專利名稱：玉郎傘多糖的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物的用途，尤其是一種玉郎傘多糖的新用途。

背景技術(shù)：
玉郎傘(YLS，也叫龍眼參)，原植物經(jīng)考證為蝶形花科植物疏葉崖豆Millertia pulchraKurz var-laxior(Dunn)Z.Wei的塊根。本發(fā)明人對(duì)玉郎傘進(jìn)行了大量的藥學(xué)、藥效學(xué)研究，并申請(qǐng)了專利(專利名稱玉郎傘提取物的制各及應(yīng)用，申請(qǐng)專利號(hào)200710034771.2)。本發(fā)明是玉郎傘多糖前期工作內(nèi)容的深入研究，即在玉郎傘多糖應(yīng)用于老年性癡呆、肝炎和肝纖維化、腫瘤治療的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步開(kāi)發(fā)了玉郎傘多糖的幾個(gè)方面的新用途。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是通過(guò)對(duì)中藥玉郎傘的深度研究，在前期研究的基礎(chǔ)上，研究開(kāi)發(fā)出中藥玉郎傘多糖新的用途，為治療酒精性急慢性肝損傷、腫瘤化療藥物骨髓抑制、腦缺血再灌注性損傷、疲勞、缺氧、高溫、免疫功能低下、炎癥等提供新的、無(wú)毒作用的制劑。
本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，玉郎傘多糖是玉郎傘主要化學(xué)成分之一，且含量最高，其提取分離工藝較簡(jiǎn)單，易于規(guī)?；a(chǎn)；毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有毒性反應(yīng)；對(duì)酒精性急慢性肝損傷、腫瘤化療藥物骨髓抑制、腦缺血再灌注性損傷等有顯著的保護(hù)作用。
本發(fā)明提出了玉郎傘多糖還具有如下幾種新用途 1、玉朗傘多糖用于酒精性急性、慢性肝損傷的保護(hù)作用； 2、玉朗傘多糖用于腫瘤化療藥物骨髓抑制的保護(hù)作用； 3、玉朗傘多糖用于腦缺血再灌注性損傷的保護(hù)作用； 4、玉朗傘多糖的耐力、耐缺氧、耐高溫作用； 5、玉朗傘多糖提高免疫功能的作用； 6、玉朗傘多糖的抗炎作用。

具體實(shí)施例方式 以下結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)描述本

發(fā)明內(nèi)容
玉郎傘多糖的制備取玉郎傘干燥根10kg，切成小塊，加100L濃度70％乙醇回流提取1次，時(shí)間3h，回收乙醇，藥渣加100L蒸餾水煮3次，每次3h，合并水提液，過(guò)濾，濾液真空濃縮至比重為1.1(50℃)，加3倍量95％乙醇醇沉24h，回收乙醇，濃縮濾液，70℃烘箱真空干燥，得白色粉狀多糖。
應(yīng)用適宜于酒精性急慢性肝損傷、腫瘤化療藥物骨髓抑制、腦缺血再灌注性損傷、疲勞、缺氧、高溫、免疫功能低下、炎癥等。
1、對(duì)酒精性急性、慢性肝損傷的保護(hù)作用 將50只小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、玉郎傘多糖低、中、高3個(gè)劑量組，劑量分別為100、200和300mg/kg。通過(guò)預(yù)先給予3個(gè)劑量組小鼠玉郎傘多糖，30d后各劑量組及模型組小鼠經(jīng)口1次給予小鼠4800mg/kg60％酒精灌胃，建立急性肝損傷模型。通過(guò)檢測(cè)血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性和甘油三酯(TG)的含量；檢測(cè)肝組織中還原性谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)和苯胺羥化酶；檢測(cè)肝臟細(xì)胞色素P450及細(xì)胞色素b5含量；HE染色觀察各組小鼠肝臟病理變化，研究玉郎傘多糖對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)、肝細(xì)胞脂肪變性等影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，16h后玉郎傘多糖各劑量組小鼠血清AST及ALT活性、TG含量與模型組相比，均顯著降低(P＜0.01或P＜0.05)；肝組織GSH含量和GSH-PX活性與模型組相比，高、中劑量組具有極顯著差異(P＜0.01)，各劑量組具有正劑效關(guān)系；肝臟細(xì)胞色素P450及細(xì)胞色素b5含量、苯胺羥化酶活性均有所提高。肝組織HE染色顯示，高、中劑量組肝細(xì)胞內(nèi)脂滴比酒精模型組明顯減少，差異具有顯著性(P＜0.01)。結(jié)果表明，玉郎傘多糖對(duì)酒精中毒引起的肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化損傷具有顯著的保肝作用。結(jié)果見(jiàn)表1～4。
表1小鼠血清TG含量、AST及ALT活性的變化
與正常對(duì)照組比較ΔP＜0.05；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 表2小鼠肝臟GSH含量、GSH-PX活性的變化
與正常對(duì)照組比較ΔP＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 表3小鼠肝微粒體CytP450、Cytb5和苯胺羥化酶的變化
與正常對(duì)照組比較ΔP＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 表4玉郎傘多糖對(duì)酒精性肝損傷小鼠肝組織病理變化的影響 0分肝細(xì)胞內(nèi)未見(jiàn)脂滴；1分個(gè)別肝細(xì)胞內(nèi)見(jiàn)脂滴；2分脂滴呈灶片狀但較??；3分有脂滴的肝細(xì)胞廣泛存在； 與正常對(duì)照組比1P＜0.01；與酒精模型組相比2P＜0.01 2、對(duì)腫瘤化療藥物骨髓抑制的保護(hù)作用 環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠骨髓抑制，口服給予小鼠不同劑量的玉郎傘多糖。用流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4/CD8T淋巴細(xì)胞亞群及其比值，半自動(dòng)血常規(guī)生化分析儀計(jì)數(shù)外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板數(shù)量及骨髓有核細(xì)胞數(shù)量；同時(shí)觀察YLS多糖對(duì)小鼠Cy毒性保護(hù)作用。結(jié)果顯示，給予3種不同劑量YLS多糖后，小鼠Cy毒性明顯下降；其中以300mg·kg-1YLS多糖保護(hù)作用最為明顯(P＜0.01)。與模型組相比，YLS多糖組小鼠骨髓有核細(xì)胞和外周血白細(xì)胞，紅細(xì)胞，血小板數(shù)量均顯著升高(P＜0.01或P＜0.05)，CD4/CDST淋巴細(xì)胞比值接近正常對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)表明，YLS多糖對(duì)Cy所致小鼠骨髓抑制有明顯保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5～7。
表5YLS多糖對(duì)CY小鼠毒性的保護(hù)性試驗(yàn)結(jié)果(n＝10) 與正常對(duì)照組比較ΔP＜0.05；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 表6YLS多糖對(duì)Cy致小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響
與正常對(duì)照組比較ΔP＜0.05；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 表7YLS多糖對(duì)Cy致小鼠白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板及骨髓有核細(xì)胞的影響
與正常對(duì)照組比較ΔP＜0.05；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 3、對(duì)腦缺血再灌注性損傷的保護(hù)作用 80只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為腦缺血再灌注組，YLS多糖高、中、低劑量組，陽(yáng)性對(duì)照組，假手術(shù)組。給藥組術(shù)前連續(xù)灌胃7d，于末次給藥60min后行手術(shù)，采用大腦中動(dòng)脈局灶性缺血再灌注模型，觀察缺血2h再灌注24h后，YLS多糖對(duì)各組大鼠腦梗死體積、腦含水量及腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與腦缺血再灌注模型組相比，YLS多糖能夠降低大鼠腦梗死體積和腦含水量，抑制腦組織中MDA的生成、降低NO含量、抑制NOS活性、提高SOD的活性(P＜0.01或P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)表明，玉郎傘多糖對(duì)大鼠急性腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8～9。
表8YLS多糖對(duì)大鼠腦梗死體積及腦組織含水量的影響
與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 表9YLS多糖對(duì)大鼠腦組織SOD、NOS活力及MDA、NO含量的影響
與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01 4、耐力、耐缺氧、耐高溫作用 將170只小白鼠隨機(jī)分為6組，分別為正常對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(1.5mg/kg尼莫地平)、實(shí)驗(yàn)組4個(gè)劑量組。實(shí)驗(yàn)組給予4個(gè)不同劑量的玉郎傘多糖(10g/kg、20g/kg、40g/kg、60g/kg)，正常對(duì)照組給予等劑量的蒸餾水，各組小鼠采用灌胃給藥7d，觀察、測(cè)定常壓下小鼠耐缺氧、游泳和耐高溫程度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組比較，40g/kg、60g/kg劑量組小鼠常壓下耐缺氧作用增強(qiáng)，且呈劑量依賴(P＜0.05)，40g/kg、60g/kg劑量組均可延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳持續(xù)時(shí)間(P＜0.05或P＜0.01)，各劑量組均可顯著提高耐高溫能力(P＜0.05或P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)表明玉郎傘水提物對(duì)小鼠耐缺氧、抗疲勞及耐高溫能力具有明顯的增強(qiáng)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表10~12。
表10玉郎傘水提物對(duì)小鼠耐缺氧能力的影響
與對(duì)照組相比P*＜0.05 表11玉郎傘水提物對(duì)小鼠負(fù)重游泳的影響
與對(duì)照組相比P*＜0.05；P**＜0.01 表12玉郎傘水提物對(duì)小鼠耐高溫能力的影響
與對(duì)照組相比P*＜0.05；P**＜0.01 5、提高免疫功能的作用 建立肉瘤S-180荷瘤鼠模型，觀察玉郎傘多糖與CTX伍用對(duì)化療后荷瘤鼠的瘤重、免疫器官指數(shù)的影響及對(duì)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、外周血谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力的影響。結(jié)果玉郎傘多糖組與CTX組比較，可明顯提高SOD活力，降低MDA含量，提高免疫器官指數(shù)；與模型組比較，CTX有使ALT、AST上升的趨勢(shì)但無(wú)顯著性差異；玉郎傘多糖與CTX伍用有使谷丙、谷草轉(zhuǎn)氨酶下降的趨勢(shì)但無(wú)顯著性差異。實(shí)驗(yàn)表明玉郎傘多糖與CTX伍用，可上調(diào)CTX降低的免疫功能，減輕CTX的毒性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表13~14。
表13玉郎傘多糖對(duì)S-180荷瘤小鼠化療后免疫器官指數(shù)的影響 注與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與CTX組比較▲▲P＜0.01。
表14玉郎傘多糖對(duì)S-180荷瘤小鼠肝組織氧化及抗氧化指標(biāo)、血清生化指標(biāo)的影響 注與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與CTX組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。
6、抗炎作用 以巴豆油致炎小鼠耳廓腫脹、角叉菜膠誘發(fā)小鼠足跖腫脹及小鼠棉球肉芽腫模型分別觀察玉郎傘多糖對(duì)小鼠耳廓腫脹、足跖腫脹及棉球肉芽腫形成的抑制作用。結(jié)果玉郎傘多糖能顯著抑制小鼠耳廓炎癥、足跖腫脹及棉球肉芽腫的形成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表15～17。
表15玉郎傘水提物及各成份對(duì)小鼠足跖腫脹的抑制作用
與空白組對(duì)照*P＜0.05，**P＜0.01 表16玉郎傘水提物及各成份對(duì)小鼠耳片腫脹的抑制作用
與空白組對(duì)照*P＜0.05，**P＜0.01 表17玉郎傘各成份對(duì)小鼠棉球肉芽腫形成的抑制作用
與空白組對(duì)照*P＜0.05，**P＜0.0權(quán)利要求
1.玉朗傘多糖的幾種新用途
1、玉朗傘多糖用于酒精性急性、慢性肝損傷的保護(hù)作用；
2.玉朗傘多糖用于腫瘤化療藥物骨髓抑制的保護(hù)作用；
3.玉朗傘多糖用于腦缺血再灌注性損傷的保護(hù)作用；
4.玉朗傘多糖的耐力、耐缺氧、耐高溫作用；
5.玉朗傘多糖提高免疫功能的作用；
6.玉朗傘多糖的抗炎作用。
全文摘要
玉郎傘，YLS，也叫龍眼參，為蝶形花科植物疏葉崖豆塊根。本發(fā)明人對(duì)玉郎傘進(jìn)行了大量的藥學(xué)、藥效學(xué)研究，在對(duì)玉郎傘多糖前期研究工作的基礎(chǔ)上，深入開(kāi)發(fā)了涉及玉郎傘多糖用于酒精性急性、慢性肝損傷、腫瘤化療藥物骨髓抑制和肝損傷、腦缺血再灌注性損傷的保護(hù)作用，以及用于疲勞、缺氧、高溫、免疫功能低下、炎癥的治療作用。增加了玉郎傘多糖新的用途。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101181315SQ200710050720
公開(kāi)日2008年5月21日 申請(qǐng)日期2007年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月30日
發(fā)明者黃仁彬, 興 林, 蔣偉哲, 蔡文娥, 付書(shū)婕, 黃建春, 張緒東, 韋京辰, 潔 簡(jiǎn), 健 陳, 黃媛恒, 楊立芳, 麗 陳 申請(qǐng)人:黃仁彬