專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療心血管疾病的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種治療心血管疾病的藥物組合物及其制備方法和用途。具體地說(shuō)，是以中藥材中的活性成分為原料制備而成的藥物組合物。
背景技術(shù)：
心、腦血管疾病是當(dāng)今人類(lèi)生命和健康受到嚴(yán)重威脅的疾病之一。中年以后的心腦血管病主要是指冠心病及腦卒中(又稱(chēng)腦中風(fēng))。這兩種常見(jiàn)病、多發(fā)病對(duì)我國(guó)人群的健康威脅日益增大。據(jù)衛(wèi)生部“1998年全國(guó)衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展情況統(tǒng)計(jì)公報(bào)”，1998年我國(guó)心血管病死亡率在城市人群為244.3/10萬(wàn)，在農(nóng)村人群為193.1/10萬(wàn)，均列為目前我國(guó)第一死因。在我國(guó)，每年大約有260萬(wàn)人死于心腦血管疾病，每天就是7000多人，每12秒就有1人因心腦血管疾病而死亡。心腦血管疾病是威脅全球人民健康與生命的頭號(hào)殺手。我國(guó)在中風(fēng)的發(fā)生率居高不下的同時(shí)，心肌梗死的發(fā)生率迅速上升，中風(fēng)與心肌梗死的發(fā)病率之比由上世紀(jì)80年代的8∶1降為90年代末的4∶1，目前則可能已成為3∶1或2∶1，與西方發(fā)達(dá)國(guó)家的1∶1逐漸接近。這說(shuō)明，繼上世紀(jì)六七十年代因中風(fēng)高發(fā)病率引起的心腦血管疾病高潮后，我國(guó)即將面臨心腦血管疾病發(fā)病的第二次浪潮。隨著我國(guó)人口結(jié)構(gòu)老齡化的來(lái)臨及人們生活水平的提高，心、腦血管疾病的發(fā)病率及死亡率還將升高。針對(duì)上述情形，目前臨床上參麥注射液的使用量也不斷增大，由紅參、麥冬兩味中藥材制成的參麥注射液是國(guó)家中醫(yī)藥管理局推薦的首批急癥必備中成藥品種之一。它具有補(bǔ)氣生津、強(qiáng)心固脫之功能，臨床主要用于心源性休克、心臟衰弱引起的低血壓、流行性出血熱、心律失常、心肌炎、冠心病、肺心病等疾病的治療。目前采用參麥注射劑的的制備方法是采用紅參100g，麥冬100g，取紅參(切片或出粗粉)加乙醇浸漬后，回流提取6次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓回收乙醇至每1ml含生藥0.3-0.4g，冷藏后濾過(guò)，于濾液中按體積加1％活性炭，攪拌后濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，加3-4倍量的純化水，冷藏，濾過(guò)后調(diào)pH至7.5，煮沸，冷藏，濾過(guò)，備用。另取麥冬加乙醇浸漬后，回流提取2次，自“每次2小時(shí)”起同法制成麥冬藥液。合并上述紅參、麥冬藥液，按處方量加入0.5％吐溫-80，攪勻，加注射用水至1000ml，調(diào)pH至7.5，濾過(guò)，灌封，滅菌，即得。這種方法雖然制作工藝簡(jiǎn)單，成本較低，卻存在不可忽視的問(wèn)題(1)制成的制劑為黃褐色液體，含有大量色素類(lèi)；(2)該藥的有效部分皂苷在水中不穩(wěn)定、易水解，常使制劑產(chǎn)生沉淀或渾濁，直接影響制劑質(zhì)量。(3)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不完善，可控指標(biāo)少，僅有皂苷定性鑒別和總皂苷含量測(cè)定，沒(méi)有有效成分含量測(cè)定指標(biāo)，加之缺乏原料質(zhì)量控制技術(shù)指標(biāo)，產(chǎn)品質(zhì)量控制難度大，這與現(xiàn)代化的中藥制劑的現(xiàn)狀不相吻合。且雖然原料相同，由于提取方法不同，有效成分配伍不同，藥效存在較大的差異，因此研究一種療效確切，成份清楚，配方合理，質(zhì)量可控的藥物非常必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種治療心血管疾病的藥物組合物，它是由人參皂苷、麥冬皂苷為活性成分制備而成的注射劑。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法及用途。
本發(fā)明提供了一種治療心血管疾病的藥物組合物，它是由下述重量配比的活性成分制備而成的注射劑人參皂苷0.1份-100份、麥冬皂苷0.1份-100份。
進(jìn)一步地，它是由下述重量配比的活性成分制備而成的注射劑人參皂苷0.1-25份、麥冬皂苷0.1-25份。
所述的注射劑是注射液、粉針劑、靜脈滴液。
其中，所述的注射劑的指紋圖譜如圖1所示。
本發(fā)明提供了一種制備該藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取紅參加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加8-20倍的水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加8-20倍的水煮沸后保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，離心除去沉淀物得人參水提液；取麥冬加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-2小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，高速離心除去沉淀物得麥冬水提液；b.純化、干燥取a步驟制備的提取物采用大孔樹(shù)脂、結(jié)晶、超濾、分子蒸餾或膜分離進(jìn)行分離純化，得到人參和麥冬有效部位干提取物尤其是皂苷類(lèi)成分，人參提取物中人參皂苷以人參皂苷Re計(jì)，重量百分比不低于70％；麥冬提取物中麥冬皂苷以麥冬皂苷Ra計(jì)，重量百分比不低于50％；c、將b步驟制備制備的人參皂苷、麥冬皂苷按下述重量配比混合，加入注射劑用附加劑，制備成注射劑人參皂苷0.1份-100份、麥冬皂苷0.1份-100份。
進(jìn)一步地，本發(fā)明藥物組合物的制備方法包括如下步驟a、藥材前處理和提取檢驗(yàn)合格的紅參、麥冬藥材分別經(jīng)挑選、洗凈、烘干、粉碎成片狀或顆粒狀。
稱(chēng)取紅參加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加8-20倍的水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加8-20倍的水煮沸后保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，離心除去沉淀物得人參水提液。
稱(chēng)取一定量的麥冬加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-2小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，高速離心除去沉淀物得麥冬水提液。
b.純化，干燥可采用大孔樹(shù)脂、結(jié)晶、超濾、分子蒸餾、膜分離等方式進(jìn)行分離純化，得到人參和麥冬有效部位干提取物尤其是皂苷類(lèi)成分，提取物中人參皂苷含量≥70％，麥冬皂苷含量≥50％。
以大孔樹(shù)脂純化法為例1、人參水提液的純化、干燥人參水提液用各種強(qiáng)堿，弱堿，鹽類(lèi)溶液洗層析柱至層析液無(wú)色，包括氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉、Na2CO3、碳酸鉀、氫氧化鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氫氧化鈣、磷酸氫鈣、碳酸氫鈣等溶液中的一種或幾種并且不僅限于以上溶液，然后至層析液pH中性時(shí)，用有機(jī)溶液洗脫，可采用包括乙醇、乙醚，乙酸乙酯，甲醇，甲苯，丙酮，氯仿等有機(jī)溶液中的一種或幾種并且不限于以上溶液，至無(wú)皂苷反應(yīng)，洗脫液勻速過(guò)精致樹(shù)脂層析柱，收集流出液，靜置12-24小時(shí)，過(guò)濾，濃縮至無(wú)有機(jī)溶液，過(guò)濾，獲透明淺黃色人參提取液，干燥后得到人參有效部位干提取物，采用噴霧干燥，冷凍干燥，烘干，薄膜干燥等各種干燥方法，得到人參提取物人參皂苷含量以人參皂苷Re計(jì)≥70％；2、麥冬水提液的純化、干燥麥冬水提液用各種強(qiáng)堿，弱堿，鹽類(lèi)溶液洗層析柱至層析液無(wú)色，包括氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉、Na2CO3、碳酸鉀、氫氧化鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氫氧化鈣、磷酸氫鈣、碳酸氫鈣等溶液中的一種或幾種并且不僅限于以上溶液，然后至層析液pH中性時(shí)，用有機(jī)溶液洗脫，可采用包括乙醇、乙醚、乙酸乙酯、甲醇、甲苯、丙酮、氯仿等有機(jī)溶液中的一種或幾種并且不限于以上溶液，至無(wú)皂苷反應(yīng)，洗脫液勻速過(guò)精致樹(shù)脂層析柱，收集流出液，靜置12-36小時(shí)，過(guò)濾，濃縮，獲透明淺黃色麥冬提取液，干燥，得麥冬有效部位干提取物，麥冬皂苷以麥冬皂苷Ra計(jì)含量≥50％。
本發(fā)明提供了該藥物組合物在制備抗休克的藥物中的用途。
本發(fā)明提供了該藥物組合物在制備改善微循環(huán)、心肌缺血的藥物中的用途。
本發(fā)明提供了該藥物組合物在制備治療靜脈血栓的藥物中的用途。
本發(fā)明原料由人參和麥冬組成，采用科學(xué)合理的生產(chǎn)工藝，嚴(yán)格操作。人參興奮中樞神經(jīng)，興奮呼吸，有“扶正培本”，補(bǔ)充機(jī)體陰、陽(yáng)、氣、血等不足的功能；麥冬滋陰生津，潤(rùn)肺止咳，清心除煩，近代藥理研究亦證明，麥冬有強(qiáng)心作用。本發(fā)明將有效成分人參皂苷與麥冬皂苷配伍注射使用，益氣固脫，養(yǎng)陰生津，補(bǔ)心復(fù)脈之功效更佳，具有抗心肌缺血、缺氧、對(duì)內(nèi)因毒素所致的血腦屏障、神經(jīng)細(xì)胞的損害等有保護(hù)作用，能延緩死亡的時(shí)間，增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的吞噬功能，并能提高免疫功能等作用。本發(fā)明藥物制備方法采用了經(jīng)過(guò)處理的大孔樹(shù)脂來(lái)純化提取物，減少了色素沉積，同時(shí)采用水進(jìn)行提取，降低了成本，并且有效成分提取率高。與原參麥注射液相比具有成分更清晰、療效確切、穩(wěn)定性好、質(zhì)量可控便于運(yùn)輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)，對(duì)傳統(tǒng)工藝進(jìn)行了革新，還重點(diǎn)研究了注射用大孔樹(shù)脂理化性質(zhì)、預(yù)處理與再生方法、殘物檢查、吸附、洗脫條件等相關(guān)闡述，在完成了大孔樹(shù)脂殘物紫外檢查技術(shù)的基礎(chǔ)上，獨(dú)創(chuàng)了靈敏度更高，專(zhuān)一性更好的高效液相色譜法檢查技術(shù)，并進(jìn)行了中藥材的指紋圖譜實(shí)驗(yàn)，為臨床提供了一種新的選擇。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。


圖1本發(fā)明藥物組合物指紋圖譜具體實(shí)施方式
實(shí)施例1本發(fā)明藥物制備方法一、藥材前處理和提取檢驗(yàn)合格的紅參、麥冬藥材分別經(jīng)挑選、洗凈、烘干、粉碎成片狀或顆粒狀。
稱(chēng)取紅參加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加8-20倍的水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加8-20倍的水煮沸后保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，離心除去沉淀物得人參水提液。
稱(chēng)取一定量的麥冬加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-2小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，高速離心除去沉淀物得麥冬水提液。
二、純化，干燥可采用大孔樹(shù)脂、結(jié)晶、超濾、分子蒸餾、膜分離等方式進(jìn)行分離純化，得到人參和麥冬有效部位干提取物尤其是皂苷類(lèi)成分，人參提取物中人參皂苷以人參皂苷Re計(jì)，重量百分比不低于70％；麥冬提取物中麥冬皂苷以麥冬皂苷Ra計(jì)，重量百分比不低于50％。
現(xiàn)僅以大孔樹(shù)脂純化法為例3、人參水提液的純化、干燥人參水提液用各種強(qiáng)堿，弱堿，鹽類(lèi)溶液洗層析柱至層析液無(wú)色，包括氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉、Na2CO3、碳酸鉀、氫氧化鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氫氧化鈣、磷酸氫鈣、碳酸氫鈣等溶液中的一種或幾種并且不僅限于以上溶液，然后至層析液pH中性時(shí)，用有機(jī)溶液洗脫，可采用包括乙醇、乙醚，乙酸乙酯，甲醇，甲苯，丙酮，氯仿等有機(jī)溶液中的一種或幾種并且不限于以上溶液，至無(wú)皂苷反應(yīng)，洗脫液勻速過(guò)精致樹(shù)脂層析柱，收集流出液，靜置12-24小時(shí)，過(guò)濾，濃縮至無(wú)有機(jī)溶液，過(guò)濾，獲透明淺黃色人參提取液，干燥后得到人參有效部位干提取物，采用噴霧干燥，冷凍干燥，烘干，薄膜干燥等各種干燥方法，得到人參提取物人參皂苷含量以人參皂苷Re計(jì)≥70％。
4、麥冬水提液的純化、干燥麥冬水提液勻速通過(guò)吸附樹(shù)脂層析柱，吸附完畢后，用各種強(qiáng)堿，弱堿，鹽類(lèi)溶液洗層析柱至層析液無(wú)色，包括氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉、Na2CO3、碳酸鉀、氫氧化鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氫氧化鈣、磷酸氫鈣、碳酸氫鈣等溶液中的一種或幾種并且不僅限于以上溶液，然后至層析液pH中性時(shí)，用有機(jī)溶液洗脫，可采用包括乙醇、乙醚，乙酸乙酯，甲醇，甲苯，丙酮，氯仿等有機(jī)溶液中的一種或幾種并不限于以上溶液，至無(wú)皂苷反應(yīng)，洗脫液勻速過(guò)精致樹(shù)脂層析柱，收集流出液，靜置12-36小時(shí)，過(guò)濾，濃縮，獲透明淺黃色麥冬提取液，干燥，得麥冬有效部位干提取物，麥冬皂苷以麥冬皂苷Ra計(jì)含量≥50％。
三、凍干粉針劑的制備稱(chēng)取人參皂苷、麥冬提取物，在無(wú)菌條件下，加水使溶解，備用。另稱(chēng)取計(jì)算好的輔料(輔料的選擇是粉針劑常用輔料)置無(wú)菌容器中，加水使溶解。兩種溶液在輕輕攪拌下充分混勻，再加水補(bǔ)足至500-1000ml。經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾除菌后，分裝于已滅菌的凍干西林瓶中，2-20ml/支，冷凍干燥，壓塞、壓蓋，即得。
四、大輸液的制備稱(chēng)取人參皂苷和麥冬皂苷后按常規(guī)制備大輸液的工藝方法制成參麥大輸液。
五、小水針的制備稱(chēng)取人參皂苷和麥冬皂苷后按常規(guī)制備水針的工藝方法制成參麥注射液。
實(shí)施例2本發(fā)明藥物凍干粉針劑的制備1、處方實(shí)施例1制備的人參皂苷 6g實(shí)施例1制備的麥冬皂苷 0.6g輔料100g注射用水 加至 500ml2、制法精密稱(chēng)取上述人參皂苷、麥冬提取物，在無(wú)菌條件下，加水使溶解，備用。另稱(chēng)取計(jì)算好的輔料(輔料的選擇是粉針劑常用輔料)置無(wú)菌容器中，加水使溶解。兩種溶液在輕輕攪拌下充分混勻，再加水補(bǔ)足至500-1000ml。經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾除菌后，分裝于已滅菌的凍干西林瓶中，2-20ml/支，冷凍干燥，壓塞、壓蓋，即得。
實(shí)施例3本發(fā)明藥物凍干粉針劑的制備處方實(shí)施例1制備的人參皂苷 24g實(shí)施例1制備的麥冬皂苷 0.6g輔料 150g注射用水 加至 1000ml按實(shí)施例2的方法制備。
實(shí)施例4本發(fā)明藥物凍干粉針劑的制備處方實(shí)施例1制備的人參皂苷 15g
實(shí)施例1制備的麥冬皂苷 1g輔料 120g注射用水 加至 800ml按實(shí)施例2的方法進(jìn)行制備。
實(shí)施例5凍干粉針劑的制備處方實(shí)施例1制備的人參皂苷 9g實(shí)施例1制備的麥冬皂苷 1.5g輔料 100g注射用水 加至 800ml按實(shí)施例2的方法進(jìn)行制備。
實(shí)施例6注射液的制備按實(shí)施例2的配比稱(chēng)取人參皂苷和麥冬皂苷后按常規(guī)制備注射液的工藝方法制成2ml，4ml，10ml的參麥注射液。
實(shí)施例7大輸液的制備按實(shí)施例4的配比稱(chēng)取人參皂苷和麥冬皂苷后按常規(guī)制備大輸液的工藝方法制成250ml或500ml參麥大輸液。
實(shí)施例8本發(fā)明藥物質(zhì)量控制方法本發(fā)明藥物制劑建立了一套完整的質(zhì)量控制方法。內(nèi)容包括性狀、鑒別(薄層色譜對(duì)照品法)、檢查(pH值、熱原、不溶性微粒、有關(guān)物質(zhì)、裝量差異、無(wú)菌)和含量測(cè)定(紅參總皂苷和麥冬皂苷)等檢查項(xiàng)目。并且還制訂了本發(fā)明藥物的指紋圖譜，標(biāo)準(zhǔn)圖譜見(jiàn)圖1色譜條件采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，乙腈-水(21∶79)為流動(dòng)相，流速每分鐘1.1ml，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，柱溫25度。
以參照物人參皂苷Re對(duì)應(yīng)的色譜峰(S)的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)％峰面積為1，計(jì)算各指紋峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)％峰面積比值。供試品指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所附的指紋圖譜模式標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相似度計(jì)算軟件計(jì)算，相似度應(yīng)大于0.9。
實(shí)施例9大輸液的制備按實(shí)施例3的配比稱(chēng)取人參皂苷和麥冬皂苷后按常規(guī)制備50ml或100ml或200ml大輸液的工藝方法制成參麥大輸液，并通過(guò)質(zhì)量檢測(cè)合格。
以上實(shí)施例僅為了對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明，而本發(fā)明的范圍不受所舉實(shí)施例的局限。
以下通過(guò)藥效學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明藥物的有益效果。
試驗(yàn)例1本發(fā)明藥物回陽(yáng)救逆試驗(yàn)抗休克作用試驗(yàn)研究本發(fā)明藥物注射劑對(duì)失血性休克貓和內(nèi)毒素休克大鼠進(jìn)行主要藥效學(xué)試驗(yàn)研究結(jié)果表明本發(fā)明藥物注射劑40mg/kg可明顯提高失血性休克貓的頸動(dòng)脈收縮壓、舒張壓(SBP、DBP)及左心室壓(LVP)，在給藥30分鐘后即有明顯作用，并可持續(xù)至90分鐘后，其提高心室去極化波(QRS)振幅在給藥后90分鐘作用最明顯。在給本發(fā)明藥物注射劑40mg/kg后10分鐘即可提高左心室等容期壓力最大變化速率(±dp/dt)，其作用可持續(xù)90分鐘以上。本發(fā)明藥物注射劑60mg/kg對(duì)內(nèi)毒素休克大鼠的頸動(dòng)脈血壓(SBP、DBP)、左心室壓(LVP)及其最大變化速率(±dp/dt)在給藥10分鐘后即有明顯提升作用，并可持續(xù)60分鐘以上，供試本發(fā)明藥物注射劑(凍干)與參麥注射液在同等劑量下相比較，上述各項(xiàng)作用均相似，無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但本發(fā)明藥物注射劑提升血壓作用時(shí)間較參麥注射液持久。
注射用本發(fā)明注射劑對(duì)犬結(jié)扎冠脈所致的心肌缺血的影響采用結(jié)扎犬左冠狀動(dòng)脈前降支造成犬心肌缺血模型，動(dòng)物隨機(jī)分四組。第一組給予本發(fā)明藥物注射劑骨架劑，第二組給予生脈注射液(華西醫(yī)科大學(xué)藥廠(chǎng))，第三組給予小劑量本發(fā)明藥物注射劑，第四組給予大劑量本發(fā)明藥物注射劑，來(lái)觀(guān)察供試本發(fā)明藥物注射劑，結(jié)果表明，給生脈注射液或本發(fā)明藥物注射劑藥物的動(dòng)物比起骨架劑組的動(dòng)物，其缺血后的心肌功能和心臟作功能力得到明顯改善和提高，外周阻力降低；血中的磷酸肌酸激酶活性和乳酸脫氫酶活性均降低；心電圖顯示缺血得到改善，心肌缺血組織范圍減少。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，表明本發(fā)明藥物注射劑有改善心肌缺血的作用，這種藥效作用與用藥劑量大小有關(guān)。
試驗(yàn)例2本發(fā)明藥物注射劑對(duì)心氣不足的標(biāo)本兼治試驗(yàn)本發(fā)明藥物注射劑對(duì)犬血流動(dòng)力學(xué)及心肌氧耗量的影響試驗(yàn)供試本發(fā)明藥物注射劑按50、25、12.5mg/kg分別給予各組麻醉犬后，其心率及血壓均無(wú)明顯影響。但50、25mg/kg組可見(jiàn)冠脈流量逐漸增加，30分鐘達(dá)高峰，60分鐘時(shí)仍有明顯作用，冠脈阻力也呈現(xiàn)同步的下降變化，上述變化與陽(yáng)性對(duì)照組參麥注射液類(lèi)似。大中劑量組的本發(fā)明藥物注射劑能明顯升高左室內(nèi)壓和左室內(nèi)壓最大上升速率及左室內(nèi)壓下降速率(但對(duì)左室舒張末期壓無(wú)明顯影響)，明顯增加心輸出量及左室作功。本發(fā)明藥物注射劑大中劑量還能明顯降低心肌耗氧量，但對(duì)耗氧指數(shù)及氧利用率無(wú)明顯影響。本發(fā)明藥物注射劑還顯示顯著降低外周血管阻力的作用。
本發(fā)明藥物注射劑對(duì)體外心肌細(xì)胞缺血培養(yǎng)的改善作用對(duì)培養(yǎng)成功的心肌細(xì)胞給予缺O(jiān)2和缺糖培養(yǎng)，造成心肌細(xì)胞發(fā)生缺O(jiān)2和缺營(yíng)養(yǎng)損傷。在缺O(jiān)2和缺糖培養(yǎng)細(xì)胞的同時(shí)第一組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入本發(fā)明藥物注射劑骨架劑，第二組加入生脈注射液，第三組加入小劑量本發(fā)明藥物注射劑，第四組加入中劑量本發(fā)明藥物注射劑，第五組加入大劑量本發(fā)明藥物注射劑。培養(yǎng)4小時(shí)后，加入本發(fā)明藥物注射劑或生脈注射液的心肌細(xì)胞釋放出的乳酸脫氫酶(LDH)明顯少于骨架劑對(duì)照組。心肌細(xì)胞受損的百分率也明顯少于骨架劑對(duì)照組。結(jié)果表明，供試本發(fā)明藥物注射劑有明顯的抗缺O(jiān)2和缺糖對(duì)心肌細(xì)胞的損傷作用。這種藥效作用具有量效關(guān)系。
試驗(yàn)例3本發(fā)明藥物注射劑主要藥效學(xué)輔助試驗(yàn)本發(fā)明藥物注射劑對(duì)大鼠的動(dòng)—靜脈短路血栓形成的影響用建立大鼠右頸動(dòng)脈與左頸靜脈的短路模型，并在短路的聚乙烯管內(nèi)放置一條手術(shù)絲線(xiàn)觀(guān)測(cè)在絲線(xiàn)上血栓形成。動(dòng)物隨機(jī)分五組，第一組給予本發(fā)明藥物注射劑骨架劑；第二組給予生脈注射液；第三組給予小劑量本發(fā)明藥物注射劑，第四組給予中劑量本發(fā)明藥物注射劑；第五組給予大劑量本發(fā)明藥物注射劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)給予了供試本發(fā)明藥物注射劑和生脈注射液的大鼠，其血栓明顯小于骨架劑組。即本發(fā)明藥物注射劑(凍干)有抗血栓形成的作用，這種藥效作用與本發(fā)明藥物注射劑劑量大小有關(guān)，本發(fā)明藥物注射劑劑量大則抑制血栓形成的作用強(qiáng)。
本發(fā)明藥物注射劑對(duì)大鼠腸系膜微循環(huán)的影響試驗(yàn)在固定腸系膜于微循環(huán)分析系統(tǒng)下，滴加去甲腎上腺素造成微循環(huán)障礙的動(dòng)物模型，來(lái)觀(guān)察藥物對(duì)大白鼠腸系膜微循環(huán)作用的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)本發(fā)明藥物注射劑能使滴加了去甲腎上腺素的大鼠腸系膜微循環(huán)恢復(fù)到正常時(shí)間縮短，使滴加了去甲腎上腺素大鼠腸系膜微動(dòng)脈管徑開(kāi)放程度加大。即本發(fā)明藥物注射劑有明顯改善微循環(huán)作用，中劑量本發(fā)明藥物注射劑(凍干)的改善微循環(huán)作用強(qiáng)度與生脈注射液組相同。本發(fā)明藥物注射劑改善微循環(huán)的藥效作用有量效關(guān)系。
試驗(yàn)例4本發(fā)明藥物急性毒理學(xué)試驗(yàn)供試本發(fā)明藥物注射劑對(duì)昆明種小鼠和大鼠(SD)的急性毒理試驗(yàn)研究結(jié)果表明，用Bliss計(jì)算求得本發(fā)明藥物注射劑對(duì)昆明種小鼠靜脈注射的LD50及其95％的可信限為82.72±(91.35-74.90)g生藥/kg，相當(dāng)于人參皂苷496.3±(548.1-449.4)mg/kg，為臨床使用劑量的496倍；用Bliss法求得本發(fā)明藥物注射劑對(duì)SD大鼠靜脈注射的LD50及其95％的可信限為36.2±(34.16-38.36)g生藥/kg，相當(dāng)于人參皂苷217.2±(205.2-225.2)mg/kg，為臨床使用劑量的217倍。這說(shuō)明本品安全性較好。
死亡動(dòng)物大多發(fā)生在注射后20分鐘以?xún)?nèi)，死亡前出現(xiàn)活動(dòng)減少，發(fā)紺，呼吸先于心跳停止，死因?yàn)槊黠@的呼吸抑制，可見(jiàn)到由呼吸急促到呼吸困難，進(jìn)而產(chǎn)生死亡的全身痙攣現(xiàn)象。
試驗(yàn)例5本發(fā)明藥物動(dòng)物長(zhǎng)期毒理學(xué)試驗(yàn)本發(fā)明藥物注射劑以400mg/kg/day、180mg/kg/day、80mg/kg/day(分別相當(dāng)于臨床擬用劑量的200、90、40倍)、輔料液20ml/kg/day和同體積的氯化鈉注射液，每天一次，連續(xù)8周的犬長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明Beagle犬靜脈滴注輔料液20ml/kg/day 4周和8周后，均未見(jiàn)臨床癥狀異常，體重、心電圖、血液學(xué)、血液生化、尿液等指標(biāo)與正常對(duì)照組均無(wú)明顯差異。
Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑400mg/kg/Day 2周后，2條犬在滴注藥液后約20分鐘出現(xiàn)短時(shí)嘔吐和流涎，持續(xù)約10分鐘左右即恢復(fù)；有4條犬?dāng)z食量減少、精神狀況較差；2、3天后，其中兩條犬?dāng)z食量和精神狀況基本恢復(fù)正常；另兩條犬?dāng)z食量持續(xù)減少，精神狀況一直較差；給藥后第34天，一條犬臥地不起，呼吸困難，在抽血和測(cè)心電圖后不久死亡；在整個(gè)給藥期間，有一條犬外觀(guān)癥狀一直較差；高劑量組其他4條犬和其他各組犬均無(wú)明顯異常臨床表現(xiàn)；從給藥后第4周起，高劑量組犬的體重開(kāi)始有所減輕，并一直持續(xù)減輕；其他兩給藥組與輔料組的體重增長(zhǎng)均無(wú)明顯差異。給藥4周后，Hb、ALP、ALT值明顯高于輔料組；給藥8周后，WBC、ALP、ALT、BUN、Crea均明顯高于輔料組。給藥4周后，2條犬尿液的BLD由“-”變成“±”和“++”。給藥8周后，肝臟、脾臟、腎臟系數(shù)均明顯大于輔料組。病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)5條犬中3條腎臟有病變。給藥8周后，骨髓象均出現(xiàn)不同程度紅細(xì)胞系統(tǒng)增生，粒/紅比下降，以中幼紅增生為主，無(wú)核紅細(xì)胞大小不均、畸形；粒系雖減少，但各階段細(xì)胞未見(jiàn)增生不良。除以上變化外，其他各項(xiàng)觀(guān)察檢測(cè)指標(biāo)與輔料組均無(wú)明顯差異。
Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑180mg/kg/Day4周后，WBC、、ALT明顯高于輔料組；給藥8周后，WBC、ALT明顯高于輔料組。骨髓象均出現(xiàn)不同程度紅細(xì)胞系統(tǒng)增生，粒/紅比下降，以中幼紅增生為主，無(wú)核紅細(xì)胞大小不均、畸形；粒系雖減少，但各階段細(xì)胞未見(jiàn)增生不良。除以上變化外，其他各項(xiàng)觀(guān)察檢測(cè)指標(biāo)與輔料組均無(wú)明顯差異。Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑80mg/kg/Day 4和8周后，各項(xiàng)觀(guān)察檢測(cè)指標(biāo)與輔料組均無(wú)明顯差異。
在停藥2周的觀(guān)察期中，各組動(dòng)物的外觀(guān)癥狀、攝食、體重增長(zhǎng)等均無(wú)明顯異常；停藥2周后，各給藥組的心電圖、血液學(xué)、血液生化、尿液、臟器系數(shù)(除高劑量組犬的肝臟和腎臟系數(shù)仍明顯大于輔料組外)和骨髓檢查的各項(xiàng)指標(biāo)與輔料對(duì)照組均無(wú)明顯差異；病理檢查各臟器也未見(jiàn)有明顯差異。
結(jié)果顯示，Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑400mg/kg/Day(臨床擬用劑量的200倍)后，ALP、ALT、BUN、Crea均明顯高于輔料組；2條犬尿液的BLD由“-”變成“±”和“++”；肝臟、腎臟系數(shù)均明顯大于輔料組。病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)5條犬中3條腎臟有病變；表明肝、腎功能明顯受損。Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑180mg/kg/Day(臨床擬用劑量的90倍)8周后，也出現(xiàn)類(lèi)似高劑量組的毒性反應(yīng)，但程度較輕。Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑80mg/kg/Day(臨床擬用劑量的40倍)8周后，未見(jiàn)任何明顯的毒性反應(yīng)。
結(jié)果提示，Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑8周后，主要毒性靶器官是肝、腎功能明顯受損，損傷程度與劑量有關(guān)；但損傷是可逆的，停藥2周后，可基本恢復(fù)。Beagle犬靜脈滴注本發(fā)明藥物注射劑8周的無(wú)毒性劑量為80mg/Kg，為臨床擬用劑量的40倍，說(shuō)明臨床擬用劑量基本上是安全的。
本發(fā)明藥物注射劑大鼠腹腔注射給藥長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)本發(fā)明藥物注射劑以150、75、37.5mg/kg/day三個(gè)劑量組分別給大鼠連續(xù)腹腔注射給藥12周的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明各劑量組動(dòng)物一般行為表現(xiàn)正常，生長(zhǎng)良好，動(dòng)物體重隨時(shí)間而增長(zhǎng)，與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；血液學(xué)和血液生化學(xué)指標(biāo)均屬正常，與空白對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；各組動(dòng)物大體解剖觀(guān)察未見(jiàn)明顯異常，各組臟器系數(shù)與空白對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，各主要臟器病理學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)藥物引起的病理變化。停藥3周后，以上各項(xiàng)檢查項(xiàng)目也未發(fā)現(xiàn)異常變化，未見(jiàn)延遲性毒性反應(yīng)。上述結(jié)果表明本發(fā)明藥物注射劑連續(xù)腹腔注射給藥12周的無(wú)毒反應(yīng)劑量為150mg/kg/day，是臨床劑量的75倍。
本發(fā)明藥物注射劑的一般安全性試驗(yàn)對(duì)本發(fā)明藥物注射劑全身主動(dòng)和被動(dòng)過(guò)敏反應(yīng)進(jìn)行了試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物注射劑高、中、低劑量組及骨架劑均未引起全身主動(dòng)和被動(dòng)過(guò)敏皮膚反應(yīng)，同時(shí)對(duì)本發(fā)明藥物注射劑進(jìn)行了肌肉和血管刺激實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)肌肉和血管無(wú)刺激。
試驗(yàn)例6本發(fā)明藥物原料配比篩選試驗(yàn)通過(guò)本發(fā)明藥物注射劑對(duì)內(nèi)毒素休克大鼠左心室內(nèi)壓(lVP)的影響試驗(yàn)，證明本發(fā)明藥物的最佳配比合理，并且人參和麥冬聯(lián)合用藥具有較好的協(xié)同增效作用。
實(shí)驗(yàn)藥品選用申請(qǐng)人自制的各種配比的凍干粉針，每60mg相當(dāng)于原生藥材2g，采用骨架劑作為空白對(duì)照。
儀器四道生理記錄儀rm-6000動(dòng)物SD大鼠50只，雌雄各半，體重200-300g，健康一級(jí)。
方法大鼠ip異戊巴比妥鈉80mg/kg麻醉后，分離右側(cè)股靜脈及股動(dòng)脈，故靜脈插入塑料導(dǎo)管連于三通供注射給藥，iv肝素3mg/只抗凝，股動(dòng)脈插管記錄血壓，(血壓換能計(jì)tp200t，載波放大器Ap601G，血壓數(shù)字顯示計(jì)AP611G)，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，從右側(cè)頸總動(dòng)脈插入自制塑料導(dǎo)管入左心室腔記錄左心室內(nèi)壓(lvp)，再經(jīng)微分器(EQ601G)測(cè)定左室內(nèi)壓最大變化速率(dp/dt max，min)，上述指標(biāo)同步記錄于四道生理記錄儀。術(shù)畢穩(wěn)定30分鐘，記錄各項(xiàng)正常指標(biāo)，然后經(jīng)股靜脈注入大腸桿菌內(nèi)毒素0111B435mg/kg(容積為1ml/只，每次注完后沖入NS 0.5ml)，當(dāng)血壓下降至正常2/3時(shí)，立即iv給與受試藥物，并測(cè)定給藥后10，30，60分鐘各項(xiàng)指標(biāo)，并以不同觀(guān)察時(shí)間點(diǎn)的實(shí)測(cè)值進(jìn)行組間t檢測(cè)，判斷其顯著性，結(jié)果見(jiàn)表1。
試驗(yàn)結(jié)果表1 藥物對(duì)內(nèi)毒素休克大鼠左心室內(nèi)壓(LVP)的影響(X±S，n＝10)

注與對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由表可見(jiàn)，本發(fā)明藥物注射劑注射后10分鐘即可顯著增加內(nèi)毒素休克大鼠的左心室收縮力，采用本發(fā)明配比的本發(fā)明藥物注射劑比較其他配比的本發(fā)明藥物注射劑增加內(nèi)毒素休克大鼠左心室收縮力作用強(qiáng)，并且人參皂苷和麥冬皂苷聯(lián)用比較單獨(dú)使用的作用更明顯，具有協(xié)同增效的作用。
本發(fā)明藥物將原料人參、麥冬采用水煮提取、大孔吸附樹(shù)脂吸附分離和乙醇精制新工藝，具有生產(chǎn)成本低，制備的紅參有效部位以人參皂苷Re計(jì)，其總皂苷含量不低于70％；麥冬有效部位以麥冬皂苷Ra計(jì)，其總皂苷含量不低于50％；并且對(duì)君藥紅參還建立了有效成分人參皂苷Rg1和Re定量質(zhì)量控制指標(biāo)。本發(fā)明藥物強(qiáng)心作用最大特點(diǎn)是在具有增強(qiáng)心臟功能作用同時(shí)，還能明顯降低冠脈阻力和外周血管阻力，增加冠脈流量，表現(xiàn)為對(duì)耗氧指數(shù)及氧利用率無(wú)明顯影響。具有明顯的抗休克作用，其提升血壓作用時(shí)間較參麥注射液持久。具有改善微循環(huán)作用。具有改善心肌缺血作用。對(duì)靜脈血栓形成具有明顯抑制作用。具有生產(chǎn)技術(shù)先進(jìn)、可控，制劑幾乎無(wú)色素雜質(zhì)，毒性更低、安全性更高，急性毒性為人體正常用量的200倍，特別是采用了微孔濾膜過(guò)濾除菌和凍干技術(shù)，能有效避免皂苷等有效成分水解，制劑穩(wěn)定性高，可控性強(qiáng)，為臨床提供了一種新的選擇。
權(quán)利要求
1.一種治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的活性成分制備而成的注射劑人參皂苷0.1份-100份、麥冬皂苷0.1份-100份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的活性成分制備而成的注射劑人參皂苷0.1-25份、麥冬皂苷0.1-25份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于所述的注射劑是注射液、粉針劑、靜脈滴液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于所述的注射劑的指紋圖譜如圖1所示。
5.一種制備治療權(quán)利要求1所述的心血管疾病的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取紅參加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加8-20倍的水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加8-20倍的水煮沸后保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，離心除去沉淀物得人參水提液；取麥冬加水煮沸后保溫1-4小時(shí)，過(guò)濾；藥渣加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-2小時(shí)，過(guò)濾；藥渣再加15-30倍的水煮沸后在50-95℃保溫1-3小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，高速離心除去沉淀物得麥冬水提液；b、純化、干燥將a步驟制備的人參提取物、麥冬水提液采用大孔樹(shù)脂、結(jié)晶、超濾、分子蒸餾或膜分離進(jìn)行分離純化，得到人參和麥冬有效部位干提取物，人參提取物中人參皂苷以人參皂苷Re計(jì)，重量百分比不低于70％；麥冬提取物中麥冬皂苷以麥冬皂苷Ra計(jì)，重量百分比不低于50％；c、將b步驟制備的提取物按下述重量配比混合，加入注射劑用附加劑，制備成注射劑人參皂苷0.1份-100份、麥冬皂苷0.1份-100份。
6.權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備抗休克的藥物中的用途。
7.權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備改善微循環(huán)、心肌缺血的藥物中的用途。
8.權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療冠心病、心肌炎、靜脈血栓的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種心血管疾病的藥物組合物，它是由人參皂苷、麥冬皂苷為活性成分加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的注射劑。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法。本發(fā)明藥物原料人參皂苷、麥冬皂苷發(fā)揮了協(xié)同增效的作用，且制劑穩(wěn)定性高，可控性強(qiáng)，為臨床提供了一種新的選擇。
文檔編號(hào)A61K9/14GK1895540SQ20051002125
公開(kāi)日2007年1月17日 申請(qǐng)日期2005年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月13日
發(fā)明者曾雁鳴, 銀海, 孫繼林 申請(qǐng)人:成都迪康藥物研究所