專利名稱：：一種復(fù)方斑蝥注射制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種復(fù)方斑蝥注射制劑及其制備方法，屬于中藥制藥的
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：復(fù)方斑蝥制劑一種具有破血消瘦、攻毒蝕瘡的作用的藥物。其中復(fù)方斑蝥膠囊為《國家衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十七冊收載品種。方由斑蝥、人參、黃芪、刺五加、三棱、半枝蓮、莪術(shù)、山茱萸、女貞子、熊膽粉、甘草共十一味藥物組成，是治療原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科惡性腫瘤等的較好藥物之一。近年來，肺癌、原發(fā)性肝癌、結(jié)直腸癌、婦科惡性腫瘤等的發(fā)病率逐年上升，已成為嚴(yán)重危害人類健康的最常見的惡性腫瘤，給我們的社會、經(jīng)濟、生活帶來諸多不變。目前，市面上的以及在申請生產(chǎn)的復(fù)方斑蝥系列產(chǎn)品多為口服制劑，有復(fù)方斑蝥顆粒、片劑、膠囊、丸劑、咀嚼片等，是一種經(jīng)典中成藥；其給藥途徑為口服，主要是經(jīng)過胃腸道吸收進入體循環(huán)進而發(fā)揮療效，具有起效慢、吸收不完全、生物利用度低等缺點；同時，對口服不便的患者，口服制劑的應(yīng)用具有局限性。同時生產(chǎn)復(fù)方斑蝥制劑的方法有很多，較為常用的是斑蝥以氯仿為溶劑來進行提?。蝗藚?、山茱萸、女貞子、半枝蓮四味藥材粉碎成細(xì)粉入藥。但是經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，上述劑型工藝中斑蝥、人參、山茱萸、女貞子、半枝蓮等接入藥會導(dǎo)致雜質(zhì)含量高，以氯仿為溶劑來進行提取會導(dǎo)致在提取過程中溶劑有殘留，因此給制劑制備帶來了不便，不利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制；另外，產(chǎn)品均為濃縮后的稠膏或清膏直接干燥后與粉末藥混合制備不同劑型，缺少對其有效成分的分離環(huán)節(jié)，這樣也會造成雜質(zhì)含量過高，純化不完善，容易導(dǎo)致不良反應(yīng)。
發(fā)明內(nèi)容針對以上現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明研究人員經(jīng)過大量的實驗，提供了一種穩(wěn)定性好、吸收充分、起效快、療效高的供注射給藥的復(fù)方斑蝥注射制劑及其制備方法。本發(fā)明中的斑蝥采用乙醇滲漉、超聲的方法提取，方法更加科學(xué)，使得制劑中的斑蝥素含量明顯提高；采用乙醇為溶劑提取除熊膽粉、斑蝥外的其余九味藥材，同時對該九味藥材中提取的總皂苷有效部位采用有機溶劑萃取的方式進行純化；對醇提后的沉淀采用大孔樹脂吸附的方法進行提純，制備人參等九味提取物的多糖有效成分。最后將熊膽粉、斑蝥提取物、總皂苷提取物和多糖有效組分一起制備注射制劑。本發(fā)明的目的是公開一種復(fù)方斑蝥注射制劑。本發(fā)明的另一個目的是公丌這種復(fù)方斑蝥注射制劑的制備方法。這種注射制劑包括輸液、水針劑、粉針劑和凍干粉針劑。本發(fā)明方法制備的復(fù)方斑蝥注射制劑有效成份含量較高，可達(dá)到提高生物利用度的效果。本發(fā)明復(fù)方斑蝥注射制劑是這樣構(gòu)成的重量組份為斑蝥0.6-6份、人參1.5-15份、黃芪7.5-100份、刺五加7.5-100份、三棱2.4-24份、半枝蓮9-100份、莪術(shù)2.4-24份、山茱萸3-30份、女貞子3-30份、熊膽粉0.05-1.0份、甘草1.5-15份。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)工藝歩驟一斑蝥提取物制備斑蝥的提取物是通過將斑蝥乙醇滲漉或超聲提取、水沉、離心的方法得到的。具體的制備方法為將斑蝥粉碎成粗粉，用75%-95%的乙醇超聲提取或用滲漉裝置滲漉提取，提取液用水進行沉淀，過濾，濾液高速離心，離心液濃縮，干燥，粉碎，即得。更具體的方法為取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-IO倍量75%-95%的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30_50Hz，提取2-3次；或?qū)唑址壑萌霛B漉裝置中滲漉提取，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-IO倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，即得。工藝歩驟二人參等九味藥材的提取取除熊膽粉外的其余人參、黃蔑等九味藥材，用6-12倍量的75%_95%乙醇提取2-3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在6(TC為1.05-1.20的稠膏，加入8-10倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。1、總皂苷提取物制備總皂苷提取物是通過將上清液用有機溶劑萃取，然后用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，即得。具體的制備方法為將人參、黃芪等九味藥材提取后的上清液，用有機溶劑萃取2-3次(有機溶劑可以是用于提取皂苷類成分的任何有機溶劑，包括乙酸乙酯、正丁醇、異戊醇等)，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，即得總皂苷提取物。2、多糖有效組分制備多糖的有效組分是通過將上述人參、黃芪等九味藥材的沉淀，采用大孔樹脂吸附除雜，超濾的方法獲得。具體的制備方法為將上述人參、黃芪等九味藥材的沉淀，加3-6倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入8-12倍量的水?dāng)嚢?，靜置，上清液過已處理好大孔吸附樹脂，用6-10倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l力-和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，即得。上述制備方法中的大孔吸附樹脂為非極性或弱極性，包括D101型、DA-201型、AB-8型等。故本發(fā)明提取工藝為方中十一味，除熊膽粉外，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量75%_95%的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30-50Hz，提取2-3次；或?qū)唑址壑萌霛B漉裝置中滲漉提取，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥提取物備用；其余人參等9味用6-12倍量的75%-95%乙醇提取2-3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在60'C為1.05-1.20的稠膏，加入8-IO倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。上清液用有機溶劑萃取2-3次(有機溶劑可以是用于提取皂苷類成分的任何有機溶劑，包括乙酸乙酯、TH丁醇、異戊醇等)，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，得總皂苷提取物備用；取沉淀加3-6倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入8-12倍量的水?dāng)嚢?，靜置，上清液過己處理好大孔吸附樹脂，用6-10倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l萬和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，得多糖有效組分備用。本發(fā)明注射制劑包括輸液制劑、水針制劑、粉針制劑和凍干粉針制劑。本發(fā)明注射制劑的制備方法為取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入適量輔料，采用液體制劑的制備方法，制備成輸液制劑、水針制劑、粉針制劑和凍干粉針制劑。具體的制備方法為本發(fā)明輸液劑的制備方法為取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入等滲調(diào)節(jié)劑和適量防腐劑，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，滅菌，制備成輸液劑。本發(fā)明輸液劑中的等滲調(diào)節(jié)劑，可以是葡萄糖、木糖醇、山梨醇、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化鉀、乳酸鈉和右旋糖酐等中的一種或幾種的組合物；本發(fā)明輸液劑中的防腐劑可以是苯甲醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、氯甲酚等其中的一種或幾種的混合物。本發(fā)明水針劑的制備方法為取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，滅菌，制備成水針劑。本發(fā)明粉針制劑的制備方法為取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入水溶性注射用賦形劑，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，干燥，制備成粉針制劑。本發(fā)明凍干粉針劑的制備方法為取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入凍干賦形劑，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，冷凍干燥，制備成凍干粉針劑。上述粉針劑和凍干粉針劑中的賦形劑，可以是甘露醇、果糖、葡聚糖、右旋糖酑、聚乙烯吡洛垸酮等中的一種或幾種的組合物。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明是以乙醇滲漉或超聲提取、水沉、離心的方法提取斑蝥藥材，提取效果好，操作方便，穩(wěn)定性好；采用乙醇為溶劑提取除熊膽粉、斑蝥外的其余九味藥材，同時對該九味藥材中提取的總皂苷有效部位采用有機溶劑萃取的方式進行純化，使得復(fù)方斑蝥藥物的有效成分集中且純度較高；對醇提后的沉淀采用大孔樹脂吸附的方法進行提純，制備人參等九味提取物的多糖有效成分，獲得的多糖組分藥理作用好、不良反應(yīng)小。針對本發(fā)明所述制備工藝，申請人進行了大量的試驗研究，具體如下實驗l:斑蝥提取物工藝實驗研究斑蝥中所含的主要成分為斑蝥素等，參照部頒標(biāo)準(zhǔn)和公丌專利，我們同時選用了氯仿、水作為溶媒提取，或斑蝥直接粉碎成細(xì)粉入藥，以斑蝥素的含量為指標(biāo)，對不同方法進行比較，結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由以上含量測定結(jié)果可以看出，采用本發(fā)明所述的醇提取方法制備斑蝥提取物，其含量高于氯仿提取和直接入藥，同時氯仿屬于毒性有機溶劑，在制備中有殘留，直接入藥雜質(zhì)限度無控制，容易過高，故選擇本發(fā)明制備方法對于斑蝥中有效成分的提取是合理的。實驗2:人參等九味提取工藝研究按照本發(fā)明所述的工藝條件，制備三批總皂苷提取物，以野黃芩苷的含量和總皂苷含量為指標(biāo)，結(jié)果見下表。提取工藝實驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由實驗結(jié)果可見，野黃芩苷平均含量為0.9468，RSD為0.98%,總皂苷含量為82.0%，RSD為1.71%,證明該工藝穩(wěn)定可行，質(zhì)量可控。實驗3:本發(fā)明制劑對實驗小鼠移植性腫瘤S,,H22的抑制作用一、材料1、動物實驗動物昆明種小鼠，體重18-22g，雌雄各半。2、藥物本發(fā)明藥物、市售復(fù)方斑蝥膠囊。二、方法與結(jié)果1、對小鼠移植性腫瘤S,的影響取腫瘤生長良好的S，小鼠，無菌條件下抽取腹水，用無菌生理鹽水按l:3稀釋，顯微鏡下計數(shù)，調(diào)瘤細(xì)胞數(shù)為1.0X107個/ml(置冰浴中)。然后取0.2ml小鼠腋部皮下接種，24小時后稱重。取試驗藥物，給藥劑量為對照組生理鹽水20ml/kg;市售復(fù)方斑蝥膠囊組2.Og/kg;本發(fā)明藥物組2.0g生藥/kg。每閂給藥一次，連續(xù)十天，末次給藥后24小時，取小鼠按常規(guī)方法處死解剖腫瘤，稱重。結(jié)果見下表。對小鼠實體瘤S,的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2、對小鼠移植性腫瘤H22的影響:取傳代后生長良好的&2小鼠，無菌條件下抽取腹水，力n4倍量無菌生理鹽水混勻，接種于小鼠右前肢腋窩處皮下，每支接種0.2ml，24小時后隨機分組，尾靜脈注射給藥和灌胃給藥，劑量同上，每日給藥一次，連續(xù)十天。末次給藥后逐日記錄各組小鼠死亡情況，計算各組小鼠平均生存天數(shù)，計算生命延長率。結(jié)果見下表。對小鼠&2腹水瘤的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>根據(jù)以上實驗結(jié)果，復(fù)方斑蝥注射制劑可明顯抑制小鼠抑制性腫瘤S,的生長，降低瘤重;對小鼠接種H22腹水瘤后的生存期有一定的延長作用。由于治療組間有顯著性差異(P〈0.05)，故本發(fā)明制劑組與市售復(fù)方斑蝥膠囊組比較，在臨床用量相同的情況下，本發(fā)明制劑組對比市售復(fù)方斑蝥膠囊的療效更好，生物利用度更高。經(jīng)試驗研究表明本發(fā)明所述制備工藝具有較強的科學(xué)性、可行性，所得樣品質(zhì)量穩(wěn)定，符合治療的質(zhì)量要求。本品給藥途徑為注射給藥，不需經(jīng)過胃腸道的消化吸收，具有療效確切、奇效快的特點。擴展了本藥物的給藥方式，便于廣大患者使用。具體實施例方式具體實施例方式本發(fā)明實施例1:斑蝥3.97g、人參9.92g、黃芪49.58g、刺五加49.58g、三棱15.83g、半枝蓮59.5g、莪術(shù)15.83g、山茱萸19.83g、女貞子19.83g、熊膽粉0.4g、甘草9.92g制備方法為方中十一味，除熊膽粉外，粉碎成50目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入10倍量90%的乙醇浸泡40分鐘后超聲振蕩提取，時間40分鐘，頻率30-50Hz，提取3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎備用；取其余人參等9味藥材，用12倍量的90%乙醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在6(TC為1.10的稠膏，加入10倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。上清液用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，即得總皂苷提取物；取沉淀加6倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入10倍量的水?dāng)嚢瑁o置，上清液過巳處理好大孔吸附樹脂，用8倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l萬和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，即得多糖有效組分；將上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，用氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，再加入適量尼泊金乙酯，調(diào)pH值為5.0，用0.22iim微孔濾膜濾過，滅菌，制備成輸液劑1000瓶。用法用量靜脈滴注，一次2-3瓶，一日2次。本發(fā)明實施例2:斑蝥0.6g、人參1.5g、黃芪7.5g、剌五加7.5g、三棱2.4g、半枝蓮9g、莪術(shù)2.4g、山茱萸3g、女貞子3g、熊膽粉0.05g、甘草1.5g制備方法為方中十一味，除熊膽粉外，粉碎成40目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6倍量75%的乙醇浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時間20分鐘，頻率30Hz，提取2次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎備用；其余人參等9味用6倍量的75%乙醇提取2次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在60。C為1.05的稠膏，加入8倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。上清液用乙酸乙酯萃取2次，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，得總皂苷提取物備用；取沉淀加3倍量的水煎煮提取2次，每次0.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入8倍量的水?dāng)嚢瑁o置，上清液過己處理好大孔吸附樹脂，用6倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l萬和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，即得多糖；取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，調(diào)pH值4.0，用0.22um微孔濾膜濾過，滅菌，制備成水針劑1000支。用法用量肌內(nèi)或靜脈注射，一次l-2支，一日2次本發(fā)明實施例3:斑蝥6g、人參15g、黃芪100g、刺五加100g、三棱24g、半枝蓮i00g、莪術(shù)24g、山茱萸30g、女貞子30g、熊膽粉1.0g、甘草15g制備方法為方中十一味，除熊膽粉外，粉碎成60目的粗粉，置入滲漉裝置中滲漉提取，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入10倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎備用；其余人參等9味用12倍量的95%乙醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在6(TC為1.20的稠膏，加入10倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。上清液用正丁醇液萃取3次，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，備用；取沉淀加6倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入12倍量的水?dāng)嚢?，靜置，上清液過已處理好大孔吸附樹脂，用10倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l力'和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，即得；取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入甘露醇和果糖，調(diào)pH值6.0，用0.22Pm微孔濾膜濾過，干燥，制備成粉針制劑1000支。用法用量肌內(nèi)或靜脈注射、滴注，一次1-2支，一日2次。本發(fā)明實施例4:斑蝥4.76g、人參11.9g、黃芪59.5g、刺五加59.5g、三棱19g、半枝蓮71.4g、莪術(shù)19g、山茱萸23.8g、女貞子23.8g、熊膽粉0.48g、甘草11.9g制備方法為方中十一味，除熊膽粉外，粉碎成50目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85%的乙醇浸泡40分鐘后超聲振蕩提取，時間30分鐘，頻率40Hz，提取2次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎備用；其余人參等9味用8倍量的85%乙醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在60'C為1.15的稠膏，加入8倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。上清液用異戊醇萃取2次，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，備用；取沉淀加5倍量的水煎煮提取2次，每次1.0小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入10倍量的水?dāng)嚢?，靜置，上清液過已處理好大孔吸附樹脂，用8倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l萬和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，即得；取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入葡聚糖和聚乙烯吡洛烷酮，調(diào)pH值4.6，用0.22um微孔濾膜濾過，冷凍干燥，制備成凍干粉針劑1000支。用法用量肌內(nèi)或靜脈注射、滴注，一次1-2支，一閂2次。本發(fā)明實施例5:按照實施例1的處方和方法制備斑蝥提取物、總皂苷提取物和多糖有效組分。將上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，用葡萄糖調(diào)節(jié)等滲，再加入適量苯甲醇，調(diào)pH值為5.2，用0.22um微孔濾膜濾過，滅菌，制備成輸液劑1000瓶。本發(fā)明實施例6按照實施例2的處方和方法制備斑蝥提取物、總皂苷提取物和多糖有效組分。取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入右旋糖酐，調(diào)pH值4.3，用0.22ym微孔濾膜濾過，干燥，制備成粉針制劑1000支。本發(fā)明實施例7按照實施例3的處方和方法制備斑蝥提取物、總皂苷提取物和多糖有效組分。取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入甘露醇和葡聚糖，調(diào)pH值5.5，用0.22um微孔濾膜濾過，冷凍干燥，制備成凍干粉針劑1000支。權(quán)利要求1.一種復(fù)方斑蝥注射制劑，其特征在于藥效組分按下述重量配比的原藥材制成的藥物斑蝥0.6-6份、人參1.5-15份、黃芪7.5-100份、刺五加7.5-100份、三棱2.4-24份、半枝蓮9-100份、莪術(shù)2.4-24份、山茱萸3-30份、女貞子3-30份、熊膽粉0.05-1.0份、甘草1.5-15份；其制備方法有以下工藝步驟工藝步驟一、斑蝥提取物制備將斑蝥粉碎成粗粉，通過采用75％-95％的乙醇超聲提取滲或用滲漉裝置滲漉提取，再將提取液水沉、離心得到。工藝步驟二、人參等九味藥材的提取取除熊膽粉外的其余人參、黃芪等九味藥材，用6-12倍量的75％-95％乙醇提取2-3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在60℃為1.05-1.20的稠膏，加入8-10倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。1、總皂苷提取物制備將上清液用有機溶劑萃取，然后用1％的氫氧化鈉水溶液洗滌，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，即得。2、多糖有效組分制備是將上述人參、黃芪等九味藥材的沉淀，采用大孔樹脂吸附除雜，超濾的方法獲得。工藝步驟三、液體制劑的制備取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入適量輔料，采用液體制劑的制備方法，制備成輸液制劑、水針制劑、粉針制劑和凍干粉針制劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方斑蝥注射制劑，其特征在于，有效成分的制備方法，還包括以下歩驟方中十一味，除熊膽粉外，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量75%_95%的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30-50Hz，提取2_3次；或?qū)唑址壑萌霛B漉裝置中滲漉提取，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥提取物備用；其余人參等9味用6-12倍量的75%-95%乙醇提取2-3次，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮成相對密度在60。C為1.05-1.20的稠膏，加入8-10倍量的水，靜置，濾過，得沉淀和上清液。上清液用有機溶劑萃取2-3次(有機溶劑可以是用于提取皂苷類成分的任何有機溶劑，包括乙酸乙酯、正丁醇、異戊醇等)，合并萃取液，用1%的氫氧化鈉水溶液洗滌二次，棄去堿水液，減壓回收有機溶劑萃取液并濃縮至干，得總皂苷提取物備用；取沉淀加3-6倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-1.5小時，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮成稠膏，稠膏加入8-12倍量的水?dāng)嚢瑁o置，上清液過已處理好大孔吸附樹脂，用6-10倍量的水洗脫，收集直接流出液和水洗液，分別用截留分子量為l萬和20萬的超濾膜超濾，收集，濃縮，干燥，得多糖有效組分備用。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述的大孔吸附樹脂為非極性或弱極性，包括D101型、DA-201型、AB-8型等。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，還包括以下歩驟輸液劑的制備取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入等滲調(diào)節(jié)劑和適量防腐劑，調(diào)pH值f0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，滅菌，制備成輸液劑；水針劑的制備取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，滅菌，制備成水針劑；粉針制劑的制備取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入水溶性注射用賦形劑，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，干燥，制備成粉針制劑；凍干粉針劑的制備取上述斑蝥提取物、總皂苷提取物、多糖有效組分用注射用水溶解，再加入熊膽粉使溶解，加入凍干賦形劑，調(diào)pH值4.0-6.0，用0.22um微孔濾膜濾過，冷凍干燥，制備成凍干粉針劑。5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的復(fù)方斑蝥注射制劑的制備方法，其特征在于，所述輔料為等滲調(diào)節(jié)劑可以是葡萄糖、木糖醇、山梨醇、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化鉀、乳酸鈉和右旋糖酐等中的一種或幾種的組合物；所述的防腐劑可以是苯甲醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、氯甲酚等其中的一種或幾種的混合物。6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的復(fù)方斑蝥注射制劑的制備方法，其特征在于，所述粉針劑和凍干粉針劑中使用的賦形劑，可以是甘露醇、果糖、葡聚糖、右旋糖酐、聚乙烯吡洛烷酮等中的一種或幾種的組合物。全文摘要本發(fā)明公開了一種復(fù)方斑蝥注射制劑及其制備方法，它由斑蝥、人參、黃芪、刺五加、三棱、半枝蓮、莪術(shù)、山茱萸、女貞子、熊膽粉、甘草及適當(dāng)輔料制備而成。本發(fā)明將斑蝥用乙醇滲漉或超聲提取、水沉、離心的方法提取，提取效果好，操作方便，穩(wěn)定性好；采用乙醇為溶劑提取除熊膽粉、斑蝥外的其余九味藥材，同時對該九味藥材中提取的總皂苷有效部位采用有機溶劑萃取的方式進行純化，使得復(fù)方斑蝥藥物的有效成分集中且純度較高；對醇提后的沉淀采用大孔樹脂吸附的方法進行提純，制備人參等九味提取物的多糖有效成分，獲得的多糖組分藥理作用好、不良反應(yīng)小。本發(fā)明方法制備的復(fù)方斑蝥注射制劑有效成份含量較高，可達(dá)到提高生物利用度的效果。文檔編號A61K9/14GK101357212SQ20071007786公開日2009年2月4日申請日期2007年7月31日優(yōu)先權(quán)日2007年7月31日發(fā)明者葉湘武申請人:貴州益佰制藥股份有限公司