專利名稱：新的肽酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有多種生理用途的蛋白酶抑制劑。
從廣義上說，本發(fā)明涉及羥基末端的羧基被五氟乙基羰基(C(O)C2F5)取代了的肽酶底物類似物。這些肽酶底物類似物可作為多種蛋白酶的特異性酶抑制劑，其抑制作用發(fā)揮了有價值的藥理學(xué)活性，因而可對多種疾病狀態(tài)產(chǎn)生有用的生理學(xué)效果。
具體地說，本發(fā)明涉及用于抑制絲氨酸-羧酸-及金屬-蛋白酶的某些肽酶底物的五氟乙基羰基類似物，其抑制作用對多種疾病狀態(tài)具有用的生理學(xué)效果。
更具體地說，本發(fā)明涉及根據(jù)其活性位點(diǎn)特征而劃分的下列幾大類肽酶之底物的五氟乙基羰基類似物Ⅰ.絲氨酸蛋白酶包括彈性蛋白酶(人白細(xì)胞)、組織蛋白酶G、凝血酶、血纖維蛋白溶酶、C-1酯酶、C-3轉(zhuǎn)換酶(Convertese)、尿激酶、血纖維蛋白溶酶原激活劑、精蟲頭粒蛋白、β-內(nèi)酰胺酶、D-丙氨酸-D-丙氨酸羧肽酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和激肽釋放酶。
Ⅱ.羧酸蛋白酶包括血管緊張肽原酶、胃蛋白酶和組織蛋白酶D。
Ⅲ.金屬蛋白酶包括血管緊張素轉(zhuǎn)化酶、腦啡肽、假單胞菌彈性蛋白酶和亮氨酸氨肽酶。
期望的前述酶的肽酶抑制劑選自有下列結(jié)構(gòu)的化合物、其水合物電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽
其中R1是氫、選自K組的氨基保護(hù)基團(tuán)、α-氨基酸或由多個α-氨基酸組成的肽，各α-氨基酸或肽均可以攜帶一個最好選自K組的氨基保護(hù)基團(tuán)，R2是α-氨基結(jié)構(gòu)單元的側(cè)鏈，負(fù)責(zé)使該抑制劑指向酶的活性部位。
式Ⅰ化合物的電子等排物包括(α)其中R1取代基的一個或多個α-氨基處于其非天然構(gòu)型(當(dāng)有一種天然構(gòu)型時)，或(b)其中當(dāng)正常肽酰胺鍵修飾時，可形成-CH2NH-(還原的)、-COOH2-(氧化)、-CH(OH)CH2-(羥基)、-CH(NH2)CH2-(氨基)、-CH2CH2-(烴)。本發(fā)明的化合物最好不是等排物形式的，具體地說最好是R1基團(tuán)中肽酰胺基團(tuán)未被修飾的，但如果有的話，則最好使等排修飾為最小。
除特別指出者外，這些肽酶底物類似物的α-氨基酸最好呈L構(gòu)型。使用已知的三字母代碼指示特定氨基酸，其中呈L構(gòu)型者使用第一個字母為大寫字母的代碼表示，呈D構(gòu)型者則使用第一個字母為小寫字母的代碼表示。
本發(fā)明的那些有天冬氨酸和谷氨酸部分的化合物可以是游離形式或鹽(如酸加成鹽或陰離子鹽)形式的?？捎靡阎椒▽⑦@樣的化合物相繼轉(zhuǎn)化成鹽或堿形式的。優(yōu)選的鹽包括三氟乙酸鹽、鹽酸鹽、鈉鹽、鉀鹽或銨鹽，但本文所包括的鹽不僅限于這些，而可擴(kuò)展到已知被用于肽化學(xué)工藝中的所有鹽。
在進(jìn)一步限定和/或闡明式Ⅰ所包括的肽酶抑制劑的范圍之前，最好說明一下與肽有關(guān)的某些基本概念。各個α-氨基酸都有一個特征性的“R-基團(tuán)”，R基團(tuán)是接到α-氨基酸之α碳原子上的側(cè)鏈或殘基。例如，甘氨酸的R基團(tuán)側(cè)鏈?zhǔn)菤?，丙氨酸是甲基，纈氨酸是異丙基。有關(guān)α氨基酸的特定R基團(tuán)或R基團(tuán)側(cè)鏈可詳見Lehinger編的Biochemistry教科書(第4章)。
為了更便于限定通式Ⅰ所包括的化合物，以及由各個酶相關(guān)的亞通式所包括的化合物的范圍，而將多種α氨基酸分成不同的組，它們可各自對受式Ⅰ肽酶底物抑制的各特定酶發(fā)揮相似的功能特性。表Ⅱ中列出了這些組，而表Ⅰ中則給出了各α氨基酸的公認(rèn)的縮寫符號。
表ⅡA組Lys和ArgB組Glu、AspC組Ser、Thr、Glu、Asn、Cys、His、Ala(3-Pyr)、Ala、(4-Pyr)和N-甲基衍生物D組Pro、IndE組Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Met、及N-甲基衍生物F組Phe、Tyr、Tyr(Me)、Ala(3Pyr)Ala(4Pyr)、Trp、Nal(1)、及N-甲基衍生物G組Gly、SarJ組
其中φ代表苯基K組乙酰(Ac)、琥珀酰(Suc)、苯甲酰(Bz)、叔丁氧基碳酰(Boc)、芐氧碳酰(Cbz)、甲苯磺酰(Ts)、1-二甲胺基萘-5-磺酰(Dns)、異戊酰(Iva)、甲氧基琥珀酰(MeOSuc)、1-金剛烷磺酰(AdSO2)、1-金剛烷乙酰(AdAc)、2-羧苯甲酰(2cbz)、苯乙酰(PhAc)叔丁基乙酰(Tba)、雙〔(1-萘基)甲基〕乙酰(BNMA)或-A-Rz，其中
6、10或12個碳原子的芳基基團(tuán)，這些碳原子可分別被選自氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1至6個碳原子的烷基、含有1至6個碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基基團(tuán)含有1至6個碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基及含有1至15個碳原子的?；鶃喕酋０被?即酰氨基磺酰和磺酰氨基碳?！癝ac”)的1至3個原子或基團(tuán)適當(dāng)取代的、條件是當(dāng)酰基亞磺酰氨基含有芳基時，該芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的原子或基團(tuán)所取代;以及功能上與之等同的其他末端氨基保護(hù)基團(tuán)。
根據(jù)如上所述，式Ⅰ的化合物也可限定為
及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中
R1是氫、選自K組的氨基保護(hù)基團(tuán)、α氨基酸或由多個氨基酸組成的肽，所說的各α氨基酸或肽均可攜帶一個最好選自K組的氨基保護(hù)基團(tuán)，R2是α氨基酸的側(cè)鏈，負(fù)責(zé)使抑制劑指向酶的活性部位，其中所說的α氨基酸和肽部分選自A、B、C、D、E、F、G和J組，且K組是末端氨基保護(hù)基團(tuán)，這些組的成員是A組Lys和ArgB組Glu、AspC組Ser、Thr、Gln、Asn、Cys、His及N-甲基衍生物D組Pro、IndE組Ala、bAla、Leu、Ile、Val、Nva、bVal、Met、Nle和N-甲基衍生物F組Phe、Tyr、Trp、Nal(1)、和N-甲基衍生物G組Gly、SarJ組
其中φ代表苯基K組乙酰(Ac)、琥珀酰(Suc)、苯甲酰(Bz)、叔丁氧基碳酰(Boc)、芐氧碳酰(Cbz)、甲苯磺酰(Ts)、1-二甲胺基萘-5-磺酰(Dns)、異戊酰(Iva)、甲氧基琥珀酰(MeOSuc)、1-金剛烷磺酰(AdSO2)、1-金剛烷乙酰(AdAc)、2-羧苯甲酰(2Cbz)、苯乙酰(PhAc)、叔丁基乙酰(Tba)、雙〔(1-萘基)甲基〕乙酰(BNMA)，或-A-R2，其中
RZ是含有6，10或12個碳原子的芳基，其中的碳原子可獨(dú)自地被選自氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羥基、含有1至6個碳原子的烷基、含有1至6個碳原子的烷氧基、羧基、其中烷基基團(tuán)含有1至6個碳原子的烷基羰基氨基、5-四唑基及含有1至15個碳原子的?；鶃喕酋０被?即酰氨基磺酰和磺酰氨基碳酰)的1至3個成員適當(dāng)取代，條件是當(dāng)?；鶃喕酋０被蟹蓟鶗r，該芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、碘和硝基的一個成員所取代;及功能上與之等同的其他末端氨基保護(hù)基團(tuán)。
盡管在其羧基末端作了修飾，但也可將式Ⅰ的化合物描述為肽衍生物。在該描述中，R2部分是在肽的P1位置，R1部分的α氨基酸將在P2→Pn位置，n是取決于此特定化合物中α氨基酸結(jié)構(gòu)單元之?dāng)?shù)目的序號，如果R1含有四個α氨基酸，它將由P2-P3-P4-P5位置組成，且在P5部分有一個選自K組的末端氨基保護(hù)基團(tuán)。
為了舉例說明本申請中使用的速記命名，可假定R1由具有末端氨基保護(hù)基團(tuán)的P2、P3、P4組成，如令R1為-Pro-Ala-Ala-Suc-OCH3，R2便是異丙基，這樣該特定化合物即寫作H3CO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val。
還應(yīng)提到的是，在某些例子中可更為方便地將末端氨基保護(hù)基團(tuán)指定為肽的分離的Pn位置。如指定末端氨基保護(hù)基團(tuán)處在P5位置，因此R1即應(yīng)是以P5為K組之保護(hù)基團(tuán)的P2-P3-P4-P5。如適當(dāng)刪去P4，則非常明顯，P5的保護(hù)基將連接到P3部分上。在那些K組代表-A-RZ部分的例子中，最好A代表-C(＝O)-，RZ代表酰基亞磺酰氨基，特別是該?；鶃喕酋０被幸粋€被鹵素取代的芳基部分(優(yōu)選的是苯基)，且-A-RZ部分最好是4-〔(4-溴苯基)磺酰氨基羰基〕苯基羰基、4-〔(4-溴苯基)磺酰氨基羰基〕苯基羰基和4-〔苯基磺酰氨基羰基〕苯基羰基(所說的部分可分別縮寫為ClφSacBz、BrφSacBz和φSacBz)。
利用上面解釋的內(nèi)容，可以下式代表用作人白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑的式Ⅰ化合物R2NHCH(R2)COCF2CF3(Ⅰa)及其水合物、等排物或其醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是P2-P3-P4-P5，這里P2是選自D、E和F組的α氨基酸，優(yōu)選的是脯氨酸，P3是D、E組的α氨基酸或賴氨酸，優(yōu)選的是異亮氨酸，纈氨酸或丙氨酸，P4是E組的α氨基酸或沒有，優(yōu)選的是丙氨酸(當(dāng)Pn是零時，該特定部分不出現(xiàn)于結(jié)構(gòu)上，即它已被刪除)，以及P5是K組的末端部分，優(yōu)選的是甲氧基琥珀酰和Cbz及CIφSacBz、BrφSacBz和φSacBz，且R2是E和G組的氨基酸側(cè)鏈，其中優(yōu)選的是正纈氨酸和纈氨酸側(cè)鏈。
人白細(xì)胞彈性蛋白酶是由發(fā)炎部位的多形核白細(xì)胞釋放的，因而是造成多種疾病狀態(tài)的原因。而式(Ⅰa)的肽酶底物具有可用于治療痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他炎性疾病的抗炎作用，并可用于治療肺氣腫。在其實(shí)際應(yīng)用中很容易借助已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確認(rèn)式(Ⅰa)化合物的酶抑制性質(zhì)。用于上述疾病時，可能的劑量范圍當(dāng)然要取決于診斷醫(yī)生所確定的疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，一般為每天每公斤體重0.01mg至10mg，優(yōu)選的劑量范圍為每天每公斤體重0.1mg至10mg。
適于該酶的化選化合物是MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-C2F5，AdSO2-Lys(2Cbz)-Pro-Val-C2F5Cbz-Val-Pro-Val-C2F5，ClφSACBz-Val-Pro-Val-C2F5，BrφSacBz-Val-Pro-Val-C2F5，
φ-SacBz-Val-Pro-Val-C2F5，tPht-Val-Pro-Val-C2F5，及Boc-Val-Pro-Val-C2F5。
用作組織蛋白酶G之抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或其醫(yī)藥上可接受的鹽由下列結(jié)構(gòu)通式代表
其中R1是-P2-P3-P4-P5，而這里P2選自于D、E或G組，且優(yōu)選的是脯氨酸，P3選自于E或G組，且優(yōu)選的是丙氨酸和纈氨酸，P4選自于E、G組，或缺失，且優(yōu)選的是丙氨酸，末端α氨基酸可攜帶一個選自K組的保護(hù)基團(tuán)，且優(yōu)選的是含有甲氧基琥珀?；鶊F(tuán)的琥珀酰ClφSacBz或其他SAC，以及R2選自E和F組的側(cè)鏈氨基酸，但較好是芐基。
化合物(Ⅰb)抑制組織蛋白酶G的實(shí)際應(yīng)用與人白細(xì)胞抑制劑相同，如包括治療關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)和肺氣腫，但也包括治療腎小球腎炎及肺部感染。就其實(shí)際應(yīng)用來說，很容易以已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確認(rèn)化合物(Ⅰb)的酶抑制特性。它們的具體應(yīng)用的實(shí)際劑量范圍當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確認(rèn)的被治療病人或動物之疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，但為產(chǎn)生預(yù)期的治療效果一般實(shí)用劑量范圍約為每天每公斤體重0.01至10mg，優(yōu)選范圍為每天每公斤體重0.1至10mg。優(yōu)選的式(Ⅰb)化合物為MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Phe-C2F5，
Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-C2F5，及ClφSacBz-Val-Pro-Phe-C2E5。
可用下式代表用作凝血酶抑制劑的式Ⅰ化合物
及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是(a)-P2-P3，(b)-P2或(c)-P2-P3-P4，其中(a)P2選自于D、E或F組，最好是脯氨酸，P3選自F組，各P3均選自F組且均呈D構(gòu)型，其中優(yōu)選Phe，(b)P2選自于K組，但較好是1-二甲胺基萘-5-磺酰、甲苯磺?；虮郊柞＃?c)P2選自于E組，但最好是丙氨酸，P3選自于C、G和E組，但最好是絲氨酸，P4選自于F、G和E組或者是零，但最好是Phe，以及R2最好是精氨酸側(cè)鏈，但也可以是選自A和J組的側(cè)鏈氨基酸，特別是(J-1)。
式(Ⅰc)所包括的化合物可抑制凝血酶，因此在使用肝素中可用這些化合物作為治療血栓性靜脈炎和冠狀血管血栓形成的起始抗凝劑。就它們的實(shí)際應(yīng)用來說，很容易用已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確認(rèn)有關(guān)式(Ⅰc)化合物的酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。將它們用于特定目的的實(shí)際劑量范圍當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物的疾病狀態(tài)的性質(zhì)及嚴(yán)重程度。為產(chǎn)生預(yù)期的治療效果，一般實(shí)用劑量約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。優(yōu)選化合物同用于抑制組織蛋白酶G者，且還包括Phe-Pro-NHCH(J-1)-C2F5，Phe-Pro-Arg-C2F5，Dns-Arg-C2F5，H-Phe-Ser-Ala-C2F5，H-(D)-Phe-Pro-Lys-C2F5，及Bz-NHCH(J-1)-C2F5。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作胰凝乳蛋白酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3-P4-P5，這里P2選自于D、E組，但最好是Leu，或選自G或K組但最好是苯甲酰，P3選自于E或G或K組，但優(yōu)選的是乙酰，或缺失，且最好是丙氨酸，P4選自于E或G或K組，或缺失，但最好是丙氨酸，P5選自于K組且最好是琥珀酰，或缺失，R2選自于E和F組側(cè)鏈氨基酸，但最好是Phe側(cè)鏈或Tyr側(cè)鏈。
抑制胰凝乳蛋白酶之化合物(Ⅰd)的實(shí)際應(yīng)用于治療胰腺炎。就它們的應(yīng)用來說，很容易用已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰd)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。當(dāng)然，在實(shí)際應(yīng)用中的真實(shí)劑量范圍將取決于由診斷醫(yī)師確認(rèn)的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到預(yù)期的治療效果，一般劑量范圍將約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1mg至10mg。優(yōu)選化合物同用于抑制組織蛋白酶G者，且還包括Bz-Phe-C2F5，Bz-Tyr-C2F5，Ac-Leu-Phe-C2F5，及Cbz-Phe-C2F5。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作胰蛋白酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物，電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R2定義同(Ⅰc)，且R1選自于(a)-P2-P3，(b)-P2或(c)-P2-P3-P4，這里(a)P2選自E或F組，但最好是脯氨酸或丙氨酸，P3選自F組(均為D構(gòu)型)但最好是Phe，(b)P2選自K組，但最好是1-二甲胺基萘-5-磺酰、甲苯磺?；虮郊柞?，且(c)P2選自D組或E組，但最好是脯氨酸或丙氨酸，P2選自G和E組，但最好是絲氨酸，P4選自G和E組或者是零，但最好是Phe。
抑制胰蛋白酶的化合物(Ⅰe)的實(shí)際應(yīng)用在于治療胰腺炎。就它們的應(yīng)用來說，很容易使用已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰe)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。對于特定使用目的的真實(shí)劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確認(rèn)的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為達(dá)到有效的治療效果，可望一般實(shí)用劑量范圍約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1mg至10mg。用于抑制胰蛋白酶的優(yōu)選化合物相同于凝血酶抑制劑。
用下列結(jié)構(gòu)式代表用作血纖維蛋白溶酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3-P4，這里P2選自于E或F組，但最好是Ala或Phe，P3選自于B、F或K組，但最好是Glu或乙酰，P4選自于K組或缺失，但最好是1-二甲胺基萘-5-磺酰，以及R2是選自于A和J組的側(cè)鏈氨基酸，但較好是賴氨酸或J-1側(cè)鏈。
式(Ⅰf)所包括的化合物抑制血纖維蛋白溶酶，因此可在治療細(xì)胞過度生長中用作抗增殖劑，特別是用于治療良性前列腺肥大和前列腺癌，以及治療牛皮癬。就其實(shí)際應(yīng)用來說，很容易借助本領(lǐng)域內(nèi)已知的校準(zhǔn)生化技術(shù)來確證(Ⅰf)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。當(dāng)然，它們的具體應(yīng)用的真實(shí)劑量范圍要取決于由診斷醫(yī)師確認(rèn)的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)及嚴(yán)重程度。一般應(yīng)用中，可望將這一范圍保持在每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。優(yōu)選的化合物是Dns-Glu-Phe-Lys-C2F5，Ac-Ala-NHCH(J-1)-C2F5，及Ac-Ala-Lys-C2F5。
用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作C1-酯酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物，電子等排物或其醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3，其中P2選自于E、G、D、C、F、A或B組，且最好是Ala，而P2則選自K組，且最好是Cbz或乙酰，以及R2選自于A和J組側(cè)鏈氨基酸，但最好是Arg或(J-1)側(cè)鏈。
式(Ⅰg)所包括的化合物能抑制C1-酯酶，故可用于治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡、關(guān)節(jié)炎、自身免疫溶血性貧血及腎小球腎炎。就它們的實(shí)際應(yīng)用來說，很容易以已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確證有關(guān)(Ⅰg)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。當(dāng)然，使用中的實(shí)際劑量范圍將取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為獲得有效的治療作用，一般的實(shí)用劑量約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好的是每天每公斤體重0.1至10mg。優(yōu)選的化合物是Cbz-Ala-Arg-C2F3和Ac-Ala-NHCH(J-1)CO-C2F5。
用下式代表用作C3-轉(zhuǎn)換酶(C3-convertase)抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物和醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自于E或F組，但最好是Ala，P3選自于E或F組，但最好是Leu，P4選自K組，但最好是Bz，且R2選自于A或J組側(cè)鏈氨基酸，但最好是Arg。
式(Ⅰh)所包括的化合物能抑制C3-轉(zhuǎn)換酶，因此可用于治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡、關(guān)節(jié)炎、自身免疫溶血性貧血及腎小球腎炎。就其實(shí)際應(yīng)用來說，很容易利用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)證實(shí)有關(guān)(Ⅰh)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。其在應(yīng)用中的真實(shí)劑量范圍當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確認(rèn)的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到有效的治療結(jié)果，可望將一般實(shí)用劑量范圍定為每天每公斤體重約0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。優(yōu)選的化合物是可用下列通式代表用作尿激酶抑制劑的式Ⅰ化合物及水合物、電子等排物或其醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3，這里P2選自E和G組，其中優(yōu)選的是Ala和Gly，P3選自B組，其中優(yōu)選的是Glu，而R2則選自A和J組之側(cè)鏈氨基酸，但最好是Arg側(cè)鏈。
式(Ⅰi)所包括的化合物能抑制尿激酶，故可用于治療表現(xiàn)為細(xì)胞過度生長的疾病狀態(tài)，如用于治療良性前列腺肥大和前列腺癌、治療牛皮癬及用作流產(chǎn)藥物。就其實(shí)際應(yīng)用來說，很容易利用本領(lǐng)域中已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)證實(shí)有關(guān)式(Ⅰi)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。其應(yīng)用中的真實(shí)劑量范圍可根據(jù)由診斷醫(yī)師確證的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度而定。為得到有效的治療結(jié)果，一般應(yīng)用的劑量范圍約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。優(yōu)選的化合物是K-Glu-Gly-Arg-C2F5和K-Glu-Gly-Phe(Gua)-C2F5，其中K是保護(hù)基團(tuán)。
用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作血纖維蛋白溶酶原抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3-P4，其中P2是Gly，P3選自于B組，但優(yōu)選的是Glu，P4可選自K組，但優(yōu)選的是1-二甲胺基萘-5-磺酰，而R2則選自于A和J組的側(cè)鏈氨基酸，且最好是Arg側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Dns-Glu-Gly-Arg-C2F5和Dns-Glu-Gly-Phe(Gua)-C2F5。
用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作精蟲頭粒蛋白抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3-P4，這里P2選自于E或K組，其中優(yōu)選的是Leu或苯甲酰，P3選自于E組，其中優(yōu)選的是Leu或缺失，P4選自于K組，其中優(yōu)選的是Boc或缺失，R2選自于A和J組的側(cè)鏈氨基酸，其中優(yōu)選的是Arg和NHCH(J-1)CO側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Boc-Leu-Leu-Arg-C2F5，Boc-Leu-Leu-Phe(Gua)-C2F5，和Bz-NHCH(J-1)-C2H5。
式(Ⅰk)的化合物是精蟲頭粒蛋白抑制劑，因此可用作抗生育劑，特征在于防止精子穿透可受孕的卵。涉及它們的實(shí)際應(yīng)用，可使用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)很容易地證實(shí)(Ⅰk)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。當(dāng)然，其具體應(yīng)用的真實(shí)劑量范圍將取決于由診斷醫(yī)師確認(rèn)的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到預(yù)期的治療效果，一般應(yīng)用的劑量范圍可定為每天每公斤體重約0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1mg至10mg。
用下列結(jié)構(gòu)通式代表可用作β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是P2，
P2選自K組，但優(yōu)選COCH2φ和Bz，R2選自E、G和C組的側(cè)鏈氨基酸，但優(yōu)選的是氫。
優(yōu)選的化合物是φCH2CONHCH2CO-C2F5和φCH2CONHCH2CHOH-C2F5。
由式(Ⅰl)所代表的化合物能抑制β-內(nèi)酰胺酶，故可用作潛在的抗菌劑，特別是β-內(nèi)酰胺抗菌劑。涉及其實(shí)際應(yīng)用，可使用已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確證有關(guān)式(Ⅰl)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。為實(shí)際應(yīng)用所采用的劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師所確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到預(yù)期的治療效果，一般劑量范圍約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1mg至10mg。
可用下式代表用作D-Ala-D-Ala羧肽酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是P2-P3，這里P2是Lys(Ac)或選自于E和C組者，其中較好是Lys(Ac)，P3選自于K組，但較好是Ac，R2是甲基，這樣P1即是ala。
優(yōu)選的化合物是Ac-Lys(Ac)-ala-C2F5。
用下式代表可用作肽酰-脯氨酰順-反異構(gòu)酶(PPI)抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，
其中R1是-P2-P3，這里P2選自E組并優(yōu)選Ala，R3選自E組側(cè)鏈氨基酸并優(yōu)選Ala側(cè)鏈。
P3選自K組并優(yōu)選MeOSuc。
式(Ⅰn)的化合物是肽酰-脯氨酰順-反異構(gòu)酶的抑制劑，故可望具有免疫抑制活性。免疫抑制劑如Cyclosporin等，可用于降低宿主免疫系統(tǒng)對被移植組織或器官的排斥作用。
用下列結(jié)構(gòu)式代表可用作血管緊張肽原酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3-P4-P5-P6，其中P2選自于E、C或F組，較好是His、Nva、Ala(3Pyr)或Ala(4Pyr)及Nle，P3選自于E或F組或缺失，較好是Tyr(Me)，P4選自于E、D、F組或缺失，較好是Pro、bAla或bVal，P5選自E、C、F組或缺失，較好是His，P6選自K組，且較好是Boc，Cbz，或Tba，或當(dāng)P3、P4、P5缺失、或當(dāng)P4為bVal或bAla，P5和P6缺失時其為BNMA，R2則是選自于E或F組或Cha的氨基酸側(cè)鏈，且較好是Leu或Cha側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Cbz-Nal(1)-His-Leu-C2F5，Cbz-Phe-His-Leu-C2F5，Boc-Phe-Nva-Leu-C2F5，Cbz-Phe-Nva-Leu-C2F5，Boc-His-Pro-Phe-His-Leu-C2F5Cbz-Phe-His-Cha-C2F5，Cbz-His-Leu-C2F5，Boc-Phe-His-Leu-C2F5，Boc-Phe-Nva-Cha-C2F5，Boc-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2F5，Boc-Phe-Ala(3Pyr)-Cha-C2F5，Tba-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2F5，Tba-Tyr(Me)-Ala(4Pyr)-Cha-C2F5，bAla-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2H5，bVal-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2F5，bVal-Tyr(Me)-His-Cha-C2F5，及bAla-Tyr(Me)-His-Cha-C2F5。
式(Ⅰo)的化合物可抑制血管緊張肽原酶，故可用作治療高血壓的抗高血壓劑。對于其實(shí)際應(yīng)用，可按本領(lǐng)域內(nèi)已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)很容易地證實(shí)有關(guān)式(Ⅰo)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。至于在其具體應(yīng)用中的真實(shí)劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到預(yù)期的治療效果，一般應(yīng)用的劑量范圍約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是0.1至10mg。
可用下式代表用作胃蛋白酶抑制劑的式1化合物及其水合物，等排物或其醫(yī)藥上可接受的鹽，
其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自E或F組，且較好是Val，P3選自E或F組，且較好是Val或缺失，P4選自K組，且較好是Iva，而R2則選自E和F組的側(cè)鏈氨基酸，且較好是Leu側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Iva-Val-Leu-C2F5和Iva-Val-Val-Leu-C2F5。
式(Ⅰp)的化合物可抑制胃蛋白酶，故可發(fā)揮抗?jié)冏饔?，用于治療和預(yù)防潰瘍病。就其應(yīng)用來說，很容易利用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰp)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。在其具體應(yīng)用中使用的真實(shí)劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)或嚴(yán)重程度。為獲得預(yù)期治療效果，可將一般使用的劑量范圍定為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作組織蛋白酶，D抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中
R1是-P2-P3-P4，其中P2選自于E和F組，且較好是Val或Ala，P3選自于E和F組或缺失，且較好是Val，P4選自于K組，且較好是Cbz，R2則選自于E和F組的氨基酸側(cè)鏈，且較好是Phe側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Cbz-Val-Val-Phe-C2F5，Iva-Val-Ala-Phe-C2F5，及Iva-Val-Phe-C2F5。
式(Ⅰq)的化合物作為組織蛋白酶D的抑制劑，其使用目的同前述的人白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑(Ⅰa)，并且還可用作抗脫髓鞘劑，以預(yù)防和抑制神經(jīng)組織損傷。為其實(shí)際應(yīng)用，可使用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)很容易地確定式(Ⅰq)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。對于它們在具體應(yīng)用中的真實(shí)劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到預(yù)期的治療效果，可將這一范圍定為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑的式Ⅰ化合物和其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1選自于K組，且較好是Bz，R2選自于E、F和G組的側(cè)鏈氨基酸，且較好是Phe側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是
Bz-Phe-C2F5和Cbz-Phe-C2F5。
式(Ⅰr)的化合物能抑制ACE，故可作為抗高血壓劑用于治療高血壓。就其實(shí)際應(yīng)用來說，很容易借助已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰr)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。當(dāng)然，它們在具體應(yīng)用中的實(shí)際劑量范圍將取決于診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到有效的治療結(jié)果，一般應(yīng)用的劑量范圍可約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作腦啡肽酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3，其中P2是GlyP3選自F組或缺失，且優(yōu)選的是Tyr，R2是氫。
優(yōu)選的化合物是Tyr-Gly-Gly-C2F5。
式(Ⅰs)的化合物可抑制腦啡肽酶，故可用作止痛劑，就其實(shí)際應(yīng)用來說，可很容易地借助已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰs)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。有關(guān)其在具體應(yīng)用中的實(shí)際劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到有效的治療結(jié)果，其一般應(yīng)用的劑量范圍將大約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表可用作假單胞菌彈性蛋白酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物，電子等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3，其中P2選自E組，且較好是Ala，P3選自K組，且較好是MeOSuc，R2選自E和G組的側(cè)鏈氨基酸，且較好是Ala側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是MeOSuc-Ala-Ala-C2F5。
式(Ⅰt)的化合物可抑制假單胞菌彈性蛋白酶，故可作為特別適用于對抗假單胞菌感染的抗菌劑。就其實(shí)際應(yīng)用來說，可很容易地借助已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰt)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。有關(guān)其在具體應(yīng)用中的實(shí)際劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師確定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。為得到有效的治療結(jié)果，其一般應(yīng)用的劑量范圍將大約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
可用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作亮氨酸氨肽酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是氫，R2選自于A、B、E、F和J組的側(cè)鏈氨基酸，且較好是Phe、Leu、Glu和Arg側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Leu-C5，F(xiàn)2和Phe-C2F5。
式(Ⅰu)的化合物是亮氨酸氨肽酶的抑制劑，因此可作為免疫刺激劑，與其他已知的抗腫瘤劑聯(lián)合使用。涉及其實(shí)際應(yīng)用，可很容易地借助已知的標(biāo)準(zhǔn)生化技術(shù)確定式(Ⅰu)化合物之酶抑制特性的效力及其他生化參數(shù)。有關(guān)其在應(yīng)用中的實(shí)際劑量范圍，當(dāng)然要取決于由診斷醫(yī)師認(rèn)定的被治療病人或動物之疾病狀態(tài)的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。但作為一般應(yīng)用的劑量范圍，為得到有效治療結(jié)果可定為每天每公斤體重約0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
用下列結(jié)構(gòu)通式代表用作激肽釋放酶抑制劑的式Ⅰ化合物及其水合物、等排物或醫(yī)藥上可接受的鹽，其中R1是-P2-P3，其中P2選自于E和F組，且較好是Phe，P3選自于C、E或F組，且可以是D或L構(gòu)型的，R2則較好是Arg或(J-1)側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Pre-Phe-Arg-C2F5和Pro-Phe-NHCH(J-1)CO-C2F5。
式(Ⅰv)的化合物是組織或血漿激肽釋放酶抑制劑，因此可抑制激肽形成。已知激肽可誘導(dǎo)與炎癥和感染(如細(xì)菌和病毒的感染)有關(guān)的疼痛和血管通透性。由于這些化合物能抑制激肽生成，故可用于緩解疼痛和炎癥進(jìn)程。此外，這些化合物可用于雄性節(jié)育，此在于它們能夠顯著地干擾正常精子功能。在實(shí)際應(yīng)用中，其劑量范圍約為每天每公斤體重0.01至10mg，較好是每天每公斤體重0.1至10mg。
特別用作病毒復(fù)制所需之反轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶(特別是HIV-1和HIV-2病毒蛋白酶，所說的病毒可能是愛滋病即獲得性免疫缺陷癥的致病因子)之抑制劑的式Ⅰ化合物是下列式(Ⅰw)所代表的化合物其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自于C、E、F和G組，且較好是Asn、Gln和Ala，P3選自于C、E、F和G組，且較好是Asn、Gln和Ala，P4選自于C組，或者是bAla或bVal，較好是Ser或Thr，且可以攜帶一個K組的氨基保護(hù)基團(tuán)，R2是選自F、E組或Cha的α氨基酸側(cè)鏈，且較好是Met、Try、Phe和Cha側(cè)鏈。
優(yōu)選的化合物是Ser-Gln-Asn-Tyr-C2F5，Ser-Gln-Asn-Phe-C2F5，Ser-Leu-Asn-Tyr-C2F5，Ser-Leu-Asn-Phe-C2F5，Thr-Gln-Asn-Tyr-C2F5，Thr-Gln-Asn-Phe-C2F5，Thr-Gln-Asn-Met-C2F5，
Thr-Leu-Asn-Tyr-C2F5，Thr-Leu-Asn-Phe-C2F5，Iva-Ser-Asn-Tyr-C2F5，Iva-Ser-Asn-Phe-C2F5，Ser-Gln-Asn-Met-C2F5，Ser-Leu-Asn-Met-C2F5，Thr-Gln-Asn-Met-C2F5，Thr-Leu-Asn-Met-C2F5，及Iva-Ser-Asn-Met-C2F5。
在其治療反轉(zhuǎn)錄病毒感染的實(shí)際應(yīng)用中，式(Ⅰw)化合物的給藥劑量約為每天每公斤體重1-100mg，且最好靜脈內(nèi)給藥。
從上面可以看出，上述分別限定了Rb、Ra、X、n和Q的式(Ⅰa)至式(Ⅰw)的化合物均限制在，通式Ⅰ范圍內(nèi)，只是通式化合物對每個特定的酶有其優(yōu)選的結(jié)構(gòu)特征。當(dāng)然也可以理解到，在這些例子中如果P1之羰基部分是呈還原態(tài)的，那么這樣的化合物就不是水合物。
由于化合物的范圍均已限制在總體發(fā)明范圍內(nèi)，且對于每個個別酶均限定在各個亞組范圍內(nèi)，因此可分別描述并舉例說明其制備方法。
一般說來，可使用與本領(lǐng)域內(nèi)已知者相似的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)反應(yīng)制備式Ⅰ的化合物。下列反應(yīng)流程A概括了制備式Ⅰ化合物的程序，其中R1和R2的定義同前，Pg是氨基保護(hù)基團(tuán)如氨基甲酸，較好是芐氧基羰基(Cbz)基團(tuán)
具體地說，本發(fā)明的化合物是經(jīng)還原式2a或2b的N-甲氧基-N-甲基酰胺，分別產(chǎn)生式3a和3b的醛而制得的。申請人優(yōu)選式2a的化合物作為起始材料?？砂慈魏我阎椒?，如使用氫化鋁鋰(LAH)很容易地完成還原反應(yīng)?？稍诶鋮s的(約0℃)、溶于非反應(yīng)性溶劑如四氫呋喃(THF)等醚溶劑的式2a或2b化合物的溶液內(nèi)加入過量的LAH，方便地完成該還原作用。反應(yīng)基本完成后，即一般在大約30分鐘后，加入10%硫酸氫鈉再加水，以使反應(yīng)混合物驟冷。然后分離產(chǎn)物，如用乙酸乙酯等溶劑提取該含水混合物、干燥并除去溶劑?？捎弥鶎游龇?如用硅膠柱，并以55%乙酸乙酯/己烷洗脫)或重結(jié)晶法純化粗產(chǎn)物。
然后使式3a和3b的醛與五氟乙基陰離子，如五氟乙基陰離子的鋰鹽反應(yīng)，以分別得到式4a或4b的醇?？砂凑崭牧嫉腜.G.Gassman和Neil J.O′Reilly(J.Org.Chem.1987，52，2481-2490)的方法完成該縮合反應(yīng)。在這一過程中，因向溶于非反應(yīng)性溶劑如二乙醚的醛和五氟乙基碘的溶液內(nèi)加入甲基鋰/溴化鋰復(fù)合物，而在原位產(chǎn)生全氟乙基陰離子。攪拌已冷卻(-78°-0℃)的反應(yīng)混合物約半至1小時，直到反應(yīng)基本完成，然后傾入過量稀鹽酸中，使反應(yīng)混合物驟冷。可用二乙醚提取然后除去溶劑以分離產(chǎn)物?？稍诠枘z上層析純化粗產(chǎn)物。
然后氧化式4a或4b的醇，以分別得到式5的氨基被保護(hù)的五氟乙基酮或所需的式Ⅰ產(chǎn)物?？赏ㄟ^已知的Swern氧化法、或使用重鉻，酸吡啶鎓或三氧化鉻/吡啶鎓復(fù)合物通過改良的Jones反應(yīng)、或使用Dess-Martin全碘烷(periodinane)、1，1，1-三(乙酰氧基)-1，1-二氫-1，2-苯并碘氧-3(1H)酮完成該氧化作用。當(dāng)然，如果在α氨基酸結(jié)構(gòu)單元的殘基上有保護(hù)基團(tuán)，可在氧化反應(yīng)之后除去該保護(hù)基團(tuán)?？砂凑找阎臉?biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)。
Swern氧化中，一般以大約2-10當(dāng)量的二甲亞砜(DMSO)與大約1至6當(dāng)量的三氟乙酐〔(CF2CO)2O〕或草酰氯〔(COCl)2〕反應(yīng)，所說的反應(yīng)物被溶解于惰性溶劑如二氯甲烷(CH2Cl2)中，所說的反應(yīng)器是在大約-80℃至-50℃的無水條件下及惰性氣氛中(如氮?dú)饣蛴型裙δ艿臍怏w中)，在原位形成锍加成物，然后向其中加入約1當(dāng)量式4a或4b的醇。
醇最好溶解于惰性溶劑如CH2Cl2或小量DMSO中，將反應(yīng)混合物加溫至約-50℃(約須10-20分鐘)，然后加入約3至10當(dāng)量叔胺如三乙胺、N-甲基嗎啉等，以完成該反應(yīng)。
一般說來，可使式4a或4b的醇與重鉻酸吡啶鎓兩種反應(yīng)物在水截留分子篩粉末(如粉末狀3Angstroem分子篩)中進(jìn)行接觸反應(yīng)而完成改良的Jones氧化，其中所說的接觸是在冰醋酸存在下于大約0℃-50℃，且較好是室溫下進(jìn)行的，然后分離并適當(dāng)除去氨基保護(hù)基團(tuán)。
另外，可在原位制備1至5當(dāng)量三氧化鉻-吡啶復(fù)合物(即Sarett試劑)(參見Fieser and Fieser“Reagents for Organic Synthesis”Vol.1，PP.145和Sarett，et al.，J.A.C.S.25，422，(1953))，所說的復(fù)合物是于原位于0°-50℃的無水條件下，在惰性溶劑(如CH2Cl2)中及惰性環(huán)境下制備的，向復(fù)合物中加入1當(dāng)量式4a或4b的醇，使反應(yīng)物相互反應(yīng)大約1至15小時，然后分離并適當(dāng)除去胺保護(hù)基團(tuán)。
將式4a或4b的醇轉(zhuǎn)化為所需的式1或5的酮的再一種方法是利用Dess-Martin全碘烷進(jìn)行氧化反應(yīng)(參見Dess Martin，J.Org.Chem.，48，4155，(1983)可使約1當(dāng)量式4a或4b的適當(dāng)?shù)拇寂c1至5當(dāng)量全碘烷(最好1.5當(dāng)量)相接觸以進(jìn)行該氧化反應(yīng)，其中所說的試劑是在惰性溶劑(如二氯甲烷)的懸液中，在0℃至50℃(較好是室溫)及無水條件和惰性環(huán)境(較好在氮?dú)猸h(huán)境)下反應(yīng)約1至48小時?？稍诜蛛x出酮之后適當(dāng)?shù)爻グ繁Ｗo(hù)基團(tuán)。
就制備本發(fā)明之化合物的優(yōu)選方式來說，可首先將氨基被保護(hù)的式4a的五氟乙醇轉(zhuǎn)化成式4b的相應(yīng)化合物，然后進(jìn)行氧化反應(yīng)。接著先根據(jù)需要使氨基被保護(hù)的五氟乙醇去保護(hù)，然后使用常規(guī)α氨基酸或肽偶聯(lián)方法加進(jìn)由R1代表的任何氨基酸或肽鏈。這里R1基團(tuán)是由一個以上的氨基酸構(gòu)成的。此時可以是整個肽鏈被加到去保護(hù)的式4a化合物上，也可以是個別氨基酸相繼偶聯(lián)到去保護(hù)的式4a化合物上，另外，也可以聯(lián)合使用這兩種偶聯(lián)方法?？捎孟嗨品椒▽⑹?的化合物轉(zhuǎn)化為所需的式1化合物。
在將個別氨基酸或肽偶聯(lián)到去保護(hù)的式4a或式5化合物上時，可利用適當(dāng)?shù)膫?cè)鏈保護(hù)基團(tuán)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)欲保護(hù)的氨基酸及肽中是否有在其他保護(hù)的氨基酸殘基來選擇和使用與這些保護(hù)功能特性有關(guān)的適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)。這種選擇的標(biāo)準(zhǔn)在于它在合成的去保護(hù)和偶聯(lián)步驟中一定不能被除去。例如，當(dāng)使用Boc作為α-氨基保護(hù)基團(tuán)時，下列側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)是適當(dāng)?shù)?，可使用對甲苯磺?tosyl)部分保護(hù)Lys和Arg等氨基酸的氨基側(cè)鏈，可使用對甲基芐基、乙酰氨基甲基、芐基(Bzl)、或叔丁基磺酰部分保護(hù)如半胱氨酸、同型半胱氨酸、青霉胺等氨基酸或其衍生物的含硫化物側(cè)鏈，可用芐基(Bzl)或環(huán)己基酯部分保護(hù)Asp、Glu等氨基酸的羧酸側(cè)鏈;可使用芐基(Bzl)酯保護(hù)Ser和Thr等氨基酸的含羥基側(cè)鏈;并可使用2-溴芐酯基(2Br-z)部分保護(hù)Try等氨基酸的含羥基側(cè)鏈?？砂闯Ｒ?guī)方法或本領(lǐng)域內(nèi)已知的方法加進(jìn)或除去這些側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)。較好用溶于無水氟化氫的苯甲醚溶液(1∶10)除去這些側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)。一般可在肽鏈合成完成之后除去側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)的保護(hù)作用，但也可以在其他任何適當(dāng)?shù)臅r候除去這些基團(tuán)。在使用固相合成方法時，較好是在由樹脂上裂解下肽的同時除去這些側(cè)鏈保護(hù)。
另外，可按照將式2a和2b化合物分別轉(zhuǎn)化為式3a和3b化合物的同樣方法，使N-甲氧基-N-甲基酰胺與五氟乙基陰離子的鋰鹽縮合，將式2a和2b的化合物分別直接轉(zhuǎn)化為式5或式1的化合物。
然后分離這些化合物并使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)純化之?？蓮氖袌錾腺彽盟璧陌被?，其衍生物和異構(gòu)體，或可按照常規(guī)方法及本領(lǐng)域已知的技術(shù)合成之。
可用常規(guī)方法分別由式6a和6b的α氨基酸制備式2a和2b的相應(yīng)的N-甲氧基-N-甲基酰胺(參見J.A.Fehrentz and B.Costra，Synthesis，676-78(1983))
將異丁基氯甲酸酯加到N-甲基嗎啉或另一種空間位阻的非親核叔胺與式6a或6b化合物在非反應(yīng)溶劑如二氯甲烷中形成的已冷卻(即-60℃至大約0℃)之混合物內(nèi)。約5分鐘至1小時(特別是約15-20分鐘)后，加入N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽，將混合物攪拌約30分鐘至大約6小時，然后再將混合物加熱至室溫。當(dāng)反應(yīng)基本上完成時(一般約1至10小時)，將混合物傾入水中，并用如乙酸乙酯提取水相。然后經(jīng)溶劑蒸發(fā)分離所需化合物并進(jìn)行粗提純，例如在硅膠上快速層析并用乙酸乙酯/己烷洗脫。進(jìn)一步的純化可進(jìn)行硅膠層析并用二氯甲烷洗脫。
下列具體實(shí)施例旨在進(jìn)一步舉例說明制備本發(fā)明化合物的方法，而不是限定式Ⅰ所包括的化合物的范圍。
實(shí)施例1CBz-Val-C2F5的制備A.CBZ-Val〔OH〕-CF2CF3的制備將Cbz-Val-H(0.55g)在二乙基醚(8ml)中制成的溶液冷卻到-78℃并加入五氟乙基碘(0.5ml)。向該混合物內(nèi)加入甲基鋰-溴化鋰復(fù)合物(2.8ml，在二乙醚中1.5M甲基鋰-LiBr復(fù)合物)?；旌衔镉?78℃下攪拌0.5小時，傾入稀鹽酸中并用二乙醚(2×100ml)提取。通過NaSO4干燥合并的提取物，然后真空除去溶劑得到粗產(chǎn)物，再經(jīng)快速層析純化即得到97mg所需產(chǎn)物。M.S.356(M+H)。
B.CBZ-Val-CF2CF3的制備將草酰氯(0.03ml)在二氯甲烷(2ml)中制成的溶液冷卻到-55℃并加入二甲亞砜(0.08ml)。將混合物攪拌5分鐘，加入CBZ Val〔OH〕-CF2CF3(82mg)溶解在二氯甲烷(1ml)中所得到的溶液。反應(yīng)混合物于-55℃下攪拌20分鐘，然后加入三乙胺(0.5ml)并加溫至室溫。將該混合物傾入水(100ml)中并用乙酸乙酯提取。通過Na2SO4干燥合并的提取物并真空除去溶劑，進(jìn)一步層析純化該粗產(chǎn)物，得到23mg所需產(chǎn)物。
實(shí)施例2L-苯丙酰胺，N-〔(苯甲氧基)羰基〕-L-纈氨酰-N-甲氧基-N-甲基向L-苯丙氨酸，N-〔N-(苯基甲氧基)羰基〕-L-纈氨酰〕(2.5g，6.25mmol)在二氯甲烷(25ml)內(nèi)所成懸液內(nèi)加入N-甲基嗎啉(1.5ml)。將該溶液冷卻到-15℃，然后加入氯甲酸異丁基酯(0.8ml)。將溶液攪拌20分鐘并加入N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.0g)。將溶液于-15℃下攪拌1小時，然后加溫到室溫并繼續(xù)攪拌3小時。將反應(yīng)混合物傾入稀NaHCO3中并用乙酸乙酯(3×75ml)提取。通過Na2SO4干燥合并的提取物，真空除去溶劑，并經(jīng)硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物。用EtOAc/己烷洗脫，得到1.8g預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例3L-N-(苯基甲氧基)羰基苯丙酰胺，N-甲氧基-N′-甲基向L-N-(苯基甲氧基)羰基苯丙氨酸(25g，0.084mol)在二氯甲烷(300ml)中所成溶液內(nèi)加入N-甲基嗎啉(18.4ml，0.167mol)。將混合物冷卻到-15℃并加入氯甲酸異丁基酯(10.8ml，83.6mmol)。將混合物于-15℃下攪拌15分鐘，然后加入N，O-二甲基羥胺HCl(8.5g)?；旌衔镉?15℃攪拌1小時，再加溫至室溫并攪拌3小時。將反應(yīng)混合物傾入水(300ml)中，用二氯甲烷(2×150ml)提取水相。通過Na2SO4干燥合并的有機(jī)提取物，使體積減少至100ml并通過硅膠(2英寸)過濾。用二氯甲烷(200ml)洗硅膠并由合并的濾液中除去溶劑，得到26.14g預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例4氨基甲酸，〔5-〔〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基〕氨基〕-6-(甲氧基甲基氨基)-6-氧代己基〕-，苯基甲基酯將L-賴氨酸，N2-〔(1，1-二甲基乙氧基)羰基〕-N6-〔(苯基甲氧基)羰基〕(10g，26.3mmol)在二氯甲烷中所成的溶液冷卻到0℃并加入二異丙基乙胺(9.15ml)。向混合物內(nèi)加入氯甲酸異丁基酯(3.4ml，26.3mmol)然后冷卻到-15℃，攪拌15分鐘，再加入N，O-二甲基羥胺HCl(2.7g)。將混合物于-15℃攪拌2小時，之后加溫至室溫并攪拌18小時。將反應(yīng)混合物傾入H2O(200ml)中并用二氯甲烷(2×150ml)提取。通過MgSO4干燥合并的提取物并真空除去溶劑，得到13.5g粗產(chǎn)物。在硅膠柱上純化該粗產(chǎn)物(3.0g)。用50%EtOAc/己烷洗脫，得到2.01g預(yù)期的產(chǎn)物。
實(shí)施例5L-苯丙氨醛，N-〔(苯基甲氧基)羰基〕-L-纈氨酰將L-苯丙酰胺、N〔(苯基甲氧基)羰基〕-L-纈氨酰-N′-甲氧基-N′-甲基(3g，6.8mol)在四氫呋喃(50ml)中所成的溶液冷卻到0℃并加入LiAlH4(250mg)。將混合物于0℃下攪拌30分鐘并加入10%硫酸氫鉀驟冷。將混合物傾入H2O(400ml)中，用乙酸乙酯(3×150ml)提取水相。通過MgSO4干燥合并的有機(jī)提取物并真空除去溶劑。通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物并用55%EtOAc/己烷洗脫，得到1.6g預(yù)期的產(chǎn)物。
實(shí)施例6Boc-Val-CF2CF3的制備將1.0g(3.8mmol)tBoc-Val-N(OCH3)CH2溶解于50ml二乙醚中并冷卻到-78℃。向混合物中加入1.5ml(12.2mmol)五氟乙基碘。再向得到混合物內(nèi)加入6.0ml(9.0mmol)1.5M溴化鋰-甲基鋰復(fù)合物(CH3Li·LiBr)(在二乙醚中)。將混合物攪拌5分鐘，并用TLC檢查之。反應(yīng)未完成。向混合物內(nèi)加入0.75ml五氟乙基碘及另外3.0ml CH3Li·LiBr。反應(yīng)仍未完成，故再加入0.75ml五氟乙基碘和3.0ml CH3Li·LiBr。經(jīng)TLC分析，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成75%，因而再加入0.75ml五氟乙基碘和3.0ml CH3Li·LiBr。將混合物攪拌10分鐘，傾入200ml水中驟冷后用2×150ml二乙醚提取。通過Na2SO4干燥合并的有機(jī)提取物，真空除去溶劑并用3cm×24cm硅膠柱純化粗產(chǎn)物，用10%EtOAc/己烷洗脫，得到900mg產(chǎn)物。
實(shí)施例7Cbz-Phe-C2F3的制備將Cbz-Phe-N(OCH3)CH3(0.57g，1.7mmol)溶解于25ml二乙醚中，冷凝0.75ml(6.1mmol)五氟乙基碘并加到冷混合物(約-55℃)中。向該混合物內(nèi)加入3.0ml(4.5mmol)甲基鋰-溴化鋰復(fù)合物。然后攪拌15分鐘，除去冷浴，再攪拌20分鐘，同時升至室溫。將反應(yīng)混合物傾入稀鹽酸中，用乙二醚(3×50ml)提取。通過Na2SO4干燥合并的提取物，真空除去溶劑，對粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠柱(3cm×20cm柱)層析，并用20% EtOAc/己烷洗脫以純化。將粗產(chǎn)物溶解于20%EtOAc/己烷并于2cm/22cm硅膠柱上再次層析，棄去排空體積后收集約20ml部分。產(chǎn)率285mg。
實(shí)施例8Boc-Val-Pro-Val-CF2CF3的制備將Boc-Val-CF2CF3溶解于100ml乙酸乙酯中并將所得混合物冷卻到0℃。用HCl氣體處理混合物5分鐘，0℃攪拌20分鐘(TLC分析顯示起始材料已消失)，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)以除去溶劑。粗鹽酸鹽不經(jīng)純化而使用。
在分液瓶內(nèi)，在二氯甲烷(6ml)和正甲基嗎啉(0.55ml，5.1mmol)的混合物中溶入0.54g(1.7mmol)Boc-Val-Pro-OH，并將混合物冷卻到-22℃。向混合物中加入0.22ml(1.7mmol)氯甲酸異丁基酯，于-22℃下攪拌25分鐘、然后加到已懸浮在10mlCH2Cl2中之001E-190的鹽酸鹽(按上段所述方法制備)內(nèi)。將混合物攪拌1.5小時。然后傾入100ml H2O中并用2×100ml二乙醚提取。用稀鹽酸、稀NaHCO3洗合并的有機(jī)提取物，然后通過Na2SO4干燥之。除去溶劑后得到660mg粗化合物。在13cm×24cm硅膠柱上快速層析，并用20%EtOAc/己烷洗脫以純化之。
上面詳細(xì)描述了本發(fā)明化合物的總的和具體的方法，以及其制備和使用方法。此外，雖然這些方法都是已知的，但闡明這些工藝方法的參考文獻(xiàn)也給出了估計生物化學(xué)作用的方法，而這些也包括在本文中。
例如體外是使用發(fā)色肽、琥珀酰丙氨酰丙氨酰丙氨酰一對硝基酰苯胺(Al)、甲氧基琥珀酰丙氨酰丙氨酰脯氨酰纈氨酰一對硝基酰苯胺(A2)等檢測人彈性蛋白酶，而所有這些試劑均可從市場上買到。所用試驗緩沖液(PH8.0)及分析技術(shù)與Lottenberg等人所述者(A3、A4)相似。酶是從人唾液中純化的(A5)，但最近已有商品出售?？山柚鶧ixon作圖(A6)確定瞬間抑制劑的動力學(xué)特性，而慢-和/或緊密結(jié)合抑制劑的定性則使用了Williams和Morrison(A7)介紹的數(shù)據(jù)分析技術(shù)。
同樣，可用相似的分光鏡技術(shù)體外檢測其它蛋白酶和分析抑制劑的作用，組織蛋白酶G(A2)，凝血酶(A3)、胰凝乳蛋白酶(A8)、胰蛋白酶(A9)、血纖維蛋白溶酶(A3)、Cl彈性蛋白酶(A10)、尿激酶(A3)、血纖維蛋白溶酶原激活劑(A11)、精蟲頭粒蛋白(A12)、β-內(nèi)酰胺酶(A13)、組織蛋白酶B(A14)、胃蛋白酶(A15)、組織蛋白酶D(A16)及亮氨酸氨肽酶(A17)。假單胞菌彈性蛋白酶則以偶聯(lián)檢測法，使用人彈性蛋白酶底物及微粒體氨肽酶檢測。
血管緊張肽Ⅰ轉(zhuǎn)化酶和腦啡肽酶及其抑制劑的放射檢測法是基于Ryan的方法(A18)，并使用了由Ventrex Laboratories，Inc。購得的滴定的底物。放射免疫分析用于研究血管緊張肽原酶(A19)。C3轉(zhuǎn)換酶則按Tack等人所述方法(A20)檢測。
下面列出了有關(guān)這些檢測法的參考文獻(xiàn)及出處
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參照上面列出的技術(shù)、再利用其他已知技術(shù)，同時與已知可用于治療上述疾病的化合物相比較，相信本領(lǐng)域內(nèi)普通技術(shù)人員將能夠得到為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明所需的足夠材料。當(dāng)然，就本發(fā)明化合物的實(shí)際應(yīng)用來說，可將其配制成適于口服的醫(yī)藥制劑，如片劑、膠囊劑或酏劑，或適于胃腸道外途徑給藥的無菌溶液或懸液。本發(fā)明化合物在應(yīng)用中的給藥劑量為每個病人每次5至500mg，每天分幾次給藥，每天總劑量約5至2000mg。如上所述，實(shí)際劑量將取決于疾病的嚴(yán)重程度，病人的體重及其他可參考的因素。
一般可將上述化合物按以下方法配制成醫(yī)藥組合物約10-500mg式Ⅰ的化合物或其混合物或醫(yī)藥上可接受的鹽與某種醫(yī)藥上可接受的載體、賦形劑、粘合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、香味劑等組合在一起，制成醫(yī)藥工業(yè)要求的單位劑量的制劑。這些組合物或制劑中活性物質(zhì)的量應(yīng)保持如前面指出的范圍。
可摻入片劑、膠囊等制劑中的輔助成分包括粘合劑如黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或白明膠;賦形劑如微晶纖維素;崩解劑如玉米淀粉、預(yù)膠化淀粉、藻酸等，潤滑劑如硬脂酸鎂;甜味劑如蔗糖、乳糖或糖精;調(diào)味劑如薄荷、冬青油或櫻桃油。如制成膠囊時，除含上述材料，還可含有液態(tài)載體如脂肪油。也可加入各種其它材料以制成包衣或改變劑量單位的物理形式。例如，可用紫膠、糖或兩者制成片劑包衣。糖漿或酏劑中可含活性成分，另外可以蔗糖作甜味劑，以羥苯甲酸甲酯和羥苯甲酸丙酯作防腐劑，以櫻桃或橙子香料作著色及調(diào)味劑。
可按常規(guī)方法，將活性物質(zhì)溶解或懸浮于載體如注射用水、天然植物油如可可油、芝麻油、花生油、棉籽油等，或合成的脂肪載體如油酸乙酯中，配制成可供注射的無菌組合物。且可根據(jù)要求加入緩沖劑，防腐劑，抗氧化劑等。
雖然已結(jié)合具體實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但應(yīng)明確的是，在不違背上文所述發(fā)明的基本特征及待批權(quán)利要求所述范圍的前提下，可以作進(jìn)一步的改動，本申請意欲覆蓋本文所述原理及基本精神的任何改動、應(yīng)用或改寫，而這一切都將在本發(fā)明看來是已知或常規(guī)實(shí)踐范圍內(nèi)的。
權(quán)利要求
1.制備下式化合物的方法，
其中R1是氫、選自K組的氨基保護(hù)基團(tuán)，α氨基酸或包含多個α氨基酸的肽，所說的各α氨基酸或肽均可以攜帶一個較好選自K組的氨基保護(hù)基團(tuán)，R2是負(fù)責(zé)使抑制劑指向酶之活性部位的α氨基酸側(cè)鏈，其中所說的α氨基酸或肽部分選自于A、B、C、D、E、F、G和J組，且K是末端氨基保護(hù)基團(tuán)，這些組的成員是組ALys和ArgBGlu，AspCSer、Thr、Gln、Asn、Cys、His和N-甲基衍生物DPro、IndEAla、Leu、Ile、Val、Nva、Met、bVal、bAla、Nle和N-甲基衍生物FPhe、Tyr、Tyr(Me)、Trp、Nal(l)和N-甲基衍生物GGly，SarJ
其中φ代表苯基K乙酰(Ac)、琥珀酰(Suc)、苯甲酰(Bz)、叔丁氧基碳酰(Boc)、芐氧羰基(Cbz)、甲苯磺酰(Ts)、1-二甲胺基萘-5-磺酰(Dns)、異戊酰(Iva)、甲氧基琥珀酰(MeOsuc)、1-金剛烷磺酰(AdSO2)、1-金剛烷乙酰(AdAc)、2-羧苯甲酰(2Cbz)、苯乙酰、叔丁基乙酰(Tba)、雙[(1-萘基)甲基]乙酰(BNMA)，或-A-Rz，其中
R2是含有6、10或12個碳的適當(dāng)1-3取代的芳基基團(tuán)，取代基可獨(dú)自地選自氟、氯、溴、磺、三氟甲基、羥基、含有1至6個碳的烷基、含有1至6個碳的烷氧基、羧基、其中烷基基團(tuán)含有1至6個碳的烷基羰基氨基、5-四唑基和含有1至15個碳的酰基亞磺酰氨基(即酰氨基磺酰和磺酰氨基碳酰)，條件是當(dāng)?；鶃喕酋０被蟹蓟鶗r，該芳基可進(jìn)一步被選自氟、氯、溴、磺和硝基的成員所取代；以及功能上與之等同的其他末端氨基保護(hù)基，該方法包括依照下述氧化程序(a)、(b)、(c)或(d)氧化式
的化合物；a)以大約2至6當(dāng)量的二甲基亞砜與1至3當(dāng)量的(CF2CO)2O或(COCl)2反應(yīng)，制備原位锍加成物；所說的反應(yīng)物被溶解于惰性溶劑中并于約-80℃-50℃溫度范圍內(nèi)及無水條件下反應(yīng)，使所說的锍加成物與約1當(dāng)量式Ⅱ的醇接觸，所說的醇被溶解于惰性溶劑中或最小量二甲基亞砜中，使反應(yīng)物于大約-50℃下反應(yīng)約10至30分鐘，并加入約3至10當(dāng)量叔胺完成反應(yīng)；b)使式Ⅱ的醇與重鉻酸吡啶鎓在粉末狀水截留分子篩中冰醋酸存在下，于0℃接觸發(fā)生反應(yīng)；c)使式Ⅱ的醇與大約1至5當(dāng)量三氧化鉻一吡啶復(fù)合物反應(yīng)，所說的復(fù)合物是在惰性溶劑中，于精性氣氛及無水條件下生成的，所說的醇的反應(yīng)在三氧化鉻一吡啶復(fù)合物一反應(yīng)混合物中進(jìn)行約1至15小時；d)使式Ⅱ的醇與1，1，1-三(乙酰氧基)-1，1-二氫-1，2-苯并碘氧-3(1H)酮反應(yīng)，所說的反應(yīng)在惰性溶劑中于惰性氣氛及無水條件下進(jìn)行約1至48小時，在反應(yīng)a、b、c或d完成之后可適當(dāng)除去被保護(hù)的胺。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4-P5，其中P2是選自D、E和F組的α氨基酸，P3是D、E組的α氨基酸或賴氨酸，P4是E組的α氨基酸或零，P5是K組的成員，R2是E和G組的氨基酸側(cè)鏈。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其產(chǎn)物是MeOSuc-Ala-Pro-Val-C2F5，AdSO2-Lys(2Cbz)-Pro-Val-C2F5Cbz-Val-Pro-Val-C2F5，ClφSacBz-Val-Pro-Val-C2F5，BrφSacBz-Val-Pro-Val-C2F5，φ-SacBz-Val-Pro-Val-C2F5，tpht-Val-Pro-Val-C2F5，及Boc-Val-Pro-Val-C2F5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4-P5，其中P2選自D、E或G組，P3選自E或G組，P4選自E、G組或缺失，P5是K組的成員，R2是選自E和F組的氨基酸側(cè)鏈。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其產(chǎn)物是MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Phe-C2F5，Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-C2F5，及ClφSacBz-Val-Pro-Phe-C2F5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是(a)-P2-P2，(b)-P2或(c)-P2-P3-P4，其中(a)P2選自D、E或F組，P3選自F組，各P3均為D構(gòu)型，(b)P2選自K組，(c)P2選自E組P3選自C、G和E組，P4選自F、G和E組，或為零，R2是精氨酸側(cè)鏈，或為選自A或J組的氨基酸側(cè)鏈。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其產(chǎn)物是Phe-Pro-NHCH(J-1)-C2F5，Phe-Pro-Arg-C2F5，Dns-Arg-C2F5，H-Phe-Ser-Ala-C2F5，H-(D)-Phe-Pre-Lys-C2F5，及Bz-NHCH(J-1)-C2F5。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4-P5，其中P2選自D、E、G或K組，P3選自E或G或K組，或缺失，P4選自E或K組，或缺失，P5選自K組，或缺失，R2選自E和F組的氨基酸側(cè)鏈。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其產(chǎn)物是Bz-Phe-C2F5，Bz-Tyr-C2F5，Ac-Leu-Phe-C2F5。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R2是精氨酸側(cè)鏈，或是選自A和J組的氨基酸側(cè)鏈，R1選自于(a)-P2-P2，(b)-P2或(c)-P2-P3-P4，其中(a)P2選自E或F組，P3選自F組，(均為D構(gòu)型)，(b)P2選自K處，(c)P2選自D或E組，P3選自G和E組，P4選自G和E組或者缺失。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自E或F組，P3選自B、F或K組，P4選自K組，R2選自A和J組的氨基酸側(cè)鏈。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其產(chǎn)物是Dns-Glu-Phe-Lys-C2F5，Ac-Ala-NHCH(J-1)-C2F5，及Ac-Ala-Lys-C2F5。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1一般是-P2-P3，其中P2選自E、G、D、C、F、A或B組，P2選自K組，R2選自于A和J組的氨基酸側(cè)鏈。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其產(chǎn)物是Cbz-Ala-Arg-C2F5和Ac-Ala-NHCH(J-1)CO-C2F5。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自E或F組，P3選自E或F組，P3選自K組，R2選自于A和J組的氨基酸側(cè)鏈。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其產(chǎn)物是Bz-Leu-Ala-Arg-C2F5。
17.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3，其中P2選自E和G組，P3選自B組，R2選自A和J組的氨基酸側(cè)鏈。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其產(chǎn)物是K-Glu-Gly-Arg-C2F5和K-Glu-Gly-Phe(Gua)-C2F5，其中K是選自K組的保護(hù)基團(tuán)。
19.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P1-P2-P3-P4，其中P2選自E或K組，P3選自E組或缺失，P4選自K組或缺失，R2選自A和J組的氨基酸側(cè)鏈。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其產(chǎn)物是Boc-Leu-Leu-Arg-C2F5，Boc-Leu-Leu-Phe(Gua)-C2F5，和Bz-NHCH(J-1)-C2F5。
21.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是P2，且P2選自于K組，R2選自于E、G和C組的氨基酸側(cè)鏈。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其產(chǎn)物是φCH2CONHCH2CO-C2F5及φCH2CONHCH2CHOH-C2F5。
23.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3，其中P3是Lys(Ac)或選自E和C組，P3選自K組，R3是甲基基團(tuán)。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其產(chǎn)物是Ac-Lys(Ac)-ala-C2F5。
25.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P3-P3-P4-P5-P6，其中P2選自E、C或F組，P3選自E或F組，或缺失，P4選自E、D或F組，或缺失，P5選自E、C、F組，或缺失，P6選自K組，或當(dāng)P4是β-氨酸或β-丙氨酸時，P5和P6缺失，R2選自E或F組的氨基酸的側(cè)鏈，或者是環(huán)己基亞甲基。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其產(chǎn)物是Cbz-Nal(1)-His-Leu-C2F5，Cbz-Phe-His-Leu-C2F5，Boc-Phe-Nva-Leu-C2F5，Cbz-Phe-Nva-Leu-C2F5，Boc-His-Pro-Phe-His-Leu-C2F5，Cbz-Phe-His-Cha-C2F5，Cbz-His-Leu-C2F5，Boc-Phe-His-Leu-C2F5，Boc-Phe-Nva-Cha-C2F5，Boc-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2F5，Boc-Phe-Ala(3Pyr)-Che-C2F5，Tba-Tyr(Me)-Nva-CHa-C2H5，Tba-Tyr(Me)-Ala(4Pyr)-Cha-C2F5，bAla-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2F5，bVal-Tyr(Me)-Nva-Cha-C2F5，bVal-Tyr(Me)-His-Cha-C2F5，和bAla-Tyr(Me)-His-Che-C2F5。
27.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3，其中R2選自E組，P3選自K組，R2選自E組的氨基酸側(cè)鏈。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中R1是MeOSuc-Ala-，R2是甲基基團(tuán)。
29.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自E或F組，P3選自E或F組，P4選自K組。R2選自E或F組的氨基酸側(cè)鏈。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其產(chǎn)物是Iva-Val-Leu-C2F5和Iva-Val-ValLeu-C2F5。
31.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4，其中P2選自E和F組，P2選自E和F組或缺失，P4選自K組，R2選自E和F組的氨基酸側(cè)鏈。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其產(chǎn)物是Cbz-Val-Val-Phe-C2F5，Iva-Val-Ala-Phe-C2F5，以及Iva-Val-Phe-C2F5。
33.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1選自K組，R2選自E、F和G組的氨基酸側(cè)鏈。
34.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其產(chǎn)物是Bz-Phe-C2F5和Cbz-Phe-C2F5。
35.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3，其中P2是Gly，P3選自F組或缺失且R2是H。
36.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其產(chǎn)物是Tyr-Gly-Gly-C2F5。
37.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3，這里P2選自E組，P3選自K組，且R2選自E和G組的氨基酸側(cè)鏈。
38.根據(jù)權(quán)利要求37的方法，其產(chǎn)物是MeOSuc-Ala-Ala-C2F5。
39.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是氫，R2選自A、B、E、F和J組的氨基酸側(cè)鏈。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的方法，其產(chǎn)物是Leu-C2F5和Phe-C2F5。
41.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3，這里P2選自E和F組，P3選自C、E或F組，其殘基可以是D-或L-構(gòu)型，且R2選自A或J組的氨基酸側(cè)鏈。
42.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其產(chǎn)物是Pro-Phe-Arg-C2F5和Pro-Phe-NHCH(J-1)CO-C2F5。
43.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是-P2-P3-P4，這里P2選自C、E、F和G組，P3選自C、E、F和G組，P4選自C組，或者是bAla或bVal，且可以攜帶一個K組的氨基保護(hù)基團(tuán)，R2是F組的氨基酸側(cè)鏈。
44.根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其產(chǎn)物為Ser-Gln-Asn-Tyr-C2F5，Ser-Gln-Asn-Phe-C2F5，Ser-Leu-Asn-Tyr-C2F5，Ser-Leu-Asn-Phe-C2F5，Thr-Gln-Asn-Tyr-C2F5，Thr-Gln-Asn-Phe-C2F5，Thr-Leu-Asn-Tyr-C2F5，Thr-Leu-Asn-Phe-C2F5，Iva-Ser-Asn-Tyr-C2F5，和Iva-Ser-Asn-Phe-C2F5。
全文摘要
本發(fā)明涉及某些肽酶底物的活化的親電子酮類似物，其可用于抑制絲氨酸—、羧酸—和金屬—蛋白水解酶，從而可對多種疾病產(chǎn)生生理學(xué)治療效果。
文檔編號C07K5/08GK1049016SQ9010487
公開日1991年2月6日 申請日期1990年7月25日 優(yōu)先權(quán)日1989年7月26日
發(fā)明者菲利浦·貝, 諾頓·鮑爾·皮特, 米切爾·理查德·安格拉喬, 蘇亞斯·麥迪 申請人:默里爾多藥物公司