專利名稱：酶抑制劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及胰島素-調(diào)節(jié)的氨肽酶(IRAP)的抑制劑和抑制氨肽酶的方法以及包含所述抑制劑的組合物。特別地，本發(fā)明的抑制劑可以適用于治療應(yīng)用，包括增強記憶和學習功能、調(diào)節(jié)細胞葡萄糖攝取和穩(wěn)態(tài)、誘導分娩和泌乳、以及其中涉及過度或不需要的IRAP活性的其它障礙或病況。
背景技術(shù)：
本說明書中對任何現(xiàn)有技術(shù)的提及并非，并且不應(yīng)被視為是承認或任何形式的提示，在澳大利亞該現(xiàn)有技術(shù)構(gòu)成了公知常識的組成部分。
胰島素-調(diào)節(jié)的氨肽酶(IRAP)為廣泛分布在許多組織，包括脂肪、肌肉、腎、腎上腺、肺和心臟中的165kDa糖蛋白(Keller等，1995；Rogi等，1996；Zhang等，1999)。在腦中，它作為較小的140kDa蛋白出現(xiàn)，可能是因差別糖基化所致(Keller等，1995；Zhang等，1999)。它是屬于M1族鋅-依賴性金屬肽酶的II型膜內(nèi)在蛋白質(zhì)并且具有含有催化位點、單一跨膜結(jié)構(gòu)域和較小N-末端胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的大C-末端胞外尾(Keller等，1995；Rogi等，1996)。最初克隆自大鼠附睪脂肪墊cDNA文庫作為用于含有胰島素-反應(yīng)性葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT4的特異性囊泡的標記蛋白(vp165)(Keller等，1995)，該相同蛋白質(zhì)與催產(chǎn)素酶同時從人胎盤cDNA文庫中被克隆(Rogi等，1996)，該酶是一種被認為在降解催產(chǎn)素中具有重要作用的酶。最近還通過對從純化自牛腎上腺膜的AT4受體蛋白中產(chǎn)生的胰蛋白酶消化肽段的質(zhì)譜分析，將AT4受體鑒定為跨膜酶胰島素調(diào)節(jié)的氨肽酶(IRAP)(Albiston等，2001)。對IRAP的生物化學和藥理學特性分析證實，它實際上就是AT4受體(Albiston等，2001)。盡管通過來自不同組織來源的三個獨立組而分離并且認為它們有益于不同的生理作用，但是這種蛋白質(zhì)的特性和特征仍然是一致的。
AT4配體，血管緊張素IV(Ang IV)、其類似物Nle-Ang IV和正亮氨酸(Norleucinal)Ang IV以及結(jié)構(gòu)上不同的肽LVV-血嗎啡樣肽7(LVV-H7)均以高親和力和相對特異性結(jié)合藥理學上不同的結(jié)合位點(被稱作AT4受體)。在體外證實所有的AT4配體，Ang IV、Nle-Ang IV和LVV-H7均為IRAP的氨肽酶活性的抑制劑，正如通過裂解合成底物Leu-β-萘基酰胺所評價的(Albiston等，2001；Lew等，2003)。Ang IV和LVV-H7展示出競爭性動力學，表明AT4配體通過結(jié)合IRAP的催化位點介導其作用。使用相同的系統(tǒng)還證實，盡管肽類Ang IV和LVV-H7結(jié)合催化位點，但是它們不被IRAP裂解(Lew等，2003)。
已經(jīng)顯示在正常動物中肽AT4配體，Ang IV、其更穩(wěn)定的類似物或LVV-H7的中樞給藥導致被動回避和空間學習范例中的記憶任務(wù)表現(xiàn)改善。在大鼠的被動回避范例中觀察到了最初的作用，其中腦室內(nèi)-心室劑量(1nmol)的Ang IV增加了厭惡性刺激后再進入暗室中的潛伏期(Braszko等，1988；Wright等，1993；Wright等，1996)。以0.1-0.5nmol/小時的劑量將Ang IV類似物長期輸注(6天)入大鼠側(cè)腦室增強了游泳迷宮(一種空間記憶范例)中的行為表現(xiàn)。在Barnes迷宮(另一種空間學習任務(wù))中，用100×10-12摩爾或1×10-9摩爾肽AT4配體Nle1-Ang IV或LVV-H7治療大鼠減少了該范例中達到學習者標準所花費的時間(Lee等，2004)。使用人工腦脊液治療的對照組動物花費7天達到了學習者的標準，而用濃度為100×10-12摩爾或1×10-9摩爾的Nle1-Ang IV或LVV-H7治療的動物在3-4天內(nèi)達到了學習者的標準(Lee等，2004)。這一觀察結(jié)果強烈表明，測試的兩種肽不僅改善了記憶，而且增強了空間學習。
不僅肽AT4配體增強了正常動物的記憶和學習，而且這些肽類還逆轉(zhuǎn)了(1)由毒蕈堿拮抗劑以化學方式或(2)由穿孔途徑的刀切損害以機械方式誘導的記憶缺失。急性給入側(cè)腦室的Ang IV、Nle-Ang IV的更穩(wěn)定類似物逆轉(zhuǎn)了空間學習范例中由毒蕈堿受體拮抗劑東莨菪堿誘導的記憶缺失(Pederson等，1998；Pederson等，2001)。在游泳迷宮范例中，可以用急性劑量(1nmol)的另一種Ang IV類似物正亮氨酸AngIV逆轉(zhuǎn)兩側(cè)穿孔途徑損害誘導的記憶缺失(Wright等，1999)。還發(fā)現(xiàn)在被動回避范例中條件試驗前急性給予另一種AT4配體LVV-H7逆轉(zhuǎn)了由東莨菪堿誘導的記憶缺失(Albiston等，2004)。
不同于M1族氨肽酶中的其它成員，IRAP的N-末端尾明顯更大(112個氨基酸)并且含有兩個位于酸性簇后的二亮氨酸模體(殘基53-54和76-77)(Keller等，1995)。這些特征排序模體還出現(xiàn)在GLUT4的羧基末端結(jié)構(gòu)域中(Bryant等，2002)并且提示這兩種蛋白質(zhì)進行了類似的胞內(nèi)排序過程。將IRAP的N-末端尾(1-109)或胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的較短片段IRAP(55-82)顯微注射入3T3-L1脂肪細胞，導致GLUT4囊泡易位至質(zhì)膜(Waters等，1997)，為IRAP的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域在運輸和/或保留GLUT4囊泡中的作用提供了支持。
如上所述，IRAP不僅被稱作GLUT4囊泡的標記蛋白(vp165)(Keller等，1995)。該蛋白質(zhì)與催產(chǎn)素酶從人胎盤cDNA文庫中同時被克隆(Rogi等，1996)，該酶是一種被認為在降解催產(chǎn)素中具有重要作用的酶。催產(chǎn)素和催產(chǎn)素受體在分娩中具有兩種重要作用。在所有哺乳動物物種中的證據(jù)提示，催產(chǎn)素在強力排出期中發(fā)揮作用并且對分娩開始的精確定時而言是重要的(Imamura等，2000)。在女性和獼猴中分娩開始可以被旁分泌機制而不被內(nèi)分泌機制介導。在基因敲除小鼠中的研究還證實了催產(chǎn)素與前列腺素之間的重要相互關(guān)系。催產(chǎn)素刺激許多物種中的前列腺素釋放，主要是在蛻膜/子宮上皮中。催產(chǎn)素的作用通過組織特異性催產(chǎn)素受體表達介導，該表達直接導致子宮肌層中收縮和蛻膜中前列腺素形成。在后期妊娠中在這些組織中存在顯著的催產(chǎn)素受體表達增加并且藥理學抑制延緩了遞送，這提示催產(chǎn)素受體對正常分娩而言是必需的。近期在具有催產(chǎn)素基因無效突變的小鼠中的研究提示了催產(chǎn)素在排乳中的重要性。
IRAP由此提供了開發(fā)可以增強或改善記憶和學習、治療葡萄糖穩(wěn)態(tài)的障礙，包括血糖過多和糖尿病和/或誘導個體分娩或泌乳的活性劑的靶標。因此，可以破壞或干擾IRAP功能活性的IRAP抑制劑可以在治療其中過度或不需要的IRAP活性起作用的病況和障礙中具有有用的治療和/或預防應(yīng)用。
發(fā)明概述在整個說明書和隨后的權(quán)利要求中，除非上下文另有要求，否則措詞“包含(comprise)”和變化形式，諸如“包含(comprises)”和“包含(comprising)”可以將被為意旨包含所述的整體或步驟或整體或步驟組，但不排除任意其它的整體或步驟或整體或步驟組。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)某些苯并-稠合的化合物具有IRAP抑制活性，并且由此可以適用于其中IRAP抑制為合乎需要的治療應(yīng)用。
因此，本發(fā)明在第一個方面中提供了用于抑制IRAP活性的方法，該方法包括使IRAP接觸抑制量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物。抑制IRAP活性可以在體外或體內(nèi)，優(yōu)選在受試者體內(nèi)進行。因此本發(fā)明還提供了用于抑制有此需要的受試者IRAP活性的方法，該方法包括對所述的受試者給予抑制有效量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物。
本文所述的化合物可以適用于治療其中過度或不需要的IRAP活性起作用的疾病或病況。因此，本發(fā)明還提供一種治療需要該治療的受試者中涉及IRAP活性的疾病或病況的方法，該方法包括對所述的受試者給予有效量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的步驟。本發(fā)明還提供了式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物在制備用于治療其中涉及IRAP活性的疾病或病況的藥物中的應(yīng)用。
如上所述，已經(jīng)顯示IRAP抑制劑可改善和增強空間學習以及逆轉(zhuǎn)記憶缺失。
因此，本發(fā)明在另一個方面中提供了用于增強受試者記憶和/或?qū)W習的方法，該方法包括對所述的受試者給予化合物式(I)的或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的步驟。本發(fā)明因此還提供了式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物在制備用于增強受試者記憶和/或?qū)W習的藥物中的應(yīng)用。
由于IRAP參與運輸GLUT4小囊泡，所以AT4配體與IRAP結(jié)合可以改變這種運輸途徑，由此調(diào)節(jié)葡萄糖攝取。實際上，已經(jīng)顯示Ang IV(0.1和1uM)可促進基礎(chǔ)和胰島素(0.7nM)刺激的葡萄糖攝入3T3-L1細胞。在具有II型或非-胰島素依賴性糖尿病(NIDDM)的受試者中，脂肪和肌細胞對胰島素的反應(yīng)有缺陷并且不能提供對葡萄糖穩(wěn)態(tài)的維持?？梢杂行笹LUT4小囊泡運動至質(zhì)膜或?qū)LUT4維持在質(zhì)膜上的活性劑，諸如IRAP抑制劑可以適用于控制葡萄糖穩(wěn)態(tài)和/或II型糖尿病，包括預防II型糖尿病的癥狀，諸如血糖過多和其它不需要的臨床后遺癥。
因此，本發(fā)明的另一個方面提供了用于治療需要該治療的受試者中葡萄糖穩(wěn)態(tài)的障礙和/或II型糖尿病的方法，該方法包括對所述的受試者給予式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的步驟。本發(fā)明因此提供了式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物在制備用于治療葡萄糖穩(wěn)態(tài)的障礙和/或II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
能夠延長循環(huán)或局部催產(chǎn)素水平的半衰期的活性劑，諸如IRAP抑制劑可以適用于誘導分娩或輔助泌乳的母親排乳。
因此，本發(fā)明的第四個方面提供了用于誘導需要該誘導的受試者分娩或泌乳的方法，該方法包括對所述的受試者給予式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的步驟，以及提供了式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物在制備用于誘導受試者分娩或泌乳的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的其它方面相當于上文使用如本文所定義的化合物11或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的那些方面。
附圖簡要說明附

圖1圖示了化合物1對東莨菪堿-誘導的記憶缺失的作用。
本發(fā)明的描述本發(fā)明提供了用作IRAP抑制劑的化合物。本發(fā)明關(guān)注的化合物包括式(I)的那些化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物 其中A為芳基、雜芳基、碳環(huán)基或雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；X為O、NR’或S，其中R’為氫、任選取代的烷基、任選取代的烯基、任選取代的炔基、任選取代的芳基、任選取代的?；?、任選取代的雜芳基、任選取代的碳環(huán)基或任選取代的雜環(huán)基；R1為NR7R8、NHCOR8、N(COR8)2、N(COR7)(COR8)、N＝CHOR8或N＝CHR8，其中R7和R8獨立地選自H、任選取代的烷基、任選取代的芳基，或R7和R8與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8元的環(huán)；R2為CN、CO2R9、C(O)O(O)R9、C(O)R9或C(O)NR9R10，其中R9和R10獨立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、碳環(huán)基、雜環(huán)基，其各自可以任選被取代，和氫；或R9和R10與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8元的環(huán)；R3-R6獨立地選自氫、鹵素、硝基、氰基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、羥基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、炔氧基、芳基氧基、雜芳基氧基、雜環(huán)基氧基、氨基、?；?、酰氧基、羧基、羧基酯、亞甲二氧基、酰氨基、硫代、烷硫基、烯硫基、炔硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、碳環(huán)基硫基、酰硫基和疊氮基，如果合適，其各自可以任選被取代，或任意兩個相鄰的R3-R6與它們所連接的原子一起形成可以任選被取代的3-8元的環(huán)；并且
Y為氫或C1-10烷基。
本文所用的術(shù)語“烷基”在單獨或化合物措詞中使用時表示直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基，優(yōu)選C1-20烷基，例如C1-10或C1-6。直鏈和支鏈烷基的實例包括甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、仲-丁基、叔-丁基、正-戊基、1，2-二甲基丙基、1，1-二甲基-丙基、己基、4-甲基戊基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、1，1-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、3，3-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、1，2，2，-三甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、庚基、5-甲基己基、1-甲基己基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、4，4-二甲基戊基、1，2-二甲基戊基、1，3-二甲基戊基、1，4-二甲基-戊基、1，2，3-三甲基丁基、1，1，2-三甲基丁基、1，1，3-三甲基丁基、辛基、6-甲基庚基、1-甲基庚基、1，1，3，3-四甲基丁基、壬基、1-，2-，3-，4-，5-，6-或7-甲基-辛基、1-，2-，3-，4-或5-乙基庚基、1-，2-或3-丙基己基、癸基、1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-和8-甲基壬基、1-，2-，3-，4-，5-或6-乙基辛基、1-，2-，3-或4-丙基庚基、十一基、1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-，8-或9-甲基癸基、1-，2-，3-，4-，5-，6-或7-乙基壬基、1-，2-，3-，4-或5-丙基辛基、1-，2-或3-丁基庚基、1-戊基己基、十二烷基、1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-，8-，9-或10-甲基十一基、1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-或8-乙基癸基、1-，2-，3-，4-，5-或6-丙基壬基、1-，2-，3-或4-丁基辛基、1-2-戊基庚基等。環(huán)烷基的實例包括單-或多環(huán)烷基，諸如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基、環(huán)癸基等。當烷基被一般地稱為″丙基″、丁基″等時，將要理解如果合適，它可以指任意的直連、支鏈和環(huán)狀異構(gòu)體。烷基可以任選被一個或多個如本文定義的任選取代基取代。
本文所用的術(shù)語“烯基”表示由含有至少一個碳-碳雙鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴殘基形成的基團，包括如上定義的乙烯型一-、二-或多-不飽和烷基或環(huán)烷基，優(yōu)選C2-20烯基(例如C2-10或C2-6)。烯基的實例包括乙烯基、烯丙基、1-甲基乙烯基、丁烯基、異-丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-戊烯基、環(huán)戊烯基、1-甲基-環(huán)戊烯基、1-己烯基、3-己烯基、環(huán)己烯基、1-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、環(huán)辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、3-癸烯基、1，3-丁二烯基、1-4，戊二烯基、1，3-環(huán)戊二烯基、1，3-己二烯基、1，4-己二烯基、1，3-環(huán)己二烯基、1，4-環(huán)己二烯基、1，3-環(huán)庚二烯基、1，3，5-環(huán)庚三烯基和1，3，5，7-環(huán)辛四烯基。烯基可以任選被一個或多個如本文定義的任選取代基取代。
本文所用的術(shù)語“炔基”表示由含有至少一個碳-碳三鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴殘基形成的基團，包括如上定義的乙烯型一-、二-或多-不飽和烷基或環(huán)烷基。除非對碳原子數(shù)做出規(guī)定，否則該術(shù)語優(yōu)選指的是C2-20炔基(例如C2-10或C2-6)。實例包括乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基和丁炔基異構(gòu)體和戊炔基異構(gòu)體。炔基可以任選被一個或多個如本文定義的任選取代基取代。
書寫為“[基團]氧基”的術(shù)語是指在通過氧連接時的特定基團，例如術(shù)語“烷氧基”、“烯氧基”、“炔氧基”和“芳基氧基”和“酰氧基”分別表示如上文定義的通過氧連接的烷基、烯基、炔基、芳基和?；?。書寫為“[基團]硫基”的術(shù)語是指在通過硫連接時的特定基團，例如術(shù)語“烷硫基”、“烯硫基”、“炔硫基”和“芳基硫基”分別表示如上文定義的通過硫連接的烷基、烯基、炔基、芳基。
術(shù)語“鹵素”(“鹵代”)表示氟、氯、溴或碘(氟代、氯代、溴代或碘代)。
術(shù)語“芳基”表示芳族烴環(huán)系的任意單、多核、共軛的和稠合的殘基。芳基的實例包括苯基、聯(lián)苯基、三聯(lián)苯基、四聯(lián)苯基、萘基、四氫萘基、蒽基、二氫蒽基、苯并蒽基、二苯并蒽基、菲基、芴基、芘基、idenyl、薁基、基。優(yōu)選的芳基包括苯基和萘基。芳基可以任選被一個或多個如本文定義的任選取代基取代。
術(shù)語“碳環(huán)基”包括任意非芳族的單環(huán)、多環(huán)、稠合或共軛的烴殘基，優(yōu)選C3-20(例如C3-10或C3-8)。環(huán)可以為飽和的，例如環(huán)烷基，或可以帶有一個或多個雙鍵(環(huán)烯基)和/或一個或多個三鍵(環(huán)炔基)。特別優(yōu)選碳環(huán)基為5-6元或9-10元環(huán)系。合適的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基、環(huán)癸基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)辛烯基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)辛四烯基、茚滿基、十氫萘基和茚基。
術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”在單獨或與化合物措詞中使用時包括任意的單環(huán)、多環(huán)、稠合或共軛的烴殘基，優(yōu)選C3-20(例如C3-10或C3-8)，其中一個或多個碳原子被雜原子替代而得到非-芳族殘基。合適的雜原子包括O、N、S、P和Se，特別是O、N和S。如果兩個或更多個碳原子被替代，那么這可以被相同雜原子中的兩個或更多個或不同的雜原子替代。雜環(huán)基可以為飽和的或部分不飽和的，即帶有一個或多個雙鍵。特別優(yōu)選雜環(huán)基為5-6和9-10元雜環(huán)基。雜環(huán)基的合適的實例可以包括吡咯烷基、吡咯啉基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、二氫吲哚基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、硫代嗎啉基、二烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、四氫吡咯基、吡喃基和二氫吡喃基。雜環(huán)基可以任選被取代。
術(shù)語“雜芳基”包括任意的單環(huán)、多環(huán)、稠合或共軛的烴殘基，其中一個或多個碳原子被雜原子替代而得到芳族殘基。優(yōu)選的雜芳基帶有3-20個環(huán)原子，例如3-10個。特別優(yōu)選雜芳基為5-6和9-10元環(huán)系。合適的雜原子包括O、N、S、P和Se，特別是O、N和S。如果兩個或更多個碳原子被替代，那么這可以被相同雜原子中的兩個或更多個或不同的雜原子替代。雜芳基的合適的實例可以包括吡啶基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、呋喃基、苯并噻吩基、異苯并噻吩基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、吲哚基、異吲哚基、吡唑基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、中氮茚基、喹啉基、異喹啉基、酞嗪基、1，5-萘啶基、喹喔啉基(quinozalinyl)、喹唑啉基、喹啉基、唑基、噻唑基、異噻唑基、異唑基、三唑基、二唑基、三唑基、三嗪基和呋咱基。雜芳基可以任選被取代。
術(shù)語“酰基”在單獨或化合物措詞中使用時表示含有部分C＝O(且不為羧酸、酯或酰胺)的基團。優(yōu)選的?；–(O)-R，其中R為氫或烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、碳環(huán)基或雜環(huán)基殘基。?；膶嵗柞；?、直鏈或支鏈烷?；?例如C1-20)，諸如乙?；⒈；⒍□；?、2-甲基丙?；?、戊?；?，2-二甲基丙?；?、己?；?、庚?；⑿刘；?、壬?；⒐秕；⑹货；⑹轷；⑹；?、十四?；?、十五酰基、十六?；?、十七?；⑹缩；?、十九酰基和二十烷?；?；環(huán)烷基羰基諸如環(huán)丙基羰基環(huán)丁基羰基，環(huán)戊基羰基和環(huán)己基羰基；芳?；T如苯甲?；⒓妆锦；洼刘；?；芳烷?；T如苯基烷?；?例如苯基乙酰基、苯基丙?；?、苯基丁酰基、苯基異丁酰基、苯基戊?；捅交乎；?和萘基烷?；?例如萘基乙?；⑤粱；洼粱□；?；芳烯?；T如苯基烯?；?例如苯基丙烯?；?、苯基丁烯?；?、苯基甲基丙烯?；?、苯基戊烯?；捅交合；洼粱；?例如萘基丙烯酰基、萘基丁烯酰基和萘基戊烯?；?；芳基氧基烷酰基，諸如苯氧基乙酰基和苯氧基丙?；?；芳基硫基氨基甲酰基，諸如苯硫基氨基甲?；环蓟胰；T如苯基乙醛?；洼粱胰；环蓟酋；T如苯基磺?；洼粱酋；?；雜環(huán)羰基；雜環(huán)烷?；?，諸如噻吩基乙酰基、噻吩基丙酰基、噻吩基丁?；?、噻吩基戊酰基、噻吩基己?；⑧邕蚧阴；⑧缍蚧阴；退倪蚧阴；?；雜環(huán)烯?；?，諸如雜環(huán)丙烯?；?、雜環(huán)丁烯酰基、雜環(huán)戊烯酰基和雜環(huán)己烯酰基；和雜環(huán)乙醛酰基，諸如噻唑基乙醛酰基和噻吩基乙醛?；?。R殘基可以如本文所述任選被取代。
術(shù)語“氨基”以其在本領(lǐng)域中理解的最廣義在本文使用，并且包括式NRARB的基團，其中RA和RB可以任意獨立地選自氫、烷基、烯基、炔基、芳基、碳環(huán)基、雜芳基、雜環(huán)基、芳烷基和?；?。RA和RB與它們所連接的氮還可以形成單環(huán)或多環(huán)環(huán)系，例如3-10元環(huán)，特別是5-6和9-10元系統(tǒng)。“氨基”的實例包括NH2、NH烷基(例如C1-20烷基)、NH芳基(例如NH苯基)、NH芳烷基(例如NH芐基)、NH?；?例如NHC(O)C1-20烷基、NHC(O)苯基)、N烷基烷基(其中每個烷基，例如C1-20可以相同或不同)和5或6元環(huán)，它們?nèi)芜x含有一個或多個相同或不同的雜原子(例如O、N和S)。
術(shù)語“酰氨基”以其在本領(lǐng)域中理解的最廣義在本文使用，并且包括式C(O)NRARB的基團，其中RA和RB如上述所定義。酰氨基的實例包括C(O)NH2、C(O)NH烷基(例如C1-20烷基)、C(O)NH芳基(例如C(O)NH苯基)、C(O)NH芳烷基(例如C(O)NH芐基)、C(O)NH?；?例如C(O)NHC(O)C1-20烷基、C(O)NHC(O)苯基)、C(O)N烷基烷基(其中每個烷基，例如C1-20可以相同或不同)和5或6元環(huán)，它們?nèi)芜x含有一個或多個相同或不同的雜原子(例如O、N和S)。
術(shù)語“羧基酯”以其在本領(lǐng)域中理解的最廣義在本文使用，并且包括具有式CO2R的基團，其中R可以選自如下基團，包括烷基、烯基、炔基、芳基、碳環(huán)基、雜芳基、雜環(huán)基、芳烷基和?；?。羧基酯的實例包括CO2C1-20烷基、CO2芳基(例如CO2苯基)、CO2芳烷基(例如CO2芐基)。
在本說明書中“任選取代的”意指可以進一步被取代或稠合(以便形成稠合多環(huán)基團)，也可以不被進一步取代或稠合的基團，其帶有一個、兩個、三個或更多個有機和無機基團，包括選自如下的那些基團烷基、烯基、炔基、碳環(huán)基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、?；⒎纪榛?、烷芳基、烷雜環(huán)基、烷雜芳基、烷碳環(huán)基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烯基，鹵代炔基、鹵代芳基、鹵代碳環(huán)基、鹵代雜環(huán)基、鹵代雜芳基、鹵代?；?、鹵代芳基烷基、羥基、羥基烷基、羥基烯基、羥基炔基、羥基碳環(huán)基、羥基芳基、羥基雜環(huán)基、羥基雜芳基、羥基?；?、羥基芳烷基、烷氧基烷基、烷氧基烯基、烷氧基炔基、烷氧基碳環(huán)基、烷氧基芳基、烷氧基雜環(huán)基、烷氧基雜芳基、烷氧基?；?、烷氧基芳烷基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、芳基氧基、碳環(huán)基氧基、芳烷基氧基、雜芳基氧基、雜環(huán)基氧基、酰氧基、鹵代烷氧基、鹵代烯氧基、鹵代炔氧基、鹵代芳基氧基、鹵代碳環(huán)基氧基、鹵代芳烷基氧基、鹵代雜芳基氧基、鹵代雜環(huán)基氧基、鹵代酰氧基、硝基、硝基烷基、硝基烯基、硝基炔基、硝基芳基、硝基雜環(huán)基、硝基雜芳基、硝基碳環(huán)基、硝基?；?、硝基芳烷基、氨基(NH2)、烷基氨基、二烷基氨基、烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、芳烷基氨基、二芳烷基氨基、?；被?、二?；被㈦s環(huán)基氨基、雜芳基氨基、羧基、羧基酯、酰氨基、烷基磺酰氧基、芳基磺酰氧基、烷基磺酰基(sulphenyl)、芳基磺酰基、亞甲二氧基硫基、烷硫基、烯硫基、炔硫基、芳基硫基、芳烷硫基、碳環(huán)基硫基、雜環(huán)基硫基、雜芳基硫基、酰硫基、氰基、硫酸酯和磷酸酯基團。還可以將任選的取代視為意旨，其中鏈或環(huán)上的CH2基團被羰基(C＝O)取代。
優(yōu)選的任選取代基包括烷基(例如C1-6烷基，諸如甲基、乙基、丙基、丁基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基)、羥基烷基(例如羥甲基、羥乙基、羥丙基)、烷氧基烷基(例如甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基等)、烷氧基(例如C1-6烷氧基，諸如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基)、鹵素、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基、羥基、苯基(其自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、芐基(其中芐基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、苯氧基(其中苯基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、芐氧基(其中芐基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、氨基、烷氨基(例如C1-6烷基，諸如甲氨基、乙氨基、丙氨基等)、二烷氨基(例如C1-6烷基，諸如二甲氨基、二乙氨基、二丙氨基)、酰氨基(例如NHC(O)CH3)、苯基氨基(其中苯基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、硝基、甲?；?、-C(O)-烷基(例如C1-6烷基，諸如乙?；?、O-C(O)-烷基(例如C1-6烷基，諸如乙酰氧基)、苯甲?；?其中苯基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)；用C＝O、CO2H、CO2烷基(例如C1-6烷基，諸如甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯)替代CH2、CO2苯基(其中苯基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、CONH2、CONH苯基(其中苯基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、CONH芐基(其中芐基自身可以進一步被例如C1-6烷基、鹵素、羥基羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、氰基、硝基OC(O)C1-6烷基和氨基取代)、CONH烷基(例如C1-6烷基，諸如甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁酰胺)和CONH二烷基(例C1-6烷基)。
優(yōu)選的式(I)的A包括任選取代的5-6元芳基、雜芳基、碳環(huán)基和雜環(huán)基，例如苯基、吡啶基(連接在C2、C3或C4上)、吡嗪基、嘧啶基(連接在C2、C4或C5上)、噠嗪基(連接在C3或C4上)、s-三嗪基(連接在C2、C4或C6上)、as-三嗪基(連接在C3、C5或C6上)、v-三嗪基(連接在C4、C5或C6上)、呋喃基(連接在C2或C3上)、吡咯基(連接在C2或C3上)、噻吩基(連接在C2或C3上)、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己二烯基、吡喃基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、吡咯烷基和吡咯啉基、在優(yōu)選的實施方案中，A為任選取代的5-6元芳基或任選取代的雜芳基，特別是任選取代的苯基或任選取代的吡啶基。
A的特別優(yōu)選的取代基包括烷基、鹵代烷基(例如一-、二-或三氟甲基、一-、二-或三氯甲基和一-、二-、三-、四、五-或六氟乙基和一-、二-、三-、四、五-或六氯乙基)、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、芳基烷基(例如芐基和苯基乙基)、烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷氧基、氨基烷氧基、烷硫基、鹵代烷硫基、羥基烷硫基、氨基烷硫基、硫代烷硫基、氨基、C(O)烷基、OC(O)烷基、芳基(例如苯基)、羧基、羧基酯(例如CO2烷基、CO2芳基)、C(O)芳基、OC(O)芳基、硝基、氰基、雜芳基(例如吡啶基)、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、羥基、硫代、亞甲二氧基、鹵素(例如Cl、Br)和酰氨基。當這類取代基含有“烷基”部分時，那么優(yōu)選的烷基為C1-10烷基，特別是C1-6烷基，諸如甲基、乙基、異-丙基、正-丙基、正-丁基、仲-丁基或叔-丁基。
在一個實施方案中，X為O。在另一個實施方案中，X為NR′。在另一個實施方案中，X為S。特別優(yōu)選X為O。當X為NR′，R′的某些優(yōu)選實例包括氫、C1-10烷基、芐基、苯基乙基、OC(O)C1-10烷基和OC(O)苯基。
在一個特別優(yōu)選的實施方案中，Y為氫。
優(yōu)選的R7和R8包括氫、C1-10烷基和苯基，其中C1-10烷基和苯基可以任選被取代。
R7和R8的特別優(yōu)選的取代基(包括上述優(yōu)選的R7和R8)包括烷基、鹵代烷基(例如一-、二-或三氟甲基、一-、二-或三氯甲基和一-、二-、三-、四、五-或六氟乙基和一-、二-、三-、四、五-或六氯乙基)、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、芳基烷基(例如芐基和苯基乙基)烷氧基、鹵代烷氧基、羥基烷氧基、氨基烷氧基烷硫基、鹵代烷硫基、羥基烷硫基、氨基烷硫基、硫代烷硫基、氨基、C(O)烷基OC(O)烷基、芳基(例如苯基)羧基、羧基酯C(O)芳基OC(O)芳基、硝基、氰基、雜芳基(例如吡啶基)雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、羥基、硫代、亞甲二氧基、鹵素(例如Cl、Br)和酰氨基或一起形成5-6元環(huán)例如(哌啶基、嗎啉基)。當這類取代基含有“烷基”部分時，優(yōu)選的烷基為C1-10烷基，特別是C1-6烷基。特別優(yōu)選R1包括NH2、NHC1-6烷基、N(C1-6烷基)(C1-6烷基)和NHC(O)C1-6烷基，最優(yōu)選NH2。
就R2而言，優(yōu)選的R9和R10包括氫、C1-10烷基、芳基(例如苯基)雜芳基(例如吡啶基)。一個特別優(yōu)選的R2為氰基(CN)。其它優(yōu)選的R2為CO2C1-10烷基(例如CO2Me、CO2Et、CO2Pr、CO2Bu等)和酰氨基，例如CONH2。
合適的R3-R6的實例包括氫、氯、溴、C1-10烷基(包括環(huán)烷基)、C2-10烯基(包括環(huán)烯基)、C2-10炔基(包括環(huán)炔基)、C1-10烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、正-和異-丙氧基和正-、仲-和叔-丁氧基)、苯基、鹵代苯基、羥基苯基、氨基苯基、烷基苯基、羥基、NH2、NHC1-10烷基、NC1-10烷基C1-10烷基(其中烷基各自可以相同或不同)、硝基、鹵代烷基，包括三氟甲基、三氯甲基、?；?例如C(O)C1-10烷基)、酰氧基(例如OC(O)C1-10烷基或OC(O)芳基，諸如OC(O)苯基)、羧基酯(例如CO2C1-10烷基和CO2苯基)、CO2H、酰氨基(例如CONHC1-10烷基)、硝基、氰基、硫代、烷硫基(例如SC1-10烷基)且相鄰的R3-R6中2個形成亞甲二氧基。R3-R6中沒有一個、有一個、兩個、三個或四個可以為氫。在一種優(yōu)選的形式中，R3-R6中的2或3或4個為氫。在一個特別優(yōu)選的實施方案中，R3、R4和R6均為H。
當任意兩個相鄰的R3-R6與它們所連接的原子一起形成3-8元的環(huán)時，該環(huán)可以為碳環(huán)(飽和或部分不飽和的)、雜環(huán)、芳基或雜芳基。在某些優(yōu)選的實施方案中，形成的環(huán)具有5-6個成員。該實施方案的特別優(yōu)選形式為其中R5和R6形成環(huán)。任意兩個相鄰的R3-R6結(jié)合在一起的實例包括-(CH2)n-，其中n為1-7，優(yōu)選1-4，特別是3或4；-O-CH2-O-；O-(CH2)2-O-CH＝CH2-CH2＝CH-；-CH2-NHCH2-；-(CH2)2-NH-CH2-；-CH2-NH-(CH2)2-；-(CH2)2-NH-；-NH-(CH2)2-；-NH-CH＝CH-；-CH＝CH-NH-；-O-CH＝CH-；-CH＝CH-O-；-S-CH＝CH-；-CH＝CH-S-；-N＝CH-CH＝N-O-CH＝CH-CH2-；和-CH2-CH＝CH-O-。如果合適，這類環(huán)中的N原子可以進一步被烷基(例如C1-10)、芳基(例如苯基)、芳基烷基(例如芐基或苯基乙基)、?；?例如C(O)C1-10烷基)羥基烷基(例如C1-10)、鹵代烷基(例如C1-10)、碳環(huán)基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基烷基、碳環(huán)基、雜芳基或雜環(huán)基取代。
可以用作本發(fā)明IRAP抑制劑和/或治療劑的其它化合物進一步描述和/或例舉在WO 02/092594中，為所有目的而將該文獻的全部內(nèi)容引入本文作為參考。
可以通過商業(yè)來源獲得用于本發(fā)明的化合物或可以通過合成有機化學領(lǐng)域中公知的方法制備，例如，參見WO 02/092594。
因此，為了制備X為O的化合物，可以按照如下的一般方案1使適當取代的苯酚化合物與合適的醛和丙二腈在有堿，諸如哌啶或N，N-二異丙基乙胺存在下反應(yīng)
方案1或者，可以在有堿存在下使醛與丙二腈反應(yīng)并且使所得亞芳基中間體與合適的酚反應(yīng)。
在一種備選的方法中，可以按照如下方案2中所述使適當取代的鄰-芳酰基苯酚、苯胺或苯硫醇與丙二腈(或合適的氰基乙酸酯、氰基乙酰胺或酰基乙腈)反應(yīng)而獲得相應(yīng)的4H-色烯、1，4-二氫喹啉或4H-硫代色烯(其中P為H或適當時為保護基)。
方案2還可以通過還原適當取代的或被保護的喹啉，制備適合的二氫喹啉化合物。
可以使用本領(lǐng)域中公知的化學轉(zhuǎn)化，例如，如ComprehensiveOrganic Transformation，A Guide to Functional Group Preparations，R.C.Larock，VCH，1989和Advanced Organic Chemistry，Reactions，Mechanisms和Structure，J.March，3rdEdition，1985或4thEdition，1992(將所述文獻的全部內(nèi)容引入本文作為參考)中所述，將胺轉(zhuǎn)化成所需的基團，來制備式(I)的化合物，其中R1不為NH2。因此，用合適的酰基化試劑，諸如羧酸、酸酐或氯化物在有合適的堿或催化劑存在下處理胺(NH2)而得到式(I)的化合物，其中R1為NHCOR8?？梢酝ㄟ^用合適的烷基或芳基鹵處理-NH2來制備烷基和芳基胺類?？梢酝ㄟ^用合適的含羰基的化合物，諸如醛或酮，按照現(xiàn)有技術(shù)公知的方法處理胺基(NH2)形成亞胺類。
類似地，可以通過本領(lǐng)域中公知的化學轉(zhuǎn)化來制備化合物，其中R2不為CN，即為羧酸、酯類、酰胺類、酸酐類和酮類，特別參見Larock，文獻同上，第9章，pp 963-995?；蛘撸线m的酚、醛和合適的氰基乙酸酯、氰基乙酰胺或酰基乙腈反應(yīng)得到化合物，其中R2為CO2R9、C(O)NR9R10、C(O)R9和C(O)O(O)R9?？梢酝ㄟ^用DDQ處理苯并吡喃且隨后用CuBr·DMS和烷基鋰化合物處理中間體制備化合物，其中Y為烷基。
將認識到在制備本發(fā)明關(guān)注的化合物的過程中，保護某些官能團可能是必不可少的或需要的，這些官能團可以是反應(yīng)性的或?qū)Σ扇〉姆磻?yīng)或轉(zhuǎn)化條件敏感(例如OH、NH2、CO2H、SH、C＝O)。用于這類官能團的合適的保護基為本領(lǐng)域中公知的并且可以按照標準實踐使用。這類保護基及其裝配和隨后在適當階段除去的方法描述在Protective Groups in Organic Chemistry，3rdEdition，T.W.Greene和P.G.Wutz，John Wiley和Sons，1999中，將該文獻的全部內(nèi)容引入本文作為參考。
可以在體外試驗中最初測定本文披露的化合物的IRAP抑制活性水平，所述的體外試驗通過評價IRAP氨肽酶底物諸如Leu-β-萘基酰胺或Leu-4-甲基香豆基-7-酰胺的裂解或降解速率或程度，來測量測試化合物抑制IRAP的氨肽酶活性的能力。然后可以與對照試驗進行比較，在對照試驗中在沒有化合物存在下測定裂解速率或程度?？梢詫⒃谟谢衔锎嬖谙碌孜锪呀獾乃俾驶虺潭鹊谋容^性的下降作為化合物抑制作用的度量。
因此，還提供了測定化合物的IRAP抑制活性的方法，該方法包括(a)溫育IRAP、IRAP底物和如本文所述的化合物；和(b)評價底物裂解的速率或程度；其中在與對照比較時，底物裂解速率或程度的下降或抑制表示化合物的IRAP抑制活性。
牽涉或涉及不需要或過度IRAP氨肽酶活性的障礙和病況可以包括與阿爾茨海默氏病和其它形式的癡呆和記憶喪失相關(guān)的記憶和學習障礙(它們與年齡相關(guān)，因頭部創(chuàng)傷、低氧損傷、手術(shù)、腦梗死或化學方式，諸如神經(jīng)毒素而誘發(fā))。還應(yīng)理解本發(fā)明的化合物也可以適用于增強或改善正常個體，即那些沒有患認知病理學情況，諸如上述那些的個體的記憶或?qū)W習。
記憶或?qū)W習(空間學習)增強是指受試者記憶或?qū)W習信息的能力提高并且可以通過充分確立的試驗測定。如果合適，將與在給予化合物前獲得的評分/結(jié)果比較的在這類試驗中獲得的“評分”或結(jié)果的正面改善認為為記憶或?qū)W習的增強。
對實驗用動物存在許多眾所周知和確立的試驗并且可以使用它們測試大鼠和小鼠，包括Barnes迷宮范例(Greferath等2000)、Barnes圓形迷宮試驗(Lee等，2004)或其改進、Y迷宮試驗或被動回避試驗。現(xiàn)將它們簡述如下。
1.Barnes迷宮給正常雄性Sprague-Dawley大鼠的側(cè)腦室中植入套管并且讓其恢復至少3天。為了進行Barnes圓形迷宮試驗，迷宮包含直徑為1.2m的升高的可旋轉(zhuǎn)的白色圓形平臺，其外周均勻間隔18個孔(直徑0.09m)。包含內(nèi)徑為0.16m寬、0.29m長和0.09m深的黑箱的逃逸通道直接位于周邊孔的下面。將視覺提示置于迷宮周圍的不同位置上。
對每次試驗而言，將動物放置在開始室下的迷宮平臺上，其為位于平臺中心的圓柱形室，并且停留20秒。在20秒的定向障礙期后，升高室。然后允許動物在240秒內(nèi)發(fā)現(xiàn)和使用逃逸通道。每只大鼠在10天內(nèi)每天接受三次連續(xù)的試驗。在測試期的第一天，將每只大鼠直接放入逃逸通道2分鐘熟悉期。然后將大鼠放回到它的籠中約1分鐘，此后給動物注射測試化合物或人工腦脊液，且然后放回到它的籠中另外5分鐘。隨后進行三次連續(xù)試驗，在其居留籠中的每次試驗之間有2分鐘的恢復期。在隨后的天(第2-8天)，從該方案中取消三次試驗前的熟悉期。
通過長期內(nèi)置導管經(jīng)腦室內(nèi)(icv)給予動物IRAP抑制劑。在測試的第一天在第一次試驗前5分鐘給予這些化合物。
2.Y迷宮Y-迷宮試驗為另一種測定空間記憶行為表現(xiàn)的行為范例并且利用了嚙齒動物探查新環(huán)境的天然本能。Y迷宮由三個相同的小通道(30cm長、10cm寬和17cm高)與通過120°角分隔的三個臂組成。為了將應(yīng)激減小至最低限度，將迷宮置于暗淡光照下的聲音衰減的室內(nèi)，迷宮地板上覆蓋有鋸屑。每次試驗后，將鋸屑混合以便消除嗅覺提示。就空間定位而言，將視覺提示置于測試室的壁上。
測試由兩次試驗組成，其通過被稱作試驗間間隔的時間間隔分開。在習得試驗過程中，將動物放在一個臂的遠端，其頭朝向遠離迷宮的中心。允許動物僅訪問迷宮的兩個可進入的臂3分鐘。在習得試驗結(jié)束時，再將動物放入其籠中持續(xù)試驗間間隔。在記憶力試驗過程中，動物進入所有的三個臂5分鐘。記錄進入的第一個臂(新的與熟悉的)、進入的次數(shù)和在新臂中花費的時間期限。
將習得期與記憶力期分開的較短試驗間間隔(2小時)能夠使遺忘效應(yīng)得到檢測。對照動物仍然記住了新臂的位置并且優(yōu)先在該臂中花費了更多時間(45-50％的時間)。較長的試驗間間隔(例如6小時)導致動物不能記住新臂的位置且由此在所有三個臂中花費了等量的時間。
動物經(jīng)手術(shù)在背側(cè)第三腦室中被植入輸注套管。將每只動物測試兩次，并且大于6小時的試驗間間隔可以適合于測試試驗化合物的促進記憶特性。通過長期內(nèi)置導管經(jīng)腦室內(nèi)對動物給予IRAP抑制劑。在第一次習得試驗前5分鐘給予這些化合物。然后將這些動物放回到其籠中至少6小時且然后再次進行測試。在新臂中花費的時間為測試化合物促進記憶特性的度量。
3.被動回避。
被動回避試驗可以用于測試IRAP抑制劑對遺忘癥動物厭惡性條件形為的作用。被動回避任務(wù)包括確定記憶保留和恢復的促進的厭惡性條件形為。該測試可以在儀器中進行，所述的儀器由通過閘刀門分隔開的光照和暗室組成。暗室的地板含有帶電的網(wǎng)格。將被動回避任務(wù)分成兩次試驗，其間隔24-48小時試驗間間隔。在第一次被稱作習得試驗的試驗過程中，將動物放入光照的室內(nèi)并且一旦動物進入暗室，就關(guān)閉閘刀門。在暗室內(nèi)，動物通過網(wǎng)格地板接受低水平的電擊(0.5mA，2秒)。然后將動物放回到其籠中24小時或48小時，此后進行測試。將再進入暗室的潛伏期作為動物記住厭惡性刺激的能力的度量。
動物經(jīng)手術(shù)在背側(cè)第三腦室中被植入輸注套管。將每只動物測試兩次，并且24小時和48小時的試驗間間隔可以適合于測試試驗化合物的促進記憶特性。通過長期內(nèi)置導管經(jīng)腦室內(nèi)給予動物IRAP抑制劑。在習得試驗前5分鐘給予這些化合物。然后將這些動物放回到其籠中24小時和48小時且然后再次進行測試。進入暗室中的潛伏期為測試化合物促進記憶特性的度量。
4.年齡-誘導的記憶缺失模型充分記錄老齡大鼠的空間學習損害并且可在Barnes迷宮范例中檢測這種缺失(Greferath等，2000)?？梢栽贐arnes迷宮范例中測試IRAP抑制劑對老齡化誘導的學習缺失的作用。
就藥物治療而言，給動物植入Alzet微型泵(經(jīng)皮下固定在頸部區(qū))，它可將測試化合物長期遞送入腦室。
可以通過許多充分確立的神經(jīng)心理試驗中的任意一種，諸如California言語學習試驗、Wechsler記憶等級-III，Hopkins言語學習試驗-RevisedTM、Rey聽覺言語學習試驗和Rey-Osterrieth復雜圖形設(shè)計試驗，測試記憶力和學習。
其它障礙和病況包括延遲分娩和延遲和/或減少的泌乳以及葡萄糖穩(wěn)態(tài)的失調(diào)，包括血糖過多和糖尿病。調(diào)節(jié)葡萄糖攝取或穩(wěn)態(tài)的能力可以應(yīng)用于治療廣泛地多種疾病。導致葡萄糖攝取或穩(wěn)態(tài)失調(diào)的胰島素抗性可以在糖尿病、高血壓和AIDS中產(chǎn)生，并且本文關(guān)注的化合物可以適用于其治療，特別是，與糖尿病相關(guān)的臨床后遺癥，諸如糖尿病性視網(wǎng)膜病、肥胖、腎臟疾病、循環(huán)問題和代謝和心臟病。
可以測定胰島素反應(yīng)性3T3脂肪細胞中的葡萄糖攝取并且因此該方法為眾所周知的。簡言之，在沒有和有增加劑量的胰島素(0-100nmol)存在下與化合物一起孵育細胞。孵育培養(yǎng)基還含有50μM 2-脫氧-D-[2，6-3H]葡萄糖并且在37℃下將孵育進行20-60分鐘。在孵育期結(jié)束時，洗滌并且裂解細胞，并且使用液體閃爍分析儀測定細胞攝取的2-脫氧-D-[2，6-3H]葡萄糖水平。
還在動物模型中測定了抗糖尿病的活性。
(i)2型糖尿病可以將2型糖尿病的動物模型，包括Zucker糖尿病型肥胖大鼠(ZDF)和ob/ob小鼠用于測試化合物促進葡萄糖穩(wěn)態(tài)的能力。飼喂動物或使其禁食并且給予腹膜內(nèi)(IP)注射化合物。通過尾部放血收集血樣并且以不同的時間間隔測定葡萄糖水平。
可以通過測定特異性糖化蛋白，包括血清中血紅蛋白和果糖胺的水平，研究長期IRAP抑制劑治療對2型糖尿病動物模型中的葡萄糖穩(wěn)態(tài)的作用。IRAP抑制劑的長期遞送通過滲透微型泵(劑量0-1mol)進行并且通過尾部放血收集血樣并且測定葡萄糖水平。在處死時，使用標準操作步驟測定糖基化血紅蛋白和果糖胺的水平。
(ii)1型糖尿病鏈脲佐菌素(STZ)處理的動物為1型糖尿病的模型。通過尾部放血收集血樣并且以不同的時間間隔測定葡萄糖水平。
通過測定特異性糖化蛋白，包括血清中的血紅蛋白和果糖胺的水平，研究長期IRAP抑制劑治療對STZ大鼠中的葡萄糖穩(wěn)態(tài)的作用。IRAP抑制劑的長期遞送通過滲透微型泵進行并且通過在0-16周之間尾部放血采集血樣并且測定葡萄糖水平。在處死時，使用標準操作步驟測定糖基化血紅蛋白和果糖胺的水平。
其它障礙可以包括其它神經(jīng)變性障礙，諸如運動神經(jīng)元疾病、進行性脊髓性肌萎縮、CNS障礙，特別是那些涉及運動和感覺神經(jīng)元的障礙或因中風或創(chuàng)傷導致的障礙；心血管系統(tǒng)的障礙，包括心臟肥厚、充血性心力衰竭、高血壓和動脈粥樣硬化、發(fā)育和/或生長的障礙、生殖系統(tǒng)或與妊娠相關(guān)的障礙，包括延遲分娩和/或泌乳減少和某些癌癥。
治療的受試者包括哺乳動物受試者人、非-靈長類、家畜動物(包括牛、馬、綿羊、豬和山羊)、陪伴動物(包括狗、貓、家兔、豚鼠)和俘獲的野生動物。還關(guān)注實驗用動物，諸如家兔、小鼠、大鼠、豚鼠和倉鼠，因為它們可以提供便利的測試系統(tǒng)。在本發(fā)明的某些實施方案中，還關(guān)注非-哺乳動物物種，諸如禽類、兩棲動物類和魚。
對受試者給予抑制IRAP或治療有效量的本發(fā)明化合物。IRAP抑制量為至少部分與IRAP發(fā)生相互作用或破壞IRAP活性的量。本文所用的IRAP活性包括IRAP與內(nèi)源性配體的功能相互作用，特別是其中功能相互作用直接或間接促進受試者記憶和/或?qū)W習能力喪失、破壞葡萄糖穩(wěn)態(tài)或延遲分娩或泌乳。治療有效量用以包括當按照所需給藥方案給藥時，至少部分獲得如下情況中的一種或多種的所需治療或預防作用的用量緩解所治療的具體障礙或疾病的癥狀、預防或延遲其發(fā)作；抑制其發(fā)展；或使其發(fā)作或發(fā)展部分或共同停止或逆轉(zhuǎn)。
可以由主治醫(yī)師確定合適的劑量和給藥方案并且可以取決于所治療的特定疾病、疾病的嚴重程度以及受試者的一般年齡、健康和體重。
可以以單劑量或一系列劑量給予活性組分。盡管能夠單獨給予活性組分，但是優(yōu)選作為組合物提供它，優(yōu)選用一種或多種藥學上可接受的助劑制成藥物組合物。因此，本發(fā)明還涉及式(I)的化合物或藥學上可接受的鹽或前體藥物在制備用于抑制受試者IRAP活性的藥物中的應(yīng)用。
這類組合物的制劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，例如，參見Remington′s Pharmaceutical Sciences，18thEdition，Mack Publishing，1990。組合物可以含有任意合適的載體、稀釋劑或賦形劑。它們包括所有常用的溶劑、分散介質(zhì)、填充劑、固體載體、包衣、抗真菌劑和抗菌劑、皮膚滲透劑、表面活性劑、等滲劑和吸收劑等。可以理解本發(fā)明的組合物還可以包括其它補充生理活性劑。
載體必須是藥學上可接受的，其含義在于與組合物中的其它組分相容并且對受試者無害。組合物包括那些適合于口服、直腸、鼻部、局部(包括皮膚、口含和舌下)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和皮內(nèi))給藥的組合物。可以將組合物便利地制成單位劑型并且可以通過藥劑學領(lǐng)域眾所周知的任何方法制備。這類方法包括將活性組分與構(gòu)成一種或多種輔助組分的載體混合的步驟。一般而言，通過均勻和緊密混合活性組分與液體載體或細粉碎的固體載體或它們兩者，且然后如果必要，使產(chǎn)物成形來制備組合物。
可以將適合于口服給藥的本發(fā)明組合物制成分離的單位，諸如各自含有預定量活性組分的膠囊、小藥囊或片劑；粉末或顆粒；在含水或非-水液體中的溶液或混懸液；或水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。
可以通過任選與一種或多種輔助組分壓制或模制制備片劑?？梢酝ㄟ^在合適的機器中壓制自由流動形式的任選混合有粘合劑(例如惰性稀釋劑)、防腐劑、崩解劑(例如羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑的活性組分，諸如粉末或顆粒，制備壓制片?？梢酝ㄟ^在合適的機器中模制用惰性液體稀釋劑濕潤的粉狀化合物的混合物制備模制片?？梢匀芜x對片劑包衣或刻痕并且可以使用例如不同比例的羥丙基甲基纖維素配制，以便提供緩釋或控釋的活性組分，以提供所需釋放特性?？梢匀芜x給片劑包腸溶衣，以便提供在腸部分，而不是在胃中的釋放。
適合于在口腔中局部給藥的組合物包括包含在矯味基質(zhì)，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠中的活性組分的錠劑；包含在惰性基質(zhì)，諸如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠中的活性組分的軟錠劑；和包含在合適的液體載體中的活性組分中的漱口劑類。
適合于對皮膚局部給藥的組合物可以包含溶于或懸浮于任意合適載體或基質(zhì)中的化合物，并且可以為洗劑、凝膠、霜劑、糊劑、軟膏劑等的形式。合適的載體包括礦物油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蠟、單硬脂酸山梨坦、聚山梨酯60、鯨蠟基酯蠟、十八醇十六醇混合物(cetearyl alcohol)、2-辛基十二醇、芐醇和水。透皮貼劑也可以用于給予本發(fā)明的化合物。
可以將直腸給藥用組合物制成含有合適的基質(zhì)的栓劑，所述的合適的基質(zhì)包含，例如可可脂、甘油、明膠或聚乙二醇。
可以將適合于陰道給藥的組合物制成陰道栓劑、陰道塞、霜劑、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧制劑，它們除含有活性組分外，還可以含有諸如本領(lǐng)域中已知適當?shù)倪@類載體。
適合于腸胃外(例如皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或腦室內(nèi))給藥的組合物可以包括含水和非-水等滲無菌注射溶液，其可以含有抗氧化劑、緩沖劑、制菌劑和使組合物與預想的接受者血液等滲的溶質(zhì)；和可以包括懸浮劑和增稠劑的含水和非-水無菌混懸液?？梢詫⒔M合物在單位劑量或多-劑量密封容器，例如安瓿和小瓶中提供，并且可以儲存在僅需要在使用前即刻添加無菌液體載體，例如注射用水的冷凍干燥(凍干)條件下?？梢杂缮鲜鲱愋偷臒o菌粉末、顆粒和片劑制備臨時注射溶液和混懸液。
優(yōu)選的單位劑量組合物為那些含有如上文所述的每日劑量或單位、每日亞劑量或其合適的部分的活性組分的組合物。
應(yīng)理解除上述具體提到的活性組分外，本發(fā)明的組合物還可以包括本領(lǐng)域中常用的與所討論的組合物類型有關(guān)的其它試劑，例如，那些適合于口服給藥的組合物可以包括諸如粘合劑、增甜劑、增稠劑、矯味劑、崩解劑、包衣劑、防腐劑、潤滑劑和/或延時劑這類其它試劑。合適的增甜劑包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿司帕坦或糖精。合適的崩解劑包括玉米淀粉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、黃原膠、膨潤土、藻酸或瓊脂。合適的矯味劑包括薄荷油、冬青油、櫻桃、橙或覆盆子矯味劑。合適的包衣劑包括丙烯酸和/或甲基丙烯酸和/或其酯類的聚合物或共聚物、蠟、脂肪醇類、玉米醇溶蛋白、蟲膠或谷蛋白。合適的防腐劑包括苯甲酸鈉、維生素E、α生育酚、抗壞血酸、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯或亞硫酸氫鈉。合適的潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸、油酸鈉、氯化鈉或滑石粉。合適的延時劑包括單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
本發(fā)明還涉及本文所述化合物的前體藥物。為本文所述化合物的前體藥物的任意化合物均在本發(fā)明的范圍和實質(zhì)內(nèi)。術(shù)語“前體藥物”以其最廣泛的含義使用并且包括在體內(nèi)通過酶促或水解方式轉(zhuǎn)化成本發(fā)明化合物的那些衍生物。這類衍生物對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說可輕易產(chǎn)生并且包括例如游離硫氫基或羥基被轉(zhuǎn)化成酯的化合物，諸如乙酸酯，或游離氨基被轉(zhuǎn)化成酰胺的化合物。本發(fā)明化合物的?；?，例如制備酯和酰胺前體藥物的操作步驟為本領(lǐng)域眾所周知并且可以包括用合適的羧酸、酸酐或氯化物在有合適的催化劑或堿存在下處理所述化合物。用于選擇和制備合適的前體藥物的其它常規(guī)操作步驟為本領(lǐng)域中公知的并且描述在下列文獻中例如WO 00/23419；Design ofProdrugs，Hans Bundgaard，Ed.，Elsevier Science Publishers，1985；和The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action，Chapter 8，pp352-401，Academic press，Inc.，1992，將這些文獻的內(nèi)容引入本文作為參考。
式(I)化合物的合適的藥學上可接受的鹽包括，但不限于藥學上可接受的無機酸的鹽，所述的無機酸諸如鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氫溴酸；或藥學上可接受的有機酸的鹽，所述的有機酸諸如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、富馬酸、馬來酸、檸檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、天冬氨酸、谷氨酸、依地酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、月桂酸、泛酸、單寧酸、抗壞血酸和戊酸。堿鹽包括，但不限于用藥學上可接受的陽離子，諸如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、銨和烷基銨形成的鹽?？梢杂萌缦逻@類試劑使含堿性氮的基團季銨化諸如低級烷基鹵，諸如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯類，如硫酸二甲酯和硫酸二乙酯等。
本發(fā)明的化合物可以為游離化合物或溶劑合物的晶型(例如水的溶劑合物，即水合物，或常用的有機溶劑，諸如醇類的溶劑合物)并且認為這兩類形式均在本發(fā)明的范圍內(nèi)。溶劑化方法一般為本領(lǐng)域中公知的。
如果合適，也關(guān)注本文所述化合物的互變異構(gòu)形式，諸如酮-烯醇互變異構(gòu)體。
還將認識到，用于本發(fā)明的某些化合物可以具有不對稱中心并且由此能夠以一種以上立體異構(gòu)形式存在。當這些化合物具有至少2個手性中心時，它們可以作為非對映異構(gòu)體存在。本發(fā)明由此還涉及在一個或多個不對稱中心上的基本上純異構(gòu)形式的化合物，例如具有大于約90％對映體過量，諸如約95％或97％對映體過量或大于99％對映體過量的對映體及其混合物，包括外消旋混合物?？梢酝ㄟ^不對稱合成，例如使用手性中間體制備這類異構(gòu)體，或可以通過常規(guī)方法，例如色譜法或使用拆分試劑拆分混合物。
本發(fā)明的化合物還可以用于治療非人的受試者且由此可以制成獸藥組合物?？梢酝ㄟ^任意合適的本領(lǐng)域公知的方式制備它們。這類組合物的實例包括那些適合于如下情況的組合物(a)口服給藥、外用(例如獸用頓服藥，包括含水和非水溶液或混懸液)、片劑、大丸劑、粉末、顆粒、與食物混合的丸粒、涂敷在舌上的糊劑；(b)腸胃外給藥，例如作為無菌溶液或混懸液的皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或腦室內(nèi)注射劑；(c)局部使用，例如霜劑、軟膏劑、凝膠、洗劑等。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解本文所述的本發(fā)明易于進行具體描述的那些以外的變型和修改。應(yīng)理解本發(fā)明包括所有這類落在本發(fā)明的范圍和實質(zhì)內(nèi)的變型和修改。本發(fā)明還包括本說明書中涉及或顯示的所有步驟、特征、組合物和化合物，單獨地或共同地，和所述步驟或特征中的任意兩種或更多種的任意和所有組合。
提供下列實施例的目的在于舉例說明本發(fā)明的某些實施方案，不用來限制上文所述的一般性。
實施例實施例1篩選IRAP抑制劑的體外試驗將體外酶促試驗用于篩選抑制IRAP活性的化合物。本試驗使用氨肽酶底物(亮氨酸4-甲基香豆基-7-酰胺)、含有IRAP的物質(zhì)的來源和候選抑制劑。
1.含IRAP的物質(zhì)的來源含IRAP的物質(zhì)的可能來源包括表達可察覺量的重組IRAP的細胞系或生物組織。表達編碼IRAP的轉(zhuǎn)染基因的原核或真核細胞代表了重組來源。
2.試驗化合物試驗化合物獲自Specs，Delftechpark 30，2628 XH Delft，荷蘭。還按照本文所述的方法學，由間苯二酚、吡啶3-甲醛和氰基乙酸乙酯制備化合物1。
3.監(jiān)測有試驗物質(zhì)存在下的IRAP的酶促活性將含IRAP的物質(zhì)與合成的氨肽酶底物，諸如Leu-MCA(亮氨酸4-甲基香豆基-7-酰胺)和試驗物質(zhì)一起溫育。將合成底物的降解速率的抑制作為試驗物質(zhì)的抑制作用的度量。
使用用含編碼全長人IRAP的cDNA的真核表達載體pcDNA-3轉(zhuǎn)染的HEK293細胞，作為重組IRAP的來源。該檢測系統(tǒng)包括測定IRAP對Leu-MCA的水解速率。通過使用為特定目的設(shè)計的熒光計記錄熒光增加(在370nm下激發(fā)，在460nm下發(fā)射)，監(jiān)測通過熒光發(fā)生性產(chǎn)物的釋放而定量的Leu-MCA的水解速率。將候選試驗化合物加入到檢測系統(tǒng)中并且將它們對Leu-MCA水解的作用確定為其抑制IRAP活性的直接指示物。結(jié)果如表1中所示。
表1

實施例2在健忘癥動物模型中篩選具有抗遺忘特性的化合物的體內(nèi)試驗1東莨菪堿-誘發(fā)的記憶缺失模型毒蕈堿受體拮抗劑東莨菪堿已經(jīng)用于誘發(fā)大鼠和小鼠中的健忘癥并且在許多記憶和學習的行為范例中得到證實。已經(jīng)顯示該化合物損傷短程記憶。在抑制性回避范例中測試了IRAP抑制劑化合物1對東莨菪堿-誘發(fā)的健忘癥的作用。
抑制性回避箱由兩個室，即一個較小的光照室和一個較大的暗室構(gòu)成并且測試包括兩次試驗。第一次訓練試驗包括將大鼠放入光照室內(nèi)面向壁，并且一旦它返回到暗室末端并且回轉(zhuǎn)，就給予2秒0.6mA的電擊，且使動物留在暗室內(nèi)總計15秒，此后將它們放回到其居留的籠中。24小時間隔后，再次測試動物并且進入暗室的潛伏期為動物記住厭惡性刺激的能力的度量。為了測試IRAP抑制劑的作用，在行為實驗前1周大鼠側(cè)腦室被植入長期內(nèi)置的套管。在測試當天，在訓練試驗前15分鐘，給大鼠注射溶于2ul 0.9％鹽水中的70nmol氫溴酸東莨菪堿或0.9％鹽水，此后將它們放置在抑制性回避箱內(nèi)以便進行訓練試驗。在訓練試驗后即刻給大鼠注射溶于2ul 10％ DMSO中的0.2或2nmol化合物1(來自實施例1)或介質(zhì)對照品。然后將大鼠放回到其居留的籠中并且在24小時后在恢復試驗中測試。在東莨菪堿處理后給予0.2或2nmol化合物1的大鼠與用東莨菪堿，隨后用介質(zhì)處理的大鼠組相比，表現(xiàn)出進入暗室的潛伏期增加(附圖1)。兩種劑量的化合物1均減弱了由東莨菪堿處理誘發(fā)的記憶缺失，從而將記憶力恢復到了對照組的水平(附圖1)。
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權(quán)利要求
1.一種抑制IRAP活性的方法，該方法包括使IRAP接觸抑制量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物 其中A為芳基、雜芳基、碳環(huán)基或雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；X為O、NR’或S，其中R’為氫、任選取代的烷基、任選取代的烯基、任選取代的炔基、任選取代的芳基、任選取代的?；?、任選取代的雜芳基、任選取代的碳環(huán)基或任選取代的雜環(huán)基；R1為NR7R8、NHCOR8、N(COR8)2、N(COR7)(COR8)、N＝CHOR8或N＝CHR8，其中R7和R8獨立地選自H、任選取代的烷基、任選取代的芳基，或R7和R8與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8元的環(huán)；R2為CN、CO2R9、C(O)O(O)R9、C(O)R9或C(O)NR9R10，其中R9和R10獨立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、碳環(huán)基、雜環(huán)基，其各自可以任選被取代，和氫，或R9和R10與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8元的環(huán)；R3-R6獨立地選自氫、鹵素、硝基、氰基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、羥基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、炔氧基、芳基氧基、雜芳基氧基、雜環(huán)基氧基、氨基、酰基、酰氧基、羧基、羧基酯、亞甲二氧基、酰氨基、硫代、烷硫基、烯硫基、炔硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、碳環(huán)基硫基、酰硫基和疊氮基，如果合適，其各自可以任選被取代，或任意兩個相鄰的R3-R6與它們所連接的原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；并且Y為氫或C1-10烷基。
2.權(quán)利要求1的方法，其中抑制受試者的IRAP。
3.一種治療需要治療的受試者中涉及IRAP活性的疾病或病況的方法，該方法包括給予有效量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物 其中A為芳基、雜芳基、碳環(huán)基或雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；X為O、NR’或S，其中R’為氫、任選取代的烷基、任選取代的烯基、任選取代的炔基、任選取代的芳基、任選取代的酰基、任選取代的雜芳基、任選取代的碳環(huán)基或任選取代的雜環(huán)基；R1為NR7R8、NHCOR8、N(COR8)2、N(COR7)(COR8)、N＝CHOR8或N＝CHR8，其中R7和R8獨立地選自H、任選取代的烷基、任選取代的芳基，或R7和R8與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；R2為CN、CO2R9、C(O)O(O)R9、C(O)R9或C(O)NR9R10，其中R9和R10獨立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、碳環(huán)基、雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；和氫，或R9和R10與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；R3-R6獨立地選自氫、鹵素、硝基、氰基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、羥基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、炔氧基、芳基氧基、雜芳基氧基、雜環(huán)基氧基、氨基、?；?、酰氧基、羧基、羧基酯、亞甲二氧基、酰氨基、硫代、烷硫基、烯硫基、炔硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、碳環(huán)基硫基、酰硫基和疊氮基，如果合適，其各自可以任選被取代，或任意兩個相鄰的R3-R6與它們所連接的原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；并且Y為氫或C1-10烷基。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述的疾病或障礙為葡萄糖穩(wěn)態(tài)的障礙或記憶喪失或損害。
5.權(quán)利要求4的方法，其中所述的疾病或障礙為I型糖尿病、II型糖尿病或血糖過多。
6.權(quán)利要求3的方法，其中A為芳基或雜芳基。
7.權(quán)利要求3的方法，其中A為5-6元的。
8.權(quán)利要求7的方法，其中A為任選取代的5-6元芳基或雜芳基。
9.權(quán)利要求8的方法，其中A為任選取代的苯基或吡啶基。
10.權(quán)利要求3的方法，其中X為O。
11.權(quán)利要求3的方法，其中Y為氫。
12.權(quán)利要求3的方法，其中R1為NR7R8。
13.權(quán)利要求12的方法，其中R1為NH2。
14.權(quán)利要求3的方法，其中R2為CN、CO2R9或C(O)NR9R10或C(O)R9。
15.權(quán)利要求3的方法，其中R3-R6選自H、OH、CN、鹵素、C1-10烷基、C2-10烯基，C1-10烷氧基、苯基、鹵代苯基、羥基苯基、氨基苯基、烷基苯基、NH2、NHC1-10烷基、NC1-10烷基C1-10烷基、NO2、+NO2H、鹵代烷基、?；ⅤＱ趸然?、CO2H、酰氨基、硫代、烷硫基且相鄰R3-R6中的2個形成亞甲二氧基。
16.權(quán)利要求3的方法，其中R3、R4和R6均為氫。
17.權(quán)利要求15的方法，其中R5選自O(shè)H、CN、鹵素、C1-10烷基、NO2、+NO2H、NH2、NHC1-10烷基、NC1-10烷基C1-10烷基。
18.一種增強受試者記憶和/或?qū)W習的方法，該方法包括對所述的受試者給予有效量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的步驟 其中A為芳基、雜芳基、碳環(huán)基或雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；X為O、NR’或S，其中R’為氫、任選取代的烷基、任選取代的烯基、任選取代的炔基、任選取代的芳基、任選取代的酰基、任選取代的雜芳基、任選取代的碳環(huán)基或任選取代的雜環(huán)基；R1為NR7R8、NHCOR8、N(COR8)2、N(COR7)(COR8)、N＝CHOR8或N＝CHR8，其中R7和R8獨立地選自H、任選取代的烷基、任選取代的芳基，或R7和R8與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；R2為CN、CO2R9、C(O)O(O)R9、C(O)R9或C(O)NR9R10，其中R9和R10獨立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、碳環(huán)基、雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；和氫，或R9和R10與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；R3-R6獨立地選自氫、鹵素、硝基、氰基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、羥基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、炔氧基、芳基氧基、雜芳基氧基、雜環(huán)基氧基、氨基、?；ⅤＱ趸?、羧基、羧基酯、亞甲二氧基、酰氨基、硫代、烷硫基、烯硫基、炔硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、碳環(huán)基硫基、酰硫基和疊氮基，如果合適，其各自可以任選被取代，或任意兩個相鄰的R3-R6與它們所連接的原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；并且Y為氫或C1-10烷基。
19.權(quán)利要求18的方法，其中A為芳基或雜芳基。
20.權(quán)利要求18的方法，其中A為5-6-元的。
21.權(quán)利要求20的方法，其中A為任選取代的5-6-元芳基或雜芳基。
22.權(quán)利要求21的方法，其中A為任選取代的苯基或吡啶基。
23.權(quán)利要求18的方法，其中X為O。
24.權(quán)利要求18的方法，其中Y為氫。
25.權(quán)利要求18的方法，其中R1為NR7R8。
26.權(quán)利要求25的方法，其中R1為NH2。
27.權(quán)利要求18的方法，其中R2為CN、CO2R9或C(O)NR9R10或C(O)R9。
28.權(quán)利要求18的方法，其中R3-R6選自H、OH、CN、鹵素、C1-10烷基、C2-10烯基，C1-10烷氧基、苯基、鹵代苯基、羥基苯基、氨基苯基、烷基苯基、NH2、NHC1-10烷基、NC1-10烷基C1-10烷基、NO2、+NO2H、鹵代烷基、?；?、酰氧基羧基酯、CO2H、酰氨基、硫代、烷硫基且相鄰R3-R6中的2個形成亞甲二氧基。
29.權(quán)利要求18的方法，其中R3、R4和R6均為氫。
30.權(quán)利要求28的方法，其中R3選自O(shè)H、CN、鹵素、C1-10烷基、NO2、+NO2H、NH2、NHC1-10烷基和NC1-10烷基C1-10烷基。
31.一種測定式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的IRAP抑制活性的方法 其中A為芳基、雜芳基、碳環(huán)基或雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；X為O、NR’或S，其中R’為氫、任選取代的烷基、任選取代的烯基、任選取代的炔基、任選取代的芳基、任選取代的?；⑷芜x取代的雜芳基、任選取代的碳環(huán)基或任選取代的雜環(huán)基；R1為NR7R8、NHCOR8、N(COR8)2、N(COR7)(COR8)、N＝CHOR8或N＝CHR8，其中R7和R8獨立地選自H、任選取代的烷基、任選取代的芳基，或R7和R8與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；R2為CN、CO2R9、C(O)O(O)R9、C(O)R9或C(O)NR9R10，其中R9和R10獨立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、碳環(huán)基、雜環(huán)基，其各自可以任選被取代；和氫，或R9和R10與它們所連接的氮原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；R3-R6獨立地選自氫、鹵素、硝基、氰基烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、羥基、烷氧基、烯氧基、炔氧基、炔氧基、芳基氧基、雜芳基氧基、雜環(huán)基氧基、氨基、酰基、酰氧基、羧基、羧基酯、亞甲二氧基、酰氨基、硫代、烷硫基、烯硫基、炔硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、碳環(huán)基硫基、酰硫基和疊氮基，如果合適，其各自可以任選被取代，或任意兩個相鄰的R3-R6與它們所連接的原子一起形成可以任選被取代的3-8-元的環(huán)；并且Y為氫或C1-10烷基；該方法包括下列步驟(a)溫育IRAP、IRAP底物和所述的化合物；和(b)評價底物裂解的速率或程度；其中在與對照比較時，底物裂解速率或程度的下降或抑制表示所述化合物的IRAP抑制活性。
32.一種抑制IRAP活性的方法，該方法包括使IRAP接觸抑制量的下式化合物 或其藥學上可接受的鹽或前體藥物。
33.一種治療需要治療的受試者中涉及IRAP活性的疾病或病況的方法，該方法包括給予有效量的下式化合物 或其藥學上可接受的鹽或前體藥物。
34.一種增強受試者記憶和/或?qū)W習的方法，該方法包括對所述的受試者給予有效量的下式的化合物 或其藥學上可接受的鹽或前體藥物的步驟。
全文摘要
本發(fā)明涉及胰島素－調(diào)節(jié)的氨肽酶(IRAP)的抑制劑和抑制氨肽酶的方法以及包含所述抑制劑的組合物。特別地，本發(fā)明的抑制劑可以適用于治療應(yīng)用，包括增強記憶和學習功能、調(diào)節(jié)細胞葡萄糖攝取和穩(wěn)態(tài)；誘導分娩和泌乳、以及其中涉及過度或不需要的IRAP活性的其它障礙或病況。
文檔編號A61K31/382GK101039690SQ200580035336
公開日2007年9月19日 申請日期2005年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月9日
發(fā)明者柴秀云, M·W·帕克, A·L·阿爾比斯通, C·J·莫頓, 吳慧玲, S·葉, F·A·O·門德爾松 申請人:霍華德弗洛里實驗生理及醫(yī)藥學院, 圣文森特醫(yī)學研究學院