專利名稱：一種貫葉金絲桃提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物提取物及其制備方法，特別涉及一種貫葉金絲桃提 取物及其制備方法。
背景技術(shù)：
貫葉金絲桃素(Hyperforin)是金絲桃屬植物貫葉金絲桃(Hypericum Perforatum L.)和含貫葉金絲桃素的其它植物中提取的具有抗抑郁、抗菌 和創(chuàng)傷治療作用的關(guān)鍵成分。貫葉金絲桃素對(duì)光、熱、氧不穩(wěn)定，分解為氧 化的降解產(chǎn)物，從而給藥物的治療活性及藥物的制備提出了一系列難題。
目前文獻(xiàn)報(bào)道的貫葉金絲桃素的提取分離方法多為溶劑提取、柱色譜分 離的方法(H. C. J. 0rth， C. Rentel， and P. C. Schmidt. [J] Pharm. Pharmacol. 1999，51:193 200. Isolation, Purity Analysis and Stability of Huperforin as a Standard Material from Hypericum perforatum L.)。 溶劑提取需要經(jīng)過加熱和濃縮，存在貫葉金絲桃素被破壞，且不同溶劑萃取 時(shí)需要大量溶劑，耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，還會(huì)帶來溶劑殘留等缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種貫葉金絲桃提取物；本發(fā)明另一 目的在于提供 該提取物的制備方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明所述貫葉金絲桃提取物可通過如下方法制備而成取貫葉金絲桃
藥材，裝入超臨界C02萃取罐中，在壓力為15 50MPa，溫度為30 5(TC條 件下萃取，即得到貫葉金絲桃提取物。萃取壓力優(yōu)選29MPa，溫度為38i:。
所述貫葉金絲桃藥材是指貫葉金絲桃、貫葉金絲桃的粗粉或貫葉金絲桃 的粗提物。貫葉金絲桃的粗粉是將貫葉金絲桃均粉碎過10目篩即得；貫葉 金絲桃的粗提物可從市場(chǎng)上購(gòu)得。
所述貫葉金絲桃藥材也可由金絲桃屬其他植物及其粗粉或粗提物所代替。上述萃取過程中還可以按照本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的常規(guī)方法加
入臨床可接受的夾帶劑，夾帶劑重量為藥材質(zhì)量的0-20%。夾帶劑可以為乙 醇、甲醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、正戊醇、異戊醇、丙酮、乙酸乙酯、 乙醚、石油醚、氯仿苯等有機(jī)溶劑，任意比例上述各種溶劑的混合物或任意 比例上述溶劑與水的混合物。
本發(fā)明所述金絲桃提取物還可按本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的常規(guī)方 法加入0.5 5%保護(hù)劑，以單味藥形式或加入復(fù)方中制成具有抗抑郁、抗菌 和創(chuàng)傷治療作用的藥物或功能食品。所述的保護(hù)劑包括但不限于維生素C或 維生素C的衍生物、維生素E或維生素E與有機(jī)酸的混合物、半胱氨酸、谷 胱甘肽等有機(jī)硫醇化合物或P -環(huán)糊精。所述的有機(jī)酸包括但不限于檸檬酸、 苯甲酸、酒石酸中任一種或它們以任意比例的組合。
本發(fā)明所述金絲桃提取物可按藥劑學(xué)常規(guī)方法加入常規(guī)輔料，以此提取 物為活性成分制成單方制劑，或制成含有上述提取物的藥物組合制劑。劑型 包括但不限于片劑、軟膠囊劑、口服掖、滴丸劑、微囊劑、顆粒劑、膜 劑、栓劑、經(jīng)皮給藥制劑、針劑、粉針劑、輸液劑、脂肪乳注射劑。其中貫 葉金絲桃素提取物存在狀態(tài)可以是固體或液體，給藥方式可以是口服、肌肉 注射或靜脈注射。其用途可以是藥物、保健食品或貫葉金絲桃素的對(duì)照品。
實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明金絲桃提取物具有抗抑郁、抗菌和創(chuàng)傷治療作用。本發(fā) 明采用超臨界C02萃取，不僅可得到高濃度的貫葉金絲桃素，而且可避免在 溶劑提取、柱色譜分離時(shí)的缺點(diǎn)。超臨界C02萃取法操作溫度接近室溫，特 別適合遇熱分解的熱敏物質(zhì)；C02無味、無臭、無毒、化學(xué)惰性，不污染環(huán) 境和產(chǎn)品；在萃取過程結(jié)束后不殘留在產(chǎn)品和料渣中，所得產(chǎn)品質(zhì)量好檔次 高；C(M介廉易得，不易燃易爆，避免了有機(jī)溶劑提取危險(xiǎn)，使用安全；溶 劑回收簡(jiǎn)單方便，節(jié)省能源，通過等溫降壓或等壓升溫被萃取物就可與萃取 劑分離；超臨界C02萃取集萃取、分離于一體，大大縮短了工藝流程，且得 到的產(chǎn)品濃度高，不需要進(jìn)行柱層析，可直接獲得純度高于50%的提取物。 由于未經(jīng)過反復(fù)溶劑萃取和柱層析，減少了貫葉金絲桃素與光、熱、氧接觸 的機(jī)會(huì)。
下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不限于構(gòu)成對(duì)本發(fā)明所要求保護(hù)范圍的限定。
實(shí)驗(yàn)例1對(duì)比溶劑提取和超臨界萃取方法提取貫葉金絲桃素
溶劑提取的方法制備貫葉金絲桃素提取物各取貫葉金絲桃藥材粗粉
200g，分別以含l%Vc的正己烷、95%乙醇、甲醇lOOOmL超聲提取1小時(shí)。
過濾，3(TC減壓回收溶劑，稱重，計(jì)算收率。
超臨界萃取的方法制備貫葉金絲桃素提取物取貫葉金絲桃藥材粗粉
200g,在壓力25Mpa，溫度38。C下萃取lh，以7 Mpa， 3(TC解析。向其中加
入iy。維生素E，得到貫葉金絲桃提取物，稱重，計(jì)算收率。
以上方法得到的提取物分別取10mg,以10mL甲醇超聲溶解。用HPLC
測(cè)定，對(duì)比不同方法提取得到的提取物中貫葉金絲桃素的含量。
表1溶劑提取和超臨界萃取方法的對(duì)照實(shí)驗(yàn)
提取方法提取物重(g)貫葉金絲桃素含量(％)提取出的貫葉金絲桃素(mg)
正己垸超聲4.1541.351716.0
95%乙醇超聲46.43. 291526. 6
甲醇超聲62.52. 351468. 8
超臨界萃取6.855. 433769. 2
從表1結(jié)果可見，在提取物的重量上，95%乙醇和甲醇提取得到的提取 物最多，但含量低，雜質(zhì)多；與有機(jī)溶劑提取的方法相比，超臨界萃取的方 法提取出的貫葉金絲桃素含量高。
實(shí)驗(yàn)例2 考察萃取壓力對(duì)貫葉金絲桃素萃取率和含量的影響
分別取同一批號(hào)的藥材(均粉碎過10目篩，混勻)在4(TC萃取溫度下，
分別以不同的壓力提取2h，考察萃取物的萃取率。分別用甲醇10ml溶解，
HPLC檢測(cè)，記錄貫葉金絲桃素的峰面積，計(jì)算峰面積/樣品重。找出適合的
萃取壓力。結(jié)果見圖1、圖2
在沒有貫葉金絲桃素標(biāo)準(zhǔn)品定量的情況下，我們以貫葉金絲桃素峰面積
/樣品重量作為含量的參考(下同)。
從圖1、 2中可見，萃取率隨壓力增加呈上升趨勢(shì)，但貫葉金絲桃素的
含量在29MPa時(shí)達(dá)到最高，隨著壓力增大，含量反而下降。說明在壓力大于
29MPa以后其它成分提取出來，造成貫葉金絲桃素含量降低。綜合以上試驗(yàn),
選擇29MPa為最佳萃取壓力。實(shí)驗(yàn)例3 考察萃取溫度對(duì)貫葉金絲桃素萃取率和含量的影響
分別取同一批號(hào)的藥材(均粉碎過IO目篩，混勻)在29MPa萃取壓力 條件下，分別以不同的溫度提取2h，考察萃取物的萃取率。分別用甲醇10ml 溶解，HPLC檢測(cè)，記錄貫葉金絲桃素的峰面積，計(jì)算峰面積/樣品重。找出 適合的萃取溫度。結(jié)果見圖3、圖4。
從圖3、 4中可見，萃取的溫度升高，可以提高萃取率；但在38'C時(shí)貫 葉金絲桃素含量最高，當(dāng)溫度升高到42'C時(shí)，含量下降，可能這個(gè)條件下其 它雜質(zhì)被提取出來，從而使含量下降。綜合上述試驗(yàn)，認(rèn)為38。C是最佳萃取 溫度。


圖1考察萃取壓力對(duì)萃取率的影響
圖2考察萃取壓力對(duì)產(chǎn)物含量的影響
圖3考察萃取溫度對(duì)萃取率的影響
圖4考察萃取溫度對(duì)產(chǎn)物含量的影響
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1: 貫葉金絲桃提取物
將貫葉金絲桃藥材lkg，粉碎過10目篩，混勻，裝入超臨界C02萃取罐 中，以壓力為29Mpa，溫度為38"C的條件進(jìn)行萃取，得到提取物101g。
實(shí)施例2: 貫葉金絲桃提取物
將貫葉金絲桃粗提物lkg裝入超臨界C02萃取罐中，加95%乙醇100ml， 以壓力為20Mpa，溫度為50'C的條件進(jìn)行萃取，得到提取物90g。向其中加 入lg維生素E，避光低溫貯存。 實(shí)施例3: 貫葉金絲桃提取物
將貫葉金絲桃藥材粗粉lkg，裝入超臨界C02萃取罐中，以壓力為45Mpa， 溫度為35'C的條件進(jìn)行萃取，得到提取物100g。
實(shí)施例4: 本發(fā)明滴丸
取實(shí)施例1中貫葉金絲桃素提取物30g，聚乙二醇6000 120g，按常規(guī) 工藝制成滴丸。
實(shí)施例5: 本發(fā)明軟膠囊取實(shí)施例2中貫葉金絲桃素提取物30g，食用植物油90g，加明膠、水、 甘油，按常規(guī)工藝制成軟膠囊。
實(shí)施例6: 本發(fā)明微型膠囊
取實(shí)施例2中貫葉金絲桃素提取物3Kg，加入阿拉伯膠粉1. 5Kg， 3%阿 拉伯膠液90L， 39&明膠液120L，甲醛、淀粉適量。經(jīng)乳化、包囊、稀釋、固 化、分散、干燥，按常規(guī)工藝制成微型膠囊。 實(shí)施例7: 本發(fā)明膠囊
取實(shí)施例l中貫葉金絲桃素提取物150g，加少量乙醇溶解，加入e-環(huán) 糊精750g與蒸餾水制成的飽和溶液中，在42'C、攪拌條件下包和30min， 過濾，加羧甲基淀粉鈉38g，按常規(guī)工藝制顆粒，裝膠囊。 實(shí)施例8: 本發(fā)明顆粒劑
取實(shí)施例2中貫葉金絲桃素提取物150g，加少量乙醇溶解，加入P-環(huán) 糊精750g與蒸餾水制成的飽和溶液中，在42t:、攪拌條件下包和30min， 過濾，微晶纖維素25g，按常規(guī)工藝制顆粒，壓片包衣。 實(shí)施例9: 本發(fā)明軟膏劑
取實(shí)施例1中貫葉金絲桃素提取物3g，加入十六醇7g,十八醇2.4g, 硬脂酸4g，硅油16g，液體石蠟9g，甘油8g，硼砂0.5g，三乙醇胺2mL， 尼泊金乙酯O.lg，蒸餾水80mU按常規(guī)工藝制成軟膏。 實(shí)施例10: 貫葉金絲桃素對(duì)照品
取實(shí)施例2中貫葉金絲桃素提取物5g，以硅膠柱層析，用石油醚洗脫， 以紫外檢測(cè)器檢測(cè)并收集其中含貫葉金絲桃素部分，合并，3(TC減壓回收溶 劑。殘?jiān)陨倭考状既芙?，上C18柱并以86 : 14比例的甲醇:水洗脫。收集 其中的貫葉金絲桃素流份，30'C減壓回收溶劑，得到貫葉金絲桃素含量高于 95%的對(duì)照品。
權(quán)利要求
1、一種貫葉金絲桃提取物，其特征在于該提取物通過如下方法制備而成取貫葉金絲桃藥材，裝入超臨界CO2萃取罐中，在壓力為15～50MPa，溫度為30～50℃條件下萃取，即得到貫葉金絲桃提取物。
2、 如權(quán)利要求1所述的貫葉金絲桃提取物，其特征在于萃取壓力為 29MPa，溫度為38。C。
3、 如權(quán)利要求1或2所述的貫葉金絲桃提取物，其特征在于所述貫葉 金絲桃藥材是指貫葉金絲桃、貫葉金絲桃的粗粉或貫葉金絲桃的粗提物。
4、 一種貫葉金絲桃提取物的提取方法，其特征在于該方法為 取貫葉金絲桃藥材，裝入超臨界C02萃取罐中，在壓力為15 50MPa，溫度為30 5(TC條件下萃取，即得到貫葉金絲桃提取物。
5、 如權(quán)利要求4所述貫葉金絲桃提取物的提取方法，其特征在于萃取 壓力為29MPa，溫度為38。C。
6、 如權(quán)利要求4或5所述貫葉金絲桃提取物的提取方法，其特征在于 所述貫葉金絲桃藥材是指貫葉金絲桃、貫葉金絲桃的粗粉或貫葉金絲桃的粗 提物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種貫葉金絲桃提取物及其制備方法。該貫葉金絲桃提取物的制備方法為取貫葉金絲桃，裝入超臨界萃取罐中，在壓力為15～50MPa，溫度為30～50℃條件下萃取，即得。本發(fā)明貫葉金絲桃提取物可抗抑郁、抗菌和治療創(chuàng)傷，臨床可用于制備藥物或功能食品，也可以用于制備貫葉金絲桃素的對(duì)照品。
文檔編號(hào)A61P31/04GK101411731SQ20071017598
公開日2009年4月22日 申請(qǐng)日期2007年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月17日
發(fā)明者何大林, 曦 劉, 段震文, 郭樹仁 申請(qǐng)人:北京北大維信生物科技有限公司