專利名稱：：減肥組成物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種包括蜜蜂花提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。此外，本發(fā)明涉及一種包括蜜蜂花提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物和桑葉提取物的混合物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。此外，本發(fā)明涉及一種包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的混合物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。
背景技術：
：肥胖被視為世界上曾經(jīng)出現(xiàn)過的最糟糕的麻煩，世界衛(wèi)生組織于1997年將其宣布為一種疾病。自從20世紀60年代以來，超重和肥胖現(xiàn)象一直呈不斷增長之勢，并且這樣的趨勢幾乎從來沒有下降過。在美國，超重或肥胖的人數(shù)正在不斷增加。目前，在20歲以上的成年人中，分別有65%和30%的人體重超標或肥胖。即使在發(fā)展中國家，經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)的肥胖率也不亞于高度發(fā)達的國家的肥胖率。目前，美國和日本的肥胖人數(shù)多達大約3億。每年，死于肥胖的人超過30萬，與肥胖相關的開支合計達到大約1千億美元。縱觀世界，隨著經(jīng)濟發(fā)展、現(xiàn)代化和城市化所推動的環(huán)境變化，肥胖人口迅猛增長。男性人口的超重率高于女性人口，但是男性人口的肥胖率則一般低于女性人口。發(fā)達國家和高度發(fā)達國家的青年兒童肥胖率都非常高。目前使用的肥胖療法包括食療、體育鍛煉、行為療法、藥物療法、綜合治療手術(胃切除術)等等。大多數(shù)廣泛用于控制肥胖的食物都是食物纖維，并且市場上銷售的有些食物還沒有在醫(yī)學上證實其療效。作為經(jīng)過FDA批準的減肥藥，現(xiàn)在可以使用下列藥物奧利司他(商標:Xenical)、苯丁胺(商標:Fastin、Zantiyl等等)和西布曲明(商標:Reductil、Meridia等等)。最新批準的奧利司他(Xenical)具有阻止吸收從食物攝取的脂肪的30%的功效，從而減輕體重。另一方面，苯丁胺和西布曲明具有抑制食欲的功效。奧利司他(Xenical)在消化道中與脂肪酶結合，然后減少在小腸中的脂解，從而阻止脂肪吸收。然而，殘留在腸中的未退化脂肪會引起若干副作用，例如腹部不適或疼痛、直腸不適或疼痛、排脂肪狀或油狀大便、嘔吐、抑郁、腿疼、腳腫脹等等。如果攝取更多脂肪，此類副作用可能會更嚴重。[10]苯丁胺改變大腦中的血清素含量，從而抑制食欲。但是它可能增高血壓和心率，并刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)，這些也是安非他明所具有相同副作用。[11]西布曲明可以抑制去甲腎上腺素、血清素和多巴胺等神經(jīng)傳遞素的再吸收，從而在大腦中引起食欲抑制。然而，它可能導致大量的副作用，包括腹部疼痛、焦慮、便秘、抑郁、頭痛、失眠、關節(jié)痛、反胃、神經(jīng)過敏、胃痛等等。此外，最近一份關于西布曲明(Reductil)與心臟死亡有關的報告使安全問題成為一個關鍵問題。[12]相應地，理想的肥胖治療應該能夠選擇性地僅減少體內(nèi)脂肪，而不影響肌肉和骨骼，在成功的體重下降后能夠維持體重，并且最重要的是，沒有長期用藥所致的副作用。[13]為了開發(fā)能夠解決上述問題并且同時還減少體內(nèi)脂肪和體重的減肥藥物，本發(fā)明的發(fā)明人研究了歷史悠久的中草藥的減肥效果。[14]關于中草藥的減肥效果，韓國專利第10-2004-0065427Al號公開了包含萬年蒿寡糖、AIP1(萬年蒿多糖組分1)的生物健康產(chǎn)品，用于改進肥胖的內(nèi)分泌生理代謝能力，并且韓國專利第10-2005-83066Al號描述了一種減肥食物，其包括杜仲提取物或桑樹提取物。[15]作為辛苦研究的結果，一種包含蜜蜂花提取物的組成物、一種包含蜜蜂花提取物和桑葉提取物的組成物、一種包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的組成物對于減少體重和體內(nèi)脂肪具有顯著的效果，從而完成了本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容技術問題[16]本發(fā)明的一個目的是提供一種包含蜜蜂花提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。本發(fā)明的另一個目的是提供一種包括蜜蜂花提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物和桑葉提取物的混合物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。本發(fā)明的再一個目的是提供一種包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的混合物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。技術方案[17]本發(fā)明提供一種包含蜜蜂花提取物作為活性成分的減肥組成物。[18]在本發(fā)明的一個實施例中，相對于100份按重量計的組成物，上述減肥組成物可以包括0.1100份按重量計的蜜蜂花提取物。[19]此外，本發(fā)明提供一種包含蜜蜂花提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物。[20]在本發(fā)明的一個實施例中，相對于100份按重量計的組成物，上述減肥組成物可以包括0.1-99份按重量計的蜜蜂花提取物和0.1~99份按重量計的桑葉提取物。[21]此外，本發(fā)明提供一種包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物。[22]在本發(fā)明的一個實施例中，相對于100份按重量計的組成物，上述減肥組成物可以包括0.1-99份按重量計的蜜蜂花提取物、0.1~99份按重量計的蒿提取物和0.199份按重量計的桑葉提取物。[23]在本發(fā)明的另一個實施例中，上述減肥組成物可以按1~3:0.1~1:13的凈重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物。[24]以上或以下使用的術語"組成物"應該包括由特定成分的混合物直接或間接形成的任何產(chǎn)物，以及包含特定成分的產(chǎn)物。[25]"蜜蜂花"是一種唇形科多年生草本植物，其通稱或俗稱又名為擰檬香薄荷、香脂草、抗水腫植物等等。蜜蜂花提取物包括類黃酮、蔽酸、精油、醇糖苷和酚類化合物等等、咖啡酸的衍生物等。迷迭香酸是一種非揮發(fā)性成分，是一種主要的蜜蜂花黃酮。己知迷迭香酸具有非常強的消炎和解熱特性，并且蜜蜂花香精油具有豐富的藥物特性，尤其是對于抑郁、神經(jīng)性頭痛、記憶力下降、神經(jīng)痛、發(fā)熱等等。此外，已知蜜蜂花香精油還可應用于鎮(zhèn)靜、抗菌、抗病毒、抗氧化和抗激素。目前，蜜蜂花的干提取物被用作血液循環(huán)促進劑成分。[26]對于本發(fā)明，術語"蜜蜂花"可以包含任何類型的蜜蜂花物種，包括香蜂草。[27]"蒿"是一種菊科多年生草本植物。其具有解熱、消炎、鎮(zhèn)痛、去濕等療效，并一直用于治療黃疸、排尿紊亂、膿腫和疥瘡，以及婦科病。蒿包含多種成分，包括濱蒿內(nèi)酯、毛蒿素、茵陳烯酮、茵陳烯、茵陳素等等。特別是，已知濱蒿內(nèi)酯能夠增加膽汁分泌，并促進膽紅素排泄，改善肝功能，可用于酒精解毒、抗氧化、抗菌和抗癌。[28]對于本發(fā)明，術語"蒿"可以包含任何種類的蒿物種，包括茵陳蒿、萬年蒿、魁蒿、黃花蒿、青蒿、苦艾、牡蒿、蛔蒿等等。[29]"桑葉"是桑物種的葉子，其具有預防腦溢血、解熱、改善視覺靈敏度的功效，并且可用于發(fā)熱、頭痛、紅眼病、多飲等的治療。桑葉包含黃酮類化合物，包括蕓香苷、槲皮苷、異槲皮苷和桑甙；以及昆蟲變態(tài)激素，包括牛膝蛻皮酮、蛻皮甾酮等等。已知桑葉提取物可用于實現(xiàn)降低血糖的功效(韓國專利第10-1998-0021670Al號)。)[30]對于本發(fā)明，術語"桑葉"可以包含任何種類的桑物種的葉子，包括桑樹葉子。[31]本發(fā)明的組成物可以包括其他減肥成分，以及一種或多種上述草本提取物。[32]此外，本發(fā)明的組成物可進一步包含至少一種符合一般標準和規(guī)范的衛(wèi)生保健物質(zhì)或成分，包括食用纖維、綠茶、人參等等，或其他安全的食物添加劑，例如適量的維生素、礦物質(zhì)等等。[33]上述食用纖維可以是洋車前子殼、纖維素、半纖維素、結晶纖維素、木質(zhì)素、果膠、褐藻酸、海藻酸、果阿膠、阿拉伯樹脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖和難消化的麥芽糖糊精中的至少一種纖維。[34]上述綠茶可以是綠茶粉、綠茶提取液或綠茶提取液粉末。[35]此外，上述人參可以是人參粉、人參提取液或人參提取液粉末。[36]此外，本發(fā)明的組成物可進一步包括諸如維生素A、維生素BpB2、維生素B3、維生素B6、維生素B12、葉酸、維生素C、維生素D:素E中的至少一種維生素；諸如銅、f丐、鐵、鎂、鉀、鋅等礦物質(zhì)；量的其他安全食物添加劑。[37]然而，除活性成分以外的成分含量并沒有特別的限制，相對于100份按重量計的組成物，這些成分的含量范圍一般在0~98份的范圍內(nèi)。[38]在制備本發(fā)明的組成物時，可以購買或使用傳統(tǒng)方法來制備草本提取物。[39]提取過程中可以使用任何干燥、非干燥或干燥和非千燥草本的混合物。[40]本領域中的技術人員可以將上述草本的提取物用作提取液或提取液粉末。對于提取，可以根據(jù)傳統(tǒng)干燥方法對草本進行干燥、干燥并切片或干燥并研成粉末，然后通過傳統(tǒng)方法進行提取，例如熱水浸提法或有機溶劑提取法。還可以使用市場上可以買到的提取液粉末。[41]例如，可以將草本切成細片，使用草本的3~20倍的水、低級醇或其混合溶劑或者有機溶劑，在室溫100°C下浸泡大約6小時~10天，重復提取切片的草本15次，然后將提取液在真空中過濾和濃縮或冷凍干燥，從而制備草本提取物?？梢酝ㄟ^傳統(tǒng)方法來處理提取，例如冷水浸軟提取、超聲波降解提取或回流提取。[42]上述低級醇可以包括CM醇，上述有機溶劑可以包括非極性溶劑，例如乙酸乙酯、氯仿、己烷和二氯甲烷。為了獲得適當?shù)奶崛〗Y果，最好使用草本的3倍以上的溶劑。但是如果溶劑量超過草本的20倍，相比于提取物量，很可能會過度消耗溶劑。[43]本發(fā)明的組成物可以根據(jù)該組成物的用途以任何形式使用，例如，用于減少體重和體內(nèi)脂肪的藥物成分或保健品成分。[44]本發(fā)明的醫(yī)藥組成物可以制備為任何形式，例如顆粒、粉末、片劑、包衣片劑、膠囊、藥丸、糖漿、滴劑、溶液、混懸劑和乳劑，或者活性成分的緩釋制劑。[45]本發(fā)明的組成物可進一步包括一種或多種醫(yī)藥或生理上可接受的載體，這些載體將適當配制以便于給藥。例如，醫(yī)藥或生理上可接受的載體可以是鹽水、熱壓水、林格氏液、緩沖鹽水、葡萄糖、麥芽糖糊精、甘油、乙醇及其混合物。如有必要，本發(fā)明的組成物可以包括傳統(tǒng)添加劑，例如抗氧劑、緩沖劑和抗菌反腐物質(zhì)。本發(fā)明的組成物還可以包括醫(yī)藥或生理上可接受的添加劑，例如稀釋劑、分散劑、表面活性劑、溶劑、崩解劑、甘味劑、粘合劑、涂層劑、發(fā)泡齊U、滑潤劑、助流劑或芳香劑。通過使用傳統(tǒng)方法或RemingtonsPharmaceuticalScience(MackPublishingCompany出版，EastonPA)的書面文本，本發(fā)明的組成物可以根據(jù)疾病或成分配制成任何所需的形式。[46]本發(fā)明的組成物可以根據(jù)傳統(tǒng)方法來通過各種途徑給藥，包括口服、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、胸腔內(nèi)、透皮、鼻腔、吸入、直腸、眼部和皮下導入。[47]本發(fā)明的保健食品組成物可以采用任何食物形式。例如，可以根據(jù)本領域中的傳統(tǒng)方法，將其與載體一起干燥，然后制作為膠囊，或者加工為片劑、顆粒、粉末、飲料、粥等等。[48]包含本發(fā)明的組成物的食物示例包括肉類、茶、飲料、快餐、點心、面條、糖果、巧克力、冰淇淋、口香糖、維生素組合、功能食品等等。[49]本發(fā)明的組成物可用于抑制體重和體內(nèi)脂肪的增加以實現(xiàn)減肥。[50]本發(fā)明提供一種抑制肥胖的方法，其包括給予接受治療者所需的有效量的減肥組成物，該組成物包含蜜蜂花提取物。此外，本發(fā)明提供一種抑制肥胖的方法，其包括給予接受治療者有效量的減肥組成物，該組成物包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物。在這些方法中，有關減肥組成物的說明與上面相同。[51]將本發(fā)明的組成物給予轉基因肥胖老鼠和高脂肪食物導致的肥胖老鼠5周以后，可以發(fā)現(xiàn)老鼠的體內(nèi)脂肪和性腺脂肪減少了。此外，進一步包括諸如食用纖維、綠茶、人參等輔助成分的本發(fā)明的組成物表現(xiàn)出對減肥作用的協(xié)同效應，例如體重減少和體內(nèi)脂肪及性腺脂肪減少。[52]此外，當將本發(fā)明的組成物給予轉基因肥胖老鼠和高脂肪食物導致的肥胖老鼠時，血液膽固醇水平和與肥胖有關的血糖水平降低了。[53]此外，在給予本發(fā)明的組成物時，不存在脂肪細胞增生的跡象，相反，脂肪細胞的大小和度量減小了，并且肝臟中的脂質(zhì)液泡數(shù)量和大小減小了，從而降低了肝臟中的脂質(zhì)積累。[54]此外，在人體臨床試驗中，體重、體內(nèi)脂肪百分比、內(nèi)臟脂肪、載脂蛋白B濃度、總膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率和低密度脂蛋白膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率顯著減少，并且動脈硬化指數(shù)得到改善，肌肉質(zhì)量得到了增強。[55]本發(fā)明的活性成分(蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物)本身具有很少的毒性和副作用，從而使本發(fā)明的組成物可長期安全用藥。[56]在決定本發(fā)明的組成物的用量時，蜜蜂花、蒿和桑葉提取物的優(yōu)選每日用量分別為0.1200毫克/千克、0~200毫克/千克和0~200毫克/千克。用量可通過各種因素確定，例如病人癥狀的種類和嚴重性、活性成分的含量、其他成分的含量和種類、配方類型、病人的參數(shù)(年齡、體重、健康狀況、性別)、食物、服藥時間、給藥途徑、組成物比率、治療時間和其他同服藥物。[57]如上所述，蜜蜂花提取物具有突出的減肥效果，包含蜜蜂花提取物、桑葉提取物的混合物和包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的混合物對蜜蜂花提取物本身具有優(yōu)異的效果。因而，本發(fā)明提供一種將蜜蜂花提取物用于生產(chǎn)減肥組成物的新穎用法、一種將蜜蜂花提取物和桑葉提取物的混合物用于生產(chǎn)減肥組成物的新穎用法，以及一種將蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的混合物用于生產(chǎn)減肥組成物的新穎用法。在這些用法中，減肥組成物的說明與上面相同。[58]從下面詳細描述的示例中，可以明顯看出本發(fā)明的優(yōu)點和特性以及揭示這些優(yōu)點和特性的方法。然而，應該清楚理解的是，本發(fā)明并不限于此，而是可以以各種其他方式實施。顯而易見，以下示例旨在完善本
發(fā)明內(nèi)容，以及向技術人員完整指出發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍僅由權利要求書限定。[59]以下示例旨在提供本發(fā)明的進一步說明，不應理解為對本發(fā)明范圍的限制。[60]圖1是顯示轉基因肥胖老鼠在服用本發(fā)明的組成物之后的體重降低情況圖；[61]圖2是顯示高脂肪食物導致的肥胖老鼠在服用本發(fā)明的組成物之后的體重降低情況圖；[62]圖3是顯示本發(fā)明的組成物對與肥胖有關的血糖水平影響的效果圖；[63]圖4是顯示本發(fā)明的組成物對皮下脂肪細胞影響的效果圖；[64]圖5是顯示本發(fā)明的組成物對轉基因肥胖老鼠肝臟中的脂質(zhì)積累影響的效果圖；[65]圖6是顯示臨床試驗中服用本發(fā)明的組成物前后，人體的體重、體內(nèi)脂肪和無脂肪體重的變化情況圖；[66]圖7是顯示臨床試驗中服用本發(fā)明的組成物前后，人體的內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪的變化情況圖。具體實施方式[67]示例1.配方1的制備[68]包含活性成分的膠囊的制作方法如下。[69]將25克香蜂草提取物制備為膠囊配方(以下根據(jù)傳統(tǒng)封裝方法將其稱為"示例1")。[70]該膠囊的成分如下。[71]香蜂草提取物25克[72]符合質(zhì)量標準的輔料[73[74:[75成膠囊配方(以下根據(jù)傳統(tǒng)封裝方法稱為"示例2"),[76:[77[78[79[80[81[82合[83[84[85[86[87[88[89[卯[91[92[93[94[95[96示例2.配方2的制備包含活性成分的膠囊的制作方法如下。將10克香蜂草提取物和10克桑樹葉子提取物混合，并將該混合物制備該膠囊的成分如下。香蜂草提取物10克桑樹葉子提取物10克符合質(zhì)量標準的輔料示例3.配方3的制備包含活性成分的膠囊的制作方法如下。將10克香蜂草提取物、5克茵陳蒿提取物和10克桑樹葉子提取物混并將該混合物制備成膠囊配方(以下根據(jù)傳統(tǒng)封裝方法將其稱為"示例3"該膠囊的成分如下。香蜂草提取物10克茵陳蒿提取物5克桑樹葉子提取物10克符合質(zhì)量標準的輔料示例4.配方4的制備包含活性成分的液體制劑的制作方法如下。將0.1克香蜂草提取物、0.05克茵陳蒿提取物和0.1克桑樹葉子提取物牟在蒸餾水中以產(chǎn)生1000單位的配方(以下稱為"示例4")。香蜂草提取物10克茵陳蒿提取物5克桑樹葉子提取物10克符合質(zhì)量標準的蒸餾水示例5.配方5的制備包含活性成分和食用纖維的配方的制作方法如下。[97]將6克香蜂草提取物、4克茵陳蒿提取物、6克桑樹葉子提取物和84克食用纖維(魔芋甘露聚糖、難消化的麥芽糖糊精)混合以產(chǎn)生該配方(以下稱為"示例5")。[98]香蜂草提取物6克[99]茵陳蒿提取物4克[100]桑樹葉子提取物6克[101]魔芋甘露聚糖12克[102]不消化的麥芽糖糊精72克[103]示例6.配方6的制備[104]包含活性成分和綠茶提取物的配方的制作方法如下。[105]將6克香蜂草提取物、4克茵陳蒿提取物、6克桑樹葉子提取物和84克綠茶提取物(包括20%的兒茶素)混合以產(chǎn)生該配方(以下稱為"示例6")。[106]香蜂草提取物6克[107]茵陳蒿提取物4克[108]桑樹葉子提取物6克[109]綠茶提取物84克[110]示例7.配方7的制備[111]包含活性成分和人參提取物的配方的制作方法如下。[112]將6克香蜂草提取物、4克茵陳蒿提取物、6克桑樹葉子提取物和4克人參提取物粉末(人參含量110毫克/克)混合以產(chǎn)生該配方(以下稱為"示例7，，)。[113]香蜂草提取物6克[114]茵陳蒿提取物4克[115]桑樹葉子提取物6克[116]人參提取物粉末4克[117]比較示例包含蒿提取物和桑葉提取物的配方的制備。[118]包含活性成分的膠囊的制作方法如下。[119]將5克茵陳蒿提取物和10克桑樹葉子提取物混合以產(chǎn)生該配方(以下稱為"比較示例")。[120]膠囊的成分如下。[121]茵陳蒿提取物5克[122]桑樹葉子提取物10克[123]實驗示例1.轉基因肥胖老鼠的減肥效果(ob/ob老鼠)[124]通過向轉基因肥胖老鼠口服給藥來觀察上述配方的減肥效果。[l25]將五周大的雄性肥胖老鼠(B6.V-Lep<ob>，JacksonLaboratory)用于實驗，經(jīng)過幾天的調(diào)整期后，向?qū)φ战M給予食用鹽溶液，而向治療組給予溶解在鹽溶液中的上述示例17中的每一種示例。[126]對于比較配方，將25毫克比較示例溶解在10毫升鹽溶液中，在5周的時間內(nèi)，每天以口服的方式將該溶液的0.4單位給予每只老鼠，該溶液設計為包含50毫克/千克的活性成分。[127]對于配方1、2和3，將25毫克每種示例溶解在10單位的鹽溶液中，并在5周時間內(nèi)每天以口服方式給予每只老鼠0.4單位的溶液，該溶液設計為包含50毫克/千克的活性成分。[128]對于配方4，將40毫克的示例4溶解在160單位的鹽溶液中，并在5周時間內(nèi)作為飲用水提供給老鼠，該溶液設計為包含40毫克/千克的活性物質(zhì)。[129]對于配方5，將1.56克的示例5溶解在100單位的鹽溶液中，并在5周時間內(nèi)每天以口服方式給予每只老鼠0.4單位的溶液，該溶液設計為包含50毫克/千克的活性成分。[130]對于配方6，使用100單位的鹽溶液懸浮1.56克的示例6，并在5周時間內(nèi)每天以口服方式給予每只老鼠0.4單位的溶液，該溶液設計為包含50毫克/千克的活性成分。[131]對于配方7，使用100單位的鹽溶液懸浮312.5毫克的示例7，并在5周時間內(nèi)每天以口服方式給予每只老鼠0.4單位的溶液，該溶液設計為包含50毫克/千克的活性成分。[132]從示例用藥的那一天開始每天測量體重，并通過估計老鼠在整個治療期間消耗的食物量來確定食物攝入量。[133]在5周之后，收集血樣以測量血糖，通過頸部脫臼犧牲動物，獲取、稱量并在液態(tài)氮中快速冷凍脂肪組織，并在-80°C下保存直至使用。下面的表1描述了測量結果。[134]表丄薦基像忠,老^護游MT資榮(ToM^老廚J<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>[135]如表1所示，與對照組相比，使用示例1的治療組平均體重減少了6°/。，體增重減少了20%，尤其是皮下脂肪減少了7%，性腺脂肪減少了5%。[136]與對照組相比，使用示例2的治療組平均體重減少了7%，體增重減少了21%，尤其是皮下脂肪減少了10%，性腺脂肪減少了6%。[137]與對照組相比，使用示例3的治療組平均體重減少了8%，體增重減少了27%，尤其是皮下脂肪減少了15%，性腺脂肪減少了7%。[138]與使用包含蒿提取物和桑葉提取物的比較示例的治療組的皮下脂肪減少比率相比，使用包含蜜蜂花提取物的示例1和2的治療組的減肥效果得到了增強。[139]此外，實驗表明，包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的組成物具有突出的減肥效果，可以顯著減少體內(nèi)脂肪。[140]特別是，當將保持其活性成分含量的示例3與諸如食用纖維、綠茶或人參等功能食物成分相結合時，可以提高減肥效果。[141]至于體內(nèi)脂肪(皮下脂肪和性腺脂肪)的減少，在示例3的基礎上，包含食用纖維的示例5減少了135%，包含綠茶提取物的示例6減少了124%，包含人參提取物粉末的示例7減少了112%，從而證明了減肥效果的增強。[142]此外，圖3描述了將示例3用藥35天的體重變化情況，與對照組相比，治療組的體重減少了。[143]因此，可以驗證本發(fā)明的組成物對于通過減少體重(尤其是體內(nèi)脂肪)來實現(xiàn)減肥是非常有效的。[144]實驗示例2.高脂肪食物導致的肥胖老鼠的減肥效果[145]觀察本發(fā)明的組成物對于高脂肪食物導致的肥胖老鼠的減肥效果。[146]使用六周大的雄性老鼠(C57BL/6J小鼠，JacksonLaborator)來進行實驗，高脂肪食物(15%[wt/wt]的脂肪)由日本的OrientalYeast公司生產(chǎn)。在經(jīng)過幾天的調(diào)整期后，在16周的時間內(nèi)，僅給對照組喂養(yǎng)高脂肪食物，而對治療組則喂養(yǎng)分別補充了示例1~7的高脂肪食物。[147]從示例用藥的那一天開始每天測量體重，并通過估計老鼠在整個治療期間消耗的食物量來確定食物攝入量。[148]在16周之后，收集血樣并通過頸部脫臼犧牲動物，獲取、稱量并在液態(tài)氮中快速冷凍脂肪組織，并在-80°C下保存直至使用。結果在表2中說明。[149]^2.庸廢嚴會激導教游^^^嚴《57肌/6/V、嚴J游減f資菜<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>性腺脂肪(g)0.41±0.130.33±0.1120%示例5體重(g)32.2±2.4029.9±2.257%體增重(g)11.U2.658.7±1.9821%皮下脂肪(g)0.82±0.200.56±0.2132%性腺脂肪(g)0.41±0.130.26±0.0837%示例6體重(g)32.2±2.4029.7±2.687%體增重(g)11.1±2.659.0±1.5719%皮下脂肪(g)0.82±0.200.58±0.1929%性腺脂肪(g)0.41±0.130.27±0.1134%示例7體重(g)32.2±2.4030.2±3.216%體增重(g)11.1±2.659.2±2.4317%皮下脂肪(g)0.82±0.200.6±0.1227%性腺脂肪(g)0.4U0.130.3±0.1127%[150]與對照組相比，使用示例1的治療組平均體重減少了4%，體增重減4了13%,特別是皮下脂肪減少了20%，性腺脂肪減少了16%。[151]與對照組相比，使用示例2的治療組平均體重減少了4%，體增重減少了13%，特別是皮下脂肪減少了22%,性腺脂肪減少了20%。[152]與對照組相比，使用示例3的治療組平均體重減少了6%，體增重減少了16%，特別是皮下脂肪減少了24%，性腺脂肪減少了27%。[153]這些結果證明，包含蜜蜂花提取物的本發(fā)明的組成物明顯減少了體內(nèi)脂肪，增強了減肥效果。[154]至于體內(nèi)脂肪(皮下脂肪和性腺脂肪)的減少，在示例3的基礎上，包含食用纖維的示例5減少了132%，包含綠茶提取物的示例6減少了123%，包含人參提取物粉末的示例7減少了107%，從而證明了如實驗示例1所示的增強減肥效果。[155]此外，圖2顯示了將示例3用藥16周的過程中的體重變化情況，證明了治療組的體重增長率比對照組的體重增長率慢。[156]因此，可以驗證本發(fā)明的組成物對于通過減少體重(尤其是體內(nèi)脂肪)來實現(xiàn)減肥是非常有效的。[157]實驗示例3.血液和組織學分析[158]使用本發(fā)明的組成物進行口服用藥，分析轉基因肥胖老鼠中的血液和組織變化。[159]首先，在5周時間內(nèi)將示例3給予轉基因肥胖(ob/ob)老鼠，并收集其血液以測量血膽固醇水平的變化。[160]對于組織學分析，將皮下脂肪冷凍切片，并使用四氧化鋨染色，以測量脂肪細胞的大小和數(shù)量。將肝臟固定在4%的戊二醛中，并以日常方法加工以進行石蠟切片。切成片并使用2%的四氧化鋨染色。[161]3-1)血膽固醇分析[162]使用示例3來給藥的治療組的血膽固醇水平為128±15.2mg/dl，而僅接收鹽溶液(賦形劑)的對照組的血膽固醇水平為140±17.6mg/dl，因此，本發(fā)明的組成物可以將血膽固醇減少9%。[163]3-2)血糖分析[164]如圖3所示，使用示例3來給藥的治療組的血糖水平為244.4±115.2mg/dl，而對照組的血糖水平為362.1±129.7mg/dl，證明治療組的血糖水平減少了33%。[165]因此，驗證了本發(fā)明的組成物可以減少與肥胖有關的血膽固醇水平和血糖。網(wǎng)3-3)給予本發(fā)明的組成物的肥胖老鼠的組織學分析[167]在染色后分析對照組和治療組的皮下脂肪細胞大小。[168]如圖4所示，與治療組相比，對照組的脂肪細胞變得肥厚，通過使用圖像分析儀計算脂肪細胞的大小發(fā)現(xiàn)，可以發(fā)現(xiàn)其大小顯著減小了46%，從11.2±2.9減小到6.1±1.5。[169]此外，與對照組相比，通過四氧化鋨染色的肝臟中的黑色脂質(zhì)液泡的大小和數(shù)量顯著減小了，如圖5所示。脂質(zhì)液泡的面積從5.4±0.5顯著減小83%，減至0.92±0.1(表3),從而驗證示例3抑制了肝臟中的脂肪積累。[170]表義浙應嚴潘虜浙,^^逾犬/力效嚴聘對照組治療組減少比率脂肪細胞(面積，11.2±2.96.1±1.546%積累)脂質(zhì)液泡(占面積百分比)5.4±0.50.92±0.183%[171]相應地，實驗證明本發(fā)明的組成物具有減小脂肪細胞大小和抑制肝臟中的脂質(zhì)積累的減肥效果。[172]因此，本發(fā)明的組成物可有效地用作減肥組成物，以抑制體增重和體內(nèi)脂肪增加。[173]實驗示例4.本發(fā)明的組成物的減肥效果臨床試驗[174]本發(fā)明的組成物的減肥效果已通過臨床試驗進行了驗證。[175]4-1.人體收集和試驗方法[176]人體是從志愿者公開收集的，這些志愿者年齡為1960周歲，具有110%以上的PIBW(理想體重百分比)，或具有男性腰圍大于90厘米、女性腰圍大于80厘米腹部肥胖。[177]任何具有嚴重病史、不可控制的中/高血壓或甲狀腺疾病或者當前正處于治療過程中、妊娠期、計劃懷孕或處于泌乳期、診斷為糖尿病并使用藥物療法治療、或服用會影響體重的藥物(Xenical、Reductil、Deuretics、抗抑郁藥、食欲抑制藥等等)的志愿者、AngioLab，Inc.的員工、研究參與人員和學生及其熟人已排除在外。[178]在此初步研究中，僅包括試驗組以評估千預前后的效果，而沒有包括安慰劑組?？偣灿?5個主體參與該試驗12周，并使用統(tǒng)計分析對結果進行了處理(表4)。[179]在12周時間內(nèi)，每個主體每天服用兩粒膠囊三次，其中包含250毫克示例3。[180]完成12周試驗的參與者的男女比率為3:22，平均年齡為31.8±1.51(19-47)，平均PIBW為133.3±3.17%，平均體重指數(shù)(BMI)為28.4±0.67kg/m2(23.5-34.7)，平均體內(nèi)脂肪為39.4±1.46%。此外，當前吸煙和飲酒的人數(shù)比率分別占20%和72%。[181]4-2.人體測量指標和血壓變化[182]如表4所示，當開始此研究時，平均體重為75.2±2.11公斤，12周以后，平均體重降至74.0±2.18公斤(pO.05)，這表明了平均PIBW和平均BMI同時減少的統(tǒng)計顯著性。[183]12周以后，體重從39.4±1.46%減輕至37.2士1.38%(pO.Ol)，而無脂肪體重從45.3±1.40千克增至46.2±1.40千克(p<0.05)，從而證明身體構成得到顯著改善。[184]12周以后，平均腰圍發(fā)生了某種程度的減小，臀圍則顯著減小(pO.Ol)。此外，12周以后，平均舒張血壓在正常范圍內(nèi)增高(pO.Ol)。[185]表4廁本發(fā)欲微成激薪就乂伴體微微屋教<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>[186]4-3.CT掃描儀分析的脂肪和肌肉面積變化[187]通過計算機體層成像(CT)分析服用本發(fā)明的組成物前后的四個不同身體部位的脂肪和肌肉面積變化。[188]如表5所示，CT在第一腰椎處掃描的上腹部中的脂肪沒有表明任何顯著變化，但是CT在第四腰椎處掃描的下腹部中的脂肪減少了。內(nèi)臟脂肪顯著減少了9.5%(p<0.01)，并且內(nèi)臟脂肪和皮下脂肪的比率急劇下降(pO.01)(圖7、表5)。[189]表5.四個不同身體部位的脂肪和肌肉面積變化<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>[190]4-4.血脂、脂蛋白、空腹血糖和胰島素濃度的變化[191]如表6所示，甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的濃度沒有變化，但是載脂蛋白B顯著減少了(p<0.05)。[192]然而，總膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇的比率(p<0.05)和低密度脂蛋白膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇的比率(p<0.05)顯著下降，證明動脈硬化指數(shù)(p<0.05)得到了顯著改善。[193]表6.廁本發(fā)薩艦激躲微、微船鵬微嚴戯激教眾<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>平均值士標準誤差，與0周值相比，*p<0.05_[194]4-5.血清、谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶、尿素氮和肌酸酐、血紅蛋白和血小板濃度變化[195]作為肝功能指數(shù)的谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶濃度，以及作為腎功能指數(shù)的尿素氮和肌酸酐濃度在正常范圍內(nèi)，在使用本發(fā)明的配方后沒有變化，如表7所示。[196]然而，紅血球(p<0.05)和白血球(pO.OOl)濃度在12周以后在正常范圍內(nèi)升高了。沒有觀察到血紅蛋白濃度和血細胞比容以及血小板數(shù)量的變化(表7)。[197]表7.蕭本發(fā)猶資成激膨顏體眾斜嫂眾<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>平均值±標準誤差，與0周值相比，*p<0.05，**p<0.001[198]4-6.膳食攝入和能量消耗分析[199]表8表明膳食攝入、營養(yǎng)素攝入和能量消耗的0周和12周值之間沒有顯著區(qū)別。[200]表&每^殷教著蘑乂截總游虜力激奔受治療者(n=25)0周12周<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>TEE^總的能量消耗TCI^總的熱量攝入平均值±標準誤差，0周值和12周值之間沒有特別的變化。[201]4-7.氧化低密度脂蛋白和脂類過氧化物的濃度變化[202]使用本發(fā)明的組成物以后，氧化低密度脂蛋白、丙二醛(血液中的脂類過氧化物)和8-epi-PGF2(尿液中的脂類過氧化物)的濃度沒有變化(表9)。[203]表9.髯眾爍^^^^l^^^7/^^i^奪眾^^^"^^^"眾<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>[204]4-8.異常反應狀態(tài)[205]在參與此臨床試驗的25個主體中，沒有觀察到與攝入示例3有關的異常反應。工業(yè)適用性[206]如上所述，本發(fā)明的組成物可以減少體重和體內(nèi)脂肪。本發(fā)明的組成物可以降低血膽固醇水平和與肥胖有關的血糖水平。[207]此外，本發(fā)明的組成物通過減小脂質(zhì)液泡的大小和數(shù)量，從而可以抑制脂肪細胞肥大和肝臟中的脂質(zhì)積累。[208]在人體臨床實驗中，本發(fā)明的組成物表明體重、PIBW、體內(nèi)脂肪(尤其是內(nèi)臟脂肪)、載脂蛋白B濃度、總膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率和低密度脂蛋白膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率顯著減少，并且動脈硬化指數(shù)得到改善，肌肉質(zhì)量得到增強。[209]因此，本發(fā)明的組成物可有效地用作減肥成分，用于減輕體重和抑制腹部脂肪，特別是內(nèi)臟脂肪。權利要求1.一種減肥組成物，包括蜜蜂花提取物作為活性成分。2.如權利要求1所述的組成物，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1~100份按重量計的蜜蜂花提取物。3.—種減肥組成物，包括蜜蜂花提取物和桑葉提取物作為活性成分。4.如權利要求3所述的組成物，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1~99份按重量計的蜜蜂花提取物和0.199份按重量計的桑葉提取物。5.—種減肥組成物，包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物作為活性成分。6.如權利要求5所述的組成物，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1~99份按重量計的蜜蜂花提取物、0.199份按重量計的蒿提取物和0.199份按重量計的桑葉提取物。7.如權利要求5所述的組成物，其中該減肥組成物按13:0.11:13的凈重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物。8.如權利要求1至7中任何一項所述的組成物，其中該組成物進一步包括食用纖維、綠茶或人參中的至少一種。9.如權利要求8所述的組成物，其中食用纖維是洋車前子殼、纖維素、半纖維素、結晶纖維素、木質(zhì)素、果膠、褐藻酸、海藻酸、果阿膠、阿拉伯樹脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖、不消化的聚葡萄糖和不消化的麥芽糖糊精中的至少一種。10.如權利要求8所述的組成物，其中綠茶為綠茶粉、綠茶提取液或綠茶提取液粉末。11.如權利要求8所述的組成物，其中人參為人參粉、人參提取液或人參提取液粉末。12.—種將蜜蜂花提取物用于生產(chǎn)減肥組成物的用法。13.如權利要求12所述的用法，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1~100份按重量計的蜜蜂花提取物。14.一種將蜜蜂花提取物和桑葉提取物的混合物用于生產(chǎn)減肥組成物的用法。15.如權利要求14所述的用法，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1-99份按重量計的蜜蜂花提取物和0.1~99份按重量計的桑葉提取物。16.—種將蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的混合物用于生產(chǎn)減肥組成物的用法。17.如權利要求16所述的用法，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1-99份按重量計的蜜蜂花提取物、0.1~99份按重量計的蒿提取物和0.1~99份按重量計的桑葉提取物。18.如權利要求12所述的用法，其中該減肥組成物按13:0.11:13的凈重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物。19.如權利要求12至18中任何一項所述的用法，其中該組成物進一步包括食用纖維、綠茶或人參中的至少一種。20.如權利要求19所述的用法，其中食用纖維是洋車前子殼、纖維素、半纖維素、結晶纖維素、木質(zhì)素、果膠、褐藻酸、海藻酸、果阿膠、阿拉伯樹脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖和不消化的麥芽糖糊精中的至少一種。21.如權利要求19所述的用法，其中綠茶為綠茶粉、綠茶提取液或綠茶提取液粉末。22.如權利要求19所述的用法，其中人參為人參粉、人參提取液或人參提取液粉末。23.—種抑制肥胖的方法，其包括給予接受治療者所需的有效量的減肥組成物，該組成物包含蜜蜂花提取物。24.如權利要求23所述的方法，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1100份按重量計的蜜蜂花提取物。25.—種抑制肥胖的方法，其包括給予接受治療者有效量的減肥組成物，該組成物包括蜜蜂花提取物和桑葉提取物。26.如權利要求25所述的方法，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1-99份按重量計的蜜蜂花提取物和0.1~99份按重量計的桑葉提取物。27.—種抑制肥胖的方法，其包括給予接受治療者有效量的減肥組成物，該組成物包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物。28.如權利要求27所述的方法，其中相對于100份按重量計的組成物，該組成物包括0.1~99份按重量計的蜜蜂花提取物、0.1~99份按重量計的蒿提取物和0.1-99份按重量計的桑葉提取物。29.如權利要求27所述的方法，其中該減肥組成物按13:0.1~1:13的凈重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物。30.如權利要求23至29中任何一項所述的方法，其中該組成物進一步包括食用纖維、綠茶或人參中的至少一種。31.如權利要求30所述的方法，其中食用纖維是洋車前子殼、纖維素、半纖維素、結晶纖維素、木質(zhì)素、果膠、褐藻酸、海藻酸、果阿膠、阿拉伯樹脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖和不消化的麥芽糖糊精中的至少一種。32.如權利要求30所述的方法，其中綠茶為綠茶粉、綠茶提取液或綠茶提取液粉末。33.如權利要求30所述的方法，其中人參為人參粉、人參提取液或人參提取液粉末。全文摘要本發(fā)明提供一種包括蜜蜂花提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。此外，本發(fā)明提供一種包括蜜蜂花提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物和桑葉提取物的混合物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。此外，本發(fā)明提供一種包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物作為活性成分的減肥組成物、蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑葉提取物的混合物的用法，以及一種使用該組成物來抑制肥胖的方法。當將本發(fā)明的組成物給予轉基因肥胖老鼠和高脂肪導致的肥胖老鼠時，本發(fā)明的組成物可以減少體重、體內(nèi)脂肪和性腺脂肪，并降低血膽固醇水平和與肥胖有關的血糖水平。此外，本發(fā)明的組成物通過減小脂質(zhì)液泡的大小和數(shù)量，從而可以抑制脂肪細胞肥大，并抑制肝臟中的脂質(zhì)積累。此外，在人體臨床試驗中，本發(fā)明的組成物表明體重、PIBW、體內(nèi)脂肪(尤其是內(nèi)臟脂肪)、載脂蛋白B濃度、總膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率和低密度脂蛋白膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率顯著減小，并且動脈硬化指數(shù)得到改善，肌肉質(zhì)量得到了增強。因此，本發(fā)明的組成物可有效地用作減肥成分，用于減輕體重和抑制腹部脂肪，特別是內(nèi)臟脂肪。文檔編號A61K36/53GK101277710SQ200680036456公開日2008年10月1日申請日期2006年10月9日優(yōu)先權日2005年10月5日發(fā)明者咸鐘千,李熙錫,金俊植,金敏英申請人:血管實驗室公司;金敏英