專利名稱：一種中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬中藥制藥領域。
背景技術(shù)：
冠心病在中醫(yī)多屬于胸痹，發(fā)病率日趨增高，成為威脅人類生命健康的主要威脅之一。臨床發(fā)病多見于老年人，但發(fā)病年齡趨于年輕化。臨床表現(xiàn)為胸部刺痛或悶痛，遇勞則甚，心悸，倦怠懶言，面色晄白或黧黑，氣短乏力，易自汗，舌質(zhì)紫暗，有瘀斑，脈沉細或細澀。由此可見，心腦血管疾病的病機多與氣虛血瘀有關，氣虛是病機的根本，血瘀既是病理產(chǎn)物，又是發(fā)病的原因。氣虛血瘀，痹阻心脈，或阻滯腦絡則發(fā)病。因此，探索一種治療該類疾病的藥物非常必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備治療氣虛血瘀型冠心病、心絞痛，心肌梗塞及合并高血脂、高血糖等癥藥物中應用的中藥組合物及其制備方法；本發(fā)明的目的還在于提供一種中藥組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的首先，發(fā)明人研制出獨特的配方，該配方包括如下重量比的藥味黃芪100～140份黨參80～120份丹參 70～90份葛根 70～90份淫羊藿 70～90份山楂 70～90份地黃 50～70份當歸 50～70份黃連 50～70份延胡索50～70份靈芝 50～70份人參 15～35份甘草 15～35份優(yōu)選后的處方為黃芪 120份黨參100份丹參 80份葛根 80份淫羊藿 80份山楂 80份地黃 60份當歸 60份黃連 60份延胡索 60份靈芝 60份人參 25份甘草 25份最優(yōu)的，處方中的延胡索和甘草分別為炙延胡索和炙甘草。
應用以上處方，就可以制成各種相應劑型，發(fā)明人優(yōu)選為膠囊劑或丸劑，并針對處方特點制定了制備方法。該制備方法包括提取精制和制劑成型兩部分，下面分別敘述。
提取精制部分，發(fā)明人研究了三種不同的工藝，但均能達到精制的目的1)將處方中人參、黃連、延胡索、山楂與60重量份黃芪粉碎成細粉，備用；其余黨參等八味與剩余黃芪加水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至90℃時相對密度1.06～1.12的清膏，放冷，與上述藥粉混合，干燥，粉碎，得藥物細粉；2)將處方中人參、延胡索粉碎成細粉，備用；其余黨參等十一味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至70℃時相對密度1.32～1.35的稠膏，放冷，與上述藥粉混合，干燥，粉碎，得到細粉；3)將處方中人參、延胡索粉碎成細粉，備用；取黃芪、黨參、地黃、甘草四味加水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，減壓濃縮至90℃時相對密度1.06～1.12的清膏，備用；其余丹參等七味，加70％乙醇回流提取二次，濾過，合并濾液，濾液減壓回收乙醇，并濃縮至90℃時相對密度為1.06～1.12的清膏，與上述水提清膏合并，噴霧干燥，將噴干粉與粉碎所得細粉混合，得到藥物細粉。
制劑成型部分，主要是得用以上制得的藥物細粉，加入相應的常規(guī)輔料，包括潤滑劑、粘合劑等，制成相應的劑型。
為了有效控制本發(fā)明所得產(chǎn)品的質(zhì)量，發(fā)明人還制定了質(zhì)量控制方法，包含定性鑒別和含量測定，其中的定性鑒別可以是如下的一種或幾種a.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚振搖提取三次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取熊果酸對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(20∶5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴40％硫酸乙醇溶液，80℃烘至斑點清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
b.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚振搖提取三次，每次20ml，乙醚液棄去，余水液加氨水調(diào)pH8～9，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-無水乙醇(8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣熏至斑點顯色清晰。置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
c.取上述(b)項下所余水液用鹽酸調(diào)pH7～8，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，棄去醋酸乙酯液。余水液用水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用2％氫氧化鈉溶液洗滌二次，每次20ml，棄去堿液；余正丁醇液用1％鹽酸溶液洗滌二次，每次20ml，棄去酸液；余正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌二次，每次20ml，蒸干正丁醇液，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃下靜置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
d.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細，準確稱取0.5g，加甲醇5ml，超聲處理15分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
含量測定方法包含如下步驟色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25∶75)為流動相，流速為1.0ml/min。檢測波長250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計應不低于4000。
對照品溶液的制備 稱取葛根素對照品適量，精密稱定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本發(fā)明組合物制劑0.5～2g，研細，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入50％甲醇50ml，稱定重量，超聲(100W，50KHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，以50％甲醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液以微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本組合物制劑每單位量含葛根以葛根素(C21H20O9)計，不得少于12mg。
上述單位量是指含相當21g原藥材的成品藥劑量。
具體實施例方式本發(fā)明藥物制劑具有扶正固本，益氣活血，行脈止痛的功能。發(fā)明人根據(jù)其功能主治，從心肌缺血再灌注損傷的保護、活血化瘀等方面對其藥效學進行了研究。
受試藥物按照本發(fā)明三種制備方法制得的制劑1-3號，含0.89g生藥/單位量的制劑。
地奧心血康膠囊http//www.epharma.com.cn/productshow.asp？id＝1194成都地奧制藥集團有限公司生產(chǎn)，批號20040301。
儀器PB303-N電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。心電圖儀，廣州禾豐實業(yè)有限公司。
動物昆明種小鼠18～22g，120只，雌雄兼用，Wistar大鼠雄性，250～300g；均由中國藥科大學新藥研究中心動物室提供。
試驗1在麻醉大鼠心肌缺血再灌注損傷模型中的保護作用將60只Wistar大鼠隨機分為6組，每組10只，分為假手術(shù)組(A組)、缺血再灌注組(B組)、本發(fā)明制劑組(C，D，E組)和陽性對照藥組(F組)。各給藥組均ig 3d，并于第4天ig后10min將大鼠用20％烏拉坦1.0～1.2g/kg(0.5～0.6mL/100g)腹腔淺麻醉。結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支(LAD)30min再通60min造成心肌缺血及再灌注損傷模型。實驗過程中通過MS～302生理記錄系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測肢體H導聯(lián)心電圖變化，并記錄缺血30min及再灌60min內(nèi)室速(VT)、室顫(VF)發(fā)生率及心律失常持續(xù)時間，計算ASI心律失常記分。再灌注結(jié)束即刻從頸動脈取血2mL，分離血清檢測血清磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(S0D)、丙二醛(MDA)。實驗完畢后，取心臟，稱全心濕重，沿冠狀溝切除心房，留下心室，稱心室濕重。稱重后立即進行活體染色，將心室橫切5～6片，放入0.5％的NBT溶液中，在37℃孵箱中10～15min染色，用水沖洗浮色。剪去各心肌片被染成藍色的非梗死區(qū)心肌，把未染色的梗死心肌稱重，除以全心重和心室重即分別得到梗死范圍占全心重和心室重的％。所得數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標準差(X±s)表示，用t檢驗進行統(tǒng)計學處理。結(jié)果見下表
表1對缺血再灌注大鼠血清CPK活性的影響(X±s，n＝10)

注與缺血再灌注(B)組比較*P＜0.05，**P＜0.01(下同)表1可見，B組與A組相比較，CPK活性升高明顯，差異存在顯著性，說明缺血再灌注模型是成功的。C，D，E組與B組比較，CPK活性明顯下降。
表2 對缺血再灌注大鼠血清中LDH活性的影響(X±s，n＝10)

表2可見，B組與A組相比較，LDH活性明顯升高。各給藥組血清中LDH活性較B組明顯下降。
表3對缺血再灌注大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響(X±s，n＝10)

表3結(jié)果可見，B組血清中SOD活性顯著低于A組，MDA含量顯著高于A組，統(tǒng)計學意義明顯。給藥組血清SOD活性均高于B組，而血清MDA含量均低于B組。
表4對大鼠冠脈結(jié)扎后缺血期和再灌期心律失常發(fā)生率的影響(X±s，n＝10)

表4可見，冠脈結(jié)扎30min，解除結(jié)扎60min后，各組大鼠均出現(xiàn)程度不同的心律失常，包括VT、VF。藥物均能降低實驗動物在缺血期和再灌注期的心律失常發(fā)生率。無論缺血期還是再灌期，各給藥組與模型組相比均能顯著減少ASI。
表5對麻醉大鼠缺血再灌注損傷后心肌梗塞重量的影響(X±s，n＝10)

表5結(jié)果顯示，B組心肌梗塞面積顯著高于A組，統(tǒng)計學意義明顯，各給藥組均能縮小梗塞面積，與模型組比較統(tǒng)計學意義明顯。
表1～表5結(jié)果表明，本發(fā)明制劑具有顯著降低心律失常發(fā)生率、心律失常嚴重指數(shù)(ASI)和心肌梗死范圍的作用。并顯著降低血清CPK、LDH活性及MDA含量，改善SOD活性的降低。說明本發(fā)明制劑能拮抗實驗性心肌缺血及再灌注損傷，具有明顯的保護作用。
試驗2對小鼠凝血、出血時間的影響取小鼠50只，隨機分為5組，每組10只。對照組(給蒸餾水)、受試藥物I、II、III組和陽性藥組，給藥30天后，用毛細管插入小鼠內(nèi)眥球后靜脈叢，自血液流進管內(nèi)開始計時。血液注滿后取出毛細管乎放于桌上，每陷30s折斷兩端毛細管約0.5cm，并緩慢向左右拉至折斷處有血凝絲出現(xiàn)，停止記時，所經(jīng)歷時間即為凝血時間，見表6。
表6對小鼠體內(nèi)癡血時間影響(X±s，n＝10)

注與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(下同)結(jié)果表明，各給藥組凝血時間顯著長于對照組。
取小鼠50只，隨機分為5組，每組10只。對照組(給蒸餾水)、受試藥物I、II、III組和陽性藥組，給藥30天后，在距鼠尾尖0.6cm處，切斷鼠尾，隨即記時。每隔30s用濾紙輕吸尾尖血液，直至出血停止，立即計時。見表7。
表7對小鼠出血時間的影響(X±s，n＝10)

結(jié)果表明，各給藥組與對照組相比出血時間延長。
試驗2表明，本發(fā)明制劑有一定的活血化瘀作用。
以下通過實施例進一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案實施例一處方黃芪 100g黨參 80g丹參 70g葛根70g淫羊藿 70g山楂 70g地黃50g當歸 50g黃連 50g延胡索 50g靈芝 50g人參 15g甘草15g制法以上十三味，取人參、黃連、延胡索、山楂與黃芪60g粉碎成細粉，備用；其余黨參等八味與剩余黃芪加水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.06～1.12(90℃)的清膏，放冷，與上述藥粉混合，干燥，粉碎，細粉加1％的羧甲淀粉鈉及微晶纖維素適量調(diào)整總量至500g，混勻，加30％乙醇作潤濕劑，混合均勻，合坨20分鐘，制丸條、分粒與搓圓，丸劑打光，低溫干燥，分裝，即得。
實施例二處方黃芪 120g黨參100g 丹參 80g葛根 80g淫羊藿 80g 山楂 80g地黃 60g當歸 60g 黃連 60g延胡索(炙) 60g靈芝 60g 人參 25g甘草(炙) 25g制法以上十三味，人參、黃連、延胡索、山楂與黃芪60g粉碎成細粉，備用；其余黨參等八味與剩余黃芪加10倍量水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.12～1.15(70℃)的清膏，放冷，加一倍量乙醇，使沉淀，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度1.32～1.35(70℃)的清膏，與上述藥粉混合，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂1g及淀粉適量，調(diào)整總量至300g，制成膠囊1000粒，即得。
實施例三處方黃芪 140g黨參120g丹參 90g葛根90g淫羊藿 90g山楂 90g地黃70g當歸 70g黃連 70g延胡索 70g靈芝 70g人參 35g甘草35g制法以上十三味，人參、黃連、延胡索、山楂與黃芪60g粉碎成細粉，備用；其余黨參等八味與剩余黃芪加10倍量水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.12～1.15(70℃)的清膏，放冷，加一倍量乙醇，使沉淀，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度1.32～1.35(70℃)的清膏，與上述藥粉混合，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂1g及淀粉適量，調(diào)整總量至300g，制成膠囊1000粒，即得。
質(zhì)量控制方法鑒別a.取膠囊內(nèi)容物3g，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚振搖提取三次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取熊果酸對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(20∶5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴40％硫酸乙醇溶液，80℃烘至斑點清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
b.取鑒別(a)項下所余水液用氨水調(diào)pH8～9，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μ1、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-無水乙醇(8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣熏至斑點顯色清晰。置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
c.取鑒別(b)項下所余水液用鹽酸調(diào)pH7～8，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，棄去醋酸乙酯液。余水液用水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用2％氫氧化鈉溶液洗滌二次，每次20ml，棄去堿液；余正丁醇液用1％鹽酸溶液洗滌二次，每次20ml，棄去酸液；余正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌二次，每次20ml，蒸干正丁醇液，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)10℃下靜置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
d.取膠囊內(nèi)容物0.5g，加甲醇5ml，超聲處理15分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25∶75)為流動相，流速為1.0ml/min。檢測波長250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計應不低于4000。
對照品溶液的制備 稱取葛根素對照品適量，精密稱定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物研細，取0.5g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入50％甲醇50ml，稱定重量，超聲(100W，50KHz)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，以50％甲醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液以微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含葛根以葛根素(C21H20O9)計，不得少于1.2mg。每粒膠囊為0.3g，相當于原藥材2.14g。
權(quán)利要求
1.一種中藥組合物，其特征在于該藥物組合物是由如下重量份的原料藥制成的黃芪100～140份 黨參80～120份 丹參 70～90份葛根70～90份淫羊藿 70～90份山楂 70～90份地黃50～70份當歸50～70份黃連 50～70份延胡索 50～70份靈芝50～70份人參 15～35份甘草15～35份
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物是由下列原料制成的黃芪120份 黨參100份 丹參 80份葛根80份淫羊藿 80份山楂 80份地黃60份當歸60份黃連 60份延胡索 60份靈芝60份人參 25份甘草25份
3.如權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物，其特征在于原料藥中的延胡索和甘草分別為炙延胡索和炙甘草。
4.如權(quán)利要求3所述的中藥組合物，其特征在于該組合物可制備成膠囊劑或丸劑。
5.權(quán)利要求4所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法包含如下步驟中的任一種1)將處方中人參、黃連、延胡索、山楂與60重量份黃芪粉碎成細粉，備用；其余黨參等八味與剩余黃芪加水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至90℃時相對密度1.06～1.12的清膏，放冷，與上述藥粉混合，干燥，粉碎，得藥物細粉；2)將處方中人參、延胡索粉碎成細粉，備用；其余黨參等十一味加水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至70℃時相對密度1.32～1.35的稠膏，放冷，與上述藥粉混合，干燥，粉碎，得到細粉；3)將處方中人參、延胡索粉碎成細粉，備用；取黃芪、黨參、地黃、甘草四味加水煎煮二次，第一次2小時，第二次1.5小時，合并煎液，濾過，減壓濃縮至90℃時相對密度1.06～1.12的清膏，備用；其余丹參等七味，加70％乙醇回流提取二次，濾過，合并濾液，濾液減壓回收乙醇，并濃縮至90℃時相對密度為1.06～1.12的清膏，與上述水提清膏合并，噴霧干燥，將噴干粉與粉碎所得細粉混合，得到藥物細粉。
6.如權(quán)利要求5所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于每種方法最終得到的藥物細粉，加入相應的常規(guī)輔料，制成相應劑型，包括膠囊劑和丸劑。
7.權(quán)利要求1、2或3所述的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法的定性鑒別方法包含如下的一種或幾種a.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚振搖提取三次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取熊果酸對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以20∶5∶0.5的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴40％硫酸乙醇溶液，80℃烘至斑點清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；b.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15ml使溶解，用鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚振搖提取三次，每次20ml，乙醚液棄去，余水液加氨水調(diào)pH8～9，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶1的甲苯-無水乙醇為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣熏至斑點顯色清晰。置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；c.取上述b項下所余水液用鹽酸調(diào)pH7～8，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，棄去醋酸乙酯液。余水液用水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用2％氫氧化鈉溶液洗滌二次，每次20ml，棄去堿液；余正丁醇液用1％鹽酸溶液洗滌二次，每次20ml，棄去酸液；余正丁醇液用正丁醇飽和的水洗滌二次，每次20ml，蒸干正丁醇液，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以13∶7∶2的氯仿-甲醇-水10℃下靜置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃下烘至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.取本發(fā)明組合物制劑2～5g，研細，準確稱取0.5g，加甲酵5ml，超聲處理15分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以6∶3∶1.5∶1.5∶0.3的苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-水為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
8.如權(quán)利要求7所述的中藥組合物的制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法還包含如下的定量方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；25∶75的甲醇-水為流動相，流速為1.0ml/min。檢測波長250nm；理論板數(shù)按葛根素峰計應不低于4000；對照品溶液的制備 稱取葛根素對照品適量，精密稱定，加甲醇使溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液，即得；供試品溶液的制備 取本發(fā)明組合物制劑0.5～2g，研細，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入50％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，以50％甲醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液以0.45μm微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
9.如權(quán)利要求1、2或3所述的中藥組合物在制備治療氣虛血瘀型心腦血管疾病的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥組合物，該組合物是由黃芪、黨參、丹參、葛根、淫羊藿、山楂、地黃、當歸、黃連、延胡索、靈芝、人參和甘草等經(jīng)一定方法制備而得，對于治療氣虛血瘀型心腦血管疾病有著較好的療效。同時，本發(fā)明還公開了該中藥組合物的制備方法和質(zhì)量控制方法。
文檔編號A61K9/48GK1806830SQ20051020004
公開日2006年7月26日 申請日期2005年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月18日
發(fā)明者高淑英 申請人:北京凱瑞創(chuàng)新醫(yī)藥科技有限公司