專利名稱：：用反式氯米芬治療男性不育癥的方法和物質的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及男性不育癥的治療。更特別地，本發(fā)明涉及包含反式氯米芬的組合物在治療不育癥中的應用。背景睪酮是男性主要的雄激素，在男性的整體健康中發(fā)揮著極其重要的作用。睪酮對于特定生殖組織(睪丸、前列腺、附睪、精嚢和陰莖)和男性第二性征的發(fā)育和維持是十分必要的。它在性欲和勃起功能中發(fā)揮著關鍵的作用，對于引發(fā)和維持精子產生是必要的。睪酮也具有與生殖組織不相關的重要功能。例如，它通過增加氮保留而積極地影響機體組成，其支持非脂肪的體重、肌肉大小和力量。它也作用于骨以刺激骨形成。睪酮分泌物是一系列激素過程的最終產物。在下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素(GnRH)控制黃體生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的脈沖式分泌，后兩種激素是由垂體前葉分泌的。接著，LH調節(jié)睪丸的間質細胞中睪酮的產生和分泌，而FSH幫助誘導精子產生。最常見地將睪酮測定為"總睪酮"。該測定包括了與性激素結合球蛋白(SHBG)結合的睪酮(~44%)(因此這部分是不能生物利用的)和游離(~2%)或與其他蛋白質松散結合(非-SHBG-結合)(-54%)的睪酮。WHO研究的結果表明，睪酮通常是按晝夜節(jié)律分泌的，早晨具有較高的水平，在8到IO點左右出現(xiàn)最低的水平。老年人(平均年齡為71歲)一整天睪酮分泌的變化變得很不顯著。現(xiàn)在還無法知道這種節(jié)律的重要性。通過內插管在24小時里每10分鐘從年輕和老年患者中獲得樣品。根據(jù)Tenover(1987),在健康的年輕男性(年齡范圍22歲到35歲，平均2T3歲)中24小時平均總血清睪酮水平為4"±0.3(±SEM)mg/ml(17.0nmol/L),而老年人(年齡范圍65到84歲，平均70.7歲)具有顯著更低的24小時平均總血清睪酮水平，為4.1±0.4mg/ml.(P<0.5;14.2腿ol/L)。與健康年輕男性的4.8±0.2mg/ml[16.6nmol/L]相比,在老年人中從單個隨機樣品中得到的總血清睪酮水平也顯著更低(4.0土0.2mg/ml[13.9nnmol/L])。睪酮缺乏會導致潛伏疾病或遺傳病，通常也是老年的并發(fā)癥。例如，由原發(fā)性睪丸衰竭引起的原發(fā)性性腺機能減退。在該情況中，睪酮水平較低而垂體促性腺激素(LH和FSH)升高。繼發(fā)性性腺機能減退是由于垂體促性腺激素的分泌不適當導致的。除了睪酮水平較低，LH和FSH的水平較低或低于正常。成年人睪酮缺乏的一些后遺癥包括范圍廣泛的癥狀，包括性欲喪失、勃起機能障礙、少精液癥或精子缺乏癥、第二性征缺乏或退化、肌肉質量進行性減少、疲勞、情緒低落和骨質疏松癥的危險增加。這些疾病中很多在類別上與男性更年期有關。現(xiàn)在在美國存在幾種形式的睪酮療法。近來，透皮制劑在市場上受到人們的喜愛。但是，由于在陰嚢皮中高濃度的5a-還原酶，陰嚢的睪酮貼劑導致5a-二氬睪酮(DHT)超過了生理水平。還未知曉這些DHT水平的提高對健康是否具有長期的影響。非陰嚢系統(tǒng)被認為是更為有利的，大多數(shù)患者達到了正常范圍內的平均血清濃度，并具有正常水平的DHT。不推薦口服睪酮的療法，因為替代療法需要的劑量與肝毒性的顯著危險有關。筒述提供了一種治療男性不育癥的方法?？梢越o要治療的患者施用包含反式氯米芬或其藥學可接受的鹽或溶劑化物的組合物，所述組合物包含有效量的反式氯米芬或其藥學可接受的鹽或溶劑化物，和任選的一種或多種藥學可接受的稀釋劑、輔劑、載體或賦形劑。該組合物包含比例大于71/29的反式氯米芬和順式氯米芬。該組合物也可以包含0%到約29%w/w的順式氯米芬和約100%到約71%反式氯米芬。該組合物也可以基本上由有效量的反式氯米芬或其藥學可接受的鹽或溶劑化物組成。該組合物可以以每日1-200mg反式氯米芬的劑量施用。該組合物也可以以每日約50mg反式氯米芬的劑量施用。該組合物也可以以每日1.5mg/kg反式氯米芬的劑量施用。該組合物可以配制成任意形式，包括膠嚢。附圖簡述附圖1是在健康男性(年輕和老年)中正常分泌的總血清睪酮曲線的代表性圖。附圖2顯示的是枸櫞酸氯米芬的化學結構。附圖3的圖形，表示的是Clomid、Enclomid和Zuclomid的血清睪酮水平的時程。附圖4的圖形，表示的是用Clomid、Enclomid和Zuclomid治療的雄性狒狒的膽固醇水平的時程。附圖5顯示的是AndroxalTM或Androgel對于睪酮水平的作用。附圖6顯示的是AndroxalTM或Androgel對于LH水平的作用。附圖7顯示的是AndroxalTM或Androgel對于FSH水平的作用。詳述提供包含反式氯米芬的組合物來治療雄性哺乳動物的不育癥。氯米芬(附圖2)是與他莫昔芬有關的抗雌激素藥，他莫昔芬阻斷了下丘腦的正常雌激素反饋，以及隨后的對腦垂體的負反饋。這導致黃體生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)增加。在男性中，這些促性腺素的水平升高刺激了睪丸的間質細胞，導致產生更高的睪酮水平。枸櫞酸氯米芬具有下列的結構J.Pharmaceut.Sci.65:148(1976)表明了氯米芬是兩種幾何異構體的混合物，它們是順式，-Z-氯米芬(順式氯米芬或珠氯米芬)和反式，E-,氯米芬(反式氯米芬或恩氯米芬)。根據(jù)Ernst等人，反式氯米芬鹽酸鹽的熔點為149°C-150.5°C,而順式氯米芬鹽酸鹽的熔點為156.5°C-158°C。Ernst等人也指出，(反式異構體)是抗雌激素藥(AE),而順式異構體是更有效和更雌激素化的形式，而且也報道了具有抗雌激素活性。該作者認為該藥物對排卵活動的作用是由于這兩種形式，說明混合物比單用反式氯米芬更為有效。反式異構體是作用于下丘腦水平的排卵作用。雌激素異構體順式氯米芬有助于生理學途徑其它的排卵增強，導致排卵。也報道了該異構體具有不同的體內半衰期。此外，也報道了在單劑量后順式形式在超過一個月的時間里留下了殘留血水平。Vandekerckhove等人(CochraneDatabaseSystRev2000;(2):CD0001Sip000))指出，涉及"8個男性的10項研究表明抗雌激素藥對于內分泌物出口即睪丸具有有益作用，但沒有足夠的證據(jù)來評價對生育力的作用。然而由于施用氯米芬會增強睪酮水平，只要睪丸仍然保留了對促性腺素刺激應答的能力，人們可以容易地推斷該藥物應當積極影響了睪酮喪失的副作用。氯米芬現(xiàn)在被證實是順式和反式異構體的混合物，順式異構體存在的量是約30%到50%(MerckManual),以在停止排卵的患者中增強生育力。氯米芬通過引發(fā)一系列的內分泌事件來改善排卵，以排卵前的促性腺素峰，和隨后的卵泡破裂達到頂點。推薦以每日高達100mg的劑量來施用該藥物5日。氯米芬也與很多的副作用有關，包括視力模糊、腹部不適、男性乳腺發(fā)育、睪丸腫瘤、血管收縮性潮紅、惡心和頭痛。此外，其他的研究提示，氯米芬具有遺傳毒性和腫瘤增強作用。這些觀測的凈結果是，目前形式的氯米芬具有30%到50%的順式異構體，在治療男性睪酮缺乏的長期治療中是不可接受的。氯米芬也用于在具有較低睪酮水平的男性中的治療介入。Te麗er等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.64:U03,(1987)和Te雨erEndocrinol.Metab.64:1118(1987)發(fā)現(xiàn)了在用氯米芬治療后，年青人和老年男性的FSH和LH都提高。他們也發(fā)現(xiàn)在男性中游離和總睪酮提高，在年輕男性中則顯示了顯著的提高。也進行了研究來確定氯米芬是否能通過改善精液質量來用于改善男性的生育力。Homonnai等人Fertil.andSteril50:801(1988)發(fā)現(xiàn)精子濃度和數(shù)量升高，但其他人則還沒有發(fā)現(xiàn)。(參見例如，Sokel等人,Fertil.andSteril.49:865(1988);Check等人，Int.J.Fertil.34:120(1989);Purvis等人，Int.J.Androl21:109(1989);和Breznik,Arch.Androl.21:109(1993).)—組人發(fā)現(xiàn)在長期治療時正常精子的百分比衰退。Shamis等人，Arch.Androl27:109(1991)。WHO研究表明，在6個月的治療后精液質量或生育力沒有改變。(AnonymousAndrol.15:299(1992).)間位分析(meta-analysis)似乎證明，在精液質量較差的男性中睪酮水平升高但不是生育力提高(Vanderkerckhove等人，2000)。研究也表明，用氯米芬長期治療對健康似乎沒有強烈的有害作用，盡管在4個月后該治療導致精液質量更差。研究中保持男性服用長達18個月的氯米芬，水平為每日25mg或每隔一日100mg。在1991年Guay等人(Urology35:377(1991))建議，氯米芬可以治療男性的性功能障礙。他們的假說認為性功能與睪酮水平有關。表明性激素和性功能之間的正相關的早期研究，Davidson等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.48:955(1979)，和另一個研究^人為與睡眠有關的勃起是對T的強烈應答，Cunningham等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.70:792(1990),都支持了上述的結論。但是，在1995年Guay等人(Gray等人，J.Clin.Endocrinol.Metab.50:3546(1995))/>開了一項研究,其中他們觀察到，在用氯米芬2個月后LH、FSH和睪酮提高，但是對勃起機能障礙沒有作用。其對于年輕男性和特定群體的老年男性可能具有一些益處，但是看起來僅僅提高睪酮水平是不夠的。也應當認真考慮睪酮對于與睡眠有關的勃起的作用(Herskowitz等人，J.Psychosomat.Res.42:541(1997))。包含反式氯米芬的組合物或者氯米芬的反式和順式異構體的預定義混和物可以用于治療男性不育癥。以lmg到約200mg的劑量(盡管確定最佳劑量在本領域普通技術人員的水平之內)給需要或要求治療男性不育癥的患者施用一或多劑量的有效量的包含反式氯米芬的組合物。順式氯米芬也可存在于該組合物中，只要反式氯米芬與順式氯米芬的比例大于1即可。氯米芬的反式和順式異構體的類似物例如如上文Ernst等人所述的那些也可以用于本發(fā)明的實施。優(yōu)選(但不是必要)施用的劑量可以作為劑量方案的一部分，該劑量方案設計成用于提高血清睪酮水平，其類似或對應于附圖1所述的正常分泌的血清睪酮曲線。例如，根據(jù)附圖1,可以以藥物制劑來施用優(yōu)選組合物的劑量，以在8a.m左右產生血清睪酮水平峰值。這些藥物制劑可以是持續(xù)釋放制劑的形式，該持續(xù)釋放制劑可以例如美國專利如U.S.6,221,399，日本專利JP4—312522,Meshali等人，Int.J.Phar.89:177-181(1993),Kharenko等人，Intern.Symp.ControlRel.Bioact.Mater.22:232-233(1995),WO95/35093,Dangprasit等人，Drug.Devel.andIncl.Pharm.21(20):2323-2337(1995);美國專利U.S.6,143,353,6,190,591,6,096,338,6,129,933,6,126,969,6,248,363和本領域公知的其他持續(xù)釋放制劑來制備。適當?shù)乃幬锝M合物或單位劑型可以是固體的形式，例如片劑或填充"交嚢，或液體的形式，例如溶液、懸浮液、乳液、酏劑或用相同物質填充的膠嚢，都用于口服。該組合物也可以是用于腸胃外(包括皮下)使用的無菌可注射溶液或乳液的形式。這些藥物組合物和單位劑型可以包含常規(guī)比例的成分。#4居本發(fā)明的組合物也可以通過靜脈內、皮下、口腔(buccal)、經月菱(transmucusal)、膜內、真皮內、腦池內或其他途徑來施用。在施用該組合物后，可以如上所述來測定血清睪酮水平，可以調節(jié)劑量來實現(xiàn)血清睪酮水平的充分提高，以實現(xiàn)與上述正常睪酮有關的期望的生理學結果。^4居本發(fā)明的組合物也可以包含1mg到約200mg劑量的反式_氯米芬(盡管確定最佳劑量在本領域普通技術人員的水平之內)。該組合物可以包含反式-氯米芬，劑量為約lmg,2mg，3mg,4mg，5mg，10mg，15mg,20mg,25mg，30mg,35mg,40mg,45mg，50mg,55mg，60mg,65mg，70mg,75mg，80mg,85mg,90mg,95mg，100mg，110mg,120mg，130mg,140mg，150mg，160mg，170mg,180mg，190mg,200mg,或它們之間劑量。該組合物可以包含反式氯米芬和順式氯米芬，比例是約71/29，72/28，73/27，74/26,75/25,76/24，77/23，78/22，79/21,80/20,81/19，82/18，83/17,84/16，85/15，86/14,87/13,88/12，89/11,90/10,91/9，92/8,93/7,94/6，95/5,96/4，97/3，98/2，99/1,99.5/0.5或它們之間的比例。氯米芬的反式和順式異構體的類似物例如如上文Ernst等人所述的那些也可以用于本發(fā)明的實施。下列的實施例是用于說明本發(fā)明，而不是意欲限制由附加的權利要求列出的本發(fā)明的范圍。實施例1Clomids對于雄性狒狒的血清睪酮和膽固醇的作用連續(xù)12天給予成年雄性狒狒1.5mg/kg的Clomid、Enclomid(反式-Clomid)或Zuclomid(順式Clomid)。在試驗樣品前第一治療日(第0日)、治療后12天(第12日)和最后治療后7日(終點或清除)取血清作為分析的樣品。1.對體重和血清LH、FSH、PRL和睪酮的作用；在接受Enclomid的組中，總血清睪酮顯著提高。參見表l。在基線期或第0日的組之間沒有差異。在治療后7日(清除期)的三組之間也沒有差異。但是在第6日Enclomid與Clomid和Zuclomid相比(分別為p=0.03和p=0.00002)以及與第12日的Zuclomid相比(p=0.047)產生了更高水平的睪酮。Zuclomid顯然沒有將總血清睪酮升高至任何程度。通過變異系數(shù)來判斷，與接受Enclomid的動物相比，接受Clomid的動物在第6日及以后產生了更為可變的總睪酮水平。當我們觀察作用的時程(附圖3)時，我們確定了，與基線或第0日值相比，僅僅Enclomid顯著和統(tǒng)計學地升高了第6和12日的總血清睪酮。此外，停止Enclomid治療導致了在第12到第18日(清除期)之間總血清睪酮的顯著降低。這表明，Enclomid容易從循環(huán)中清除，這與觀察到的Endomid在人中的代i射清除相符。Enclomid與Clomid本身相比顯然更好和更一致，而Zuclomid則是無效的。表1血清睪酮水平(ng/dl)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>血清LH或FSH沒有變化?？傃宀G酮與LH的比例與總血清睪酮具有相同的樣式，表明了沒有依賴性(未標出數(shù)據(jù))。在U天的研究中體重也沒有變化。在接受Enclomid的組的研究期間血清催乳素(PRL)降低，表明了在部分(Ben-Jonathan和Hnasko,2001)中描述的以及基于下列的事實所預期的抗雌激素的作用隨著男性的年齡，睪酮減退和催乳素提高(Feldman等人，2002)。2.對膽固醇水平的作用用Enclomid治療降低了血清膽固醇，而Zuclomid提高了該相同參數(shù)。初步的分析表明，膽固醇水平的改變是統(tǒng)計學不顯著的，該改變在正常的范圍內。為了觀測這兩種異構體以證明在短時間內對膽固醇水平的相反作用，進行進一步的分析。詳細的分析表明，Enclomid導致了血清膽固醇水平降低了8%。相反，用Zuclomid治療導致血清膽固醇水平升高了22%。用Clomid治療導致血清膽固醇水平輕微升高?？紤]到所述異構體可替代地具有雌激素激動劑或拮抗劑活性，Enclomid和Zuclomid對血清膽固醇水平的相反作用是意料之中的。這些結果表明，Enclomid可以用于治療具有較高膽固醇水平的患者。這些結果也表明，如果用于長期升高睪酮水平，Enclomid對于血清月旦固醇比Zuclomid更為良性。3.對于臨床化學參數(shù)的作用通過ANOVA或通過Kruskal-Wallis驗確定，在研究開始時，三組之間任意的實驗參數(shù)中每個參數(shù)的平均值沒有差異。所有組都顯示了每個參數(shù)的正常值，除了(l)血清鈉；一個相關的計算參數(shù)，陰離子間隙，在整個實驗的所有9只狒狒中都較低；(2)血清葡萄糖；和(3)BUN,用Enclomid治療的組在第0天較高。在治療后第12日和第7曰(清除期)，各組的任意參數(shù)沒有差異，除了陰離子間隙，顯示為Clomid和Zuclomid組具有比Enclomid組更低的值。該組狒狒的血清鈉和陰離子間隙的值似乎是異常的。用Enclomid和Zuclomid^J"紅血3求群具有實質的作用，而Zuclomid對血細胞比容具有實質的作用。在第0天和終點時，所有的化合物都降低了平均細胞血紅蛋白濃度(MCHC)。由于平均細胞血紅蛋白(MCH)不變而且平均細胞體積(MCV)增加，MCHC的降低是可預見的。盡管期望睪酮可以升高血細胞比容，但僅僅用不會增加總血清睪酮的Zuclomid治療顯示了統(tǒng)計學差異。顯然，應當4全測在^f吏用Zuclomid的臨床試驗中的男性的紅血球群的特性。預計Enclomid具有更小的作用。盡管發(fā)現(xiàn)這些值保持在正常的范圍內，似乎12曰的Enclomid治療對于血小板具有明顯的作用。在此處考慮的一件事情是雄性和雌性狒狒(279只雄性和348只雌性)之間血小板數(shù)目的性別二態(tài)現(xiàn)象。這可能是由于激素。由于Enclomid組表現(xiàn)為睪酮增加，因此在該組中血小板數(shù)的降低可能是由于睪酮的變化而繼發(fā)的。此外，用Enclomid治療將血小板數(shù)從第0日的水平推進至正常水平，第0日的水平是該組正常水平的高端。并不能預測Enclomid必然對血小壽反具有有害作用。所試驗的所有Clomids對于白血球(WBC)群都具有作用，最顯著的是Enclomid增加了淋巴細胞和曙紅細胞的數(shù)目。該作用并不是如所觀察的那樣筒單。似乎Enclomid對于降低血中粒細胞的百分比具有強烈作用。當該值降低到正常范圍以下時，在7日的清除期后該作用是非常強烈的(該時程可以反映出要影響WBC群的改變需要相對較長的時間)。在狒狒中，白血球群幾乎沒有雌雄二態(tài)現(xiàn)象，因此，該作用最可能是由于化合物本身，而不是睪酮的改變。但是，當我們用WBC計數(shù)器觀測粒細胞的計算值時，我們發(fā)現(xiàn)對于任意化合物粒細胞數(shù)目沒有差異。同時，淋巴細胞的過程是最為有趣的。在群中淋巴細胞的數(shù)目和百分比都隨著Enclomid治療而提高。然而，淋巴細胞的百分比的平均值仍然在正常的范圍內，考慮到WBC的數(shù)目具有增加的趨勢，Enclomid的凈作用是增加淋巴細胞的數(shù)目。曙紅細胞的結果是類似的。這對治療具有較低淋巴細胞的男性，例如HIV-陽性的男性具有清楚的含義。由于基于該結果Enclomid不會減少淋巴細胞，因此它可以用于治療患有AIDS的男性群體。由于疾病的消耗作用，這些個體經常使用意欲升高睪酮的試劑來治療。低的肝和腎毒性以及對膽固醇和脂類的有益效果對于意欲用于HIV-陽性的男性的任意藥物也是非常有利的性質，其中HIV-陽性的男性已經對該疾病喪失抵抗力。Clomid或Zuclomid對血清葡萄糖的增加是在正常范圍內。在Enclomid的情況中，平均血清葡萄糖值在第O日是4交高的，隨著治療并沒有增加。沒有證據(jù)表明Enclomid對血糖具有有害作用。通過酶AST和ALT判斷，對肝功能沒有明顯的有害作用。治療時這些值有降低的趨勢。在血清中酶水平的升高表明了肝損害。對于Clomid組，在研究結束時ALT/SGPT降低到范圍之外，盡管在治療期期間的差異并不是統(tǒng)計學顯著的。Enclomid和Zuclomid的變化在正常范圍之內。在懷孕期AST受到壓抑；因此可以用理論說明雌激素激動劑的作用，例如Zuclomid降低邊緣AST水平。在肝中也發(fā)現(xiàn)了堿性磷酸酶(ALP),并在不同的疾病狀態(tài)時升高。ALP的降低進一步反駁了肝損害。血清白蛋白也是一種肝產物，其也沒有變化。在較長時間里血清白蛋白的強烈抑制可以促進人的游離血清甾類激素水平，盡管性激素結合球蛋白發(fā)揮了更重要的作用。作為一個基線，根據(jù)所分析的參數(shù)，沒有化合物與肝損害有關。成骨細胞活動和骨疾病伴隨有高血清ALP值。在Zuclomid治療后ALP沒有升高，在Enclomid治療后該值則降低。與Zuclomid相比，使用Enclomid預計會有更為良性的結果。盡管在Clomid和Enclomid組中在研究期間改變了BUN和BUN/肌酸酐，肌酸酐沒有發(fā)生決定性的改變反駁了腎功能不全。腎小球過濾能力的缺失將會導致BUN增加。由于營養(yǎng)不良(不能以可控的方式)或較高的液體攝取(假定伴隨有水胂)，人發(fā)生了BUN降低。同時，盡管用Enclomid時在第0日和第12日之間總血清睪酮提高，血清肌酸酐值沒有改變，反駁了在該較短的時間間隔內肌肉質量的增加。在整個研究中，所有動物的血清鈉水平都低于參照值。Clomid和Zuclomid組的血清二氧化碳在第12日高于參照值。在整個研究中所有動物的血清陰離子間隙更低，與鈉的結果平行。相對于正常值，Enclomid升高了該參數(shù)。在整個治療期中在受試動物中檢測的電解質失衡難以捉摸，但如BUN結果所示，可能是相同液體紊亂現(xiàn)象的一部分。上述結果表明，在增強總血清睪酮方面，Enclomid比Clomid或Zuclomid更為有效。Zuclomid顯然是無效的，該缺陷限制了Clomid在性腺功能減退中的任何應用，特別是由于Zuclomid較長的半衰期，Clomid中的Zuclomid組分會隨時間在循環(huán)中占優(yōu)勢。當與Zuclomid和甚至通常是Clomid相比，Enclomid在所有方面都是相對良性的。當考慮到Enclomid降低膽固醇和肝酶的趨勢，以及相反地Zuclomid的趨勢是升高該相同參數(shù)，上述的結論是特別正確的。如果它可以顯示出不降低或增強淋巴細胞的CD4+亞群時，Enclomid升高淋巴細胞數(shù)的驚人趨勢可以用于患有AIDS的男性。實施例2使用反式氯米芬以及比例大于1的反式氯米芬和順式氯米芬的混合物提高男性睪酮水平的方法在施用反式-氯米芬前，從男性患者中取血樣，用例如Matsumoto,等人Clin.Endocrinol.Metab.56;720(1983)(引入本文作為參考)所述的方法測定睪酮水平。也可以如Tenover等人J.Clin.Endocrinol.Metab.65:1118(1987)所述來測定性激素結合球蛋白(SHBG)，無論是游離的還是與睪酮結合的，其中該文章描述了通過卩H]二氫睪酮飽和分析和放射免疫測定法測定SHBG。也可以例如根據(jù)Tenover等人J.Clin.Endocrinol和Metab.65:1118(1987)來測定未與SHBG-結合的睪酮水平(生物可利用的睪酮)。也可參見Soderguard等人，J.SteroidBiochem16:801(1982),引入本文作為參考。給予患者每日1.5mg/kg氯米芬的劑量，其中反式氯米芬與順式氯米芬的比例大于1。監(jiān)測患者的睪酮水平，使得可以調節(jié)給藥的量和給藥頻率以達到患者的睪酮的治療水平。實施例3AndroxalTM與Androgel⑧的比舉交在Hackensack,NewJersey的AdvancedBiologicalResearch,Inc.(ABR)ClinicalResearchCenter進行安慰劑對照的刺激研究，以在性腺功能減退的男性中比較口服的AndroxalTM(反式氯米芬)和Androgel。Androgel⑧(SolvayPharmaceuticals,Inc.)由乳膏組成，該乳膏施用了在經皮基質中的外源性睪酮。該研究募集了62名性腺功能減退的男性，他們的睪酮水平小于300ng/dl(正常值為298—1034ng/dl)，將這些男性隨機分成6個組，三個劑量的AndroxalTM(12.5mg，25mg和50mg)、安慰劑、以及高和低劑量的Androgel。在每個AndroxalTM組和安慰劑組中的一半男性隨機分成各股，在第1和14天讓這些股進入住院期來確定AndroxalTM的藥物動力學參數(shù)以及睪酮的循環(huán)性變化。以雙盲形式施用安慰劑和AndroxalTM劑量。以公開標簽的模式施用Androgel⑧乳膏。類似于該研究的其他患者，一半的Androgel⑧患者進入住院期。在接觸藥物兩周后，再將患者維持7到10天來確定他們的睪酮水平的狀態(tài)。我們注意到，與安慰劑不同，在研究的AndroxalTM或Androgel⑧組中都沒有副作用。1.對睪酮水平的作用所有劑量的AndroxalTM或Androgel⑧都產生了睪酮從基線睪酮水平的統(tǒng)計學顯著的變化(附圖5)。較低、中等和較高劑量的AndroxalTM實現(xiàn)了平均增加分別為169,247和294ng/dl，而最低批準劑量的Androge1⑧5G和最高批準劑量的Androgel10G產生的從基線的變化為212和363ng/dl。這些值無法與AndroxalTM實現(xiàn)的改變值統(tǒng)計學地區(qū)分開。這種無法區(qū)分表明AndroxalTM和Androgel⑧之間的差異是由當使用Androgel⑧時發(fā)現(xiàn)的高變異性結果所導致的。例如，50mg劑量的AndroxalTM在15天后將平均總睪酮升高至589±172ng/dl,變異系數(shù)(CV)為29%，與安慰劑組類似(36%)。另一方面，Androgel5G和10G得到的平均總睪酮值分別為473±289ng/dl和608±323ng/dl,CVs分別為61%和53%。在AndroxalTM治療14天后，所有劑量都和與安慰劑組類似的總睪酮日間模式相關，即早晨的峰，中午為谷和夜間升高。不受任何理論束縛，該模式是由于AndroxalTM的作用方式，其似乎如下所示通過對下丘腦-垂體軸的作用而介導。Androge,對男性的日間模式幾乎是平直的。但是，Androgel⑧對總睪酮的尖峰信號與劑量有關，通常超出了1,0Mng/dl的正常高水平。服用Androgel10G的某些個體能夠達到超過2500ng/dl的總睪酮峰水平。2.對LH和FSH水平的作用在性腺功能減退的男性患者中，用AndroxalTM治療產生了LH血清水平的統(tǒng)計學顯著的提高(附圖6)。如在總血清睪酮的情況中，在隨訪期(即，每日口服治療停止后7-10日)血清LH的水平出人意料的連續(xù)，其中對于三組AndroxalTM劑量，血清LH都保持較高水平。作為對比，用Androgd⑧治療在開始時降低了LH,在停藥后有向預治療水平的明顯回跳。在性腺功能減退的男性患者中，用AndroxalTM治療也會產生FSH血清水平的統(tǒng)計學顯著的提高(附圖7)。。FSH的提高模式與在LH的情況中所觀察到的類似，即，所有劑量的AndroxalTM提高了血清FSH,并且在隨訪期仍保持較高水平，而AndroGel⑧抑制了血清FSH的水平，停止治療使得血清FSH向著更類似于預治療水平的濃度回跳。3.對其它臨床化學參數(shù)的作用也測定了對血清二羥基睪酮(DHT)水平的作用。服用Androxal的男性發(fā)生了DHT向總睪酮的有利轉變。例如，服用50mg劑量的AndroxalTM的男性DHT/IT比為0.83,而作為比較，安慰劑組為1.07。作為比較，每個Androgel組的DHT/TT比均〉1.5。該結果表明，服用AndrogeM)的男性可以比總睪酮更快地獲得DHT。因此，在服用AndrogeM)的男性中，相對于睪酮，DHT的正常水平受到了破壞。也顯示了臨床化學參數(shù)的結果，出人意料地，服用AndroxalTM的男性經歷了非劑量依賴性的甘油三酯降低。在治療2周后，甘油三酯平均降低了19.1%。作為比較，安慰劑組降低了5.9%,而對于Androgel5G和10G則分別提高了0.3%和22%。4.討論根據(jù)該研究，我們推斷作為潛在的療法，AndroxalTM對于很多患者都是有利的。Androxal可以將總睪酮以高度連貫的方式提高至正常范圍，而不會使血清睪酮出現(xiàn)異常的高尖峰。此外，使用反式氯米芬來治療患有繼發(fā)性性腺機能減退的男性提供了一種新的途徑，潛在性地其可以^氐消外源性治療例如Androgel的某一主要的副作用。夕卜源性治療劑提供了負反饋，因此可以降低FSH和LH產生。FSH是一種重要的生殖激素，在男性中可以刺激精子產生。當長期與外源性睪酮接觸時，作為對FSH產生的作用的結果，導致了精液合成降低，由于精子量較低導致可能有暫時的不育癥，因此導致睪丸收縮，睪丸的體積與曲細精管內精子產生的水平有關。FSH水平的升高也表明，AndroxalTM可以用于治療男性，包括性腺功能減退的男性的不育癥。權利要求1.一種治療男性不育癥的方法，包括給需要的患者施用一種組合物，該組合物包含有效量的反式氯米芬或其藥學可接受的鹽或溶劑化物和任選的一種或多種藥學可接受的稀釋劑、輔劑、載體或賦形劑，其中該組合物的特征如下(a)反式氯米芬與順式氯米芬的比例大于71/29；或(b)該組合物包含0％到約29％w/w的順式氯米芬和約100％到約71％的反式氯米芬。2.權利要求1的方法，其中該組合物基本上由有效量的反式氯米芬或其藥學可接受的鹽或溶劑化物組成。3.權利要求1的方法，其中該組合物以每日1-200mg反式-氯米芬的劑量施用。4.權利要求3的方法，其中該組合物以每日約50mg反式-氯米芬的劑量施用。5.權利要求3的方法，其中該組合物以每日1.5mg/kg反式-氯米芬的劑量施用。6.權利要求l的方法，其中該組合物是以膠嚢形式提供。7.權利要求2的方法，其中該組合物以每日l-200mg反式-氯米芬的劑量施用。8.權利要求7的方法，其中該組合物以每日約50mg反式-氯米芬的劑量施用。9.權利要求7的方法，其中該組合物以每日1.5mg/kg反式-氯米芬的劑量施用。10.權利要求2的方法，其中該組合物是以膠嚢形式提供。全文摘要治療男性不育癥的包含反式氯米芬的組合物，可以用于治療男性不育癥。文檔編號A61K31/137GK101115477SQ200680004157公開日2008年1月30日申請日期2006年2月3日優(yōu)先權日2005年2月4日發(fā)明者J·波多爾斯基申請人:雷普羅斯治療公司