專利名稱：：一種用于治療禽大腸桿菌病的中藥顆粒劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于獸藥領(lǐng)域，特別是涉及一種用于治療禽大腸桿菌病的中藥顆粒布j。技術(shù)背景禽致病性大腸桿菌的耐藥性及其廣泛且迅速的傳播，使禽大腸桿菌病上升為危害養(yǎng)禽業(yè)最棘手的疾病之一。由于腸道微生物抗原和抗原決定簇復(fù)雜，免疫機(jī)制存在差異，從菌苗角度防治該病尚未取得突破性進(jìn)展，故化學(xué)藥物仍是防治本病的主要手段。而抗菌藥的濫用和大量亞治療量的預(yù)防、飼料添加用藥及無節(jié)制地延長用藥時(shí)間，均導(dǎo)致了大腸桿菌耐藥性的產(chǎn)生、傳播，同時(shí)造成了藥物殘留而危害人畜健康及公共衛(wèi)生的可能。大腸桿菌病中醫(yī)也稱為"腸黃"，是雞的常見病之一，本病的病機(jī)為濕熱蘊(yùn)結(jié)于大腸，導(dǎo)致氣血受阻，傳導(dǎo)失職。使?jié)駸岫拘白饔糜诖竽c而產(chǎn)生腸內(nèi)生黃，見有腹痛、瀉痢，后則水瀉。濕熱之邪與血搏結(jié)，使腸絡(luò)受阻。見糞中有膿血混雜、其味腥臭。熱盛傷津，故口渴貪飲之征象。治則以清熱燥濕，涼血解毒。我國傳統(tǒng)中草藥在清熱燥濕，涼血解毒方面的優(yōu)秀經(jīng)典組方很多。近年來，國內(nèi)學(xué)者從現(xiàn)代藥理學(xué)角度對(duì)中藥的抗菌機(jī)理進(jìn)行了研究，為中草藥的合理使用提供了現(xiàn)代理論基礎(chǔ)。目前臨床上使用的中藥制劑多為散劑，存在給藥不便，又因雞的消化道短，不能消化木質(zhì)纖維素，而引起的藥物吸收差，用量大等缺點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容基于上述情況，本發(fā)明旨在提供一種用于治療禽大腸桿菌病的復(fù)方中藥顆粒劑。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種用于治療禽大腸桿菌病的復(fù)方中藥制劑，其特征在于:黃連3-5份，黃柏3-5份，金銀花4-6份，菊花3-5份，白頭翁3-5份，蒼術(shù)3-5份，石榴皮3-5份，蒲公英3-5份，地榆3-5份，板藍(lán)根3-5份，穿心蓮4-6份，茯苓2-3份，五倍子3-5份。優(yōu)選為黃連4份，黃柏4份，金銀花4.5份，菊花4份，白頭翁4份，蒼術(shù)4份，石榴皮4份，蒲公英4份，地榆4份，板藍(lán)根4份，穿心蓮4.5份，茯苓2.5份，五倍子4份。一種用于治療禽大腸桿菌病的復(fù)方中藥制劑，其特征在于所述的復(fù)方中藥制劑的劑型為顆粒劑。根據(jù)中獸醫(yī)辯證論治，大腸桿菌病可視為疫毒內(nèi)侵，肺胃熱盛，血瘀氣滯，治宜清熱解毒，活血散瘀。方中黃連、黃柏、金銀花清熱解毒，涼血消腫為主，蒲公英、菊花、板藍(lán)根、白頭翁、穿心蓮清熱解毒、涼血止痢、消腫止痛，石榴皮、蒼術(shù)澀腸、燥濕止痢為輔藥，地榆、五倍子收斂止血為佐藥，茯苓滲濕健脾為使藥。黃柏清濕熱、虛火為佐藥。各藥合用共達(dá)清熱解毒、涼血清火止痢的功效。本發(fā)明采用行業(yè)通用的方法制得將十三味藥材，加水煎煮兩次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓薄膜蒸發(fā)，濃縮至相對(duì)密度為1.29-1.31(65°C)的清膏。加輔料適量制粒，濕粒干燥整形，分裝，即得。下面以具體實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明的余果l材料與方法1.1試驗(yàn)藥物供試藥品為本發(fā)明藥物，主要成分為黃連、黃柏、金銀花、菊花、白頭翁、蒼術(shù)、石榴皮、蒲公英、地榆、板藍(lán)根、穿心蓮、茯夸、五倍子，推薦劑量為0.5g/L飲水；對(duì)照藥品2%諾氟沙星可溶性粉，鹽酸諾氟沙星購自浙江某藥廠，批號(hào)030107。1.2試驗(yàn)動(dòng)物430只AA混合肉雛，購自南京某養(yǎng)雞公司，運(yùn)至禽舍內(nèi)籠養(yǎng)，常規(guī)管理，喂給全價(jià)飼料至14日齡，經(jīng)檢查沒有發(fā)生大腸桿菌病，即可示為試驗(yàn)用雞。其中80只用來做預(yù)試驗(yàn)，將其余350只試驗(yàn)用健康雞分成7組，其中l(wèi)、2、3組分別為攻毒本發(fā)明藥物高、中、低治療組，4組為諾氟沙星可溶性粉對(duì)照組，5組為陰性對(duì)照組(攻毒未治疔對(duì)照組)，6組為陽性對(duì)照組(不攻毒不治療的健康對(duì)照組)，安全對(duì)照組(按照IO倍本發(fā)明藥物推薦劑量使用于健康試驗(yàn)雞只)。1.3大腸肝菌人工感染劑量的確定1.3.1菌種雞大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(078血清型)由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院提供1.3.2試驗(yàn)菌液的制備將標(biāo)準(zhǔn)凍干菌O78加0.5ml肉湯溶解后接種于麥康凱瓊脂上，分離單個(gè)菌落。挑取直徑1-2mm光滑、圓形、紅色菌落2-3個(gè)接種于2ml普通肉湯，37'C培養(yǎng)18h。肉湯培養(yǎng)物接種雞復(fù)壯后，從死雞肝臟中分離大腸桿菌，按上述方法重新接種。革蘭氏染色鏡檢無雜菌生長后，作為試驗(yàn)菌液。用平板稀釋法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)約為6xl09CFU/ml。1.3.3攻毒劑量的確定(預(yù)試驗(yàn))80只健康雞，分為4組，每組20只，3組為感染組，1組為對(duì)照組。感染組又分高劑量組(每只雞接種1.2億菌)、中劑量組(每只雞接種0.9億菌)和低劑量組(每只雞接種0.6億菌);對(duì)照組肌注0.5ml生理鹽水。根據(jù)發(fā)病、病變和致死情況，最后確定1.2億雞源性大腸桿菌078標(biāo)準(zhǔn)株為試驗(yàn)攻毒量。1.4試驗(yàn)方法除陽性對(duì)照組和安全對(duì)照組外，每只雞肌肉注射1.2億大腸桿菌。攻毒后4小時(shí)，雛雞表現(xiàn)精神不振、停食、縮頸、閉眼、伏地不動(dòng)及反應(yīng)遲鈍等癥狀。用細(xì)菌學(xué)檢査法確診為大腸桿菌病，此后馬上用藥，連續(xù)使用五天，觀察治療效果。表1試驗(yàn)分組及藥物處理<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>1.5療效判定標(biāo)準(zhǔn)1.5.1死亡在試驗(yàn)期間出現(xiàn)雞大腸桿菌病的典型癥狀并死亡，尸體剖檢有典型的病變特征，并從肝、脾及心分離培養(yǎng)出雞大腸埃希氏菌，判定為感染該菌而死亡。根據(jù)死亡雞數(shù)計(jì)算各組的死亡率。1.5.2治愈在試驗(yàn)期間經(jīng)內(nèi)服給藥后雞精神狀態(tài)、食欲恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)排稀糞等臨床癥狀，均屬治愈。根據(jù)治愈雞占試驗(yàn)雞數(shù)的比率計(jì)算治愈率。1.5.3有效經(jīng)內(nèi)服給藥后，完全治愈的雞和沒有死亡但有臨床癥狀表現(xiàn)者，均為有效；試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組存活的雞數(shù)占試驗(yàn)雞數(shù)的百分率為有效率。1.5.4增重根據(jù)試驗(yàn)開始及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每只雞的體重，計(jì)算每只雞的增重量，然后據(jù)此計(jì)算每組試驗(yàn)雞的平均增重。相對(duì)增重率是按各用藥治療組與健康對(duì)照組的增重之比計(jì)算，其中健康對(duì)照組雞增重率設(shè)為100%。1.6數(shù)據(jù)的分析和處理用生物統(tǒng)計(jì)進(jìn)行數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)，其中死亡率、有效率及治愈率用卡方檢驗(yàn)；增重采用t檢驗(yàn)。2試驗(yàn)結(jié)果各實(shí)驗(yàn)組對(duì)雞大腸桿菌病的療效見表2表2各藥物對(duì)雞大腸桿菌病的療效比較死亡率(y。)治愈率(％)有效率平均增重相對(duì)增重率組別(%)(g)(%)陽性對(duì)照組o—一281.6100陰性對(duì)照組900——本發(fā)明藥物高劑量組108090262.593.2本發(fā)明藥物中劑量組167884261.692.9本發(fā)明藥物低劑量組326868203.072.1諾氟沙星可溶性粉組306870214.076.0安全對(duì)照組0279.399.22.1死亡率各用藥組相比較，本發(fā)明藥物高、中劑量組死亡率較低，分別為10%、16%。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明，本發(fā)明藥物高、中劑量組死亡率極顯著低于陰性對(duì)照組(感染對(duì)照組)的死亡率(p<0.01)。2.2治愈率與有效率本發(fā)明藥物高、中劑量組治愈率較高，均超過75%。上述二組的有效率也較高，均超過80%。本發(fā)明藥物低劑量組、諾氟沙星可溶性粉組的治愈率、有效率相對(duì)較低。2.3增重率本發(fā)明藥物高、中劑量組的增重率與陰性對(duì)照組相比較差異極顯著(p〈0.01)。本發(fā)明藥物低劑量組、諾氟沙星可溶性粉組增重均顯著低于本發(fā)明藥物高、中劑量組對(duì)照組(p<0.05)。由上述實(shí)驗(yàn)可以看出，本發(fā)明藥物的有效率、治愈率、增重率均顯著高于對(duì)照藥物。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明方劑具有清熱解毒，補(bǔ)脾開胃，養(yǎng)血止痢的功效。結(jié)合禽類生'殖道短，不能消化木質(zhì)纖維的特殊生理結(jié)構(gòu)，將藥物制成可溶性顆粒劑，在詞用飲水中迅速溶解，患雞通過飲水吸收后，能夠達(dá)到迅速起效的目的。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:黃連3份，黃柏3份，金銀花4份，菊花3份，白頭翁3份，蒼術(shù)3份，石榴皮3份，蒲公英3份，地榆3份，板藍(lán)根3份，穿心蓮4份，茯苓2份，五倍子3份。加水煎煮兩次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓薄膜蒸發(fā)，濃縮至相對(duì)密度為1.29-1.31(65°C)的清膏。加輔料適量制粒，濕粒干燥整形，分裝，即得。主用于治療腸炎型及敗血型大腸桿菌病。適用于禽心包炎、肝周炎、腹膜炎、雛雞卵黃吸收不良等癥?；祜?，家禽每2升水中加本品1.0克，一日二次，自由飲用，連用3-5天，重癥加倍量使用。實(shí)施例2:黃連5份，黃柏5份，金銀花6份，菊花5份，白頭翁5份，蒼術(shù)5份，石榴皮5份，蒲公英5份，地榆5份，板藍(lán)根5份，穿心蓮6份，茯苓3份，五倍子5份。加水煎煮兩次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓薄膜蒸發(fā)，濃縮至相對(duì)密度為1.29~1.31(65°C)的清膏。加輔料適量制粒，濕粒干燥整形，分裝，即得。主用于治療腸炎型及敗血型大腸桿菌病。適用于禽心包炎、肝周炎、腹膜炎、雛雞卵黃吸收不良等癥?；祜嫞仪菝?升水中加本品1.0克，一日二次，自由飲用，連用3-5天，重癥加倍量使用。實(shí)施例3:黃連4份，黃柏4份，金銀花4.5份，菊花4份，白頭翁4份，蒼術(shù)4份，石榴皮4份，蒲公英4份，地榆4份，板藍(lán)根4份，穿心蓮4.5份，茯苓2.5份，五倍子4份。加水煎煮兩次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓薄膜蒸發(fā)，濃縮至相對(duì)密度為1.29~1.31(65°C)的清膏。加輔料適量制粒，濕粒干燥整形，分裝，即得。主用于治療腸炎型及敗血型大腸桿菌病。適用于禽心包炎、肝周炎、腹膜炎、雛雞卵黃吸收不良等癥?；祜嫞仪菝?升水中加本品l.O克，一日二次，自由飲用，連用3-5天，重癥加倍量使用。權(quán)利要求1.一種用于治療禽大腸桿菌病的中藥復(fù)方制劑，其特征在于黃連3-5份，黃柏3-5份，金銀花4-6份，菊花3-5份，白頭翁3-5份，蒼術(shù)3-5份，石榴皮3-5份，蒲公英3-5份，地榆3-5份，板藍(lán)根3-5份，穿心蓮4-6份，茯苓2-3份，五倍子3-5份。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療禽大腸桿菌病的中藥復(fù)方制劑，其特征在于本發(fā)明優(yōu)選處方為黃連4份，黃柏4份，金銀花4.5份，菊花4份，白頭翁4份，蒼術(shù)4份，石榴皮4份，蒲公英4份，地榆4份，板藍(lán)根4份，穿心蓮4.5份，茯苓2.5份，五倍子4份。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療禽大腸桿菌病的中藥復(fù)方制劑，其特征在于所述的復(fù)方中藥制劑的劑型為顆粒劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種用于治療禽大腸桿菌病的中藥復(fù)方顆粒劑，包括黃連，黃柏，金銀花，菊花，白頭翁，蒼術(shù)，石榴皮，蒲公英，地榆，板藍(lán)根，穿心蓮，茯苓，五倍子十三味藥。主用于治療腸炎型及敗血型大腸桿菌病。適用于禽心包炎、肝周炎、腹膜炎、雛雞卵黃吸收不良等癥。本發(fā)明方劑具有清熱解毒，補(bǔ)脾開胃，養(yǎng)血止痢的功效。結(jié)合禽類生殖道短，不能消化木質(zhì)纖維的特殊生理結(jié)構(gòu)，將藥物制成可溶性顆粒劑，在飼用飲水中迅速溶解，患雞通過飲水吸收后，能夠達(dá)到迅速起效的目的。文檔編號(hào)A61K36/756GK101209306SQ200610130528公開日2008年7月2日申請(qǐng)日期2006年12月25日優(yōu)先權(quán)日2006年12月25日發(fā)明者李旭東,蘇建東,鮑恩東申請(qǐng)人:天津市潤拓生物技術(shù)有限公司