔組合物。2.口腔組合物其中可以結合包被的或囊封的蛋白酶、為組合物提供增加的去除牙齒表面色斑的能力(例如牙齒增白)的口腔組合物，包括例如口香糖(例如壓縮口香糖)、糖食(例如硬糖和韌糖)、牛扎糖、巧克力、18太妃糖、糖衣糖果、飴糖、糖錠、壓制片、膠囊、可食用膜、牙粉、堅果、泡沫、漱口液、口腔噴霧、牙膏產品及其組合。通常，包被的或囊封的蛋白酶占口腔組合物的至少大約0.02重量％、至少大約0.05重量％、至少大約0.1重量％、至少大約0.25重量％、至少大約0.5重量％或至少大約1重量％。此外，囊封的蛋白酶通常占口腔組合物的少于大約10重量％、少于大約8重量％、少于大約6重量％、或少于大約4重量％。因此，包被的或囊封的酶在口腔組合物中的濃度可以在從大約0.02重量％到大約10重量％、或從大約0.1重量％到大約8重量％、或從大約0.5重量％到大約6重量％、或從大約1重量％到大約4重量%的范圍內。就此而言，應該指出，口腔組合物中存在的囊封的蛋白酶的量，可以至少部分是囊封的酶中荷載的酶的函數(例如載量越高，需要加入到口腔組合物中的越少)。因此，在各種不同的可選實施方案中，囊封的蛋白酶可以占口腔組合物的大約0.02重量％到10重量％、或口腔組合物的大約0.03重量％到大約8重量％、或口腔組合物的大約0.05重量％到大約7重量％。在各種這樣的實施方案中，囊封的蛋白酶可以占到口腔組合物中這些范圍低限或與其接近的比例；例如，囊封的蛋白酶可以占口腔組合物的大約0.02重量％到大約1重量％、大約0.03重量％到大約0.75重量％、或從大約0.05重量％到大約5重量％。在還有的其它可選實施方案中，囊封的蛋白酶可以占口腔組合物的大約2重量％到大約10重量％、或大約重量4%到大約8重量％、或口腔組合物的大約5重量％到大約7重量％。在各種其它實施方案中(例如壓縮的和/或片狀口香糖組合物)，囊封的蛋白酶可以占口腔組合物的大約5重量％到大約10重量％、或口腔組合物的大約6重量％到大約10重一般來說，本發(fā)明的口腔組合物可以通過本
技術領域：
的普通專業(yè)人員已知的任何手段或方法來制備。但是，通常，口腔組合物的制備方法包括將囊封的蛋白酶與口腔組合物的一種或多種組分相接觸，以形成混合物。例如，方法通常包括將囊封的酶放置在含有口腔組合物的一種或多種組分、或除了囊封的酶之外的最終口腔組合物的容器中(即囊封的酶最后加入)。一般來說，方法還包括將組分的混合物形成適合口腔消耗的形狀。在制備口香糖的那些實施方案中，一種或多種組分一般可以選自甜味劑、膠基、香料、多元醇及其組合。當需要壓縮的口香糖時，口腔組合物的一種或多種組分一般包括粉末狀的膠基。進一步示例，當要制備的口腔組合物是壓制片時，與囊封的蛋白酶接觸的一種或多種組分一般包括選自甘露糖醇、木糖醇、山梨糖醇、麥芽糖醇、氫化的異麥芽糖(isomaltalose)、乳糖醇、赤蘚糖醇及其組合的多元醇。正如在本文別處指出的那樣，蛋白酶表面的囊封或包被可以在口腔組合物的制備和/或儲存過程中為酶提供更好的穩(wěn)定性。但是，在某些實施方案中，包被的或囊封的酶被摻入到口腔組合物(例如壓縮的口香糖組合物)中的方式或條件可以被最適化，以進一步限制，如果不能避免的話，酶的顯著變性或失活。口腔組合物的制造中可能造成囊封的酶變性的條件是加工溫度，或者更具體來說是囊封的酶與口腔組合物的其它組分接觸時的溫度(例如含有囊封的酶和一種或多種的口腔組合物組分的混合物的溫度)，和/或囊封的酶所接觸或混合的口腔組合物其它組分的pH。一般來說，酶的變性或失活與囊封的酶所接觸或混合的其它組分的溫度和/或pH直接成比例。因此，根據本發(fā)明，囊封的蛋白酶被加入到口腔組合物組分的混合物時的溫度不會對酶造成顯著的變性。例如，該溫度通常低于大約70°C、低于大約60。C、或甚至低于大約50。C。此外，加入或混合囊封的蛋白酶所的組分或組分的混合物的pH、和/或最后的組合物的pH—般不造成酶的顯著變性，可以為至少大約2、至少大約4、或至少大約6，pH可以是例如大于大約2并小于大約8、大于大約5并小于大約7.5、或大于大約6并小于大約7。此外或可選地，加入囊封的蛋白酶20的混合物，一般具有基本上不使酶變性的水分含量。A.口香糖在本發(fā)明的各種不同的實施方案中，口腔組合物是口香糖的形式。本發(fā)明的口香糖可以使用本
技術領域：
已知的各種不同的方法和機器來制備。例如，可以使用例如弓刃混合器分批制備制劑。但是，可選地，制劑也可以使用本
技術領域：
己知的設備，通過連續(xù)工藝制備。常規(guī)的壓片機和劃線機可用于形成和劃分口香糖芯，或者也可以在成型機上制造芯，該機器包括滴落框(dropframe)和氮氣冷卻，允許制備球形、橢圓形和其它的形狀。各種不同的壓片工藝也可以使用，只要它們允許制備均勻的口香糖芯就行。標準的壓片技術包括但不限于直接壓縮和成粒(濕法或干法)。常規(guī)的藥物制片設備或糖食制片設備也可以使用。這樣的設備的例子是Stokes壓片機，可以從StokesManufacturingInc獲得。一般來說，口香糖組合物含有水溶性增量部分(bulkportion)、不溶于水的咀嚼膠基部分以及一種或多種水溶性的調味劑。水溶性增量部分與一部分調味劑在咀嚼過程中在一段時間內消散，而膠基部分在整個咀嚼過程中保留在口中。在口香糖組合物中使用的膠基的量可依賴于許多因素，包括例如所需的咀嚼特性和/或口香糖的其它物理性質。不溶的膠基一般包含彈性體、樹脂、脂肪和油、軟化劑和無機填充劑，并且也可以包含蠟。不溶的膠基可以占口香糖組合物的大約5重量％到大約95重量％之間。但是，膠基通常占口香糖的大約10重量%到大約50重量％之間，更通常占口香糖的大約25重量％到大約35重量％之間。在各種不同的實施方案中，口香糖膠基可以含有大約20重量％到大約60重量％的合成彈性體，最多為大約30重量％的天然彈性體，大21約5重量％到大約55重量％的彈性體增塑劑，大約4重量％到大約35重量％的填充劑，大約5重量％到大約35重量％的軟化劑，以及任選的少量(例如大約1重量％以下)的混雜成分或組分例如著色劑、抗氧化劑等。合成彈性體可以包括但不限于GPC重均分子量為大約IO,OOO到大約95,000的聚異丁烯、異丁烯-異戊二烯共聚物(丁基彈性體)、苯乙烯-丁二烯共聚物(苯乙烯-丁二烯的比率為例如大約1:3到大約3:1)、GPC重均分子量為大約2,000到大約90,000的聚乙酸乙烯酯、聚異戊二烯、聚乙烯、月桂酸乙烯酯的含量為共聚物的大約5重量％到大約50重量％的乙酸乙烯酯-月桂酸乙烯酯共聚物，及其組合。優(yōu)選的合成彈性體包括GPC重均分子量從大約50,000到80,000的聚異丁烯，就結合的苯乙烯來說苯乙烯-丁二烯比例從1:1到1:3的苯乙烯-丁二烯共聚物，GPC重均分子量從大約10,000到65,000的聚乙酸乙烯酯、其中具有較高分子量的聚乙酸乙烯酯一般用于泡泡糖膠基，以及月桂酸乙烯酯含量為10的乙酸乙烯酯-月桂酸乙烯酯共聚物。天然彈性體可以包括天然橡膠，例如煙(smoked)乳膠或液體乳膠和銀菊膠，以及天然的膠例如節(jié)路頓膠(jelutong)、萊開歐膠(lechicaspi)、perillo、sorva、二齒鐵線子膠(massaranduba七alata)、巧克力鐵線子膠(massarandubachocolate)、nispero、rosindinha、糖膠樹膠(chicle)、香港古塔膠(guttahangkang)及其組合。優(yōu)選的合成彈性體和天然彈性體的濃度根據使用了膠基的口香糖是粘性的還是常規(guī)的、是泡泡糖還是普通口香糖而變化。優(yōu)選的天然彈性體包括節(jié)路頓膠、糖膠樹膠、sorva和二齒鐵線子膠。彈性體增塑劑可以包括但不限于天然的松香酯，例如甘油酯或部分氫化的松香、聚合的松香的甘油酯、部分二聚的松香的甘油酯、松香的甘油酯、部分氫化的松香的季戊四醇酯、松香的甲基酯和部分氫化的甲基酯、松香的季戊四醇酯；合成物質例如從a-、P-衍生的萜烯樹脂，和/或上述的任何適當的組合。優(yōu)選的彈性體增塑劑也將根據具體的應用以及所使用的彈性體的類型而變化。填充劑和/或調質劑可以包括碳酸鎂和碳酸^、碎石灰石、硅酸鹽類例如硅酸鎂和硅酸鋁、粘土、氧化鋁、滑石、氧化鈦、磷酸一鈣、二鈣和三鈣、纖維素聚合物例如木頭，及其組合。軟化劑和/或乳化劑可以包括動物脂(tallow)、氫化的動物脂、氫化的和部分氫化的植物油、可可脂、單硬脂酸甘油酯、三乙酸甘油酯、卵磷脂、甘油一酯和三酯、乙?；母视鸵货?、脂肪酸(例如硬脂酸、棕櫚酸、油酸和亞油酸)，及其組合。著色劑和增白劑可以包括FD&C染料和色淀、水果和蔬菜提取物、二氧化鈦，及其組合。正如本文別處指出的那樣，膠基可以含有蠟。但是，不含蠟的膠基的例子公開在美國專利No.5，2S6，500中，其公開內容出于所有相關目的在此引為參考。除了不溶于水的膠基部分之外，典型的口香糖組合物還包括水溶性增量部分。水溶性部分可以包含增量甜味劑、高強度甜味劑、調味劑、軟化劑、乳化劑、色素、酸味劑、填充劑、抗氧化劑，以及其它提供所需性質的組分。軟化劑可以被加入到口香糖中以便優(yōu)化口香糖的咀嚼性和口感。軟化劑，也被稱為增塑劑和塑化劑，通常占口香糖的大約0.5重量％到大約15重量％。軟化劑可以包括甘油、卵磷脂及其組合。水性甜味劑溶液，例如含有山梨糖醇、氫化的淀粉水解物、玉米糖漿及其組合的水溶液，也可以在口香糖中用作軟化劑和粘合劑。增量甜味劑或增量劑(bulkingagent)，包括糖和無糖的組分。增量甜味劑一般占口香糖的大約5重量％到大約95重量％，更通常占口香糖的大約20重量％到大約80重量％，更通常占口香糖的大約30重量％到大約60重量％。糖類甜味劑一般包括在口香糖
技術領域：
中熟知的糖類成分，包括但不限于單獨或組合的蔗糖、右旋糖、麥芽糖、糊精、干燥的轉化糖、果糖、左旋糖、半乳糖、玉米糖漿固形物等。無糖甜味劑包括但不限于糖醇例如單獨或組合的山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、麥芽糖醇、氫化淀粉水解物、赤蘚糖醇、塔格糖、海藻糖等。高強度人造甜味劑也可以單獨或與上述物質組合使用。優(yōu)選的甜味劑包括但不限于單獨或組合的三氯蔗糖、阿斯巴甜、NAPM的衍生物例如紐甜(neotame)、丁磺氨的鹽、阿力甜、糖精及其鹽、環(huán)拉酸及其鹽、甘草甜素、二氫查耳酮、奇異果甜蛋白、應樂果甜蛋白等。為了提供較長時間的持續(xù)的甜味和香味感覺，可能適宜囊封或以其他方式控制至少一部分人造甜味劑的釋放。這樣的技術例如濕法成粒、蠟法成粒、噴霧干燥、噴霧激冷、冷凍干燥、流化床包被、凝聚以及纖維延伸(fiberextension)，可以用于獲得所需的釋放特性。根據本發(fā)明，已經發(fā)現具有肽結構的高強度甜味劑，例如阿斯巴甜、紐甜或其它鹽類衍生物例如丁磺氨鉀，在某些實施方案中可能不是優(yōu)選的，除非將它們囊封。如果這樣的甜味劑原封不動地放置在本發(fā)明的口腔組合物中，它一般在1到2周內分解，導致生成硫化物副產物，在咀嚼時產生硫感覺的怪味(off-notes)。使用和不使用丁磺氨鉀制造的壓縮口香糖的臺式感覺測試(benchtopsensorytests)已經顯示，在不含有丁磺氨鉀的口香糖中沒有產生硫味。在口香糖中可以使用糖和/或無糖甜味劑的組合。此外，軟化劑也可以提供附加的甜度，例如使用糖的水溶液或糖醇溶液。24如果需要低卡路里的口香糖，可以使用低卡路里的增量劑。低卡路里的增量劑的例子包括聚葡萄糖、Raftilose、Raftilin、低聚果糖(例如NutraFlora)、帕拉金糖低聚糖、瓜爾膠水解物(例如SunFiber)、或不能消化的糊精(例如Fiberso1⑧)。提供所需香味的調味劑可以包括精油、合成香料或其混合物，包括但不限于來自植物和水果的油例如柑橘油、水果香精、胡椒薄荷油、留蘭香油、其它的薄荷油、丁香油、冬青油、茴香油等。人造調味劑和組分也可以使用。調味劑可以以粉末或液體形式存在，天然的和人造的調味劑可以以任何感官可接收的方式混合。調味劑可以包括涼味劑，以增加產品的香味和呼吸清新感。涼味劑包括薄荷醇、乙基-對-薄荷垸甲酰胺、N,2,3-三甲基-2-異丙基丁酰胺、戊二酸薄荷酯(香味提取物制造聯合會(FlavorExtractManufacturingAssociation)(FEMA4006))、琥珀酸薄荷酯、薄荷醇PG碳酸酯、薄荷醇EG碳酸酯、乳酸薄荷酯、薄荷酮甘油縮酮、薄荷醇甘油醚、N-叔丁基-對-薄荷垸-3-甲酰胺、對-薄荷垸-3-羧酸甘油酯、甲基-2-異丙基-二環(huán)(2.2.1)、庚烷-2-甲酰胺、薄荷醇甲醚及其組合。任何這些調味劑可以以口香糖的大約0.1重量％到大約15重量％的量、更通常以口香糖的大約0.2重量％到大約5重量％的量存在。任選本發(fā)明的口香糖可以包含其它的呼吸清新、抗微生物或口腔護理成分或組分，例如選自葡萄糖酸的鋅鹽和銅鹽、乳酸的鋅鹽和銅鹽、乙酸的鋅鹽和銅鹽、檸檬酸的鋅鹽和銅鹽、葉綠素銅及其組合的食品可接受的金屬鹽?？谙闾沁€可以包含抗微生物的精油和香料組分，例如胡椒薄荷、水楊酸甲酯、百里酚、桉油醇、肉桂醛、聚磷酸鹽、焦磷酸鹽及其組合，也可以添加到口香糖組合物中。牙科護理成分或組分例如氟化物鹽、磷酸鹽、脂類、抗微生物劑、鈣、電解質、蛋白添加劑、牙科磨料及其組合，也可以添加到口香糖組合物中。除了本發(fā)明的活性成分之外，還可以出于各種目的加入其他的活性成分或藥物。如果口香糖中的藥物或活性成分是水溶性的，它優(yōu)選應該包含在唾液中產生所需濃度的藥物(即更親水的平衡)的基質/乳化劑系統。如果藥物或活性成分是水不溶性的，口香糖優(yōu)選包含在唾液中產生所需濃度的藥物(即更親脂的平衡)的基質/乳化劑系統。一般來說，口香糖通過在本
技術領域：
中已知的可商購混合器中相繼加入各種不同的口香糖成分或組分來制造。囊封的蛋白酶一般可以在制造過程中的任何時間加入，但是優(yōu)選在接近混合結束時加入，以便使酶在可能導致酶變性的熱中的暴露最小化。在成分或組分完全混合之后，將口香糖料團從混合器中取出并塑造成所需的形式，例如壓成片并切成條、擠成塊、或鑄成球丸，然后包衣或鍋包衣。一般來說，成分或組分的混合首先通過將膠基融化并將其加入到運行的混合器中，膠基也可以在混合器本身中融化。色素或乳化劑也可以在這時加入。軟化劑例如甘油也可以在這時與糖漿和一部分增量劑一起加入。在混合器中加入其它部分的增量劑。調味劑一般與最后一部分增量劑一起加入。其它可選的成分或組分以本
技術領域：
的普通技術人員所熟知的典型的方式加入到批次中。整個混合過程通常花費5到15分鐘，但是有時需要較長的混合時間。本
技術領域：
的專業(yè)人員將會認識到，可以對上面描述的過程進行許多改變?？谙闾悄z基和口香糖產品通常使用分開的混合器、不同的混合技術、并且通常在不同的工廠來制造。這樣做的一個原因是制造膠基以及從膠基和其它成分或組分例如甜味劑和香料制造口香糖的最適條件非常不同，以至于將兩種任務整合到一起是不現實的。一方面，口香糖膠基的制造涉及分散性(通常是高剪切力)混合難以摻混的成分或組分，例如彈性體、填充劑、彈性體增塑劑、膠基軟化劑/乳化劑以及有時還有蠟，并通常需要長的混合時間。另一方面，口香糖產品的制造涉及膠基與更精細的成分或組分例如產品軟化劑、增量甜味劑、高強度甜味劑和調味劑的混合，這使用分配性(通常較低剪切力)的混合進行較短的時間。應該指出，在本發(fā)明的一個具體實施方案中，本發(fā)明的囊封的酶可以使用本
技術領域：
已知的加工方法和口香糖配方摻入到壓縮的口香糖組合物中(參見，例如美國專利No.2,290,120、4,753,805、5,582,852、6,290,985、6,322,828、6,582,738和6,558,722;美國專利公布No.2003/0086999、2003/0026871、2003/0099741和WO2003/084338，它們都出于所有相關的目的在此引為參考)。根據這樣的實施方案，通常，添加或混合了囊封的酶的組分或組分的混合物的水分含量(例如液體香料的含量)，在得到的混合物和/或完成的組合物中是低于大約6重量％、低于大約4重量％、低于大約2重量％或甚至低于大約1重量％。一般來說，任何將顆粒組合物壓縮成特定的形狀的標準技術，都可用于制備本發(fā)明的顆粒狀口香糖組合物并形成其所壓縮的形狀(例如片狀)。例如，一種常用的壓縮顆粒組合物的技術是制片。一般來說，制片包括了使用含有模具和沖頭的壓片機。應用了壓縮的基本原理，其中模具中填滿顆粒狀口香糖組合物，然后在壓力下用降低的沖頭將它壓縮。組合物上的這種壓力被保持一段時間，這被稱為停頓時間，它足以使組合物的顆粒狀微粒粘合在一起，并使它們被壓縮形成壓縮的口香糖形狀(例如片狀)。一旦形成后，片劑從模具中被彈出。制備片狀口香糖芯的工程一般可以通過將切碎的膠基加入到未加熱的口香糖混合器、優(yōu)選為雙弓刃混合器(doublesigmablade)中來進行。與膠基一起加入的是粉末狀的色素和所使用的糖或甜味劑的三分之一部分?；旌祥_始進行，并在糖摻入到膠基中之后，這通常要花大約5到7分鐘，將第二個三分之一部分的糖或甜味劑加入到混合器中。一旦混合物顯得均勻后，將剩余的糖或甜味劑部分(即最后的三分之一)加入到混合器中?？偟幕旌蠒r間通常大約25分鐘。從混合器中取出得到的粉末，過篩到所需的篩網大小。然后可以加入適當量的噴霧干燥的香料、酸、成片劑(例如硬脂酸鎂)和流動劑(例如二氧化硅)。然后將該最終的混合物混合直到粉末均勻。然后將得到的粉末在制片機例如Stokes機上壓制。另一種常用的壓縮顆粒組合物的技術是壓塊。這種技術描述在例如國際申請No.WO99/25203中，在此出于所有相關目的以其全文引為參考。不論選擇了何種具體的方式來制備壓縮的口香糖，加工的時間以及加工的技術可以取決于許多因素，包括例如膠基的組分、成品膠基的所需性質，以及在批式加工的情況下，制備的批次的大小。例如，通常，一旦成分變得均勻后，混合器中的內含物的復合就開始實現。因此，復合時間一般是變化的，通常在大約15分鐘到大約90分鐘的范圍內。在各種不同的實施方案中，使用例如混合擠出機的連續(xù)工藝可以用于制備膠基。例如，在最初的成分被合并以形成均勻的混合物并復合了所需的時間后，剩余的膠基成分可以同時或順序加入，以形成均勻的熔化料團。例如，在最初的化合時間之后，任何剩余的彈性體和/或增塑劑都可以加入。其它任選的成分例如蠟和/或油，可以以這種方式和/或在彈性體和增塑劑加入之后加入。然后使料團在卸載前變得均勻。一般來說，并且如本文別處指出的那樣，本發(fā)明的顆粒狀口香糖組合物的不溶性膠基部分，基本上可以是任何具有所需性質的膠基，并且當膠基與口香糖組合物的其它成分在本文別處描述的混合裝置中進行混合時，膠基可以作為小的顆粒均勻分布在整個顆粒狀口香糖組28合物中。本發(fā)明的顆粒狀(即壓縮的)口香糖組合物的水溶性增量部分還可以包含例如一種或多種下列物質調味劑、增量甜味劑或高強度甜味劑、成粒劑、軟化劑、乳化劑、著色劑、酸味劑、填充劑、抗氧化劑、和/或潤滑劑，以及本
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中已知的其它組分。一般來說，組分的具體組合及其濃度，可以通過本
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己知的方法來確定，以便獲得具有所需性質的口香糖組合物。添加到顆粒狀口香糖組合物中的調味劑的類型以及量可以變化，這出于多種考慮，包括例如組合物將具有的香味的所需強度和/或持續(xù)時間。此外，添加到顆粒狀口香糖組合物中的調味劑的量也可以根據添加的調味劑的類型而變化，因為某些調味劑比其它的強度更大。在至少一個實施方案中，調味劑的濃度是顆粒狀口香糖組合物的至少大約0.5重量％、至少大約1重量％、至少大約2.5重量％、至少大約5重量％或更高(例如至少大約6重量％、至少大約10重量％或更高)，濃度在例如顆粒狀口香糖組合物的大約1重量％到大約10重量％、大約2重量％到大約8重量％、或大約4重量％到大約6重量％的范圍內。應該指出的是，在本發(fā)明的各種不同的實施方案中，在口腔組合物整個制備過程中將溫度保持相對低是有利的，這在本文別處指出。不受任何具體理論的束縛，據信在這種相對低的溫度下加工是有利的，這在于除了限制或防止囊封的酶變性之外，還限制或防止在較高溫度下易于降解的熱不穩(wěn)定的調味劑的降解。可用于本工藝生產的口香糖的調味劑包括例如天然的和人造或合成的調味料或其組合，包括精油、香精、提取物、粉末，包括酸和其它能夠影響味覺特征的物質。盡管適合用于壓縮口香糖的香料的范圍幾乎是沒有限制的，但它們一般可以分成幾個大類。水果香料包括檸檬、橙子、萊檬、葡萄柚、柑橘、草莓、蘋果、櫻桃、覆盆子、黑莓、藍莓、香蕉、菠蘿、香瓜、甜瓜、西瓜、葡萄、醋栗、芒果、獼猴桃以及許多其它水果香料及其組合。薄荷香料包括留蘭香、胡椒薄荷、冬青、羅勒、薄荷、薄荷醇及其混合物。辛香料包括肉桂、香草、丁香、巧克力、肉豆寇以及許多其它辛香料。不太常用的是草藥和咸味香料，例如爆米花、辣椒、玉米片等的香料。調味劑也可以包括涼味劑以增加產品的香味和呼吸清新感。除了薄荷醇之外，涼味劑還可以包括例如乙基-對-薄荷烷甲酰胺、N-2,3-三甲基-2-異丙基丁酰胺、戊二酸薄荷酯、琥珀酸薄荷酯、薄荷醇PC碳酸酯、薄荷醇EC碳酸酯、乳酸薄荷酯、薄荷酮甘油縮酮、薄荷醇甘油醚、N-叔丁基-對-薄荷垸-3-甲酰胺、對-薄荷垸-3-羧酸甘油酯、甲基-2-異丙基-二環(huán)(2.2.1)、庚垸-2-甲酰胺、薄荷醇甲醚及其組合。本發(fā)明的口香糖還可以任選包含其它的呼吸清新或抗微生物成分，包括抗微生物的精油和香料組分，例如胡椒薄荷、水楊酸甲酯、百里酚、桉油醇、肉桂醛、聚磷酸鹽、焦磷酸鹽及其組合，也可以使用。應該指出，調味劑可以作為液體、固體或二者而加入。例如，在某些實施方案中，本發(fā)明的壓縮的口香糖組合物可以含有噴霧干燥的香料來部分或完全代替液體香料。或者，食用香料可以采用冷凍干燥的固體(例如粉末)的形式。當使用液體和固體調味劑的組合時，液體食用香料與固體食用香料的重量比率可以在例如大約5:1到大約1:5、或大約2:1到大約l:2之間的范圍內。在至少一個實施方案中，液體食用香料稍微過量，液體食用香料與固體食用香料的重量比率在例如大約1:1和大約1.5:l之間(例如大約1.2:1或大約1.3:1)。與調味劑類似，加入到顆粒狀口香糖組合物中的著色劑的類型和量也可以出于多種考慮進行改變，包括例如組合物所具有的顏色的所需強度和/或持續(xù)時間，使用的準確濃度用本
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的標準方法來確定。此外，加入到顆粒狀口香糖組合物中的著色劑的量也可以隨著加入的著色劑的類型而變化，因為某些著色劑比其它的強度更大。示例性的著色劑包括例如常用的色素或增白劑(例如FD&C染料和色淀、水果和蔬菜提取物、二氧化鈦等)。加工助劑例如潤滑劑，也可以任選包含在顆粒狀口香糖組合物中，加工助劑例如潤滑劑是在口香糖制劑形成的過程中和以后都有助于將顆粒狀口香糖組合物保持在自由流動的顆粒形式的一種或多種物質。此外，加工助劑的存在也可以導致顆粒狀口香糖組合物減少粘性，這降低了粘附在混合設備的內表面和葉片上、從而在每次生產運行后殘留在混合設備內部的組合物的量。通過減少在每次生產運行后殘留在混合設備內部的口香糖組合物的量，可以提高每次生產運行的口香糖組合物的產率(例如可以獲得例如至少大約80%、至少大約90%、至少95%或更高的口香糖組合物的產率)。此外，混合設備或其它加工設備可以更容易和徹底地清潔，從而減少了生產運行之間的停機時間。與調味劑和著色劑類似，加入到顆粒狀口香糖組合物中的加工助劑(例如潤滑劑)的類型和量也可以出于多種考慮進行改變，包括例如顆粒狀口香糖組合物是否要壓成片狀，加工助劑例如幫助顆粒狀組合物的壓片。此外，在例如壓片前加入到顆粒狀口香糖組合物中的加工助劑的量，也可以隨著所加入的助劑的類型而變化，因為某些助劑比其它的更有效。在一個實施方案中，加工助劑例如潤滑劑的濃度，為顆粒狀組合物的至少大約0.5重量％、至少大約1重量％、至少大約2重量％、至少大約3重量％、至少大約4重量％、至少大約5重量％或更高(例如至少大約6重量％、至少大約8重量％或更高)，濃度在例如從大約0.5重量％到大約5重量％、或從大約1重量％到大約4重量％的范圍內。示例性的加工助劑包括潤滑劑例如硬脂酸鹽(例如硬脂酸鎂)、硬脂基延胡索酸鈉、氫化植物油、滑石、二氧化硅(例如火成二氧化硅或沉淀的二氧化硅)、或硬脂酸，其中在一個具體的實施方案中使用了硬脂酸鹽。此外，顆粒狀口香糖組合物可任選含有成粒劑，它一般來說是不與顆粒狀口香糖組合物中的其它組分發(fā)生不利的反應、并且當按照本發(fā)明的工藝與其它組分混合時、產生具有所需性質的口香糖組合物的物質。例如，成粒劑在至少某些實施方案中可以是水溶性的，以便最終的顆粒狀口香糖組合物具有較好的感官性質。在一個具體實施方案中，成粒劑也起到甜味劑的功用。本發(fā)明的壓縮的口香糖還可以含有一種或多種甜味劑(例如一種或多種增量甜味劑)。適合的甜味劑在本
技術領域：
中是眾所周知的，當用于本發(fā)明的方法中時，通常幫助形成具有所需性質的壓縮的口香糖組合物。用于本發(fā)明的顆粒狀口香糖組合物的可能的甜味劑的例子包括碳水化合物，特別是糖類(例如單獨地或組合的蔗糖、右旋糖、麥芽糖、糊精、葡萄糖、果糖、左旋糖、半乳糖、干轉化糖、玉米糖漿固形物等)，和/或無糖的甜味劑，例如塔格糖、海藻糖、糖醇或多元醇(例如山梨糖醇、甘露糖醇、麥芽糖醇、木糖醇、異麥芽糖醇和赤蘚糖醇，和/或其組合)，和/或高強度人造甜味劑(有時被稱為高能或人造甜味劑，它可以被定義為比蔗糖甜至少大約10倍或大約20倍的食品可接受的化學物質)，例如甘氨酸、阿斯巴甜、三氯蔗糖、NAPM衍生物例如紐甜、丁磺氨的鹽(例如丁磺氨鉀)、阿力甜、糖精及其鹽、環(huán)拉酸及其鹽、環(huán)己基氨基磺酸鹽、甜葉菊苷和甘草酸鹽(例如甘草酸銨)、二氫查耳酮、奇異果甜蛋白、應樂果甜蛋白、紫蘇衍生的甜味劑、甜葉菊衍生的甜味劑、莫那亭(monatin)、應樂果甜蛋白、査耳酮以及甜味劑-甜味劑鹽的組合(例如阿斯巴甜-丁磺氨鹽)等，以及它們的混合物。在至少一個實施方案中，甜味劑或增量甜味劑作為干燥的顆?；蚍勰┘尤?。應該指出的是，某些物質既可以用作甜味劑又可以用作成粒劑，例如糖(如蔗糖、果糖、右旋糖及其混合物)和多元醇(例如山梨糖醇、甘露糖醇、異麥芽糖醇、木糖醇、赤蘚糖醇及其混合物)。當一種或多種這些物質用在口香糖組合物中作為成粒劑時，可能不需要其它的或不同的甜味劑。32當與其它組分(例如調味劑、著色劑等)一起加入到顆粒狀口香糖組合物中時，加入到顆粒狀口香糖組合物中的甜味劑的類型和量可以出于多種考慮進行改變，包括例如組合物要具有的甜味劑的所需強度和/或持續(xù)時間。此外，加入到顆粒狀口香糖組合物中的甜味劑的量也可以隨著要加入的甜味劑的類型而變化，因為某些甜味劑比其它的強度更大。在至少一個實施方案中，甜味劑的濃度為顆粒狀組合物的至少大約25重量％、至少大約35重量％、至少大約45重量％、至少大約55重量％、至少大約65重量％、至少大約75重量％或更高，濃度在例如顆粒狀組合物的大約25重量％到大約75重量％、從大約35重量％到大約65重量％、或從大約45重量％到大約55重量％的范圍內。此外，應該指出，當高強度甜味劑被用于顆粒狀口香糖組合物中時，其濃度通?？梢栽陬w粒狀口香糖組合物的例如從大約0.01重量％到大約2重量％、從大約0.1重量％到大約1.5重量％、或從大約0.5重量％到大約1重量％的范圍內。軟化劑也可以任選加入到本發(fā)明的壓縮口香糖中，以便優(yōu)化口香糖的咀嚼性和/或"口感"。軟化劑，也可被稱為增塑劑或塑化劑，可以占例如口香糖的大約0.5重量％到大約15重量％，或口香糖的大約1重量％到大約10重量％，或口香糖的大約2重量％到太約8重量％。軟化劑可以包括例如甘油、卵磷脂、三醋精(或甘油三乙酸酯)及其組合o正如前面提到的那樣，乳化劑也可以用于修飾質地，并導致口香糖組合物的疏水和親水組分可混合。適合用于本發(fā)明的乳化劑可以包括例如單硬脂酸甘油酯、甘油三乙酸酯、卵磷脂、甘油單酯或二酯、乙酰化的甘油單酯或二酯、以及蒸餾過的甘油單酯或二酯。應該指出，可以通過改變模具和沖頭的形狀(例如環(huán)形、塊狀、枕形等)來制造許多形狀和大小的片。含有一種或多種囊封的酶的口香糖制劑、包括壓縮的口香糖的實施例，顯示在下面的實施例25-34中。B.片和錠在各種不同的其它實施方案中，口腔組合物為使用常規(guī)技術制造的壓制的片(例如壓制的薄荷糖)或錠(例如硬粒)的形式。優(yōu)選在各種不同的實施方案中，這些片或錠是緩慢溶解的。一般來說，壓制的片和錠以同樣的方式使用同樣的通用配方來制備；但是，錠的配方通常含有最多大約2重量％的水膠體作為阻隔劑以提供閃亮的表面，而壓制的片不含有阻隔劑，通常具有光滑的外觀。典型的片的配方顯示在下面的實施例35-39中。一般來說，片是基本材料、粘合劑、香料和潤滑劑的混合物?；静牧贤ǔＪ翘腔蚨嘣?。本發(fā)明的壓制的片和錠通常含有糖或水溶性的多羥基醇(多元醇)形式作為主要組分或組分的固體載體，糖或多元醇的含量為載體的大約85重量％到大約98重量％，其中多元醇例如甘露糖醇、木糖醇、山梨糖醇、麥芽糖醇、氫化的異麥芽糖、乳糖醇、赤蘚糖醇、氫化的淀粉水解物(例如"Lacasin")、氫化葡萄糖、氫化二糖和/或氫化多糖。可以使用的糖是蔗糖、右旋糖、乳糖、麥芽糖以及其它常見的糖。固體鹽例如碳酸氫鈉、氯化鈉、碳酸氫鉀或氯化鉀，可以完全或部分地取代多元醇載體。基本材料還可以包含高強度甜味劑例如丁磺氨鉀、阿斯巴甜、阿力甜、三氯蔗糖、甘草甜素、糖精和環(huán)拉酸鹽。通常使用的粘合劑是天然的膠和水膠體例如阿拉伯樹膠、瓜耳膠、瓊脂、藻酸鹽、黃蓍樹膠、明膠、玉米糖漿、淀粉和麥芽糖糊精。最常用的粘合劑是明膠、阿拉伯樹膠和麥芽糖糊精或玉米糖漿,。當非糖的多元醇例如山梨糖醇被用作基本材料時，不需要粘合劑進行結合，因為這些多元醇多易被壓縮形成片。在某些情況下，多元醇例如山梨糖醇也可以用作粘合劑，并可以與糖組合形成壓縮片的基本材料。粘合劑通常占片的大約2重量％到大約8重量％。潤滑劑用于使得從壓制工具或模具和沖頭很好地釋出。各種不同的潤滑劑或不粘劑可用于片中作為釋放劑，包括例如乙?；母视蛦嗡狨ァ⑾?、卵磷脂、乳化劑和單、二或三硬脂酸酯。具體來說，適合的潤滑劑可以包括植物油(例如椰子油)、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、氨基酸、硬脂酸鋁、滑石、淀粉和Carbowax。這些潤滑劑中最常用的是硬脂酸鎂或硬脂酸鈣和硬脂酸。固體潤滑劑被加入到片組合物中，以幫助形成片并允許它從壓片機中釋出。潤滑劑通常占片的大約0.1重量%到大約5重量％或大約0.5重量％到大約2重量％。在某些情況下，在片劑組合物中加入低水平的流動劑例如二氧化硅，以幫助混合物流動到壓片機中。片和錠一般含有一種或多種食用香料。適合的食用香料包括天然的和人造的香料和薄荷，例如胡椒薄荷油、薄荷醇、留蘭香油、香草香精、肉桂油、冬青油(水楊酸甲酯)、茴香、丁香油、檸檬油、桔油、葡萄香精、萊檬油、葡萄柚油、蘋果、杏香精，以及它們的組合。調味料的用量一般根據個體香料而不同，可以在例如片或錠的大約0.5重量％到大約3重量％或大約0.01重量％到大約2重量％的范圍內。人造調味料組分也被考慮用于本發(fā)明的片中。本
技術領域：
的專業(yè)人員將會認識到，天然的和人造的調味劑可以合并在任何感官可接受的摻合物中。所有這樣的香料和香料摻合物都被本發(fā)明考慮到了。此外，薄荷醇和生理涼味劑(有時被稱為高強度涼味劑)可以以大約0.01重量％到大約1重量％的水平加入到片中。除了薄荷醇之外，這些涼味劑在被加入到用于形成片的成分或組分的混合物中之前，優(yōu)選與香料預先混合。薄荷醇可以與香料預先混合，或可以以其晶體形式加入到片組合物的混合物中。典型的涼味劑包括取代的對-薄荷烷甲35酰胺、無環(huán)甲酰胺、薄荷酮甘油縮酮、乳酸薄荷酯、琥珀酸薄荷酯、以及3-l-薄荷氧基丙烷-l，2-二醇。這些涼味劑和香料也可以摻入到片劑的各種包衣中。本發(fā)明的片和錠通常也包含任選的甜味劑和/或著色劑。甜味劑可以是本
技術領域：
已知的一種或多種甜味劑，包括天然的和人造的甜味劑。甜味劑可以選自廣范圍的材料，包括水溶性甜味劑、水溶性人造甜味劑、基于二肽的甜味劑及其混合物。因此，甜味劑可以選自下面的非限制性的名單，其包括糖例如蔗糖、葡萄糖、玉米糖漿、右旋糖、轉化糖、果糖及其混合物；糖精及其各種鹽例如鈉鹽或鈣鹽；環(huán)拉酸及其各種鹽例如鈉鹽；游離的阿斯巴甜；二氫查耳酮甜味化合物；甘草甜素；甜葉菊苷；應樂果甜蛋白；奇異果甜蛋白；三氯蔗糖、異麥芽酮糖醇、紐甜、乳糖醇、海藻糖、低聚乳果糖(lactosucrose)、聚葡萄糖、塔格糖、紫蘇糖；以及糖醇例如山梨糖醇、山梨糖醇糖漿、甘露糖醇、麥芽糖醇、赤蘚糖醇、木糖醇等。還考慮到不可發(fā)酵的糖替代品氫化淀粉水解物(也稱為Lycasin)作為甜味劑。還考慮到了合成的甜味劑3，6-二氫-6-甲基-1-1,2，3-氧雜噻嗪-4-酮-2，2-二氧化物，特別是其鉀鹽(丁磺氨鉀)、鈉鹽和鈣鹽。在各種不同的優(yōu)選實施方案中，山梨糖醇是甜味劑和增量劑。包含的甜味劑的量是能夠有效提供所需程度的甜味和體積的量，一般為片或錠的重量的大約0.001重量％到大約70重量％。高強度人造甜味劑也可以單獨或與其它甜味劑組合使用。優(yōu)選的高強度甜味劑包括但不限于單獨或組合的三氯蔗糖、阿斯巴甜、NAPM的衍生物例如紐甜、丁磺氨的鹽、阿力甜、甜菊、糖精及其鹽、環(huán)拉酸及其鹽、甘草甜素、二氫査耳酮、奇異果甜蛋白、應樂果甜蛋白等。為了提供較長時間持續(xù)的甜味和香味感覺，可適宜囊封或以其他方式控制至少一部分人造甜味劑的釋放。這樣的技術例如濕法成粒、蠟法成粒、噴霧干燥、噴霧激冷、流化床包被、凝聚以及纖維延伸，可用于獲得所需的釋放特征。在本發(fā)明的片或錠中可以存在著色劑。例子包括色素例如二氧化鈦、天然食品著色劑例如P-胡蘿卜素、甜菜苷、姜黃以及其它適用于食物、藥物和化妝品應用的被稱為F.D.&C.染料的染料等。所述材料可以以片或錠的最多大約1重量％、優(yōu)選最多大約6重量％的量摻入。本發(fā)明的片和錠一般按照本
技術領域：
已知的常規(guī)混合和制片技術來制備。例如，壓制的片劑可以通過濕法成粒、干法成粒和直接壓縮的方法來制備。一般來說，濕法成粒包括混合碾碎的粉末，通過將碾碎的粉末與粘合劑溶液進行摻合來制備濕料團，將濕料團粗過篩并將潮濕的顆粒干燥，通過14到20目篩對顆粒進行過篩，將篩過的顆粒與潤滑劑和崩解劑混合，最后對料團進行壓片。相反，干法成粒一般包括研磨粉末，壓縮成大的硬片以制造塊(slugs)，將塊過篩，與潤滑劑和崩解劑混合，最后壓片。在直接壓縮方法中，碾碎的成分或組分被混合，然后只通過壓縮來成片。在直接壓縮方法中，基本材料在加入任何香料之前與任何高強度甜味劑進行干式摻合。將液體香料和固體香料緩慢地加入到基本材料中，并在干式材料混合器例如螺帶式混合器或Hobart混合器中混合。最后加入潤滑劑例如硬脂酸鎂，但是不過度混合。將混合物與硬脂酸鎂過度混合可能減少潤滑。一般來說，最終的粉末混合物在送去壓片之前可以被允許放置多達12小時，以便其性質適合于制片。如果混合物太潮濕，可以在制片前將其干燥。使用常規(guī)的旋轉壓片機來生產優(yōu)選的片，包括例如可從FetteAmerica,300RoundhillDr.,Rockaway，N.J.;StokesDiv.ofDTIndustries,1500Grundy'sLane,Bristol,PA;或ThomasEngineering,Inc.575W.CentralRd.,HoffmanEstates,IL.得到的壓片機。旋轉壓片操作的基本步驟包括四步。第一步是填充模具的空腔；第二步是通過除去過量的填充物來調整填充物；第三步是壓縮；第四步是將片從模具中彈出。在標準的生產設備中，在最后的壓縮以及然后彈出之前還有預壓縮的步驟。優(yōu)選的糖食片劑的大小為大約0.2到大約0.5克。c.包衣應該指出的是，在本發(fā)明的各種不同的實施方案中，本發(fā)明的口腔組合物(例如口香糖和/或片劑)可以被包衣。常規(guī)的鍋包衣步驟可用于用蔗糖包被口香糖或片，但是最近在鍋包衣上的進步允許使用其它的碳水化合物材料來用于代替蔗糖。一些這樣的組分包括但不限于右旋糖、麥芽糖、帕拉金糖、木糖醇、乳糖醇、山梨糖醇、麥芽糖醇、甘露糖醇、赤蘚糖醇、氫化的異麥芽酮糖和其它新的糖醇或其組合。這些材料可以與鍋包衣改性劑摻混，包括但不限于阿拉伯樹膠、麥芽糖糊精、玉米糖漿、明膠、纖維素類材料例如羧甲基纖維素或羥甲基纖維素、淀粉和改性淀粉、植物膠例如藻酸鹽、刺槐豆膠、瓜耳膠和黃蓍樹膠、不溶性碳酸鹽例如碳酸鈣或碳酸鎂和滑石?？拐硠┮部梢宰鳛殄伆赂男詣┘尤?，這允許使用各種不同的碳水化合物和糖醇用于開發(fā)新的包糖衣的或包衣的口香糖產品。包衣可以包含一種或多種香料，以及在各種不同的實施方案中，包含一種或多種按照本發(fā)明制備的囊封的酶。在各種這樣的實施方案中，包衣中存在的囊封的蛋白酶的濃度為包衣總重量的大約1重量％到大約15重量％，或從大約2.5重量％到大約15重量％。一般來說，包衣的存在增加了片或錠在口中溶解所花的時間。在各種不同的實施方案中，緩慢溶解的片或錠是優(yōu)選的，以便在從大約3分鐘到大約15分鐘、或從大約5分鐘到大約10分鐘的一段時間內提供活性成分(例如囊封的酶)的持續(xù)釋放速度。D.酶活性應該指出，通常，囊封酶的方法(例如加工條件、包衣類型等)和/或與囊封的酶接觸的口腔組合物組分和/或含有囊封的酶的最終口腔組合物的制備方法(例如加工條件，包括溫度、水分含量、pH等)，以優(yōu)化酶的活性(即酶從牙齒表面去除色斑的活性)的方式進行控制。換句話說，通常，各種不同的加工步驟、條件、組合物的組分等的選擇，是為了確保酶在囊封后和包合在口腔組合物中之后保留顯著的活性。例如，酶在囊封后和包合在口腔組合物中之后，通?？梢跃哂兄辽俅蠹s25%的活性、至少大約50°/。的活性、至少大約75%的活性、至少大約85%的活性、至少大約95%的活性或更高。本發(fā)明以下面的實施例進一步說明。這些實施例不被視為限制本發(fā)明的范圍或可以實踐本發(fā)明的方式。實施例噴霧干燥、流化床包被和噴霧激冷的酶實施例1按照本
技術領域：
普遍已知的囊封方法和技術，通過對乙醇/蟲膠/枯草桿菌蛋白酶溶液進行噴霧干燥，獲得內容物為80重量％的蟲膠和20重量％的枯草桿菌蛋白酶的囊封的枯草桿菌蛋白酶。實施例2通過對固體含量為10重量％的乙醇/玉米蛋白/胰凝乳蛋白酶溶液進行噴霧干燥，獲得內容物為70重量％的玉米蛋白和30重量％的胰凝乳蛋白酶的囊封的胰凝乳蛋白酶。實施例3通過用固體含量為30重量％的乙醇/蟲膠溶液對胰蛋白酶進行流化床包被，獲得內容物為60重量％的蟲膠和40重量％的胰蛋白酶的囊封的胰蛋白酶。實施例4通過對熔化的蠟和枯草桿菌蛋白酶的混合物進行噴霧激冷，獲得內容物為85重量％的蠟和15重量％的枯草桿菌蛋白酶的囊封的枯草桿菌蛋白酶。實施例5通過對乙醇/蟲膠/胃蛋白酶的混合物進行噴霧干燥，然后對噴霧干燥的產品進行流化床包被以提供乙醇和玉米蛋白的第二個包衣，獲得內容物為20重量％的玉米蛋白、20重量％的蟲膠和60重量％的胃蛋白酶的囊封的胃蛋白酶。實施例6通過用固體含量為10重量W的HPMC水溶液對枯草桿菌蛋白酶進行流化床包被，獲得內容物為30重量％的羥丙基甲基纖維素(HPMC)和70重量％的枯草桿菌蛋白酶的囊封的枯草桿菌蛋白酶。實施例7通過用固體含量為30重量％的阿拉伯樹膠的水溶液對枯草桿菌蛋白酶進行流化床包被，獲得內容物為40重量％的阿拉伯樹膠和60重量%的枯草桿菌蛋白酶的囊封的枯草桿菌蛋白酶。聚結的酶實施例8通過摻合胰蛋白酶和HPMC，在混合物中加入水，并將獲得的產物干燥和碾碎，獲得內容物為15重量％的羥丙基甲基纖維素(HPMC)和85重量％的胰蛋白酶的聚結的胰蛋白酶。實施例9通過摻合凝乳酶和明膠，在混合物中加入水，并將獲得的產物干燥和碾碎，獲得內容物為15重量％的明膠和85重量％的凝乳酶的聚結的凝乳酶。實施例10通過將木瓜蛋白酶與含有25%玉米蛋白的乙醇溶液進行混合，并將獲得的產物干燥和碾碎，獲得內容物為10重量％的玉米蛋白和90重量％的木瓜蛋白酶的聚結的木瓜蛋白酶。實施例11通過混合枯草桿菌蛋白酶和麥芽糖糊精，然后加入水，并將獲得的產物干燥和碾碎，獲得內容物為15重量％的麥芽糖糊精和85重量％的枯草桿菌蛋白酶的聚結的枯草桿菌蛋白酶。通過多步程序制備的聚結的/囊封的酶實施例12將枯草桿菌蛋白酶用麥芽糖糊精噴霧干燥，以提供固體含量為30重量％的噴霧干燥的/囊封的枯草桿菌蛋白酶。將該粉末與羥丙基甲基纖維素(HPMC)以粉末/HPMC為85/15的重量比率(wt/wt)進行聚結，用水潤濕并干燥。碾碎后，獲得的粉末含有大約68重量％的枯草桿菌蛋白酶、大約17重量％的麥芽糖糊精和大約15重量％的HPMC。實施例13將胰蛋白酶與HPMC以胰蛋白酶/HPMC為85/15的wt/wt比率進行聚結。在干燥和碾碎后，用大約25%固體含量的乙醇/蟲膠溶液對獲得的粉末進行流化床包被，以提供含有大約60重量％的胰蛋白酶、大約10重量％的HPMC和大約30重量％的蟲膠的最終產物。實施例14將胰凝乳蛋白酶與HPMC以胰凝乳蛋白酶/HPMC為85/15的wt/wt比率進行聚結。在干燥和碾碎后，用15%固體、高pH的玉米蛋白水溶液對獲得的粉末進行聚結，以提供含有大約60重量％的胰凝乳蛋白酶、大約10重量％的HPMC和大約30重量％的玉米蛋白的最終產物。實施例1541將胃蛋白酶用25重量％的明膠溶液進行噴霧干燥。然后將噴霧干燥的產物用15%固體、高pH的玉米蛋白水溶液進行聚結。最終的產品含有大約50%的胃蛋白酶、大約20%的明膠和大約30%的玉米蛋白。使用吸附技術制備的囊封的酶實施例16將10重量％的菠蘿蛋白酶溶液噴灑在微晶體纖維素粉末上。將獲得的混合物干燥并碾碎，以提供有大約70重量％的微晶纖維素和大約30重量％的菠蘿蛋白酶的產品。實施例17將10重量％的枯草桿菌蛋白酶溶液噴灑在高吸附性淀粉上，將獲得的混合物干燥并碾碎，以提供有大約80重量％的淀粉和大約20重量%的枯草桿菌蛋白酶的產品。使用吸附技術、包括將酶與糖或糖醇一起干燥、和/或將酶與糖或糖醇在融化狀態(tài)下混合在一起時重新固化，而制備的囊封的酶-實施例18以90份山梨糖醇對10份胃蛋白酶的重量比率將將胃蛋白酶加入到融化的山梨糖醇中?；旌虾?，將摻合物冷卻并碾碎。實施例19制備含有溶解在96重量％的高果糖玉米糖漿中的4重量％的胰蛋白酶的混合物。然后將混合物蒸發(fā)以降低水分并碾碎。實施例1-19中的產品適合摻入到表1-5中顯示的配方中。實施例20-24根據本發(fā)明制備的典型的口香糖配方顯示在表1中。按照本文的詳細描述制備口香糖并囊封酶。適合的香料和涼味劑在本
技術領域：
中42是眾所周知的。數值是口香糖組合物或囊封的酶的重量％。表1成分實施例20實施例21實施例22實施例23實施例24膠基34.2726.2241.0042.0032.72卵磷脂0.170.170,170.170.05山梨糖醇50.0649.8630.0035.00木糖醇60.00麥芽糖醇4.0015.00碳酸鈣10.0017.520.331.08甘油4.001.00山梨糖醇糖漿2.504.50玉米糖漿5.0高強度甜味劑0.600.600.600.300.30囊封的高強度甜味劑0.300.30涼味劑0.300,30囊封的枯草桿菌蛋白酶(基于囊封的酶重量的30重量°/。的酶)0.500.051.000.0250.03囊封的胰凝乳蛋白酶(基于囊封的酶重量的20重量°/。的酶)0.025囊封的胰蛋白酶(基于囊封的酶重量的10重量％的酶)0.025香料1.601.601.601.601.60合計100.00%100.00%100.00%100,00%100.00%實施例25按照本文的詳細描述制備了壓片的/壓縮的口香糖，包括摻入通過噴霧干燥制備的囊封的酶(即枯草桿菌蛋白酶)。配方顯示在下面的表2中。數值是口香糖組合物或囊封的酶的重量％。表2成分實施例25膠基84.30二氧化硅0.50硬脂酸鎂1.50囊封的高強度甜味劑0.50囊封的枯草桿菌蛋白酶(基于囊封的酶重量的25重量％的酶)10.00薄荷醇0.20噴霧干燥的香料3.00合計100實/0實施例26-34按照下面顯示的表3和4制備了符合本發(fā)明的典型的壓片的/壓縮的口香糖。按照本文的詳細描述制備了壓片的/壓縮的口香糖并囊封了酶。數值是口香糖組合物或囊封的酶的重量％。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>表4<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>實施例35-39按照下面顯示的表5制備符合本發(fā)明的典型的片組合物。按照本文的詳細描述制備片并囊封了酶。適合的香料是本
技術領域：
中眾所周知的。數值是片或囊封的酶的重量％。表5成分實施例35實施例36實施例37實施例38實施例39山梨糖醇94.0894.4456.64卯.08色素0.050.020.020.20木糖醇93.3035.30二氧化硅0,190.19硬脂酸鎂1.010.501.011.010.50高強度甜味劑0.580.390.390.390.19囊封的高強度甜味劑0,190.190.39囊封的枯草桿菌蛋白酶(基于囊封的酶重量的20重量％的酶)0.572.505.50囊封的胰蛋白酶(基于囊封的酶重量的40重量％的酶)3.00囊封的枯草桿菌蛋白酶(基于囊封的酶重量的30重量％的酶)5.000.507.88涼味劑香料0.760.760.760.760.76合計100.00%100.00%100.00%100.00%跳00%實施例40按照下面表6中的顯示制備符合本發(fā)明的典型的泡沫組合物，包含按照本文的詳細描述制備的凍干(即冷凍干燥的)枯草桿菌蛋白酶。適合的香料和涼味劑在本
技術領域：
是眾所周知的。數值是泡沬的重量%。47表6<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>實施例41本實施例描述了通過噴霧干燥在阿拉伯樹膠中囊封枯草桿菌蛋白酶。將阿拉伯樹膠水溶液和枯草桿菌蛋白酶溶液(阿拉伯樹膠溶液對枯草桿菌蛋白酶溶液為4:1的重量比)混合，制備噴霧干燥溶液?？莶輻U菌蛋白酶溶液含有8重量％的枯草桿菌蛋白酶和80:20(wAv)的甘油和水的混合物。阿拉伯樹膠溶液含有溶解在水中的80重量％的阿拉伯樹膠。噴霧干燥溶液表現出大約29%的白利糖度值(通過使用本
技術領域：
已知的方法來測定)。噴霧干燥溶液被導入到包括霧化輪并可以從Spray-Tech(OklahomaCity,OK)商購的噴霧干燥器中，按照本文的詳細描述將枯草桿菌蛋白酶囊封在阿拉伯樹膠內。干燥器入口處的空氣溫度是大約180。C，干燥器出口處的空氣溫度是大約80°C。使用以大約每分鐘35-37轉(rpm)的速度運轉的泵，將噴霧干燥溶液導入到噴霧干燥器中。得到的產物含有大約2.6重量％的枯草桿菌蛋白酶。實施例42本實施例詳細描述了體外去除枯草桿菌蛋白酶色斑的篩查。將牛牙齒樣品切開以制備大約10mn^的牙釉質表面。牙齒表面用砂紙拋光，并用酸輕微侵蝕以便于更強的色斑附著。然后將每個表面通過與空氣接觸和與染色培養(yǎng)液接觸(在大約37°C)的交替周期進行為期4天的處理；空氣-培養(yǎng)液周期每天重復兩次。培養(yǎng)液是很細碎的即溶咖啡(MaxwellHouse)和茶(Lipton)(1:1的重量比率)、24小時藤黃八疊菌(sarcinalutea)turtox培養(yǎng)基(培養(yǎng)基與咖啡或茶的體積對重量比率為大約10:1)、以及可以從Sigma-Aldrich商購的胃粘蛋白(胃粘蛋白與咖啡或茶的重量比率為0.75:1)在足量的也可以從Sigma-AWrich商購的無菌胰蛋白胨大豆溶液中的混合物。染色后，牙釉質表面用去離子水沖洗，干燥過夜，使用MinoltaCM2600-d分光光度計測量染色強度(即獲得L、a*、b*和E值)。制備由氯化鈉(大約10重量％)、碳酸氫鈉(大約86重量％)和碳酸鈉(大約4重量％)組成的溶液，每種都可以從SpectrumChemical商購，在其中加入色斑去除活性物質(商購的枯草桿菌蛋白酶)。然后將牛牙齒表面樣品(N=8)在這些溶液中處理，每日兩次(每次IO分鐘)，總共處理7天。在試驗過程中表面在潮濕的唾液薄膜中保存過夜。在4天和7天處理后，使用上面描述的分光光度法測量每個表面的染色強度，并根據在樣品處理前和處理后測定的E值的變化dE計算染色去除功效。為了進行對比，將枯草桿菌蛋白酶功效與據信不表現出明顯的色斑去除功效的陰性對照(人造唾液)和據報道表現出色斑去除功效的陽性對照(六偏磷酸鈉)的效能進行比較。如圖1所示，枯草桿菌蛋白酶在從每百萬份75份(ppm)到1200ppm的活性濃度范圍內，提供了對數性的色斑去除劑量效應(y=0.2938Ln(x)-0.6716;R2=0.9831)，并且基于回歸分析顯示出有統計學顯著性(p<0.05)。如圖2所示，在濃度大于或等于1200ppm時，枯草桿菌蛋白酶也被證明具有比人造唾液對照明顯高的色斑去除功效，以及與溶液中5000ppm的六偏磷酸鈉陽性對照相當的功效(p<0.05)。選擇的枯草桿菌蛋白酶和陽性對照六偏磷酸鈉的濃度大約是消費者典型的20分鐘咀嚼過程中從口香糖中釋出的活性物質的量。實施例43本實施例描述了在嚼出試驗過程中囊封的活性物質從按照本文的詳細描述制備的壓縮口香糖中釋放的情況。每次使用的兩粒口香糖中囊封的酶占6重量％。口香糖被5位評議小組成員(A-E)咀嚼總共20分鐘的時間。在1、2、3、4、5、10、15和20分鐘的時間間隔從每個評議小組成員收集唾液。唾液樣品中活性物質(即枯草桿菌蛋白酶)的濃度對樣品時間的圖顯示在圖3中。圖4提供了實施例42中描述的體外活性試驗和根據本實施例中詳細描述的口香糖試驗制備的每日活性劑量估算值之間的比較。具體來說，在實施例42的體外試驗中，牛牙釉質每天在1200ppm的枯草桿菌蛋白酶中暴露20分鐘(即每日暴露24000ppm-分鐘)。這對應于圖4中體外試驗曲線下的面積。圖4還包括對應于圖3中的平均枯草桿菌蛋白酶濃度曲線的口香糖曲線。該曲線表示在20分鐘的嚼出試驗中13,530ppm的枯草桿菌蛋白酶劑量(即口香糖曲線下的面積)。假定每天使用4次，所測試類型的口香糖據信提供了大約54,120ppm-分鐘的每日活性劑量。顯然，該活性劑量比在體外試驗中所使用的每日枯草桿菌蛋白酶劑量高兩倍以上，而體外試驗在實施例42中已經證實提供了比陰性對照高和至少與陽性對照相當的色斑去除功效。圖4還包括了對應于大約26,000卯m-分鐘的每日枯草桿菌蛋白酶劑量的薄荷糖試驗的曲線。本發(fā)明不限于上述的實施方案，可以進行各種不同的修改。上面描述的優(yōu)選實施方案，包括實施例，其目的僅僅是為了使本
技術領域：
的其它專業(yè)人員熟悉本發(fā)明、它的原理以及它的實踐應用，以便本
技術領域：
的其它專業(yè)人員可以以眾多的形式改造和應用本發(fā)明，以便可以最好地適合于特定應用的需要。對于在本整個說明書(包括所附的權利要求書)中使用的單詞"包括"或"包含"或"含有"來說，除非上下文另有需要，否則這些單詞使用的基礎和明確理解是，它們應該被解釋為包含性而不是排他性，本申請人希望在解釋本整個說明書中，對每個這樣的單詞都如此闡釋。5權利要求1.有效去除牙齒表面色斑的口腔組合物，該組合物包含囊封的蛋白酶，其中囊封的蛋白酶含有有效去除牙齒表面色斑的蛋白酶以及至少部分包被蛋白酶表面的囊封劑。2.權利要求l的口腔組合物，其中所述蛋白酶選自組織蛋白酶、胃蛋白酶、凝乳酶、嗜熱菌蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶及其組合。3.權利要求1的口腔組合物，其中所述蛋白酶是枯草桿菌蛋白酶。4.權利要求1的口腔組合物，至少大約0.02重量％。5.權利要求1的口腔組合物，大約0.02重量％到大約10重量％。6.權利要求1的口腔組合物，至少大約10重量％。7.權利要求1的口腔組合物,大約10重量％到大約50重量％。8.權利要求1的口腔組合物,本上包被所有酶表面的囊封劑。其中囊封的蛋白酶占口腔組合物的其中囊封的蛋白酶占口腔組合物的其中所述蛋白酶占囊封的蛋白酶的其中所述蛋白酶占囊封的蛋白酶的其中囊封的蛋白酶含有蛋白酶和基9.權利要求l的口腔組合物，其中所述囊封劑選自丙烯酸聚合物和共聚物、羧基乙烯基聚合物、聚酰胺、聚苯乙烯、聚乙酸乙烯酯、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮、蠟及其組合。10.權利要求1的口腔組合物，其中所述口腔組合物是口香糖、糖食、錠、壓縮片、可食用薄膜、口腔噴霧、牙粉、漱口水、泡沫、牙膏產品或其組合的形式。11.權利要求1的口腔組合物，其中口腔組合物是壓縮的口香糖的形式。12.權利要求1的口腔組合物，其中口腔組合物的水分含量少于大約6重量％。13.權利要求1的口腔組合物，其中所述組合物含有囊封的高強度甜味劑，所述甜味劑選自三氯蔗糖、阿斯巴甜、紐甜、丁磺氨的鹽、阿力甜、糖精及其鹽、環(huán)拉酸及其鹽、甘草甜素、二氫查耳酮、奇異果甜蛋白、應樂果甜蛋白及其組合。14.權利要求1的口腔組合物，其中口腔組合物在口腔組合物的表面上還含有包衣。15.制備有效去除牙齒表面色斑的口腔組合物的方法，該方法包括將囊封的蛋白酶與口腔組合物的一種或多種組分相接觸，其中囊封的蛋白酶含有有效去除牙齒表面色斑的蛋白酶以及至少部分包被酶表面的囊封劑。16.權利要求15的方法，其中所述方法還包括提供口腔組合物的一種或多種組分；以及提供囊封的蛋白酶。17.權利要求16的方法，其中囊封的酶與口腔組合物的一種或多種組分相接觸包括將一種或多種組分放置在容器中，其中所述一種或多種組分選自甜味劑、膠基、香料、多元醇或其組合；將囊封的酶放置在容器中；以及混合容器的內含物，以使一種或多種組分與囊封的酶相接觸。18.權利要求17的方法，其中所述方法還包括將口腔組合物形成適合口腔消耗的形狀。19.權利要求18的方法，其中所述方法還包括通過一種或多種工藝形成囊封的蛋白酶，所述工藝選自噴霧干燥、噴霧冷卻、噴霧激冷、擠出、凝聚、分子包合、流化床包被、成粒、聚結、軋輥壓制及其組合o20.權利要求18的方法，其中所述口腔組合物是口香糖、糖食、錠、壓縮片、可食用薄膜、口腔噴霧、牙粉、漱口水、泡沫、牙膏產品或其組合的形式。21.權利要求15的方法，其中所述蛋白酶選自組織蛋白酶、胃蛋白酶、凝乳酶、嗜熱菌蛋白酶、胰蛋白酶、彈性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶及其組合。22.權利要求15的方法，其中所述蛋白酶是枯草桿菌蛋白酶。23.權利要求15的蛋白酶，其中囊封的蛋白酶含有蛋白酶和基本上包被所有酶顆粒表面的囊封劑。24.權利要求15的方法，其中所述囊封劑選自丙烯酸聚合物和共聚物、羧基乙烯基聚合物、聚酰胺、聚苯乙烯、聚乙酸乙烯酯、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮、蠟及其組合。25.權利要求15的方法，其中所述接觸形成囊封的蛋白酶與口腔組合物的一種或多種組分的混合物。26.權利要求25的方法，其中所述混合物具有基本上不使酶變性的水分含量。27.權利要求25的方法，其中所述混合物具有基本上不使酶變性的溫度。28.權利要求15的方法，其中所述口腔組合物是壓縮的口香糖的形式，并且口腔組合物的一種或多種組分包含粉末狀膠基。29.權利要求15的方法，其中所述口腔組合物是壓縮片的形式，并且口腔組合物的一種或多種組分包含選自甘露糖醇、木糖醇、山梨糖醇、麥芽糖醇、氫化的異麥芽糖、乳糖醇、赤蘚糖醇及其組合的多元醇。全文摘要總的來說，本發(fā)明涉及了有效去除牙齒表面色斑的口腔組合物(例如糖食或口香糖產品例如壓縮的口香糖)。具體來說，本發(fā)明涉及包含包被的或囊封的蛋白酶的口腔組合物，以提供有效去除牙齒色斑的口腔組合物。文檔編號A61K8/11GK101489520SQ200780027015公開日2009年7月22日申請日期2007年5月25日優(yōu)先權日2006年5月25日發(fā)明者邁克爾·S·哈斯申請人:Wm.雷格利Jr.公司