專利名稱：：一種治療咽喉疾病的中藥含片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療咽喉疾病的中藥含片。
背景技術(shù)：
：咽喉疾病是一種非常多見的上呼吸感染癥，在臨床治療咽喉疾病的用藥當(dāng)中，目前廣泛使用抗生素類藥物，這類藥物雖然見效快，但是抗生素治療只能抑制或者殺滅咽部細(xì)菌，不能使原病變消除，且副作用也較大；目前也有使用中成藥治療咽喉疾病的，如中國專利CN1182595A所公開的"一種治療慢性咽炎、急性咽喉炎的中成藥"是采用桔梗、薄荷冰、冰片、赤芍、白砂糖、葡萄糖粉配制而成，先將前四味藥按一定比例混合粉碎研細(xì)，再將藥粉和葡萄糖粉按比例與溶化的白砂糖混合拌勻，制成中成藥制劑；專利號CN1187365A，所公開的清咽口服液及其制備方法，是選用南沙參、石斛、陳皮、玄參、生地、金銀花、枳殼、黃芩、麥冬、薄荷、桔梗、甘草共十二味中草藥經(jīng)二次高壓水煎、過濾、減壓壓縮、醇提、煮沸等工序精制而成；專利號CN100998697A所公開的一種治療咽喉疾病的中藥口含片及其制備方法，是由牛黃，板藍(lán)根，訶子，桔梗,豬牙皂，連翹，天花粉，珍珠層粉，廣東土牛膝，冰片，山豆根，了哥王，填充劑，環(huán)糊精，矯味劑，潤滑劑等多種成分制成中藥含片。現(xiàn)有技術(shù)中用于治療咽喉疾病的中成藥物存在成分種類繁多且某些成分價(jià)格相對昂貴和不易得，配制工藝相對復(fù)雜，且治療效果不理想等缺點(diǎn)，故此，治療咽喉疾病的藥物有待于進(jìn)一步改善。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為了克服上述技術(shù)中的不足之處，提供一種配方簡單，成分原材料價(jià)廉易得，制造工藝簡單，具有良好的清熱解毒、利咽消腫止痛作用，對咽喉疾病的治療效果顯著且沒有副作用的治療咽喉疾病的中藥含片。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下的方案-本發(fā)明的解決方案是基于祖國醫(yī)學(xué)對咽喉疾病發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識及治療原則，參考現(xiàn)代藥理研究成就，從祖國的醫(yī)藥寶庫中，篩選出清熱解毒、利咽止痛、清火鎮(zhèn)痛、化膿消腫的植物藥材，按中醫(yī)理論組方，提取精華，使其發(fā)揮清熱解毒、利咽消腫止痛等作用。本發(fā)明一種治療咽喉疾病的中藥含片，其特征在于它是由下述重量組分的原料藥制成的-廣東土牛膝4050、山芝麻1220、崗梅2030、野菊花1220、水楊梅2030、淡竹葉1220、一點(diǎn)紅1220、淀粉2030、糊精2030、蔗糖4060。如上所述的一種治療咽喉疾病的中藥含片，其特征是各原料藥的重量比是廣東土牛膝4045、山芝麻1618、崗梅2530、野菊花1618、水楊梅2530、淡竹葉1618、一點(diǎn)紅1618、淀粉2025、糊精2025、蔗糖4050。為證明本發(fā)明對咽喉疾病的療效，本發(fā)明進(jìn)行了如下的動物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)一、本發(fā)明中藥含片對解熱鎮(zhèn)痛作用的動物實(shí)驗(yàn)1、藥物和試劑(1)、本發(fā)明中藥含片(0.92g/ml)，取廣東土牛膝、崗梅根、山芝麻、野菊花、水楊梅、淡竹葉、一點(diǎn)紅等煎煮兩次，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，合并兩次濾液，濃縮至密度為0.92g/ml，即可，由中山中醫(yī)院制劑室提供，批號060213。(2)、阿司匹林，由湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號050807，規(guī)格50mg/片。(3)、冰醋酸，由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號91C301-3，分析純；(4)、干酵母30克，安琪酵母股份有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品編號101109。(5)、液體石蠟。2、主要儀器恒溫水浴箱、秒表、注射器、熱板(不銹鋼金屬盒)和體溫表。3、實(shí)驗(yàn)用動物昆明種小鼠，體重18—22g/只；SD大鼠，體重180—220g/只，雄性。(均購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，合格證號省科委2002A024,省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動管會26-2003A003)。(-)、本發(fā)明中藥含片對干酵母所致大鼠發(fā)熱的解熱作用的動物實(shí)1、實(shí)驗(yàn)方法(1)、配制酵母懸液秤取干酵母10g，置于乳缽中，逐漸加入蒸餾水研磨為均勻的懸漿，最后定容為50ml(20%)，此液須臨用時(shí)配制。(2)、大鼠的準(zhǔn)備在大鼠于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下適應(yīng)時(shí)，每日用水銀體溫表從肛內(nèi)測體溫l次，以使其適應(yīng)體溫測量的操作，并可了解大鼠體溫恒定與否。每次測量肛溫時(shí)均要在體溫表的水銀端沾少量液體石蠟，以減少對大鼠肛門的摩擦。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日每小時(shí)測體溫一次，連續(xù)2次，記錄數(shù)據(jù)，取其平均值以作為其正常的體溫。(3)、分組取體重在180g-220g之間的大鼠，且體重相差不宜超過30g,選取體溫變化不超過0.3"C的大鼠用來實(shí)驗(yàn)(體溫應(yīng)在36.5。C-38.(TC之間)，共選取60只，取其中IO只做預(yù)試，其余50只隨機(jī)分為五組，①空白對照組；②本發(fā)明中藥含片低劑量(8.28/kg)對照組；③本發(fā)明中藥含片中劑量(16.56g/kg)對照組；④本發(fā)明中藥含片高劑量(33.12g/kg)對照組；⑤阿司匹林陽性對照組(0.2g/kg)。每組10只，并標(biāo)記。于正式實(shí)驗(yàn)前8—10小時(shí)要開始禁食，不禁水。(4)、預(yù)試合適酵母劑量將10只用來做預(yù)試的大鼠進(jìn)行如下預(yù)試3只用作酵母劑量為0.5ml/100g的預(yù)試，4只用作酵母劑量為0.6ml/100g的預(yù)試，3只用作酵母劑量為0.7ml/100g的預(yù)試，摸索出最佳酵母注射劑量是0.6ml/100g，因其升溫、降溫明顯，歷時(shí)較短，注射后4小時(shí)即制成發(fā)熱動物模型，注射后10小時(shí)左右開始降溫°(5)、觀察解熱效果給每只大鼠從背部皮下注射20%酵母混懸液iomi/kg，每隔一小時(shí)測一次肛溫，待體溫升高rc左右時(shí)(剔除體溫升溫變化小于0.8°C)，開始給藥，本發(fā)明中藥含片高、中、低三個劑量組、空白對照(蒸溜水)組、阿司匹林組，灌胃給予等容量0.13ml/100g。于給藥后lh、2h、3h、4h各測一次肛溫。(6)、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果用；士SD表示，數(shù)據(jù)采用SPSSV10.0軟件包進(jìn)行分析，用t檢驗(yàn)，比較各組間的差異顯著性。結(jié)果見表一。表一各組大鼠對干酵母所致發(fā)熱的解熱作用比較(；士SD，n=10)組別劑量正常致熱后_給藥后('c)_(g/kg)('C)('C)lh2h3h4h①對照組1.3037.49±0.2138.81±0.3438.81±0.2738.75±0.2138.62±0.2138.11±0.28②低劑量8.2837.40±0.2438.72±0.2738.50±0.25*38.18±0.18**37.92±0,16**37.73±0.18**③中劑量16.5637.33±0.2638.73±0.3238.32±0.21**37.97±0.25**—37.83±0.16**37.58±0.20**④高劑量33.1237,39±0,3138.67±0.2938.23±0.25**'37,94±0.17**"37.81±0.26**37.64±0.10**⑤阿司匹林0.237.38±0.3738.60±0,4038,26±0.26**37.95±0.20**37.70±0.32**37.67±0.27**與空白對照組比，*P<0.05,**P<0.01;各劑量組比，-P<0.05,一P<0.01實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與空白組比本發(fā)明中藥含片各劑量組均有較好的解熱作用(P〈0.05)，并且在給藥后一至兩小時(shí)時(shí)有較好的量效關(guān)系，低劑量組與高劑量組比有顯著性差異(P<0.05)，但低劑量在給藥后一至兩小時(shí)時(shí)沒有阿司匹林解熱作用好；高、中劑量組的解熱效果始終與阿司匹林相近。(二)、本發(fā)明中藥含片對醋酸致小鼠疼痛的抑制作用的動物實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)方法(1)、配制0.7%的醋酸生理鹽水溶液用移液管準(zhǔn)確吸取100%的冰醋酸0.35ml，加入PH值為7.0—7.2的生理鹽水制成50ml溶液。(2)、分組取1822g健康小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為五組，①空白對(蒸溜水)照組；②本發(fā)明中藥含片低劑量(11.96g/kg)對照組；③本發(fā)明中藥含片中劑量(23.92g/kg)對照組；④本發(fā)明中藥含片高劑量(47.84g/kg)對照組；⑤阿司匹林陽性對照組(0.2g/kg)。(3)、灌藥給試驗(yàn)動物連續(xù)灌胃給藥4天，每天一次，每次按0.9ml/100g容量灌胃給藥。末次給藥30min后，給各鼠腹腔均注射新配制的0.7%冰醋酸液(新配)0.1ml/10g。(4)、觀察反應(yīng)觀察注射醋酸液后20min內(nèi)的扭體反應(yīng)(伸展后肢、腹部收縮內(nèi)凹、臀部抬高)次數(shù)。(5)、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理比較各組的扭體次數(shù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛率。數(shù)據(jù)采用SPSSV10.0軟件包進(jìn)行分析，用t檢驗(yàn)，比較給藥組與空白對照組之間的差異顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表二。鎮(zhèn)痛百分率(％)二(對照組扭體平均次數(shù)-實(shí)驗(yàn)組扭體平均次數(shù))/對照組扭體平均次數(shù)X100%表二各組小鼠扭體次數(shù)及鎮(zhèn)痛率比較<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>與空白組比，**P<0.01;給藥組間比，'P<0.05;與阿司匹林組比，#P<0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明中藥含片可明顯減少由于醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，各劑量組對醋酸所致小鼠疼痛有顯著的鎮(zhèn)痛作用，與空白組相比有顯著性差異(P<0.01)，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系；高劑量組明顯優(yōu)于低劑量組(P<0.01)，并且優(yōu)于阿司匹林組(P<0.05)，而低劑量和中劑量組與阿司匹林組鎮(zhèn)痛作用相近。從鎮(zhèn)痛百分率也可得出同樣的結(jié)論。〇、本發(fā)明中藥含片對熱板致小鼠疼痛的影響作用的動物實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)方法將水浴箱加滿水，使熱板接觸水面，在室溫為15—2(TC的情況下調(diào)節(jié)恒溫水浴箱的水溫在55±0.5°C，預(yù)熱金屬盤10分鐘。每次取健康雌性小鼠一只放入金屬盤內(nèi)。記錄自放入金屬盤內(nèi)至出現(xiàn)舔后腳所需時(shí)間(秒)，作為該鼠的痛閾值。棄舔后足時(shí)間小于5秒或30秒內(nèi)仍不舔足者不用，選出痛閾值在530秒的小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只，重新測定其正常痛閾一次，取2次測定的平均值作為該小鼠的基礎(chǔ)痛閾值(給藥前的痛閾值)。對以下五個實(shí)驗(yàn)組本發(fā)明中藥含片①低劑量組(11.96g/kg)、②中劑量組(23.92g/kg)、③高劑量組(47.84g/kg)、④空白對照(蒸餾水)組、⑤阿司匹林組(0.2g/kg)，每次按0.9ml/100g容量灌胃給藥，每天一次，連續(xù)給藥3天。測定末次給藥后60min、90min、120min時(shí)的痛閾值。以小鼠舔后足反應(yīng)作為痛閾指標(biāo)，并剔除發(fā)生其他反應(yīng)的小鼠。為防足部燙傷，設(shè)截止時(shí)間為60秒，若其在熱板上60秒仍無痛覺反應(yīng)，應(yīng)立即取出，按60秒計(jì)其痛閾值。2、效果比較比較各組各時(shí)段的痛閾值，計(jì)算用藥后痛閾提高的百分率。數(shù)據(jù)采用SPSSV10.0軟件包進(jìn)行分析，用t檢驗(yàn)比較給藥組與空白對照組之間痛閾差異的顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表三。痛閾提高的百分率(％)=(用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值)/用藥前平均痛閾值X1007。表三各組小鼠各時(shí)段痛閾值的比較(；±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>與空白組比，林P<0.01;給藥組間比，&P<0.05,&&P<0.01;與阿司匹林組比，ttP<0.05，糾P<0.01實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明由于中藥發(fā)揮作用較緩，故低劑量組在給藥一小時(shí)后鎮(zhèn)痛作用不明顯，但在給藥一個半小時(shí)至兩小時(shí)后有明顯的鎮(zhèn)痛作用(P<0.01)。而中劑量組和高劑量組均一直表現(xiàn)出很好的鎮(zhèn)痛作用(P<0.01)。在給藥一小時(shí)后低、中劑量組的鎮(zhèn)痛效果不及阿司匹林，高劑量組一直與阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用相近，但作用時(shí)間比阿司匹林較持久。但隨著時(shí)間的推移低、中劑量組的鎮(zhèn)痛作用越來越接近阿司匹林，且在一定的時(shí)間內(nèi)表現(xiàn)出良好的量效關(guān)系。從鎮(zhèn)痛百分率也可知該復(fù)方土牛膝口含片斷有很好的鎮(zhèn)痛作用，且鎮(zhèn)痛百分率的提高與劑量有明顯的相關(guān)性。二、本發(fā)明中藥含片對抗炎作用實(shí)驗(yàn)的動物實(shí)驗(yàn)101、藥物和試劑(1)、本發(fā)明中藥含片(0.92g/ml)，(取廣東土牛膝、崗梅根、山芝麻等煎煮兩次，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，合并兩次濾液，濃縮至密度為0.92g/ml，即可。)中山中醫(yī)院制劑室提供，批號060213;(2)、阿司匹林，湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號050807，規(guī)格50mg/片；(3)、冰醋酸，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號91C301-3，分析純;(4)、伊文思蘭，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，分析純，批號1641016;(5)、10%雞蛋清生理鹽水溶液；(6)、酚紅；(7)、肥皂水；(8)、烏來糖，化學(xué)純，上?；瘜W(xué)試劑供應(yīng)公司；(9)、青霉素G鉀鹽及硫酸鏈霉素混合液(每毫升含青霉素800U，鏈霉素650U);(10)、20mg滅菌棉球。2、實(shí)驗(yàn)用動物昆明種小鼠，體重18—22g/只；SD大鼠，體重180—220g/只，雄性。(均購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，合格證號省科委2002A024,省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動管會26-2003A003)。3、實(shí)驗(yàn)儀器(1)、UV—754紫外可見分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)；(2)、微量吸管；(3)、離心機(jī)；(4)、T500型電子天平(常熟市雙杰測試儀器廠)；(5)、解剖剪刀；(6)、眼科鑷；(7)、平鑷；(8)、足跖容積測量裝置；(9)、4號針頭；柳小燒杯、(ll)電子秤、似消毒外科手術(shù)器械一套。(-)、本發(fā)明中藥含片對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高的影響的動物實(shí)驗(yàn)1、分組取體重1822g的健康小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為五組，分別為①空白對照組(蒸餾水組)；②本發(fā)明中藥含片低劑量(11.96g/kg)對照組；③本發(fā)明中藥含片中劑量(23.92g/kg)對照組；本發(fā)明中藥含片高劑量(47.84g/kg)對照組；⑤阿司匹林(0.2g/kg)對照組。2、實(shí)驗(yàn)方法連續(xù)灌胃給藥4天，每天一次，每次給予等容量0.9ml/100g。于末次給藥后30min，尾靜注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.lml/10g，隨即腹腔注射0.8%冰醋酸生理鹽水液0.lml/10g，20分鐘后脫頸椎處死，剪開腹部皮膚肌肉，用6ml生理鹽水分?jǐn)?shù)次洗滌腹腔，用吸管吸出洗滌液，合并后加入生理鹽水至10ml，3000rpm離心15分鐘；取上清液于590nm比色測定吸收度。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果用S士SD表示，數(shù)據(jù)采用SPSSV10.0軟件包進(jìn)行分析，用t檢驗(yàn)，比較阿司匹林組、給藥組與空白對照組之間吸收度的差異顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表四。表四對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高的影響(:c土SD)組別動物數(shù)(n)劑量(g/kg)0D值①蒸餾水89ml0.32±0.08②低劑量1011.960.24±0.04*③中劑量1023.920.20±0.05**'高劑量1047.840.15±0.06氺承⑤阿司匹林100.20.24±0.05*與空白組比，*P<0.05，**P<0.01;各給藥組間比，-P<0.05;與阿司匹林組比，#P<0.05由實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明中藥含片可明顯抑制醋酸所致的小鼠腹內(nèi)炎性物質(zhì)的滲出，各劑量組均有顯著的抑制小鼠腹腔內(nèi)炎性物質(zhì)滲出的作用，與空白組相比有顯著性差異(P<0.05=,并呈現(xiàn)較好的量效關(guān)系，低中、低高、中高劑量組比較時(shí)均有顯著性差異(P<0.05=。且高劑量組明顯優(yōu)于阿司匹林組(P<0.05)，而低劑量和中劑量組與阿司匹林組鎮(zhèn)痛作用相近。(二)、本發(fā)明中藥含片對蛋清致大鼠足跖腫脹的影響的動物實(shí)驗(yàn)1、分組選用健康大鼠50只，雄性，隨機(jī)分為五組，分別為①空白對照組(蒸餾水組)；②本發(fā)明中藥含片低劑量(8.28g/kg)對照組；③本發(fā)明中藥含片中劑量(16.56g/kg)對照組；④本發(fā)明中藥含片高劑量(33.12g/kg)對照組；⑤阿司匹林(0.2g/kg)對照組。2、實(shí)驗(yàn)方法在每鼠左后足跖正面上端作一清晰橫線，利用容積測量裝置采用排水法測定鼠爪體積(Vn)，分別測二次，取其平均值，即為該鼠給藥前的足跖體積。然后分別給實(shí)驗(yàn)組按高、中、低三個劑量連續(xù)灌胃給藥4天，容量均為0.13ml/100g。于末次給藥l小時(shí)后，用0.25ml注射器吸取剛用生理鹽水配制好的10%蛋清(0.lml/跖)，用4號針頭注入大鼠左后腳跖皮下，然后于注入后lh、2h、3h、4h各測大鼠足跖體積l次(Vt)，計(jì)算鼠跖的腫脹度和抑制率。腫脹度=致炎后足跖體積一致炎前足跖體積抑制率(％)=(對照組平均腫脹度-同時(shí)相給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度X1007。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果用；土SD表示，數(shù)據(jù)采用SPSSV10.0軟件包進(jìn)行分析，用t檢驗(yàn)，比較同一時(shí)相內(nèi)阿司匹林組、給藥組與正常對照組之間的腫脹度和抑制率的差異顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表五表五對蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響(x士SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>與空白組比，*P<0.05，**P<0.01;各給藥組間比，-P<0.05，—P<0.01;與阿司匹林組比，#P<0.05;()為抑制率由實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明中藥含片可明顯抑制雞蛋清所致的大鼠足跖腫脹，與空白組相比有顯著差異性(P<0.01);并呈現(xiàn)較好的量效關(guān)系，在給藥1小時(shí)至2小時(shí)時(shí)低中、低高劑量組相比均有顯著性差異(P<0.05)。但在給藥1小時(shí)后低劑量組沒有阿司匹林組(P<0.05)效果好，這可能與中藥的顯效特點(diǎn)有關(guān)，而在隨后的時(shí)間內(nèi)各給藥組與阿司匹林組的抑制作用相近。但從腫脹抑制率來看，高劑量組明顯高于阿司匹林組。曰、本發(fā)明中藥含片對棉球所致大鼠肉芽腫增生的影響的動物實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)方法選用體重180g220g左右大鼠50只，雄性。腹腔注射25%烏來糖(0.45ml/100g)進(jìn)行麻醉后，在每只大鼠的左右腹股溝處先用碘酒消毒，后用75%酒精棉球脫碘后，各切開皮膚約lcm長的縱切口，用眼科鑷子將兩個滅菌棉球(每個棉球20mg，高壓滅菌，各加入氨芐青霉素每個lmg/0.1ml，5(TC烘箱烤干)分別植入大鼠兩側(cè)腹股溝皮下，隨即縫合皮膚，術(shù)后隨機(jī)分為五組。從手術(shù)當(dāng)天開始對以下五組①空白對照組(蒸餾水組)；②本發(fā)明中藥含片低劑量(8.28g/kg)對照組；③本發(fā)明中藥含片中劑量(16.56g/kg)對照組；④本發(fā)明中藥含片高劑量(33.12g/kg)對照組；⑤阿司匹林對照組給予阿司匹林(0.2g/kg)，灌胃給藥，每天一次，連續(xù)9天，藥容量為0.13ml/100g，第10天將大鼠頸椎脫臼處死，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，剔除脂肪組織，在70。C烘箱中放置12h后稱重，減去原棉球重量即為肉芽腫凈重。統(tǒng)計(jì)時(shí)剔除切口處發(fā)炎者。以肉芽腫及其系數(shù)，用t檢驗(yàn)，比較阿司匹林組、給藥組與正常對照組對肉芽腫抑制的差異顯著性。棉球肉芽抑制率(％)二(正常對照組棉球肉芽平均凈重一給藥組棉球肉芽平均凈重)/正常對照組棉球肉芽平均凈重X1007。肉芽腫系數(shù)=棉球肉芽腫凈重(mg)/體重(100g)2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果用；士SD表示，數(shù)據(jù)采用SPSSV10.0軟件包進(jìn)行分析，用t檢驗(yàn)，比較同一時(shí)相內(nèi)阿司匹林組、給藥組與正常對照組之間的腫脹度和抑制率的差異顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表六-表六對棉球所致大鼠肉芽增生的影響(S±SD,)組別劑量(g/kg)動物數(shù)(n)棉球肉芽凈重(mg)肉芽腫系數(shù)(mg)/(100g)肉芽抑制率(％)①蒸餾水1.3935.3±7.015.1±4.6—②低劑量8.31028.4±4.1*13.6±2.519.5③中劑量16.6927.9±7.5*11.4±1.4*21.0③高劑量33.11024.7±2.9**'11.4±1.4*-30.0⑤阿司匹林0.21023,4±6.8**10.0±3.3**33.7與空白組比，*P<0.05，**P<0.01;各給藥組間比，-P<0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以棉球肉芽凈重為指標(biāo)時(shí)，與空白組比各給藥組均可抑制棉球肉芽腫的生長(P<0.05=;與阿司匹林組比較二者無顯著性差異(P>0.05);本發(fā)明中藥含片各劑量組之間比較時(shí)可知低劑量組明顯弱于高劑量組(P<0.05=。但以棉球肉芽腫系數(shù)為評價(jià)指標(biāo)時(shí)，與正常組比低劑量組抑制棉球肉芽腫不明顯，中、高劑量組對抑制小鼠肉芽腫有較顯著的抑制作用(P<0.05=，這說明棉球肉芽腫系數(shù)排除了因大鼠體重相差較大引起的差異，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具有可比性；中、高劑量組與阿司匹林組無顯著性差異(P>0.05)。無論按棉球肉芽腫凈重還是按棉球肉芽腫系數(shù)統(tǒng)計(jì)，二者統(tǒng)計(jì)結(jié)果基本一致，本發(fā)明中藥含片有抑制棉球所致的大鼠肉芽腫的作用，但從抑制率看，本發(fā)明中藥含片對棉球肉芽腫的抑制作用稍弱或接近于阿司匹林。三、本發(fā)明中藥含片對抗病毒作用的動物實(shí)驗(yàn)1、藥物和試劑①、本發(fā)明中藥含片(0.92g/ml，取廣東土牛膝、崗梅根、山芝麻等煎煮兩次，第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，合并兩次濾液，濃縮至密度為0.92g/ml，即可。)中山中醫(yī)院制劑室提供，批號060213;實(shí)驗(yàn)時(shí)口含片稀釋為l:1281:1024四個稀釋度用于實(shí)驗(yàn)。②、病毒唑，湖北濱湖制藥廠生產(chǎn)，批號970512，體外時(shí)用量為180ug/ml;體內(nèi)時(shí)小鼠按臨床等效劑量(0.07g/kg/d)灌胃給藥。2、病毒①柯薩奇B族病4型(CoxB4);②副流感病毒(HVJ);③呼吸道合胞病毒(RSV);④單純皰疹病毒(HSV-I);以上各病毒分別購自中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所及兒科研究所。⑤流感病毒亞甲型鼠肺適應(yīng)株(FM1)，購自中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所。3、細(xì)胞人喉癌傳代細(xì)胞H印-2株，購自中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所。4、細(xì)胞培養(yǎng)液(1)含10%小牛血清、(2)0.29mg谷氨酰胺/ml、(3)100u/ml青、鏈霉素的Eagle'sMEM(日本日水制藥株式會社出品)；5、細(xì)胞維持液除所含小牛血清為2%外，其他含量均同培養(yǎng)液。6、主要儀器①C02培養(yǎng)箱(日本Yamato松株式會社產(chǎn)品)。②倒置顯維鏡，日本01y即us產(chǎn)品。7、動物ICR小鼠，雌雄兼用。體重用14土lg，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供，許可證編號SCXK(京)2002-0003。(-)、本發(fā)明中藥含片的體外抗病毒的動物實(shí)驗(yàn)1、藥物對Hep-2培養(yǎng)細(xì)胞的毒性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)前將本發(fā)明中藥含片用Eagle's培養(yǎng)液作1:21:512倍比稀釋后，加到已長成單層的H印-2細(xì)胞培養(yǎng)板中，100u1/孔，每個稀釋度藥液做4個復(fù)孔，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對照。將培養(yǎng)板置37°C5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)四天，置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，確定細(xì)胞不出現(xiàn)明顯退變的最低稀釋倍數(shù)(最大濃度)，實(shí)驗(yàn)時(shí)順延做到最小有效濃度(即最大稀釋倍數(shù))。按Reed-Muench法計(jì)算50%毒性濃度(TC5。)和最大無毒濃度(TC。)。結(jié)果見表七表七本發(fā)明中藥含片對培養(yǎng)細(xì)胞的TC。TC5。(ul/ml)<table>complextableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>2、對病毒致細(xì)胞病變作用的影響取已長成單層細(xì)胞的培養(yǎng)板，倒掉培養(yǎng)液，接種100TCID5。的不同病毒液50ul，置37°C5%C02培養(yǎng)箱中吸附l小時(shí)后，倒掉病毒液，用不含小牛血清的Eagle's維持液洗細(xì)胞面2次后，加入相應(yīng)稀釋度的藥液100ul/孔。同時(shí)設(shè)病毒對照、陽性對照藥及正常細(xì)胞對照。置37-C5^C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變，當(dāng)病毒對照組細(xì)胞病變?yōu)?+++時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。細(xì)胞病變按六級標(biāo)準(zhǔn)判斷，并按Reed-Muench計(jì)算50%有效濃度(IC5。)和治療指數(shù)(TI)。注一細(xì)胞生長正常，無病變出現(xiàn)；±:細(xì)胞病變少于整個單層的10%;1:細(xì)胞病變約占整個單層細(xì)胞的25Q/^以下；2:細(xì)胞病變約占整個單層細(xì)胞的50%以下；3:細(xì)胞病變約占整個單層細(xì)胞的75%以下；4:細(xì)胞病變約占整個單層細(xì)胞的75%以上。治療指數(shù)(TI)=TC5。/IC50(3、本發(fā)明中藥含片對流感病毒致小鼠死亡的保護(hù)作用的動物實(shí)驗(yàn)1、劑量設(shè)計(jì)人臨床用量為60ml/60kg/d，小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)分別采用20ml、lOrnl、5ml/kg/d三個劑量組(分別相當(dāng)與人臨床用量的2倍、等倍和l/2倍)。2、病毒引起小鼠死亡最小毒力的測定將病毒用生理鹽水稀釋成0.5-4LD5。的不同病毒液，取小鼠50只，每個稀釋度10只，0.05ml/只滴鼻感染。觀察動物的死亡情況，取感染后15天內(nèi)動物死亡率在90%以上的濃度，為實(shí)驗(yàn)時(shí)的感染量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示2LD50感染時(shí)，小鼠的死亡率為90%,故將其定為實(shí)驗(yàn)時(shí)的感染量。3、觀察對動物死亡保護(hù)情況(1)、分組取小鼠100只，按體重隨機(jī)分成5組。分別為①病毒感染對照組本；②病毒唑陽性對照組；③發(fā)明中藥含片高劑量組；④本發(fā)明中藥含片中劑量組⑤本發(fā)明中藥含片低劑量組。(2)、實(shí)驗(yàn)方法各給藥組灌胃給藥，每天1次，每次0.2ml/10g體重，連續(xù)7天，病毒對照組在同等條件下給予蒸餾水。給藥第二天各組小鼠用乙醚輕度麻醉后，以2個LDs。流感病毒液滴鼻感染，每只0.05ml。記錄感染后小鼠的死亡數(shù)，計(jì)算死亡率、死亡保護(hù)率及平均存活天數(shù)、生命延長率。死亡率％=死亡動物數(shù)/動物總數(shù)乂100%死亡保護(hù)率%=(對照組死亡率-實(shí)驗(yàn)組死亡率)/對照組死亡率X100%實(shí)驗(yàn)組平均存活天數(shù)一感染組平均存活天數(shù)生命延長率=-感染組平均存活天數(shù)(3)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果①、對病毒致細(xì)胞病變作用的影響本發(fā)明中藥含片在體外對CoxB4、、RSV、病毒的致細(xì)胞病變作用有明顯抑制作用，其ICs。分別為2.0、2.8ul口含片/ml，TI分別為5.6和4。對HSV-1、副流感-1型病毒的致細(xì)胞病變有一定的抑制作用。其ICs。分別為4.0、5.0ul口含片/ml,TI分別為2.8和2.24(見表八)。表八本發(fā)明中藥含片體外抗病毒實(shí)驗(yàn)藥液病毒種IC50ul/mlTI本發(fā)明中藥口含片CoxB^2.05.6HSV-14.02.8RSV2.84副流感-15.02.24②、本發(fā)明中藥含片對流感病毒致小鼠死亡的保護(hù)作用小鼠感染病毒15天內(nèi)，本發(fā)明中藥含片5ml/kg/d劑量組動物的死亡率為55%;死亡保護(hù)率分別為38.39%，與感染對照組相比有顯著差異(P<0.05)，表示本發(fā)明中藥含片在此劑量時(shí)對流感病毒感染致小鼠死亡有顯著的保護(hù)作用(見表九)。表九本發(fā)明中藥含片對流感病毒致小鼠死亡的保護(hù)作用<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>本發(fā)明中藥含片10ml/kg/d、5ml/kg/d二個劑量組小鼠的存活天數(shù)較感染組明顯延長，與對照組比較有顯著性差異。生命延長率分別為17.67%和22.22%。表示本發(fā)明中藥含片在此劑量時(shí)對流感病毒感染致小鼠死亡有明顯的保護(hù)作用(見表十)。表十本發(fā)明中藥含片對流感病毒致小鼠死亡的保護(hù)作用<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>與對照組比較**P〈0.01*P〈0.05四、本發(fā)明中藥含片治療小兒急性咽炎、扁桃體炎的臨床試驗(yàn)1、病例選擇選取符合西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，中醫(yī)診斷辨證為風(fēng)熱外侵或肺胃熱盛者。發(fā)病在3日之內(nèi)的小兒急性咽炎、扁桃體炎患者120例，隨機(jī)分為二組-①治療組60例，男、女各30例，年齡1歲12歲，平均年齡5.78歲，其中急性咽炎30例，平均病程1.66天；急性扁桃體炎30例，平均病程1.92天.②對照組60例，男、女各30例，年齡112歲，平均年齡5.81歲，其中急性咽炎30例，平均病程1.68天；急性扁桃體炎30例，平均病程1.93天。2、主要癥狀體征①急性咽炎咽痛、咽干、灼熱、吞咽疼痛、尿黃、大便干結(jié)，甚至發(fā)熱、頭痛、四肢酸痛。査咽部粘膜急性充血、腫脹，腭弓、懸雍垂水腫，咽后壁淋巴濾泡及咽側(cè)索紅腫，甚至咽后壁淋巴出現(xiàn)黃色點(diǎn)狀滲出物，頜下淋巴結(jié)腫大有壓痛。②急性扁桃體炎咽痛、咽干、灼熱、吞咽或咳嗽時(shí)疼痛加重，尿黃、大便干結(jié)，部分患者有發(fā)熱、頭痛、四肢酸痛。査咽部粘膜急性彌漫性充血，以扁桃體及兩腭弓最嚴(yán)重，腭扁桃體腫大，表面可見黃白色膿點(diǎn)，咽后壁淋巴濾泡及咽側(cè)索紅腫，甚至頜下淋巴結(jié)腫大有壓痛。3、治療及觀察方法(1)、給藥方法①治療組每次服本發(fā)明中藥含片510g，每日3次，3日為一療程。②對照組患者服用頭孢克洛口含片每次O.125g(三歲以下兒童酌減)，每日3次，3日為一療程。兩組在治療期間停用其他藥物。(2)觀察指標(biāo)治療后第3天、第6天復(fù)査，記錄癥狀體征改變情況。治療期間記錄兩組不良反應(yīng)。4、治療結(jié)果(如表十一和表十二所示)表十一急性咽炎兩組療效比較((n,。/。)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表十一示兩組療效比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。提示本發(fā)明中藥口含片治療急性咽炎療效明顯優(yōu)于對照組。_表十二急性扁桃體炎兩組療效比較((n，y。)_<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表十二示兩組療效比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。提示本中藥含片治療急性扁桃體炎療效明顯優(yōu)于對照組。不良反應(yīng)應(yīng)用復(fù)方土牛膝口含片治療期間，全部病例未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。綜上所述，本發(fā)明一種治療咽喉疾病的中藥含片有以下優(yōu)點(diǎn)(一)、本發(fā)明一種治療咽喉疾病的中藥含片，采用清熱解毒，消腫利咽的廣東土牛膝，輔以清熱解毒、利咽消腫、散瘀止痛的崗梅根和水楊梅根，同時(shí)佐以清熱涼血、解毒的一點(diǎn)紅，清熱躁濕解毒山芝麻，，佐以清熱除煩、疏風(fēng)散熱的淡竹葉和菊花，諸藥合用，共奏良好的清熱解毒、利咽消腫止痛作用，對咽喉疾病的治療效果顯著。(二)本發(fā)明中藥含片的配方簡單，成分原材料價(jià)廉易得，制造工藝簡單，從而降低了成本(三)、本發(fā)明中藥含片具有良好的清熱解毒、利咽消腫止痛作用，對咽喉疾病的治療效果顯著且沒有副作用。(四)本發(fā)明中藥含片加入最佳配比的輔料麥芽糊精、淀粉、蔗糖，使本發(fā)明中藥含片入口細(xì)膩柔順、無糊口、無顆粒感具有口感好的優(yōu)點(diǎn)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1按下述的配比稱取原料藥廣東土牛膝400克、山芝麻200克、崗梅300克、野菊花200克、水楊梅300克、淡竹葉200克、一點(diǎn)紅200克。將以上七味藥材，加水煎煮二次:第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，合并兩次濾液進(jìn)行過濾，濾液濃縮至適量，加等量(等體積)乙醇靜置24小時(shí)，取上清液，濃縮至8(TC時(shí)相對密度為1.20的清膏，備用，稱取原料藥淀粉200克、糊精200克、蔗糖400克并與上述的清膏充分混合均勻，待干燥后用粉碎機(jī)粉碎，噴入適量冰片和0.5%薄荷腦的乙醇液，立即壓片，即得本發(fā)明中藥含片。實(shí)施例2按下述的配比稱取原料藥廣東土牛膝500克、山芝麻120克、崗梅200克、野菊花120克、水楊梅200克、淡竹葉120克、一點(diǎn)紅120克。將以上七味藥材，加水煎煮二次:第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，合并兩次濾液進(jìn)行過濾，濾液濃縮至適量，加等量(等體積)乙醇靜置24小時(shí)，取上清液，濃縮至8(TC時(shí)相對密度為1.20的清膏，備用，稱取原料藥淀粉300克、糊精300克、蔗糖600克并與上述的清膏充分混合均勻，待干燥后用粉碎機(jī)粉碎，噴入適量冰片和0.5%薄荷腦的乙醇液，立即壓片，即得本發(fā)明中藥含片。實(shí)施例3按下述的配比稱取原料藥廣東土牛膝450克、山芝麻180克、崗梅250克、野菊花180克、水楊梅250克、淡竹葉180克、一點(diǎn)紅180克。將以上七味藥材，加水煎煮二次:第一次煎煮2小時(shí)，第二次煎煮1.5小時(shí)，合并兩次濾液進(jìn)行過濾，濾液濃縮至適量，加等量(等體積)乙醇靜置24小時(shí)，取上清液，濃縮至80'C時(shí)相對密度為1.20的清膏，備用，稱取原料藥淀粉180克、糊精180克、蔗糖360克并與上述的清膏充分混合均勻，待干燥后用粉碎機(jī)粉碎，噴入適量冰片和0.5%薄荷腦的乙醇液，立即壓片，即得本發(fā)明中藥含片。本發(fā)明按照上述配比和方法制造的中藥含片，具有清熱解毒、利咽消腫止痛作用，對咽喉疾病的治療效果顯著且沒有副作用。權(quán)利要求1.一種治療咽喉疾病的中藥含片，其特征在于其特征在于它是由下述重量組分的原料藥制成的廣東土牛膝40～50、山芝麻12～20、崗梅20～30、野菊花12～20、水楊梅20～30、淡竹葉12～20、一點(diǎn)紅12～20、淀粉20～30、糊精20～30、蔗糖40～60。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療咽喉疾病的中藥含片，其特征是各原料藥的重量比是-廣東土牛膝4045、山芝麻1618、崗梅2530、野菊花1618、水楊梅2530、淡竹葉1618、一點(diǎn)紅1618、淀粉2025、糊精2025、蔗糖4050。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療咽喉疾病的中藥含片，其特征在于它是由下述重量份的原料藥制成的廣東土牛膝40～50、山芝麻12～20、崗梅20～30、野菊花12～20、水楊梅20～30、淡竹葉12～20、一點(diǎn)紅12～20、淀粉20～30、糊精20～30、蔗糖40～60；本發(fā)明中藥含片原料藥組分簡單，成分原材料價(jià)廉易得，制造工藝簡單，具有良好的清熱解毒、利咽消腫止痛作用，對咽喉疾病的治療效果顯著且沒有副作用。文檔編號A61P11/00GK101371905SQ20071002995公開日2009年2月25日申請日期2007年8月22日優(yōu)先權(quán)日2007年8月22日發(fā)明者曾聰彥,梅全喜,清羅,鐘希文申請人:中山市中醫(yī)院