專利名稱：用固體脂質(zhì)納米顆粒提高前藥生物利用度的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的技術(shù)領(lǐng)域涉及經(jīng)淋巴系統(tǒng)靶向吸收，提高前藥生物利用度的方法。該技術(shù)領(lǐng)域也涉及前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
新藥開發(fā)和篩選技術(shù)的出現(xiàn)提高了分子的效力，但同時(shí)也帶來更多理化和生物方面的問題，例如可溶性差和親脂性低。通過口服途徑給予藥物有許多優(yōu)點(diǎn)，但口服給藥的藥物的療效卻主要依賴于藥物的效力和系統(tǒng)利用度或生物利用度。藥物效力在很大程度上受該藥物的化學(xué)或分子結(jié)構(gòu)影響，是個(gè)體分子的固有性質(zhì)。生物利用度受多種因素影響，例如理化、制劑以及患者的相關(guān)情況。由于藥物生物利用度受多種因素影響，所以可以通過應(yīng)用涉及修飾藥物理化性質(zhì)和某些程度的生物反應(yīng)的制劑策略來提高藥物生物利用度，以獲得盡可能高的生物利用度和治療效果。然而，理解藥物分子在(i)加工(ii)儲(chǔ)存和(iii)給藥后階段的行為是比較重要的。在藥物吸收至全身性循環(huán)之前，口服給藥的藥物必須成功克服由不同pH范圍和消化酶組成的復(fù)雜胃腸道(GIT)環(huán)境。
為了提高可溶性差和親脂性低的藥物的生物利用度，現(xiàn)有技術(shù)記載了多種方法。這些方法可粗分為兩類，包括對分子化學(xué)結(jié)構(gòu)的改進(jìn)和劑型改進(jìn)。改變分子結(jié)構(gòu)、制備前藥及鹽的形成，是包括在藥物分子的化學(xué)修飾中的方法。使用溶解增強(qiáng)劑或吸收增強(qiáng)劑、形成包合配合物、以及將大小減少至微米甚至納米水平，是包括在提高生物利用度的劑型改進(jìn)中的方法。
前藥制備是提高生物利用度眾所周知的方法。前藥是指活性部分的任何藥學(xué)上可接受的酯、酯的鹽或其它衍生物，在給予受試者時(shí)，其能容易地通過酶或非酶途徑提供活性部分。前藥被設(shè)計(jì)成用于提高分子的可溶性和滲透性，在其結(jié)構(gòu)中包括極弱的鍵。這些弱鍵有利于在腸道上皮細(xì)胞或血液中，使前藥容易地轉(zhuǎn)化為活性母體部分，但與此同時(shí)這些弱鍵也使前藥對胃腸道消化酶和pH作用敏感，導(dǎo)致吸收前的降解，從而使前藥設(shè)計(jì)的目的失敗。當(dāng)前藥顯示出從腸壁迅速排出時(shí)，該問題進(jìn)一步加劇，其中前藥吸收良好，但進(jìn)入腸細(xì)胞之后其易于轉(zhuǎn)化為活性部分，并重新流回腸道而不是進(jìn)入血液循環(huán)，從而降低有效生物利用度。頭孢泊肟普昔酯(Cefpodoxime proxetil)是此類前藥的原型實(shí)例，其有大量吸收前降解和排出機(jī)制(efflux machanism)的問題。與頭孢泊肟鈉靜脈注射液相比，商業(yè)使用的頭孢泊肟普昔酯片劑的絕對生物利用率由此減少至只有約50％。需要慎重地引用制劑技術(shù)，以在這種情況中取得更好的結(jié)果。
淋巴系統(tǒng)是循環(huán)系統(tǒng)的子系統(tǒng)。淋巴系統(tǒng)類似于血液循環(huán)系統(tǒng)，其中淋巴管分支就像動(dòng)脈和靜脈通過身體的所有部位，只不過淋巴系統(tǒng)攜帶的是稱為淋巴的無色液體而不是血液。淋巴系統(tǒng)的解剖學(xué)和生理學(xué)在身體各個(gè)部位是不同的。小腸淋巴的特點(diǎn)在于，在每一絨毛中有位于中央的乳糜管。乳糜管通過腸系膜淋巴管與淋巴毛細(xì)管/引流管(drain)管叢相連，連入乳糜池。來自乳糜池的淋巴液從胸導(dǎo)管排出，在左內(nèi)頸靜脈和左鎖骨下靜脈處直接排空至總循環(huán)中。消化道相關(guān)的淋巴組織，包括扁桃體、腺樣體(瓦爾代爾環(huán)，Waldeyer’s ring)、Peyer淋巴集結(jié)、闌尾和大腸中的淋巴聚集體、胃部隨年齡積累的淋巴樣組織、食管小淋巴聚集體、以及消化道固有層中彌散分布的淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞。Peyer淋巴集結(jié)是小腸中發(fā)現(xiàn)的淋巴組織較大的聚集體。覆蓋著“圓頂”的上皮包含有大量的上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞。一些上皮細(xì)胞在其表面有復(fù)雜的微折疊。這些細(xì)胞被稱為M細(xì)胞，據(jù)信它們在從腸腔至Peyer淋巴集結(jié)的抗原轉(zhuǎn)移中起重要作用。
因此，由于淋巴系統(tǒng)獨(dú)特的解剖學(xué)和生理學(xué)特性，存在利用淋巴系統(tǒng)作為藥物遞送的可選方法的潛力。靶向給藥至淋巴系統(tǒng)有一定的優(yōu)點(diǎn)。這些優(yōu)點(diǎn)包括可避免首過代謝，直接將藥物遞送至淋巴循環(huán)的特定區(qū)域(例如在治療疾病的情況下)，以及調(diào)節(jié)藥物遞送至系統(tǒng)循環(huán)的效率的可能性。影響表觀淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)的主要因素包括給藥途徑、藥物遞送系統(tǒng)設(shè)計(jì)、以及藥物的理化和代謝性質(zhì)?？墒勾蠓肿雍湍z狀顆粒(例如乳糜微粒)選擇性地經(jīng)淋巴系統(tǒng)通過間隙吸收。納米顆粒通過稱為細(xì)胞內(nèi)吞的特定方法進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。已在存在吸收增強(qiáng)劑的情況下，用藥物與高分子量載體(例如硫酸葡聚糖)復(fù)合的親淋巴遞送系統(tǒng)，來增強(qiáng)抗癌藥物的選擇性淋巴遞送。
現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)了多種主要針對溶解性提高的制劑方法，通常期望藉此有利于提高生物利用度。一種這樣的方法涉及對可溶性差的藥物使用脂質(zhì)系統(tǒng)。脂質(zhì)系統(tǒng)的制劑包括微米或納米乳劑、脂質(zhì)體、自乳化藥物遞送系統(tǒng)、以及固體脂質(zhì)納米顆粒。
美國專利4,880,634公開了用于口服給予生物利用度較差藥物的脂質(zhì)納米粒(nano-pellet)。其公開了包含以極細(xì)液態(tài)、膠狀懸液形式存在的脂質(zhì)納米粒的口服給藥藥物的賦形劑系統(tǒng)，該脂質(zhì)納米粒包括脂質(zhì)和表面活性劑，其中納米粒的顆粒直徑在50-1,000nm范圍內(nèi)，在脂質(zhì)納米粒中脂質(zhì)與表面活性劑的比率在1∶0.1-1∶2.2范圍內(nèi)，其中脂質(zhì)納米粒在懸液中以1-20重量％的濃度存在?？蓪⑺帉W(xué)活性物質(zhì)與脂質(zhì)納米粒一起提供，這就使提高口服給藥生物利用度成為可能。
美國專利5,785,976涉及室溫下生物可降解脂質(zhì)固體顆粒的懸液，優(yōu)選甘油三酯，其可用作水溶性差藥物或其它生物活性試劑的載體并可用于顆粒的懸浮。
Eldem等(Pharm.Res.，8，(1991)，47-54)描述了噴霧干燥和噴霧冷凝方法制備的脂質(zhì)微丸(micropellet)。獲得的球狀微丸有光滑的表面。
美國專利5,250,236公開了用微乳技術(shù)制備固體脂質(zhì)納米顆粒的方法，包括以下步驟將融化的脂質(zhì)物質(zhì)加入由水、表面活性劑和可選表面活性助劑組成的混合物中，形成微乳，將微乳分散于水中，透濾水洗，冷凍干燥，獲得終產(chǎn)品。
美國專利6,337,092公開了包被有天然磷脂的亞微米至微米大小的顆?；蛭⒘＃渲兴鲱w粒是通過組合使用靜電和立體穩(wěn)定劑，分別從至少一種帶電表面修飾劑和至少一種嵌段共聚物制備的。該顆粒的生成及儲(chǔ)存穩(wěn)定性受該靜電和立體穩(wěn)定劑組合的影響。

發(fā)明內(nèi)容
本領(lǐng)域已知脂質(zhì)納米顆粒可提高某些疏水性藥物的生物利用度。然而，現(xiàn)在我們發(fā)現(xiàn)固體脂質(zhì)納米顆?？捎米髋渲朴形涨敖到?在胃腸腔中或在腸細(xì)胞或上皮細(xì)胞)和/或排出機(jī)制問題的前藥的遞送系統(tǒng)，從而通過經(jīng)淋巴系統(tǒng)的靶向吸收增強(qiáng)該前藥的生物利用度。
因此，在一個(gè)總的方面，本發(fā)明提供了通過經(jīng)淋巴系統(tǒng)的靶向吸收提高前藥生物利用度的方法。
在另一總的方面，本發(fā)明提供了使用固體脂質(zhì)納米顆粒將前藥的生物利用度提高到常規(guī)口服劑型的1.25倍或更多的方法。
在另一總的方面，本發(fā)明提供了包含前藥和脂質(zhì)載體的前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒，該前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒的生物利用度提高到常規(guī)口服劑型的1.25倍或更多。
在另一總的方面，本發(fā)明提供了前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒的制備方法，該方法包括將前藥溶解/分散于脂質(zhì)載體和穩(wěn)定劑的混合物以及進(jìn)一步加工為合適劑型的步驟。


圖1所示為時(shí)間對頭孢泊肟酸的形成百分比(％)的曲線圖。
圖2所示為時(shí)間對剩余頭孢泊肟普昔酯的百分比(％)的曲線圖。
圖3所示時(shí)間對上皮細(xì)胞內(nèi)頭孢泊肟普昔酯的濃度(mmol/gm)的曲線圖。
圖4所示為時(shí)間對上皮細(xì)胞內(nèi)頭孢泊肟酸的濃度(mmol/gm)的曲線圖。
具體實(shí)施例方式
有可溶性和/或滲透性問題的屬于II、III、IV類生物藥的藥物，是前藥制備的目標(biāo)。已知前藥可通過提高可溶性差藥物的溶解度和/或滲透性來提高該藥物的生物利用度。據(jù)認(rèn)為前藥口服給藥后可在腸道吸收，在腸壁/胞漿通過酶或非酶作用水解為母體部分。但在某些情況下，單獨(dú)的前藥制備并不能解決該問題。盡管有改進(jìn)的溶解度和滲透性，這些前藥卻仍顯示出較差的生物利用度，這是由吸收前降解和迅速溢回腸腔造成的。提高這種前藥生物利用度的一種方法是靶向淋巴系統(tǒng)，其中前藥直接進(jìn)入淋巴，從而沒有吸收前降解和排出機(jī)制。淋巴系統(tǒng)也提供了某些其它優(yōu)點(diǎn)，使得總體生物利用度被增強(qiáng)。
頭孢泊肟普昔酯是前藥的一個(gè)例子，商業(yè)使用的口服片劑顯示出的絕對生物利用度僅為靜脈注射劑的50％。進(jìn)行系統(tǒng)性研究以確定頭孢泊肟普昔酯生物利用度差的可能原因。
在不同pH條件下進(jìn)行可溶性和穩(wěn)定性研究，發(fā)現(xiàn)頭孢泊肟普昔酯是pH依賴型的溶解度和穩(wěn)定性，兩者都隨著pH的增加而下降。盡管可溶性降低，但腸道pH時(shí)的可溶性預(yù)期足夠取得期望的吸收度。因此，在腸道的穩(wěn)定性而不是溶解度，可能是生物利用度降低的可能原因之一。
用體外鼠腸“翻轉(zhuǎn)囊(Everted Sac)”法進(jìn)行進(jìn)一步研究，以確定頭孢泊肟和頭孢泊肟普昔酯的有效滲透系數(shù)。令人驚奇地發(fā)現(xiàn)頭孢泊肟和頭孢泊肟普昔酯的滲透系數(shù)是相似的。這出乎意料，因?yàn)檎J(rèn)為頭孢泊肟普昔酯比頭孢泊肟更親脂，設(shè)計(jì)頭孢泊肟普昔酯是為了提高滲透性和吸收度。因此，似乎所獲得的滲透系數(shù)受未知因素的影響(例如存在排出機(jī)制)，這些因素進(jìn)而降低了生物利用度。
排出機(jī)制在降低總體生物利用度中所起的作用，通過體外鼠腸“翻轉(zhuǎn)囊”法予以證實(shí)，其中對空腸段下存在的頭孢泊肟普昔酯的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。觀察結(jié)果顯示，約90％存在的頭孢泊肟普昔酯在15分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化為頭孢泊肟酸，在30分鐘內(nèi)幾乎完全轉(zhuǎn)化，如圖1、圖2所示。發(fā)現(xiàn)頭孢泊肟普昔酯迅速轉(zhuǎn)化為暴露于上皮細(xì)胞的頭孢泊肟的原因是腸細(xì)胞內(nèi)頭孢泊肟普昔酯至頭孢泊肟酸的吸收后代謝問題，以及其溢回至腸腔的問題。
排出機(jī)制可用新鮮外翻空腸環(huán)，通過腸組織吸收研究進(jìn)行證實(shí)?？漳c環(huán)顯示，在低于1分鐘的初期，腸細(xì)胞內(nèi)存在大量頭孢泊肟普昔酯。但在上皮細(xì)胞內(nèi)其濃度迅速消耗，隨時(shí)間推移觀察到了頭孢泊肟濃度的出現(xiàn)。對頭孢泊肟普昔酯進(jìn)行吸收研究時(shí)，在組織中觀察到其蹤跡的時(shí)間僅有5分鐘。這表明頭孢泊肟普昔酯迅速滲透，但迅速轉(zhuǎn)化為頭孢泊肟，流向頂側(cè)(apical side)而不是基底側(cè)，從而導(dǎo)致吸收降低。隨時(shí)間推移，累積的頭孢泊肟被吸收，但較緩慢直至更低的程度。當(dāng)用頭孢泊肟進(jìn)行相似的研究時(shí)，展示了組織的恒定吸收率，給出上升趨勢的濃度對時(shí)間圖。研究結(jié)果示于圖3和圖4中。除吸收前降解外，該排出機(jī)制進(jìn)一步降低了生物利用度。
在吸收入系統(tǒng)循環(huán)前，從前藥至活性成分的轉(zhuǎn)化，在所有常規(guī)口服劑型中仍是一個(gè)難題。因此，需要制備前藥(例如頭孢泊肟普昔酯)的制劑，該制劑能使前藥通過腸內(nèi)容物并提供足夠的保護(hù)使其免遭腸內(nèi)容物及腸細(xì)胞酶的降解。經(jīng)淋巴吸收的固體脂質(zhì)納米顆粒，在該情況下是個(gè)較好的選擇。固體脂質(zhì)納米顆粒不進(jìn)入血流，而是通過稱為細(xì)胞內(nèi)吞的特殊吸混過程(persorption)吸收入淋巴，借此小液滴或固體顆粒通過腸壁并由此進(jìn)入淋巴流。由于前藥沒有進(jìn)入降解前藥的腸細(xì)胞，其次由于避免了與胃腸道環(huán)境直接接觸，所以前藥吸收前降解的機(jī)會(huì)較低。而且，淋巴系統(tǒng)吸收前藥，沒有任何首過效應(yīng)(若有的話)，因此進(jìn)一步提高了生物利用度。
本發(fā)明的前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒，與常規(guī)口服劑型相比，可以提高生物利用度1.25倍或更多，特別是1.5倍或更多。與常規(guī)劑型相比，達(dá)到藥物血漿水平，需要的前藥更少。因此，固體脂質(zhì)納米顆粒將具有成本效益，可減少劑量清除(dumping)的機(jī)會(huì)及相關(guān)的毒性問題。
固體脂質(zhì)納米顆粒由與脂質(zhì)載體復(fù)合的前藥組成，并被制成納米范圍的球狀固體顆粒，特別是在100-500nm范圍。固體脂質(zhì)納米顆粒集合了聚合物納米顆粒、脂肪乳和脂質(zhì)體的優(yōu)點(diǎn)，但同時(shí)避免了它們的某些缺點(diǎn)。大小、脂質(zhì)載體的性質(zhì)、Zeta電位、構(gòu)成方法、以及提供的營養(yǎng)成分，都是影響固體脂質(zhì)納米顆粒性能的因素。因此，一方面，本發(fā)明的固體脂質(zhì)納米顆粒包括前藥和脂質(zhì)載體。
可將固體脂質(zhì)納米顆粒用于因吸收前降解和/或排出機(jī)制問題而有較低生物利用度的前藥。前藥的實(shí)例包括頭孢泊肟普昔酯、頭孢他美酯、頭孢托侖匹酯、頭孢呋辛酯、伐西洛韋、纈更昔洛韋、疊氮胸苷、卡培他濱、泛昔洛韋、萘丁美酮、匹氨西林、伊立替康、特非那定、依那普利、雷米普利、地匹福林、奧美拉唑、柳氮磺吡啶、奧沙拉嗪、烏洛托品(methanamie)、班布特羅、別嘌呤醇、吉西他濱、氟達(dá)拉濱、克拉屈濱、辛伐他汀、替加氟、磷苯妥英、和維拉米丁(viramidine)。前藥量可占固體脂質(zhì)納米顆粒的約5％w/w至約90％w/w，特別是約10％w/w至約40％w/w。
脂質(zhì)載體的實(shí)例包括一種或多種12-30個(gè)碳原子的飽和直鏈脂肪酸單-、雙-、三-甘油酯，所述脂肪酸為例如月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、山萮酸、木蠟酸、蠟酸、及蜂花酸；多羥基醇的酯，所述多羥基醇為例如乙二醇、丙二醇、甘露醇、山梨醇、12-22個(gè)碳原子的飽和脂肪酸醇如月桂醇、肉豆蔻醇、鯨蠟醇、硬脂醇、花生醇以及山萮醇、24-30個(gè)碳原子的飽和蠟醇如二十四烷醇、蠟醇、二十六烷醇以及蜂花醇；等等。其它的例子包括動(dòng)物或植物磷脂，例如卵磷脂及其氫化形式；多肽，例如明膠及其修飾形式；蠟，例如巴西棕櫚蠟及蜂蠟；等等。所用脂質(zhì)，優(yōu)選熔點(diǎn)在約30℃-100℃范圍內(nèi)。固體脂質(zhì)納米顆粒中，前藥與脂質(zhì)載體的比率可以在約1∶0.5-約1∶10之間變化。脂質(zhì)載體的量在固體脂質(zhì)納米顆粒的約5％w/w至約90％w/w之間變化，特別地，在約20％w/w至約70％w/w之間變化。
此外，本發(fā)明的固體脂質(zhì)納米顆?？蛇M(jìn)一步包括一種或多種其它藥學(xué)上可接受的添加劑，例如穩(wěn)定劑、助溶劑、冷凍保護(hù)劑、防腐劑等等。
通常，固體脂質(zhì)納米顆粒包括將靜電作用最小化的穩(wěn)定劑，當(dāng)分散于胃腸道內(nèi)容物中時(shí)，所述靜電作用會(huì)導(dǎo)致顆粒凝集從而影響再現(xiàn)性。穩(wěn)定劑的實(shí)例包括一種或多種任何聚合物和/或表面活性劑，所述聚合物和/或表面活性劑能阻止固體脂質(zhì)納米顆粒凝集從而穩(wěn)定組合物。聚合物的具體實(shí)例包括聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮等等。表面活性劑本質(zhì)上可以是離子型或非離子型的。其實(shí)例包括天然形成及合成的磷脂，其氫化衍生物及混合物，神經(jīng)鞘脂，以及糖鞘脂；生理活性的膽汁鹽，例如膽酸鈉、脫氫膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、甘膽酸鈉以及?；悄懰徕c；飽和及不飽和的脂肪酸或脂肪醇；乙氧基脂肪酸或脂肪醇以及它們的酯和醚；烷基芳基聚醚醇，例如泰洛沙泊；糖或糖醇與脂肪酸或脂肪醇的酯和醚；乙?；蛞已趸鶈?和二甘油酯；合成的生物可降解聚合物，例如聚氧乙烯聚氧丙烯氧化物嵌段共聚物；磺基琥珀酸酯，聚氧乙烯失水山梨糖醇酯，乙氧基失水山梨糖醇酯或失水山梨糖醇醚；氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)如明膠和白蛋白，卵磷脂，蛋卵磷脂，聚氧乙烯脂肪醇醚，聚氧乙烯硬脂酸酯，以及聚氧乙烯醚和聚氧丙烯醚(例如Pluronic)、乙氧基飽和甘油酯(例如Labrafil)以及部分脂肪酸甘油酯和聚甘油內(nèi)醚(例如Gelucire)的相應(yīng)混合縮合物。
助溶劑的實(shí)例包括一種或多種揮發(fā)性的溶劑，如有機(jī)溶劑，包括氯仿、甲醇、乙醇等等。
冷凍保護(hù)劑用于防止組合物在冷凍期間損壞。其實(shí)例包括糖，如蔗糖、葡萄糖、海藻糖；甘醇(含有至少兩個(gè)羥基的醇)，如乙二醇、丙二醇、甘油；等等。
防腐劑的實(shí)例包括苯甲醇、苯乙醇、苯氧乙醇、苯甲酸鈉、羥苯甲酸甲酯、羥苯甲酸丙酯、羥苯甲酸丁酯、沒食子酸丙酯、德美卡普羅(demercaprol)、丁基羥基茴香醚、丁基羥基甲苯、抗壞血酸棕櫚酯、焦亞硫酸鈉、生育酚和/或其酯等等。
固體脂質(zhì)納米顆?？捎帽绢I(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)制備，例如高壓勻化法(熱勻化或冷勻化)、微乳化-固化法、溶劑乳化/蒸發(fā)法等等。
在一個(gè)實(shí)施方式中，前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒是通過高壓熱勻法制備的，該方法包括(a)將脂質(zhì)融化，將前藥溶解/分散于脂質(zhì)中；(b)將負(fù)載了前藥的脂質(zhì)分散于熱水性表面活性劑混合物中；(c)預(yù)混合，形成粗預(yù)乳劑；(d)高壓勻化，形成熱的水包油納米乳劑；以及(e)通過冷卻至室溫，固化納米乳劑，得到固體脂質(zhì)納米顆粒。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒是通過高壓冷勻法制備的，所述方法包括
(a)將脂質(zhì)融化，將前藥溶解/分散于脂質(zhì)中；(b)將負(fù)載了前藥的脂質(zhì)在液氮或干冰中固化；(c)適度研磨固體；(d)將其分散于表面活性劑的有機(jī)溶劑溶液/分散液中；(e)混合，形成粗預(yù)乳劑；以及(f)室溫或更低溫度下高壓勻化，得到固體脂質(zhì)納米顆粒。
在另一實(shí)施方式中，前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒是通過溶劑乳化/蒸發(fā)法制備的，所述方法包括(a)將前藥和脂質(zhì)溶解于有機(jī)溶劑中；(b)混合入穩(wěn)定劑；以及(c)勻化和蒸發(fā)該溶劑，得到固體脂質(zhì)納米顆粒。
或者，固體脂質(zhì)納米顆粒也可通過微乳化-固化或多步微乳化-固化技術(shù)制備。
如需要，可將如上制備的固體脂質(zhì)納米顆粒與一種或多種藥用惰性賦形劑組合，加工成常規(guī)口服劑型，例如懸液、片劑、膠囊、丸劑、香囊粉劑等等。
固體脂質(zhì)納米顆粒的性能，可通過評估下表所示的某些參數(shù)來分析

本發(fā)明用下述實(shí)施例進(jìn)一步說明，但該實(shí)施例并不對本發(fā)明范圍構(gòu)成任何限制。
實(shí)施例

工藝流程1.將頭孢泊肟普昔酯和三山崳酸甘油酯(tribehenin)溶解于氯仿中，形成溶液。
2.保持40-50℃連續(xù)攪拌下，將步驟1的溶液逐滴加入到含聚乙烯醇的水溶液中。
3.超離心純化步驟2的均一混合物，收集濾液。
4.將步驟3中的濾液冷凍干燥，得到固體脂質(zhì)納米顆粒。
上述制備的固體脂質(zhì)納米顆粒有或多或少的球狀，平均粒徑在100-500nm范圍內(nèi)。頭孢泊肟普昔酯在脂質(zhì)中的負(fù)載量約5-20％。此外，將實(shí)施例1-3中每一組合物的固體脂質(zhì)納米顆粒在40℃下儲(chǔ)存，用經(jīng)驗(yàn)證的(validated)HPLC法在2周以上的時(shí)間內(nèi)定期對頭孢泊肟普昔酯進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，頭孢泊肟普昔酯含量至少為95％。
固體脂質(zhì)納米顆粒(T)的體內(nèi)表現(xiàn)是以CepodemTM100(由Ranbaxy Lab.Ltd.銷售)片劑(R)為參照，在雄性Sprague-Dawely大鼠(重量250-275gm)中，以10mg/kg體重劑量(頭孢泊肟酸當(dāng)量)，在加速條件下(自由飲水)進(jìn)行評估的。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和操作都按照動(dòng)物學(xué)會(huì)道德委員會(huì)認(rèn)可的方法進(jìn)行。用口服計(jì)量注射針隨著鹽水，以特定劑量口服給予每一制劑。在0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，12，24小時(shí)，收集血樣(0.4-0.5ml)。離心樣品分離血漿，用經(jīng)驗(yàn)證的HPLC法分析藥物含量。從所獲數(shù)據(jù)計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Cmax(最大血漿濃度)、Tmax(達(dá)到最大血漿濃度的時(shí)間)、AUC0-t(從0小時(shí)至最后樣品收集時(shí)間的血漿濃度比時(shí)間曲線下面積)以及AUC0-∞(從0小時(shí)至無窮大時(shí)的血漿濃度比時(shí)間曲線下面積)。用MS-ExcelTM和非線性回歸軟件PC-NONLINTM對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。研究結(jié)果如下表所示。

上述結(jié)果清楚表明，固體脂質(zhì)納米顆粒對提高前藥口服利用度的重要性。
權(quán)利要求
1.一種提高前藥生物利用度的方法，所述方法采用固體脂質(zhì)納米顆粒將前藥生物利用度提高到常規(guī)口服劑型的1.25倍或更多。
2.如權(quán)利要求1所述的提高前藥生物利用度的方法，其中，常規(guī)口服劑型生物利用度低是因吸收前降解和/或排出機(jī)制造成的。
3.一種前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒，其包含前藥和脂質(zhì)載體，所述納米顆粒提供的生物利用度高出常規(guī)口服劑型1.25倍或更多。
4.如權(quán)利要求3所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，所述前藥選自下組頭孢泊肟普昔酯、頭孢他美酯、頭孢妥侖匹酯、頭孢呋辛酯、伐西洛韋、纈更昔洛韋、疊氮胸苷、卡培他濱、泛昔洛韋、萘丁美酮、匹氨西林、伊立替康、特非那定、依那普利、雷米普利、地匹福林、奧美拉唑、柳氮磺吡啶、奧沙拉嗪、烏洛托品、班布特羅、別嘌呤醇、吉西他濱、氟達(dá)拉濱、克拉屈濱、辛伐他汀、替加氟、磷苯妥英或維拉米丁。
5.如權(quán)利要求4所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，所述前藥占所述固體脂質(zhì)納米顆粒的約5％w/w至約90％w/w。
6.如權(quán)利要求3所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，所述脂質(zhì)載體選自下組12-30個(gè)碳原子的飽和直鏈脂肪酸的單-、二-、三-甘油酯；多羥基醇的酯；24-30個(gè)碳原子的飽和蠟醇；動(dòng)物或植物磷脂，例如卵磷脂，及其氫化形式；或多肽。
7.如權(quán)利要求6所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，所述脂質(zhì)載體占所述固體脂質(zhì)納米顆粒的約5％w/w至約90％w/w。
8.如前述任一權(quán)利要求所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，所述固體脂質(zhì)納米顆粒進(jìn)一步包括一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑，所述賦形劑選自下組穩(wěn)定劑、助溶劑、冷凍保護(hù)劑或防腐劑。
9.如前述任一權(quán)利要求所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其是通過包括下列步驟的方法制備的將前藥溶解/分散于脂質(zhì)載體和穩(wěn)定劑的混合物中，然后加上成合適劑型。
10.如權(quán)利要求9所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，溶解/分散前藥是通過高壓勻化技術(shù)、微乳化-固化技術(shù)、多步微乳化-固化技術(shù)或者溶劑乳化/蒸發(fā)技術(shù)進(jìn)行的。
11.如權(quán)利要求9所述的固體脂質(zhì)納米顆粒，其中，所述劑型選自懸液、片劑、膠囊、丸劑或香囊粉劑。
12.本文實(shí)施例記載說明的提高前藥生物利用度的方法。
全文摘要
本發(fā)明公開了經(jīng)淋巴系統(tǒng)靶向吸收提高前藥生物利用度的方法。也公開了前藥的固體脂質(zhì)納米顆粒及其制備方法。
文檔編號A61K9/48GK1977826SQ20061006473
公開日2007年6月13日 申請日期2006年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月23日
發(fā)明者A·K·班塞爾, K·凡蘇庫瑪 申請人:蘭貝克賽實(shí)驗(yàn)室有限公司