專利名稱：：基于植物的用于改善肝臟健康的制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。還應(yīng)理解本文使用術(shù)語的目的僅在于描述特定的實(shí)施方案，但并非指定這些實(shí)施方案限定本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍僅由權(quán)利要求限定。用于本發(fā)明制劑中的組分本發(fā)明基于令人意外的發(fā)現(xiàn)，即更完整地描述在表1中的下列組分的獨(dú)特組合改善了肝臟健康綠芥末根纖維粉，朝鮮薊葉提取物，蘆夢提取物，野葛提取物，薄荷科芬芳植物提取物，五味子屬漿果提取物，三七總甙(三七根的乙醇提取物)，三七(來自三七根的水提取物)，葛根弄菠菜脫水物。更具體地說，本發(fā)明的制劑通過防止肝臟受到醇和四氯化碳損傷改善了肝臟健康。另外，這些制劑通過誘導(dǎo)II期酶改善了肝臟健康。II期酶導(dǎo)致除去了潛在致癌物，通過有助于其從體內(nèi)除去來進(jìn)行。"防止肝臟受到醇損傷"和"防止肝臟受到四氯化碳損傷"意旨本文所述制劑保護(hù)或改善目前的肝功能的能力。表1組分描述朝鮮薊葉提取物來自朝鮮薊的提取物已經(jīng)用于抗肝病的民間醫(yī)學(xué)并且請求保護(hù)了這類提取物的發(fā)揮保肝作用。Jow"a/五^wo-z/7armaco/og);,86:203-211(2003)。成分包4舌類黃酉同和愈創(chuàng)木內(nèi)酯類的倍半薛化合物。Czygan,Franz-Christian等,Her6a/Z)rwg^awt/尸/y^o//7t^7wacei/,z'ca/s,3rded.,Stuttgart,Germany,MedpharmScientificPublishers,2004.p.174。朝鮮薊葉提取物可以獲自GmpoCentroflora，SSoPaulo,Brazil.<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>葛根提取物常稱作峨嵋山野葛藤(OmeiMountainKudzuVine)。薄荷科芬芳植物提取物薄荷科芬芳植物的成分包括兩種苯酚香芽酚和麝香草酚(另外參見百里香和香旱芽菜)。還發(fā)現(xiàn)了各種單碎烴類(檸檬烯，松油烯，羅勒烯，石竹烯，卩-沒藥烯和對-傘花烴)和單碎醇類(沉香醇，4-松油醇)。三七在本文中稱作來自三七根的水提取物。已知三七包含皂苷類。三七可以獲自DracoNaturalProducts,SanJose,California。五味子屬(Schisandra)漿果提取物五味子屬漿果(Schisandra)或五味子屬(Schizandra)漿果常稱作五味子。它一般用于抑制釋放，促進(jìn)流體分泌，補(bǔ)腎和誘導(dǎo)鎮(zhèn)靜。參見US6,455,078。描述了五味子屬木脂素類可防止肝臟受到CCU損害。尸/""toA^Wca,61(2);134-7(1995)。菠菜脫水物菠菜包含在臨床上用于肝病的甜菜堿。參見US2003/0091615。菠菜脫水物可以獲自AccessBusinessGroupLLC,Ada,Michigan。綠芥末根研咒提示綠齊末(,ra6/ay'opom'dsyn.EutremaWasabi)可以產(chǎn)生富含防護(hù)性II期解毒酶，諸如谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)的增力。，側(cè)耳產(chǎn)生保肝作用。已經(jīng)提示近期鑒定的分離自綠花椰菜的6-曱基亞磺?；夯惲蚯杷狨?6-HITC),即萊菔硫烷(4-甲基亞磺酰基丁基異硫氰酸酯)類似物為綠芥末中主要的GST誘導(dǎo)物。J.S/o/C/zem.,1;277(5):3456-63(2002)。已知綠芥末包含異石危氰酸酯成分。文獻(xiàn)同上。綠芥末根提取物可以獲自EULInternationalHerbManufacturing，LaVerne,California。本發(fā)明的制劑表2例示了可以包括在補(bǔ)充劑中的有代表性的每日量的組分。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實(shí)施例2每3片<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例4<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實(shí)施例6<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實(shí)施例8<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>可以按照工業(yè)中公知的典型方法制備上述典型的壓片制劑。例如，使綠芥末根纖維粉，朝鮮薊葉提取物，五味子屬漿果提取物，三七總戒和菠菜脫水物通過安裝了20目篩的SWECO分選沖幾而進(jìn)入100立方英尺的PK摻合機(jī)。將微晶纖維素加入到PK摻合機(jī)中摻合。將組分摻合10分鐘。使羧曱基纖維素鈉和二氧化硅通過安裝了20目篩的SWECO分選機(jī)而直接進(jìn)入100立方英尺的PK摻合機(jī)。將組分摻合10分鐘。接下來使硬脂酸(stearicacidis)通過安裝了20目篩的SWECO分選機(jī)而直接進(jìn)入100立方英尺的PK摻合才幾。將該混合物再摻合5分鐘。將所得混合物放入斗或超大型袋并且4壓制成片劑。給藥方法可以將本發(fā)明的制劑配制成可接受的載體并且可以制備，包裝和標(biāo)記它們用于促進(jìn)健康，肝功，防止對肝臟的醇和/或化學(xué)損傷，誘導(dǎo)II期酶以便促進(jìn)健康的肝功能?？梢詫⒈景l(fā)明的制劑及其可接受的載體配制成用于口服給藥的丸劑，片劑，在使用前用水或其它適當(dāng)?shù)拿浇槲镌偃芙獾母稍锘蚍蹱町a(chǎn)品，棒，食品，溶液，糖漿劑，混懸液，飲料，錠劑等的形式。還可以通過非腸道或通過吸入或吹入(通過口腔或鼻)和給予本發(fā)明的制劑?？梢酝ㄟ^常規(guī)方式，使用藥學(xué)上可接受的添加劑制備液體制劑，所述的添加劑諸如懸浮劑(例如山梨醇糖漿，纖維素衍生物或氫化食用脂)；乳化劑(例如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水媒介物(例如非水的，油酯類或分級分離的植物油)；和防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯曱酸丙酯或山梨酸)。當(dāng)以飲料形式給予時(shí)，本發(fā)明的制劑可以基于水，基于乳品，基于茶，基于果汁或其某些的組合。還可以通過口服給予固體形式的本發(fā)明制劑，所述的固體形式通過超過方式，使用藥學(xué)上可接受的賦形劑制備，所述的賦形劑諸如粘合劑(例如預(yù)膠化玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基曱基纖維素；填充劑(例如乳糖，微晶纖維素或磷酸氫釣)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂，滑石粉或二氧化硅)；崩解劑(例如羧甲基纖維素鈉，馬鈴薯淀粉或羥基乙酸淀粉鈉)；或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉)?？诜o藥的本發(fā)明制劑可以進(jìn)一步包含增稠劑，包括黃原膠(xanthumgum)，羧甲基纖維素，羧乙基纖維素，羥丙基纖維素，曱基纖維素，微晶纖維素，淀粉，糊精，發(fā)酵乳清，豆腐，麥芽糖糊精，多元醇類，包括糖醇類(例如山梨醇和甘露糖醇)，碳水化合物(例如乳糖)，丙二醇藻酸鹽，膠凝糖樹膠，瓜爾膠，果膠，黃蓍膠，阿拉伯樹膠，槐豆膠，阿拉伯膠，明膠和這些增稠劑的混合物。本發(fā)明口服給藥的制劑可以包含有效量的一種或多種甜味劑，包的甜味劑的量可以改變，:一i取決于所用、甜味劑的類型和所需的甜味強(qiáng)度。除上述制劑外，還可以將化合物配制成緩釋和/或定時(shí)釋放制劑。必須將制劑維持在有效的某些最低治療劑量。常用的定時(shí)和/或控釋遞送系統(tǒng)包括，但不限于淀粉，滲透泵或明膠微嚢。如果需要，可以將制劑制成藥包或配藥裝置，其可以包含含有本發(fā)明制劑的一個(gè)或多個(gè)單位劑型。例如，藥包可以包含塑料箔，諸如泡罩包。藥包或配藥裝置可以附帶給藥用說明書。可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員充分理解的方法和技術(shù)制備其它有用的劑型，并且這些劑型可以包括在生產(chǎn)片劑，膠嚢或液體劑型中使用的其它組分。劑量和劑量頻率根據(jù)個(gè)體消費(fèi)者或患者的年齡，體重，病情和反應(yīng)以及所用的本發(fā)明特定制劑的不同而改變。指定將上述描述視為例證性的，而非限制性的。通過下列實(shí)驗(yàn)研究和實(shí)施例進(jìn)一步解釋本發(fā)明，這些研究和實(shí)施例不應(yīng)視為限制性的。各組分的生物測定研究對幾種物質(zhì)進(jìn)行生物測定測試以便嘗試預(yù)測其對醇和化學(xué)誘導(dǎo)的肝損害的防護(hù)能力。為了評價(jià)這一點(diǎn)，用所述物質(zhì)處理肝細(xì)胞并且使用兩種不同測定法測定細(xì)胞存活率。使用2.5%乙醇才莫擬醇損害作為損傷。將0.2%的CCU用于化學(xué)損傷。選擇這些濃度，因?yàn)樗鼈優(yōu)樵陬A(yù)實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生20%細(xì)胞死亡的濃度并且由此不會導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆的細(xì)胞死亡/損害。以三種濃度(l,10和100lug/mL)測試物質(zhì)并且確定EC-50的估計(jì)值(參見下面實(shí)驗(yàn)部分的更詳細(xì)描述)。除細(xì)胞存活率測定外，還進(jìn)行II期酶誘導(dǎo)測試以便確定物質(zhì)是否具有解毒特性。II期酶誘導(dǎo)測定法測定了樣品誘導(dǎo)表示解毒效果的醌還原酶(II期酶)的能力。II期酶導(dǎo)致除去了潛在致癌物，通過有助于其從體內(nèi)除去來進(jìn)行。已知綠花椰菜因其萊菔硫烷含量而成為良好的II期酶誘導(dǎo)物。純的萊菔硫烷在106U/g具有活性，而已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了綠花椰菜的4000-74,000U/g活性(依賴于變種，形式和/或提取條件)。認(rèn)為高于30,000U/g的活性極佳。認(rèn)為低于5000U/g的活性最低。視為良好II期酶誘導(dǎo)物的大部分物質(zhì)具有15,000-30,000U/g的活性。表3和4值中概括了所有測試物質(zhì)的EC-50值。表3特別針對的是乙醇防護(hù)效果，且表4針對的是四氯化碳。表5給出了II期酶誘導(dǎo)測定結(jié)果。表3:用于乙醇防護(hù)評價(jià)的MTT和LDH測定的EC-50結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表4:用于CC14防護(hù)評價(jià)的MTT和LDH測定的EC-50結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>*每克鮮重物質(zhì)中的誘導(dǎo)物單位I。-=忽略不計(jì)的活性，+=幾乎沒有活性，++=良好活性，+++=才及為良好的活性，++++=才及佳活性。**因?qū)?xì)胞的毒性而未報(bào)導(dǎo)。實(shí)驗(yàn)為了進(jìn)行乙醇防護(hù)和CCU評價(jià)，制備在DMSO中從儲備樣品溶液，然后用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋以便測試。通過向96-孔微量滴定板中的3個(gè)孔中各自添加100|LiL樣品對HepG2細(xì)胞(人肝細(xì)胞系)進(jìn)行處理。在4小時(shí)孵育后，加入損傷物(2.5%乙醇或0.2%四氯化碳)并且再進(jìn)行過夜孵育期。第二天使用兩種不同的測定法測定細(xì)胞存活率。首先使用Promega的CytoTox-ONE均勻膜完整性測定法(HomogenousMembraneIntegrityAssay)，通過測定釋放入培養(yǎng)基的LDH估計(jì)未存活的細(xì)胞數(shù)量。在細(xì)胞膜受損時(shí)LDH滲漏出細(xì)胞。第二種測定法為MTT測定法，它測定了活細(xì)胞線粒體將黃色四氮唑鹽還原成不溶性紫色甲臘(formazen)產(chǎn)物。在與MTT溶液孵育后，加入異丙醇以便增溶著色的結(jié)晶。產(chǎn)生的顏色量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。為了進(jìn)行II期酶誘導(dǎo)測定法，制備在乙腈中的儲備樣品溶液，然后在細(xì)胞培養(yǎng)基中稀釋以便測試。通過向96-孔微量滴定板中的3個(gè)孔中各自添加150iuL樣品對Hepalclc7細(xì)胞(鼠肝瘤細(xì)胞系)進(jìn)行處理。在48小時(shí)孵育后，通過測定NADPH-依賴性曱萘氬醌-介導(dǎo)的MTT還原確立醌還原酶的誘導(dǎo)活性。將活性報(bào)導(dǎo)為每克鮮重物質(zhì)中的誘導(dǎo)物單位，其中將一個(gè)誘導(dǎo)物活性單位定義為使Hepalclc7細(xì)胞的醌還原酶比活性加倍所需的誘導(dǎo)物量。有關(guān)組分組合的生物測定研究對幾種肝解毒組分的摻合物進(jìn)行生物測定測試以便嘗試預(yù)測其對醇和化學(xué)誘導(dǎo)的肝損害的防護(hù)能力。測試了這些摻合物與已經(jīng)在市場上銷售的兩種用于肝臟健康的產(chǎn)品-NUTRILITE⑧奶薊和蒲^^英和China'sKingDrink。為了評價(jià)這一點(diǎn)，用所述樣品處理肝細(xì)胞并且使用兩種不同測定法測定損傷和細(xì)胞存活率。使用2.5%乙醇;^莫擬醇損害作為損傷。將0.2%的CCU用于化學(xué)損傷。選擇這些濃度，因?yàn)樗鼈優(yōu)樵陬A(yù)實(shí)-瞼中產(chǎn)生20%細(xì)胞死亡的濃度并且由此不會導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆的細(xì)胞死亡/損害。以三種濃度(l,10和100iug/mL)測試樣品并且確定EC-50的估計(jì)值(參見下面實(shí)驗(yàn)部分的更詳細(xì)描述)。具有10pg/mL或低于它的EC-50值的物質(zhì)表示最為有效，推定10%該物質(zhì)在5L血液(平均人體積)中吸收。表現(xiàn)出對CC14肝細(xì)胞損害最大功效的摻合物為8523-25-CI(實(shí)施例1),8523-27-CI(實(shí)施例8)，8523-28-CI(實(shí)施例2)和8523-30-CI(實(shí)施例3)。表現(xiàn)出良好性能的其它摻合物(在510fig/mL時(shí)表現(xiàn)出40%的防護(hù)作用)為8523-20-CI,8523畫22曙CI，8523-24-CI,8523-26-CI和8523-31-CI。這些摻合物中在S10ng/mL時(shí)無一表現(xiàn)出對演出肝細(xì)胞損害的功效。對照組產(chǎn)品(NUTRILITE奶薊和KingDrink)也未達(dá)到SlO|ug/mL的EC-50值。具有>100pg/mL的EC-50值摻合物為8523-28-CI(實(shí)施例2),8523-30-CI(實(shí)施例3),8523-31-CI(實(shí)施例4)和8523-32-CI(實(shí)施例5)。表6-9中概括了所有測試樣品的結(jié)果。這些結(jié)果也可以在圖1-4中觀察到。表6:用于乙醇防護(hù)評價(jià)的MTT測定結(jié)果(*=在一個(gè)或多個(gè)濃度下達(dá)到EC-40)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表7:用于乙醇防護(hù)評價(jià)的LDH測定的EC-50結(jié)果(*=在一個(gè)或多個(gè)濃度下達(dá)到EC-40)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>除細(xì)胞存活率測定外，還進(jìn)行II期酶誘導(dǎo)測試以便確定物質(zhì)是否具有解毒特性。II期酶誘導(dǎo)測定法測定了樣品誘導(dǎo)表示解毒效果的醌還原酶(n期酶)的能力。已知綠花椰菜因其萊菔硫烷含量而成為良好的II期酶誘導(dǎo)物。純的菜菔硫烷在1(^U/g具有活性，而已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了綠花椰菜的4000-74,000U/g活性(依賴于變種，形式和/或提取條件)。認(rèn)為高于30,000U/g的活性極佳。認(rèn)為低于5000U/g的活性最低。視為良好II期酶誘導(dǎo)物的大部分物質(zhì)具有15,000-30,000U/g的活性。所有測試摻合物均具有良好到極佳的II期酶誘導(dǎo)活性。最高活性來源于8523-27(實(shí)施例8)且最低活性來源于8523-31(實(shí)施例4)。極佳活性還來源于8523-22,8523-23,8523-30(實(shí)施例3)，8523-32(實(shí)施例5)和8523-33。表10中給出了所有測試樣品的II期酶誘導(dǎo)測定結(jié)果。表10:II期酶(醌還原酶)誘導(dǎo)測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>*每克鮮重物質(zhì)中的誘導(dǎo)物單位I。-=忽略不計(jì)的活性，+=幾乎沒有活性，++=良好活性，+++=極為良好的活性，++++=極佳活性。**因?qū)?xì)胞的毒性而未報(bào)導(dǎo)。實(shí)驗(yàn)制備在DMSO中從儲備樣品溶液，然后用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋以便測試。通過向96-孔微量滴定板中的3個(gè)孔中各自添加100|uL樣品對HepG2細(xì)胞(人肝細(xì)胞系)進(jìn)行處理。在4小時(shí)孵育后，加入損傷物(2.5%乙醇或0.2%四氯化碳)并且再進(jìn)行過夜孵育期。第二天使用兩種不同的測定法測定細(xì)胞存活率。首先使用Promega的CytoTox-ONE均勻膜完整性測定法，通過測定釋放入培養(yǎng)基的LDH估計(jì)未存活的細(xì)胞數(shù)量。在細(xì)胞膜受損時(shí)LDH滲漏出細(xì)胞。第二種測定法為MTT測定法，它測定了活細(xì)胞線粒體將黃色四氮唑鹽還原成不溶性紫色曱月替產(chǎn)物。在與MTT溶液孵育后，加入異丙醇以便增溶著色的結(jié)晶。產(chǎn)生的顏色量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。通過在求三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的平均值后，首先計(jì)算各孔的毒性百分比(l-實(shí)驗(yàn)/陰性對照)確定防護(hù)率。然后通過下式計(jì)算防護(hù)百分比(％毒性陽性對照-%毒性樣品)/%毒性陽性對照，陽性對照為2.5%乙醇或0.2%四氯化碳。然后評價(jià)了表現(xiàn)出500/。防護(hù)率(EC-50)的濃度。為了本實(shí)驗(yàn)的目的，將其分類為<1,1，1-10，10,10-100,100或〉100|ug/mL。為了進(jìn)行II期酶誘導(dǎo)測定法，制備在乙腈中的儲備樣品溶液，然后在細(xì)胞培養(yǎng)基中稀釋以便測試。通過向96-孔微量滴定板中的3個(gè)孔中各自添加150iuL樣品對Hepalclc7細(xì)胞(鼠肝瘤細(xì)胞系)進(jìn)行處理。在48小時(shí)孵育后，通過測定NADPH-依賴性甲萘氬醌-介導(dǎo)的MTT還原確立醌還原酶的誘導(dǎo)活性。將活性報(bào)導(dǎo)為每克鮮重物質(zhì)中的誘導(dǎo)物單位，其中將一個(gè)誘導(dǎo)物活性單位定義為使Hepalclc7細(xì)胞的醌還原酶比活性加倍所需的誘導(dǎo)物量。哺乳動物研究可以進(jìn)行臨床測試以便證實(shí)制劑對肝臟健康的功效。預(yù)計(jì)這些制劑通過防止肝臟受到化學(xué)和純損傷而改善了肝臟健康。用于這類測試的方案如下。方案1:CCU肝損傷模型1.1原理當(dāng)CCU被肝臟線粒體酶活化，形成三氯甲烷自由基(CCl3.)。這種自由基與蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)合導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成受損和脂質(zhì)代謝障礙，從而造成肝細(xì)胞中的甘油三酯累積(TG)。CCl3.還與〇2快速合并成三氯甲烷過氧化物自由基(CCl30r),產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞膜的變性損傷，酶滲漏和各種類型的細(xì)胞病理性改變和甚至壞死。1.2實(shí)驗(yàn)動物單一性別的成年大鼠或小鼠。每組由8-12只大鼠(180-220g)或10-15只小鼠(18-22g)組成。1.3實(shí)驗(yàn)方法和搡作步驟1.3.1劑量組和測試樣品的給藥期限設(shè)定3個(gè)劑量組，1個(gè)空白對照組和1個(gè)才莫型對照組。劑量組之一的劑量為IO倍(小鼠)或5倍(大鼠)推薦的人體劑量。CCl4(分析純)用于形成肝損傷模型。形成模型的方法可以使用灌胃給藥或腹膜內(nèi)注射。對小鼠灌胃給藥的CCU濃度為1%。用可食用植物油稀釋ccu并且灌胃給藥的劑量為5mL/kgBW(就CCl4而言的劑量為80mg/kgBW)。對大鼠灌胃給藥的CCU濃度為2%-3%和且劑量為5mL/kgBW(就CC14而言的劑量為160-240mg/kgBW)。如果必要，可以i殳定陽性對照組和溶劑對照組。測試樣品的給藥期限為30天并且如果必要，可以延長至45天。1.3.2測試樣品的給藥途徑用灌胃法給予測試樣品。如果不可能，那么可以將測試樣品混入食物或飲用水并且記錄食物攝取量或飲水量。1.3.3實(shí)驗(yàn)操作步驟每天通過灌胃對實(shí)驗(yàn)組動物給予測試樣品，而對那些空白對照組和模型對照組給予蒸餾水。每周將動物稱重兩次，以便調(diào)節(jié)測試樣品劑量。在30天本實(shí)驗(yàn)的前夕，使各組動物禁食16小時(shí)。通過灌胃給模型組和各測試樣品組的動物給予單劑量的CCU,而對那些空白對照組給予植物油。實(shí)驗(yàn)組動物持續(xù)接受測試樣品，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束(測試樣品和CCU的給藥間隔超過4小時(shí))。在給予CCU后，按照實(shí)際條件在24小時(shí)或48小時(shí)后處死動物。采血并且分離血清以{更測定ALT和AST。取肝臟用戶與組織病理學(xué)檢查。1.3.4測定指標(biāo)肝臟的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(AST),組織病理學(xué)4企查。1.4ALT和AST的測定1.4.1測定方法可以選擇全自動生化分析儀或Reitman-Frankel法(試劑盒)。1.4.1數(shù)據(jù)處理和結(jié)果評價(jià)使用方差分析，但首先用按照方差分析的程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。如果方差為均勻性的，那么計(jì)算F值。如果F值〈Fo.05，那么結(jié)論為不同組平均值之間的差異無顯著性。如果F值2Fo.o5且尸S0.05，那么將幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組與1個(gè)對照組平均值的配對對比法用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。就具有非正態(tài)分布或方差不均勻性的數(shù)據(jù)而言，進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)化并且將轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)用于在滿足正?；蚍讲罹鶆蛐砸蠛蟮慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果正?；蚍讲罹鶆蛐缘哪康脑谧兞哭D(zhuǎn)化后仍然無法達(dá)到，那么將排序檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果測試樣品組的ALT和AST與^t型對照組的那些具有明顯差異，那么可以將ALT和AST的結(jié)果分別評價(jià)為陽性。1.5肝臟的組織病理學(xué)變化，診斷標(biāo)準(zhǔn)和評價(jià)結(jié)果1.5.1實(shí)驗(yàn)材料用10%福爾馬林固定大鼠肝臟的左葉。從肝臟的左葉的中部的才黃截面上取肝臟組織以便常規(guī)制備病理切片(石蠟包埋，H.E.染色)。1.5.2顯微鏡檢查使用40-倍目鏡連續(xù)觀察整個(gè)組織切片，從肝臟的一端視野中開始記錄細(xì)胞病理性改變?？梢杂^察到葉的中心肝細(xì)胞變性改變和幾個(gè)細(xì)胞壞死。病理性改變的主要類型為氣球樣變性，脂肪變性，細(xì)胞質(zhì)濃縮，水腫性變性和肝細(xì)胞壞死等。1.5.3等級評定標(biāo)準(zhǔn)分別記錄占每個(gè)視野中部分視野區(qū)域的每一病理性改變，并且合計(jì)觀察到的視野中的病理性改變的總分。肝細(xì)胞的氣球樣變性(細(xì)胞溶脹，遺留少量細(xì)胞質(zhì))大致正常0點(diǎn)具有氣球樣變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的1/41點(diǎn)具有氣球樣變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的1/22點(diǎn)具有氣球樣變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的3/43點(diǎn)具有氣球樣變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野4點(diǎn)肝細(xì)胞脂肪變性(明顯區(qū)別的脂肪滴液泡出現(xiàn)在肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中)大致正常0;、具有脂肪變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的1/41,、具有脂肪變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的1/22,泉具有脂肪變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的3/43,泉具有脂肪變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野4,、細(xì)胞質(zhì)濃縮(增強(qiáng)的嗜曙紅細(xì)胞染色)大致正常0,泉具有細(xì)胞質(zhì)濃縮的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的1/41,、具有細(xì)胞質(zhì)濃縮的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的2/42,泉具有細(xì)胞質(zhì)濃縮的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的3/43,泉具有細(xì)胞質(zhì)濃縮的肝細(xì)胞占整個(gè)視野4,泉水胂性變性未觀察到具有水腫性改變的肝細(xì)胞0力、具有水肺性變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的1/41,泉具有水肺性變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的2/42,#、具有水腫性變性的肝細(xì)胞占整個(gè)視野的3/43;、具有水腫性變性的彌散性肝細(xì)胞占整個(gè)視野4力、肝細(xì)胞壞死(細(xì)胞質(zhì)的嗜曙紅細(xì)胞改變，凝固性壞死)未》見察到壞死細(xì)胞散發(fā)的壞死細(xì)胞占整個(gè)視野的1/40點(diǎn)1點(diǎn)2點(diǎn)3點(diǎn)4點(diǎn)壞死細(xì)胞占整個(gè)^L野的2/4壞死細(xì)^<占整個(gè)—見野的3/4彌散性壞死細(xì)胞占整個(gè)視野1.5.4數(shù)據(jù)處理和結(jié)果評價(jià)使用方差分析，但首先用按照方差分析的程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。如果方差為均勻性的，那么計(jì)算F值。如果F值〈Fo.05,那么結(jié)論為不同組平均值之間的差異無顯著性。如果F值2Fo.()5且尸S0.05,那么將幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組與1個(gè)對照組平均值的配對對比法用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。就具有非正態(tài)分布或方差不均勻性的數(shù)據(jù)而言，進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)化并且將轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)用于在滿足正?；蚍讲罹鶆蛐砸蠛蟮慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果正?；蚍讲罹鶆蛐缘哪康脑谧兞哭D(zhuǎn)化后仍然無法達(dá)到，那么將排序檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。在肝細(xì)胞病理性改變中，包括肝細(xì)胞的氣球樣變性，脂肪變性，細(xì)胞質(zhì)濃縮，水胂性變性和肝細(xì)胞壞死，如果在任何測試樣品劑量組中的肝細(xì)胞壞死與模型對照組中相比均有具備顯著性差異的緩解，并且其它類型的病理性改變明顯緩解或與;f莫型對照組中的那些相比無顯著性差異，那么可以將動物病理學(xué)研究結(jié)果評價(jià)為陽性。如果肝細(xì)胞的4種類型的病理性改變，即氣球樣變性，脂肪變性，細(xì)胞質(zhì)濃縮和水腫性變性加重和緩解同時(shí)存在顯著性差異并且肝細(xì)胞壞死在任何一個(gè)須'j試樣品劑量組中均比模型對照組具有顯著性差異的緩解，那么將各種病理性改變和加倍的壞死的得分彼此加和。將總分用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果總分具有顯著性差異，那么可以將動物病理性實(shí)驗(yàn)結(jié)果評價(jià)為陽性。1.6結(jié)果評價(jià)預(yù)計(jì)兩種血液生化指標(biāo)ALT和AST中的任何一個(gè)和病理學(xué)檢查結(jié)果為陽性并且將測試樣品評價(jià)為有助于防止對肝臟的化學(xué)損傷。方案2:醇肝損傷模型2.1原理在取大量乙醇后，通過乙醇脫氫酶催化的大量脫羥基化導(dǎo)致三羧酸循環(huán)障礙和脂肪酸氧化減弱，由此影響肝細(xì)胞中的脂肪代謝和脂肪沉淀。同時(shí)，乙醇可以活化氧分子并且導(dǎo)致氧自由基產(chǎn)生，從而導(dǎo)致體內(nèi)肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化和還原型谷胱甘肽耗盡。2.2實(shí)驗(yàn)動物單一性別的成年大鼠或小鼠。每組由8-12只大鼠(180-220g)或10-15只小鼠(18-22g)組成。2.3實(shí)驗(yàn)方法和操作步驟2.3.1劑量組和測試樣品的給藥期限設(shè)定3個(gè)劑量組，1個(gè)空白對照組和1個(gè)沖莫型對照組。劑量組之一的劑量為10倍(小鼠)或5倍(大鼠)推薦的人體劑量。如果必要，可以設(shè)定陽性對照組。無水乙醇(分析純)用于形成肝損傷模型。無水乙醇的濃度為50%(用蒸餾水稀釋)并且對小鼠灌胃給藥的劑量為12-14mL/kgBW(相當(dāng)于乙醇6000-7000mg/kgBW)。測試樣品的給藥期限為30天并且如果必要，可以延長至45天。2.3.2測試樣品的給藥途徑用灌胃法給予測試樣品。如果不能灌胃給藥，那么可以將測試樣品混入食物或飲用水并且記錄每只動物的食物攝取量或飲水量。2.3.3實(shí)驗(yàn)操作步驟每天通過灌胃對測試樣品組動物給予測試樣品，而對那些空白對照組和才莫型對照組給予蒸餾水。每周將動物稱重兩次并且按照體重調(diào)整測試樣品劑量。在給予測試樣品完成時(shí)，對模型組和3個(gè)劑量組給予50%乙醇12mL/kgBW的單劑量，而對那些空白對照組動物鄉(xiāng)合予蒸餾水。在禁食16小時(shí)后，處死動物以便進(jìn)行各種指標(biāo)一全查和組織病理學(xué)檢查。2.3.4檢查指標(biāo)肝臟的丙二醛(MDA)，還原型谷胱甘肽(GSH),甘油三酯(TG)含量。2.4測定肝臟勻化物中脂質(zhì)過氧化物丙二醛(MDA)的降解產(chǎn)物的方法2.4.1原理MDA為細(xì)i包膜脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物之一。測定MDA含量可以間接估計(jì)脂質(zhì)過氧化的程度。當(dāng)在酸性條件下共同加熱MDA和硫巴比妥時(shí)，形成粉紅色復(fù)合物并且其吸收峰在535nm,才艮據(jù)它可以測定MDA含量。2.4.2儀器和試劑儀器721分光光度計(jì)，微量樣品上樣器，恒溫水浴，普通離心機(jī)，混合旋轉(zhuǎn)器，帶有制動器的離心管，組織勻漿器。試劑0.2M乙酸鹽緩沖溶液，pH3.5:0.2M乙酸溶液185mL0.2M乙酸鈉溶液15mLlmmol/L四乙氧基丙烷(儲備溶液，保持在4。C下3個(gè)月)，恰在使用前用水稀釋至40nmol/mL:8.1%十二烷基硫酸鈉SDS0.8%硫巴比妥TBA0.2M磷酸鹽緩沖溶液，pH7.40.2M磷酸氬二鈉1920mL0.2M石舞酸二氬鉀480mL2.4.3實(shí)驗(yàn)操作步驟2.4.3.l樣品的制備組織勻化物樣品用生理鹽水沖洗所需一定量的器官，擦干，切碎并且放入均漿器。加入0.2M磷酸鹽緩沖溶液并且以2000r/分鐘將該混合物勻化10s。重復(fù)離心3次，間隔30s，形成5。/o組織勻化物(W/V)。以3000r/分鐘將該勻化物離心5-10分鐘并且取上清液用于測定。2.4.3.2樣品的測定試劑空白管孝S。鄉(xiāng)標(biāo)準(zhǔn)管5%組織勻化物O.lmL40nmol/mL四乙氧基丙烷O.lmL8.1%SDS0.2mL0.2mL0.2mL0.2M乙酸鹽緩沖溶液1.5mL1.5mL1.5mL0.8%TBA1.5mL1.5mL1.5mLH200.8mL0.7mL0.7mL混合以便勻化，沸水浴60分鐘防止光照，用流動水冷卻，在532nm處進(jìn)4亍比色。2.4.3.3計(jì)算B-AB-A脂質(zhì)過氧化物含量(nmol/mg組織)=--xCxK=-x40F—AF—A0.05x歸0脂質(zhì)過氧化物含量(nmol/100mg蛋白質(zhì))=B-AB-A1-xCxK-x40x——-x歸F—AF—A0.05蛋白質(zhì)(mg)/g組織A:空白管的吸收度B:樣品管的吸收度F:四乙氧基丙烷的吸收度C:四乙氧基丙烷的濃度(40nmol/mL)K:稀釋倍數(shù)2.4.3.4數(shù)據(jù)處理和結(jié)果評4介使用方差分析，但首先用按照方差分析的程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。如果方差為均勻性的，那么計(jì)算F值。如果F值〈Fo.05,那么結(jié)論為不同組平均值之間的差異無顯著性。如果F值2Fo.o5且尸S0.05，那么將幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組與1個(gè)對照組平均值的配對對比法用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。就具有非正態(tài)分布或方差不均勻性的數(shù)據(jù)而言，進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)化并且將轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)用于在滿足正?；蚍讲罹鶆蛐砸蠛蟮慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果正?；蚍讲罹鶆蛐缘哪康脑谧兞哭D(zhuǎn)化后仍然無法達(dá)到，那么將排序檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果評價(jià)預(yù)計(jì)測試樣品組的MDA含量與模型對照組具有顯著性差異，且照此將這一指標(biāo)結(jié)果評價(jià)為陽性。2.5測定肝臟勻化物中還原型谷胱甘肽(GSH)的方法2.5.1原理GSH-Px催化的GSH與5,5，-二硫代硝基曱酸(DTNB)的反應(yīng)產(chǎn)生黃色5-硫代-2-硝基-甲酸陰離子，它在423nm波長處具有最大吸收峰。測定該離子的濃度可以計(jì)算GSH含量。2.5.2試劑蒸餾水加至1000mL。0.004%DTNB溶液將TNB40mg溶于1000mL0.1mol/LPBS溶液(pH^8.0)。疊氮化鈉緩沖溶液0.9%生理鹽水4%磺基水楊酸溶液O.lmol/LPBS溶液(pHNa2HP04KH2P0413.452g0.722gNaN316.25mgEDTA-Na27.44mgNa2HP041.732gNaH2P041.076g蒸餾水加至1000mL。少量HC1和NaOH用于調(diào)節(jié)pH7.0。將該溶液保持在4°C下。標(biāo)準(zhǔn)溶液稱重還原型GSH15.4mg并且向50mL中加入疊氮化鈉緩沖溶液制成lmmol/L終濃度。恰在使用前制備該溶液。2.5.3方法2.5.3.1樣品的測定將生理鹽水5mL加入到0.5g肝臟中。將該混合物充分研磨成細(xì)濃稠液體(10%肝勻漿)。勻化后，向0.5mL勻化物中加入0.5mL4o/o磺基水楊?；旌虾?，在室溫下以3000rpm將該混合物離心IO分鐘并且上清液為樣品。試劑測定管空白管樣品0.5mL—4%石黃基水楊酸一0.5mLDINB4.5mL4.5mL混合該混合物，在室溫下放置10分鐘并且在412nm處測定其吸收度。2.5.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>2.5.3.3樣品GSH含量Omol/L肝組織)=相應(yīng)曲線濃度值(pmol/L)+50g/L2.5.4數(shù)據(jù)處理和結(jié)果評價(jià)使用方差分析，但首先用按照方差分析的程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。如果方差為均勻性的，那么計(jì)算F值。如果F值〈Fo.05,那么結(jié)論為不同組平均值之間的差異無顯著性。如果F值2Fo.o5且尸^0.05,那么將幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組與1個(gè)對照組平均值的配對對比法用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。就具有非正態(tài)分布或方差不均勻性的數(shù)據(jù)而言，進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)化并且將轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)用于在滿足正?；蚍讲罹鶆蛐砸蠛蟮慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果正?；蚍讲罹鶆蛐缘哪康脑谧兞哭D(zhuǎn)化后仍然無法達(dá)到，那么將排序檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果評價(jià)預(yù)計(jì)測試樣品組的還原型GSH含量與模型對照組具有顯著性差異，且照此將這一指標(biāo)結(jié)果評價(jià)為陽性。2.6測定肝臟勾化物中甘油三酯(TG)的方法2.6.1測定方法甘油三酯測定試劑盒(磷酸甘油氧化酶過氧化物酶方法)用于測定10%肝臟勻化物中的甘油三酯含量。按照與測定血清甘油三酯相同的方法，使用等量的10%肝臟勻化物而不是血清，按照操作的描述進(jìn)行測定。將測定結(jié)果表示為mmol/g肝臟重量。2.6.2數(shù)據(jù)處理和結(jié)果評價(jià)使用方差分析，但首先用按照方差分析的程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。如果方差為均勻性的，那么計(jì)算F值。如果F值〈Fo.05,那么結(jié)論為不同組平均值之間的差異無顯著性。如果F值》Fo.c)5且尸S0.05,那么將幾個(gè)實(shí)^r組與1個(gè)對照組平均值的配對對比法用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。就具有非正態(tài)分布或方差不均勻性的數(shù)據(jù)而言，進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)化并且將轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)用于在滿足正?；蚍讲罹鶆蛐砸蠛蟮慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果正?；蚍讲罹鶆蛐缘哪康脑谧兞哭D(zhuǎn)化后仍然無法達(dá)到，那么將排序檢驗(yàn)用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果評價(jià)預(yù)計(jì)測試樣品組的TG與模型對照組具有顯著性差異，且照此將這一指標(biāo)結(jié)果評價(jià)為陽性。2.7肝臟的組織病理學(xué)改變，診斷標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)果評價(jià)2.7.1實(shí)驗(yàn)材料從肝臟的左葉的中部取橫切片以便取檢查材料。對切片進(jìn)行冷凍并且用蘇丹III染料染色。2.7.2顯微鏡檢查從肝臟的一端視野中開始記錄細(xì)胞病理性改變。使用40-倍目鏡連續(xù)觀察整個(gè)組織切片。觀察的主要目標(biāo)為肝臟中脂肪滴的分布，范圍和區(qū)Jt或。2.7.3等級評定標(biāo)準(zhǔn)肝細(xì)胞中脂肪滴為散在的和罕見的0點(diǎn)含脂肪滴的肝細(xì)胞不超過1/41點(diǎn)含脂肪滴的肝細(xì)胞不超過1/22點(diǎn)含脂肪滴的肝細(xì)胞不超過3/43點(diǎn)肝組織幾乎^J旨肪滴取代4點(diǎn)2.7.4數(shù)據(jù)處理和結(jié)果評價(jià)使用方差分析，但首先用按照方差分析的程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。如果方差為均勻性的，那么計(jì)算F值。如果F值〈Fo.05,那么結(jié)論為不同組平均值之間的差異無顯著性。如果F值2Fo.o5且尸S0.05，那么將有非正態(tài)分布或方差不均勻性的數(shù)據(jù)而言，進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)化并且將轉(zhuǎn)化的數(shù)據(jù)用于在滿足正?；蚍讲罹鶆蛐砸蠛蟮慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析。如果正?；蚍讲罹鶆蛐缘哪康脑谧兞哭D(zhuǎn)化后仍然無法達(dá)到，那么將排序檢-瞼用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。預(yù)計(jì)任何測試樣品劑量組中的脂肪變性與模型對照組相比均具有顯著性差異的緩解，且照此將結(jié)果評價(jià)為陽性。2.8結(jié)果評價(jià)預(yù)計(jì)滿足下列條件，且照此將測試樣品評價(jià)為有助于防止醇的肝損傷(a)3個(gè)指標(biāo)，肝MDA,還原型GSH和TG的檢查結(jié)果為陽性。(b)3個(gè)指標(biāo)，即肝MDA，還原型GSH和TG中的任何2個(gè)為陽性且組織病理學(xué)檢查結(jié)果為陽性。權(quán)利要求1.包含至少兩種選自如下的組分的制劑五味子屬漿果提取物，三七總甙，野葛提取物，菠菜脫水物，薄荷科芬芳植物提取物，朝鮮薊葉提取物，綠芥末根粉，葛根提取物，三七和蘆筍脫水物，其中該制劑有效改善肝臟健康。2.權(quán)利要求1所述的制劑，其中五味子屬漿果提取物的存在量為150mg-1000mg，三七總戒的存在量為lOOmg-500mg,野葛提取物的存在量為150mg-1000mg,菠菜脫水物的存在量為20mg-500mg，薄荷科芬芳植物提取物的存在量為20mg-500mg,朝鮮薊葉提取物的存在量為200mg-1000mg,綠芥末根提取物的存在量為200mg-1000mg,葛根提取物的存在量為150mg-1000mg,三七的存在量為100mg-500mg，且蘆夢脫水物的存在量為100mg-500mg。3.權(quán)利要求1所述的制劑，其中該制劑包含150mg-500mg綠芥末根粉、200mg-1000mg朝鮮薊葉提取物、150mg-1000mg五味子屬漿果提取物、100mg-500mg三七總戒和20mg-500mg菠菜脫水物。4.權(quán)利要求1所述的制劑，其中該制劑包含150mg-500mg綠芥末、200mg-lOOOmg朝鮮薊葉提取物、150mg-lOOOmg野葛提取物、lOOmg-500mg三七總戒和20mg—500mg薄荷科芬芳植物。5.權(quán)利要求l所述的制劑，其中該制劑包含200mg-lOOOmg朝鮮薊葉提取物、150mg-1000mg野葛提取物和20mg-500mg薄荷科芬芳植物提取物。6.防止肝臟受到四氯化碳損害的方法，包括提供權(quán)利要求1所述的制劑。7.權(quán)利要求6所述的方法，其中該制劑包含150mg-500mg綠芥末根粉、200mg-lOOOmg朝鮮薊葉提取物、150mg-1000mg五味子屬漿果提取物、100mg-500mg三七總戒和20mg-500mg菠菜脫水物。8.權(quán)利要求6所述的方法，其中至少兩種組分選自三七總甙、野葛提取物、菠菜脫水物、薄荷科芬芳植物提取物、綠芥末根粉、葛根提取物、三七和聲,脫水物。9.權(quán)利要求6所述的方法，其中該制劑包含綠芥末和選自三七總甙、三七、野葛提取物、葛根提取物、菠菜和薄荷科芬芳植物的組分之一。10.權(quán)利要求6所述的方法，其中通過口服給予該制劑。11.權(quán)利要求6所述的方法，其中該制劑為片劑形式。12.防止肝臟受到醇損傷的方法，所述方法包括提供權(quán)利要求1所述的制劑來進(jìn)行。13.權(quán)利要求12所述的方法，其中該制劑包含150mg-500mg綠芥末根粉、200mg-1000mg朝鮮薊葉提取物、150mg-1000mg五味子屬漿果提取物、100mg-500mg三七總甙和20mg-500mg菠菜脫水物。14.權(quán)利要求12所述的方法，其中該制劑包含朝鮮薊和薄荷科芬芳植物。15.權(quán)利要求12所述的方法，其中通過口服給予片劑形式的該制劑。16.誘導(dǎo)II期酶的方法，所述方法包括提供權(quán)利要求1所述的制劑。17.權(quán)利要求16所述的方法，其中該制劑包含150mg-500mg綠芥末根粉、200mg-1000mg朝鮮薊葉提取物、150mg-1000mg五味子屬漿果提取物、100mg-500mg三七總戒和20mg-500mg菠菜脫水物。18.權(quán)利要求15所述的方法，其中該制劑包含葛根提取物和選自朝鮮薊葉提取物、綠芥末根粉、薄荷科芬芳植物提取物、三七總戒、三七和野葛提取物的組分之一。19.權(quán)利要求15所述的方法，其中通過口服給予片劑形式的該制劑。全文摘要本發(fā)明涉及基于植物的通過防止肝臟受到醇和化學(xué)損傷和/或通過誘導(dǎo)II期酶用于改善肝臟健康的制劑。本發(fā)明的制劑包括綠芥末根纖維粉，朝鮮薊葉提取物，蘆筍脫水物，野葛提取物，薄荷科芬芳植物提取物，五味子屬(schisandra)漿果提取物，三七總甙(三七(Panax三七總甙)根的乙醇提取物)，三七(來自三七根的水提取物)，葛根提取物(峨眉葛(Puerariaomeiensis))，菠菜脫水物或其組合。文檔編號A61P1/16GK101415433SQ200680050699公開日2009年4月22日申請日期2006年11月15日優(yōu)先權(quán)日2005年11月15日發(fā)明者A·錢德拉,C·J·伊康特,C·L·哈克,C·M·帕加內(nèi)利,M·黃,P·D·約翰遜,S·R·達(dá)科斯塔,黃若谷申請人:捷通國際有限公司