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治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物的制作方法

文檔序號:1032217閱讀:578來源:國知局
專利名稱:治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于含有原料或其與不明結(jié)構(gòu)之反應(yīng)產(chǎn)物的醫(yī)用配制品技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及到來源于植物的材料。
背景技術(shù)
腦供血不足性眩暈、腔隙性腦梗塞及高黏血癥等病癥是神經(jīng)內(nèi)科臨床常見病與多發(fā)病,根據(jù)其臨床表現(xiàn)、病因病機(jī)、治法治則、預(yù)后轉(zhuǎn)歸等臨床特點(diǎn),當(dāng)歸屬于中醫(yī)藥學(xué)中“眩暈”、“中風(fēng)”等病證的范疇。
眩暈是以頭暈?zāi)垦橹饕R床表現(xiàn)的一種疾病,輕者閉目即止,重者如乘舟車,旋轉(zhuǎn)不定,不能站立,或伴有惡心、嘔吐、汗出,甚則昏倒等癥狀。其范圍可涉及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的多種病癥。其中臨床以椎基底動脈供血不足所致者最為常見。
椎基底動脈供血不足性眩暈是由于腦動脈粥樣硬化、頸椎病等多種原因所致的基底系統(tǒng)供血障礙而引起的疾病,占中老年人各種眩暈的60%以上,是臨床常見病、多發(fā)病,其發(fā)作無明顯的規(guī)律性,多突然發(fā)病,因其進(jìn)一步發(fā)展能加重病情,危及患者生命,因此,近年來逐漸受到人們的重視。
腔隙性梗塞亦是臨床常見病及多發(fā)病之一,是腦梗塞的一種最常見的類型。屬于中醫(yī)藥學(xué)“中風(fēng)”病證范疇。腔梗的概念于上世紀(jì)六十年代初由Fisher提出,并經(jīng)詳細(xì)的臨床病理學(xué)研究,證實(shí)是發(fā)生在大腦半球深部和腦干等部位的直徑為3~15mm(一般不超過20mm)的缺血性微栓塞。這種梗塞治愈后在腦組織上留有外觀略顯萎縮的小腔或篩孔,因此,統(tǒng)一以腔隙性腦梗塞命名。近年來隨著CT及MRI等現(xiàn)代診斷技術(shù)的發(fā)展,腔梗的診出率明顯提高。據(jù)統(tǒng)計,腔梗占全部腦梗塞的20%左右,好發(fā)于老年人,60歲以上者占60%,男多于女,男女之比為5~6∶1。腔梗臨床表現(xiàn)多樣,可以表現(xiàn)為典型的腔隙綜合片;也可以表現(xiàn)無癥狀,僅在CT或MRI上顯示梗塞灶。盡管普遍認(rèn)為腔梗較其它腦梗塞臨床癥狀輕、預(yù)后好,但也有研究發(fā)現(xiàn),從腔梗的長期預(yù)后來看并沒有以前報道的那樣好。而且本病復(fù)發(fā)率較高,與腦萎縮、血管性癡呆呈明顯相關(guān)性,使患者神經(jīng)功能缺損程度逐漸加重,直接影響老年人的生活質(zhì)量。目前西醫(yī)對腔梗的治療尚未引起重視,而中醫(yī)不僅可以辨證治療該病急性期或慢性期的臨床癥狀,而且可以有效地預(yù)防復(fù)發(fā)及血管性癡呆的發(fā)生。在該病的治療中顯示了獨(dú)特的優(yōu)勢與廣闊的前景。目前用于上述病證的主要藥物有強(qiáng)力定眩片、腦絡(luò)通膠囊等,均系原地方標(biāo)準(zhǔn)藥品,療效不夠確切。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服上述藥物的缺點(diǎn),提供一種毒副作用小、療效顯著的治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物。
解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案它是以下述重量份配比的中藥原料按常規(guī)制劑方法制成的口服藥劑天麻4~15份葛 根 15~40份川芎5~12份茯 苓 15~30份當(dāng)歸8~15份炒白術(shù) 4~10份。
制備本發(fā)明藥物的優(yōu)選中藥原料重量份配比是天麻5~15份葛 根 20~30份川芎6~10份茯 苓 16~25份當(dāng)歸9~12份炒白術(shù) 6~9份。
制備本發(fā)明藥物的最佳中藥原料重量份配比是天麻10份 葛 根 20份川芎10份 茯 苓 20份當(dāng)歸10份 炒白術(shù) 8份。
將上述各組分按常規(guī)方法制成的口服藥劑是制劑學(xué)上所說的膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液。
在本發(fā)明的配比中選用了天麻、葛根、川芎、茯苓、當(dāng)歸、炒白術(shù)中藥原料,各組分的有效成分以及用途如下本發(fā)明配比中的天麻,味甘、辛、性平,歸肝經(jīng),功擅息風(fēng)止痙,平肝陽,祛風(fēng)通絡(luò),長于息風(fēng)滌痰,解痙降逆。
川芎,味辛,性溫,歸肝、膽、心胞經(jīng),具有活血祛瘀,行氣開郁,祛風(fēng)止痛之功,臨床常以其主治頭痛、眩暈諸疾。
當(dāng)歸,味甘、辛、苦,性溫,歸肝、心、脾經(jīng),具有補(bǔ)血,活血,調(diào)經(jīng)止痛,潤燥滑腸的功能。
葛根,味甘、辛,性平,歸脾、胃經(jīng),擅治頭項強(qiáng)痛之疾。現(xiàn)代常用其治療心腦血管疾病,具有活血化瘀,擴(kuò)張血管,增強(qiáng)腦血流量及益智、減少心肌氧耗等作用。
炒白術(shù),味苦、甘,性溫,歸脾、胃經(jīng),功能健脾益氣,燥濕利水。擅治脾氣虛弱,神疲乏力、痰飲眩暈諸疾。
本發(fā)明藥物膠囊劑的制備工藝如下本發(fā)明配比六味中藥中,取天麻50%,粉碎成中粉,加5倍量75%乙醇冷浸36小時,濾過,濾液減壓回收乙醇至無醇味,制成天麻冷浸稠膏,備用;天麻藥渣與葛根、川芎、茯苓、當(dāng)歸、炒白術(shù)加10倍量水煎煮三次,每次2小時,合并煎液,藥液濃縮至相對密度為1.15~1.20(60℃)的清膏,加乙醇使含醇量達(dá)70%,靜置24小時,濾過,濾液回收乙醇,濃縮成稠膏,與天麻冷浸稠膏合并,取剩余天麻粉碎成細(xì)粉,加入上述稠膏中,充分混勻,80℃以下烘干,粉碎,加入淀粉,制粒,裝入粒膠囊,即得。每粒重0.4g,每粒含中藥原料2.34g。
本發(fā)明藥物片劑的制備工藝如下本發(fā)明藥片劑所用的中藥原料以及重量配比與本發(fā)明藥物膠囊劑完全相同,天麻的提取以及其它五味中藥的提取工藝步驟與本發(fā)明膠囊劑完全相同。將天麻提取物、其它五味中藥原料的提取物、剩余50%的天麻粉碎成細(xì)粉以及輔料混合,所用的輔料及其重量配比按制劑學(xué)片劑的重量比選取,按制劑學(xué)常規(guī)制片制備方法制成本發(fā)明藥物片劑。每片重0.5g,每片含中藥原料1.755g本發(fā)明藥物顆粒劑的制備工藝如下本發(fā)明藥物顆粒劑用的中藥原料以及重量配比與本發(fā)明藥物膠囊劑完全相同,天麻的提取工藝步驟以及其它中藥原料的提取工藝步驟與膠囊劑完全相同。所用的輔料及其重量配比按制劑學(xué)顆粒劑的重量比選取,按制劑學(xué)常規(guī)顆粒劑制備方法制成本發(fā)明藥物顆粒劑。每袋重5g,每克含中藥原料1.404g。
本發(fā)明藥物口服液的制備工藝如下本發(fā)明藥物口服液所用的中藥原料以及重量配比與本發(fā)明藥物膠囊劑完全相同,中藥原料的提取工藝步驟與本發(fā)明膠囊劑完全相同,所用的輔料及其重量配比按制劑學(xué)口服液的重量比選取,按制劑學(xué)常規(guī)口服液的制備方法制成本發(fā)明藥物口服液。每瓶10mL,每毫升含中藥原料0.702g。
本發(fā)明藥物經(jīng)藥效試驗,試驗結(jié)果表明本發(fā)明藥物能縮短小鼠旋轉(zhuǎn)后逃避電擊反射潛伏期,具有抗眩暈的藥理作用;本發(fā)明藥物對不完全腦缺血大鼠共濟(jì)協(xié)調(diào)功能有一定改善作用,并可改善完全腦缺血后再灌流大鼠腦組織能量代謝狀況;本發(fā)明藥物可改善中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為,減少腦組織缺血范圍,對大鼠急性腦缺血、缺氧有一定的保護(hù)作用;本發(fā)明藥物對小鼠記憶獲得障礙有顯著的改善作用;本發(fā)明藥物對小鼠記憶鞏固障礙有顯著的改善作用;本發(fā)明藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明,但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例1以生產(chǎn)本發(fā)明膠囊劑產(chǎn)品1000粒為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻300g葛 根600g川 芎300g茯 苓600g當(dāng) 歸300g炒白術(shù)240g淀 粉 加至400g。
其制備工藝按本發(fā)明膠囊劑的制備工藝進(jìn)行。每粒重0.4g,每粒含中藥原料2.34g,每日口服3次,每次3粒。
以生產(chǎn)本發(fā)明藥物片劑產(chǎn)品1000片為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻225g葛 根450g川 芎225g茯 苓450g當(dāng) 歸225g炒白術(shù)180g淀 粉 加至500g。
其制備工藝按本發(fā)明片劑的制備工藝進(jìn)行。每片重0.5g,每片含中藥原料1.755g,每日口服3次,每次4片。
以生產(chǎn)本發(fā)明顆粒劑產(chǎn)品1000克為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻180g葛 根360g川 芎180g茯 苓360g當(dāng) 歸180g炒白術(shù)144g蔗 糖 400g糊 精 加至1000g。
其制備工藝按本發(fā)明顆粒劑的制備工藝進(jìn)行。每袋重5g,每克含中藥原料1.404g,每日服3次,每次1袋。
以生產(chǎn)本發(fā)明口服液產(chǎn)品1000mL為例所用的中藥原料和輔料及其重量配比為
天 麻90g葛 根180g川 芎90g茯 苓180g當(dāng) 歸90g炒白術(shù)72g蔗 糖400g蒸餾水 加至1000mL。
其制備工藝按本發(fā)明口服液制備工藝進(jìn)行。每瓶10mL,每毫升含中藥原料0.702g,每次10mL,每日服三次。
在本實(shí)施例的配比中,中藥原料各組分的重量份為天 麻10份 葛 根20份川 芎10份 茯 苓20份當(dāng) 歸10份 炒白術(shù)8份。
實(shí)施例2以生產(chǎn)本發(fā)明膠囊劑產(chǎn)品1000粒為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻203g 葛 根763g川 芎255g 茯 苓509g當(dāng) 歸407g 炒白術(shù)203g淀 粉 加至400g。
其制備工藝按本發(fā)明膠囊劑的制備工藝進(jìn)行。每粒重0.4g,每粒含中藥原料2.34g,每日口服3次,每次3粒。
以生產(chǎn)本發(fā)明藥物片劑產(chǎn)品1000片為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻153g 葛 根572g川 芎191g 茯 苓381g當(dāng) 歸305g 炒白術(shù)153g淀 粉 加至500g。
其制備工藝按本發(fā)明片劑的制備工藝進(jìn)行。每片重0.5g,每片含中藥原料1.755g,每日口服3次,每次4片。
以生產(chǎn)本發(fā)明顆粒劑產(chǎn)品1000克為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻122g 葛 根458g川 芎153g 茯 苓305g當(dāng) 歸244g 炒白術(shù)122g
蔗 糖 400g糊 精 加至1000g其制備工藝按本發(fā)明顆粒劑的制備工藝進(jìn)行。每袋重5g,每克含中藥原料1.404g,每日服3次,每次1袋。
以生產(chǎn)本發(fā)明口服液產(chǎn)品1000mL為例所用的中藥原料和輔料及其重量配比為天 麻61g 葛 根229g川 芎76g 茯 苓153g當(dāng) 歸122g炒白術(shù)61g蔗 糖 400g蒸餾水 加至1000mL。
其制備工藝按本發(fā)明口服液制備工藝進(jìn)行。每瓶10mL,每毫升含中藥原料0.702g,每次10mL,每日服三次。
在本實(shí)施例的配比中,中藥原料各組分的重量份為天 麻4份 葛 根15份川 芎5份 茯 苓10份當(dāng) 歸8份 炒白術(shù)4份實(shí)施例3以生產(chǎn)本發(fā)明膠囊劑產(chǎn)品1000粒為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻288g葛 根767g川 芎230g茯 苓575g當(dāng) 歸288g炒白術(shù)192g淀 粉 加至400g。
其制備工藝按本發(fā)明膠囊劑的制備工藝進(jìn)行。每粒重0.4g,每粒含中藥原料2.34g,每日口服3次,每次3粒。
以生產(chǎn)本發(fā)明藥物片劑產(chǎn)品1000片為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻216g葛 根575g川 芎173g茯 苓431g當(dāng) 歸216g炒白術(shù)144g淀 粉 加至500g。
其制備工藝按本發(fā)明片劑的制備工藝進(jìn)行。每片重0.5g,每片含中藥原料1.755g,每日口服3次,每次4片。
以生產(chǎn)本發(fā)明顆粒劑產(chǎn)品1000克為例所用的原料藥和輔料及其重量配比為天 麻173g葛 根460g川 芎138g茯 苓345g當(dāng) 歸173g炒白術(shù)115g蔗 糖400g糊 精 加至1000g其制備工藝按本發(fā)明顆粒劑的制備工藝進(jìn)行。每袋重5g,每克含中藥原料1.404g,每日服3次,每次1袋。
以生產(chǎn)本發(fā)明口服液產(chǎn)品1000mL為例所用的中藥原料和輔料及其重量配比為天 麻86g 葛 根230g川 芎69g 茯 苓173g當(dāng) 歸86g 炒白術(shù)58g蔗 糖 400g蒸餾水 加至1000mL。
其制備工藝按本發(fā)明口服液制備工藝進(jìn)行。每瓶10mL,每毫升含中藥原料0.702g,每次10mL,每日服三次。
在本實(shí)施例的配比中,中藥原料各組分的重量份為天 麻15份葛 根40份川 芎12份茯 苓30份當(dāng) 歸15份炒白術(shù)10份為了驗證本發(fā)明藥物對腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的治療效果,申請人采用本發(fā)明實(shí)施例1重量配比制備的膠囊劑(試驗時名稱為鎮(zhèn)眩通絡(luò)膠囊)委托試驗單位進(jìn)行了藥效試驗和降低血糖的時效關(guān)系試驗,各種試驗情況如下一、本發(fā)明藥物主要藥效學(xué)試驗試驗?zāi)康牟捎谜游锱c模型動物試驗,觀察鎮(zhèn)本發(fā)明藥物對小鼠眩暈?zāi)P偷挠绊?,對阻斷大鼠四動脈所致腦缺血模型的影響、對大腦中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為和腦梗塞面積的影響、對醋酸致痛小鼠扭體反應(yīng)的影響、對二甲苯所致小鼠耳廓炎癥的影響、對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的影響、對亞硝酸鈉致小鼠記憶鞏固障礙模型的影響及對蛋清致大鼠足跖腫脹的影響試驗,反映鎮(zhèn)眩通絡(luò)膠囊的功效與主治,為臨床試驗提供理論依據(jù)。
實(shí)驗藥品阿司匹林腸溶片,陜西白鹿制藥股份有限公司,批號為050731,規(guī)格為25mg/片;腦絡(luò)通膠囊,由浙江康恩貝制藥股份有限公司生產(chǎn),規(guī)格為每粒裝0.5g(含鹽酸托哌酮50mg),批準(zhǔn)文號為國藥準(zhǔn)字Z33021082,產(chǎn)品批號為050601;強(qiáng)力定眩片,由陜西漢王藥業(yè)有限公司生產(chǎn),規(guī)格為每片重0.35g,產(chǎn)品批號為040708;鹽酸嗎啡注射液沈陽第一制藥廠(東藥集團(tuán)),規(guī)格為2ml/支(1%),批號為050203;亞硝酸鈉(NaNO2),成都市金山化工試劑廠生產(chǎn),規(guī)格為分析純,產(chǎn)品批號為030810。本發(fā)明藥物膠囊由西安市中醫(yī)醫(yī)院提供;批號為041101,規(guī)格為0.33g/粒,每克藥粉相當(dāng)7.09g生藥量,人日用量為2.97g藥粉/人(相當(dāng)于21.06g生藥),人體重若按60kg計算,則人日用量為0.0495g/kg(相當(dāng)于0.351g生藥/kg);配制將本發(fā)明藥物膠囊用自來水配制成適當(dāng)混懸液,臨用臨配;0.9%氯化鈉注射液,由四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn),500ml/瓶,批準(zhǔn)文號為國藥準(zhǔn)字H51021158,產(chǎn)品批號為A050517。
實(shí)驗器材自制小鼠眩暈實(shí)驗儀,可調(diào)速動物眩暈產(chǎn)生儀,旋轉(zhuǎn)速度0~500轉(zhuǎn)/分,逃避電擊反射訓(xùn)練儀,將一調(diào)壓變壓器經(jīng)導(dǎo)線及開關(guān)連接上逃避電擊反射箱制作成逃避電擊反射訓(xùn)練儀,逃避電擊反射訓(xùn)練箱由帶蓋的圓柱形透明有機(jī)玻璃盒制作而成,底部鋪設(shè)銅絲電柵欄,從蓋上懸掛一寬1.0cm,長4.0cm的小凳,凳離電柵欄高度為5.0cm,刺激電壓設(shè)定為35~40V,頻率為50Hz的交流電;T6spectrop hotometer,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;ELX 800 UV,BIO-TEK;LMAX II化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀,美國生產(chǎn);IKA手握勻漿器、SIGMA3K30低溫高速離心機(jī)、IAK渦旋混勻器,德國生產(chǎn);FORMA超低溫冰箱(-86℃),美國生產(chǎn)。
實(shí)驗動物ICR品系小白鼠,體重18~22g,雌雄兼用,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心提供,合格證號為陜醫(yī)動證字第08-004號;SD品系大白鼠,體重180~220g,雌性;由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心提供,合格證號為陜醫(yī)動證字第08-005號。
實(shí)驗室溫度為22~26℃,相對濕度35%~70%,自然光源,換氣扇通風(fēng),飲自來水,食全價固體飼料,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心提供,動物按性別分籠飼養(yǎng)。
1、本發(fā)明藥物對小鼠實(shí)驗性眩暈?zāi)P偷挠绊慖CR小鼠,體重18~22g。參照文獻(xiàn)方法進(jìn)行實(shí)驗,將小鼠放入逃避電擊反射訓(xùn)練箱,給以電刺激(35~40V,頻率為50Hz),動物會在訓(xùn)練箱內(nèi)掙扎以逃避電擊,當(dāng)發(fā)現(xiàn)下掛的小凳時會跳上以逃避電擊(小凳寬1.0cm,長4.0cm,凳離電柵欄高度為5.0cm)。只要小鼠跳上小凳并保持30秒以上就算一次訓(xùn)練成功,連續(xù)訓(xùn)練3天,每天上、下午各訓(xùn)練1遍,每遍要訓(xùn)練3次,使其建立穩(wěn)定且牢固的逃避電擊反射。潛伏期測試時,為了保證電柵欄與動物腳趾間導(dǎo)電良好,在每次測試前用0.9%鹽水濕紗布擦拭電柵欄一次,并及時清理干凈動物的尿液及糞便,使動物每次所受到的電擊強(qiáng)度保持均勻;取已經(jīng)牢固建立逃避電擊反射的小鼠50只,隨機(jī)均分成5組,每組10只正常對照組,給等體積生理鹽水;模型對照組,給等體積自來水;陽性對照組(腦絡(luò)通膠囊組),給腦絡(luò)通膠囊1.0g/kg;本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組,分別給本發(fā)明藥物1.78g/kg、0.89g/kg、0.45g/kg(分別相當(dāng)于原生藥12.64g/kg、6.32g/kg、3.16g/kg),給藥前測量旋轉(zhuǎn)后的逃避電擊反射潛伏期(轉(zhuǎn)速380r/min,每次旋轉(zhuǎn)1min),共測量3次,前后兩次測量間隔30分鐘左右,以給藥前3次測量結(jié)果的平均值作為給藥前結(jié)果。然后每組分別灌胃給藥,在45分鐘、75分鐘、105分鐘、150分鐘分別將動物放入動物眩暈產(chǎn)生儀內(nèi),以380轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速勻速旋轉(zhuǎn)1分鐘驟停,立即將動物放入逃避電擊反射訓(xùn)練儀并給以電擊,記錄小鼠跳上小凳的時間,只有當(dāng)小鼠跳上小凳并保持30秒以上不再跌落才算完成逃避電擊反射,否則表明眩暈狀態(tài)未結(jié)束,沒有完成逃避電擊反射。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,t檢驗,結(jié)果見表1。
表1本發(fā)明藥物對小鼠實(shí)驗性眩暈?zāi)P偷挠绊?x±s)

注與正常對照組比較;△P<0.05,△△P<0.01;與給藥前比較*P<0.05,**P<0.01。
表1結(jié)果顯示,正常對照組小鼠在給予生理鹽水前后其旋轉(zhuǎn)后逃避電擊反射潛伏期無明顯變化,P均>0.05。本發(fā)明藥物各劑量組在給藥后不同時間內(nèi)能明顯縮短旋轉(zhuǎn)后逃避電擊反射潛伏期,與正常對照組比較,本發(fā)明藥物1.78g/kg與0.89g/kg劑量組在給藥后45分鐘、75分鐘、105分鐘、150分鐘,0.45g/kg劑量組在75分鐘、105分鐘、150分鐘時與正常對照組比較,均有顯著性差異,P<0.05或0.01。腦絡(luò)通組在給藥后75分鐘、105分鐘、150分鐘時與正常對照組比較,亦具有顯著性差異,P<0.05或0.01。本發(fā)明藥物組各劑量給藥后45分鐘、75分鐘、105分鐘、150分鐘各時間點(diǎn)與給藥前比較,差異有顯著性,均P<0.05或0.01,腦絡(luò)通組給藥后各時間點(diǎn)與給藥前比較,具有顯著性差異。提示本發(fā)明藥物能縮短旋轉(zhuǎn)后逃避電擊反射潛伏期,具有抗眩暈的藥理作用。
2、本發(fā)明藥物對阻斷四動脈所致腦缺血大鼠的影響取SD大鼠60只,雄性,體重280~320g,隨機(jī)分成6組,每組10只。分組為假手術(shù)對照組,0.9%氯化鈉注射液1ml/100g;腦缺血模型組,0.9%氯化鈉注射液1ml/100g;模型+陽性藥腦絡(luò)通組,0.5g/kg,用生理鹽水配成0.5%;模型+本發(fā)明藥物小劑量組,0.25g/kg;模型+本發(fā)明藥物中劑量組,0.5g/kg;模型+本發(fā)明藥物大劑量組,1g/kg。
用乙醚吸入麻醉各組大鼠,無菌條件下分離兩側(cè)頸總動脈,并分別置線備用。在大鼠背部正中枕骨后第一、二頸椎位置切口,顯微鏡下暴露第一頸椎兩側(cè)橫突翼板,并找到左、右翼板小孔,用直徑1mm左右的單極電凝針插入其中,灼斷除假手術(shù)組外其余各組大鼠雙側(cè)椎動脈,縫合傷口。術(shù)中及術(shù)后麻醉清醒前用烤燈維持動物體溫(37.0±0.5)℃,實(shí)驗室溫保持在(24~25)℃。隨即各組大鼠灌胃給藥一次,容量1ml/100g。手術(shù)后次日,再次灌胃給藥一次,給藥30分鐘后將大鼠頭向持板者一側(cè)放在面積為40×30cm2的水平位置平滑木板上,在4~5秒時間逐漸抬高持板者一側(cè)木板,使木板與地面的角度從0°轉(zhuǎn)向90°,記錄大鼠從木板上下滑時的角度。每只大鼠測定3次,取3次下滑角度值平均值作為協(xié)調(diào)運(yùn)動指標(biāo)。隨后,拆除各組大鼠頸部縫合線(假手術(shù)對照組除外),用動脈夾夾閉雙側(cè)頸總動脈,夾閉雙側(cè)頸總動脈后30分鐘再開啟動脈夾進(jìn)行腦再灌流。3小時后斷頭處死大鼠,迅速將頭置于液氮中,15分鐘后剝離出全腦,稱重并求腦指數(shù)[g/100g體重]。然后將全腦置于2mlTris-HCl緩沖液中(0℃,pH7.4)勻漿30s(700轉(zhuǎn)/分鐘),再加緩沖液至6ml,于冷凍離心機(jī)內(nèi)(4℃)3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘,取上清液,用比色法(乳酸測試盒)測乳酸含量;用熒光素酶法(ATP檢測試劑盒)測ATP;羥胺法(SOD測試盒)測SOD含量,求各生化指標(biāo)含量,試驗結(jié)果見表2、表3,t檢驗統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)。
表2本發(fā)明藥物對大鼠雙側(cè)椎動脈阻斷后協(xié)調(diào)運(yùn)動和四動脈阻斷后腦指數(shù)的影響(x±s)

與腦缺血模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。
表2結(jié)果表明,阻斷雙側(cè)椎動脈后,本發(fā)明藥物各劑量組大鼠斜板下滑角度均大于腦缺血模型組,其中0.5g/kg和1g/kg劑量組下滑角度與模型組比較差異有顯著性(P<0.05或P<0.01);阻斷雙側(cè)椎動脈后,本發(fā)明藥物各劑量組大鼠腦指數(shù)均小于腦缺血模型組,其中0.5g/kg和1g/kg劑量組腦指數(shù)與模型組比較存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。陽性對照藥腦絡(luò)通膠囊組大鼠的下滑角度、腦指數(shù)與腦缺血模型組比較,均有顯著性差異。
表3本發(fā)明藥物對大鼠四動脈阻斷后腦缺血大鼠腦組織生化指標(biāo)的影響(x±s)

與腦缺血模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。
表3結(jié)果表明,阻斷雙側(cè)頸總動脈30分鐘后恢復(fù)頸總動脈血流,進(jìn)行腦再灌流3小時后,本發(fā)明藥物各劑量組大鼠腦組織乳酸低于腦缺血模型組,而ATP和SOD含量則高于模型組,其中0.5g/kg和1g/kg劑量組大鼠腦組織乳酸、ATP、SOD與腦缺血模型組比較,有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。陽性對照藥腦絡(luò)通膠囊組大鼠的腦組織乳酸、ATP、SOD與腦缺血模型組比較,均有顯著性差異。
上述結(jié)果表明本發(fā)明藥物對不完全腦缺血大鼠共濟(jì)協(xié)調(diào)功能有一定改善作用,并可改善完全腦缺血后再灌流大鼠腦組織能量代謝狀況。
3、本發(fā)明藥物對大腦中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為和腦梗塞面積的影響SD大鼠60只,雄性,體重280~320g,隨機(jī)分成6組,每組10只假手術(shù)對照組,0.9%氯化鈉注射液1ml/100g;腦缺血模型組,0.9%氯化鈉注射液1ml/100g;模型+陽性藥腦絡(luò)通組,0.5g/kg,用生理鹽水配成0.5%溶液;模型+本發(fā)明藥物小劑量組,0.25g/kg;模型+本發(fā)明藥物中劑量組,0.5g/kg;模型+本發(fā)明藥物大劑量組,1g/kg。
試驗時各組大鼠腹腔注射4%戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉,手術(shù)暴露右頸總動脈、頸內(nèi)動脈和頸外動脈。除假手術(shù)對照組外,結(jié)扎其余各組大鼠的頸總動脈和頸外動脈,并于頸內(nèi)動脈和頸外動脈分叉下方頸總動脈上剪一切小口,將一預(yù)先用乙醇燈燒成圓頭的4-0號尼龍線插入右頸內(nèi)動脈,緩慢向前推進(jìn)約18.5±0.5mm(自分叉部計),至遇阻力為止,插線完畢后,將頸內(nèi)動脈和尼龍線一起結(jié)扎,縫合皮膚。隨后,灌胃給各組大鼠藥物一次,容量1ml/100g。術(shù)中及術(shù)后動物麻醉清醒前用烤燈維持動物肛溫37.0±0.5℃,實(shí)驗室溫保持在24±0.5℃。動物蘇醒后放回鼠籠,自由飲食。腦缺血后12小時左右,再次灌胃給各組藥物一次,容量1ml/100g。
腦缺血后24小時,根據(jù)Bederson評分標(biāo)準(zhǔn),采用單盲法對動物進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評分,滿分為10分,分?jǐn)?shù)越高,代表動物的行為障礙越嚴(yán)重。
Bederson’s評分標(biāo)準(zhǔn)

隨后斷頭處死各組大鼠,記錄張口喘氣時間后迅速取出全腦,除嗅球、小腦和低位腦干,置于冰鹽水中10分鐘,冠狀切成五片2mm厚腦片,迅速將腦片置于0.5%硝基四氮唑藍(lán)(NBT)染液中,37℃避光溫孵染色30種,其間每隔7~8分鐘翻動一次,正常腦組織為藍(lán)色,缺血腦梗腦組織為白色。溫孵完畢后用數(shù)碼相機(jī)拍照雙側(cè)腦片,輸入計算機(jī)并采用美國Scion Corporation的Scion Image Beta 4.0.2圖像處理軟件計算梗塞面積,求出每鼠5片腦片總梗塞面積與腦片總面積之比。結(jié)果見表4,t檢驗統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)。
表4本發(fā)明藥物對中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為和腦梗塞面積的影響(X±S)

與腦缺血模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。
表4結(jié)果表明,模型+本發(fā)明藥物各劑量組大鼠Bederson’s神經(jīng)行為積分和腦組織梗塞面積比例均低于腦缺血模型組,其中0.5g/kg和1g/kg劑量組神經(jīng)行為積分和腦組織梗塞面積比例與模型組比較,存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。提示本發(fā)明藥物可改善中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為,減少腦組織缺血范圍,對大鼠急性腦缺血、缺氧有一定的保護(hù)作用。
4、本發(fā)明藥物對醋酸致痛小鼠扭體反應(yīng)的影響ICR品系小白鼠50只,體重18-22g,雌雄各半,隨機(jī)分為5組,每組10只。分別為模型對照組,給等容積潔凈自來水;陽性對照組,皮下注射嗎啡20mg/kg;本發(fā)明藥物大劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物小劑量組,分別給本發(fā)明藥物1.78g/kg、0.89g/kg、0.45g/kg,分別相當(dāng)于原生藥12.64g/kg、6.32g/kg、3.16g/kg。各組均按0.2ml/10g體重灌胃給藥。給藥1小時后,各組小鼠分別腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只,觀察記錄小鼠15分鐘內(nèi)的扭體(腹部內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高)次數(shù)及潛伏期,數(shù)據(jù)進(jìn)行組間t檢驗。試驗結(jié)果見表5。
表5本發(fā)明藥物對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(x±s)

注t檢驗,與對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
由表5結(jié)果可見,嗎啡組能明顯減少醋酸致痛小鼠的扭體次數(shù),與模型對照組比較,有顯著性差異(P<0.01)。本發(fā)明藥物能明顯減少醋酸致痛小鼠的扭體次數(shù),與模型對照組比較,大、中劑量組有顯著性差異(P<0.01或P<0.05)。嗎啡組能明顯延長醋酸致痛小鼠的潛伏期,與模型對照組比較,有顯著性差異(P<0.01)。本發(fā)明藥物能明顯延長醋酸致痛小鼠的潛伏期,與模型對照組比較,大劑量組有顯著性差異(P<0.01)。提示本發(fā)明藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。
5、本發(fā)明藥物對二甲苯所致小鼠耳廓炎癥的影響ICR品系小白鼠72只,體重18-22g,♀♂各半,按體重隨機(jī)分為6組,每組12只。分別為模型對照組,給等容積自來水;醋酸潑尼松陽性對照組,給醋酸潑尼松10.8mg/kg;腦絡(luò)通膠囊陽性對照組,給腦絡(luò)通膠囊1.0g/kg;本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組,分別給本發(fā)明藥物1.78g/kg、0.89g/kg、0.45g/kg,分別相當(dāng)于原生藥12.64g/kg、6.32g/kg、3.16g/kg)各組均按0.2ml/10g灌胃給藥,每日一次,連續(xù)3天。末次給藥后一個小時,每鼠右耳內(nèi)外側(cè)涂二甲苯0.05ml致炎,左耳作對照,1小時后頸椎脫臼處死小鼠。沿耳廓基線剪下兩耳,于左右耳相同部位用打孔器(8mm)打下耳片,用分析天平稱重,按下式計算小鼠耳廓腫脹度和腫脹率,分析本發(fā)明藥物的抗小鼠耳廓二甲苯性腫脹的作用。數(shù)據(jù)進(jìn)行組間t檢驗。
試驗結(jié)果見表6。
腫脹度=右耳片重-左耳片重

表6本發(fā)明藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(x±s,n=12)

注與空白對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
由表6結(jié)果可見,強(qiáng)的松片組及腦絡(luò)通組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用,與模型對照組比較,耳廓腫脹度及腫脹率的差異均有顯著性(P<0.01或P<0.05)。本發(fā)明藥物給藥組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用,與模型對照組比較,本發(fā)明藥物1.78g/kg劑量組、0.89g/kg劑量組耳廓腫脹度及腫脹率的差異均有顯著性(P<0.01或P<0.05)。提示本發(fā)明藥物具有顯著的抗炎作用。
6、本發(fā)明藥物對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的影響ICR品系小白鼠72只,體重18-22g,♂,按體重隨機(jī)分為6組,每組12只。分別為空白對照組、模型對照組,分別給等容積自來水;強(qiáng)力定眩片陽性對照組,給強(qiáng)力定眩片1.89g/kg;本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組,分別給本發(fā)明藥物1.78g/kg、0.89g/kg、0.45g/kg,分別相當(dāng)于原生藥12.64g/kg、6.32g/kg、3.16g/kg。以上各組均連續(xù)給藥7天后開始訓(xùn)練。訓(xùn)練前先將跳臺儀底部銅柵電壓調(diào)節(jié)至36V,于末次給藥1小時訓(xùn)練,訓(xùn)練前20分鐘,除正常對照組腹腔注射生理鹽水外,其余各組均腹腔注射東莨菪堿4.5mg/kg,10分鐘后進(jìn)行跳臺法訓(xùn)練。每批實(shí)驗各組分別有1只小鼠給藥,平行操作。各小鼠放入跳臺儀后先適應(yīng)環(huán)境3分鐘,然后通電,小鼠受電擊后跳上跳臺以逃避電擊,跳下時以小鼠雙足同時接觸銅柵為觸電,視為錯誤反應(yīng),訓(xùn)練5分鐘。24后后測試,測試時先將小鼠放在跳臺上,同時用秒表記錄小鼠第一次跳下的時間(即觸電潛伏期)和5分鐘內(nèi)跳下次數(shù)(即錯誤次數(shù)),數(shù)據(jù)進(jìn)行組間t檢驗。
試驗結(jié)果見表7。
表7本發(fā)明藥物對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的影響(x±s,n=12)

注與空白對照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型對照組比較,△P<0.05,△△P<0.01。
由表7結(jié)果可見,強(qiáng)力定眩組對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的小鼠跳臺錯誤次數(shù)有明顯的減少作用,與模型對照組比較,差異有顯著性(P<0.01)。本發(fā)明藥物給藥組對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的小鼠跳臺錯誤次數(shù)有明顯的減少作用,與模型對照組比較,本發(fā)明藥物1.78g/kg劑量組和0.89g/kg劑量組的差異均有顯著性(P<0.01或P<0.05)。強(qiáng)力定眩組對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的小鼠觸電潛伏期有明顯的延長作用,與模型對照組比較,差異有顯著性(P<0.01)。本發(fā)明藥物給藥組對東莨菪堿致小鼠記憶獲得障礙模型的小鼠觸電潛伏期有明顯的延長作用,與模型對照組比較,本發(fā)明藥物1.78g/kg劑量組、0.89g/kg劑量組和0.45g/kg劑量組的差異均有顯著性(P<0.01或P<0.05)。提示本發(fā)明藥物對記憶獲得障礙有顯著的改善作用。
7、本發(fā)明藥物對亞硝酸鈉致小鼠記憶鞏固障礙模型的影響ICR品系小白鼠72只,體重18-22g,♂,按體重隨機(jī)分為6組,每組12只。分別為空白對照組、模型對照組,分別給等容積自來水;強(qiáng)力定眩片陽性對照組,給強(qiáng)力定眩片1.89g/kg;本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組,分別給本發(fā)明藥物1.78g/kg、0.89g/kg、0.45g/kg,分別相當(dāng)于原生藥12.64g/kg、6.32g/kg、3.16g/kg。以上各組均連續(xù)給藥7天,給藥后30分鐘進(jìn)行避暗訓(xùn)練,訓(xùn)練結(jié)束后除空白對照組腹腔注射生理鹽水外,其余各組均腹腔注射亞硝酸鈉125mg/kg。于24小時后進(jìn)行測試,記錄3分鐘內(nèi)小鼠從明室進(jìn)入暗室的潛伏期和錯誤次數(shù),數(shù)據(jù)進(jìn)行組間t檢驗。試驗結(jié)果見表8。
表8對亞硝酸鈉致記憶鞏固障礙模型的影響(x±s,n=12)

注與空白對照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型對照組比較,△P<0.05,△△P<0.01。
由表8結(jié)果可見,強(qiáng)力定眩組對亞硝酸鈉致記憶鞏固障礙模型的小鼠避暗錯誤次數(shù)有明顯的減少作用,與模型對照組比較,差異有顯著性(P<0.01)。本發(fā)明藥物給藥組對亞硝酸鈉致記憶鞏固障礙模型的小鼠避暗錯誤次數(shù)有明顯的減少作用,與模型對照組比較,本發(fā)明藥物1.78g/kg劑量組和0.89g/kg劑量組的差異均有顯著性(P<0.01或P<0.05)。強(qiáng)力定眩組對亞硝酸鈉致記憶鞏固障礙模型的小鼠進(jìn)入暗室的潛伏期有明顯的延長作用,與模型對照組比較,差異有顯著性(P<0.05)。本發(fā)明藥物給藥組對亞硝酸鈉致記憶鞏固障礙模型的小鼠進(jìn)入暗室潛伏期有明顯的延長作用,與模型對照組比較,本發(fā)明藥物1.78g/kg劑量組和0.89g/kg劑量組的差異均有顯著性(P<0.05)。提示本發(fā)明藥物對記憶鞏固障礙有顯著的改善作用。
8、本發(fā)明藥物對蛋清致大鼠足跖腫脹的影響蛋清的配制取新鮮雞蛋一枚,于頂端輕輕敲出一孔,傾出蛋清于小燒杯中(注意傾倒時不要將蛋黃傾出),用細(xì)玻璃棒不斷攪動使均勻,并用冷蒸餾水配制成10%濃度,配好后即刻使用。
SD大鼠,♂,50只,體重180g-220g,隨機(jī)分為5組,每組10只。分別為模型對照組,給等容積自來水;模型+陽性對照組,給強(qiáng)的松5mg/kg;模型+本發(fā)明藥物大劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物小劑量組,分別給劑量組0.99g/kg、0.50g/kg、0.25g/kg,分別相當(dāng)于原生藥7.02g/kg、3.51g/kg、1.76g/kg。各組均按2ml/100g體重灌胃給藥,每日一次,連續(xù)7天。在每鼠右后肢踝關(guān)節(jié)周圍用記號筆做一標(biāo)記,按文獻(xiàn)方法測定致炎前的足跖容積。末次給藥后1小時,在右后足跖皮下注射上述新鮮配制的10%新鮮蛋清0.05ml,于致炎后0.5小時、1小時、2小時、4小時、6小時用足跖容積測量器測右后足跖容積。以致炎前后容積差值與致炎前正常體積之比作為足跖腫脹率,判斷藥物對蛋清所致大鼠足腫脹的影響。試驗結(jié)果見表9。
表9本發(fā)明藥物對蛋清致大鼠足跖腫脹的影響(n=10,x±s)

續(xù)表 本發(fā)明藥物對蛋清致大鼠足跖腫脹的影響(n=10,x±s)

注1為模型對照組、2為陽性對照組、3為本發(fā)明藥物0.99g/kg組、4為本發(fā)明藥物0.50g/kg組、5為本發(fā)明藥物.25g/kg組。t檢驗,與模型對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
由表9結(jié)果可見,強(qiáng)的松組在蛋清致炎后0.5小時、1小時、2小時、4小時、6小時的腫脹率明顯降低,與模型對照組相同時間的腫脹率比較,均有顯著性差異(P<0.01)。本發(fā)明藥物在蛋清致炎后的腫脹率明顯降低,與模型對照組比較,本發(fā)明藥物0.99g/kg組在致炎后1小時、2小時、4小時、6小時各時間的腫脹率均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01),本發(fā)明藥物0.50g/kg組在致炎后2小時、4小時、6小時的腫脹率有顯著性差異(P<0.05)。提示本發(fā)明藥物具有抑制大鼠蛋清所致的足跖腫脹作用。
試驗結(jié)論本發(fā)明藥物能縮短小鼠旋轉(zhuǎn)后逃避電擊反射潛伏期,具有抗眩暈的藥理作用;本發(fā)明藥物對不完全腦缺血大鼠共濟(jì)協(xié)調(diào)功能有一定改善作用,并可改善完全腦缺血后再灌流大鼠腦組織能量代謝狀況;本發(fā)明藥物可改善中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為,減少腦組織缺血范圍,對大鼠急性腦缺血、缺氧有一定的保護(hù)作用;本發(fā)明藥物對小鼠記憶獲得障礙有顯著的改善作用;本發(fā)明藥物對小鼠記憶鞏固障礙有顯著的改善作用;此外,本發(fā)明藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。
本發(fā)明的功能主治滌痰化瘀,鎮(zhèn)眩通絡(luò)。主治痰瘀痹阻腦絡(luò)所致的腦供血不足性眩暈、腔隙性腦梗塞、高黏血癥,癥見視物晃動,行走不穩(wěn),半身麻木、無力,智力下降等。
本發(fā)明的規(guī)格本發(fā)明藥物膠囊劑每粒重0.4g,每粒含中藥原料2.34g;本發(fā)明藥物片劑每片重0.5g,每片含中藥原料1.755g;本發(fā)明藥物顆粒劑每袋重5g,每克含中藥原料1.404g;本發(fā)明藥物口服液每瓶10mL,每毫升含中藥原料0.702g。
本發(fā)明的用法用量每日服三次,每次口服膠囊劑3?;蚱瑒?片或顆粒劑1袋或口服液1瓶。
權(quán)利要求
1.一種治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物,其特征在于它是由下述重量份配比的中藥原料按常規(guī)制劑方法制備的口服藥劑天麻4~15份葛根15~40份川芎5~12份茯苓15~30份當(dāng)歸8~15份炒白術(shù) 4~10份。
2.按照權(quán)利要求1所述的治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物,其特征在于其中各中藥原料的重量份配比是天麻5~15份葛根20~30份川芎6~10份茯苓16~25份當(dāng)歸9~12份炒白術(shù) 6~9份。
3.按照權(quán)利要求1所述的治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物,其特征在于其中各中藥原料的重量份配比是天麻10份葛根20份川芎20份茯苓20份當(dāng)歸10份炒白術(shù) 8份。
4.按照權(quán)利要求1所述的治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物,其特征在于所說的口服藥劑是制劑學(xué)中所說的膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液。
全文摘要
一種治療腦供血不足性眩暈和腔梗及高黏血癥的口服藥物,它是由天麻4~15、葛根15~40、川芎5~12、茯苓15~30、當(dāng)歸8~15、炒白術(shù)4~10重量份配比的中藥原料按常規(guī)制劑方法制備的口服藥劑。本發(fā)明藥物經(jīng)藥效試驗,表明本發(fā)明藥物能縮短小鼠旋轉(zhuǎn)后逃避電擊反射潛伏期,具有抗眩暈的藥理作用;對不完全腦缺血大鼠共濟(jì)協(xié)調(diào)功能有一定改善作用,并可改善完全腦缺血后再灌流大鼠腦組織能顯代謝狀況;可改善中動脈栓塞性腦缺血大鼠神經(jīng)行為,減少腦組織缺血范圍,對大鼠急性腦缺血、缺氧有一定的保護(hù)作用;對小鼠記憶獲得障礙有顯著的改善作用;對小鼠記憶鞏固障礙有顯著的改善作用;具有顯著的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。
文檔編號A61P9/10GK1895558SQ20061004303
公開日2007年1月17日 申請日期2006年6月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月27日
發(fā)明者王靜怡 申請人:王靜怡
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