專利名稱：同載間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物的抗癌緩釋劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含間質(zhì)水解劑的抗實(shí)體腫瘤組合物，為抗癌緩釋劑，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明提供一種含間質(zhì)水解劑的緩釋注射劑和緩釋植入劑。該抗癌緩釋劑可有效地抑制或破壞實(shí)體腫瘤間質(zhì)及腫瘤血管，并能抑制腫瘤的新生血管，有效降低腫瘤內(nèi)的張力、間質(zhì)壓力、間質(zhì)粘性，進(jìn)而提高其間質(zhì)液導(dǎo)率，有利于藥物進(jìn)入實(shí)體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴(kuò)散。
背景技術(shù)：
癌癥手術(shù)治療不能清除散在的瘤細(xì)胞，因此常復(fù)發(fā)或?qū)е履[瘤細(xì)胞因手術(shù)刺激而擴(kuò)散轉(zhuǎn)移；放療和傳統(tǒng)的化療不具選擇性，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度或治療劑量，效果差，毒性大，單純提高藥物或放射劑量又受到全身毒性反應(yīng)的限制。參見孔等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁，1998年(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)。
低劑量的藥物治療不僅能夠增加癌細(xì)胞的藥物耐受性，而且還可促進(jìn)其浸潤性生長”，參見梁等“順鉑脈沖篩選后增加了人肺癌細(xì)胞的藥物耐受性及體外浸潤能力并伴有基因表達(dá)的改變”《國際癌癥雜志》111期484-93頁，2004年(Liang Y，et al.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。
抗腫瘤藥物局部放置能夠較好地克服以上缺陷，不僅能夠明顯提高腫瘤局部的藥物濃度，而且可以顯著降低全身毒性反應(yīng)。大量體內(nèi)外試驗(yàn)已顯示出對實(shí)體腫瘤的治療效果，參見孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)和孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑治愈大鼠原發(fā)腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》64期268-273頁(1997年)(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1997 Oct；64268-273)。還可參見中國專利(ZL00111093.4；ZL96115937.5；申請?zhí)?01111264，001111272)及美國發(fā)明專利(專利號6,376,525B1；5,651,986；5,626,862)。
然而，實(shí)體腫瘤由腫瘤細(xì)胞和腫瘤間質(zhì)組成，其中腫瘤間質(zhì)中的血管不僅為腫瘤細(xì)胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴(kuò)散，參見尼提等“細(xì)胞外間質(zhì)的狀況對實(shí)體腫瘤內(nèi)藥物運(yùn)轉(zhuǎn)的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁，2000年(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。
腫瘤間質(zhì)中的血管及結(jié)締組織中的纖維蛋白及膠原蛋白等成分與過度增生的腫瘤細(xì)胞導(dǎo)致實(shí)體腫瘤的間質(zhì)壓力(interstitial pressure)高、間質(zhì)粘性(interstitialviscosity)大、組織張力系數(shù)(tissue tensile modulus)大、間質(zhì)液導(dǎo)率(hydraulicconductance)低。以上諸因素大大限制了藥物進(jìn)入實(shí)體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴(kuò)散，因此構(gòu)成腫瘤化療的主要障礙。
不僅如此，腫瘤間質(zhì)中的血管對常規(guī)化療藥物并不敏感，常導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對埃坡霉素的耐受性的增強(qiáng)，其結(jié)果是治療失敗。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的藥物組合物，含間質(zhì)水解劑和或埃坡霉素。更具體而言，是抗實(shí)體腫瘤的緩釋劑，主要為緩釋植入劑和緩釋注射劑。
本發(fā)明抗實(shí)體腫瘤緩釋劑包括抗癌有效成分和藥用輔料，抗癌有效成分選自埃坡霉素及其衍生物和或間質(zhì)水解劑。間質(zhì)水解劑為血管抑制劑和/或蛋白水解酶，血管抑制劑除具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用外，可有效地抑制或破壞腫瘤的血管并能抑制腫瘤的新生血管的形成，進(jìn)而不僅使腫瘤細(xì)胞失去生長所需的支架及營養(yǎng)物質(zhì)的來源，與蛋白水解酶合用或單獨(dú)應(yīng)用還可明顯促進(jìn)化療藥物進(jìn)入腫瘤及在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴(kuò)散；蛋白水解酶可有效降解腫瘤間質(zhì)中的血管及結(jié)締組織中的纖維蛋白及膠原蛋白等成分，有效降低腫瘤內(nèi)的張力、間質(zhì)壓力、間質(zhì)粘性，進(jìn)而提高其間質(zhì)液導(dǎo)率，有利于藥物進(jìn)入實(shí)體腫瘤以及在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴(kuò)散。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，埃坡霉素和間質(zhì)水解劑制成的埃坡霉素緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度、降低藥物對正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術(shù)操作的并發(fā)癥、降低病人的費(fèi)用。以上意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明的復(fù)方藥物組合物可制成任意制劑形式，如，但不限于，膠囊、緩釋劑、顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、注射劑、軟膏、貼劑、植入劑、緩釋劑植入劑、緩釋劑注射劑等。其中以緩釋劑為優(yōu)選，以緩釋劑植入劑和緩釋劑注射劑為最優(yōu)選。
藥用輔料有數(shù)百種以上，具有緩釋作用的藥用輔料，特別是能將本發(fā)明中所選的間質(zhì)水解劑在人體或動(dòng)物體內(nèi)于一定的時(shí)間內(nèi)緩慢釋放比非顯而易見，特定的緩釋輔料與可緩釋藥物組合的選擇需要經(jīng)過大量的創(chuàng)造性勞動(dòng)才能確定。相關(guān)數(shù)據(jù)，特別是動(dòng)物體內(nèi)釋放特性的數(shù)據(jù)需要經(jīng)過體內(nèi)外大量創(chuàng)造性的實(shí)驗(yàn)才能獲得，并非經(jīng)過有限的實(shí)驗(yàn)就能確定，具有非顯而易見性。
緩釋輔料的選擇因藥物而定。經(jīng)大量研究發(fā)現(xiàn)，對于此類藥物而言，粘度范圍IV(dl/g)為0.1～0.8的水溶性多聚物較理想。特別適于本發(fā)明的緩釋輔料優(yōu)選聚磷酯(polyphosphoesters)、聚磷酸酯(polyphosphate)、聚亞磷酸酯(polyphosphite)、聚膦酸酯(polyphosphonate)、聚脂環(huán)磷酸酯(poly(cycloaliphatic phosphoester))、磷酸乙酯(EOP)、聚(1，4-二(羥乙酯)對苯二酸酯-co-磷酸乙酯/對苯二酸酯鹽酸酯，80/20)(p(BHET-EOP/TC，80/20))、p(BHET-EOP/TC，50/50)、聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯(p(LAEG-EOP))、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)(p(DAPG-EOP))、反(式)-1，4-二甲基環(huán)己烷(trans-1，4-cyclohexane dimethanil，CHDM)、己基二氯代磷酸酯(hexylphosphorodichloridate，HOP)、4-二甲胺基吡啶(4-dimethylaminopyridine，DMAP)、聚(1，4-二(羥乙酯)對苯二酸酯-co-4-二甲胺基吡啶-co-磷酸乙酯/對苯二酸酯鹽酸鹽，80/20)(p(BHDPT-EOP/TC，80/20))、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、聚(反(式)-1，4-二甲基環(huán)己烷-磷酸乙酯)(p(CHDM-HOP))或聚(反(式)-1，4-二甲基環(huán)己烷-己基二氯代磷酸酯(p(CHDM-EOP))。
緩釋輔料還可選用上述任意一種與外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚對二氧環(huán)己酮(PDO)、聚三亞甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、殼聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或蛋白膠的組合。
蛋白水解酶選自彈性蛋白酶、胰彈性蛋白酶、金屬蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、木瓜酶、木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、纖溶酶、舍雷硫代肽酶、胰酶、組織蛋白酶-G、半胱氨酸蛋白酶、硫酯酶、酰胺轉(zhuǎn)移酶、轉(zhuǎn)酯酶活性、纖溶酶原激活劑、膠原酶、多形核白細(xì)胞絲氨酸蛋白酶、核酸酶、脂肪酶、酯酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、神經(jīng)氨酸酶、淀粉酶、松弛肽、干擾素(γ-干擾素)和纖維蛋白酶中的一種或其組合。
其中以彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G、纖溶酶原激活劑、膠原酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、干擾素(γ-干擾素)和纖維蛋白酶為優(yōu)選。
血管抑制劑選自吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素、TNP-470中的一種或其組合。
以上新生新生血管抑制劑還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等。
本發(fā)明中間質(zhì)水解劑在組合物中所占的比例因具體情況而定，可為0.1％-50％，以1％-40％為佳，5％-30％為最佳。
埃坡霉素選自下列之一或組合埃坡霉素(Epothilone)或埃坡霉素衍生物，埃坡霉素衍生物選自埃坡霉素A、埃坡霉素B(Patupilone，EPO-906)、埃坡霉素C(去氧埃坡霉素，desoxyepothilone)、埃坡霉素D(epothilone D(EpoD)，12，13-desoxyepothilone B，去氧埃坡霉素B，dEpoB，KOS-862或NSC-703147)、埃坡霉素E、埃坡霉素F等以及它們的衍生物。
其中，埃坡霉素C的衍生物如，但不限于，4-去甲基-9-酮-埃坡霉素C、12，13-二氫-13-氧埃坡霉素C(12，13-dihydro-13-oxoepothilone C)；埃坡霉素B的衍生物如，但不限于，21和26位分別或同時(shí)被氨基取代的埃坡霉素B、9，10位去氫埃坡霉素B、10，11位去氫埃坡霉素B、26，27位被鹵素取代的埃坡霉素B、9位，10位，11位，14位，21位，26位分別被羥基取代的埃坡霉素B、21，26-二羥基埃坡霉素B、21-羥基-10，11去氫埃坡霉素B、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素B、4-去甲基-9，10-二去氫埃坡霉素B、4-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B、6-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B、21-氨基埃坡霉素B、21-羥基埃坡霉素B、26-羥基埃坡霉素B、26-氟埃坡霉素B、26-氨基埃坡霉素B、12，13位環(huán)丙基埃坡霉素B、12，13位環(huán)丁基埃坡霉素B、ixabepilone(BMS-247550)、氮雜埃坡霉素B(Azaepothilone B，內(nèi)脂環(huán)中的氧被氮取代)、26-三氟-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B(26-Trifluoro-(E)-9，10-dehydro-12，13-desoxyepothilone B[Fludelone(Flu)])；埃坡霉素D的衍生物如，但不限于，21和26位分別或同時(shí)被氨基取代的埃坡霉素D、9和10位去氫埃坡霉素D、10，11位去氫埃坡霉素D、26，27位被鹵素取代的埃坡霉素D、9位，10位，11位，14位，21位，26位分別被羥基取代的埃坡霉素D、21，26-二羥基埃坡霉素D、21-羥基-10，11去氫埃坡霉素D、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素D、4-去甲基-9，10-二去氫埃坡霉素D、4-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素D、6-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素D、21-羥基埃坡霉素D、21-氨基埃坡霉素D、26-羥基埃坡霉素D、26-氨基埃坡霉素D、26-氟埃坡霉素D、6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素(或異埃坡霉素)、異埃坡霉素D、9，10去氫埃坡霉素D、10，11去氫埃坡霉素D、呋喃埃坡霉素D(furano-epothilone D)，(E)-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素D(E)-9，10-dehydro-12，13-desoxyepothiloneD)，BMS-310705，6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素(ZK-EPO)，11，12-去氫-12，13-去氫-13-去氧埃坡霉素D11，12-dehydro-12，13-dihydro-13-oxoepothilone D、12，13-去氫-13-去氧埃坡霉素D(12，13-dihydro-13-oxoepothilone D)、9-氧基埃坡霉素D(9-oxoepothilone D)、8-表-9-氧基埃坡霉素D(8-epi-9-oxoepothilone D)、上述埃坡霉素及埃坡霉素衍生物優(yōu)選埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、ixabepilone(BMS-247550)、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D、BMS-310705中的一種或其組合。
上述埃坡霉素及埃坡霉素衍生物埃坡霉素及其衍生物還可由雷帕霉素(rapamycin)取代。雷帕霉素、埃坡霉素及埃坡霉素衍生物在組合物中所占的比例因具體情況而定，可為0.1％-50％，以1％-30％為佳，5％-20％為最佳。
抗癌有效成分間質(zhì)水解劑和/或埃坡霉素衍生物在藥物緩釋劑中的重量百分比為0.5％-60％，以2％-40％為佳，以5％-30％為最佳。間質(zhì)水解劑與埃坡霉素衍生物的重量比為1-19∶1到1∶1-19，以1-9∶1為優(yōu)選。
本發(fā)明抗癌緩釋劑中的抗癌有效成分優(yōu)選如下(1)2-40％的彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G、纖溶酶原激活劑、膠原酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干擾素、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470；(2)2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、ixabepilone(BMS-247550)、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705；(3)2-40％的梭菌蛋白酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑索、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470與2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、ixabepilone(BMS-247550)、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705的組合。
本發(fā)明緩釋微球中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選下列之一(1)25-70％的PLGA與30-80％的聚苯丙生；(2)30-90％的聚苯丙生與35-90％的PLA；(3)40-95％的p(BHET-EOP/TC)；(4)40-95％的p(LAEG-EOP)；(5)40-95％的p(DAPG-EOP)；(6)40-95％的p(BHDPT-EOP/TC)；(7)40-95％的p(CHDM-HOP)；(8)40-95％的p(CHDM-EOP)；或(9)40-95％的35-95％的p(DAPG-EOP)與20-60％的癸二酸、25-60％的PLGA、35-60％的PLA或30-60％的聚苯丙生共混或聚合。
以上組合中，輔料的總量不超過98％。
分子量峰值及共聚物中單體比為a)聚乳酸分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚苯丙生中，對羧苯基丙烷∶癸二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；d)p(BHET-EOP/TC)中，BHET-EOP∶TC為90-40∶10-60；e)p(BHDPT-EOP/TC)中、BHDPT-EOP∶TC為90-40∶10-60；f)p(DAPG-EOP)的分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；在各種高分子聚合物中，分子量峰值因不同需要而定，可為，但不限于，5000-200,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以5,000-30,000為最優(yōu)選；單體共混比因不同需要而定，可為，但不限于，10-90∶90-10，但以20-80∶80-20為優(yōu)選，以40-60∶60-40為最優(yōu)，高分子粘度范圍IV(dl/g)為0.1～0.8，以0.2-0.6為優(yōu)選，以0.2-0.5為最優(yōu)選。
本發(fā)明的的一種優(yōu)選形式是緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。具體而言，該抗癌緩釋注射劑由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分 0.5-60％緩釋輔料 40-99％助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。
其中，抗癌有效成分為間質(zhì)水解劑或和埃坡霉素。
助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
當(dāng)藥物緩釋微球中的抗癌有效成分僅為間質(zhì)水解劑或埃坡霉素衍生物時(shí)，抗癌緩釋注射劑主要用于增加其它途徑應(yīng)用的間質(zhì)水解劑或埃坡霉素衍生物的作用效果，或用于對放療或其它療法的增效。當(dāng)藥物緩釋微球中的抗癌有效成分僅為間質(zhì)水解劑或其增效劑(埃坡霉素衍生物)時(shí)，抗癌緩釋注射劑的應(yīng)用及增效方式為(1)含間質(zhì)水解劑的緩釋注射劑局部注射，而埃坡霉素衍生物經(jīng)其他途徑應(yīng)用；(2)局部注射含埃坡霉素衍生物的緩釋注射劑，其他途徑應(yīng)用間質(zhì)水解劑；(3)局部注射含間質(zhì)水解劑的緩釋注射劑與含埃坡霉素衍生物的緩釋注射劑；或(4)局部注射含間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物的緩釋注射劑。
局部應(yīng)用的抗癌緩釋注射劑還用于對放療或其它療法的增效。其他途徑指，但不限于，動(dòng)脈、靜脈、腹腔、皮下、腔內(nèi)給藥。
緩釋注射劑中，藥物緩釋系統(tǒng)可制成微球、亞微球、微乳、納米球、顆?；蚯蛐涡⊥瑁缓笈c注射溶媒混合后制成注射劑使用。在各種緩釋注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優(yōu)選，混懸型緩釋注射劑是將含抗癌成分的藥物緩釋系統(tǒng)懸浮于注射液中所得的制劑，所用的緩釋輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限于，蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液。助懸劑的目的在于有效懸浮含藥微球，從而利于注射之用。為方便注射，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))。助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
助懸劑在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可為0.1-30％因具體情況而定。優(yōu)選助懸劑的組成為A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；或B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
溶媒的制備則取決于溶媒的種類，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液，但必須嚴(yán)格按照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。特殊溶媒需考慮到助懸劑的種類及其組成、溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質(zhì)及其需要量及注射劑的制備方法，如將羧甲基纖維素鈉(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐溫80(0.1％)溶于生理鹽水中得相應(yīng)得溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關(guān)鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強(qiáng)。這種意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的主要指數(shù)特征之一。溶媒的黏度取決于助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))。按照此條件所制得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選20cp-650cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選60cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。
注射劑的制備有多種方法，一種是將助懸劑為“0”的緩釋微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為“0”的緩釋微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助懸劑混勻，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混于特殊溶媒中制得相應(yīng)的混懸液，然后用真空干燥等辦法去除混懸液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用于說明而非限制本發(fā)明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優(yōu)選，以50-200mg/ml最優(yōu)選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選100cp-1000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選200cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。此黏度適用于18-22號注射針頭和特制的內(nèi)徑更大的(至3毫米)注射針頭。
緩釋注射劑的制備方法是任意的，可用若干種方法制備如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、噴霧干燥法制備微球、溶解法結(jié)合冷凍(干燥)粉碎法制成微粉、脂質(zhì)體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發(fā)法)、干燥法、噴霧干燥法和乳化法為優(yōu)選。微球則可用于制備上述各種緩釋注射劑，其方法是任意的。所用微球的粒徑范圍可在5-400um之間，以10-300um之間為優(yōu)選，以20-200um之間為最優(yōu)選。
微球還可用于制備其他緩釋注射劑，如凝膠注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。其中，嵌段共聚物膠束由疏水-親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內(nèi)核-外殼結(jié)構(gòu)，疏水嵌段形成內(nèi)核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進(jìn)入體內(nèi)達(dá)到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優(yōu)選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優(yōu)選生物降解聚合物(如聚磷酯、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)、PLA、聚丙交酯、聚己內(nèi)酯及其共聚物)作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑范圍可在10-300um之間，以20-200um之間的為優(yōu)選。凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內(nèi)酯共聚物)溶于某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)后形成流動(dòng)性較好的凝膠，可經(jīng)瘤周或瘤內(nèi)注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴(kuò)散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或癸二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、PLA與PLGA的混合物、癸二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]。聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
本發(fā)明抗癌藥物緩釋劑的又一種形式是抗癌藥物緩釋劑為緩釋植入劑?？拱┲踩雱┑挠行С煞挚删鶆虻匕b于整個(gè)藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴(kuò)散和/或經(jīng)多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點(diǎn)在于所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可制成多種劑型。如，但不限于，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限于，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放植入劑為優(yōu)選?？蔀?.1-5mm(粗)×1-10mm(長)的棒狀，也可為片狀等其它形狀。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而制成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細(xì)描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，干燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。
緩釋輔料可為各種水溶性或非水溶性高分子多聚物，本發(fā)明抗癌緩釋植入劑的抗癌有效成分及重量百分比優(yōu)選如下(1)2-40％的彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G、纖溶酶原激活劑、膠原酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干擾素、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470；(2)2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、ixabepilone(BMS-247550)、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705；(3)2-40％的梭菌蛋白酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470與2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、ixabepilone(BMS-247550)、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705的組合。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的緩釋輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，在各種高分子聚合物中以水溶性高分子聚合物為主選。
緩釋輔料可為各種水溶性或非水溶性高分子多聚物，在多種緩釋輔料中優(yōu)選p(BHET-EOP/TC，80/20)、p(BHET-EOP/TC，50/50)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC，80/20)、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、p(CHDM-HOP)、p(CHDM-EOP)或以上任意一種輔料與外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、殼聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或蛋白膠的組合。其中捐諞恰熬邸鋇囊饉肌本發(fā)明緩釋植入劑中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下(1)25-70％的PLGA與30-80％的聚苯丙生；(2)30-90％的聚苯丙生與35-90％的PLA；(3)40-95％的p(BHET-EOP/TC)；(4)40-95％的p(LAEG-EOP)；(5)40-95％的p(DAPG-EOP)；(6)40-95％的p(BHDPT-EOP/TC)；(7)40-95％的p(CHDM-HOP)；(8)40-95％的p(CHDM-EOP)；或(9)40-95％的35-95％的p(DAPG-EOP)與20-60％的癸二酸、25-60％的PLGA、35-60％的PLA或30-60％的聚苯丙生共混或聚合。
以上組合中，輔料的總量不超過98％。
分子量峰值及共聚物中單體比為a)聚乳酸分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；
c)聚苯丙生中，對羧苯基丙烷∶癸二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；d)p(BHET-EOP/TC)中，BHET-EOP∶TC為90-40∶10-60；e)p(BHDPT-EOP/TC)中、BHDPT-EOP∶TC為90-40∶10-60；f)p(DAPG-EOP)的分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；在各種高分子聚合物中，分子量峰值因不同需要而定，可為，但不限于，5000-200,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以5,000-30,000為最優(yōu)選；單體共混比因不同需要而定，可為，但不限于，10-90∶90-10，但以20-80∶80-20為優(yōu)選，以40-60∶60-40為最優(yōu)，高分子粘度范圍IV(dl/g)為0.1～0.8，以0.2-0.6為優(yōu)選，以0.2-0.5為最優(yōu)選。
給藥途徑取決于多種因素，為于原發(fā)或轉(zhuǎn)移腫瘤所在部位獲得有效濃度，藥物可經(jīng)多種途徑給予，如皮下、腔內(nèi)(如腹腔、胸腔及椎管內(nèi))、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置、選擇性動(dòng)脈注射、淋巴結(jié)內(nèi)及骨髓內(nèi)注射。以選擇性動(dòng)脈注射、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置為優(yōu)選。
本發(fā)明可以用于制備治療人及動(dòng)物的各種腫瘤的藥物制劑，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑，所指腫瘤包括起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結(jié)腸、直腸的原發(fā)或轉(zhuǎn)移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
本發(fā)明所制的緩釋注射劑或緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。
除上述緩釋輔料外，還可選用其他物質(zhì)見美國專利(專利號4757128；4857311；4888176；4789724；6537585 B1；71101568 B1)及《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細(xì)描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限于，鉀鹽和鈉鹽等；也可添加其它藥用輔料，如，但不限于，充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
通過如下試驗(yàn)和實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)作進(jìn)一步的描述試驗(yàn)1、不同方式應(yīng)用間質(zhì)水解劑(膠原酶)后的局部藥物濃度比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)前列腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長至1厘米直徑后將其分組。每組劑量均為5mg/kg膠原酶。測定不同時(shí)間腫瘤內(nèi)藥物含量(％)，結(jié)果表明，間質(zhì)水解劑經(jīng)不同方式應(yīng)用后的局部藥物濃度差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的重要特征。以下的相關(guān)抑瘤試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。
試驗(yàn)2、不同方式應(yīng)用間質(zhì)水解劑(透明質(zhì)酸酶)后的體內(nèi)抑瘤作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)胰腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長至0.5厘米直徑后將其分組。每組劑量均為5mg/kg透明質(zhì)酸酶。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果。結(jié)果表明，間質(zhì)水解劑經(jīng)不同方式應(yīng)用后的抑瘤作用差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內(nèi)放置緩釋植入劑和瘤內(nèi)注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內(nèi)注射緩釋注射劑操作最方便、容易。不僅療效好，毒副作用也小。
試驗(yàn)3、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的體內(nèi)抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)乳腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表1)。第一組為對照，第2到10組為治療組，藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。間質(zhì)水解劑的劑量為2mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為12mg/kg。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表1)。
表1
以上結(jié)果表明，間質(zhì)水解劑(胰蛋白酶)和其增效劑(埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)4、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細(xì)胞包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)等。將間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物按10ug/ml濃度加到體外培養(yǎng)24小時(shí)的各種腫瘤細(xì)胞中，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)。其腫瘤細(xì)胞生長抑制效果見表2所示。
表2
以上結(jié)果表明，所用埃坡霉素衍生物(異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550)及間質(zhì)水解劑(纖溶酶)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗(yàn)5、間質(zhì)水解劑及埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)肝腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表3)。第一組為對照，第2到10組為治療組，緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。間質(zhì)水解劑的劑量為15mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為5mg/kg。治療后第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表3)。
表3
以上結(jié)果表明，所用間質(zhì)水解劑(糜蛋白酶)及埃坡霉素衍生物(埃坡霉素B、埃坡霉素C、氮雜埃坡霉素B、BMS-310705)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)6、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)肺癌腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組(間質(zhì)水解劑或埃坡霉素衍生物)和聯(lián)合治療組(間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物)。藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。間質(zhì)水解劑的劑量為2.5mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為10mg/kg。治療后第28天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表4)。
表4
以上結(jié)果表明，所用間質(zhì)水解劑(胃蛋白酶)及埃坡霉素衍生物(埃坡霉素D、雷帕霉素、BMS-247550、BMS-310705)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。
試驗(yàn)7、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)乳腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。藥物經(jīng)瘤內(nèi)注射。間質(zhì)水解劑的劑量為4mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為10mg/kg。治療后第21天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表5)。
表5
以上結(jié)果表明，所用間質(zhì)水解劑(膠原酶和透明質(zhì)酸酶各2mg/kg)及埃坡霉素衍生物(埃坡霉素D、埃坡霉素B、雷帕霉素、氮雜埃坡霉素B)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)8、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)甲狀腺腫瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。間質(zhì)水解劑的劑量為10mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為2mg/kg。治療后第28天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表6)。
表6
以上結(jié)果表明，所用間質(zhì)水解劑(菠蘿蛋白酶)及埃坡霉素衍生物(埃坡霉素D、埃坡霉素B、雷帕霉素、氮雜埃坡霉素B)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)9、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用按試驗(yàn)7所述方法測定埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用，結(jié)果表明選自埃坡霉素D、埃坡霉素B、雷帕霉素、氮雜埃坡霉素B等埃坡霉素衍生物能顯著增強(qiáng)胰蛋白酶或胃蛋白酶對胰腺癌、肺癌、結(jié)腸及卵巢癌的抑瘤效果，增效作用在58-68％(P＜0.01)。
試驗(yàn)10、不同分子量聚乳酸制成的間質(zhì)水解劑緩釋植入劑的體內(nèi)釋放比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，分組(3只/組)并于皮下給予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承載的等量間質(zhì)水解劑(松弛肽)緩釋植入劑。然后分別于1、3、7、14、21、28和35天測藥物于植入劑內(nèi)的剩余量，進(jìn)而得出其體內(nèi)釋放速度(％)。結(jié)果表明，分子量為20000的釋放為1天(8％)、3(28％)、7(56％)、14(82％)、21(90)、28(94)和35(98％)。比較不同分子量聚乳酸制成的松弛肽緩釋植入劑的體內(nèi)釋放發(fā)現(xiàn)，隨分子量增加而變慢，以第7天為例，與全身給藥組相比，腫瘤抑制率隨聚乳酸分子量增加而提高，依次為68％(MW5000)、66％(MW15000)、54％(MW25000)、50％(MW40000)和48(MW60000)。
試驗(yàn)11、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)食道癌細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。間質(zhì)水解劑的劑量為3mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為15mg/kg。治療后第28天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表7)。
表7
以上結(jié)果表明，所用間質(zhì)水解劑(分散酶、梭菌蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼)及埃坡霉素衍生物(埃坡霉素B)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
試驗(yàn)12、間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物(緩釋注射劑)的抑瘤作用以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)淋巴瘤細(xì)胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為陰性對照(空白)、單藥治療組、聯(lián)合治療組。緩釋植入劑經(jīng)瘤內(nèi)放置。間質(zhì)水解劑的劑量為12mg/kg，埃坡霉素衍生物的劑量均為6mg/kg。治療后第28天測量腫瘤體積大小，用腫瘤生長抑制率作指標(biāo)比較治療效果(見表8)。
表8
以上結(jié)果表明，所用間質(zhì)水解劑(拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、血管內(nèi)皮抑素)及埃坡霉素衍生物(埃坡霉素D)在該濃度單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明又一重要特征。
特別注意的是，本發(fā)明的緩釋劑，特別是緩釋注射劑操作簡單方便、重復(fù)性好。不僅療效好，毒副作用小。
總之，所用間質(zhì)水解劑和各種埃坡霉素衍生物單獨(dú)應(yīng)用時(shí)對多種腫瘤細(xì)胞生長均有明顯的抑制作用，當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可表現(xiàn)出顯著的增效作用。因此，本發(fā)明所述的的有效成分為間質(zhì)水解劑與任意一種埃坡霉素衍生物。含有以上有效成分的藥物可制成緩釋微球，進(jìn)而制成緩釋注射劑和植入劑，其中以與含助懸劑的特殊溶媒組合形成的混懸注射劑為優(yōu)選。
緩釋注射劑或緩釋植入劑還可通過以下實(shí)施方式得以進(jìn)一步說明。上述實(shí)施例及以下實(shí)施例只是對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，并非對其內(nèi)容和使用作任何限制。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1.
將40mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為20∶80)共聚物和40mgPLGA(50∶50，MW20000)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg埃坡霉素D和10mg膠原酶，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％埃坡霉素D和10％膠原酶的注射用微球。然后將微球懸浮于含15％甘露醇的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為280cp-560cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為22-35天左右。
實(shí)施例2.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1相同，但所不同的是緩釋輔料聚苯丙生的對羧苯基丙烷∶癸二酸為50∶50，PLGA為75∶250，MW為40000；所含抗癌有效成分為5％雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與15％吉非替尼的組合；緩釋注射劑的黏度為300cp-580cp(20℃-30℃時(shí))。
實(shí)施例3.
將40mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為20∶80)共聚物和40mgPLA(MW20000)放入容器中放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入5mg透明質(zhì)酸酶和15mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含5％透明質(zhì)酸酶和15％雷帕霉素的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為200cp-420cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為20-35天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例4加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例3相同，但所不同的是緩釋輔料聚苯丙生的對羧苯基丙烷∶癸二酸為50∶50，PLA的MW為40000；所含抗癌有效成分及其重量百分比為5-30％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與2-40％的透明質(zhì)酸酶或厄羅替尼的組合；緩釋輔料為分子量峰值為20000-40000的聚乳酸(PLGA，50∶50)；緩釋注射劑的黏度為320cp-640cp(20℃-30℃時(shí))。
實(shí)施例5.
將70mg分子量峰值為10000-25000的p(BHET-EOP/TC，80/20)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入20mg埃坡霉素B和10mg吉非替尼，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％埃坡霉素B和10％吉非替尼的注射用微球。然后將微球懸浮于含5-15％山梨醇的注射液中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為340cp-400cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例6.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例5相同，但所不同的是緩釋輔料為分子量峰值為25000-45000的p(BHET-EOP/TC，50/50)，所含抗癌有效成分為15％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與10％的吉非替尼、鏈激酶、糖苷酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干擾素或纖維蛋白酶的組合。
實(shí)施例7.
將70mg分子量峰值為10000-25000的p(LAEG-EOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20mg拉帕替尼和10mg異埃坡霉素D，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％拉帕替尼與10％異埃坡霉素D的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和0.5％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為180cp-350cp(20℃-25℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例8.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例7相同，但所不同的是緩釋輔料為分子量峰值為10000-25000的p(DAPG-EOP)，所含抗癌有效成分為15-25％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與15-25％的纖溶酶、舍雷硫代肽酶、胰酶、組織蛋白酶-G、半胱氨酸蛋白酶、硫酯酶、酰胺轉(zhuǎn)移酶、轉(zhuǎn)酯酶活性或纖溶酶原激活劑的組合。
實(shí)施例9將70mg分子量峰值為20000-45000的p(DAPG-EOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20mg血管內(nèi)皮抑素和10mg BMS-247550，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％血管內(nèi)皮抑素和10％的BMS-247550注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和15％山梨醇和0.2％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為260cp-600cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例10加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例9相同，但所不同的是緩釋輔料為分子量峰值為45000-65000的p(DAPG-EOP)，所含抗癌有效成分為10-20％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與10-20％的拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、SU6668或煙曲霉素的組合。
實(shí)施例11將70mg分子量峰值為15000-25000的p(BHDPT-EOP/TC，80/20)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg氮雜埃坡霉素B和20mg伏他拉尼，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％氮雜埃坡霉素B和20％伏他拉尼的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例12加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例11相同，但所不同的是緩釋輔料為分子量峰值為25000-45000的p(BHDPT-EOP/TC，50/50)，是所含抗癌有效成分為10％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與10％的司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他或SU5416的組合。
實(shí)施例13將40mg分子量峰值為15000的聚乳酸(PLA)和30mg分子量峰值為15000-25000的p(CHDM-HOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg呋喃埃坡霉素D和20mg達(dá)薩替尼，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％呋喃埃坡霉素D和20％達(dá)薩替尼的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例14加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例11、13相同，但所不同的是緩釋輔料為分子量峰值為10000-25000的p(CHDM-EOP)；所含抗癌有效成分為5-25％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與5-25％的卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬或馬立馬司他的組合。
實(shí)施例15.
將35mg分子量峰值為20000-45000的聚乳酸(PLA)和35mg分子量峰值為20000-45000的p(DAPG-EOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg BMS-310705和15mg索拉非尼，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含15％BMS-310705和15％索拉非尼的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為320cp-460cp(25℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為18-25天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例16加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例15相同，但所不同的是緩釋輔料為分子量峰值為10000-25000的p(DAPG-EOP)和分子量峰值為10000-25000的PLGA各為35毫克，抗癌有效成分及其重量百分比為15％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與15％的胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G或纖溶酶原激活劑的組合。
實(shí)施例17.
將70mg分子量峰值為30000的雙脂肪酸與癸二酸(SA)共聚物(雙脂肪酸∶癸二酸為20∶80)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg梭菌蛋白酶和15mg埃坡霉素D，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含15％梭菌蛋白酶和15％埃坡霉素D的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑，黏度為360cp-480cp(25℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為20-25天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例18.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例17相同，但所不同的是緩釋輔料為40％的聚苯丙生(50∶50)與30％的分子量峰值為10000-30000的PLA混合物，抗癌有效成分及其重量百分比為15％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與15％的胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G或纖溶酶原激活劑的組合。
實(shí)施例19加工成緩釋劑的方法步驟與實(shí)施例1-18相同，但所不同的是所用的緩釋輔料(1)25-70％的PLGA與30-80％的聚苯丙生；(2)30-90％的聚苯丙生與35-90％的PLA；(3)40-95％的p(BHET-EOP/TC)；(4)40-95％的p(LAEG-EOP)；(5)40-95％的p(DAPG-EOP)；(6)40-95％的p(BHDPT-EOP/TC)；(7)40-95％的p(CHDM-HOP)；(8)40-95％的p(CHDM-EOP)；或(9)40-95％的35-95％的p(DAPG-EOP)與20-60％的癸二酸、25-60％的PLGA、35-60％的PLA或30-60％的聚苯丙生共混或聚合。
以上組合中，輔料的總量不超過98％。
實(shí)施例20加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-19相同，但所不同的是所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20。
實(shí)施例21加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-20相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為2-10％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與2-10％的菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G或纖溶酶原的組合。
實(shí)施例22加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-20相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為20-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與20-40％的糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G或纖溶酶原的組合。
實(shí)施例23加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-12相同，但所不同的是所含抗癌有效成分制成植入劑，所不同的是所含抗癌有效成分為20-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與10-20％的糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G或纖溶酶原的組合。
實(shí)施例24加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例14-22相同，但所不同的是所含抗癌有效成分制成植入劑，所不同的是所含抗癌有效成分為2-20％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705與10-20％的糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G或纖溶酶原的組合。
以上實(shí)施例僅用于說明，而并非局限本發(fā)明的應(yīng)用。
本發(fā)明所公開和保護(hù)的內(nèi)容見權(quán)利要求。
權(quán)利要求
1.一種同載間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物的抗癌緩釋劑，其特征在于該抗癌緩釋劑由緩釋輔料和抗癌有效成分組成，其中，抗癌有效成分選自埃坡霉素衍生物和/或間質(zhì)水解劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于霉素衍生物選自埃坡霉素、雷帕霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素C、12，13-二氫-13-氧埃坡霉素C、21-氨基埃坡霉素B、26-氨基埃坡霉素B、21，26柖被F旅顧谺、9，10-去氫埃坡霉素B、10，11-氫埃坡霉素B、26，27-鹵基埃坡霉素B、9位，10位，11位，14位，21位，26位分別被羥基取代的埃坡霉素B、21，26-二羥基埃坡霉素B、21-羥基-10，11去氫埃坡霉素B、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素B、4-去甲基-9，10-二去氫埃坡霉素B、4-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B、6-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B、21-氨基埃坡霉素B、21-羥基埃坡霉素B、26-羥基埃坡霉素B、26-氟埃坡霉素B、26-氨基埃坡霉素B、12，13位環(huán)丙基埃坡霉素B、12，13位環(huán)丁基埃坡霉素B、ixabepilone、氮雜埃坡霉素B、26-三氟-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B、21和26位分別或同時(shí)被氨基取代的埃坡霉素D、9和10位去氫埃坡霉素D、10，11位去氫埃坡霉素D、26，27位被鹵素取代的埃坡霉素D、9位，10位，11位，14位，21位，26位分別被羥基取代的埃坡霉素D、21，26-二羥基埃坡霉素D、21-羥基-10，11去氫埃坡霉素D、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素D、4-去甲基-9，10-二去氫埃坡霉素D、4-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素D、6-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素D、21-羥基埃坡霉素D、21-氨基埃坡霉素D、26-羥基埃坡霉素D、26-氨基埃坡霉素D、26-氟埃坡霉素D、異埃坡霉素、異埃坡霉素D、9，10去氫埃坡霉素D、10，11去氫埃坡霉素D、呋喃埃坡霉素D、(E)-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素D、BMS-310705，6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素，11，12-去氫-12，13-去氫-13-去氧埃坡霉素D、12，13-去氫-13-去氧埃坡霉素D、9-氧基埃坡霉素D或8-表-9-氧基埃坡霉素D；間質(zhì)水解劑選自彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G、纖溶酶原激活劑、膠原酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干擾素、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素、TNP-470之一或其組合；緩釋輔料選自下列之一(1)55-90％的PLGA與50-90％的聚苯丙生；(2)30-90％的聚苯丙生與35-90％的PLA；(3)40-95％的p(BHET-EOP/TC)；(4)40-95％的p(LAEG-EOP)；(5)40-95％的p(DAPG-EOP)；(6)40-95％的p(BHDPT-EOP/TC)；(7)40-95％的p(CHDM-HOP)；(8)40-95％的p(CHDM-EOP)；或(9)40-95％的350-95％的p(DAPG-EOP)與20-60％的癸二酸、25-60％的PLGA、35-90％的PLA或30-90％的聚苯丙生共混或聚合。以上組合中，不同輔料的總量不超過98％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于分子量峰值及共聚物中單體比為a)聚乳酸分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚苯丙生中，對羧苯基丙烷∶癸二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；d)p(BHET-EOP/TC)中，BHET-EOP∶TC為90-40∶10-60；e)p(BHDPT-EOP/TC)中、BHDPT-EOP∶TC為90-40∶10-60；f)p(DAPG-EOP)的分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于的抗癌緩釋劑為緩釋注射劑，由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分 0.5-60％緩釋輔料 40-99％助懸劑 0.0-30％和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20；f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；g)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或i)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述之抗癌緩釋注射劑，其特征在于抗癌有效成分中間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物的重量比為1-19∶1到1∶1-19。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述之抗癌緩釋注射劑，其特征在于抗癌有效成分及其重量百分比為下列之一(1)2-40％的彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G、纖溶酶原激活劑、膠原酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干擾素、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470；(2)2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705；或(3)2-40％的梭菌蛋白酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470與2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705的組合。
7.根據(jù)權(quán)利要求1和4所述之抗癌緩釋劑，其特征在于抗癌緩釋劑為緩釋植入劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述之抗癌緩釋劑，其特征在于緩釋植入劑中緩釋輔料選自下列之一(1)25-70％的PLGA與30-80％的聚苯丙生；(2)30-90％的聚苯丙生與35-90％的PLA；(3)40-95％的p(BHET-EOP/TC)；(4)40-95％的p(LAEG-EOP)；(5)40-95％的p(DAPG-EOP)；(6)40-95％的p(BHDPT-EOP/TC)；(7)40-95％的p(CHDM-HOP))；(8)40-95％的p(CHDM-EOP)；或(9)40-95％的35-95％的p(DAPG-EOP)與20-60％的癸二酸、25-60％的PLGA、35-60％的PLA或30-60％的聚苯丙生共混或聚合。以上組合中，輔料的總量不超過98％。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述之抗癌緩釋劑，其特征在于緩釋植入劑中的抗癌有效成分及重量百分比優(yōu)選如下(1)2-40％的彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、鏈霉蛋白酶、分散酶、菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、梭菌蛋白酶、纖溶酶、組織蛋白酶-G、纖溶酶原激活劑、膠原酶、鏈激酶、糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、γ-干擾素、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470；(2)2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、ixabepilone BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705；(3)2-40％的梭菌蛋白酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、纖維蛋白酶、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應(yīng)停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素、血管內(nèi)皮抑素、甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達(dá)薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬、馬立馬司他、SU5416、SU6668、煙曲霉素或TNP-470與2-40％的雷帕霉素、埃坡霉素、埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、異埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、BMS-247550、氮雜埃坡霉素B、呋喃埃坡霉素D或BMS-310705的組合。
10.根據(jù)權(quán)利要求1、4和7所述之抗癌緩釋劑，其特征在于抗癌有效成分用于制備治療起源于人及動(dòng)物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結(jié)腸或直腸的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物制劑。
全文摘要
同載間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物的抗癌緩釋劑一種抗癌緩釋注射劑由緩釋微球和溶媒組成。其中緩釋微球包括抗癌有效成分和緩釋輔料，溶媒為含助懸劑的特殊溶媒。抗癌有效成分為間質(zhì)水解劑和埃坡霉素衍生物；間質(zhì)水解劑選自梭菌蛋白酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、溶菌酶、松弛肽、伏他拉尼、培立替尼等，埃坡霉素衍生物選自埃坡霉素(A－F)、雷帕霉素等；緩釋輔料為p(BHET－EOP/TC)、p(LAEG－EOP)、p(DAPG－EOP)、p(BHDPT－EOP/TC)、p(CHDM－HOP)、p(CHDM－EOP)、p(DAPG－EOP)等；助懸劑的黏度為100cp－3000cp(25℃－30℃時(shí))，選自羧甲基纖維素鈉等。緩釋微球還可制成緩釋植入劑，于瘤內(nèi)或瘤周注射或放置可降低藥物的全身反應(yīng)、選擇性地提高藥物瘤內(nèi)滲透和擴(kuò)散，有利于維持腫瘤局部藥物濃度。因此，除用于腫瘤治療，還可增強(qiáng)化療和/或放療等非手術(shù)療法的抑瘤效果。
文檔編號A61K45/06GK1957916SQ20061020120
公開日2007年5月9日 申請日期2006年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月4日
發(fā)明者孫娟, 劉玉燕, 孔慶新 申請人:濟(jì)南帥華醫(yī)藥科技有限公司