專利名稱::孤啡肽受體的高效全部和部分激動劑和拮抗劑的制作方法孤啡肽受體的高效全部和部分激動劑和拮抗劑發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及孤啡肽(N/OFQ)類似物,其可以調(diào)節(jié)孤啡肽受體(NOP受體)的活性,藥品組合物包括所述的多肽類似物以及其在治理所述受體相關(guān)的功能紊亂、病理現(xiàn)象或病理狀態(tài)的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
:-1994年一種新的稱為0RL1的受體被克隆了,這種受體的結(jié)構(gòu)與阿片受體相似;根據(jù)最新的世界藥理學(xué)大會(IUPHAR)的建議,這種受體最恰當(dāng)?shù)拿Q為阿片受體樣受體(NOP)。在1995年底發(fā)現(xiàn)其內(nèi)源配位體(N/OFQ)是一種十七肽(heptadecapeptide)與一些阿片類多肽(例如強啡肽A)類似,然而其并不與傳統(tǒng)的p(MOP),S(DOP)或k(KOP)類阿片受體綁定。NOP受體介導(dǎo)的細(xì)胞效果與傳統(tǒng)阿片受體引發(fā)的效果相似。從結(jié)構(gòu)的視點和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的視點看,盡管代表藥理學(xué)上一個明確的分支,N/OFQ-NOP多肽/受體系統(tǒng)屬于阿片族。1996-1998年間的進(jìn)行的一些研究顯示孤啡肽可以調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)的一些功能(疼痛、焦慮、學(xué)習(xí)、記憶、藥物濫用、食欲)和外周神經(jīng)的一些功能(血壓、心率、腎臟、消化道、泌尿和呼吸功能)(更多細(xì)節(jié)參見Massi^#21,2000)。從1996年開始本發(fā)明人進(jìn)行了一些關(guān)于N/OFQ-NOP體系的研究,識別了部分NOP受體配位體,例如i)N/OFQ(l-13)-NH2,其為與同孤啡肽天然配位體活性相同的最小功能片段(Calo等,歐洲藥理學(xué)期刊311,R3-5,1996),ii)N/OFQ-NH2其產(chǎn)生(特別是在體內(nèi))比N/OFQ更強烈更長效的效果(Rizzi等,NaunynSchmiedebergs藥理學(xué)文檔363,161-165.2001),iii)[Ty—]N/OFQ(l-13)-NH2,一個混合的激動劑,其作用在NOP以及傳統(tǒng)阿片受體上(Calo#■,加拿大生理和藥理期刊75,713-8,1997;Vamni寧,7Vmm戸&/zmz.e^6er^^^邀^^V^360,270-7,1999),iv)[Phe'(CHrNH)Gly2]N/OFQ(l-13)-NH2,一個選擇性NOP受體配位體,其表現(xiàn)為一個純拮抗劑、部分或全部激動劑,這是基于所研究的制劑/檢驗(Guerrini攀,類房秀理學(xué)谫辨123,163-5,1998;Okawa禁^^,秀謬學(xué),勢7^127,123-30,1999)-基于Calo等對于[Phe](CH2-NH)Gly2]N/OFQ(1-13)-NH2藥理學(xué)行為的詳細(xì)分析(多,21,935-47,2000),其排除這個化合物為真實的NOP部分激動劑,v)[Nphe^N/OFQ(l-13)-NH2,是第一純NOP受體競爭性拮抗劑(Calo^>炎房莠潘學(xué)谫辨129,1183-93,2000;Guerrini箏,秀激眾學(xué)谫T^15,2805-13,2000)。這些配位體的作用已經(jīng)通過一些體外體內(nèi)檢驗而表征(參見Calo等,炎嵐秀潘學(xué),菊75/129,1261-83,2000)。最近,Phe4殘基被(pF)Phe或(pN02)Phe所替代,因此得到有效的選擇性NOP激動劑(Guerrini攀,秀欽眾學(xué)激/^44,3956-64,2001)。其它感興趣的化合物,[Arg14,Lys15]N/OFQ,對于由HEK293細(xì)胞表達(dá)的人重組NOP受體的選擇性,其被鑒定為高效激動劑(超過N/OFQ17倍),(Okada寧,主激眾夢浙仝激激遝學(xué)^^^疆諷278,493-8,2000)。通過分離的對N/OFQ敏感的組織在體外以及在老鼠體內(nèi)對這個配位體的作用進(jìn)一步表征(Rizzi箏,秀潘學(xué)浙實邀洽^"學(xué)激賴300,57-63,2002)。同時Zhang等(Zhang等,,激眾學(xué),沐45,5280-5286,2002)描述了N/OFQ激動劑,特征在于2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)殘基在7和/或11位取代Ala殘基,并且有增加了的配位親合力和潛能。孤啡肽激動劑也被描述在WO99/07212,WO97/07208,WO99/03491,WO99/03880,和EP1422240。這個配位體的用途也被報告用于與痛覺過敏、神經(jīng)內(nèi)分泌功能、壓力、運動活性以及焦慮相關(guān)的疾病的治療/防治。孤啡肽的序列如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>圖l'.側(cè)腦室內(nèi)(i.C.V.,見于上翼片)或鞘內(nèi)(i.t.,見于下翼片)給藥N/OFQ(10nmol/鼠)和UFP-112(0.1nmol/鼠)的停藥試驗效果(參見Cal6等英國藥理學(xué)期刊.125,375-378,1998)。對照動物接受生理鹽水i.c.v.注射(2pl/鼠)。每一點代表至少4個試驗的平均值土標(biāo)準(zhǔn)平均值誤差。圖2:側(cè)腦室(i.c.v.)給藥N/OFQ(10nmol/鼠)和UFP-112(O.lnmol/鼠)對于老鼠的自發(fā)性運動活性效果的持續(xù)時間(參見Rizzi等,NaunynSchmiedebergs藥理學(xué)文檔363,161-165,2001)。照動物接受生理鹽水ix.v.注射(2)al/鼠)。每一點代表至少4個試驗的平均值士標(biāo)準(zhǔn)平均值誤差。圖3:電刺激后在老鼠的輸精管中N/OFQ和UFP-112等效濃度的效果的可逆性和動力學(xué)。輸精管由電刺激誘導(dǎo)的收縮由于UFP-112或N/OFQ的存在而被抑制。
發(fā)明內(nèi)容這里所用的術(shù)語具有本領(lǐng)域的已知的含義,例如IUPHAR關(guān)于受體的命名和藥物分類(Pharm.Rev.(2003)Vo155,No4,p.597)如下所述:效果-是一種概念,其表達(dá)不同激動劑產(chǎn)生的不同反應(yīng)的程度,甚至是占據(jù)受體的相同部分的時候。潛能-化合物活性的表達(dá)式,其根據(jù)產(chǎn)生己定義的效果所需要的濃度或量來限定對于激動經(jīng)潛能由pEC5o度量或者對于拮抗劑由pA2度量。本發(fā)明的目標(biāo)物是如通式(I)的孤啡肽類似物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>1其中Xaa1是Phe或N-芐基-甘氨酸(Nphe);表示位于頭兩個氨基酸殘基之間的結(jié)合物并且選自CO-NH、CH2-NH、CHrO;Xbb4是Phe或者(pX)Phe,其中"X"代表H、Cl、Br、I、F、N02、CN,"p"表示Phe苯環(huán)的對位;XcJ和Xdd11選自Ala、2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva)、2-氨基-2-乙基-丁酸(Deg)、2-氨基-2-丙基-戊酸(Dpg)、(CaCH3)Leu、(CaCH3)Vall、l-氨基-環(huán)丙基-羧酸(Ac3C)、l-氨基-環(huán)戊基-羧酸(Ac5c)和l-氨基-環(huán)己基-羧酸(Ac6C);Xee14和Xff15選自Arg、Lys、Orn、omoArg、二氨基丁酸、二氨基丙酸,或者Trp;R表示二肽Asn-Gln-NH2或Asn-Gln-OH或具有-NH2和-OH終端基團(tuán)之一的氨基酸Asn或-NH2或-OH終端基團(tuán)。另外,本發(fā)明包括通式(I)的化合物的藥物學(xué)可接受的鹽,特別是有機和無機酸鹽,例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、醋酸鹽、琥珀酸鹽、抗壞血酸鹽、酒石酸鹽、葡萄糖酸鹽、安息香酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽和硬脂酸鹽?;诒景l(fā)明的通式I的化合物具有的藥物活性甚至比已知的多肽配位體高100倍。因此可以假設(shè)一個基于通式I的換位的協(xié)同效應(yīng)位置1、4、7、11、14和15以及頭兩個氨基酸殘基之間的結(jié)合物。通式I化合物的更高活性以及特別首選化合物,優(yōu)選激動劑和基于親合力、潛能、蛋白酶抑制性、體外動力學(xué)以及體內(nèi)作用時間[(pF)Phe4、ib7、rg14、Lys15]N/OFQ-NH2被證明為更優(yōu)選的。優(yōu)選的通式(I)的化合物是,其中?是CO-NH或CHrNH或CHrO;Xaa1是Phe或Nphe,Xbb4是Phe或pX)Phe其中"(pX)"如前所定義,Xcc7和Xdd11如前所定義,Xee"和Xff"是Arg、Lys、Orn、omoArg或Trp;R是-NH2或-OH或Asn-NH2或Asn-OH或Asn-Gln-NH2或Asn-Gln-OH。更優(yōu)選的通式(I)的化合物是其中?是CO-NH或CH2-NH或CH2-0;Xaa1是Phe或Nphe;Xbb4是Phe或(pF)Phe或(pN02)Phe;Xcc7和Xdd11是Ala、2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva)、2-氨基-2-乙基-丁酸(Deg)、2-氨基-2-丙基-戊酸(Dpg)、(CaCH3)Leu、(QCH3)Val、1-氨基-環(huán)丙基-羧酸(AC3C)、l-氨基-環(huán)丙基-羧酸(AC5C)和1-氨基-環(huán)丙基-羧酸(Ac6c);Xee14和Xff15是Arg或Lys;R是Asn-Gln-NH2或-順2.通式(I)最優(yōu)選的多肽類似物是,其中可變殘基如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>其中,最優(yōu)選的化合物是指?是CO-NH或CH2-NH或CH2-0;Xaa1是Phe或Nphe;Xbb4isPhe或(pF)Phe或(pN02)Phe;Xcc7和Xdd11是Ala、2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva);Xee14是Arg;Xff5是Lys;R是Asn-Gln-NH2或-順2。如下所示a)H-Nphe-Gly-Gly-Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2b)H-Phe-Gly-Gly-(pF)Phe畫Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2c)H-Phe曙?-(CHrNH)-Gly-Gly-(pF)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2d)H-Phe--(CH2-0)-Gly-Gly-(pF)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2e)H-Phe-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg_Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2f)H-Phe--(CH2-NH)-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys_Ser-Ala-Arg-Lys曙Arg-Lys-Asn-Gln-NH2g)H-Phe--(CH2-0)-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2h)H-Nphe-Gly-Gly-Phe曙Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2i)H-phe-Gly-Gly人PF)phe-Thr-Gly,Aib-Arg-Lys-ser-Ala-Arg-Lys-Arg-Lys,NH2l)H-phe--(CH2-NH)-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-m)H-phe--(CH2-o)-Gly-Gly-(PF)phe-ThT-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Ala-Arg-Lys—Arg-Lys-NK2n)H-phe-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser畫Ala-Arg-Lys,A,rg-:Lys-MH2o)H-phe-,(CH2-NH)-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Ala-A.rg-JLys-A.rg-:Lys-NK2p)H-phe-,(CH26)-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-A.la-Arg-Lys-i\rg-lLys-NK2aa)H-Nphe畫Gly-Gly-phe-dlr畫Gly-Aib-Arg-Lys-ser-AiblArg-Lys-Arg-Lys-Asn,Gln-NK2bb)H-phe-Gly-Gly人PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-Arg-I.ys-A.rg<Lys-A.sn-Gln-ISS2cc)H-phe-人CH2-NM)-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib畫Arg-Lys-Ser-Aib-Arg—Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NK2基H-phe-,(CH2-o)-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-A,rg-lLys-A.rg-:Lys-A.sn-Gln-NM2ee)H-phe-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-Arg-Lys-Arg-t,ys-Asn-Gln-NH23H-phe!(CH2-NK)-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-A.rg'Lys-Arg-:Lys-Asn-Gln-NH2gg)H-phe--(CH2-0)-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Aib-Arg-Lys-Arg-Lys—Asn-Gln-NK2hh)H-Nphe-Gly-Gly-phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-Arg-Lys-Arg-LyslNH2ii)H-phe-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-Arg-Lys-Arg-Lys"NH2ll)H-phe--(CHrNM)-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-mm)H-phe--(CH26)-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-A.rg-:Lys-A.rg-:Lys-NK2nn)H-phe-Gly-Gly人PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-Arg-Loo)H-phe--(CH2-NH)-Gly-Gly-(PN02)phe-ThT-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-A.rg-lLys-A.rg-I,ys-NH2pp)H-phe--(CH2-0)-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Aib-Arg-Lys-Arg,Lys-NK2aaa)H-Nphe-Gly-Gly-phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys,Asn-Gln-NH2bbb)H-phe-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Iva-Arg-Lys-A.rg-:Lys-A.sn-Gln'NrH2ccphe--(CH2-NM)-Gly-Gly-(PF)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Iva-AI.g-Lys-ATg-Lys-Asn-Gln-NK2ddd)H-phe--(CH2-o)-Gly-Gly-(PF)phThr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Iva-Arg-:Lys-Arg-ILys-Asn-Gln-NH2eee)H-phe-Gly-Gly-(PN02)phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Iva-Arg-Lys-A.rg-ILys..Asn-Gln-NH2fff}H-Phe--(CH2-NK)-Gly-Gly-(PN02)phe-TKT-Gly-Aib-Arg-Lys-ser-Iva-Arg-Lys-ArgLysAsn-Gln-NH2ggg)H-Phe--(CH2-0)-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-Asn-Gln-NH2hhh)H-Nphe-Gly-Gly-Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2iii)H-Phe-Gly-Gly-(pF)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva隱Arg-Lys-Arg-Lys-NH2m)H-Phe--(CH2-NH)-Gly-Gly-(pF)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2mmm)H-Phe--(CHrO)-Gly-Gly-(pF)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2nnn)H-Phe-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib_Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2ooo)H-Phe--(CH2-NH)-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2ppp)H-Phe--(CH2-0)-Gly-Gly-(pN02)Phe-Thr-Gly-Aib-Arg-Lys-Ser-Iva-Arg-Lys-Arg-Lys-NH2基于本發(fā)明的多肽類似物可由已知的不同技術(shù)合成,例如Schroeder等"多肽"vol1,學(xué)術(shù)出版社,1965;Bodanszky等"多肽合成"Interscience出版社,1966;Barany&Memfield,"多肽;分析、合成、生物學(xué)",2,學(xué)術(shù)出版社,1980;E.AtheroneR.C.Sheppard,"固相多肽合成"牛津大學(xué)出版社IRL出版社1989;J.Jones,"多肽化學(xué)合成",克萊侖頓出版社,牛津大學(xué)1994.技術(shù)包括固相多肽合成或液相多肽合成,有機化學(xué)合成法或上述任意方法的組合。合成方法的選擇是基于所給定的多肽的組成。優(yōu)選的,所用的合成方法是固相工藝和傳統(tǒng)的液相工藝的組合,可以降低成本,特別是對于工業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)。更詳細(xì)的,所述方法包括i)在多肽鏈片斷溶液中合成,這是通過N-保護(hù)的氨基酸(適當(dāng)激活)順序耦合來到一個氨基酸或一個C-保護(hù)的多肽鏈,分離中間產(chǎn)物,然后選擇所述片斷的去保護(hù)的N和C-終端,重復(fù)耦合直到獲得所需要的多肽。需要的話所述鏈?zhǔn)侨ケWo(hù)的。ii)在不溶性的聚合物基材上從C-終端向N-終端固相合成多肽鏈。用無水氟酸或三氟酸水解以便將多肽從樹脂上移除,同時對側(cè)鏈去保護(hù)。在合成終點,多肽可以通過由適當(dāng)?shù)娜芤禾幚砘蛘呱V技術(shù)(例如HPLC)來提純和分離。基于本發(fā)明的作用在NOP受體上的多肽類似物是i)當(dāng)其具有[Phe1(CO-NH)Gly2]結(jié)構(gòu)時為完全激動劑,ii)當(dāng)其具有[Phe1(CH2-NH)Gly2]或[Phe1(CHrO)Gly2]結(jié)構(gòu)時為部分激動劑,其具有[Nphe1(CO-NH)GlyS]結(jié)構(gòu)時為純拮抗劑。另外,本發(fā)明涉及含有這里所描述的多肽類似物的藥物組合物,其可與藥物學(xué)可接受的載體和賦形劑組合。本發(fā)明的組合物以可注射制劑、膠囊、藥片、微粒、溶液、懸浮劑、糖槳、栓劑、鼻腔噴劑、霜、藥膏、凝膠、緩釋制劑或其它形式,通過口服、腸道、呼吸、直腸、蛛網(wǎng)膜下、膀胱內(nèi)或局部給藥。制備藥物組合物的原則和方法在本領(lǐng)域已知并且被描述,例如,Remington的制藥學(xué),18°版,馬克出版公司,Easton,Pa,1990?;诒景l(fā)明的藥物組合物所含有的多肽(或其衍生物)的有效量通常為0.001-100mg,優(yōu)選為0.01-10mg。日常劑量將根據(jù)病理/功能紊亂、年齡、性別和患者體重而改變,通常健康狀態(tài)和其它變換需要基于個案評估。考慮到本發(fā)明的多肽在生物測試中顯示的活性概況,含有所述多肽的藥物組合物可用于治療神經(jīng)和感覺神經(jīng)的功能紊亂、病態(tài)。令人驚奇的是獲得NOP受體的高效和持久活性,用來治療焦慮、厭食、過度緊張、心動過速、保水失調(diào)、低鈉血癥、充血性心力衰竭、消化道平滑肌運動紊亂、呼吸疾病和泌尿道疾病(特別是神經(jīng)性膀胱炎的尿失禁)、發(fā)炎、邊緣神經(jīng)系統(tǒng)脊髓痛覺喪失,特別是用于治療慢性疼痛或更特別的是控制咳嗽。而且,其可以作為拮抗劑用來治療記憶、情緒、運動活性(例如帕金森癥)、食物攝取失調(diào)(例如易餓癥)等問題,更常見的,用于治療肥胖病人。這些化合物的高分子量以及存在殘基(可以被生理pH主動改變)使得他們不能跨越血腦屏障。所述化合物局部給藥后可發(fā)揮中樞效果,盡管他們表現(xiàn)出很好的外周分布。例如,蛛網(wǎng)膜下或脊髓給藥后,激動劑化合物可以誘導(dǎo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)痛覺喪失。具體實施例方式1.多肽合成丄/常船成磁錄本發(fā)明的多肽通過固相合成制備,所用樹脂為4-(2',4'-二甲氧基苯基-芴甲氧羰基-氨基甲基苯氧基乙酰氨基-正亮氨?;?樹脂(Rink-氨基MBHA樹脂)。由(HATU)濃縮的芴甲氧羰基氨基酸作為羧基功能激活劑,芴甲氧羰基(Fmoc)基團(tuán)通過使用20%的哌啶二甲基酰胺(DMF)溶液去除,榜定到被保護(hù)的多肽上的樹脂用K試劑處理以便獲得多肽粗產(chǎn)物。含有綁定在頭兩個氨基酸殘基[Phe1(CH2-NH)Gly2]或[Phe17(CH2-0)Gly2]之間的修飾的多肽的化合物通過在合成的最后步驟在綁定到樹脂上的被保護(hù)的多肽(2-17)或(2-16)或(2-15)上濃縮Boc-Phe-CHO獲得,因此減少有NaBH3CN的"亞氨基"衍生物的原位中間產(chǎn)物,或者在合成的最后步驟綁定到樹脂的被保護(hù)的多肽(3-17)或(3-16)或(3-15)上冷凝Boc-[Phe'(CH2-0)Gly2]-OH(其獲得方法參見報道Balboni等《/Ozem.Soc.7>"ra/,1998,pg1645-1651),使用HATU作為冷凝劑。使用AlltechC-18色譜柱(150x4.6mm,5inm)在貝克曼系統(tǒng)金168高效液相色譜中對照分析粗產(chǎn)物和最終產(chǎn)物。化合物通過一個二元洗脫系統(tǒng)分析,所述系統(tǒng)由溶劑A:35mMNaH2P04(pH2.1)和溶劑B:59mMNaH2P04(pH2.1)-乙腈(60:40v/v)組成,根據(jù)要分析的化合物的物化特性來設(shè)計梯度,流速為1mL/分鐘并且波長為220nm。使用水制備型高效液相色譜S制備4000系統(tǒng)提純多肽粗產(chǎn)物,使用水徑向密封色柱S畫LC40mm(30x40cm,C18,300A,15nm),其由用于分析HPLC的流動相洗脫,并且根據(jù)反應(yīng)粗產(chǎn)物的分析概況來設(shè)計梯度。最終化合物的分子量使用micromass公司的ZMD2000儀器進(jìn)行電噴霧質(zhì)譜分析而得。對于一些中間產(chǎn)物多肽,使用Bmker公司200MHz儀器進(jìn)行1HNMR光譜分析。"餅前述的多肽類似物b)、c)和d)由下述程序制備。Rink-AmideMBHA(0.65mmol/g,0.2g)樹脂用20%的哌啶DMF溶液處理,用Fmoc-Gln(Trt)-OH濃縮,由HATU激活羧基功能。下述芴甲氧羰基氨基酸被順序耦合到延長的多肽鏈上Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pmc)曙OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pmc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ser(tBu)隱OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc曙Arg(Pmc)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-(pF)Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Phe-OH。在DMF中所有笏甲氧羰基氨基酸(4當(dāng)量)使用HATU(4當(dāng)量)和二異丙基乙胺(4當(dāng)量)耦合到多肽鏈上;耦合反應(yīng)進(jìn)行1小時。為了最優(yōu)化合成產(chǎn)量,并且易于提純化合物,對于Aib殘基必須進(jìn)行l(wèi)小時的?;瘉黼p重耦合。20%哌啶DMF溶液被用來在每一步驟中去除Fmoc基團(tuán)。然后去保護(hù)最后的Na-Fmoc基團(tuán),多肽樹脂用甲醇清洗然后真空干燥生成[(pF)Phe4,Aib7,Arg14,Lys15]-N/OFQ(1-17)-Rink-氨基MBHA-保護(hù)的樹脂。被保護(hù)的多肽樹脂用K試劑(三氟乙酸(TFA)/水/苯酚/乙二硫醇/甲基苯基硫醚82.5:5:5:2.5:5;v/v;10mL/0.2g樹脂)室溫下處理1小時。過濾用完的樹脂,真空濃縮溶液,殘基由醚接地。多肽粗產(chǎn)物由制備型反相HPLC提純,凍干得到白色粉末。合成[Phe'(CH2-NH)Gly2、(pF)Phe4,Aib7,Arg14,Lys15]-N/OFQ-NH2(多肽c)是開始于前述合成的中間產(chǎn)物[(pF)Phe4,Aib7Arg14,Lys"]-N/OFQ-(2-17)-樹脂。中間產(chǎn)物(0.2g,0.65mmol/g,0.13mmol)在含有1。/。(V/V)醋酸的甲醇(2mL)中重懸浮并且加壓膨脹。20分鐘后,含有Boc-Phe-CHO(0.065g,0.26mmol)和NaBH3CN(0.033g,0.52mmol)的甲醇溶液(0.8mL)被添加,反應(yīng)混合物被攪拌1.5小時。樹脂然后如前述用甲醇清洗并用K試劑處理。合成[Phe17(CHrO)Gly2,(pF)Phe4,Aib7,Arg",Lys"]N/OFQ-NH2(多肽d)開始于前述合成的[(pF)Phe4,Aib7Arg14,Lys勺-N/OFQ(3-17)-樹脂。在普通?;瘲l件下,這個中間產(chǎn)物(0.2g,0.65mmol/g,0.13mmol)在最后步驟用Boc-Phe[(CHrO)]Gly-OH(4當(dāng)量,0.16g,0.52mmo1)?;肏ATU激活羧基功能。然后,如前述樹脂用甲醇清洗,用K試劑處理。2.藥理測試"#糊誠化合物在體外進(jìn)行測試,測試使用地鼠(Hamster)卵母細(xì)胞膜,其表達(dá)人類重組NOP受體(CHOhM)P)(受體綁定實驗和GTPYS綁定剌激實驗),以及在電刺激后使用鼠輸精管進(jìn)行測試。在生物鑒定實驗(鼠輸精管)中對于化合物效果研究的條件描述在Bigoni等(iVa柳3;打Sc/imiWe6ergs^"湮學(xué)J^^359,160-7,1999),用于研究CHOhNOP細(xì)胞效果的條件描述在McDonald等(池w,5Wz附zW由,秀麥學(xué)J^教,367,183-187,2003)。在每一系列實驗中,新化合物的活性是與天然孤啡肽比較的。2.2結(jié)果在受體綁定實驗中,所有測試化合物被證實可以從人重組NOP受體上完全取含氚N/OFQ?;诓煌幕瘜W(xué)修飾,化合物展示了出非常不同的受體親合力(pKj)。通常,具有[Phe17(CO-NH)Gly2]結(jié)構(gòu)的化合物顯示出比具有[Phe17(CH2-NH)Gly勺結(jié)構(gòu)的化合物更高的親合力,而且顯示出比具有[Nphe17(CO-NH)Gly"結(jié)構(gòu)的化合物高出極多的親合力。此外,結(jié)合了[(pF)Phe4,Aib7,Arg14,Lys"]修飾的化合物顯示出比那些單一修飾的化合物更好的親合力。在涉及GTPyS綁定刺激的功能性實驗以及在涉及對于電刺激誘導(dǎo)的鼠輸精管收縮抑制實驗中,具有[Phe1(CO-NH)Gly勺結(jié)構(gòu)的化合物模擬了N/OFQ的效果,并且在特別誘導(dǎo)的相似最大效果中,用作完全激動劑,具有[Phe17(CH2-NH)GlyS]結(jié)構(gòu)的化合物用作部分激動劑,這是因為它們的最大效果低于N/OFQ。最后,具有[Nphe'(CO-NH)Gly2]結(jié)構(gòu)的化合物本質(zhì)上沒有產(chǎn)生任何效果,但是用作N/OFQ的競爭拮抗劑。為了簡單化,表1報告了所獲得的化合物以及所參照的孤啡肽[(pF)Phe4,Aib7Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2(UFP-112),[Phe1(CH2-NH)Gly2,(pF)Phe4,Aib7Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2(UFP-113),[Nphe1,Aib7Arg",Lys15]N/OFQ-NH2(UFP-111)。表1[(pF)Phe4,Aib7,Arg14,Lysl5〗N/OFQ-NH2(UFP-112),[Phe1(CH2-NH)Gly2,(pF)Phe4,Aib7,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2(UFP-113),[Nphe1,Aib7,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2(UFP-lll),以及參照物孤啡肽的生物活性<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>如在表1中所突出的,化合物UFP-113表現(xiàn)為NOP受體部分激動劑,其所引起的最大效果低于N/OFQ,無論是在GTPyS檢測還是在電刺激誘導(dǎo)的鼠輸精管收縮抑制檢測中。UFP-lll被正面是純粹且有效的用于NOP受體的拮抗劑。Schild法進(jìn)行分析(在GTPyS實驗和鼠輸精管系統(tǒng)中進(jìn)行)顯示這個化合物表現(xiàn)為NOP受體的競爭性拮抗劑,其效值分別為(表現(xiàn)為pA2)8.68和7.46,(參見表1)。2.3.UFP-112化合物的選擇性。UFP-112的效果是NOP受體活動介導(dǎo)的,顯示為事實上這個多肽在鼠輸精管中的活動在有納洛酮(一個傳統(tǒng)但不是NOP受體的阿片受體的非選擇性拮抗劑,)存在時沒有改進(jìn),但是其去除將被UFP-101(其為一種選擇性NOP受體拮抗劑([Nphel,Argl4,Lysl5]N/OFQ-NH2,Cal6等,英國藥理學(xué)期刊136,303-311,2002))有效拮抗。UFP-101被用來同UFP-112競爭,并且顯示出的效值(pA26.81)與那些當(dāng)它被用來與內(nèi)源性N/OFQ激動劑(pA26.91)競爭的時得到效值相似。這表明三種分子(N/OFQ,UFP-112和UFP-101)與同一個受體(NOP受體)相互作用。這個進(jìn)一步顯示在對于NOP受體基因(NOP,剔除鼠組織中所得到的結(jié)果中(參見Nishi,M.等,嚴(yán)疑乏孤艱嚴(yán)f沐好無饜劍游,嬸^應(yīng)浙銀力關(guān)像EmboJ16(8):1858-64,1997)(見表2)。表2-對于野生型(NOP+/+)輸精管和NOP受體剔除(NOP,鼠的N/OFQ和UFP112激動劑的效果以及DOP,D-Pen2,D-Pen5腦啡肽(DPDPE)激動劑效果。<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>對于電誘導(dǎo)的收縮的抑制效果,由UFP"12引起的抑制效果(這與在N/OFQ上發(fā)現(xiàn)的類似)在從NOP;鼠中分離的輸精管中消失了,確認(rèn)了UFP-112的生物活性僅是與NOP受體作用?;衔颷D-Pen2,D-Pen5]-腦啡肽,DPDPE(參見LifeSci.1983;33Suppl1:447-50),作為一種選擇性DOP激動劑,被用于主動對照。這個對照顯示從NOP受體剔除的鼠分離出的組織對于沒有使用NOP受體的刺激抑制反應(yīng)正常。2.4基f本發(fā)欲游眾^激遂摔絲游秀邏M試根據(jù)McDonald等(A/mm;;"5^w/WeZ)w^^"潘^j^教367,183-187,2003),這些化合物如在段落2.1中一樣在表達(dá)人重組NOP受體(CHOhwp)的地鼠卵母細(xì)胞(CHO)膜上進(jìn)行體外測試。關(guān)于這些化合物對于NOP受體選擇性的研究是通過對于CHO細(xì)胞膜受體綁定研究進(jìn)行的,CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染有人重組阿片受體(p(MOP),S(DOP)或k(KOP)類),所用方法與用于CHOhNop的一樣。選擇性的研究所采用的競爭性試驗是基于McDonald等(A^w"y"Sc/ww'e^Z^^^"潘夢文/i367,183-187,2003)所描述的方法。為測量對于N/OFQ的pKj,含氚的N/OFQ被用作放射配位體,然而[3司-特培洛菲被用于傳統(tǒng)阿片受體。新化合物的活性是與天然孤啡肽進(jìn)行比較的。在轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞膜上進(jìn)行的受體綁定試驗中,UFP-lll,UFP-112和UFP-113顯示出對于NOP受體比對于MOP,KOP以及DOP受體高得多的選擇性(>100倍)(見表3)。表3在轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞中UFP-112,UFP-113和UFP-lll對于NOP、MOP、DOP以及KOP受體的親合力(pKO(參見McDonald等(iV麵"&taW&e,秀潘學(xué)文教367,183-187,2003)。f<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>數(shù)據(jù)是4個試驗的平均值。標(biāo)注1-所用加氖配位體為卩H]孤啡肽標(biāo)注2—DAMGO意味著[D-Ala(2),N-MePhe(4),Gly-ol(5)]腦啡肽標(biāo)準(zhǔn)3-所用加氣配位體為[3司-特培洛菲3.化合物UFP-112在體內(nèi)完全激動劑效果研究化合物UFP-112是一個完全激動劑,其在老鼠體內(nèi)以不同生物檢驗進(jìn)行測試1)尾回縮檢驗,Cald等,(英國藥理學(xué)期刊125,373-378,1998)以及Rizzi等(臨床藥理學(xué)18,56,2004)所描述的程序進(jìn)行實驗;2)飼養(yǎng)動物的食物攝取測量,根據(jù)Rizzi等(意大利神經(jīng)科學(xué)學(xué)會國家會議以及意大利-瑞典神經(jīng)科學(xué)聯(lián)席會議,Ischia(那波利)1-410月,2005)所描述的方法;3)自發(fā)性活動活性的測量檢驗,根據(jù)Rizzi等,(A^"w少"Sc/m7/e^6^^^"湮學(xué)jt^363,161-165,2001所描述的方法。在每個檢測中,等效劑量的UFP-112和N/OFQ的活性被檢測。因為UFP-112顯示出100倍的更高潛能,UFP-112所用的劑量為0.001-O.lnmol,而N/OFQ所用劑量為0.1-10歸l。在鼠尾回縮試驗中,等效劑量的UFP-112模擬了N/OFQ天然配位體的效果,盡管其顯示了更長的作用時間(〉120minutes)。UFP-112(0.001-0.lnmol)果通過側(cè)腦室(i.c.v.)途徑注入誘導(dǎo)了促傷害感受,然而當(dāng)鞘內(nèi)(i.t.)給藥時則引起抗傷害感受(參見圖l).所述效果(與在N/OFQ中發(fā)現(xiàn)的類似)是由NOP受體活動介導(dǎo)的,因為它們在NOP一鼠中是缺乏的。N/OFQ和UFP-112在等效劑量下用于飼養(yǎng)鼠的食物攝取試驗。所用化合物誘導(dǎo)了一個明顯的食物攝取增加,同樣在這些檢驗中證明UFP-112比N/OFQ有效100倍。在這個測試中,N/OFQ和UFP-112的食欲過盛效果是僅僅由于NOP受體的活動,因為這樣的效果存在于NOP+/+鼠中而在NOP一鼠中沒有。為了調(diào)査UFP-112在體內(nèi)的作用時長,試驗是在鼠中進(jìn)行的,對照等效N/OFQ(10nmol)和UFP-112(O.lnmol)在同一期間的自發(fā)性活動活性效果(5:30p.m.-7:30),兩者均為i.c.v.給藥。Bothpeptidesinhibitedthelocomotoractivity兩個多肽都抑制了活動活性,但是N/OFQ在i.c.v.注射60分鐘后停效,而UFP-112則是6小時后停效(見圖2)。4.N/OFO和新衍生物UFP-111、UFP-112、UFP-113在腦漿和血漿中的代謝穩(wěn)定性。血漿和腦組織樣本是從瑞士鼠(莫里尼,雷吉奧艾米列,意大利,25-30g)中獲得的.醚麻醉的動物通過位于左心室的針頭灌注生理肝磷脂溶液。血液被抽出并且室溫下在14000xg離心2分鐘。從壓縮團(tuán)中分離后,血漿被等分試樣并且保存在-8(TC.血液抽出后,動物在腦移除前進(jìn)一步灌注生理溶液2分鐘。腦組織由一個ultra-Turrax(JankeKunkel,Staufen,德意志聯(lián)邦共和國)分散機被均分在5vol.(w/v)的Tris/HCl(50mM,pH7.4,0°C),3次,每次15秒。通過離心分離(3000xg15分鐘,4。C)所得的上清液被倒出并且保存在-80°C。根據(jù)布拉福德方法(分,f笏眾學(xué),72,248-254,1976)確定制劑的蛋白質(zhì)含量,對于腦漿為8pg:l,對于血漿為17iug/>il。每個多肽(3mg/500jilTris)的100)nl的等分試樣由總體積為1ml的腦漿或血漿(450nl)孵化(最終濃度為6|ig^l),含有Tris/HCl50mMpH7.4緩沖液。在37°C下以不同且最長為240分鐘的時間來孵化等分試樣。在不同的孵化時間,一個等分試樣(iooMl)被移出并且通過添加4.5%TFA溶液(200pl)阻止其退化。離心分離后(3000rpm15分鐘)一等分試樣(100pl)的上清液被注入RP-HPLC。高效液相色譜分析是在裝配有可變波長UV探測器的貝克曼系統(tǒng)金色譜系統(tǒng)使用Kromasil100-5C18色譜柱(4.6x250mm)進(jìn)行的。包括梯度分析的洗脫實驗條件是使用均含有0.1%TFA的水(溶劑A)和乙腈(溶劑B),流速為0.7ml/分鐘。下面的程序用于梯度分析,基于被分析物的物理化學(xué)特性來選擇在20分鐘內(nèi)線形梯度為5%-40%B;在5分鐘內(nèi)線形梯度為40%-60%B;在5分鐘內(nèi)線形梯度為60%-5%B。洗脫液被監(jiān)控在220n。半衰期(T^)是使用最小平方法通過線形回歸得到的,圖示了每個衍生物的峰值面積為其孵化時間的函數(shù),對于每個分析至少采用5個點。由3個不同實驗獲得的數(shù)據(jù)顯示在表3(平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤差)。表3.N/OFQ和衍生物在鼠血漿和腦組織中的T'/2(min)<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>N/OFQ在血漿中半衰期(T1/2)大約為1小時,這與其在腦漿中所得完全不同,在腦漿中為3分?;诒景l(fā)明的多肽顯示出明顯長于天然多肽的半衰期。特別是,在血漿中UFP-lll和UFP-113的P/2大約是N/OFQ的兩倍,而UFP-112的P/2則是N/OFQ的3倍。衍生物表現(xiàn)出的比N/OFQ更長的半衰期,在腦漿中比血漿更明顯。事實上,所有衍生物在腦組織中的P/2都比N/OFQ(3min.)高出3倍。這些數(shù)據(jù)顯示與N/OFQ相比化學(xué)修飾的UFP-lll、112和113序列增加了其作為激動劑或拮抗劑的能力這樣的修飾調(diào)節(jié)了其對于NOP受體的效果并且確定了一個明顯的由在血漿和腦漿中存在的多肽酶引發(fā)的退化敏感性的降低。這個重要特性對于這些分子延長其在體內(nèi)作用是至關(guān)重要的,正如在部分3(沐/^^f^)所總結(jié)的實驗對UFP-112的證明。5.UFP-112對于鼠輸精管抑制效果的動力學(xué)在電刺激的鼠輸精管中,UFP-112作用的動力學(xué)以及清洗后的效果的可逆行都明顯慢于N/OFQ(參見圖3)。這表現(xiàn)在對于電刺激誘導(dǎo)的輸精管收縮的抑制效果上。與代謝穩(wěn)定性數(shù)據(jù)一起,可以解釋相對于N/OFQ內(nèi)源配位體,UFP-112在體內(nèi)的更長的作用時間。6通式I化合物對于電刺激后的鼠輸精管的生物活性表4總結(jié)了電刺激后在鼠輸精管所獲得的結(jié)果,這是在通式I化合物存在的情況下,這些化合物在激動劑模板N/OFQ-NH2的7和11位進(jìn)行了不同的化學(xué)修飾。這些數(shù)據(jù)顯示相對于對照序列,不同的氨基酸取代不會改變這些化合物作為完全激動劑潛能提升的效果(除了在一些情況下(例如[AcsC"]N/OFQ-NH2和[D/L-Iva"]N/OFQ-NH2))。需要注意的是,個體修飾所得潛能的提升(2倍于參照序列),是低于在不同位置的組合修飾所帶來的潛能的提升,如在化合物UFP-112中(表1),其潛能增加100倍。表4:在位置7和11的不同化學(xué)修飾通式I化合物在電刺激鼠輸精管中測得的潛能<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>權(quán)利要求1.具有通式(I)的多肽Xaa1-?-Gly2-Gly3-Xbb4-Thr5-Gly6-Xcc7-Arg8-Lys9-Ser10-Xdd11-Arg12-Lys13-Xee14-Xff15-R(I)其中Xaa1選自Phe或N-芐基-甘氨酸;?表示位于頭兩個氨基酸殘基之間的結(jié)合物,且選自CO-NH和CH2-NH和CH2-O;Xbb4是Phe或pXPhe,其中“X”選自H、Cl、Br、I、F、NO2和CN,并且“p”表示在苯丙氨酸的苯環(huán)的對位;Xcc7和Xdd11選自Ala、2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva)、2-氨基-2-乙基-丁酸(Deg)、2-氨基-2-丙基-戊酸(Dpg)、(CaCH3)Leu、(CaCH3)Val、1-氨基-環(huán)丙基-羧酸(Ac3c)、1-氨基-環(huán)戊基-羧酸(Ac5c)以及1-氨基-環(huán)己基-羧酸(Ac6c);Xee14和Xff15選自Arg、Lys、Orn、omoArg、二氨基丁酸、二氨基丙酸以及Trp;R表示二肽Asn-Gln-NH2、Asn-Gln-OH、帶有氨基或羥基終端基團(tuán)的Asn或氨基(-NH2)或羥基(-OH)終端基團(tuán);以及其藥物學(xué)可接受的鹽。2.如權(quán)利要求1所述的多肽,其中Xcc7選自2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva)、2-氨基-2-乙基-丁酸(Deg)、2-氨基-2-丙基-戊酸(Dpg)、(CaCH3)Leu、(CaCH3)Val、1-氨基-環(huán)丙基-羧酸(AC3C)、1-氨基-環(huán)戊基-羧酸(AC5C)以及l(fā)-氨基-環(huán)己基-羧酸(AC6C)及其藥物學(xué)可接受的鹽。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多肽,選自<table>tableseeoriginaldocumentpage3</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>及其藥物學(xué)可接受的鹽。4.如權(quán)利要求2所述的多肽,其中Xaa1是Phe;Xbb4是(pX)Phe,其中"X"選自H、F、N02,"p"表示Phe苯環(huán)的對位;Xcc7選自2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、l-氨基-環(huán)戊基-羧酸(Ac5C)和2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva);Xdd"選自Ala、2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、1-氨基-環(huán)戊基-羧酸(Ac5c)、2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva);Xee14為Arg;Xff"為LysR表示雙肽Asn-Gln-NH2或Asn-NH2或氨基(-NH2)基團(tuán);及其藥物學(xué)可接受的鹽。5.如權(quán)利要求4所述多肽,其中?是CO-NH;"X"是F;Xcc7是2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib),Xdd11是Ala,R表示雙肽Asn-Gln-NH2;及其藥物學(xué)可接受的鹽。6.如權(quán)利要求4所述的多肽,其中?是CH2-NH;"X"是F;Xcc7是2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib),Xdd"是Ala,R表示雙肽Asn-Gln-NH2;及其藥物學(xué)可接受的鹽。7.如權(quán)利要求3所述的多肽,其中Xaa1是N-苯基-甘氨酸(Nphe);是CO-NH;Xbb4是Phe;Xcc7選自2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)或2-氨基-2-甲基-丁酸(Iva);Xdd11選自Ala、2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib)、2-氨基-2-甲基-丙酸(Iva),R表示二肽Asn-Gln-NH2或氨基(-NH2)基團(tuán);及其藥物學(xué)可接受的鹽。8.如權(quán)利要求7所述的多肽,其中Xcc7是2-氨基-2-甲基-丙酸(Aib);Xdd11是Ala,R表示二肽Asn-Gln-NH2,及其藥物學(xué)可接受的鹽。9.含有如權(quán)利要求l-8所述的多肽的組合物。.10.含有作為活性成分的如權(quán)利要求1-8所述的多肽以及藥物學(xué)可接受的載體和/或賦形劑的藥物組合物。11.如權(quán)利要求10所述的藥物組合物,通過口服、局部、呼吸、直腸、脊柱、蛛網(wǎng)膜下,膀胱或腸道外給藥。12.如權(quán)利要求11所述的藥物組合物,其中通過蛛網(wǎng)膜下和腸道外給藥。13.如權(quán)利要求l-8所述的多肽在制備用于治療或預(yù)防神經(jīng)或感覺神經(jīng)功能紊亂的藥物中的用途。14.如權(quán)利要求4-6所述多肽在制備用于治療或預(yù)防過度緊張、心動過速、水保持失調(diào)、低鈉血癥、心力衰竭、消化道或呼吸道或泌尿道平滑肌運動功能紊亂、發(fā)炎、外周神經(jīng)或脊髓痛覺喪失、慢性疼痛以及咳嗽的藥物中的用途。15.如權(quán)利要求14所述的如權(quán)利要求4-6所述的多肽的用途,其中用于治療泌尿系統(tǒng)失調(diào),包括神經(jīng)性膀胱功能障礙性失禁或膀胱過度興奮、呼吸系統(tǒng)功能紊亂或慢性疼痛。16.如權(quán)利要求13所述的多肽在制備鎮(zhèn)定劑或者用于治療或預(yù)防焦慮的藥物中的用途。17.如權(quán)利要求7-8所述的多肽在制備用于治療記憶和情緒功能紊亂、運動活性以及食物攝取失調(diào)和治療肥胖的藥物中的用途。全文摘要孤啡肽多肽類似物,及其組合物,以及其在治療與激活或阻止NOP受體相關(guān)的失調(diào)或功能紊亂中的用途。文檔編號A61K38/33GK101128482SQ200680004992公開日2008年2月20日申請日期2006年2月15日優(yōu)先權(quán)日2005年2月15日發(fā)明者吉羅拉莫·卡羅,塞沃羅·薩爾瓦多尼,多米尼科·雷革里,雷莫·古里尼申請人:馬納里尼國際運轉(zhuǎn)盧森堡股份公司