專利名稱：一種安神口服液體制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種由中藥材靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g和甘草50g制成的安神口服液體制劑的質(zhì)量控制方法，特別涉及用高效液相色譜法測(cè)定該藥物中甘草酸的含量和用薄層色譜法鑒別中藥材白術(shù)、首烏藤以及仙鶴草的安神口服液體制劑質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(中成藥成方制劑)第六冊(cè)(WS3-B-1130-92)公布了治療貧血體虛，頭昏，失眠等疾病的安神糖漿，該藥物配方由靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g組成，上述原料共制成糖漿1000ml。上述標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容沒有說明安神糖漿的質(zhì)量控制方法。
中藥制劑長(zhǎng)期以來，質(zhì)量難以有效控制，有效控制中藥產(chǎn)品的質(zhì)量是一個(gè)重大的課題，現(xiàn)有技術(shù)中采用的方法不完整，少數(shù)針對(duì)性不強(qiáng)，使用這些方法難以達(dá)到真正控制質(zhì)量的目的。以上安神糖漿該制劑由于缺少質(zhì)量控制方法，難以控該制劑的質(zhì)量；給正常的生產(chǎn)經(jīng)營帶來了困難，利用已知的一些技術(shù)難以對(duì)該制劑產(chǎn)品提供好的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，采用新的手段對(duì)安神口服液體制劑的質(zhì)量進(jìn)行控制，特別是采用用高效液相色譜法測(cè)定該藥物中甘草酸的含量和用薄層色譜法鑒別成品中中藥材白術(shù)、首烏藤以及仙鶴草，解決了該制劑質(zhì)量控制的難題。本發(fā)明針對(duì)安神口服液體制劑的特點(diǎn)以及本發(fā)明配方，提供了一種實(shí)用的質(zhì)量控制方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種安神口服液體制劑的質(zhì)量控制方法，以保證該制劑在生產(chǎn)過程中對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，完善質(zhì)量監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的準(zhǔn)確性。
本發(fā)明是針對(duì)安神口服液體制劑提出質(zhì)量控制方法的，所述安神口服液體制劑包括安神糖漿、安神口服液及任何一種用以下配方制備的口服液體制劑。
靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g。
本發(fā)明所述安神口服液體制劑，其制備方法可以采用以下方法通過將上述配方的中藥原料經(jīng)過提取或其他方式加工，制成藥物活性物質(zhì)，隨后，以該物質(zhì)為原料，需要時(shí)加入藥物可接受的載體，按照制劑學(xué)的常規(guī)技術(shù)制成膠囊、顆粒劑、片劑。所述活性物質(zhì)可以通過選自以下方式的方法得到，如通過粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過篩、滲漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、層析等方法得到、這些活性物質(zhì)可以是浸膏形式的物質(zhì)，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根據(jù)制劑的不同需要決定制成不同的濃度。
本發(fā)明的安神口服液體制劑，在制成制劑時(shí)根據(jù)需要可以加入藥物可接受的載體，這些載體可以是任何適合制成安神口服液體制劑的載體，如苯甲酸或鉀鹽、甘露醇、山梨醇、山梨酸或鉀鹽、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、尼泊爾甲酯、尼泊爾乙酯、尼泊爾丙酯、尼泊爾丁酯、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素A、維生素C、維生素E、維生素D、氮酮、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、土溫60-80、司盤-80、蜂蠟、羊毛脂、液體石蠟、十六醇、沒食子酸酯類、瓊脂、三乙醇胺、堿性氨基酸、尿素、尿囊素、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料等。
本發(fā)明的安神口服液體制劑，優(yōu)選的是經(jīng)過如下方法制備的其中安神糖漿制法為以上八味中藥材，靈芝加水煎煮二次，第一次5小時(shí)，第二次3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用；其余白術(shù)等七味，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用。另取蔗糖264g，加水適量，煮沸溶解后，濾過，與上述兩種濃縮液混勻，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.10(90℃)，放冷，加入苯甲酸鈉3g，加水稀釋至1000ml，攪勻，即得。
其中安神口服液制法為以上八味，靈芝加水煎煮二次，第一次5小時(shí)，第二次3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用；其余白術(shù)等七味，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用。加單糖漿264ml、苯甲酸鈉2.59，與上述兩種濃縮液混勻，加水至1000ml，攪勻，濾過，灌封，每袋容量為10ml，即得。
本發(fā)明的安神口服液體制劑，其中藥配方中，部分中藥可以用同等作用的中藥進(jìn)行替換，替換后療效不會(huì)改變。
本發(fā)明通過下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)其一用高效液相色譜法測(cè)定安神口服液體制劑中甘草酸的含量；其二用薄層色譜法鑒別安神口服液體制劑中的中藥材白術(shù)、首烏藤和仙鶴草。
具體的安神口服液體制劑的質(zhì)量控制方法，可以通過以下步驟予以實(shí)現(xiàn)
用高效液相色譜法測(cè)定安神口服液體制劑中甘草酸的含量的步驟甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液的配制，安神口服液體制劑樣品溶液的配制，用高效液相色譜儀測(cè)定以上溶液，得色譜圖，繪制對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)安神口服液體制劑樣品峰面積，和標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算該樣品中甘草酸單銨鹽的含量。
具體測(cè)定步驟如下試驗(yàn)儀器、試藥、試劑島津LC-10ATvp高效液相色譜儀，LC-10ATvp輸液泵；SPD-M10Avp二級(jí)陣列檢測(cè)器；SCL-10Avp系統(tǒng)控制器；CTO-10ASvp恒溫柱箱；CLASS-VP6.1工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；微量進(jìn)樣器(25μl)，HAMILTON公司。
甘草酸單銨鹽對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)0731-200204)。甲醇(色譜純)、醋酸銨(分析純)、冰醋酸(分析純)、注射用水。
照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定甘草酸單銨鹽的含量包括以下步驟a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液；檢測(cè)波長(zhǎng)為250±3nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
b.對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品適量，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
c.供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(0.45μm)，即得。
d.測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定；上述色譜條件流動(dòng)相的數(shù)值范圍可選取為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液(26-53∶58-69)，優(yōu)選比例為睛-2.5％冰醋酸水溶液(37∶63)；對(duì)照品溶液的制備最好精密稱取甘草酸單銨鹽對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，使得每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.2-0.3mg，折合甘草酸為0.1959-0.2939mg；供試品溶液的制備最好取上清液濾過0.45μm；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液5-10μl注入色譜儀，測(cè)定，即得。本品每1ml含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于0.50mg。
本發(fā)明的質(zhì)量控制方法中，用薄層色譜法鑒別安神口服液體制劑中的中藥材白術(shù)、首烏藤和仙鶴草的步驟如下
薄層色譜法鑒別中藥材白術(shù)(中國藥典2000年版一部附錄VI B)的步驟a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材，加乙醇回流提取，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀崛芙?，用水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓鳛閷?duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品，置水浴上蒸至適量，加乙醇，攪拌，靜置，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀崛芙?，用醋酸乙酯提取，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，濾過，濾液作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。
上述該白術(shù)薄層鑒別樣品的處理可采用醋酸乙酯提取，展開劑為正丁醇-丙酮-水-冰醋酸，正丁醇-丙酮-水-冰醋酸比例(7∶2∶1∶1)為最佳，顯色劑為茚三酮試液最佳。
薄層色譜法鑒別中藥材首烏藤(中國藥典2000年版一部附錄VI B)的步驟a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材，加入無水乙醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為?duì)照藥材溶液。
b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液。
c.供試品溶液的制備取本品，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤骸?br> d.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液，對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視。
上述該首烏藤薄層鑒別樣品的處理可采用無水乙醇提取，展開劑為正己烷-醋酸乙酯-甲酸，正己烷-醋酸乙酯-甲酸比例(30∶10∶0.5)為最佳，在紫外光燈(365nm)下顯色為最佳。
薄層色譜法鑒別中藥材仙鶴草(中國藥典2000年版一部附錄VI B)的步驟a.供試品溶液的制備取本品，加水，用乙醚提取，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值，用醋酸乙酯提取，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?使溶解，作為供試品溶液。
b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材，加水加熱至沸，并保持微沸，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液，對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鐵乙醇溶液。
上述該仙鶴草薄層鑒別樣品的處理可依次采用乙醚和醋酸乙酯提取，并加鹽酸調(diào)節(jié)水溶液pH值至2；展開劑為氯仿-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲酸乙酯-甲酸比例(5∶5∶1)為最佳，顯色劑為1％的三氯化鐵乙醇溶液最佳。
優(yōu)選中藥材白術(shù)薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)鑒別按下列步驟進(jìn)行a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材1-3g，加乙醇40-100ml回流提取1-1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-50ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取1-3次，每次10-30ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品10-50ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇15-40ml，攪拌，靜置1-2小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0-30ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取2-4次，每次15-20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取2-4次，每次15-20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?-6ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
優(yōu)選中藥材首烏藤薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)鑒別按下列步驟進(jìn)行a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1-0.2g，加入無水乙醇15-20ml，超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.8-1.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
c.供試品溶液的制備取本品5-10ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇10-30ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液。
d.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液5-10μl，對(duì)照品溶液0.5-2.5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
優(yōu)選中藥材仙鶴草薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)鑒別按下列步驟進(jìn)行a.供試品溶液的制備取本品5-10ml，加水10-30ml，用乙醚提取1-3次，每次10-25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-3，用醋酸乙酯提取1-2次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液。
b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材1.0-2.0g，加水100-200ml加熱至沸，并保持微沸1.5-2.5小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取1-3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液6-12μl，對(duì)照藥材溶液5-10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
更優(yōu)選中藥材白術(shù)薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)鑒別按下列步驟進(jìn)行a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材1.5g，加乙醇50ml回流提取1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品20ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇30ml，攪拌，靜置1小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
C.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
更優(yōu)選中藥材首烏藤薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)鑒別按下列步驟進(jìn)行a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1g，加入無水乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.再取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
c.供試品溶液的制備取本品5ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
d.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液8μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
更優(yōu)選中藥材仙鶴草薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)鑒別按下列步驟進(jìn)行a.供試品溶液的制備取本品5ml，加水15ml，用乙醚提取3次，每次25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材2.0g，加水150ml加熱至沸，并保持微沸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
C.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液6μl，對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明提供了白術(shù)、首烏藤和仙鶴草的TCL鑒別。增加了對(duì)制劑中甘草酸含量的質(zhì)量檢測(cè)方法，多次重復(fù)試驗(yàn)，確認(rèn)本質(zhì)量控制方法較為穩(wěn)定、簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性良好?？勺鳛榭诜苿┵|(zhì)量控制和考察工藝的穩(wěn)定性的指標(biāo)。
本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例供試品所用制劑均采用本發(fā)明實(shí)施例1所述的糖漿劑，可采用本發(fā)明實(shí)施例2所述的口服液，還可用與各個(gè)實(shí)施例中所述的制劑具有相同原料組成的其他制劑。
本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例一測(cè)定方法的方法學(xué)考察1線性關(guān)系考察1.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱取甘草酸單銨鹽對(duì)照品9.44mg，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.1888mg，折合甘草酸為0.1849mg)。
1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜(表1)，以峰面積A(μV·s)對(duì)質(zhì)量數(shù)x(μg)進(jìn)行線性回歸計(jì)算，得線性回歸方程為A＝545709.30×X-6565.30，r＝0.9999()，精密量取對(duì)照品溶液5μl注入液相色譜儀，所得峰面積為497831，將一供試品溶液進(jìn)樣分析所得峰面積分別用回歸方程和一點(diǎn)法計(jì)算含量，結(jié)果的相對(duì)偏差為0.0318％，故本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)采用一點(diǎn)法計(jì)算含量。甘草酸線性范圍0.3698μg～1.849μg。
表1甘草酸線性關(guān)系考察


2精密度試驗(yàn)精密量取本品25ml，按本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備供試液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積(表2)。
表2制劑供試品中甘草酸的精密度試驗(yàn)

結(jié)果可見，該法精密度良好。
3重現(xiàn)性試驗(yàn)分別精密量取本品25ml，按本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備5份供試液，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果列入表3，甘草酸平均含量為0.9392mg/ml，RSD為1.58％。結(jié)果可見，該法重現(xiàn)性良好。
表3制劑供試品中甘草酸的重現(xiàn)性試驗(yàn)

4.供試品溶液中甘草酸的穩(wěn)定性試驗(yàn)精密量取本品25ml，按本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備供試液，分別于0、2、4、6、8小時(shí)測(cè)定甘草酸峰面積(見表4)，結(jié)果表明，供試品溶液中甘草酸在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
表4制劑供試品中甘草酸的穩(wěn)定性試驗(yàn)

5.回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，分別精密量取5份已測(cè)定含量的樣品(平均含量為0.7514mg/ml)1.25ml，置10ml量瓶中，精密加甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.181mg，折合甘草酸為0.1773mg)5ml，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(0.45um)，制得供試液。分別精密吸取5ul注入液相色譜儀，記錄色譜，測(cè)定含量，計(jì)算回收率(結(jié)果見表5)，平均回收率為99.33％，RSD為2.03％。
表5供試品溶液中甘草酸測(cè)定回收率試驗(yàn)

6.樣品測(cè)定按本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制備供試品溶液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣5μl，記錄色譜，測(cè)定峰面積，按下式計(jì)算含量

式中Ai供試品溶液峰面積As對(duì)照品溶液峰面積Cs對(duì)照品(甘草酸)溶液濃度(mg/ml)10定容體積(ml)2.5取樣量(ml)根據(jù)嚴(yán)格按照生產(chǎn)工藝制備3批樣品，測(cè)定樣品中甘草酸含量，測(cè)定結(jié)果見表6。
表6 3批樣品中甘草酸含量測(cè)定結(jié)果

從三批含測(cè)的數(shù)據(jù)看，該制備工藝甘草酸的煎煮收率最小為50.39％，最大為54.80％，因此將收率低限暫定為50％，制劑中甘草酸含量限度計(jì)算如下甘草酸含量限度(mg/ml)＝制劑含甘草藥材(g/ml)×藥材含甘草酸限度(藥典規(guī)定)×制劑中甘草酸收率×103＝(50/1000)×2.0％×50％×103＝0.50mg/ml。故暫定本品每1ml含甘草以甘草酸計(jì)不得少于0.50mg。根據(jù)樣品測(cè)定結(jié)果，3批樣品中的甘草酸含量均在該限度范圍內(nèi)。
本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例二 對(duì)藥材的定性鑒別的研究藥材定性鑒別研究(1)以白術(shù)對(duì)照藥材鑒別方中白術(shù)藥材。方法一取本品，置水浴上蒸至近干，加醋酸乙酯超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。方法二取本品，置水浴上蒸至近干，加乙醇攪拌后靜置濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀崛芙?，用醋酸乙酯提取，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。同法分別制備缺白術(shù)藥材的陰性供試品溶液。另取白術(shù)對(duì)照藥材，分別按相應(yīng)方法制成對(duì)照藥材溶液。分別以氯仿-甲醇-冰醋酸(10∶1.5∶0.2)、正丁醇-丙酮-水(4∶3∶1)及正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開。結(jié)果表明，選用方法二，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑展開的分離度好，斑點(diǎn)顯色清晰，陰性對(duì)照無干擾(見

圖1)，方法重現(xiàn)性好，故列入本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
(2)以首烏藤對(duì)照藥材及大黃素對(duì)照品鑒別方中首烏藤藥材。取本品，蒸干，放冷，加無水乙醇超聲處理后濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。同法制備缺首烏藤藥材的陰性供試品溶液。另取首烏藤對(duì)照藥材0.1g，加入無水乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。再取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)及石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開。結(jié)果表明，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑展開的分離度好，斑點(diǎn)顯色清晰，陰性對(duì)照無干擾(見圖2)，重現(xiàn)性好，故列入本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
(3)以仙鶴草對(duì)照藥材鑒別方中仙鶴草藥材。方法一取本品，加水稀釋后用氯仿提取，合并提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。方法二取本品，加水稀釋，用乙醚提取，水層用鹽酸調(diào)pH1～2，加醋酸乙酯提取，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。方法三取本品，置水浴上蒸至近半，加乙醇攪拌后靜置濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀崛芙?，?％硫酸乙醇溶液置沸水浴上回流30分鐘，加水30ml，置水浴上蒸至約30ml，放冷，用乙醚提取，提取液加水洗滌，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。分別用相應(yīng)的方法制備缺仙鶴草藥材的陰性供試品溶液。另取仙鶴草對(duì)照藥材，分別用相應(yīng)的方法制備對(duì)照藥材溶液。分別以氯仿-甲醇-冰醋酸(9∶1∶0.5)、氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，噴以不同的顯色劑。結(jié)果表明，選用方法二，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑展開的分離度好，斑點(diǎn)顯色清晰，陰性對(duì)照無干擾(見圖3)，方法重現(xiàn)性好，故列入本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。
(4)方中靈芝和墨旱蓮藥材經(jīng)多次試驗(yàn)，均因陰性有干擾，分離度不好等因素未建立專屬的薄層色譜鑒別方法，故未列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文。另本品采用煎煮的提取工藝，不能將女貞子中熊果酸提出，且女貞子、合歡皮無對(duì)照藥材，故未建立專屬的薄層色譜鑒別方法。
具體實(shí)施例方式
以下通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1安神糖漿的質(zhì)量控制取中藥材靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g，上述原料，靈芝加水煎煮二次，第一次5小時(shí)，第二次3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用；其余白術(shù)等七味，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用。另取蔗糖264g，加水適量，煮沸溶解后，濾過，與上述兩種濃縮液混勻，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.10(90℃)，放冷，加入苯甲酸鈉3g，加水稀釋至1000ml，攪勻，濾過，灌裝，每袋容量10ml，即得。
性狀本品為棕黑色的粘稠液體；味甜而微苦。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2000年版一部附錄I H)。
1、用高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定甘草酸單銨鹽的含量?jī)x器、試劑、試藥島津LC-10ATvp高效液相色譜儀，LC-10ATvp輸液泵；SPD-M10Avp二級(jí)陣列檢測(cè)器；SCL-10Avp系統(tǒng)控制器；CTO-10ASvp恒溫柱箱；CLASS-VP6.1工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；微量進(jìn)樣器(25μl)，HAMILTON公司；甲醇(色譜純)、醋酸銨(分析純)、冰醋酸(分析純)、注射用水；甘草酸單銨鹽對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)0731-200204)。
a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙睛-2.5％冰醋酸水溶液(37∶63)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
b.對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.2mg，折合甘草酸為0.1959mg)。
c.供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(0.45μm)，即得。
d.測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每1ml含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于0.50mg。
2、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材白術(shù)
a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材(購自中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)22082-200305)1.5g，加乙醇50ml回流提取1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品20ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇30ml，攪拌，靜置1小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
C.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1g，加入無水乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。再取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
b.供試品溶液的制備取本品5ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液8μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
上述該首烏藤薄層鑒別樣品的處理可采用乙醇？，展開劑為正己烷-醋酸乙酯-甲酸，正己烷-醋酸乙酯-甲酸比例(30∶10∶0.5)為最佳，在紫外光燈(365nm)下顯色為最佳。
4、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材仙鶴草a.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材2.0g，加水150ml加熱至沸，并保持微沸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品5ml，加水15ml，用乙醚提取3次，每次25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液6μl，對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例2安神口服液的質(zhì)量控制取中藥材靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g，上述原料，靈芝加水煎煮二次，第一次5小時(shí)，第二次3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用；其余白術(shù)等七味，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用。加單糖漿264ml、苯甲酸鈉2.59，與上述兩種濃縮液混勻，加水至1000ml，攪勻，濾過，灌封，每袋容量為10ml，即得。
性狀本品為棕黑色的澄清液體；味甜而微澀。
檢查應(yīng)符合口服液項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2000年版一部附錄IC)。
1、用高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定甘草酸單銨鹽的含量?jī)x器、試劑、試藥島津LC-10ATvp高效液相色譜儀，LC-10ATvp輸液泵；SPD-M10Avp二級(jí)陣列檢測(cè)器；SCL-10Avp系統(tǒng)控制器；CTO-10ASvp恒溫柱箱；CLASS-VP6.1工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；微量進(jìn)樣器(25μl)，HAMILTON公司；甲醇(色譜純)、醋酸銨(分析純)、冰醋酸(分析純)、注射用水；甘草酸單銨鹽對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)0731-200204)。
a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙睛-2.5％冰醋酸水溶液(37∶63)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
b.對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.2mg，折合甘草酸為0.1959mg)。
c.供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(0.45μm)，即得。
d.測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每1ml含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于0.50mg。
2、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材白術(shù)
a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材(購自中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)22082-200305)1.5g，加乙醇50ml回流提取1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品20ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇30ml，攪拌，靜置1小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1g，加入無水乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。再取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
b.供試品溶液的制備取本品5ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液8μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
上述該首烏藤薄層鑒別樣品的處理可采用乙醇？，展開劑為正己烷-醋酸乙酯-甲酸，正己烷-醋酸乙酯-甲酸比例(30∶10∶0.5)為最佳，在紫外光燈(365nm)下顯色為最佳。
4、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材仙鶴草a.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材2.0g，加水150ml加熱至沸，并保持微沸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品5ml，加水15ml，用乙醚提取3次，每次25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液6μl，對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例3取靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g，制法性狀檢查皆與實(shí)施例1相同。其質(zhì)量控制方法為1、用高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定甘草酸單銨鹽的含量，可按以下步驟進(jìn)行a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液(26∶58)；檢測(cè)波長(zhǎng)為247nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
b.對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.2mg，折合甘草酸為0.1959mg)。
c.供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(0.45μm)，即得。
d.測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定；本品每1ml含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于0.50mg。
2、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材白術(shù)a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材1，加乙醇40ml回流提取1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取1次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品10ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇15ml，攪拌，靜置1小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次15ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取2次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1g，加入無水乙醇15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.8-1.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
c.供試品溶液的制備取本品5-10ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇10-30ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液。
d.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液5μl，對(duì)照品溶液0.5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
4、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材仙鶴草a.供試品溶液的制備取本品5ml，加水10ml，用乙醚提取1次，每次10ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，用醋酸乙酯提取1次，每次15ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。
b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材1.0g，加水100ml加熱至沸，并保持微沸1.5小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取1次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液6μl，對(duì)照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例4取靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g，制法性狀檢查皆與實(shí)施例2相同。其質(zhì)量控制方法為1、用高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定甘草酸單銨鹽的含量，可按以下步驟進(jìn)行a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液(53∶69)；檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
b.對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.3mg，折合甘草酸為0.2939mg)。
c.供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(0.45μm)，即得。
d.測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定；本品每1ml含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于0.50mg。
2、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材白術(shù)a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材3g，加乙醇100ml回流提取1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品50ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇40ml，攪拌，靜置2小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取4次，每次20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.2g，加入無水乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
c.供試品溶液的制備取本品10ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
d.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液10μl，對(duì)照品溶液2.5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
4、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材仙鶴草a.供試品溶液的制備取本品10ml，加水30ml，用乙醚提取3次，每次25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。
b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材2.0g，加水200ml加熱至沸，并保持微沸2.5小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液12μl，對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)施例5取中藥材靈芝50g、白術(shù)(炒)100g、女貞子(制)100g、合歡皮150g、首烏藤150g、仙鶴草250g、墨旱蓮100g、甘草50g，上述原料，靈芝加水煎煮二次，第一次5小時(shí)，第二次3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用；其余白術(shù)等七味，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.05(90℃)，靜置24小時(shí)，取上清液備用。另取蔗糖264g，加水適量，煮沸溶解后，濾過，與上述兩種濃縮液混勻，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.10(90℃)，放冷，加入苯甲酸鈉3g，加水稀釋至1000ml，攪勻，濾過，灌裝，每袋容量10ml，即得。
性狀本品為棕黑色的粘稠液體；味甜而微苦。
檢查應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2000年版一部附錄IH)。
1、用高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定甘草酸單銨鹽的含量，可按以下步驟進(jìn)行a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液(30∶59)；檢測(cè)波長(zhǎng)為251nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
b.對(duì)照品溶液的制備取甘草酸單銨鹽對(duì)照品約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.25mg，折合甘草酸為0.2646mg)。
c.供試品溶液的制備精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液濾過(0.45μm)，即得。
d.測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液8μl，注入液相色譜儀，測(cè)定；本品每1ml含甘草以甘草酸(C42H62O16)計(jì)，不得少于0.50mg。
2、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材白術(shù)a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材2g，加乙醇70ml回流提取1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.供試品溶液的制備取本品30ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇25ml，攪拌，靜置1.5小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各8μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.15g，加入無水乙醇20ml，超聲處理25分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。
b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
c.供試品溶液的制備取本品8ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。
d.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液8μl，對(duì)照品溶液1.5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
4、用薄層色譜法鑒別該藥物中藥材仙鶴草a.供試品溶液的制備取本品8ml，加水20ml，用乙醚提取2次，每次20ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，用醋酸乙酯提取1次，每次20ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。
b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材2.5g，加水150ml加熱至沸，并保持微沸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取2次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。
c.照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液9μl，對(duì)照藥材溶液8μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(5∶5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種安神口服液體制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于，包括以下步驟高效液相色譜法測(cè)定安神口服液體制劑中甘草酸的含量；用薄層色譜法鑒別安神口服液體制劑中的中藥材白術(shù)、首烏藤和仙鶴草。
2.權(quán)利要求1的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述高效液相色譜法測(cè)定安神口服液體制劑中甘草酸的含量，經(jīng)過以下步驟a甘草酸單銨鹽對(duì)照品溶液的配制，b安神口服液體制劑樣品溶液的配制，c用高效液相色譜儀測(cè)定以上溶液，得色譜圖，d繪制對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)安神口服液體制劑樣品峰面積，和標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算該樣品中甘草酸單銨鹽的含量。
3.權(quán)利要求1的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述用薄層色譜法鑒別安神口服液體制劑中的中藥材白術(shù)、首烏藤和仙鶴草，經(jīng)過以下步驟a.白術(shù)、首烏藤和仙鶴草對(duì)照藥材溶液的制備b.安神口服液體制劑供試品溶液的制備c.照薄層色譜法試驗(yàn)。
4.權(quán)利要求2的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的條件是a.色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液；檢測(cè)波長(zhǎng)為250±3nm；理論板數(shù)按甘草酸單銨鹽峰計(jì)算應(yīng)不低于2000；b.對(duì)照品溶液的制備 取甘草酸單銨鹽對(duì)照品適量，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得；c.供試品溶液的制備 精密量取裝量項(xiàng)下的本品2.5ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上清液經(jīng)0.45μm濾膜濾過，即得；d.測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定。
5.權(quán)利要求2的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述流動(dòng)相的數(shù)值范圍為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液26-53∶58-69。
6.權(quán)利要求5的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述流動(dòng)相的數(shù)值范圍為乙睛-2.5％冰醋酸水溶液37∶63。
7.權(quán)利要求5的質(zhì)量控制方法，其特征在于，經(jīng)過以下步驟精密稱取甘草酸單銨鹽對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，使得每1ml含甘草酸單銨鹽對(duì)照品0.2-0.3mg，折合甘草酸為0.1959-0.2939mg；供試品溶液取上清液濾過0.45μm；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液5-10μl注入色譜儀，測(cè)定，即得，供試品每1ml含甘草以甘草酸C42H62O16計(jì)，不得少于0.50mg。
8.權(quán)利要求3的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述用薄層色譜法鑒別安神口服液體制劑中的中藥材白術(shù)、首烏藤和仙鶴草，經(jīng)過以下步驟鑒別中藥材白術(shù)的步驟a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材，加乙醇回流提取，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀崛芙?，用水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，作為?duì)照藥材溶液；b.供試品溶液的制備取本品，置水浴上蒸至適量，加乙醇，攪拌，靜置，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀崛芙?，用醋酸乙酯提取，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，濾過，濾液作為供試品溶液；c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；鑒別中藥材首烏藤的步驟a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材，加入無水乙醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓鳛閷?duì)照藥材溶液；b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成溶液，作為對(duì)照品溶液；c.供試品溶液的制備取本品，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；d.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液，對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；鑒別中藥材仙鶴草的步驟a.供試品溶液的制備取本品，加水，用乙醚提取，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值，用醋酸乙酯提取，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?使溶解，作為供試品溶液；b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材，加水加熱至沸，并保持微沸，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液，對(duì)照藥材溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鐵乙醇溶液。
9.權(quán)利要求7的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述步驟是對(duì)白術(shù)a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材1-3g，加乙醇40-100ml回流提取1-1.5小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-50ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取1-3次，每次10-30ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；b.供試品溶液的制備取本品10-50ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇15-40ml，攪拌，靜置1-2小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0-30ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取2-4次，每次15-20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取2-4次，每次15-20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?-6ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液；c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸(7∶2∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；對(duì)首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1-0.2g，加入無水乙醇15-20ml，超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；b.取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.8-1.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；c.供試品溶液的制備取本品5-10ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇10-30ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；d.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液5-10μl，對(duì)照品溶液0.5-2.5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；對(duì)仙鶴草a.供試品溶液的制備取本品5-10ml，加水10-30ml，用乙醚提取1-3次，每次10-25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-3，用醋酸乙酯提取1-2次，每次15-30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?.5-3ml使溶解，作為供試品溶液；b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材1.0-2.0g，加水100-200ml加熱至沸，并保持微沸1.5-2.5小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取1-3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液6-12μl，對(duì)照藥材溶液5-10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸5∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
10.權(quán)利要求8的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述步驟是對(duì)白術(shù)a.對(duì)照藥材溶液的制備取白術(shù)對(duì)照藥材1.5g，加乙醇50ml回流提取1小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；b.供試品溶液的制備取本品20ml，置水浴上蒸至約10ml，加乙醇30ml，攪拌，靜置1小時(shí)，取上清液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml微熱溶解，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，棄醋酸乙酯提取液，水層用水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液；c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-丙酮-水-冰醋酸7∶2∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；對(duì)首烏藤a.對(duì)照藥材溶液的制備取首烏藤對(duì)照藥材0.1g，加入無水乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；b.再取大黃素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；c.供試品溶液的制備取本品5ml，置水浴上蒸干，放冷，加入無水乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；d.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液8μl，對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸30∶10∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。對(duì)仙鶴草a.供試品溶液的制備取本品5ml，加水15ml，用乙醚提取3次，每次25ml，棄乙醚液，水溶液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；b.對(duì)照藥材溶液的制備取仙鶴草對(duì)照藥材2.0g，加水150ml加熱至沸，并保持微沸2小時(shí)，放冷，濾過，濾液自“用乙醚提取3次”起，余下步驟按供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液；c.照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液6μl，對(duì)照藥材溶液10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲酸乙酯-甲酸5∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1％的三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
全文摘要
本發(fā)明公開了安神口服液體制劑的質(zhì)量控制方法，該方法采用薄層色譜法對(duì)白術(shù)、首烏藤和仙鶴草進(jìn)行鑒別，并照高效液相色譜法以藥物中甘草酸成分作為指標(biāo)進(jìn)行含量測(cè)定。本發(fā)明質(zhì)量控制方法對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量控制更為穩(wěn)定、簡(jiǎn)便，且結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性良好。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1785281SQ20051000327
公開日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2005年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月10日
發(fā)明者葉湘武, 王澤坤 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司