專利名稱：三環(huán)化合物作為甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及N-雜環(huán)基甲基苯甲酰胺衍生物，其制備方法及其在治療中的應(yīng)用。
本發(fā)明的化合物相應(yīng)于通式(I) 其中R代表氫原子或乙烯基基團(tuán)；當(dāng)R代表氫原子時(shí)n代表0或1或2，而當(dāng)R代表乙烯基基團(tuán)時(shí)n代表1；當(dāng)R代表氫原子時(shí)X代表式CH基團(tuán)或氮原子，而當(dāng)R代表乙烯基基團(tuán)時(shí)X代表式CH基團(tuán)；R1代表任選由一個(gè)或多個(gè)選自鹵素原子、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，羥基及(C1-C6)烷氧基基團(tuán)、三氟甲基基團(tuán)的取代基取代的苯基或萘基基團(tuán)，或者環(huán)己基基團(tuán)，或者選自噻吩基、吡啶基、唑基、呋喃基、噻唑基、喹啉基和異喹啉基的雜芳基基團(tuán)；R2代表氫原子，或者一個(gè)或多個(gè)選自鹵素原子及三氟甲基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、噻吩基、苯氧基、羥基、巰基、硫(C1-C6)烷基、氰基或通式-NR4R5、SO2NR4R5、-SO2-(C1-C6)烷基、-SO2-苯基、-CONR4R5、-COOR7、-CO-(C1-C6)烷基、-CO-苯基、-NHCOR8、-NHSO2-(C1-C6)烷基、-NHSO2-苯基及-NHSO2NR4R5或與苯基基團(tuán)的2位和3位相連的式-OCF2O-基團(tuán)的取代基；(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-SO2-(C1-C6)烷基、-CO-(C1-C6)烷基及-NHSO2-(C1-C6)烷基基團(tuán)任選由一個(gè)或多個(gè)R3基團(tuán)取代；苯基、-SO2-苯基、-CO-苯基及-NHSO2-苯基基團(tuán)任選由R6基團(tuán)取代；R3代表鹵素原子、苯基基團(tuán)、(C1-C6)烷氧基、-NR4R5；R4和R5相互獨(dú)立代表氫原子或(C1-C6)烷基基團(tuán)或R4和R5與所連接的氮原子一起形成吡咯烷環(huán)、哌啶環(huán)或嗎啉環(huán)；R6代表氫原子、鹵素原子、三氟甲基基團(tuán)、氰基基團(tuán)、羥基基團(tuán)、巰基基團(tuán)、(C1-C6)烷基基團(tuán)或(C1-C6)烷氧基；R7代表氫原子或任選由一個(gè)或多個(gè)R3基團(tuán)取代的(C1-C6)烷基基團(tuán)，或任選由R6基團(tuán)取代的苯基基團(tuán)；R8代表任選由一個(gè)或多個(gè)R3基團(tuán)取代的(C1-C6)烷基基團(tuán)，或任選由R6基團(tuán)取代的(C1-C6)烷氧基基團(tuán)或苯基基團(tuán)。
在通式(I)化合物中，可在全部?jī)?yōu)選的化合物中辨別某些化合物組1蘇型構(gòu)型的化合物及其中n代表0或1的通式(I)化合物；組2在分子式中X代表式CH基團(tuán)的組1化合物；組3在分子式中R代表氫原子的組2化合物；組4在分子式中n代表1的組3化合物；組5在分子式中R1代表任選取代的苯基基團(tuán)的組4化合物。
式(I)化合物可含有多個(gè)不對(duì)稱中心。因此它們可以對(duì)映異構(gòu)體形式或非對(duì)映異構(gòu)體形式存在。這些對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、及其混合物，并包括外消旋混合物，均在本發(fā)明范圍內(nèi)。
更特別的是，對(duì)那些R＝H的式(I)化合物而言，可以蘇型((1S，2S)和(1R，2R))或赤型((1S，2R)和(1R，2S))非對(duì)映異構(gòu)體形式、或純對(duì)映異構(gòu)體形式或這些異構(gòu)體的混合物的形式存在。
式(I)化合物可以堿或酸的加成鹽的形式存在。此類加成鹽在本這些鹽最好用藥學(xué)上可接受的酸制備，但是其他可用的酸(例如用于式(I)化合物的純化和分離的酸)的鹽也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。式(I)化合物也可以水合物或溶劑化物的形式存在，即是以與一個(gè)或多個(gè)分子的水或溶劑締合或化合的形式存在。此類水合物或溶劑化物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明化合物表現(xiàn)出甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glyt1和/或glyt2特異抑制劑的特殊活性。
通式(I)化合物可按照下列方案1中所示的方法制備。
方案1 根據(jù)方案1，將其中n、X、R和R1如上述所定義的通式(II)二胺與通式(III)的活化的酸或酰氯(其中Y代表疏核基團(tuán)例如鹵原子，R2如上述所定義)用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行偶合反應(yīng)。
通式(II)二胺(其中R＝H，n、X和R1如上述所定義)可按照下列方案2中所示的方法制備。
方案2
將通式(IV)酮(其中n、X和R1如上述所定義)與芐氧基羥胺鹽酸鹽在吡啶中回流得到通式(V)肟。肟的Z和E兩種形式可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如硅膠柱層析法分離。
優(yōu)選的Z型肟(V)鹽酸鹽接著在四氫呋喃中用氫化鋰鋁回流還原，提供大部分為蘇型的通式(II)二胺。
通過(guò)還原通式(V)的E型肟得到兩種非對(duì)映異構(gòu)體(蘇型/赤型)二胺(II)的混合物。
赤型和蘇型非對(duì)映異構(gòu)體可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如硅膠柱層析法分離。
另一種制備其中R和R1如上述所定義、n等于1而X為CH的通式(II)二胺方法如下列方案3所示。
方案3 按照Bull.Soc.Chim.Belg.(106)，1997，77-84及TetrahedronAsymmetry，(6)，1995，1699-1702中描述的方法，通式(VI)的醇通過(guò)Mitsunobu反應(yīng)轉(zhuǎn)化為胺。
另外相應(yīng)于蘇型非對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)映異構(gòu)體(1R，2R)或(1S，2S)及赤型非對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)映異構(gòu)體(1S，2R)或(1R，2S)的通式(I)手性化合物也可通過(guò)用高效液相層析(HPLC)在手性柱上分離外消旋化合物獲得，或者從所得的手性胺、或者通過(guò)使用手性酸例如酒石酸、樟腦磺酸、二苯甲酰酒石酸、N-乙?；涟彼岵鸱滞ㄊ?II)外消旋胺獲得，通過(guò)在醇類溶劑中分部和優(yōu)先重結(jié)晶非對(duì)映異構(gòu)體鹽，或者使用類似于方案3中描述的方法通過(guò)由赤型或蘇型手性醇對(duì)映選擇性合成而獲得。手性醇可通過(guò)類似于Tetrahedron，(55)，1999，2795-2810中描述的方法獲得。在R代表乙烯基基團(tuán)及R1代表喹啉基基團(tuán)的情況下，通式(II)二胺可按照方案3使用相應(yīng)的市售手性醇制備。
通式(IV)外消旋酮可按照類似于Chem.Commun.，1999，1927-1928中描述的方法通過(guò)橋環(huán)狀胺的活化絡(luò)合物的去質(zhì)子化并與親電試劑例如酯或Weinreb酰胺反應(yīng)制備，或者按照類似于J.Med.Chem.，1980，180-184中描述的方法通過(guò)有機(jī)金屬化合物與2-奎寧酸乙酯反應(yīng)制備，或者通過(guò)按照類似于J.Org.Chem.，50，1985，29-31和Chem.Comm.，1999，1927-1929中描述的方法所得的相應(yīng)醇用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的氧化劑例如二氧化錳或草酰氯-二甲基亞砜系統(tǒng)氧化制備。
通式(VI)醇也可通過(guò)在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的條件下還原相應(yīng)的通式(IV)酮獲得。
通式(III)的酸和酰氯可通過(guò)商業(yè)途徑獲得或通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的類似方法制備。
例如，4-氨基-3-氯-5-三氟甲基苯甲酸可按照類似于Arzneim.Forsch.，34，11a，(1984)，1668-1679中描述的方法通過(guò)用磺酰氯在含氯溶劑例如氯仿中氯化4-氨基-5-三氟甲基苯甲酸制備。
2，6-二氯-3-三氟甲基苯甲酸可通過(guò)類似于US 3,823,134中描述的方法制備。
衍生自磺胺的苯甲酸可按照類似于專利DE-2436263、BE-620741、DE-1158957、US-3112337、GB-915259、US-3203987、DE-642758、EP-68700、FR-2396757、DE-2734270，及J.Pharm.Pharmacol.(1962)，14，679-685中描述的方法制備。
間氯磺酸可按照類似于J.Chem.Soc.(C)，(1968)，13，及專利US-2273444、DE-19929076、EP-0556674中描述的方法獲得。
鄰位或?qū)ξ坏穆然腔砂凑疹愃朴趯＠鸘S-3663615中描述的方法由重氮鹽與4-氨基-3-氯苯甲酸反應(yīng)實(shí)現(xiàn)。
磺胺通過(guò)氯磺化衍生物在過(guò)量胺的存在下在例如四氫呋喃的溶劑中于室溫或回流反應(yīng)獲得。
二級(jí)磺胺可按照類似于專利BE-620741中描述的方法甲基化。
一級(jí)磺胺可在例如四氫呋喃的溶劑中在例如碳酸鉀的堿的存在下與異氰酸酯反應(yīng)。
某些苯甲酸的亞砜衍生物在專利DE-2056912、DE-2901170及US-3953476中均有描述，或可通過(guò)類似于專利BE-872585及J.Org.Chem.，(1991)，56(1)，4976-4977中描述的方法獲得。
通式(III)的苯甲酸衍生物(其中R2代表支鏈烷基基團(tuán))可按照專利US-4879426及Syn.Lett.(1996)，473-474和J.Med.Chem.(2001)，44，1085-1098中描述的類似方法制備。
聯(lián)苯型的苯甲酸衍生物可按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。
最后，羰基化苯甲酸可按照類似于專利US-3725417和GB-913100及Chem.Pharm.Bull.，(1988)，36(9)，3462-3467和J.Labelled Compd.Radiopharm.，(1997)，39(6)，501-508中描述的方法合成。
酯或酰胺可在Tetrahedron Lett.，(2000)，41，3157-3160中描述的條件下通過(guò)用強(qiáng)堿在酸的對(duì)位直接羰基化引入。
最后，苯甲酸的氰基衍生物通過(guò)在氰化鉀、四(三苯基膦)合鈀型催化劑的存在下，在四氫呋喃型溶劑中按照類似于J.Org.Chem.(1967)62，25，8634-8639中描述的方法加熱鹵化苯甲酸或苯甲酸酯獲得。
其他通式(III)酸及酰氯可按照類似于專利EP-0556672、US-3801636及J.Chem.Soc.，(1927)，25、Chem.Pharm.Bull.，(1992)，1789-1792、Aust.J.Chem.，(1984)，1938-1950和J.O.C.，(1980)，527中描述的方法獲得。
下述實(shí)施例舉例說(shuō)明幾種本發(fā)明化合物的制備方法。元素分析、及IR、NMR光譜和手性柱HPLC圖譜確證了所得化合物的結(jié)構(gòu)和對(duì)映異構(gòu)體純度。
實(shí)施例標(biāo)題括號(hào)中所標(biāo)明的數(shù)字對(duì)應(yīng)于稍后特定表格的第1列中的數(shù)字。
在化合物名稱中，連字符“-”是詞的一部分，連字符“_”只用作一行字末端斷行的連接；在無(wú)斷行時(shí)取消，并不應(yīng)由正常連字符及空格代替。
實(shí)施例1(化合物N°3)蘇型-2-氯-N-[(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基)苯基甲基]-3-三氟甲基苯甲酰胺鹽酸鹽1∶11.1.(Z)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲酮O-芐基肟鹽酸鹽在裝備有磁力攪拌的100ml燒瓶中，加入2.2g(9.35毫摩爾)1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲酮(Chem.Commun.，1999，1927-1928)和3g(18.69毫摩爾)芐氧基羥胺鹽酸鹽及50ml吡啶，回流加熱該混合物20h。
減壓蒸去溶劑后，用水和氯仿稀釋殘留物，分離水層，并用氯仿萃取。洗滌合并的有機(jī)相后，用硫酸鈉干燥并減壓蒸去溶劑，殘留物用硅膠柱層析純化，用氯仿和甲醇混合物洗脫。
得到0.5g相應(yīng)于(E)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲酮O-芐基肟的組分，及2.25g相應(yīng)于(Z)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲酮O-芐基肟鹽酸鹽的另一組分，熔點(diǎn)195-197℃。
1.2.蘇型-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺在裝備有磁力攪拌的250ml三頸燒瓶及氮?dú)鈿夥罩校瑢?.3g(34.32毫摩爾)氫化鋰鋁的10ml四氫呋喃懸浮液置于其中，分部向其中加入2.2g(6.16毫摩爾)(Z)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲酮O-芐基肟鹽酸鹽并回流加熱2h。
冷卻后，于0℃先后加入1.3ml水、1.3ml 15％蘇打水溶液及3.9ml水水解該溶液。用Celite過(guò)濾該多相混合物，濾液減壓濃縮，然后用1N鹽酸和氯仿稀釋該殘留物。分離有機(jī)層并用氨水堿化水層。用氯仿萃取2次。洗滌合并的有機(jī)相后，用硫酸鈉干燥并減壓蒸去溶劑，得到1.25g油狀可結(jié)晶的蘇型-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺，在下步反應(yīng)中直接使用。熔點(diǎn)120-140℃。
1.3.蘇型-2-氯-N-[(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基)苯基甲基]-3-三氟甲基苯甲酰胺鹽酸鹽1∶1在裝備有磁力攪拌的100ml燒瓶中，于0℃將0.51g(2.12毫摩爾)2-氯-3-三氟甲基苯甲酰氯的5ml氯仿溶液及0.29g(2.12毫摩爾)碳酸鉀置于其中，加入0.42g(1.93毫摩爾)蘇型-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺的5ml氯仿溶液，室溫?cái)嚢柙摶旌衔?h。
用水水解并用氯仿稀釋后，分離水層并用氯仿萃取。洗滌合并的有機(jī)相后，用硫酸鈉干燥并減壓蒸去溶劑，殘留物用硅膠柱層析純化，用氯仿和甲醇混合物洗脫。得到0.18g油狀產(chǎn)物。
將該產(chǎn)物溶解于幾ml的丙-2-醇中，加入6ml 0.1N鹽酸的丙-2-醇溶液，減壓濃縮該混合物以減少溶劑體積。研磨后，最終分離得到0.15g固體鹽酸鹽。熔點(diǎn)257-262℃。
實(shí)施例2(化合物N°4)蘇型-2，6-二氯-N-[(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基)苯基甲基]-3-三氟甲基苯甲酰胺鹽酸鹽1∶1在裝備有磁力攪拌的100ml燒瓶中，加入0.36g(1.38毫摩爾)2，6-二氯-3-三氟甲基苯甲酸、0.187g(1.38毫摩爾)羥基苯并三唑、0.264g(1.38毫摩爾)1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的7ml氯仿溶液，室溫?cái)嚢柙摶旌衔?0分鐘。
加入0.3g(1.38毫摩爾)蘇型-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺的5ml氯仿溶液并室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。
用水水解并用氯仿稀釋后，分離水層并用氯仿萃取。洗滌合并的有機(jī)相后，用硫酸鈉干燥并減壓蒸去溶劑，殘留物用硅膠柱層析純化，用氯仿和甲醇混合物洗脫。得到0.37g油狀產(chǎn)物。
將該產(chǎn)物溶解于幾ml的丙-2-醇中，加入20ml 0.1N鹽酸的丙-2-醇溶液，減壓濃縮該混合物以減少溶劑體積。研磨后，最終分離得到0.35g固體鹽酸鹽。熔點(diǎn)270-273℃。
實(shí)施例3(化合物N°14)2-氯-N-(8α，9S-辛可那-9-基)-3-三氟甲基苯甲酰胺鹽酸鹽2∶13.1.8α，9S-辛可那-9-胺在裝備有磁力攪拌的100ml三頸燒瓶及氮?dú)鈿夥罩校瑢?.74g(2.5毫摩爾)8α，9R-辛可那-9-醇(辛可尼丁)及0.79g(3毫摩爾)三苯基膦的15ml四氫呋喃懸浮液置于其中，加入3.5ml 0.9M疊氮酸的苯溶液(3毫摩爾)。向該溶液中滴加0.55ml(2.75毫摩爾)二異丙基碳二亞胺的1.5ml四氫呋喃溶液，并于40℃加熱16h。
加入0.65g(2.5毫摩爾)三苯基膦并攪拌30分鐘，加入0.5ml水并再攪拌6h。
用1N鹽酸水解并用氯仿稀釋。用氨水堿化水層并用氯仿萃取幾次。洗滌合并的有機(jī)相后，用硫酸鈉干燥并減壓蒸去溶劑，得到0.97g橙色油狀8α，9S-辛可那-9-胺，在下步反應(yīng)中使用該產(chǎn)物的粗品。
3.2.2-氯-N-(8α，9S-辛可那-9-基)-3-三氟甲基苯甲酰胺鹽酸鹽2∶1按照實(shí)施例1.3中描述的方法，從0.97g(3.3毫摩爾)8α，9S-辛可那-9-胺、0.84g(3.4毫摩爾)2-氯-3-三氟甲基苯甲酰氯和0.5g(3.63毫摩爾)碳酸鉀，得到0.360g油狀物，并將其溶解于30ml 1N鹽酸中。用氯仿萃取水層，然后減壓蒸發(fā)溶劑。得到0.26g白色固體鹽酸鹽。
熔點(diǎn)185-205℃；[α]D25＝-5.4(c＝0.986，MeOH)。
實(shí)施例4(化合物N°17)2，6-二氯-N-[(1S)-[(2S)(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基)苯基甲基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽1∶14.1(1S)-[(2S)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺D-酒石酸鹽將9.4g(43.45毫摩爾)蘇型-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺溶解于150ml乙醇中。向其中加入6.52g(43.45毫摩爾)D-酒石酸的200ml乙醇溶液。減壓蒸去溶劑后，將殘留物置于500ml乙醇/水(9/1)溶液中，然后加熱至溶解。連續(xù)3次重結(jié)晶后，得到5.39g(1S)-[(2S)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺D-酒石酸鹽。
熔點(diǎn)125-135℃。D25＝-46.1(c＝0.616；MeOH)。
4.2.2，6-二氯-N-[(1S)-[(2S)(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基)苯基甲基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽1∶1在裝備有磁力攪拌的100ml燒瓶中，于0℃加入3.33g(12.02毫摩爾)2，6-二氯-3-(三氟甲基)苯甲酰氯的30ml氯仿溶液及1.82g(13.22毫摩爾)碳酸鉀，向其中加入2.6g(12.02毫摩爾)(1S)-[(2S)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2.]辛-2-基(苯基)甲基]胺(由堿化4.1中描述的鹽然后萃取獲得)的40ml氯仿溶液，并室溫?cái)嚢柙摶旌衔?h。
用水水解并用氯仿稀釋后，分離水層并用氯仿萃取。洗滌合并的有機(jī)相后，用硫酸鈉干燥并減壓蒸去溶劑，殘留物用硅膠柱層析純化，用氯仿和甲醇混合物洗脫。得到5.4g油狀產(chǎn)物。
將該產(chǎn)物溶解于幾ml氯仿中，加入600ml鹽酸飽和的乙醚溶液，減壓濃縮該混合物。殘留物用乙酸乙酯重結(jié)晶。得到4.7g 2，6-二氯-N-[(1S)-[(2S)(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基)苯基甲基]-3-(三氟甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽。
熔點(diǎn)264-268℃。D25＝+61.1°(c＝0.32；MeOH)。
實(shí)施例5(化合物N°26)蘇型N-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲基]-2，6-二氯-3-(三氟甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽1∶15.11-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲醇在100ml三頸燒瓶中及氬氣中，于0℃將1.11g(10毫摩爾)喹核堿置于40ml無(wú)水四氫呋喃中。逐滴加入1.33ml(10.5毫摩爾)三氟化硼-乙醚絡(luò)合物，于0℃攪拌30min(溶液A)。在250ml三頸燒瓶中及氬氣中，平行地將2.47g(22毫摩爾)無(wú)水叔丁基醇鉀置于60ml無(wú)水四氫呋喃中。冷卻至-70℃并逐滴加入22ml 1M仲丁基鋰的環(huán)己烷/己烷(22毫摩爾)混合物溶液，并保持溫度低于-60℃(溶液B)。加料完成后，將溶液A導(dǎo)入到溶液B中，維持溫度約為-70℃并攪拌2h。
在50ml三頸燒瓶中及氬氣中，于-70℃將2.36ml(22毫摩爾)重蒸4-氟苯甲醛置于20ml四氫呋喃溶液中。導(dǎo)入溶液B并保持溫度至約-70℃。將所得溶液于-70℃放置30min并使溫度上升至-20℃。然后用10％鹽酸溶液水解。用乙醚萃取后再取水層，并用氨水堿化。用氯仿萃取，然后減壓蒸去溶劑。殘留物用硅膠柱層析純化，用氯仿和甲醇混合物洗脫。得到0.53g黃色固體1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲醇。
熔點(diǎn)69-70℃。
5.21-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲酮在250ml三頸燒瓶中及氮?dú)庵校?70℃將1.3ml二甲基亞砜置于40ml四氫呋喃中，逐滴加入0.9ml草酰氯(11毫摩爾)，并在該溫度下攪拌30min。逐滴加入1g(4.6毫摩爾)1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲醇的40ml四氫呋喃溶液。30min后，于-70℃加入4ml(27.6毫摩爾)三乙胺。然后于-70℃攪拌該反應(yīng)混合物30min、于0℃攪拌30min、然后室溫?cái)嚢?h。
將該混合物傾入氨水溶液中，然后用氯仿萃取幾次。有機(jī)層用硫酸鈉干燥并減壓蒸發(fā)。殘留物用硅膠柱層析純化，用氯仿和甲醇混合物洗脫。得到1g 1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲酮。
熔點(diǎn)68-69℃。
5.3(Z)1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-基(4-氟苯基)甲酮O-芐基肟鹽酸鹽根據(jù)實(shí)施例1.1中描述的操作方法，從1.17g(5毫摩爾)酮開(kāi)始，反應(yīng)液處理后，所得殘留物用乙醚研磨后得到1.4g(Z)1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-基(4-氟苯基)甲酮O-芐基肟鹽酸鹽。
熔點(diǎn)202-203℃。
5.4蘇型1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-基(4-氟苯基)甲胺根據(jù)1.2中描述的操作方法，從1.47g(4.54毫摩爾)(Z)1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-基(4-氟苯基)甲酮O-芐基肟鹽酸鹽開(kāi)始，得到1g蘇型1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-基(4-氟苯基)甲胺(非對(duì)映異構(gòu)體過(guò)量，de＝90％)。
5.5N-[(S)-(2S)-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲基]-2，6-二氯-3-(三氟甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽1∶1根據(jù)1.3中描述的操作方法，從0.39g(1.66毫摩爾)蘇型1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-基(4-氟苯基)甲胺、0.5g(1.83毫摩爾)2，6-二氯-3-三氟甲基苯甲酰氯、0.25g(1.83毫摩爾)碳酸鉀開(kāi)始，層析純化后得到0.79g油狀蘇型N-[1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛-2-基(4-氟苯基)甲基]-2，6-二氯-3-(三氟甲基)苯甲酰胺，然后用氯化氫氣體的乙醚溶液成鹽。
熔點(diǎn)290-291℃。
其他化合物按照實(shí)施例1、2和5中描述的方法，從其他功能化的醛起始獲得。
下列表1舉例說(shuō)明幾種本發(fā)明化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
在″R″列中，-CH＝CH2指乙烯基基團(tuán)，在″R1″列中，C6H5指苯基基團(tuán)而4-C9H6N指喹啉-4-基基團(tuán)。在″鹽″列中，-指堿形式的化合物，″HCl″指鹽酸鹽，″tfa″指三氟醋酸鹽。
表中化合物14、19至23、24以一個(gè)或多個(gè)水分子的溶劑化鹽酸鹽或二鹽酸鹽(見(jiàn)表)存在。
表中化合物15和16形成一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體，可用制備型HPLC分離，使用CHIRALCELAD 20μm柱，溶劑為異己烷/丙-2-醇95/5混合物，對(duì)化合物17和18也同樣。
表2中給出化合物的物理性質(zhì)、熔點(diǎn)和旋光度?！?d)″表示在熔點(diǎn)處分解。
表1
表2
對(duì)本發(fā)明化合物進(jìn)行了一系列的藥理測(cè)試，結(jié)果顯示它們作為治療活性物質(zhì)的重要性是明顯的。
在表達(dá)人類天然轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glvt1的SK-N-MC細(xì)胞中的甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的研究在有或無(wú)受試化合物的存在下，通過(guò)測(cè)定結(jié)合放射活性，研究了在表達(dá)人類天然轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glyt1的SK-N-MC細(xì)胞(人類神經(jīng)上皮細(xì)胞)中[14C]甘氨酸的捕獲。在用0.02％纖連蛋白預(yù)先處理的板中，孵育單層細(xì)胞48h。試驗(yàn)當(dāng)天，棄去培養(yǎng)液，細(xì)胞用pH 7.4的Krebs-HEPES緩沖液([4-(2-羥乙基)哌嗪-1-乙磺酸)洗滌。于37℃在緩沖液(對(duì)照組)或不同濃度受試化合物或10mM甘氨酸(非特異性捕獲的測(cè)定)的存在下預(yù)孵育10min后，然后加入10μM[14C]甘氨酸(特異性活性112mCi/毫摩爾)。于37℃繼續(xù)孵育10min，通過(guò)用pH 7.4的Krebs-HEPES緩沖液洗滌2次終止該反應(yīng)。在加入100μl閃爍液并攪拌1h后，測(cè)定細(xì)胞結(jié)合放射活性。用Microbeta Tri-luxTM計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。化合物的有效性由化合物降低50％甘氨酸特異性捕獲的濃度IC50確定，而該濃度由對(duì)照組和含有10mM甘氨酸組的結(jié)合放射活性之差確定。
在該試驗(yàn)中，本發(fā)明活性最強(qiáng)的化合物的IC50為0.001-10μM。
一些化合物的具體結(jié)果如下(IC50，單位μM)化合物N°3 0.017化合物N°4 0.004化合物N°14 0.07化合物N°17 0.001化合物N°26 0.07化合物對(duì)小鼠皮質(zhì)均質(zhì)體中[14C]甘氨酸捕獲抑制活性的體外研究試驗(yàn)當(dāng)天，以逐漸增加的劑量經(jīng)口(通過(guò)在研缽中在0.5％Tween/MethocelTM蒸餾水溶液中研磨受試分子制備)或腹膜內(nèi)(將受試分子溶解于生理血清中，或根據(jù)該分子的溶解性，通過(guò)在研缽中在0.5％Tween/MethocelTM蒸餾水溶液中研磨制備)給予20-25g OF1 IffaCrédo雄性小鼠待研究化合物。對(duì)照組給予載體。劑量以mg/kg表示，給藥途徑和治療時(shí)間由待研究分子的性能確定。
在給藥后的特定時(shí)間，動(dòng)物以安樂(lè)死方式處死，將每個(gè)動(dòng)物的皮質(zhì)迅速在冰上剝除、稱重并于4℃保存或在-80℃冷凍(在這兩種情況下，樣品最多保存1天)。各樣品均在pH 7.4Krebs-HEPES緩沖液中按照10ml/g組織進(jìn)行均質(zhì)化。在10mM L-丙氨酸和緩沖液的存在下，20μl各均質(zhì)體在室溫孵育10min。通過(guò)向?qū)φ战M中加入10mM甘氨酸確定非特異性捕獲。該反應(yīng)由抽濾終止，所獲得的放射活性通過(guò)固體閃爍測(cè)定，在Microbeta Tri-luxTM計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)。甘氨酸捕獲抑制劑將減少各均質(zhì)體中結(jié)合放射配體的量。化合物的活性由其ED50(相對(duì)于對(duì)照組抑制50％[14C]甘氨酸捕獲的劑量)評(píng)價(jià)。
在該試驗(yàn)中，最有效的本發(fā)明化合物由腹膜內(nèi)或口服給藥的ED50為0.1-5mg/kg。
小鼠脊髓均質(zhì)體中甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的研究在有或無(wú)被研究化合物的存在下，通過(guò)測(cè)定結(jié)合放射活性，研究了小鼠脊髓均質(zhì)體中轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glyt2對(duì)[14C]甘氨酸的捕獲。
動(dòng)物(試驗(yàn)當(dāng)天重20-25g的OF1 Iffa Crédo雄性小鼠)安樂(lè)死后，將每個(gè)動(dòng)物的脊髓迅速剝除、稱重并保存在冰中。樣品在pH 7.4Krebs-HEPES緩沖液([4-(2-羥乙基)哌嗪-1-乙磺酸)中按照25ml/g組織進(jìn)行均質(zhì)化。50μl均質(zhì)體在pH 7.4 Krebs-HEPES緩沖液和不同濃度的待研究化合物或10mM甘氨酸(以測(cè)定非特異性捕獲)的存在下于25℃預(yù)孵育10min。然后于25℃在10min內(nèi)加入[14C]甘氨酸(特異活性＝112mCi/毫摩爾)，使最終濃度為10μM。該反應(yīng)由抽濾終止，放射活性通過(guò)固體閃爍測(cè)定，在Microbeta Tri-luxTM計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)。
化合物的有效性由化合物降低50％甘氨酸特異性捕獲的濃度IC50確定，而該濃度由對(duì)照組和含有10mM甘氨酸組的結(jié)合放射活性之差確定。
在該試驗(yàn)中，本發(fā)明活性最強(qiáng)的化合物的IC50為0.02-10μM。
化合物N°17的IC50為0.69μM。
用本發(fā)明通式(I)化合物進(jìn)行的試驗(yàn)的結(jié)果表明，它們是甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glyt1(大部分存在于腦中)抑制劑和甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glyt2(大部分存在于脊髓)抑制劑。
因此本發(fā)明的化合物可用于藥物的制備，尤其是制備甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glyt1和/或glyt2抑制劑藥物。
由此根據(jù)另一方面，本發(fā)明的目的是包含式(I)化合物、或其與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽、或式(I)化合物的水合物或溶劑化物的藥物。
本發(fā)明化合物尤其可用于治療與癡呆、精神病、特別是精神分裂癥(不足型和產(chǎn)出型)及由安定藥引發(fā)的急性或慢性錐體外癥狀相關(guān)的行為障礙，治療各種形式的焦慮、驚慌發(fā)作、恐怖癥、強(qiáng)制性障礙，治療各種形式的抑郁，包括精神病抑郁，治療酒精濫用或戒除引起的障礙，性行為障礙，攝食障礙，及治療偏頭痛。
另外，本發(fā)明化合物可用于治療風(fēng)濕病和急性脊柱病引起的疼痛性肌肉攣縮，治療髓的或腦的痙攣性攣縮，治療輕度至中度急性和亞急性疼痛癥狀，治療強(qiáng)烈和/或慢性疼痛、神經(jīng)原疼痛和難治的疼痛，治療帕金森病及神經(jīng)變性或由安定藥引起的帕金森氏癥狀，治療一級(jí)和二級(jí)普遍性癲癇，部分單純的或復(fù)雜的癥狀，混合型及其他癲癇綜合征而作為其他抗癲癇治療的補(bǔ)充或單一療法，治療睡眠呼吸暫停及神經(jīng)保護(hù)。
本發(fā)明的目的也是含有效劑量的為藥學(xué)上可接受的堿或鹽或溶劑化物及與一種或多種常規(guī)賦形劑的混合物(如果合適)形式的至少一種本發(fā)明化合物的藥用組合物。
根據(jù)藥物劑型及所期望的給藥方式選擇所述賦形劑。
本發(fā)明的藥用組合物也可經(jīng)口、舌下、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、局部、氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、經(jīng)皮、直腸、眼內(nèi)給藥。
給藥的單位劑量形式例如可為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、口服或注射溶液或懸浮液、經(jīng)皮給藥膏藥(藥膏)、栓劑。對(duì)局部給藥而言，可使用軟膏、洗劑和洗眼劑。
作為實(shí)例，片劑形式的本發(fā)明化合物的給藥單位劑量形式可包含下列成分本發(fā)明化合物50.0mg甘露醇 223.75mg交聯(lián)羧甲基纖維素鈉 6.0mg玉米淀粉15.0mg羥丙基-甲基纖維素 2.25mg硬脂酸鎂3.0mg根據(jù)制劑形式，給予所述單位劑量形式以使每公斤體重日服用0.01-20mg主要活性物質(zhì)。
會(huì)有特殊情況，其中更高或更低劑量為合適劑量，這種劑量不超出本發(fā)明的范圍。根據(jù)常規(guī)用法，每個(gè)病人的合適劑量由醫(yī)生根據(jù)給藥方式、體重及病人的反應(yīng)確定。
本發(fā)明根據(jù)其另一些方面也涉及上述病癥的治療方法，包括給予病人有效量的本發(fā)明的化合物、或其藥學(xué)上可接受的鹽或其水合物或其溶劑化物。
權(quán)利要求
1.相應(yīng)于通式(I)的化合物， 其中R代表氫原子或乙烯基基團(tuán)；當(dāng)R代表氫原子時(shí)n代表0或1或2，當(dāng)R代表乙烯基基團(tuán)時(shí)n代表1；當(dāng)R代表氫原子時(shí)X代表式CH基團(tuán)或氮原子，當(dāng)R代表乙烯基基團(tuán)時(shí)X代表式CH基團(tuán)；R1代表任選由一個(gè)或多個(gè)選自鹵素原子、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基基團(tuán)，羥基及(C1-C6)烷氧基、三氟甲基基團(tuán)的取代基取代的苯基或萘基基團(tuán)，或者環(huán)己基基團(tuán)，或者選自噻吩基、吡啶基、唑基、呋喃基、噻唑基、喹啉基和異喹啉基的雜芳基基團(tuán)；R2代表氫原子，或者一個(gè)或多個(gè)選自鹵素原子及三氟甲基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、噻吩基、苯氧基、羥基、巰基、硫(C1-C6)烷基、氰基或通式-NR4R5、SO2NR4R5、-SO2-(C1-C6)烷基、-SO2-苯基、-CONR4R5、-COOR7、-CO-(C1-C6)烷基、-CO-苯基、-NHCOR8、- NHSO2-(C1-C6)烷基、-NHSO2苯基及-NHSO2NR4R5或與苯基基團(tuán)的2位和3位相連的式-OCF2O-基團(tuán)的取代基；(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-SO2-(C1-C6)烷基、-CO-(C1-C6)烷基及-NHSO2-(C1-C6)烷基基團(tuán)任選由一個(gè)或多個(gè)R3基團(tuán)取代；苯基、-SO2-苯基、-CO-苯基及-NHSO2苯基基團(tuán)任選由R6基團(tuán)取代；R3代表鹵素原子、苯基基團(tuán)、(C1-C6)烷氧基、-NR4R5；R4和R5相互獨(dú)立代表氫原子或(C1-C6)烷基基團(tuán)或R4和R5與所連接的氮原子一起形成吡咯烷環(huán)、哌啶環(huán)或嗎啉環(huán)；R6代表氫原子、鹵素原子、三氟甲基基團(tuán)、氰基基團(tuán)、羥基基團(tuán)、巰基基團(tuán)、(C1-C6)烷基基團(tuán)或(C1-C6)烷氧基；R7代表氫原子或任選由一個(gè)或多個(gè)R3基團(tuán)取代的(C1-C6)烷基基團(tuán)，或任選由R6基團(tuán)取代的苯基基團(tuán)；R8代表任選由一個(gè)或多個(gè)R3基團(tuán)取代的(C1-C6)烷基基團(tuán)，或任選由R6基團(tuán)取代的(C1-C6)烷氧基基團(tuán)或苯基基團(tuán)，所述化合物以游離堿或與酸的加成鹽、水合物或溶劑化物的形式存在。
2.權(quán)利要求1的化合物，其特征在于所述化合物為蘇型構(gòu)型。
3.權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)的化合物，其特征在于n代表0或1。
4.權(quán)利要求3的化合物，其特征在于X代表式CH基團(tuán)。
5.權(quán)利要求4的化合物，其特征在于R代表氫原子。
6.權(quán)利要求5的化合物，其特征在于n代表1。
7.權(quán)利要求6的化合物，其特征在于R1代表任選取代的苯基基團(tuán)。
8.一種藥物，其特征在于所述藥物由權(quán)利要求1-7之一的化合物組成。
9.一種藥用組合物，其特征在于所述藥用組合物包含權(quán)利要求1-7之一的化合物及至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
10.權(quán)利要求1-7之一的式(I)化合物在制備用于治療與癡呆相關(guān)的行為障礙、精神病、各種形式的焦慮，驚慌發(fā)作，恐怖癥，強(qiáng)制性障礙、各種形式的抑郁、酒精濫用或戒除引起的障礙、性行為障礙、攝食障礙及偏頭痛的藥物中的用途。
11.權(quán)利要求1-7之一的式(I)化合物在制備用于治療攣縮、疼痛、帕金森病及帕金森氏癥狀、癲癇、混合型及其他癲癇綜合征而作為其他抗癲癇治療的補(bǔ)充或單一療法、睡眠呼吸暫停及神經(jīng)保護(hù)的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有通式(I)的化合物，其中R代表氫原子或乙烯基基團(tuán)；n代表0、1或2；X代表具有式CH的基團(tuán)或氮原子；R
文檔編號(hào)A61P25/00GK1882587SQ200480033568
公開(kāi)日2006年12月20日 申請(qǐng)日期2004年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月17日
發(fā)明者G·達(dá)加贊利, G·埃斯滕內(nèi)-布托, P·馬加特, B·馬拉布特, P·羅歇 申請(qǐng)人:賽諾菲-安萬(wàn)特