專利名稱：大麻素衍生物、其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般地涉及Δ-8-四氫大麻酚(Δ8-THC)、Δ-9-四氫大麻酚(Δ9-THC)和Δ-6a-10a-四氫大麻酚(Δ6a-10a-THC)的大麻素衍生物，以及它們治療CB-1或CB-2介導(dǎo)的狀況的用途，所述大麻素衍生物作為大麻素受體1-型(CB-1)和/或大麻素受體2-型(CB-2)的激動(dòng)劑或拮抗劑是有活性的。
背景技術(shù)：
在1964年Mechoulam和同事分離和鑒別了作為大麻的主要活性組分的Δ-9-四氫大麻酚(Δ9-THC)(Gaoni et al.，J.Am.Chem.Soc.861646(1964))。在接下來(lái)的幾十年中，CB1和CB2受體被發(fā)現(xiàn)、表征和證明引起Δ9-THC的作用(Gernard et al.，Biochem.J.279129(1991)；Skaper et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 933984(1996)；Matsuda etal.，Nature 34661(1990)；Munro et al.，Nature 36561(1993))。從此，CB1和CB2受體作為用于開(kāi)發(fā)抗肥胖劑(Di Marzo et al.，Nature 410822(2001))、抗癌劑(Palolaro et al.，Prostaglandins Leukot.Essent.Fatty Acids 66319(2002))、鎮(zhèn)痛劑(Palmer et al.，Chem.Phys.Lipids1213(2002))和抗青光眼劑(Porcella et al.，Eur.J.Neurosci.13409(2001)；Chien et al.，Arch.Ophthalmol.12187(2003))的潛在治療靶點(diǎn)得到了關(guān)注。開(kāi)發(fā)治療劑的努力導(dǎo)致鑒別了與大麻素受體結(jié)合的許多結(jié)構(gòu)不同類型的化合物，這些化合物包括經(jīng)典的大麻素類(Δ9-THC)、非經(jīng)典的大麻素類例如CP55,940(Melvin et al.，Med.Chem.2767(1984))、二芳基吡唑類例如AM-251(Lan et al.，JMed.Chem.42769(1999))和氨基烷基吲哚類例如WIN-55212(D′Ambra etal.，J Med.Chem.35124(1992))。到目前為止，在藥理學(xué)和SAR方面最被廣泛研究的大麻素類似物是經(jīng)典的和非經(jīng)典的大麻素類。
經(jīng)典的大麻素類(CCBs)和非經(jīng)典的大麻素類對(duì)CB1受體的結(jié)合親和力一般可分別用三點(diǎn)和四點(diǎn)藥效團(tuán)模型界定(Seltzman，Curr.Med.Chem.6685(1999))。形成CCB類似物的三點(diǎn)藥效團(tuán)的構(gòu)造單元是(1)芳環(huán)C1位的酚基(Razdan，Pharmac.Rev.3875(1986)；Ulisset al.，J.Med.Chem.18213(1975))；(2)帶有一個(gè)環(huán)外的C11甲基或羥甲基的不飽和Δ8或Δ9C環(huán)，或者含有9-β-羥基、9-β-羥甲基或9-酮基官能團(tuán)的飽和C環(huán)(Thomas et al.，Mol.Pharmacol.40656(1991)；Wilson et al.，J Med.Chem.191165(1976)；Melvin et al.，Mol.Pharmacol.441008(1993)；Mechoulam et al.，Experientia 44762(1988)；和(3)3-7個(gè)碳的C3脂肪族側(cè)鏈，其中庚基類似物代表最優(yōu)的側(cè)鏈長(zhǎng)度。除了基本的藥效團(tuán)模型外，用1′，1′-二甲基、1′，2′-二甲基和1′，1′-二硫戊環(huán)代替C3側(cè)鏈通常增強(qiáng)了CCBs的活性(Huffmanet al.，Tetrahedron 531557(1997)；Huffman et al.，Bioorganic Med.Chem.Lett.72799(1997)；Guo et al.，J.Med.Chem.373867(1994)；Devane et al.，J.Med Chem.352065(1992)；Tius et al.，Life Sci.562007(2007)；Huffman et al.，J.Med Chers.393875(1996))。
作為QSAR研究和LBP位點(diǎn)定向誘變的結(jié)果，顯著地細(xì)化了對(duì)CCBs的藥效團(tuán)單元和配體結(jié)合袋(LBP)之間相互作用的認(rèn)識(shí)。計(jì)算研究已經(jīng)鑒別出在CCBs的C1區(qū)中氫鍵給體/接受體對(duì)的必要條件(Thomas et al.，Mol.Pharmacol.40656(1991)；Schmetzer et al.，J.Computer-Aided Mol Design 11278(1997)；Reggio et al.，J.Med.Chem.321630(1989)；Johnson et al.，Cannabinoids as TherapeuticAgents，Boca Raton，F(xiàn)L，CRC Press(1986))，結(jié)果是提出與在CB1受體中C1羥基和關(guān)鍵的Lys192相互作用有關(guān)(Song et al.，Mold.Pharmacol.49891(1996)；Chin et al.，J.Neurochem.70280(1998))。另外的在Tyr275和在C9區(qū)含羥基的CCBs之間的給體/接受體對(duì)可能是CB1親和性較之Δ9-THC提高的原因(McAllister et al.，Biochem.Pharmacol.632121(2002)，在此通過(guò)參考以其全文將它并入)。
C1和C9取代基的分子內(nèi)幾何結(jié)構(gòu)通過(guò)CCBs的剛性環(huán)系緊緊地限定，然而QSAR研究表明在C3側(cè)鏈中有適度至高構(gòu)象柔性(Schmetzer et al.，J.Computer-Aided Mol.Design 11278(1997)；Papahatjis et al.，J.Med.Chem.411195(1998)；Ryan et al.，Life Sci.562013(1995)；Keimowitz et al.，J.Med.Chem.4359(2000)。這些研究清楚地顯示CB1的LBP優(yōu)選在C3是疏水性的取代基，但是構(gòu)象柔性的條件仍有待于充分闡明。至此結(jié)果的進(jìn)展被報(bào)道在一系列構(gòu)象限制的Δ8-THC側(cè)鏈類似物(結(jié)合亞甲基和次甲基官能度)(Keimowitz etal.，J.Med.Chem.4359(2000))和1′-環(huán)丙基類似物的研究中(Papahatjis et al.，Bioorg.Med.Chem.Lett.123583(2002))。研究提示相對(duì)于芳環(huán)平面，側(cè)鏈采用正交幾何結(jié)構(gòu)，側(cè)鏈尾部折疊形成疏水性袋。盡管在側(cè)鏈中引入不飽和度，在這組分子中仍保留了相當(dāng)大的柔性。在預(yù)測(cè)柔性側(cè)鏈構(gòu)象中內(nèi)在的計(jì)算局限性、缺少x射線結(jié)晶學(xué)數(shù)據(jù)或者高分辨率核磁共振數(shù)據(jù)，多少限制了預(yù)測(cè)優(yōu)選的側(cè)鏈幾何結(jié)構(gòu)和CB受體LBP空間必要條件的能力。
仍然需要確定可用于治療目的的化合物以實(shí)現(xiàn)治療受CB-1受體和/或CB-2受體介導(dǎo)的狀況或障礙。
本發(fā)明旨在開(kāi)發(fā)Δ8-THC、Δ9-THC和Δ6a-10a-THC類似物，其表現(xiàn)出對(duì)CB-1受體和/或CB-2受體的激動(dòng)劑或者拮抗劑活性，并可用于治療受這些受體介導(dǎo)的狀況或障礙。
發(fā)明概述本發(fā)明的第一個(gè)方面涉及下式(I)的大麻素類似物
其中C環(huán)在Δ8位、Δ9位或Δ6a-10a位含有雙鍵；X選自C(CH3)2、C(-Y(CH2)nY-)、CH2、C(O)、 和 Y選自S和O；R1選自C3-C8環(huán)烷基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、聯(lián)苯基、2-萘基、噻唑基、苯并噻唑基、甲基四唑基、
和 R2和R3對(duì)于含有Δ8或Δ9雙鍵的化合物而言是甲基，或者對(duì)于含Δ6a-10a雙鍵的化合物而言獨(dú)立地選自C1-C3烷基和C1-C3鏈烷醇；R4對(duì)于含Δ8或Δ9雙鍵的化合物而言選自甲基、甲醇、-(CH2)mCOOH和-(CH2)mCOH，對(duì)于含Δ6a-10a雙鍵的化合物而言是甲基；R5選自H、OH、甲氧基和乙氧基；R6-R10獨(dú)立地選自H、OH、C1-C6烷基、鹵素、氨基、C1-C2烷基氨基、C1-C2二烷基氨基、酰氨基、C1-C2烷基酰氨基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6醇、含C1-C6烷基的羧基、含C1-C6烷基的羰基、含C1-C6烷基的酯、含C1-C6烷基的亞砜和含C1-C6烷基的砜；R11-R13的至少一個(gè)選自C1至C6烷基、C1至C6烷氧基、氟和氯，而R11-R13的其余的可任選是H；n是2到4的整數(shù)；和m是整數(shù)0或1。
本發(fā)明的第二個(gè)方面涉及一種組合物，其包含根據(jù)上述式(I)的化合物和在藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明的第三個(gè)方面涉及調(diào)節(jié)大麻素受體活性的方法，所述的方法包括提供根據(jù)式(I)的化合物；和將細(xì)胞的大麻素受體與所述化合物接觸，通過(guò)所述接觸調(diào)節(jié)在細(xì)胞內(nèi)大麻素受體的活性。
本發(fā)明的第四個(gè)方面涉及治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的方法，所述方法包括提供式(I)化合物，其中所述化合物起大麻素受體的激動(dòng)劑的作用；和給予患者有效治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的量的所述化合物。
本發(fā)明的第五個(gè)方面涉及治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的方法，所述方法包括提供根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物起大麻素受體的拮抗劑的作用；和給予患者有效治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的量的所述化合物。
本發(fā)明的第六個(gè)方面涉及制備根據(jù)式(I)的化合物的方法。
根據(jù)一種方法，本發(fā)明的Δ8-THC或Δ9-THC化合物通過(guò)使具有式(II)結(jié)構(gòu)的中間體化合物 與根據(jù)式(IIIa)或式(IIIb)的反應(yīng)物 在有效形成根據(jù)權(quán)利要求1的在C環(huán)的Δ8或Δ9位含有雙鍵的化合物的條件下反應(yīng)進(jìn)行制備。
根據(jù)另一種方法，Δ6a-10a-THC類似物可以通過(guò)使具有式(IV)結(jié)構(gòu)的中間體化合物
與酸(如三氟乙酸或氫溴酸)在有效形成本發(fā)明的在C環(huán)的Δ6a-10a位含有雙鍵的化合物的條件下反應(yīng)進(jìn)行制備。
本發(fā)明的若干化合物具有證示的對(duì)CB-1、CB-2受體或這兩者的親和性，并且若干化合物顯示出相對(duì)于另一種受體對(duì)一種受體的選擇性。本發(fā)明的化合物提供較大益處，因?yàn)楦鶕?jù)本發(fā)明可制備具有一種或多種官能團(tuán)的多種多樣的1′-芳族THC。這類化合物不能通過(guò)慣常方法獲得，特別是不能從先前已知的1′-直鏈烴THC類似物得到。另外，如在體外或體內(nèi)試驗(yàn)證據(jù)顯示的，若干化合物顯示對(duì)CB-1和/或CB-2受體提高的親和性以及治療CB受體介導(dǎo)的狀況的功效。
附圖的簡(jiǎn)要描述

圖1是化合物28的部分2D NOESY譜(300ms混合時(shí)間)，其顯示環(huán)己基環(huán)上，芳族質(zhì)子H2/H4和亞甲基，H3′/H7′，和次甲基質(zhì)子，H2′之間的NOE。
圖2是化合物25的部分1D NMR譜，其顯示二硫戊環(huán)基團(tuán)的非對(duì)映亞甲基質(zhì)子。
圖3是化合物28的立體視圖，其顯示由2D NOESY實(shí)驗(yàn)獲得的NOE約束(虛黃線)。碳原子以白色表示，氫原子以藍(lán)綠色表示，氧原子是紅色的。
圖4是化合物28的立體視圖，其顯示分子動(dòng)力學(xué)研究中確定的兩個(gè)環(huán)己基側(cè)鏈構(gòu)象。碳原子以白色表示，氫原子以藍(lán)綠色表示，氧原子是紅色的。
圖5是化合物28的計(jì)算的PM3勢(shì)能表面，其為扭轉(zhuǎn)參數(shù)θτ1和φτ2的函數(shù)。報(bào)道的能量是以哈里特計(jì)算的形成的熱。AM1勢(shì)能表面具有相同的定性特征。
圖6A-B舉例說(shuō)明了在理論B3LYP/6-31G(p，d)水平計(jì)算的HOMO的軌道圖。以環(huán)己基氫原子為中心的軌道葉的形狀提示與氫ls原子軌道有關(guān)的反鍵σ-軌道。圖6A證示環(huán)A上在兩個(gè)環(huán)己基氫原子和芳族軌道葉之間的互相推斥作用，而圖6B僅顯示一種這樣的相互作用。存在與環(huán)A有關(guān)的軌道葉的顯著扭曲，其支持在環(huán)己基氫原子和與芳香環(huán)有關(guān)的電子密度之間的顯著推斥。
圖7舉例說(shuō)明用于制備具有1′-環(huán)烷基取代基的本發(fā)明各種Δ8-THC類似物的合成方案。
圖8A-B舉例說(shuō)明用于制備具有1′-苯基取代基的本發(fā)明各種Δ8-THC類似物的合成方案。
圖9舉例說(shuō)明關(guān)于每一苯基衍生物C3-C1′鍵的能量與旋轉(zhuǎn)。曲線通過(guò)固定最低能量結(jié)構(gòu)的前側(cè)幾何結(jié)構(gòu)得到，因而表示勢(shì)能表面的垂直截面。曲線暗示了大的構(gòu)象柔性，盡管對(duì)化合物34和化合物36來(lái)說(shuō)有一些存在相當(dāng)大的旋轉(zhuǎn)障礙。在圖例中使用的，KM-222指的是化合物34、KM-222指的是化合物33、KM-224指的是化合物35，KM-233指的是化合物36。
圖10舉例說(shuō)明化合物34的計(jì)算的PM3勢(shì)能表面。注意到在表面上大的淺阱，例如在(170，50)附近的阱，顯示大的構(gòu)象自由度。
圖11舉例說(shuō)明化合物33的計(jì)算的PM3勢(shì)能表面。注意到在此表面上有大量窄而淺的阱，顯示大量的局部最小值。經(jīng)PM3計(jì)算確定此表面的十三個(gè)局部最小值(見(jiàn)表4)。
圖12舉例說(shuō)明化合物35的計(jì)算的PM3勢(shì)能表面。注意到各個(gè)阱中大的對(duì)稱性，在此表面上分開(kāi)的阱之間的相似性。化合物34的勢(shì)能表面也是如此，在該表面上的阱非常寬。
圖13舉例說(shuō)明化合物36的計(jì)算的PM3勢(shì)能表面。注意在此表面上大量的狹而深的阱，其是由C1′位的羰基氧與來(lái)自環(huán)A的π體系之間強(qiáng)π相互作用產(chǎn)生的。經(jīng)PM3計(jì)算確定此表面十六個(gè)局部最小值(參見(jiàn)表4)。
圖14舉例說(shuō)明表4定義的化合物34(c)的最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的HOMO軌道圖。
圖15舉例說(shuō)明表4定義的化合物34(c)的最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的LUMO軌道圖。
圖16舉例說(shuō)明表4定義的化合物33(H)最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的HOMO軌道圖。
圖17舉例說(shuō)明表4定義的化合物33(H)最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的LUMO軌道圖。
圖18舉例說(shuō)明表4定義的化合物35(H)最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的HOMO軌道圖。
圖19舉例說(shuō)明表4定義的化合物35(H)最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的LUMO軌道圖。
圖20舉例說(shuō)明表4定義的化合物36(M)最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的HOMO軌道圖。
圖21舉例說(shuō)明表4定義的化合物36(M)最低能量構(gòu)象異構(gòu)體的LUMO軌道圖。
圖22是舉例說(shuō)明在失血性休克方案期間平均血壓的變化對(duì)化合物25或Δ8-THC(12毫克/公斤)與NS-398(2毫克/公斤)結(jié)合的給藥時(shí)間圖?；衔?5顯示了相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照Δ8-THC和NS-398提高的行為。如在圖22的圖例使用的，AN-155指的是化合物25，NS-398指的是COX-2抑制劑。
圖23是舉例說(shuō)明在失血性休克過(guò)程期間平均血壓的變化對(duì)陰性對(duì)照給藥的時(shí)間，相對(duì)于Δ8-THC和NS-398陽(yáng)性對(duì)照的圖。
圖24是舉例說(shuō)明在上偕-二甲基-苯基Δ8-THC(化合物33)對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用的IC50。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及下式(I)的大麻素類似物
其中X選自C(CH3)2、C(-Y(CH2)nY-)、CH2、C(O)、 和 Y選自S和O；R1選自C3-C8環(huán)烷基、噻吩基-、呋喃基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、聯(lián)苯基、2-萘基、噻唑基、苯并噻唑基、甲基四唑基、
和 R2和R3對(duì)于含有Δ8或Δ9雙鍵的化合物而言是甲基，或者對(duì)于含Δ6a-10a雙鍵的化合物而言選自C1-C3烷基和C1-C3鏈烷醇；R4對(duì)于含Δ8或Δ9雙鍵的化合物而言選自甲基、甲醇、-(CH2)mCOOH和-(CH2)mCOH，對(duì)于含Δ6a-10a雙鍵的化合物而言是甲基；R5是選自H、OH、甲氧基和乙氧基；R6-R10獨(dú)立地選自H、OH、C1-C6烷基、鹵素、氨基、C1-C2烷基氨基、C1-C2二烷基氨基、酰氨基、C1-C2烷基酰氨基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6醇、含C1-C6烷基的羧基、含C1-C6烷基的羰基、含C1-C6烷基的酯、含C1-C6烷基的亞砜和含C1-C6烷基的砜；R11-R13的至少一個(gè)選自C1至C6烷基、C1至C6烷氧基、氟和氯，而R11-R13的其余的可任選是H；n是2到4的整數(shù)；和m是整數(shù)0或1。
根據(jù)式(I)的化合物可在C環(huán)內(nèi)含Δ8雙鍵、Δ9雙鍵或Δ6a-10a雙鍵。式(I)化合物的立體化學(xué)未在上文顯示，雖然Δ8-THC和Δ9-THC類似物在B、C環(huán)之間的6a和10a位具有特定的立體化學(xué)。優(yōu)選的Δ8-THC和Δ9-THC類似物的立體化學(xué)如下所示。
如這里使用的，烷基或更大基團(tuán)(例如烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰氨基、醇、羧基、羰基、酯基、亞砜基和砜基)的烷基取代基可以是直鏈或支鏈烷基，非限制性地包括甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、1-甲基乙基、1-甲基丙基、叔丁基、1-甲基苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、1-乙基丁基、2-乙基丁基等，優(yōu)選直鏈烷基。C1至C3烷基含總共3個(gè)碳原子，C1至C6烷基含總共6個(gè)碳原子等。
優(yōu)選的烷基是甲基、乙基和丙基。優(yōu)選的烷氧基是甲氧基和乙氧基。優(yōu)選的羧基是甲基羧基、乙基羧基和丙基羧基。優(yōu)選的醛基可以是甲醛(carbaldehyde)或乙醛基團(tuán)。優(yōu)選的羰基是甲酮(methanone)、乙酮(ethanone)和丙酮基團(tuán)。優(yōu)選的酯基可以使它們的羰基直接連接到苯環(huán)上或被含甲基、乙基或丙基末端基團(tuán)(插入烷基取代基)取代。優(yōu)選的亞砜可以使硫直接連接到苯環(huán)上或被含甲基、乙基或丙基末端基團(tuán)的(插入烷基取代基)取代。優(yōu)選的砜可以使硫直接連接到苯環(huán)上或被含甲基、乙基或丙基末端基團(tuán)(插入烷基取代基)取代。
優(yōu)選的R1基團(tuán)是環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、4-吡咯烷基、聯(lián)苯基、2-萘基、5-嘧啶基、2-噻唑基、2-苯并噻唑基、甲基四唑基、苯基、鄰-甲基苯基、間-甲基苯基、對(duì)-甲基苯基、間，對(duì)-二甲基苯基、鄰，對(duì)-二甲基苯基、間-乙基苯基、對(duì)-乙基苯基、間，對(duì)-二乙基苯基、間-甲醇基-苯基、間-乙醇-苯基、對(duì)-甲醇-苯基、對(duì)-乙醇-苯基、對(duì)-氯苯基、對(duì)-氟苯基、對(duì)-溴苯基、間-氨基苯基、對(duì)-氨基苯基、間-甲基氨基苯基、對(duì)-甲基氨基苯基、N，N-二甲基-間-氨基苯基、N，N-二甲基-對(duì)-氨基苯基、間-酰氨基苯基、對(duì)-酰氨基苯基、間-甲基酰氨基苯基、對(duì)-甲基酰氨基苯基、間-氰基苯基、對(duì)-氰基苯基、間-硝基苯基、對(duì)-硝基苯基、鄰-甲氧苯基、間-甲氧基苯基、對(duì)-甲氧基苯基、間-乙氧苯基、對(duì)-乙氧苯基、間-甲基亞砜-苯基、間-乙基亞砜-苯基、對(duì)-甲基亞砜-苯基、對(duì)-乙基亞砜-苯基、間-甲基砜-苯基、間-乙基砜-苯基、對(duì)-甲基砜-苯基、對(duì)-乙基砜-苯基、間-甲基酮-苯基、對(duì)-甲基酮、間-乙基酮-苯基、對(duì)-乙基酮-苯基、間-甲酸酯-苯基、對(duì)-甲酸酯-苯基、間-乙酸酯-苯基、對(duì)-乙酸酯-苯基、2-甲基環(huán)戊基、2-甲氧基環(huán)戊基、2-乙基環(huán)戊基、2-乙氧基環(huán)戊基、2-氯環(huán)戊基、2-氟環(huán)戊基、2-甲基環(huán)己基、2-甲氧基環(huán)己基、2-乙基環(huán)己基、2-乙氧基環(huán)己基、2-氯環(huán)己基、2-氟環(huán)己基、3-甲基環(huán)己基、3-甲氧基環(huán)己基、3-乙基環(huán)己基、3-乙氧基環(huán)己基、3-氯環(huán)己基、3-氟環(huán)己基、3-甲基環(huán)庚基、3-甲氧基環(huán)庚基、3-乙基環(huán)庚基、3-乙氧基環(huán)庚基、3-氯環(huán)庚基、3-氟環(huán)庚基、4-甲基環(huán)庚基、4-甲氧基環(huán)庚基、4-乙基環(huán)庚基、4-乙氧基環(huán)庚基、4-氯環(huán)庚基、4-氟環(huán)庚基、4-甲基環(huán)辛基、4-甲氧基環(huán)辛基、4-乙基環(huán)辛基、4-乙氧基環(huán)辛基、4-氯環(huán)辛基、4-氟環(huán)辛基、5-甲基環(huán)辛基、5-甲氧基環(huán)辛基、5-乙基環(huán)辛基、5-乙氧基環(huán)辛基、5-氯環(huán)辛基和5-氟環(huán)辛基。這些化合物中最優(yōu)選噻吩基、取代的環(huán)己基和取代的環(huán)苯基基團(tuán)。
優(yōu)選的R2和R3基團(tuán)(即，當(dāng)C環(huán)含Δ6a-10a雙鍵時(shí))包括甲基、乙基、甲醇和乙醇。R2和R3可以相同或不同。其中最優(yōu)選甲基、甲醇和乙醇。
優(yōu)選的R4基團(tuán)包括甲基、甲醇、羧酸和甲醛。其中最優(yōu)選甲醇和甲基。
因?yàn)镽5影響本發(fā)明化合物的選擇性，因此對(duì)于CB-1選擇性的化合物優(yōu)選的基團(tuán)(例如OH基)和對(duì)于CB-2選擇性的化合物優(yōu)選的基團(tuán)(例如氫、甲氧基和乙氧基)不同。
優(yōu)選的X基團(tuán)是CH2、C(O)、C(CH3)2、C(-S(CH2)2S-)、C(-S(CH2)3S-)、C(-O(CH2)2O-)和C(-O(CH2)3O-)。其中目前最優(yōu)選偕-二甲基基團(tuán)和酮基。
特別優(yōu)選的化合物非限制性地包括下列化合物。
偕-二甲基-環(huán)戊基-Δ8-THC
偕-二甲基-環(huán)己基-Δ8-THC 偕-二甲基-環(huán)庚基-Δ8-THC 偕-二甲基-苯基-Δ8-THC 偕-二甲基-對(duì)-甲基苯基-Δ8-THC
偕-二甲基-間-甲基苯基-Δ8-THC 偕-二甲基-2-噻吩基-Δ8-THC 偕-二甲基-間-氯苯基-Δ8-THC 偕-二甲基-對(duì)-氯苯基-Δ8-THC
本發(fā)明還涉及生產(chǎn)式(I)化合物的方法。
Δ8-THC類似物通?？梢愿鶕?jù)下述方案1中定義的合成方案制備。
方案1Δ9-THC類似物通?？筛鶕?jù)下述方案2中定義的用薄荷-二烯-醇兩套環(huán)閉合制備。
方案2Δ6a-10a-THC類似物通?？梢宰鳛橥庀旌衔锘蜃鳛樾饧兊漠悩?gòu)體用β酮酯如下述方案3中所述制備。
方案3在方案1-3的每一個(gè)中，X取代基可以是二硫戊環(huán)基、偕-二甲基或亞甲基。這些取代基可以如下述方案4a-c中所述被引入間苯二酚，然后其可被引入上述方案1-3。
例如，本發(fā)明含作為X的酮取代基的化合物可由含二硫戊環(huán)基作為X的化合物形成。該反應(yīng)方案如下述方案4d所示。
方案4d雖然如上所示的化合物代表本發(fā)明的Δ8-THC或Δ9-THC類似物，但是相同的方法可用于本發(fā)明的Δ6a-10a-THC類似物。
例如，本發(fā)明的含可替換取代基作為X的化合物可從含酮取代基作為X的化合物形成(例如在方案4d中形成)。這些反應(yīng)方案如方案4e-4g所示。
雖然上述化合物代表本發(fā)明的Δ8-THC或Δ9-THC類似物，但是相同方法可用于本發(fā)明的Δ6a-10a-THC類似物。
例如，本發(fā)明含R5位非羥基的化合物可根據(jù)下述方案5a和5b中所示的方案制備。
方案5a方案5b雖然上述方案5a、5b中所示的化合物表示本發(fā)明的Δ8-THC或Δ9-THC類似物，但是相同方法可用于本發(fā)明的Δ6a-10a-THC類似物。
例如，在R4位含有羧基或醛基的本發(fā)明Δ8-或Δ9-THC類似物可分別根據(jù)下述方案6a和6b中所示的方案制備。
方案6a 方案6b羧基或醛基可以在標(biāo)準(zhǔn)條件下被還原(例如NaBH4或者LiAlH4)形成甲醇基團(tuán)。
在方案1-3中的每一個(gè)中，R1取代基可以是雜環(huán)，優(yōu)選雜芳環(huán)。這些雜環(huán)R1取代基可以經(jīng)格利雅反應(yīng)引入，允許如下述方案7所示制備間苯二酚衍生物。然后可將間苯二酚引入上述方案1-3，制備本發(fā)明的化合物。
方案7
在方案7中，雜環(huán)被顯示是未取代的。但是，應(yīng)理解的是，環(huán)取代基可以在間苯二酚形成以前被引入環(huán)中。如方案7中所示的含一個(gè)雜原子的六元環(huán)是用來(lái)表示任何上述定義的R1雜原子環(huán)。
本發(fā)明的進(jìn)一步方面涉及式(I)化合物用于調(diào)節(jié)大麻素受體活性和用于治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況、疾病或障礙的用途。
在此方面，本發(fā)明還涉及組合物，其含一種或多種根據(jù)式(I)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
一種或多種化合物以實(shí)現(xiàn)給藥目的有效的量存在。當(dāng)個(gè)別需要改變時(shí)，測(cè)定每種成分有效量的最佳范圍屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的技能。給予的一種或多種化合物的量將取決于患者和給藥模式而變化并且可以是任何有效量。典型的劑量包括約0.01至約100毫克/公斤體重，更優(yōu)選在約0.01至約1.0毫克/公斤體重之間，直到每天三次。用于本發(fā)明化合物給藥的治療方案還可以容易地由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員確定。給予的所述化合物的量可以在寬范圍內(nèi)變化，以單位劑量提供約0.01至20毫克/公斤患者體重/天的有效量以實(shí)現(xiàn)預(yù)期效果。單個(gè)劑量?jī)?yōu)選在約1毫克-約1000毫克/每劑量之間。
藥學(xué)上可接受的載體可以是任何合適的助劑、載體、賦形劑、穩(wěn)定劑或它們的組合，所述藥物組合物可以呈固體或液體形式，如片劑、膠囊、粉末、溶液、懸浮液或乳液。通常，所述組合物將含約0.01至99％、優(yōu)選約20至75％的活性化合物，連同助劑、載體和/或賦形劑。
對(duì)于口服治療給藥，所述活性化合物可以與賦形劑混合并以片劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿等形式使用。
固體單位劑型(例如片劑或膠囊劑)可以具有常用形式。例如，所述化合物可以與一種或多種潤(rùn)滑劑和/或惰性填料(如乳糖、蔗糖或玉米淀粉)結(jié)合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，這些化合物和常規(guī)的片劑基材(如乳糖、蔗糖或玉米淀粉)與粘合劑(如阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠)、崩解劑(如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉或藻酸)，以及潤(rùn)滑劑(如硬脂酸或硬脂酸鎂)結(jié)合制片。
口服的液體劑量可以含水基或醇基載體，以及甜味劑(如玉米糖漿、糖精、阿司帕坦等)、天然的或合成的香味料以及任選一種或多種染料。
適合注射使用的形式包括膠態(tài)分散體、微乳劑和用于臨時(shí)配制無(wú)菌可注射分散體或微乳劑的無(wú)菌粉末。在所有情況下，所述的形式應(yīng)是無(wú)菌的，并應(yīng)是在一定程度上存在容易注射性的流體。其應(yīng)在生產(chǎn)和儲(chǔ)存條件下穩(wěn)定，并且應(yīng)受保護(hù)抗微生物(如細(xì)菌和真菌)的污染。所述活性化合物的溶液或懸浮液可以在水中適當(dāng)?shù)嘏c表面活性劑(諸如羥丙基纖維素)混合制備。分散體還可以在甘油、液體聚乙二醇和其在油中的混合物中制備。舉例性油是石油、動(dòng)物、植物或合成來(lái)源的油，例如花生油、大豆油或礦物油。通常，水、鹽水、葡萄糖水溶液和相關(guān)的糖溶液以及二醇(如丙二醇或聚乙二醇)可以與作為預(yù)制劑的微乳劑結(jié)合使用。在普通的儲(chǔ)存和使用條件下，這些制劑含防腐劑以防止微生物生長(zhǎng)。
為了用作氣霧劑，本發(fā)明的化合物在溶液中或懸浮液中，可和合適的推進(jìn)劑(例如烴類推進(jìn)劑，如丙烷、丁烷或異丁烷)和常規(guī)的助劑一起包裝在加壓的噴霧劑容器中。本發(fā)明的物質(zhì)還可以非加壓的形式(如在氣霧器或霧化器中)給藥。
取決于所要進(jìn)行的治療，本發(fā)明所述的化合物或組合物可以經(jīng)口、局部、透皮、胃腸道外、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、通過(guò)鼻內(nèi)滴注、由腔內(nèi)或膀胱內(nèi)滴注、眼內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、損傷內(nèi)或通過(guò)施用到粘膜諸如鼻、咽喉和支氣管。
本發(fā)明的一種優(yōu)選組合物是微乳制劑，其含下列成分
本發(fā)明的化合物可以各種濃度/劑量(如上文所定義的那些)被引入微乳制劑。在試驗(yàn)中，使用了1毫克/劑量(0.1w/w百分比)的劑量。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選組合物是具有下述組成的制劑氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC，50mol％)、膽甾醇(45mol％)和二硬脂酰磷脂酰(phosphotidyl)乙醇胺-PEG2000共軛物(DSPE-PEG2000，5mol％)。本發(fā)明的化合物可以各種濃度/劑量(如上文所定義的那些)被引入脂質(zhì)體制劑。
因?yàn)楸景l(fā)明的化合物結(jié)合CB-1和/或CB-2受體并起這些受體的激動(dòng)劑或拮抗劑的作用，本發(fā)明的化合物可用于調(diào)節(jié)這些受體之一或兩者的活性。本發(fā)明的該方法是通過(guò)使細(xì)胞的大麻素受體與本發(fā)明化合物接觸進(jìn)行的，通過(guò)所述接觸調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)大麻素受體的活性。
具有大麻素受體的細(xì)胞可以離體(即，用于進(jìn)行確定化合物作為激動(dòng)劑或拮抗劑的活性試驗(yàn))或體內(nèi)(即，用于治療或者預(yù)防大麻素受體介導(dǎo)的狀況)定位。已證明CB-1受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、血管內(nèi)皮、子宮、睪丸、輸精管、小腸或膀胱中被表達(dá)。已證明CB-2受體在脾和各種血細(xì)胞(如白細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)中被表達(dá)。根據(jù)本發(fā)明這個(gè)方面的影響的細(xì)胞可以是上述確定的細(xì)胞之一或存在于上述確定的組織之一。
使用對(duì)一種大麻素受體相對(duì)于另一種是選擇性的化合物可能是理想的。對(duì)CB-1受體選擇性的化合物優(yōu)選顯示出至少4∶1、更優(yōu)選至少10∶1、最優(yōu)選至少20∶1的Ki比[CB1/CB2]。對(duì)CB-2受體選擇性的化合物優(yōu)選顯示出至少4∶1、更優(yōu)選至少10∶1、最優(yōu)選至少20∶1的Ki比[CB2/CB1]。
大麻素受體介導(dǎo)的狀況的治療或預(yù)防可通過(guò)提供本發(fā)明的化合物，然后對(duì)患者給予有效量的所述化合物或含該化合物的組合物用于治療或預(yù)防所述狀況。
對(duì)于大麻素受體調(diào)節(jié)劑，一般而言以及特別是對(duì)于CB1受體激動(dòng)劑、CB1受體拮抗體、CB2受體激動(dòng)劑和CB2受體拮抗體，已經(jīng)確定了許多用途。
已經(jīng)鑒定CB受體調(diào)節(jié)劑適用于治療呼吸疾病(例如慢性肺阻塞性障礙、肺氣腫、哮喘、支氣管炎等)和免疫調(diào)節(jié)疾病或紊亂(例如移植排斥反應(yīng)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎性腸病、狼瘡、移植物抗宿主疾病、T細(xì)胞介導(dǎo)的超敏性疾病、牛皮癬、橋本氏甲狀腺炎、急性感染性多神經(jīng)炎、癌、接觸性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、缺血性或再灌注損傷(Leftheris等人的美國(guó)專利No.6,653,304，其全文在此引用參考)。
已經(jīng)鑒定CB-1受體激動(dòng)劑適用于預(yù)防和治療神經(jīng)變性障礙，如腦中風(fēng)和顱腦創(chuàng)傷(Mittendorf等人的美國(guó)專利No.6,284,788，其全文在此引用參考)；治療高血壓、外周血管疾病、心絞痛和失血性休克(Kunos等人的美國(guó)專利No.5,939,429，其全文在此引用參考)；和治療細(xì)胞增殖障礙(例如乳腺癌或前列腺癌)(Guzman，Nature ReviewsCancer 3745-755(2003)，其全文在此引用參考)。
已經(jīng)鑒定CB-1受體拮抗劑適用于預(yù)防或治療神經(jīng)炎性病變，特別是涉及脫髓鞘的狀況(例如多發(fā)性硬化、急性感染性多神經(jīng)炎)、病毒性腦炎、腦血管意外或顱外傷的狀況(Bourrie等人的美國(guó)專利No.6,642,258，其全文在此引用參考)；眼障礙(如青光眼)、肺障礙(如哮喘和慢性支氣管炎)、過(guò)敏性疾病(如過(guò)敏性鼻炎、接觸性皮炎、過(guò)敏性結(jié)膜炎)、炎癥(如關(guān)節(jié)炎和炎性腸病)、疼痛、免疫系統(tǒng)障礙(如狼瘡和AIDS)、同種異體移植物排斥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(如圖雷特綜合征、帕金森氏病、亨廷頓舞蹈病、癲癇)和各種精神障礙(例如抑郁、躁狂性抑郁等)和嘔吐(Martin等人的美國(guó)專利No.6,509,367，其全文在此引用參考)；治療進(jìn)食障礙(如厭食)和涉及消耗非必需食品的消耗障礙(例如、糖、碳水化物、酒、藥物等的消耗)(Maruani等人的美國(guó)專利No.6,344,474，其全文在此引用參考)；治療低血壓，如與膿毒性休克相關(guān)的低血壓(Kunos等人的美國(guó)專利No.5,939,429，其全文在此引用參考)；治療抑郁癥、認(rèn)知功能喪失、精神警覺(jué)喪失、記憶喪失、與阿爾茨海默氏病、頭部創(chuàng)傷、老年性癡呆和腦腫瘤的一種或多種有關(guān)的感覺(jué)知覺(jué)喪失(Cullinan等人的美國(guó)專利No.5,747,524，其全文在此引用參考)。
已經(jīng)鑒定CB-2受體調(diào)節(jié)劑適用于治療細(xì)胞增殖障礙，如癌(Burstein等人的美國(guó)專利No.6,448,288，其全文在此引用參考)。
已經(jīng)鑒定CB-2受體激動(dòng)劑適用于治療免疫-調(diào)節(jié)的免疫紊亂如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、濕疹、多發(fā)性硬化、糖尿病和甲狀腺炎、骨形成/吸收障礙如骨質(zhì)疏松癥、強(qiáng)直性脊柱炎、痛風(fēng)、與痛風(fēng)有關(guān)的關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎和腎缺血(Xiang等人的美國(guó)專利No.6,100,259；Bender等人的美國(guó)專利No.5,948,777，其分別在此以其全文引用作為參考)。
本發(fā)明化合物的藥理學(xué)活性(即，作為激動(dòng)劑、逆激動(dòng)劑、拮抗劑等)可用標(biāo)準(zhǔn)品在本領(lǐng)域公知的體外試驗(yàn)中確定，如環(huán)AMP或35S(GTPγS)結(jié)合試驗(yàn)(參見(jiàn)例如Pertwee，Curr.Med.Chem.6(8)635-664(1999)，其全文在此引用參考)。
實(shí)施例提供以下實(shí)施例以舉例說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方案，但決不是要限制本實(shí)施例1-4的材料和方法材料所有化學(xué)品和試劑購(gòu)自Sigma-Aldrich或Fisher Scientific Inc.。無(wú)水溶劑就在使用之前通過(guò)用金屬鈉或氫化鈣蒸餾進(jìn)行制備。所有反應(yīng)在干燥條件和氬氣氛下進(jìn)行。硅膠60,200-425目用于急驟色譜法。1HNMRs、13C NMRs和2D譜在Varian 500 Inova MHz NMR上得到并且與指定的結(jié)構(gòu)一致。所有NMR在CDCl3中記錄，除非另作說(shuō)明。常規(guī)質(zhì)譜在Bruker ESQUIRE Ion Trap LC/MS(n)體系上確定，而HRMS則在University of Tennessee，Knoxville質(zhì)譜法中心測(cè)定。IR譜在Perkin-Elmer Model 1605FT紅外分光光度計(jì)上測(cè)定。薄層色譜法在硅膠板上進(jìn)行(Merck TLC板，硅膠60，F(xiàn)254)。
NMR研究和分子建模所有譜在23攝氏度和500MHz在Varian Inova-500光譜儀上用5-mm HCN三共振探頭獲得。質(zhì)子和碳化學(xué)位移參考DMSO的剩余溶劑峰(對(duì)于質(zhì)子是2.49ppm，對(duì)于碳是40ppm)。對(duì)于二維NOESY度量，對(duì)間接面積記錄總共512個(gè)點(diǎn)(fid)，2秒循環(huán)遲延。在Sybyl軟件內(nèi)的TRIAD NMR包用于數(shù)據(jù)處理和分析。在NOESY譜中的峰用TRIAD標(biāo)準(zhǔn)函數(shù)賦值和積分。然后用這些峰積分用MARDIGRAS生成對(duì)28的距離約束。來(lái)自每五個(gè)混合時(shí)間的結(jié)果得到非常相似的距離約束，因此各個(gè)距離約束在五個(gè)混合時(shí)間上求平均值得到所述分子的距離約束的最終設(shè)值。然后檢查得到的約束保證距離誤差符合NOE約束的建立誤差，其中；x＜2.5埃是+/-0.1埃；x≤3.0埃是+/-0.2埃；x≤3.5埃是+/-0.3埃；和x≥3.5是+/-0.4埃。
使用1fs時(shí)間步長(zhǎng)和MARDIGRAS生成的約束的四步驟模擬退火在28上進(jìn)行如下(1)在300K下的1ps動(dòng)力學(xué)；(2)1ps加熱至500K；(3)另一個(gè)1ps加熱階段至700K；(4)1ns平衡至500K。附加參數(shù)包括帶有Gasteiger-Huckel電荷的Tripos力場(chǎng)、8非鍵合截留值(cutoff)和距離依賴的介電常數(shù)函數(shù)。實(shí)驗(yàn)上得到的NOE距離約束在所有動(dòng)態(tài)運(yùn)行的步驟期間使用，芳香碳被限定為保持環(huán)幾何結(jié)構(gòu)的聚集體。分子幾何學(xué)在1000fs間隔在動(dòng)態(tài)運(yùn)行的階段(1)期間抽樣，并且在加熱和冷卻周期期間抽樣一次。在用于另外的分析期間采集總共1,007個(gè)構(gòu)象并且將這些進(jìn)行二十個(gè)動(dòng)態(tài)模擬，每個(gè)得到平均構(gòu)象。這些平均構(gòu)象然后被最小化，具有梯度容許限度0.005千卡/摩爾/埃，無(wú)限定的聚集體或?qū)嶒?yàn)的NOE距離約束，得到最終的平均構(gòu)象。
量子力學(xué)計(jì)算量子力學(xué)計(jì)算用GAMESS計(jì)算化學(xué)包在SGI Origin 2000上用8個(gè)信息處理機(jī)和4GB存貯器進(jìn)行。分子軌道表面由B3LYP/6-31G(p，d)結(jié)果計(jì)算，使用在孟菲斯大學(xué)修改的MOLDEN版本(Schaftenaar，G.等人，J.Comput.-Aided Mol.Design 14123(2000)，其其全文在此引入作為參考)。勢(shì)能表面使用AMI和PM3半經(jīng)驗(yàn)波函數(shù)計(jì)算，如同最終幾何結(jié)構(gòu)最佳化。
受體結(jié)合試驗(yàn)來(lái)自轉(zhuǎn)染有人CB1受體的HEK293細(xì)胞的細(xì)胞膜(Lot#1929，Bmax1.7pmol/mg蛋白質(zhì)，對(duì)于[3H]CP 55,940結(jié)合的Kd186pM)和來(lái)自轉(zhuǎn)染有人CB2受體的CHO-K1細(xì)胞的膜(Lot#1930，Bmax3.3pmol/mg蛋白質(zhì)，對(duì)于[3H]CP 55,940結(jié)合的Kd0.12nM)購(gòu)自Perkin-ElmerLife Sciences，Inc.。具有120Ci/mmol比活性的[3H]CP 55,940得自Perkin-Elmer Life Sciences，Inc.。所有其它的化學(xué)品和試劑得自Sigma-Aldrich。在得自Millipore，Inc.的配備了孔徑1.2μ的玻璃纖維過(guò)濾器(親水性，GFC過(guò)濾器)的96孔板進(jìn)行試驗(yàn)。在進(jìn)行所述試驗(yàn)之前，濾過(guò)器用0.05％聚乙烯亞胺溶液浸泡然后用去離子水洗滌5x。過(guò)濾在96孔真空集管(manifold)(Millipore Inc.)上進(jìn)行，在實(shí)驗(yàn)?zāi)┪矠V過(guò)器用移液管管尖刺穿(punched out)直接放入閃爍管，管充滿5毫升閃爍雞尾酒Ecolite(+)(Fisher Scientific)。在Beckmann閃爍計(jì)數(shù)器LS6500型上進(jìn)行計(jì)數(shù)。在DMSO中制備藥物溶液，放射性配體溶于乙醇。
培養(yǎng)緩沖劑含50mM TRIS-HCI、5mM MgCl2、2.5mM EDTA、0.5mg/ml無(wú)脂肪酸牛血清清蛋白，pH7.4。
對(duì)CB1受體的結(jié)合程序描述如下8μg膜(20μl的1∶8在培養(yǎng)緩沖劑中稀釋)與5μl藥物溶液(10-4M至10-12M)和5μl的5.4nM[3H]CP 55,940一起以總體積200μl在30攝氏度培養(yǎng)90分鐘。非特異性的結(jié)合用10μM WIN55,212-2(Ki＝4.4nM)測(cè)定。過(guò)濾所述膜，濾過(guò)器用0.2毫升冰冷的培養(yǎng)緩沖劑洗滌7次，然后在真空下風(fēng)干。
對(duì)CB2受體的結(jié)合程序描述如下15.3μg的膜(20μl的1∶20在培養(yǎng)緩沖劑中稀釋)與5μl藥物溶液(10-4M至10-12M)和5μl的10nM[3H]CP55,940以總體積200μl一起在30攝氏度培養(yǎng)90分鐘。非特異性的結(jié)合使用10μM WIN55,212-2(Ki＝4.4nM)測(cè)定。過(guò)濾所述膜，濾過(guò)器用0.2毫升冰冷的培養(yǎng)緩沖劑洗滌7次，然后在真空下風(fēng)干。
數(shù)據(jù)累計(jì)和統(tǒng)計(jì)分析如下進(jìn)行從10-4M至10-12M變化的藥物濃度，一式三份加入各個(gè)實(shí)驗(yàn)，使用GraphPad Prism確定個(gè)體摩爾IC50值。各個(gè)藥物的相應(yīng)的Ki值用Cheng and Prusoff方程式確定(Cheng，Y.等人，Biochem.Pharmacol.223099(1973)，其全文在此引用參考)并且最終的數(shù)據(jù)表示為n≥2試驗(yàn)的Ki±S.E.M.。
實(shí)施例1-合成含1′-環(huán)烷烴官能度的Δ8-THC類似物通過(guò)順式-Δ2-p-薄荷烯-1，8-二醇與適當(dāng)取代的間苯二酚的酸催化偶合進(jìn)行Δ8-THC側(cè)鏈修飾的類似物的合成(Papahatjis，D.P.et al.，J.Med.Chem.411195(1998)，其全文在此引用參考)。如圖7所概括的合成前體間苯二酚，通過(guò)使3，5-二甲氧基芐腈與合適的烷基或環(huán)烷基鹵化物的格利雅反應(yīng)，然后將得到的亞胺HCl水解生成酮5-8(Singer，M.et al.，J.Med.Chem.414400(1998)，其全文在此引用參考)。然后將這些酮與乙烷-1，2-二硫醇在BF3·Et2O存在下反應(yīng)得到相應(yīng)的二硫戊環(huán)9-12(Papahatjis，D.P.et al.，J.Med.Chem.411195(1998)，其全文在此引用參考)或與二甲基鋅和TiCl4反應(yīng)得到相應(yīng)的偕-二甲基中間體13-15(Singer，M.et al.，J Med.Chem.414400(1998)，其全文在此引用參考)。用BBr3在0攝氏度將中間體芳基醚脫保護(hù)12-16小時(shí)生成5-取代的間苯二酚16-22。間苯二酚與順式-Δ2-對(duì)-薄荷烯-1，8-二醇(從(+)-Δ2-蒈烯根據(jù)Prasad and Dev的方法制備)(Prasad，R.S.etal.，Tetrahedron 321437(1976)，其全文在此引用參考)，在對(duì)-甲苯磺酸一水合物的存在下反應(yīng)，得到相應(yīng)的Δ8-THC類似物23-29。
化合物51-(3，5-二甲氧基苯基)-戊-1-酮向在烘箱中干燥1小時(shí)的Mg碎屑(1.12克，46.7毫摩爾)和無(wú)水THF(32毫升)中加入1-丁基溴(4.46克，32.5毫摩爾)，然后回流反應(yīng)半小時(shí)。在形成格利雅以后，加入3，5-二甲氧基芐腈(4克，24.5毫摩爾)，混合物回流4小時(shí)。反應(yīng)用冰冷卻15分鐘，隨后緩慢加入40毫升6N的HCl，然后混合物回流16小時(shí)。除去THF，殘余物溶于EtOAc(60毫升)和6N HCl(15毫升)。分離各層，水層用EtOAc(4×20毫升)萃取。萃取合并的EtOAc萃取液，用飽和的NaHCO3、水和鹽水洗滌。干燥后，濃縮有機(jī)相，然后殘余物在硅膠上解析，用EtOAc/己烷(5∶25)洗脫，得到3.52克(64.7％)化合物5白色固體。Rf＝0.43(己烷∶乙酸乙酯9∶1)；IR(KBr片)2956，1601，1206，1067，755cm-1；1HNMR δ7.09(d，J＝2.31Hz，2H)，6.64(t，J＝2.31Hz，1H)，3.84(s，6H)，2.92(t，J＝7.4Hz，2H)，1.71(q，J＝7.71Hz，2H)，1.40(s，J＝7.71Hz，2H)，0.95(t，J＝7.32Hz，3H)；13C NMR δ200.51，161.10，139.33，106.17，105.29，55.83，38.70，26.84，22.71，14.17；MS(ESI，Pos.)m/z245([M+23]+)。
化合物6環(huán)戊基-(3，5-二甲氧基苯基)-甲酮用合適的烷基溴，按照關(guān)于化合物5所述的方法從3，5-二甲氧基芐腈類似地制備化合物6。得到2.90克(50.2％)澄清的油。Rf＝0.58(己烷∶乙酸乙酯9∶1)；IR(KBr純)2956，1604，1204，1067，755cm-1；1HNMR δ7.11(d，J＝2.31Hz，2H)，6.63(t，J＝2.29Hz，1H)，3.83(s，6H)，3.70-3.60(m，1H)，1.95-1.87(m，4H)，1.75-1.59(m，4H)；13C NMRδ202.71，161.06，139.23，106.57，105.11，55.80，46.72，30.35，26.54；MS(ESI，Pos.)m/z 257([M+23]+)。
化合物7環(huán)己基-(3，5-二甲氧基苯基)-甲酮用所述合適的烷基溴，按照關(guān)于化合物5的方法從3，5-二甲氧基芐腈類似地制備化合物7。得到19.3克(63.3％)澄清的油。Rf＝0.43(己烷∶乙酸乙酯9∶1)；IR(KBr純)2936，1594，1200，1059，734cm-1；1HNMR δ7.08(d，J＝2.4Hz，2H)，6.63(t，J＝2.25Hz，1H)，3.83(s，6H)，3.24-3.14(m，1H)，2.05-1.71(m，5H)，1.54-1.19(m，5H)；13C NMR δ203.73，161.12，138.61，106.35，104.92，55.77，45.99，30.39，29.73，27.12，26.17，26.05；MS(ESI，Pos.)m/z 271([M+23]+)。
化合物8環(huán)庚基-(3，5-二甲氧基苯基)-甲酮用所述合適的烷基溴，按照關(guān)于化合物5的方法從3，5-二甲氧基芐腈類似地制備化合物8。得到11.0克(45.6％)澄清的油。Rf＝0.58(己烷∶乙酸乙酯9∶1)；IR(KBr純)2941，1592，1201，1063，757cm-1；1H NMRδ7.07(d，J＝2.4Hz，2H)，6.64(t，J＝2.4Hz，1H)，3.84(s，6H)，3.40-3.32(m，1H)，1.96-1.52(m，12H).13C NMR δ204.16，161.12，138.72，106.40，104.96，55.80，46.99，46.66，31.59，31.13，28.55，28.36，28.08，27.04；MS(ESI，Pos.)m/z 285([M+23]+)。
化合物92-丁基-2-(3，5-二甲氧基苯基)-[1，3]二硫戊環(huán)向攪拌的化合物5(3.52克，15.9毫摩爾)在無(wú)水CH2Cl2(58毫升)中的溶液中加入BF3-Et2O(0.58毫升，4.8毫摩爾)和乙烷-1，2-二硫醇(2.71克，28.8毫摩爾)，在室溫下攪拌16小時(shí)。然后用10％NaOH(20毫升)萃取有機(jī)相，然后用水和鹽水萃取。干燥有機(jī)相，濃縮，然后殘余物在硅膠上解析，用EtOAc/己烷(5∶10)洗脫，得到4.50克(95.2％)化合物9無(wú)色油。Rf＝0.51(己烷∶乙酸乙酯9∶1)；IR(純)2955，1205，1067 694cm-1；1H NMR δ6.89(d，J＝2.22Hz，2H)，6.34(t，J＝2.21Hz，1H)，3.81(s，6H).3.40-3.20(m，4H)，2.33(t，J＝7.532H)，1.31-1.20(m，4H)，0.85(t，J＝6.78Hz，3H).13C NMR δ160.56，148.04，106.01，98.74，74.58，55.60，45.92，39.33，30.23，23.03，14.13；MS(ESI，Pos.)m/z 299(M+)。
化合物102-環(huán)戊基-2-(3，5-二甲氧基苯基)-[1，3]二硫戊環(huán)從化合物6用按照關(guān)于化合物9所述的相同方法制備化合物10。得到2.92克(87％)油。Rf＝0.52(己烷∶乙酸乙酯92∶8)；IR(純)2955，1206，1066，694cm-1；1H NMR δ6.98(d，J＝2.19Hz，2H)，6.34(t，J＝2.25Hz，1H)，3.80(s，6H)，3.35-3.09(m，4H)，2.82-2.71(m，1H)，1.80-1.43(m，8H).13C NMR δ160.03，149.37，106.37，98.35，79.474，55.35，52.14，38.79，31.17，25.73；MS(ESI，Pos.)m/z 333([M+23]+)。
化合物112-環(huán)己基-2-(3，5-二甲氧基苯基)-[1，3]二硫戊環(huán)從化合物7用按照關(guān)于化合物9所述的相同方法制備化合物11。得到16.8克(89.6％)油。Rf＝0.43(己烷∶乙酸乙酯92∶8)；IR(純)2930，1198，1062，698cm-1；1H NMR δ6.94(d，J＝2.4Hz，2H)，6.33(t，J＝2.25Hz，1H)，3.80(s，6H)，3.33-3.09(m，4H)，2.17-2.09(m，1H)，1.92-1.88(m，2H)，1.73-1.58(m，3H)，1.27-0.97(m，5H).13C NMR δ160.20，148.17，107.00，98.59，80.97，55.60，50.71，39.07，31.18，26.91，26.35；MS(ESI，Pos.)m/z 347([M+23]+)。
化合物122-環(huán)庚基-2-(3，5-二甲氧基苯基)-[1，3]二硫戊環(huán)從化合物8用按照關(guān)于化合物9所述的相同方法制備化合物12。得到3.60克(79.2％)油。Rf＝0.56(己烷∶乙酸乙酯92∶8)；IR(純)2925，1206，1067，832，693cm-1；1H NMR δ6.94(d，J＝2.4Hz，2H)，6.32(t，J＝2.25Hz，1H)，3.80(s，6H)，3.31-3.10(m，4H)，2.40-2.32(m，1H)，1.96-1.30(m，12H).13C NMR δ160.38，148.94，106.52，98.48，81.99，70.21，55.60，51.27，45.22，39.34，32.82，29.80，28.04，27.77；MS(ESI，Pos.)m/z 361([M+23]+)。
化合物131-(1-環(huán)戊基-1-甲基-乙基)-3，5-二甲氧基苯在裝備有加料用漏斗的干燥的三頸燒瓶中加入無(wú)水二氯甲烷(80毫升)，然后冷卻到-40攝氏度。將1M TiCl4在二氯甲烷中的溶液(102毫升，102毫摩爾)轉(zhuǎn)入加料漏斗，然后慢慢加入所述冷的二氯甲烷溶液中，保持溫度-40攝氏度。所述溶液冷卻到-50攝氏度，經(jīng)加料漏斗盡可能迅速地加入2M二甲基鋅在甲苯中的溶液(51毫升，102毫摩爾)，保持溫度在-40和-50攝氏度之間。加料完成后，劇烈攪拌粘稠的紅色溶液10分鐘，隨后迅速加入化合物6(4.01克，17.1毫摩爾)在無(wú)水二氯甲烷(20毫升)中的溶液，保持溫度在-45和-35攝氏度之間。然后用2小時(shí)將溫度緩慢升至-10攝氏度同時(shí)持續(xù)攪拌。將所述混合物傾入冰/水(200毫升)，水層用二氯甲烷(4×50毫升)萃取。合并的有機(jī)萃取液用飽和的NaHCO3、水和鹽水洗滌，干燥然后濃縮。殘余物在硅膠上解析，用EtOAc/己烷(1∶9)洗脫，得到2.75克(65.0％)的化合物13無(wú)色油。Rf＝0.50(己烷∶乙酸乙酯95∶5)；IR(純)2955，1457，1422，1205，1067，831cm-1；1H NMR δ6.53(d，J＝2.4Hz，2H)，6.30(t，J＝2.25，1H)，3.79(s，6H)，1.55-1.38(m，7H)，1.25(s，6H)，1.21-1.15(m，2H)；13CNMR δ160.50，153.36，105.30，96.76，55.45，51.80，39.90，27.94，25.97，25.82；MS(ESI，Pos.)m/z 249([M+H]+)。
化合物141-(1-環(huán)己基-1-甲基-乙基)-3，5-二甲氧基苯從化合物7用按照關(guān)于化合物13所述的相同方法制備化合物14。得到3.69克(70.3％)油。Rf＝0.55(己烷∶乙酸乙酯95∶5)；IR(純)2932，1457，1422，1208，1066702cm-1；1H NMR δ6.48(d，J＝2.4Hz，2H)，6.35(t，J＝2.1Hz，1H)，3.80(s，6H)，1.72-1.55(m，6H)，1.45-1.39(m，1H)，1.21(s，6H)，1.18-1.05(m，2H)，0.97-0.85(m，2H)；13C NMR δ160.52，153.48，105.35，96.64，55.44，49.28，41.06，28.18，27.44，26.96，25.50；MS(ESI，Pos.)m/z 263([M+H]+)。
化合物151-(1-環(huán)庚烷-1-甲基-乙基)-3，5-二甲氧基苯從化合物8用按照關(guān)于化合物13所述的相同方法制備化合物15。得到3.61克(72.3％)油。Rf＝0.50(己烷∶乙酸乙酯95∶5)；IR(純)2934，1455，1422，1206，1067，701cm-1；1H NMR δ6.50(d，J＝2.5Hz，2H)，6.29(t，J＝2.25Hz，1H)，3.80(s，6H)，1.73-1.69(m，1H)，1.65-1.50(m，H)，1.48-1.38(m，H)，1.37-1.28(m，H)，1.18(s，6H)；13C NMR δ160.33，153.83，104.94，96.41，55.21，49.21，42.03，29.52，28.06，27.95，25.19；MS(ESI，Pos.)m/z 277([M+H]+)。
化合物165-(2-丁基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-苯-1，3-二醇在氬氣下在-78攝氏度將三溴化硼(32.9毫升的1M溶液，32.9毫摩爾)加入化合物9(4.51克，3.23毫摩爾)在二氯甲烷(546毫升)中的溶液。然后用3小時(shí)將反應(yīng)溫度緩慢升至0攝氏度。在0攝氏度繼續(xù)攪拌12-14小時(shí)或直到反應(yīng)完成。通過(guò)加入甲醇除滅未反應(yīng)的三溴化硼，除去溶劑，用乙醚稀釋殘油。有機(jī)相用飽和的NaHCO3，水和鹽水洗滌，干燥然后濃縮。殘余物在硅膠上解析，用二乙醚/己烷(4∶6)洗脫，得到0.675克(74.1％)的化合物16蠟狀固體。Rf＝0.28(己烷∶乙酸乙酯8∶2)1H NMR δ6.79(d，J＝2.5Hz，2H)，6.23(t，J＝2H，1H)，5.30(br s，2H)，3.38-3.19(m，4H)，2.25(t，J＝9.75Hz，2H)，1.29-1.18(m，4H)，0.83(t，J＝7Hz，3H)；13C NMR δ156.24，148.45，107.23，101.50，73.90，45.50，39.01，29.96，22.74，13.86；MS(ESI，Neg.)m/z 269([M-H]-)。
化合物175-(2-環(huán)戊基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-苯-1，3-二醇從化合物10用按照關(guān)于化合物16所述的相同方法制備化合物17。得到0.67克(74.1％)蠟狀固體。Rf＝0.28(己烷∶乙酸乙酯8∶2)1HNMR δ6.89(d，J＝2.4Hz，2H)，6.23(t，J＝2.1Hz，1H)，5.68(brs，2H)，3.34-3.07(m，4H)，2.78-2.67(m，1H)，1.71-1.38(m，8H)；13C NMRδ156.26，150.31，108.13，101.59，79.28，52.27，39.02，31.39，25.94；MS(ESI，Pos.)m/z 305([M+23]+)。
化合物185-(2-環(huán)己基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-苯-1，3-二醇從化合物11用按照關(guān)于化合物16所述的相同方法制備化合物18。得到0.853克(62.2％)蠟狀固體。Rf＝0.27(己烷∶乙酸乙酯8∶2)1H NMRδ6.78(d，J＝0.9Hz，2H)，6.19(t，J＝1.95Hz，1H)，4.14(br s，2H)，3.32-3.07(m，4H)，2.15-2.06(m，1H)，1.96-1.58(m，4H)，1.19-1.00(m，4H)；13C NMR δ156.95，147.94，107.39，101.12，80.58，60.83，50.56，38.82，30.92，26.77，26.24，21.08，14.17；MS(ESI，Neg.)m/z 295([M-H]-)。
化合物195-(2-環(huán)庚基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-苯-1，3-二醇從化合物12用按照關(guān)于化合物16所述的相同方法制備化合物19。得到0.582克(41.5％)蠟狀固體。Rf＝0.28(己烷∶乙酸乙酯8∶2)1H NMR δ6.85(d，J＝2.4Hz，2H)，6.22(t，J＝2.25Hz，1H)，5.16(br s，2H)，3.31-3.07(m，4H)，2.35-2.28(m，1H)，1.97-1.29(m，12H)；13C NMR δ156.07，149.33，107.65，101.25，50.92，39.00，32.55，27.70，27.43；MS(ESI，Pos.)m/z 333([M+23]+)。
化合物205-(1-環(huán)戊基-1-甲基-乙基)-苯-1，3-二醇從化合物13用按照關(guān)于化合物16所述相同方法制備化合物20。得到1.29克(72.9％)粘稠的油。Rf＝0.28(己烷∶乙醚6∶4)1H NMR δ6.44(d，J＝2.1Hz，2H)，6.20(t，J＝2.1Hz，1H)，5.70(brs，2H)，2.02-1.98(m，1H)，1.57-1.35(m，6H)，1.18(s，6H)；13C NMR δ156.22，154.66，105.10，99.83，53.24，50.33，36.21，24.99，24.75；MS(ESI，Neg.)m/z219([M-H]-)。
化合物215-(1-環(huán)己基-1-甲基-乙基)-苯-1，3-二醇從化合物14用按照關(guān)于化合物16所述相同方法制備化合物21。得到1.11克(61.9％)粘稠的油。Rf＝0.28(己烷∶乙醚6∶4)1H NMR δ6.38(d，J＝2Hz，2H)，6.17(t，J＝2.25Hz，1H)，4.82(brs，2H)，1.71-1.68(m，2H)，1.63-1.60(m，1H)，1.53-1.51(m，2H)，1.42-1.36(m，1H)，1.17(s，6H)，1.16-1.03(m，3H)，0.94-0.86(m，2H)；13C NMRδ156.32，154.45，106.56，100.02，49.21，40.85，28.12，27.39，26.91，25.39，14.40；MS(ESI，Neg.)m/z 233([M-H]-)。
化合物225-(1-環(huán)庚基-1-甲基-乙基)-苯-1，3-二醇從化合物15用按照關(guān)于化合物16所述相同方法制備化合物22。得到0.442克(24.7％)粘稠的油。Rf＝0.26(己烷∶乙醚6∶4)1H NMRδ6.40(d，J＝2Hz，2H)，6.17(t，J＝2Hz，1H)，4.74(brs，2H)，1.68-1.50(m，7H)，1.48-1.39(m，2H)，1.35-1.25(m，2H)，1.15(s，6H)，1.14-1.08(m，2H)；13C NMRδ156.15，154.78，106.13，99.74，49.22，41.79，29.46，28.01，27.88，25.06；MS(ESI，Neg.)m/z 247([M-H]-)。
化合物233-(2-丁基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇向化合物16(650毫克，2.4毫摩爾)在無(wú)水苯(20毫升)中的溶液中加入順式-薄荷-2-烯-1，8-二醇(408毫克，2.4毫摩爾)，隨后加入對(duì)-甲苯磺酸一水合物(19毫克，0.099毫摩爾)。反應(yīng)混合物在80攝氏度攪拌4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，然后用乙醚稀釋，用飽和的NaHCO3，水和鹽水洗滌。干燥后濃縮，殘余物在硅膠上解析(1.9厘米×25厘米)，用3％二乙醚-石油醚洗脫，得到254毫克(26.3％)的化合物23淺黃色蠟狀固體。Rf＝0.22(石油醚∶乙醚9∶1)1H NMRδ6.77(d，J＝2Hz，1H)，6.63(d，J＝1.5Hz，1H)，5.44(d，J＝4Hz，1H)，4.82(s，1H)，3.37-3.24(m，4H)，3.22-3.18(m，1H)，2.73-2.68(m，1H)，2.31-2.27(m，2H)，2.17-2.18(m，1H)，1.86-1.79(m，3H)，1.71(s，3H)，1.40(s，3H)，1.29-1.23(m，6H)，1.12(s，3H)，0.86-0.84(m，3H)；13C NMRδ154.81，154.65，144.23，134.95，119.53，112.11，109.55，106.69，77.17，73.98，45.87，44.97，39.40，37.11，36.03，31.83，30.18，28.09，27.81，23.73，23.04，18.80，14.17；HRMS(FAB)，m/z，C23H32O2S2計(jì)算值，404.1844，實(shí)驗(yàn)值404.1844。
化合物24二硫戊環(huán)基-環(huán)戊基Δ8-THC或3-(2-環(huán)戊基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇從化合物17用按照關(guān)于化合物23所述相同的方法制備化合物24。得到55毫克(14.6％)淺黃色蠟狀固體。Rf＝0.22(石油醚∶乙醚9∶1)1HNMRδ6.86(d，J＝1.5Hz，1H)，6.70(d，J＝2Hz，1H)，5.43(d，J＝4Hz，1H)，4.76(br s，1H)，3.33-3.12(m，5H)，2.77-2.66(m，1H)，2.15-2.12(m，1H)，1.88-1.78(m，3H)，1.70(s，3H)，1.68-1.67(m，2H)，1.60-1.59(m，3H)，1.53-1.42(m，5H)，1.38(s，3H)，1.10(s，3H)；13C NMRδ154.55，154.33，146.82，134.95，119.53，111.90，110.12，107.31，79.00，52.40，44.98，39.12，36.06，31.83，31.41，31.34，28.08，27.80，25.91，23.71，18.77；HRMS(FAB)，m/z，C24H32O2S2計(jì)算值，416.1844，實(shí)驗(yàn)值416.1841。
化合物25二硫戊環(huán)基-環(huán)己基Δ8-THC或3-(2-環(huán)己基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇從化合物18用按照關(guān)于化合物23所述相同的方法制備化合物25。得到193毫克(22.2％)淺黃色蠟狀固體。Rf＝0.22(石油醚∶乙醚9∶1)1HNMRδ6.81(d，J＝2Hz，1H)，6.65(d，J＝2Hz，1H)，5.44(d，J＝5Hz，1H)，4.79(br s，1H)，3.28-3.10(m，5H)，2.72-2.66(m，1H)，2.16-2.06(m，2H)，1.93-1.79(m，5H)，1.72-1.67(m，1H)，1.70(s，3H)，1.61-1.58(m，1H)，1.29-1.02(m，6H)，1.38(s，3H)，1.11(s，3H)；13C NMRδ154.48，154.25，145.36，134.97，119.54，111.94，110.44，107.62，80.35，77.11，66.14，50.61，44.99，39.14，36.07，31.85，31.07，31.00，28.10，27.83，26.88，26.36，23.74，18.81，15.50，11.94；HRMS(FAB)，m/z，C25H34O2S2計(jì)算值，430.2000，實(shí)驗(yàn)值430.2000.。
化合物26二硫戊環(huán)基-環(huán)庚基Δ8-THC或3-(2-環(huán)庚基-[1，3]二硫戊環(huán)-2-基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇從化合物19用按照關(guān)于化合物23所述相同的方法制備化合物26。得到61毫克(14.2％)淺黃色固體。Rf＝0.22(石油醚∶乙醚9∶1)1H NMRδ6.82(d，J＝1.5Hz，1H)，6.67(d，J＝1.5Hz，1H)，5.426(d，J＝4.5Hz，1H)，4.88(brs，1H)，3.28-3.11(m，5H)，2.72-2.66(m，1H)，2.33-2.28(m，1H)，2.16-2.13(m，1H)，1.93-1.79(m，7H)，1.70(s，3H)，1.39(s，3H)，1.11(s，3H)，1.93-1.28(m，8H)；13C NMRδ154.32，154.18，145.80，134.69，119.25，111.59，109.66，106.87，81.16，76.85，50.93，44.67，39.06，35.78，32.54，32.47，31.57，27.78，27.71，27.54，27.48，23.46，18.52；HRMS(FAB)，m/z，C26H36O2S2計(jì)算值，444.2157，實(shí)驗(yàn)值444.2170。
化合物27偕-二甲基-環(huán)戊基Δ8-THC或3-(1-環(huán)戊基-1-甲基-乙基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇從化合物20用按照關(guān)于化合物23所述相同的方法制備化合物27。得到334毫克(41.6％)淺黃色固體。Rf＝0.32(石油醚∶乙醚95∶5)；1HNMRδ6.42(d，J＝1Hz，1H)，6.26(d，J＝2Hz，1H)，5.43(d，J＝5Hz，1H)，4.66(brs，1H)，3.21-3.17(m，1H)，2.72-2.67(m，1H)，2.16-2.13(m，1H)，2.06-1.99(m，1H)，1.94-1.76(m，6H)，1.70(s，3H)，1.39(s，3H)，1.22-1.13(m，2H)，1.11(s，3H)，1.18(s，6H)；13C NMRδ154.8，154.45，150.68，135.00，119.58，110.38，108.60，106.03，76.90，51.77，45.11，39.22，36.25，31.75，28.13，27.90，27.86，25.85，25.76，23.74，18.76；HRMS(FAB)，m/z，C24H34O2計(jì)算值，354.2558，實(shí)驗(yàn)值354.2566。
化合物28偕-二甲基-環(huán)己基Δ8-THC或3-(1-環(huán)己基-1-甲基-乙基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇從化合物21用按照關(guān)于化合物23所述相同的方法制備化合物28。得到298毫克(37.9％)淺黃色固體。Rf＝0.33(石油醚∶乙醚95∶5)1HNMRδ6.37(d，J＝2Hz 1H)，6.22(d，J＝1.5Hz，1H)，5.43(d，J＝5Hz，1H)，4.65(br s，1H)，3.21-3.17(m，1H)，2.72-2.67(m，1H)，2.18-2.13(m，1H)，1.91-1.77(m，3H)，1.71(s，3H)，1.67-1.67(m，2H)，1.61-1.50(m，4H)，1.39(s，3H)，1.41-1.36(m，1H)，1.16(s，3H)，1.15(s，3H)，1.10-1.03(m，3H)，0.92-0.75(m，2H)；13C NMRδ154.32，154.23，150.54，134.76，119.34，110.08，108.44，105.80，76.66，48.84，44.87，40.155，36.03，31.51，27.89，27.63，27.18，26.72，25.26，24.93，23.50，18.53；HRMS(FAB)，m/z，C25H36O2計(jì)算值，368.2715，實(shí)驗(yàn)值368.2715。
化合物29偕-二甲基-環(huán)庚基Δ8-THC或3-(1-環(huán)庚基-1-甲基-乙基)-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇從化合物22用按照關(guān)于化合物23所述相同的方法制備化合物29。得到341毫克(42.9％)淺黃色蠟狀固體。Rf＝0.33(石油醚∶乙醚95∶5)1H NMRδ6.39(d，J＝1.5Hz，1H)，6.2(d，J＝1.5Hz，1H)，5.43(d，J＝4.5Hz，1H)，4.67(brs，1H)，3.21-3.17(m，1H)，2.72-2.67(m，1H)，2.16-2.10(m，1H)，1.91-1.79(m，3H)，1.70(s，3H)，1.67-1.51(m，8H)，1.47-1.41(m，2H)，1.38-1.26(m，3H)，1.14(s，6H)，1.11(s，3H)，1.12-1.07(m，1H)；13C NMRδ154.40，154.29，151.11，134.77，119.35，110.05，109.76，108.31，105.67，76.65，49.13，44.89，41.36，36.05，31.54，29.48，29.45，28.16，28.05，27.94，27.90，27.87，27.63，25.15，24.93，23.50，22.95，18.52；HRMS(FAB)，m/z，C26H38O2計(jì)算值，382.2872，實(shí)驗(yàn)值382.2878。
實(shí)施例2-受體結(jié)合試驗(yàn)來(lái)自用人CB1大麻素受體轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞的細(xì)胞膜和來(lái)自用人CB2大麻素受體轉(zhuǎn)染的CHO-K1細(xì)胞的膜用于受體結(jié)合試驗(yàn)。通過(guò)增加Δ8-THC類似物23-29和Δ8-THC的濃度，從CB1和CB2受體制備物置換[3H]CP 55,940，被用來(lái)測(cè)定構(gòu)象傾向探針的結(jié)合親和性(見(jiàn)下表1)。與rCB1的47.6nM和mCB2的39.3的報(bào)道值相比(親和性比例CB1/CB2＝1.21)，對(duì)于Δ8-THC在hCB1和hCB2受體的Ki值分別是28.5nM和25.0nM(親和性比例CB1/CB2＝1.14)(BuschPtersen，J.et al.，J.Med.Chem.393790(1996)，其全文在此引用參考)。LBP探針顯示出相對(duì)于Δ8-THC對(duì)所述受體亞型結(jié)合親和性3至143倍增強(qiáng)。偕-二甲基類似物27-29和戊基二硫戊環(huán)23對(duì)于CB1和CB2受體具有亞納摩爾親和性，也就是說(shuō)比得上非常有效的1′，1′-二甲基庚基-Δ8-THC(DMHT，Ki＝0.77nM)(Martin，B.R.et al.，Pharmacol.Biochem.Behav.43295(1993)，其全文在此引用參考)。在這組化合物中，化合物1′，1′-二甲基環(huán)戊基，27，具有對(duì)CB1受體最高的親和性(Ki＝0.34nM)，而1′，1′-二甲基環(huán)庚基，29，顯示出對(duì)CB2受體更大的親和性(Ki＝0.22nM)。雖然親和性較高，僅證明化合物29在受體亞型之間具有適當(dāng)?shù)倪x擇性。沒(méi)有一種化合物顯示出在受體亞型之間顯著的選擇性(例如，大于10∶1)。
表18Δ-THC和類似物23-29對(duì)CB1和CB2受體的結(jié)合親和性
a對(duì)于8Δ-THC和類似物的Ki值從n≥2的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)以一式三份進(jìn)行得到，在括號(hào)中表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差。
對(duì)1′，1′-二硫戊環(huán)基團(tuán)的1′，1′-二甲基取代令人意外地降低了對(duì)CB1和CB2受體的親和性。這系列不與在合成的1′，1′-二甲基類似物中觀察到的親和性相似，具有明顯比1′，1′-二硫戊環(huán)-庚基-Δ8-THC更高的Ki(DTHT，Ki＝0.32nM)(Papahatjis，D.P.et al.，J.Med.Chem.411195(1998)，其全文在此引用參考)。在這系列化合物中，后者的碳等價(jià)物，25，具有1.86nM的Ki，暗示受體的結(jié)構(gòu)要求與空間約束有關(guān)。1′，1′-二硫戊環(huán)戊基類似物23相對(duì)于碳等價(jià)物24分別具有對(duì)CB1和CB2受體4.7倍和11倍增加的親和性。相對(duì)于27-29，與24-26對(duì)CB1親和性減小2-28倍相結(jié)合的這些數(shù)據(jù)提示該系列可能有助于定義LBP的空間限制。此外，基于二硫戊環(huán)系列的空間要求，當(dāng)考慮到26對(duì)CB1受體的1.76nM Ki和24對(duì)CB2受體的2.74nM Ki時(shí)，觀察到適度的受體亞型選擇性。對(duì)兩個(gè)系列的受體結(jié)合研究的總結(jié)果提示這些Δ8-THC類似物將有助于關(guān)于CCBs發(fā)展LBP的SAR。
實(shí)施例3-NMR和分子建模研究對(duì)CB1和CB2受體所述二甲基環(huán)烷基類似物的結(jié)合親和性可與非常有效的1′，1′-二甲基庚基THC(DMHT，Ki＝0.77nM)類似物相比。這些化合物的分子建模分析表明，與作為DMHT的環(huán)狀碳等價(jià)物28的4.55相比，DMHT的線性尺寸是7.72。在側(cè)鏈線性長(zhǎng)度的3.17的差值提示在LBP中有一個(gè)區(qū)域，其適應(yīng)C3取代基，其特征在于是疏水的橢球。仍不清楚這是否是適應(yīng)線性類似物側(cè)鏈的相同袋；但是，橢球袋的潛在存在使得關(guān)于三環(huán)體系的表征環(huán)狀側(cè)鏈的相對(duì)幾何結(jié)構(gòu)很重要。這種嘗試的一個(gè)方面使用1D和2D高場(chǎng)核磁共振譜法評(píng)價(jià)相關(guān)的側(cè)鏈幾何結(jié)構(gòu)；此外，對(duì)28進(jìn)行了廣泛NOESY研究旨在得到用于分子建模的距離約束。
在類似物23-29中構(gòu)成質(zhì)子的化學(xué)位移首先運(yùn)用1D、gHSQC、gHMBC和gCOSY實(shí)驗(yàn)賦值?；谶@種賦值，經(jīng)2D NOESY實(shí)驗(yàn)檢查質(zhì)子的相對(duì)空間定位。觀察所有衍生物中相互連接三環(huán)體系質(zhì)子NOEs的網(wǎng)絡(luò)。對(duì)27-29的NOESY實(shí)驗(yàn)顯示，在芳香環(huán)的H2和H4質(zhì)子和二甲基和環(huán)烷基次甲基質(zhì)子之間的強(qiáng)NOEs(圖1)；此外，亞甲基單元α至環(huán)烷基的次甲基顯示，關(guān)于芳族質(zhì)子的中等NOEs。對(duì)于二硫戊環(huán)探針24-26，觀察到類似的類型，每個(gè)二硫戊環(huán)亞甲基的兩個(gè)弱NOEs顯著相加形成一個(gè)NOE。這些對(duì)二硫戊環(huán)亞甲基的NOEs的存在和在3.07-3.33ppm之間多重峰的存在，即，非對(duì)映的質(zhì)子(圖2)，對(duì)這些質(zhì)子的觀察提示，抑制了環(huán)的柔性，因而質(zhì)子存在于芳族屏蔽/去屏蔽漏斗的獨(dú)特區(qū)域。對(duì)LBP探針觀察到的NOE類型和強(qiáng)度暗示C3側(cè)鏈的構(gòu)造傾向。
結(jié)合建模的NOE強(qiáng)度的定性分析提示在溶液中環(huán)烷基官能度伸長(zhǎng)遠(yuǎn)離芳香環(huán)并且不重疊在環(huán)上，即，在H4′-H6′和H2/H4質(zhì)子之間明顯缺少NOEs(圖1)。為了更準(zhǔn)確地檢查相對(duì)的環(huán)取向，用混合時(shí)間300-700ms在100ms間隔內(nèi)對(duì)28進(jìn)行了NOESY實(shí)驗(yàn)。選擇這種類似物用于研究是因?yàn)樗荄MHT的碳等價(jià)物。譜顯示出41個(gè)清楚解析的NOEs，帶有從環(huán)己基到H2和H4質(zhì)子產(chǎn)生的8個(gè)信號(hào)亞群。利用TRIPOS TRIAD軟件積分那些不相重疊的清楚的賦值峰，隨后用MARDIGRAS的約束產(chǎn)生，得到26距離約束的網(wǎng)絡(luò)(圖3)(SYBYL，version 6.8，Tripos，Inc.St.Louis，MO(2001)，其全文在此引用參考)。利用這些約束，使模型經(jīng)歷1ns制約的分子動(dòng)力學(xué)，測(cè)定與實(shí)驗(yàn)的NMR數(shù)據(jù)有關(guān)的扭轉(zhuǎn)構(gòu)象異構(gòu)體的群體。產(chǎn)生的構(gòu)象顯示在環(huán)己烷次甲基和芳族質(zhì)子之一之間的單一約束妨礙，很可能是由于C3-C1′-C2′-C3′(τ2)鍵在41和319度扭轉(zhuǎn)角之間互變，表示在模擬退火研究中觀察到的兩個(gè)扭轉(zhuǎn)群(圖4)。利用格點(diǎn)搜索的多級(jí)扭轉(zhuǎn)驅(qū)動(dòng)未能預(yù)測(cè)這些幾何結(jié)構(gòu)，提示電子效應(yīng)是NMR研究中觀察到的構(gòu)象的原因。因此，利用量子力學(xué)計(jì)算檢查驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)偏移的電子效應(yīng)。
實(shí)施例4-量子力學(xué)計(jì)算假定偕-二甲基將采用使構(gòu)象偏移的側(cè)鏈和芳香環(huán)之間相互作用最大化的構(gòu)象異構(gòu)體似乎是合理的。但是，基于分子力學(xué)計(jì)算(即，靜電學(xué)和空間分析)不能解釋通過(guò)NMR和分子動(dòng)力學(xué)預(yù)測(cè)的環(huán)己基類似物28的構(gòu)象。為了解釋這個(gè)問(wèn)題，已經(jīng)使用半經(jīng)驗(yàn)的和密度泛函理論(DFT)計(jì)算中肯地評(píng)價(jià)可能的構(gòu)象異構(gòu)體和確定所述試驗(yàn)結(jié)果中電子作用的重要性。
用AM1和PM3半經(jīng)驗(yàn)參數(shù)化法，用GAMESS計(jì)算化學(xué)包進(jìn)行幾何結(jié)構(gòu)優(yōu)化(Schmidt，M.W.et al.，J.Comput.Chem.141347(1993)，其全文在此引用參考)。通過(guò)計(jì)算優(yōu)化的幾何結(jié)構(gòu)赫賽函數(shù)確認(rèn)穩(wěn)定點(diǎn)。用這些優(yōu)化結(jié)構(gòu)，用AM1和PM3作為圍繞C2-C3-C1′-C2′(τ1)和C3-C1′-C2′-C3′(τ2)鍵旋轉(zhuǎn)的函數(shù)，并且所有其它的幾何參數(shù)保持恒定來(lái)計(jì)算勢(shì)能表面(PES)。兩個(gè)半經(jīng)驗(yàn)的勢(shì)能表面表明，圍繞τ1和τ2鍵有相對(duì)自由的旋轉(zhuǎn)(圖5)。在PM3表面上更明顯的″凸紋″由更發(fā)散的電子密度產(chǎn)生，該電子密度用相對(duì)于AM1的PM3參數(shù)化法產(chǎn)生。在PES中四個(gè)大峰是環(huán)己基基團(tuán)上亞甲基氫和THC部分的C2氫接近碰撞的結(jié)果。最劇烈的這些碰撞由兩個(gè)氫原子之間1.03的間隙引起。
在PES上有6個(gè)區(qū)域，其表示類似物28的局部最小值，其可以根據(jù)(θτ1，τ2)的定制角度對(duì)表示為A(141，56)，B(259，301)，C(270，180)，D(323，56)，E(40，305)和F(108，190)。進(jìn)行在PM3水平的幾何結(jié)構(gòu)最佳化以識(shí)別最接近這些點(diǎn)的每個(gè)的局部最小值，然后用B3LYP函數(shù)和6-31G(p，d)基本設(shè)置進(jìn)行DFT能量計(jì)算。另外，用同樣的方法識(shí)別通過(guò)關(guān)于τ1鍵180度旋轉(zhuǎn)得到的關(guān)聯(lián)構(gòu)象異構(gòu)體(標(biāo)明A ′，B′等)。對(duì)于τ2兩面角的數(shù)值范圍對(duì)于量子力學(xué)計(jì)算是56-305度，而動(dòng)力學(xué)研究預(yù)測(cè)范圍是41-319。對(duì)于在B3LYP/6-31G(p，d)水平的六個(gè)最低能量構(gòu)象的相對(duì)的能量(Hehre，W.J.et al.，J.Chem.Phys.225756(1972)；Hariharan，P.C.et al.，Theoret.Chimica Acta 28213(1973)，其全文在此參考引用)，在下表2中給出。注意在這些結(jié)構(gòu)之間最大的能量差僅是0.6千卡/摩爾(大約8.8毫哈里特)，提示全部構(gòu)象異構(gòu)體是易受熱影響的。在分子建模結(jié)果和量子力學(xué)結(jié)果之間觀察到的偏差足夠小(即，在10％以內(nèi))，從而這兩種方法之間可調(diào)整一致。
表2對(duì)于偕-二甲基類似物在勢(shì)能表面上六個(gè)最低能量之間的相對(duì)能量差(千卡/摩爾)(Huffman et al.，J.Med Chem.393875(1996))。
a括號(hào)中的數(shù)字是定制角度對(duì)(θτ1，τ2)然而，NMR數(shù)據(jù)提示在溶劑相中有優(yōu)選的構(gòu)象，提示電子貢獻(xiàn)可能是重要的。圖6B顯示偕-二甲基類似物28的HOMO軌道圖(來(lái)自B3LYP/6-31G(p，d)計(jì)算)。在該構(gòu)象中，有與連到C3′碳原子的氫原子相關(guān)的軌道葉。這個(gè)葉的形狀提示反鍵σ軌道，表明在氫原子和芳環(huán)電子密度之間的互相推斥作用。與芳環(huán)相關(guān)的軌道葉的形狀的檢驗(yàn)顯示與該氫相互作用有關(guān)的變形。圖6A顯示相同化合物在圍繞τ2角旋轉(zhuǎn)180度之后并且隨后的如先前所述再優(yōu)化的HOMO軌道圖。在這種情況下，我們注意到在芳環(huán)和最近的氫原子之間兩種這樣的推斥，其導(dǎo)致能量增加0.28千卡/摩爾。雖然小，但這個(gè)能量可以足夠?qū)е氯軇┫嘀械臉?gòu)象優(yōu)選。因?yàn)锽3LYP函數(shù)的性質(zhì)和6-31G(p，d)基本設(shè)置中存在擴(kuò)散功能，因此可以觀察這個(gè)特征。與試驗(yàn)結(jié)果相比，我們可以推測(cè)NMR譜中的偏移是在芳環(huán)和環(huán)己基末端氫之間電子相互作用的結(jié)果，優(yōu)選有利于使這種推斥數(shù)目最小的構(gòu)象。
實(shí)施例1-4的討論新的Δ8-THC類似物的設(shè)計(jì)和合成允許對(duì)CB1和CB2受體側(cè)鏈LBP袋探查。假設(shè)含和已知高親和力配體相同碳數(shù)但是線尺寸減少的環(huán)烷基側(cè)鏈可以提供對(duì)側(cè)鏈袋幾何結(jié)構(gòu)的了解。為此，合成了7種新的Δ8-THC類似物并進(jìn)行對(duì)人CB1和CB2受體結(jié)合親和性的測(cè)試。二甲基環(huán)烷基類似物27-29具有的Ki值(0.34對(duì)于0.94nM)可與那些非常有效的CB1類似物，如DHMT(0.77nM)、1′，2′-二甲基庚基(0.46-0.84nM)類似。相反，1′，1′-二硫戊環(huán)引入到環(huán)烷基類似物與二甲基系列相比降低了受體結(jié)合。顯著的例外是23，其中相對(duì)于Δ8-THC觀察到與CB1和CB2受體的結(jié)合分別增加了33和47倍。當(dāng)比較來(lái)自不同種化合物的受體結(jié)合數(shù)據(jù)和從不同的受體制備物得到的受體結(jié)合數(shù)據(jù)時(shí)還必須謹(jǐn)慎；但是，在我們的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的hCB1與rCB1的親和力比例是1.67，而hCB2與mCB2的比值是1.57。分析這個(gè)比例，我們的化合物仍然可與其它已知的高親和力CB配位體相比。
在CB1親和性中最顯著的差異發(fā)生在環(huán)戊基和戊基化合物23，24和27中。有趣的是，23和27具有對(duì)CB1受體的高親和性，相反，24具有11-28倍降低的CB1親和性。24提高的Ki的物質(zhì)基礎(chǔ)可能反映由于二硫戊環(huán)τ1的有限旋轉(zhuǎn)，其因而阻止環(huán)戊基最佳化與受體的相互作用?；趯?duì)28的NMR和量子力學(xué)計(jì)算不能預(yù)測(cè)圍繞τ1和τ2旋轉(zhuǎn)的這種限制，其因而提示27可以采取使受體相互作用最大化的幾何結(jié)構(gòu)。特別是，雖然關(guān)于τ2的構(gòu)象柔性，環(huán)己基的空間體積阻止了圍繞τ1的自由旋轉(zhuǎn)。類似物23不受與環(huán)狀類似物有關(guān)的空間約束的限制，因而可以采用受體有利的構(gòu)象。與24-26對(duì)CB1受體的親和性相反，所述二硫戊環(huán)好象沒(méi)有被CB2受體耐受，即，對(duì)24和26親和性減少7和33倍。這與對(duì)CB1親和性的數(shù)據(jù)結(jié)合，提示在受體亞型之間LBP側(cè)鏈要求對(duì)空間體積敏感。
該研究尤其最重要的發(fā)現(xiàn)是環(huán)烷基側(cè)鏈結(jié)合到CB1和CB2受體，親和性可與直鏈Δ8-THC類似物(如DMHT)相比。對(duì)環(huán)狀的側(cè)鏈類似物最大線性尺寸的分析對(duì)于27是3.90埃，對(duì)于29是4.99埃，相比之下對(duì)于DMHT是7.72埃。這些距離與受體結(jié)合數(shù)據(jù)聯(lián)合起來(lái)暗示，存在一種橢圓疏水袋，其可能表示或可能不表示被線性側(cè)鏈類似物占據(jù)的袋?；贜MR和量子力學(xué)計(jì)算，從芳香環(huán)的平面起，在溶液中C3側(cè)鏈相對(duì)于三環(huán)體系的取向投影124度。這些研究的結(jié)果提供了對(duì)Δ8-THC類似物溶液構(gòu)象的了解，其可以反映這些CB配體的LBP空間約束。在LBP中側(cè)C3側(cè)鏈的取向不能結(jié)論性地確定，因?yàn)榕潴w以不同于溶液或晶體結(jié)構(gòu)的構(gòu)象結(jié)合受體。此外，類似物親和性不能與配體功效相關(guān)聯(lián)，因?yàn)樵S多高親和性配體在功能試驗(yàn)中顯示出不良的功效(Griffin，G.et al.，Br.J.Pharmacol.132525-35(2001)，其全文在此引用參考)。對(duì)該化合物系的功能試驗(yàn)將最終允許我們細(xì)化CB受體的LBD的結(jié)構(gòu)要求和這些類似物的特性。
類似物27-29具有可與已知的高親和性CCB配體相比的對(duì)CB1和CB2受體的親和性，而二硫戊環(huán)衍生物24和26具有減少的親和性。受體結(jié)合數(shù)據(jù)提示對(duì)于該系列化合物的側(cè)鏈結(jié)合袋可以表征為疏水的橢圓形。雖然功能效價(jià)不需要與結(jié)合親和性有關(guān)，Ki值給出了受體結(jié)構(gòu)的部分的征兆，為改進(jìn)CCB結(jié)構(gòu)生產(chǎn)親和性更高的類似物上作準(zhǔn)備。報(bào)告的化合物的功能活性的測(cè)定與對(duì)CCBs的SAR研究相結(jié)合應(yīng)提供對(duì)開(kāi)發(fā)這類CB受體類似物非常寶貴的了解。此外，上述的研究可以幫助闡明是否橢圓袋與線性側(cè)鏈CB類似物占據(jù)的袋是相同的袋。
實(shí)施例5-合成含1′-苯基官能度的Δ8-THC類似物經(jīng)典大麻素類的側(cè)鏈往往通過(guò)使3，5-二甲氧基芐腈與合適的格利雅試劑反應(yīng)，然后將中間體亞胺鹽酸水解為酮而制備(Singer et al.，J.Med.Chem.414400(1998)，其全文在此引用參考)。由于與烷基格利雅試劑相比芳族格利雅試劑反應(yīng)性降低，選擇3，5-二甲氧基苯甲醛作為原料，使其與苯基溴化鎂反應(yīng)得到相應(yīng)的醇(37)(Frenette et al.，J.Org.Chem.563083(1991)，其全文在此引用參考)如圖8A-B所示。醇用PCC氧化得到關(guān)鍵中間體酮(38)(Frenette et al.，J.Org.Chem.563083(1991)，其全文在此引用參考)。通過(guò)使酮與乙烷二硫醇在三氟化硼存在下反應(yīng)在C1’位引入二硫戊環(huán)(40)(Papahatjis et al.，J.Med.Chem.411195(1998)，其全文在此引用參考)。酮中間體還與二甲鋅和四氯化鈦反應(yīng)在C1’位形成二甲基取代基(39)(Singer et al.，J.Med.Chem.414400(1998)，其全文在此引用參考)。中間體(40)用阮內(nèi)鎳脫硫得到亞甲基中間體(41)(Sondheimer et al.，Tetrahedron.Lett.，803995(1958)，其全文在此引用參考)。1-取代的3，5-二甲氧基中間體(39-41)用三溴化硼脫保護(hù)得到相應(yīng)的間苯二酚(42-44)(Singer et al.，J.Med.Chez.414400(1998)，其全文在此引用參考)。然后由這些間苯二酚(42-44)通過(guò)使它們與順式Δ2-對(duì)-薄荷烯-1，8-二醇(從(+)-Δ2-蒈烯制備(Prasad et al.，Tetrahedron 321437(1976)，其全文在此引用參考))在對(duì)甲苯磺酸存在下反應(yīng)得到Δ8-THC類似物(33-35)。在C1’位帶有酮官能度的Δ8-THC類似物通過(guò)用硝酸銀將類似物(34)脫保護(hù)得到(Reece et al.，Tetrahedron，244249(1968)，其全文在此引用參考)。
化合物33偕-二甲基-苯基-Δ8-THCRf＝0.42(二氯甲烷∶己烷50∶50)，Rf＝0.6(乙酸乙酯∶石油醚10∶90)，1H NMR(CDCl3)δ7.14ppm(m，5H)，6.36ppm(d，J＝1.8Hz，1H)，5.91ppm(d，J＝2.1Hz，1H)，5.35ppm(d，J＝6Hz，1H)，4.44ppm(s，1H)，3.1ppm(m，1H)，2.61ppm(m，1H)，2.05ppm(m，1H)，1.75ppm(m，3H)，1.62ppm(s，3H)，1.54ppm(m，6H)，1.31ppm(s，3H)，1.04ppm(s，3H)；MS(ESI，Neg)，m/z 361([M-1]-).HRMS(FAB)，m/zC25H30O2計(jì)算值，362.2246，實(shí)驗(yàn)值362.2239。
化合物34二硫戊環(huán)基-苯基-Δ8-THCRf＝0.22(二氯甲烷∶己烷50∶50)，Rf＝0.58(乙酸乙酯∶石油醚20∶80)，1H NMR(CDCl3)δ7.54ppm(m，2H)，7.18ppm(m，3H)，6.65ppm(d，J＝2.1Hz，1H)，6.39ppm(d，J＝2.1Hz，1H)，5.35ppm(d，J＝4.2Hz，1H)，4.61ppm(s，1H)，3.32ppm(m，4H)，3.1ppm(m，1H)，2.62ppm(m，1H)，2.06ppm(m，1H)，1.76ppm(m，3H)，1.62ppm(s，3H)，1.29ppm(s，3H)，1.03ppm(s，3H)；MS(ESI，Neg)，m/z 423([M-1]-).HRMS(FAB)，m/z C25H28O2S2計(jì)算值，424.1531，實(shí)驗(yàn)值424.1533。
化合物35亞甲基-苯基-Δ8-THCRf＝0.34(二氯甲烷∶己烷50∶50)，Rf＝0.42(乙酸乙酯∶石油醚10∶90)，1H NMR(CDCl3)δ7.22ppm(m，3H)，7.13ppm(m，2H)，6.22ppm(m，1H)，5.98ppm(m，1H)，5.35ppm(d，J＝6Hz，1H)，4.52ppm(s，1H)，3.74ppm(s，2H)，3.1ppm(m，1H)，2.62ppm(m，1H)，2.07ppm(m，1H)，1.75ppm(m，3H)，1.62ppm(s，3H)，1.29ppm(s，3H)，1.03ppm(s，3H)；MS(ESI，Neg)，m/z 333([M-1]-).HRMS(FAB)，m/z C23H26O2計(jì)算值，334.1933，實(shí)驗(yàn)值334.1928。
化合物36甲酮-苯基-Δ8-THCRf＝0.2(二氯甲烷∶己烷50∶50)，Rf＝0.47(乙酸乙酯∶石油醚20∶80)，1H NMR(CDCl3)δ7.82ppm(m，2H)，7.58ppm(m，1H)，7.48ppm(m，2H)，6.92ppm(d，J＝1.8Hz，1H)，6.83ppm(d，J＝1.5Hz，1H)，5.48ppm(m，2H)，3.34ppm(m，1H)，2.81ppm(m，1H)，2.18ppm(m，1H)，1.88ppm(m，3H)，1.74ppm(s，3H)，1.41ppm(s，3H)，1.12ppm(s，3H)；MS(ESI，Neg)，m/z 347([M-1]-)。HRMS(FAB)，m/z C23H24O3計(jì)算值，348.1725，實(shí)驗(yàn)值348.1717。
用轉(zhuǎn)染到HEK293 EBNA細(xì)胞中的人受體的膜制備物確定這些帶有苯基側(cè)鏈的新的Δ8-THC類似物的CB1和CB2結(jié)合親和性。用氚化的CP55,940作為競(jìng)爭(zhēng)放射性配體進(jìn)行受體結(jié)合試驗(yàn)，用10μm WIN55212-2確定非特異性的結(jié)合(Nadipuram et al.，Bioorg.Med.Chem.113121(2003)，其全文在此引用參考)。
這些新的類似物的CB2結(jié)合親和性在0.9-86nM范圍內(nèi)，而CB1結(jié)合親和性范圍是12-297nM(下表3)。引起興趣的是，當(dāng)與先導(dǎo)化合物(32)相比時(shí)，這些化合物顯示出顯著不同的結(jié)合特征。二甲基類似物(33)顯示對(duì)CB1和CB2受體二者良好的結(jié)合親和性，對(duì)CB2受體有13倍的選擇性。該選擇性與先導(dǎo)化合物(32)形成對(duì)照，該先導(dǎo)化合物以幾乎相等的親和性結(jié)合兩個(gè)亞型。當(dāng)與Δ8-THC相比時(shí)，酮類似物(36)顯示對(duì)CB2受體類似的結(jié)合親和性，但是對(duì)CB1受體結(jié)合親和性幾乎減少10倍。二硫戊環(huán)類似物(34)顯示出無(wú)亞型選擇性，但是相對(duì)于1′-環(huán)己基衍生物，親和性減少10倍(CB1Ki＝1.86nM和CB2Ki＝1.05nM)(Nadipuram et al.，Bioorg Med.Chem.113121(2003)，其全文在此引用參考)。與Δ8-THC相比，亞甲基類似物(5)顯示對(duì)兩個(gè)亞型顯著降低的結(jié)合親和性。
表3化合物33-36對(duì)CB1和CB2受體的親和性(Ki)
aΔ8-THC和類似物的Ki值從三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中獲得，每個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行兩次，Ki值被表示為這三個(gè)值的平均值，均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差列于括號(hào)中。
1’-苯基取代的Δ8-THC類似物的結(jié)合親和性提供一些新的對(duì)CB1和CB2受體的結(jié)合袋的官能團(tuán)要求的了解。從我們的對(duì)CB2受體顯示出適度選擇性的二甲基和酮類似物可以發(fā)現(xiàn)重要的結(jié)構(gòu)信息。這與我們的上述環(huán)己基Δ8-THC類似物的數(shù)據(jù)結(jié)合(Nadipuram et al.，Bioorg.Med.Chez.113121(2003)，其全文在此引用參考)提示，當(dāng)與CB1受體相比時(shí)，CB2受體的亞位點(diǎn)結(jié)合袋可耐受環(huán)烷基側(cè)鏈和剛性的芳族側(cè)鏈。當(dāng)考慮Huffman等人報(bào)告的n個(gè)短鏈C3類似物也顯示出顯著的CB2選擇性時(shí)(Huffinan et al.，Bioorg.Med.Chem.104119(2002)，其全文在此引用參考)，33和36的選擇性是有趣的。當(dāng)考慮到與我們的1-羥基類似物相比，短鏈類似物主要是1-脫氧和1-甲氧基化合物時(shí)，在兩個(gè)結(jié)構(gòu)類型之間比較是困難的。盡管，我們的1-羥基化合物適度的選擇性可能暗示在苯基側(cè)鏈和芳香族氨基酸之間存在有利的相互作用，該氨基酸可能存在于CB2受體結(jié)合袋中。雖然難以進(jìn)行任何直接比較，但是已經(jīng)提出芳族殘基存在于CB1受體的LBP(Papahatjis et al.，J.Med.Chem.411195(1998)，其全文在此引用參考)。相反，這些化合物相對(duì)于環(huán)己基衍生物(Nadipuram et al.，Bioorg Med.Chem.113121(2003)，其全文在此引用參考)和直鏈衍生物(Papahatjis et al.，J.Med.Chem.411195(1998)，其全文在此引用參考)顯示的降低的CB1結(jié)合親和性可能提示，所述化合物不能采用使配體-受體相互作用最大化的構(gòu)象。極性C1’酮基團(tuán)的存在還可能減少早先被Papahatjis和同事提出的CB1親和性(Papahatjis et al.，J.Med.Chez.411195(1998)，其全文在此引用參考)。應(yīng)用取代的C1’苯基進(jìn)行的另外的研究應(yīng)提供了對(duì)這類Δ8-THC類似物的SAR的了解。結(jié)合這些功能試驗(yàn)研究應(yīng)有助于更好地理解CB1和CB2受體的LBP的結(jié)構(gòu)要求差異，并且可以幫助研究出更多選擇性的化合物。
實(shí)施例6-1’-苯基Δ8-THC類似物的NMR和電子結(jié)構(gòu)分析所有計(jì)算用GAMESS(Schmidt，M.W.et al.，J.Comput.Chem.，141347(1993)，其全文在此引用參考)計(jì)算化學(xué)包在Silicon GraphicsOrigin 2000上用8信息處理機(jī)和4GB總共內(nèi)存空間進(jìn)行。最初的幾何結(jié)構(gòu)優(yōu)化用PM3半經(jīng)驗(yàn)的哈密頓函數(shù)進(jìn)行，隨后進(jìn)行數(shù)值的赫賽函數(shù)校正各個(gè)結(jié)構(gòu)是局部最小值。然后將得到的結(jié)構(gòu)作為勢(shì)能表面計(jì)算的參考點(diǎn)。
選定兩個(gè)二面角代表圍繞C3-C1’鍵的扭轉(zhuǎn)和前-側(cè)苯基圍繞其與C1′的鍵的旋轉(zhuǎn)。我們此后會(huì)分別提及這些作為τ1和τ2的兩個(gè)角。在理論P(yáng)M3水平進(jìn)行勢(shì)能表面(PES)計(jì)算，關(guān)于每一扭轉(zhuǎn)角從0到360度以十度增量的方式進(jìn)行。所有其它的幾何參數(shù)保持固定在從最初的PM3幾何結(jié)構(gòu)優(yōu)化中獲得的值。優(yōu)化結(jié)構(gòu)適用作補(bǔ)充信息以PDB(蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù))文件形式。根據(jù)在如下相應(yīng)PDB文件中四原子設(shè)值確定兩個(gè)扭轉(zhuǎn)角化合物34(二硫戊環(huán)基-苯基-Δ8-THC)(τ16，1，19，40τ240，19，41，49)；化合物33(偕-二甲基-苯基-Δ8-THC)(τ12，1，19，20 τ220，19，41，42)；化合物35(亞甲基-苯基-Δ8-THC)(τ12，1，19，20τ220，19，41，42)；化合物36(甲酮-苯基-Δ8-THC)(τ12，1，19，39τ239，19，40，41)。得到的能量相對(duì)于最低能量結(jié)構(gòu)校正，得到的勢(shì)能表面在圖10-13中用對(duì)數(shù)尺度作圖以突出特征。較暗的顏色代表低能量區(qū)域，較淺的顏色代表較高的能量。
在各個(gè)PES上確定局部最小值然后用PM3哈密頓函數(shù)進(jìn)行幾何結(jié)構(gòu)優(yōu)化。由此設(shè)值得到的結(jié)構(gòu)，其經(jīng)數(shù)值赫賽函數(shù)計(jì)算不能確認(rèn)為局部極小值，在隨后的計(jì)算中放棄。
然后在每一確定的局部最小值上用B3LYP/6-31G(p，d)(Lee etal.，Physical Review B，37785(1988)；Hehre et al.，J.Chenz.Phys.562257(1972)；Hariharan et al.，Sheoret.Chimica Acta，28213(1973)，其全文在此引用參考)進(jìn)行密度泛函理論計(jì)算。用在孟菲斯大學(xué)改進(jìn)的MOLDEN版本(Schaftenaar et al.，J.Comput.Aided Mol.Design，14123(2000)，其全文在此引用參考)由DFT結(jié)果生成分子軌道表面。
所有譜在23攝氏度和500MHz在Varian Inova-500光譜儀上用5-mm HCN三共振探頭獲得。質(zhì)子和碳化學(xué)位移參考CDCl3的剩余溶劑峰(對(duì)于質(zhì)子是7.24ppm，對(duì)于碳是77ppm)。對(duì)于二維NOESY度量，對(duì)間接面積記錄總共1024個(gè)點(diǎn)(fid)，采用2秒循環(huán)遲延，500ms混合時(shí)間。在Sybyl(″SYBYL，version 6.8″，St.Louis，MOTripos，Inc.2001，其全文在此引用參考)軟件內(nèi)的TRIAD NMR包用于數(shù)據(jù)處理和分析。。在NOESY譜中的峰用TRIAD標(biāo)準(zhǔn)函數(shù)賦值和積分。然后用這些峰積分用MARDIGRAS生成距離約束。然后檢查得到的約束保證距離誤差符合NOE約束的建立誤差，其中，x＜2.5埃是+/-0.1埃；x≤3.0埃是+/-0.2埃；x≤3.5埃是+/-0.3埃；和x≥3.5是+/-0.4埃。
對(duì)實(shí)施例5每一苯基化合物用MARDIGRAS生成的約束進(jìn)行模擬調(diào)整十個(gè)循環(huán)(例如化合物33、34、35和36)，加熱到1000K達(dá)lps，然后指數(shù)(exponential)冷卻到200K，然后平衡5ps。在模擬調(diào)整運(yùn)行的所有步驟期間使用實(shí)驗(yàn)上得到的NOE距離約束。這些獨(dú)特旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的平均構(gòu)象然后被最小化，采用0.005千卡/摩爾/埃的梯度容許限度，不使用實(shí)驗(yàn)的NOE距離約束，得到最終的平均構(gòu)象。附加包括帶有MMFF94電荷的Tripos力場(chǎng)、8埃非鍵合截留值和距離依賴的介電常數(shù)函數(shù)。
每一苯基衍生物顯示出大的構(gòu)象柔性，得到大量的局部最小值。表4(下文)顯示確定的整套最小值和相關(guān)的結(jié)構(gòu)的DFT能量(表示為千卡/摩爾)以及每個(gè)局部最小值的HOMO-LUMO能量間距。對(duì)跨越HOMO-4至LUMO+4的所述最低能量構(gòu)象的軌道能量如下表5所示。如表6所示比較最低能量最小限度和NMR導(dǎo)出的結(jié)果清楚地證明，真正了解這些分子最可能的構(gòu)象需要更多成熟的方法。
表4每一大麻素衍生物的局部最小值。各個(gè)最小值用兩個(gè)扭轉(zhuǎn)角τ1和τ2鑒別，其分別描述圍繞C3-C1’和C1’-C2’鍵的旋轉(zhuǎn)。
表5所述最低能量局部最小值用eV表示的軌道能量。包括用于對(duì)比的偕-二甲基-環(huán)己基-Δ8-THC和二硫戊環(huán)-環(huán)己基-Δ8-THC結(jié)果。
表6對(duì)比理論的和NMR觀察的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)參數(shù)。
考慮到對(duì)于各個(gè)衍生物的可能的局部最小值數(shù)，我們首先確定是否整個(gè)勢(shì)能表面易受這些分子的影響。為了解釋這一第一近似值中的問(wèn)題，我們?yōu)槊總€(gè)分子圖示旋轉(zhuǎn)能障，通過(guò)采用在勢(shì)能表面上最低能量結(jié)構(gòu)然后旋圍繞τ1旋轉(zhuǎn)分子前側(cè)面(圖9)。化合物34(二硫戊環(huán)衍生物)和化合物36(甲酮衍生物)具有顯著的旋轉(zhuǎn)能障，而化合物33(偕-二甲基衍生物)和化合物35(亞甲基衍生物)各具有小于3千卡/摩爾的旋轉(zhuǎn)能障。這提示化合物33和化合物35可以接近整個(gè)勢(shì)能表面，而化合物34和化合物36將被限制在的勢(shì)能表面上特定的阱。
勢(shì)能表面的一個(gè)有趣的特征從圖10-13的檢查中顯露出來(lái)。除了對(duì)化合物34和化合物36的旋轉(zhuǎn)大的障礙以外，對(duì)于化合物36只有非常少的與圍繞τ旋轉(zhuǎn)有關(guān)的能量，對(duì)于化合物34僅僅稍微更多。這暗示在勢(shì)能表面上特定的阱中，這兩種分子具有大的構(gòu)象自由度。在化合物36的情況下，通過(guò)認(rèn)為在羰基和環(huán)A之間的π共軛對(duì)此進(jìn)行解釋。共軛的強(qiáng)度產(chǎn)生對(duì)旋轉(zhuǎn)的大障礙，因?yàn)楸匾能壍乐丿B被打破，讓分子的前側(cè)自由圍繞C3-C1’鍵旋轉(zhuǎn)直到重疊再次建立。在化合物34的情況下，沒(méi)有共軛用來(lái)解釋該相互作用。事實(shí)上，二硫戊環(huán)衍生物合成背后的基本原理是提供足夠阻礙前側(cè)部分旋轉(zhuǎn)的空間體積。在位阱內(nèi)旋轉(zhuǎn)自由度可用硫原子對(duì)大麻素電子結(jié)構(gòu)的影響來(lái)解釋。如果我們查看二硫戊環(huán)衍生物的HOMO(圖14)，我們就知道與這些軌道有關(guān)的電子密度集中在大麻素骨架的環(huán)A上。但是，該分子的LUMO(圖15)移動(dòng)了電子密度，包括取代的苯環(huán)和二硫戊環(huán)鍵中的硫原子。硫原子作用就象一種在苯環(huán)之間的“電子橋”，其允許在位阱內(nèi)更大得多的振動(dòng)。
雖然這得到了一些對(duì)這些分子構(gòu)象自由度的了解，但是它仍然未提供令人滿意NMR實(shí)驗(yàn)的解釋。為了進(jìn)行正確的解釋，我們需要考慮每個(gè)分子所有可獲得的構(gòu)象。在對(duì)每個(gè)局部最小值計(jì)算赫賽函數(shù)中，確定總吉布斯自由能在298.15K。用這些能量，我們可以對(duì)可能結(jié)構(gòu)應(yīng)用麥克斯韋-玻茲曼平均值得到這些分子中的每一種的“平均結(jié)構(gòu)”。我們已經(jīng)以四種方式使用了這種麥克斯韋-玻茲曼分析，結(jié)果如下表所示。第一欄表示麥克斯韋-玻茲曼平均值，其假設(shè)在勢(shì)能表面上完全構(gòu)象自由度。對(duì)于該分析，考慮在勢(shì)能表面上最低能量構(gòu)象0.59千卡/摩爾內(nèi)的所有結(jié)構(gòu)。第二欄表示可以從圍繞τ2自由旋轉(zhuǎn)同時(shí)限制τ1為勢(shì)能阱極限獲得的所有結(jié)構(gòu)，其中確定最低能量結(jié)構(gòu)。類似地，第三欄表示圍繞τ1自由度同時(shí)以相同方式限制τ2。最后一欄表示在特定的勢(shì)能阱內(nèi)確定的所有局部最小值的平均值，其假定分子不能在勢(shì)能表面上測(cè)定任何其它阱。
表7平均側(cè)鏈幾何結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)參數(shù)。
研究表6和表7提供了解釋NMR數(shù)據(jù)的方法。如果我們考慮化合物33和化合物35，其在理論上被預(yù)測(cè)在勢(shì)能表面上具有完全構(gòu)象自由度，我們知道實(shí)際上通過(guò)僅選取低能結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)的平均結(jié)構(gòu)與實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)非常符合。這是對(duì)基于如表6所示簡(jiǎn)單選取最低能量結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)的刻板對(duì)比。類似地，如果我們研究在單個(gè)位阱內(nèi)從化合物36的麥克斯韋-玻茲曼平均數(shù)獲得的結(jié)果，我們看到很好的與試驗(yàn)結(jié)果的一致性。唯一的差異出現(xiàn)在化合物34的處理上。在這種情況下將分析限制到單個(gè)位阱預(yù)測(cè)τ1角是153.7度，而NMR實(shí)驗(yàn)觀察到的角是325.1度。因?yàn)槎蛭飙h(huán)環(huán)閉合是兩步驟方法，可以設(shè)想由于在計(jì)算中預(yù)測(cè)的高旋轉(zhuǎn)能障，來(lái)自每一可用勢(shì)能阱的產(chǎn)物將形成并保留構(gòu)象上受限制。硫原子的影響提供了在單個(gè)阱中很大的旋轉(zhuǎn)自由度，并產(chǎn)生構(gòu)象異構(gòu)體分布，其在NMR實(shí)驗(yàn)中與在假定完全構(gòu)象自由度的情況中似乎相同。因而，如果我們僅選取最低能量結(jié)構(gòu)，就象化合物33和化合物35，我們得到了與NMR實(shí)驗(yàn)非常好的一致性。用麥克斯韋-玻茲曼劃分函數(shù)對(duì)整個(gè)勢(shì)能表面積分可提供對(duì)由實(shí)驗(yàn)對(duì)τ1和τ2預(yù)測(cè)值偏差的更多了解，但是這將需要在每一點(diǎn)計(jì)算赫賽函數(shù)和熱力學(xué)能量。
這些大麻素衍生物的一個(gè)最令人感興趣的特征是它們的電子結(jié)構(gòu)。我們注意到將苯環(huán)加到側(cè)鏈引入了若干新的軌道，其能量在環(huán)己基衍生物的初始HOMO和LUMO能量之間(見(jiàn)圖7)。比較化合物34與偕-二甲基-環(huán)己基-Δ8-THC和化合物33與二硫戊環(huán)基-環(huán)己基-Δ8-THC，我們發(fā)現(xiàn)前沿軌道的軌道能已經(jīng)被“壓縮”，提供更小的HOMO-LUMO間隔并在相同能量區(qū)內(nèi)添加了額外的態(tài)。我們發(fā)現(xiàn)在化合物35和化合物36中有類似的軌道結(jié)構(gòu)，并注意到在化合物36中額外的π共軛將LUMO能量降低到使其成為結(jié)合軌道的點(diǎn)。當(dāng)考慮DFT過(guò)高估計(jì)空軌道能量的傾向時(shí)，該結(jié)果甚至更有趣。
圖14-21顯示對(duì)于各個(gè)大麻素的最低能量結(jié)構(gòu)在理論B3LYP/6-31G(p，d)水平的HOMO和LUMO軌道圖。對(duì)于在本研究中的每一苯基衍生物，我們發(fā)現(xiàn)LUMO提供了非經(jīng)典的π體系，在環(huán)A和前側(cè)苯環(huán)上的電子密度之間直接重疊。就其中所述LUMO能量是束縛的化合物34和化合物36而言，這提供了在兩個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)之間電子轉(zhuǎn)移的機(jī)理。考慮到化合物33和化合物35中LUMO的低能量(分別＜0.2eV)，對(duì)于這些分子也可能適用相同的機(jī)理。這樣的π體系的存在提示可能有一種通過(guò)不存在典型的n到π躍遷的電子轉(zhuǎn)移的分子熒光的機(jī)理。計(jì)劃并將另外報(bào)道關(guān)于這些新化合物的熒光的進(jìn)一步研究。
結(jié)論我們認(rèn)為在NMR實(shí)驗(yàn)中觀察到的結(jié)構(gòu)代表了在溶液中的時(shí)間-平均結(jié)構(gòu)。由于在PES上的阱的淺表特性，有理由認(rèn)為圍繞τ1和τ2的“搖擺”模式是得到所述實(shí)驗(yàn)觀測(cè)值的原因。這是一個(gè)重要的觀察，因?yàn)榫臀覀冏盍私獾?，這代表了在這類化合物中觀察到的NMR結(jié)構(gòu)的第一個(gè)理論合理化。另外，我們已經(jīng)表明，主要集中在PES最低能量結(jié)構(gòu)的傳統(tǒng)方法不足以正確地解釋NMR實(shí)驗(yàn)觀測(cè)值。
我們認(rèn)為，對(duì)新的苯基取代的經(jīng)典大麻素的電子結(jié)構(gòu)的這種新認(rèn)識(shí)具有超過(guò)這類大麻素的意義。當(dāng)考慮到在結(jié)構(gòu)不同的吡唑和烷基氨基吲哚大麻素配體和研究人員從所有配體共用位點(diǎn)描繪唯一LBP亞位點(diǎn)相互作用的努力時(shí)，這一點(diǎn)是最明顯的。對(duì)LBP與配體的相互作用也出現(xiàn)了一致同意，其可能是部分由于研究所有類型大麻素配體的電子特性的有限研究。我們認(rèn)為我們的方法事實(shí)上可鑒定為還未確定的相似性，其通過(guò)分子力學(xué)方法不容易評(píng)價(jià)。電子效應(yīng)在這些新的大麻素類中清楚地起作用，認(rèn)識(shí)到這些將可能在配體設(shè)計(jì)和配體合成方法中帶來(lái)新的路線。但是迄今一直沒(méi)有嘗試基于這些計(jì)算的QSAR模型。我們認(rèn)為E-QSAR(電子定量構(gòu)效關(guān)系)模型的未來(lái)發(fā)展將在將來(lái)認(rèn)識(shí)這些及其他藥物作用中起重要作用。
實(shí)施例7-合成取代的1’-苯基Δ8-THC類似物和1’-噻吩-2-基Δ8-THC類似物基本上按實(shí)施例5中所述的合成化合物，除了用取代的-苯基溴化鎂或噻吩基溴化鎂得到相應(yīng)醇以外。醇用PCC氧化得到關(guān)鍵中間體酮(Frenette et al.，J.Org.Chem.563083(1991)，其全文在此引用參考)。使酮中間體與二甲鋅和四氯化鈦反應(yīng)在C1’位形成二甲基取代基(Singer et al.，J.Med.Chem.414400(1998)，其全文在此引用參考)。然后在對(duì)甲苯磺酸存在下從相應(yīng)的間苯二酚通過(guò)使它們與順式Δ2-對(duì)-薄荷烯-1，8-二醇反應(yīng)得到含對(duì)甲-基苯基(化合物50)，間-甲基苯基(化合物51)，對(duì)-氟苯基(化合物52)，對(duì)-氯苯基(化合物53)，間-氯苯基(化合物54)和噻吩基(化合物55)的1’-取代的偕-二甲基Δ8-THC類似物(Prasad et al.，Tetrahedron 321437(1976)，其全文在此引用參考)?；衔?0偕-二甲基-對(duì)-甲基苯基Δ8-THC或6，6，9-三甲基-3-(1-甲基-1-對(duì)-甲苯基-乙基)-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇產(chǎn)量0.5449克(55.6％)白色泡沫。Rf＝0.33(二氯甲烷-己烷，1∶1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)1.11(s，3H)，1.37(s，3H)，1.59(m，6H)，1.69(s，3H)，1.81(m，3H)，2.14(m，1H)，2.31(s，3H)，2.67(m，1H)，3.16(m，1H)，4.53(s，1H)，5.42(d，J＝4.5Hz，1H)，5.98(d，J＝2Hz，1H)，6.43(d，J＝2Hz，1H)，7.07(d，J＝8Hz，2H)，7.143(d，J＝8Hz，2H)；MS(ESI，Neg)m/z 375.4[(M-1)-]。
化合物51偕-二甲基-間-甲基苯基Δ8-THC或6，6，9-三甲基-3-(1-甲基-1-間-甲苯基-乙基)-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇產(chǎn)量0.139克(28.8％)黃色的油。Rf＝0.34(二氯甲烷-己烷，1∶1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)1.12(s，3H)，1.38(s，3H)，1.59(m，6H)，1.69(s，3H)，1.82(m，3H)，2.14(m，1H)，2.31(s，3H)，2.68(m，1H)，3.17(m，1H)，4.52(s，1H)，5.42(d，J＝4.5Hz，1H)，5.97(d，J＝2Hz，1H)，6.43(d，J＝2Hz，1H)，6.98(m，1H)，7.05(m，2H)，7.15(m，1H)；MS(ESI，Neg)m/z 375.5[(M-1)-]。
化合物52偕-二甲基-對(duì)-氯苯基-Δ8-THC或3-[1-(4-氯-苯基)-1-甲基-乙基]-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇產(chǎn)量0.6334克(50.4％)白色泡沫。Rf＝0.41(二氯甲烷-己烷，1∶1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)1.04(s，3H)，1.30(s，3H)，1.51(m，6H)，1.62(s，3H)，1.75(m，3H)，2.07(m，1H)，2.61(m，1H)，3.09(m，1H)，4.49(s，1H)，5.35(d，J＝5Hz，1H)，5.89(d，J＝2Hz，1H)，6.30(d，J＝2Hz，1H)，7.09(d，J＝8.5Hz，2H)，7.15(d，J＝9Hz，2H)；MS(ESI，Neg)m/z 395.9[(M-1)-]。
化合物53偕-二甲基-間-氯苯基-Δ8-THC或3-[1-(3-氯-苯基)-1-甲基-乙基]-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇產(chǎn)量0.6597克(50.6％)白色固體。Rf＝0.37(二氯甲烷-己烷，1∶1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)1.04(s，3H)，1.30(s，3H)，1.51(m，6H)，1.62(s，3H)，1.75(m，3H)，2.07(m，1H)，2.61(m，1H)，3.09(m，1H)，4.51(s，1H)，5.35(d，J＝4.5Hz，1H)，5.89(d，J＝1.5Hz，1H)，6.31(d，J＝1.5Hz，1H)，7.07(m，3H)，7.17(m，1H)；MS(ESI，Neg)m/z395.9[(M-1)-]化合物54偕-二甲基-對(duì)-氟苯基-Δ8-THC或3-[1-(4-氟-苯基)-1-甲基-乙基]-6，6，9-三甲基-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇產(chǎn)量0.5919克(45.5％)淺粉色泡沫。Rf＝0.37(二氯甲烷-己烷，1∶1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)1.04(s，3H)，1.30(s，3H)，1.51(m，6H)，1.62(s，3H)，1.75(m，3H)，2.07(m，1H)，2.61(m，1H)，3.09(m，1H)，4.49(s，1H)，5.35(d，J＝4.5Hz，1H)，5.90(d，J＝2Hz，1H)，6.32(d，J＝2Hz，1H)，6.86(m，2H)，7.12(m，2H)；MS(ESI，Neg)m/z379.5[(M-1)-]。
化合物55偕-二甲基-噻吩基Δ8-THC或6，6，9-三甲基-3-(1-甲基-1-噻吩-2-基-乙基)-6a，7，10，10a-四氫-6H-苯并[c]苯并吡喃-1-醇產(chǎn)量0.1176克(21.9％)白色泡沫。Rf＝0.37(二氯甲烷-己烷，1∶1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)1.04(s，3H)，1.30(s，3H)，1.63(m，9H)，1.74(m，3H)，2.07(m，1H)，2.61(m，1H)，3.10(m，1H)，4.50(s，1H)，5.35(d，J＝4.5Hz，1H)，6.04(d，J＝2Hz，1H)，6.38(d，J＝2Hz，1H)，6.76(dd，J＝1.5Hz，3.5Hz，1H)，6.84(m，1H)，7.07(dd，J＝1Hz，5Hz，1H)；MS(ESI，Neg)m/z 367.4[(M-1)-]。
實(shí)施例8-受體結(jié)合試驗(yàn)如在材料和方法(用于實(shí)施例1-4)和在實(shí)施例2中所述對(duì)化合物50-55進(jìn)行了受體結(jié)合試驗(yàn)，確定它們?cè)贑B-1和CB-2受體上的結(jié)合親和性(見(jiàn)下表8)。
與rCB1的47.6nM和mCB2的39.3的報(bào)道值相比(親和性比例CB1/CB2＝1.21)，Δ8-THC在hCB1和hCB2受體上的Ki值分別是28.5nM和25.0nM(親和性比例CB1/CB2＝1.14)(Busch-Ptersen，J.et al.，J.Med.Chem.393790(1996)，其全文在此引用參考)。相對(duì)于Δ8-THC，所有化合物顯示出對(duì)CB-1和CB-2受體二者增強(qiáng)的親和性，除了偕-二甲基-對(duì)-氟苯基-Δ8-THC類似物以外(其確實(shí)顯示出對(duì)CB-2受體增強(qiáng)的親和性)。另外，這些類似物相對(duì)于Δ8-THC顯示出直到93倍增強(qiáng)的對(duì)受體亞型的結(jié)合親和性。特別注意到偕-二甲基-對(duì)-甲基苯基和偕-二甲基-2-噻吩類似物具有對(duì)CB-2受體的亞納摩爾親和性，對(duì)CB-2受體有一定程度的選擇性。這兩個(gè)化合物相對(duì)于偕-二甲基-苯基-Δ8-THC類似物顯示出提高的對(duì)CB-1和CB-2受體的親和性。還注意到偕-二甲基-對(duì)-氯苯基類似物顯示出對(duì)CB-2受體提高的選擇性。
表8Δ8-THC和取代的苯基類似物50-55對(duì)CB1和CB2受體的結(jié)合親和性
a對(duì)于8Δ-THC和所述類似物的Ki從n≥2的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)以一式三份進(jìn)行得到，在括號(hào)中顯示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差。
實(shí)施例9-使用偕-二甲基-環(huán)己基Δ8-THC類似物治療失血性休克被Wagner等人改進(jìn)的大鼠失血性休克模型(Nature 390518-521(1997)，其全文在此引用參考)用來(lái)測(cè)試顯示出選擇性收縮血管活性的藥物組合。雄性Sprague-Dawley大鼠，300-350克，4月齡，首先用異氟醚(isoflo)使麻醉，然后注射尿烷(0.7克/公斤i.p.，隨后0.3g/kgi.v.)麻醉。通過(guò)對(duì)流傳熱將體溫維持在約37攝氏度。通過(guò)將后肢綁在固定板上將動(dòng)物限制為仰臥姿勢(shì)。在左肢腹股溝區(qū)域剃毛，切口暴露股骨的神經(jīng)血管束。用P50管對(duì)左側(cè)股靜脈進(jìn)行和動(dòng)脈插管，用4-0絲線綁緊入位。在前側(cè)頸區(qū)域進(jìn)行中線切口，橫向?qū)η邢聦咏M織暴露頸動(dòng)脈。將1.4F(0.56毫米)Millar導(dǎo)管壓力傳感器插入動(dòng)脈監(jiān)視血壓和心率。用4-0絲線綁緊入位。左側(cè)股靜脈用于藥物注射，左側(cè)股動(dòng)脈用于放血和取樣。動(dòng)物按照外科的方法進(jìn)行分步放血直至平均血壓穩(wěn)定在40mm Hg。在休克誘導(dǎo)之后5分鐘或恰好在休克誘導(dǎo)之前，基于在活體顯微鏡檢查術(shù)研究中確定的毫克/公斤給藥施用最初的藥物注射。這些研究的終點(diǎn)是動(dòng)物死亡或當(dāng)動(dòng)物嚴(yán)重痛苦時(shí)進(jìn)行安樂(lè)死。記錄存活時(shí)間、血壓和心率，與只接受賦形劑的對(duì)照動(dòng)物比較。每次研究使用最少6只動(dòng)物，由此確定平均生存時(shí)間。成功的藥物組合被定義為相對(duì)于接受賦形劑或單一藥物的對(duì)照，動(dòng)物存活時(shí)間至少加倍的那些。監(jiān)控成功應(yīng)答最長(zhǎng)四小時(shí)。
用偕-二甲基-環(huán)己基Δ8-THC的實(shí)驗(yàn)用12毫克/公斤偕-二甲基-環(huán)己基Δ8-THC或Δ8-THC和2毫克/公斤NS-398(COX-2抑制劑)進(jìn)行。這些實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如圖22所示。未處理動(dòng)物的比較如圖23所示。進(jìn)行失血性休克和用二元治療(即，大麻素受體1激動(dòng)劑/COX-2抑制劑)的動(dòng)物相對(duì)于對(duì)照動(dòng)物顯示出存活時(shí)間明顯增加。但是，用高親和性CB1配體偕-二甲基-環(huán)己基Δ8-THC處理的動(dòng)物顯示出ΔMAP的迅速增加，其達(dá)到基礎(chǔ)MAP水平的85％內(nèi)，隨后ΔMAP下降，其平行于對(duì)Δ8-THC的應(yīng)答。整個(gè)分布圖提示，新的大麻素類似物在失血性休克二元治療中提供了更大的功效。
實(shí)施例10-體外測(cè)定偕-二甲基-苯基Δ8-THC類似物對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的IC50為了測(cè)定偕-二甲基-苯基Δ8-THC類似物關(guān)于細(xì)胞毒性的IC50，進(jìn)行劑量逐步上升研究，測(cè)定化合物對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤的細(xì)胞性作用。在100μl總體積補(bǔ)充的Hams/F12培養(yǎng)基中以70％的匯合將C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞一式三份加到96-孔平底板，在37攝氏度培養(yǎng)過(guò)夜以允許貼壁。培養(yǎng)物然后用從0.1至9uM逐步升高的濃度的化合物處理。在合適的補(bǔ)加培養(yǎng)基中進(jìn)行所有的藥物刺激，所述的補(bǔ)加培養(yǎng)基用0.5％DMSO配制，但是血清被限制在1％以防止藥物被血清成分結(jié)合。加入藥物后，在48小時(shí)用CellTiter 96R非放射性細(xì)胞增殖試驗(yàn)(G5421，Promega，Madison，WI)分析細(xì)胞死亡。用Lab體系MultiskanBiochromatic Elisa平板讀數(shù)儀(Vienna，Virginia)通過(guò)在492nm比較來(lái)自MTS反應(yīng)吸光度數(shù)值，計(jì)算各個(gè)時(shí)點(diǎn)培養(yǎng)物中存在的活細(xì)胞的百分比。所有描述值代表三個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的平均值，這些試驗(yàn)的結(jié)果如圖24所示。
多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)是所有主要的腦腫瘤中最常見(jiàn)和惡性的，具有高程度的神經(jīng)膠質(zhì)瘤的大多數(shù)患者的中間存活率數(shù)月。雖然或許抗腫瘤劑具有優(yōu)良的體外活性，但是對(duì)CNS給藥的困難限制了它們的使用。觀察到的偕-二甲基-苯基Δ8-THC的IC50，在8μM濃度5小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)細(xì)胞完全死亡的事實(shí)，以及大麻素非常確實(shí)的CNS滲透性支持了新的大麻素作為抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤劑的用途。
雖然在此已經(jīng)表明和詳細(xì)描述了優(yōu)選的實(shí)施方案，對(duì)于相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，不背離本發(fā)明精神可做出各種改進(jìn)、添加、代替等是顯而易見(jiàn)的，因此認(rèn)為這些也包括在隨后權(quán)利要求定義的本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.根據(jù)式(I)的化合物 其中，X選自C(CH3)2、C(-Y(CH2)nY-)、CH2、C(O)、 和 Y選自S和O；R1選自基團(tuán)C3-C8環(huán)烷基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、聯(lián)苯基、2-萘基、噻唑基、苯并噻唑基、甲基四唑基、 和 R2和R3對(duì)于含有Δ8或Δ9雙鍵的化合物而言是甲基，或?qū)τ诤?a-10a雙鍵的化合物而言是選自C1-C3烷基和C1-C3鏈烷醇；R4對(duì)于含Δ8或Δ9雙鍵的化合物而言是選自甲基、甲醇、-(CH2)mCOOH和-(CH2)mCOH的基團(tuán)，或者對(duì)于含Δ6a-10a雙鍵的化合物而言是甲基；R5選自H、OH、甲氧基和乙氧基；R6-R10獨(dú)立地選自H、OH、C1-C6烷基、鹵素、氨基、C1-C2烷基氨基、C1-C2二烷基氨基、酰氨基、C1-C2烷基酰氨基、氰基、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6醇、含C1-C6烷基的羧基、含C1-C6烷基的羰基、含C1-C6烷基的酯、含C1-C6烷基的亞砜和含C1-C6烷基的砜；R11-R13的至少一個(gè)選自C1至C6烷基、C1至C6烷氧基、氟和氯，而R11-R13的其余的可任選是H；n是2到4的整數(shù)；和m是整數(shù)0或1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2、R3和R4是甲基；和R5是OH。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中X是C(CH3)2。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1是C5-C7環(huán)烷基、 或
5.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1是2-噻吩、苯基、對(duì)-甲基苯基或間-甲基苯基。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中X是C(-Y(CH2)nY-)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中X是CH2。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中X是C(O)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中R1是C5-C7環(huán)烷基、 或
10.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是C3-C8環(huán)烷基、 或
11.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是苯基、鄰-甲基苯基、間-甲基苯基、對(duì)-甲基苯基、間，對(duì)-二甲基苯基、鄰，對(duì)-二甲基苯基、間-乙苯基、對(duì)-乙基苯基、間，對(duì)-二乙基苯基、對(duì)-氯苯基、對(duì)-氟苯基、對(duì)-溴苯基、間-氨基苯基、對(duì)-氨基苯基、間-甲基氨基苯基、對(duì)-甲基氨基苯基、N，N-二甲基-間-氨基苯基、N，N-二甲基-對(duì)-氨基苯基、間-氰基苯基、對(duì)-氰基苯基、間-硝基苯基、對(duì)-硝基苯基、鄰-甲氧苯基、間-甲氧基苯基、對(duì)-甲氧基苯基、間-乙氧苯基、對(duì)-乙氧苯基、間-羥基苯基、對(duì)-羥基苯基、間-甲基砜-苯基、對(duì)-甲基砜-苯基、間-乙基砜-苯基、對(duì)-乙基砜-苯基、間-甲基亞砜-苯基、對(duì)-甲基亞砜-苯基、間-乙基亞砜-苯基、或?qū)?乙基亞砜-苯基。
12.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、4-吡咯烷基、聯(lián)苯、2-萘基、5-嘧啶基、2-噻唑基、2-苯并噻唑基或甲基四唑基。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)C含Δ8雙鍵。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)C含Δ9雙鍵。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中環(huán)C含Δ6a-10a雙鍵。
16.一種組合物，含有根據(jù)權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中該組合物呈微乳制劑的形式。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其中所述脂質(zhì)體制劑含有聚乙二醇300、乙醇、聚山梨酯80、醋酸生育酚和乙二胺四乙酸二鈉溶液。
19.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中所述載體是油。
20.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中所述載體是含有氫化大豆磷脂酰膽堿、膽甾醇和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-PEG2000共軛物的制劑。
21.調(diào)節(jié)大麻素受體活性的方法，它包括提供根據(jù)權(quán)利要求1的化合物；和使細(xì)胞的大麻素受體與所述化合物接觸，其中所述接觸調(diào)節(jié)細(xì)胞中大麻素受體的活性。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中所述細(xì)胞是離體的。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中所述細(xì)胞是體內(nèi)的。
24.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中所述大麻素受體是CB-1受體。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中所述細(xì)胞來(lái)自中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、血管內(nèi)皮、子宮、睪丸、輸精管、小腸或膀胱。
26.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中所述化合物對(duì)CB-1受體是選擇性的，其Ki比[CB1/CB2]為至少4∶1。
27.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中大麻素受體是CB-2受體。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中所述細(xì)胞來(lái)自脾、白細(xì)胞、B-細(xì)胞或巨噬細(xì)胞。
29.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中所述化合物對(duì)CB-2受體是選擇性的，其Ki比[CB2/CB1]為至少4∶1。
30.治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的方法，它包括提供根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物起大麻素受體的激動(dòng)劑的作用；給予患者有效治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的量的所述化合物。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述給藥是經(jīng)口、局部、透皮、胃腸道外、皮下地、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、通過(guò)鼻內(nèi)滴注、通過(guò)腔內(nèi)或膀胱內(nèi)滴注、眼內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、損傷內(nèi)或通過(guò)對(duì)粘膜施用進(jìn)行的。
32.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述給藥的量在約1毫克至約1000毫克/劑量。
33.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，還包括周期性地重復(fù)所述給藥。
34.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述化合物是CB-1受體的激動(dòng)劑。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述化合物對(duì)CB-1受體是選擇性的，其Ki比[CB1/CB2]為至少4∶1。
36.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中所述大麻素受體-介導(dǎo)的狀況選自神經(jīng)變性障礙、高血壓、外周血管疾病、心絞痛和失血性休克以及細(xì)胞增殖障礙。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中所述神經(jīng)變性障礙是腦中風(fēng)或顱腦創(chuàng)傷。
38.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中所述細(xì)胞增殖障礙是乳腺癌或前列腺癌。
39.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述大麻素受體是CB-2受體。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的方法，其中所述化合物對(duì)CB-2受體是選擇性的，其Ki比[CB2/CB1]為至少4∶1。
41.根據(jù)權(quán)利要求40的方法，其中所述大麻素受體介導(dǎo)的狀況選自免疫介導(dǎo)的免疫障礙、骨形成/吸收障礙和腎缺血。
42.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中所述免疫介導(dǎo)的免疫障礙選自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、濕疹、多發(fā)性硬化、糖尿病和甲狀腺炎。
43.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中所述骨形成/吸收障礙選自骨質(zhì)疏松癥、強(qiáng)直性脊柱炎、痛風(fēng)、與痛風(fēng)有關(guān)的關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎。
44.治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的方法，它包括提供根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物起大麻素受體的拮抗劑的作用；給予患者有效治療大麻素受體-介導(dǎo)的狀況的量的所述化合物。
45.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述給藥是經(jīng)口、局部、透皮、胃腸道外、皮下地、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、通過(guò)鼻內(nèi)滴注、通過(guò)腔內(nèi)或膀胱內(nèi)滴注、眼內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、損傷內(nèi)或通過(guò)對(duì)粘膜施用進(jìn)行的。
46.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述給藥的量為約1毫克至約1000毫克/劑量。
47.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，還包括周期性地重復(fù)所述給藥。
48.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述化合物是CB-1受體的拮抗劑。
49.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中所述化合物對(duì)CB-1受體是選擇性的，其Ki比[CB1/CB2]為至少4∶1。
50.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中所述大麻素受體介導(dǎo)的狀況選自涉及脫髓鞘的神經(jīng)炎性病變、病毒性腦炎、腦血管意外、顱創(chuàng)傷、眼障礙、肺障礙、過(guò)敏性疾病、炎性狀況、免疫系統(tǒng)障礙、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、嘔吐、進(jìn)食障礙、低血壓、抑郁癥、認(rèn)知功能喪失、精神警覺(jué)喪失、記憶喪失和感覺(jué)知覺(jué)喪失。
51.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述涉及脫髓鞘的神經(jīng)炎性病變選自多發(fā)性硬化和急性感染性多神經(jīng)炎。
52.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述眼障礙是青光眼。
53.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述肺障礙選自哮喘和慢性支氣管炎。
54.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述過(guò)敏性疾病選自過(guò)敏性鼻炎、接觸性皮炎和過(guò)敏性結(jié)膜炎。
55.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述炎性狀況選自關(guān)節(jié)炎、炎性腸病和疼痛。
56.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述免疫系統(tǒng)障礙選自狼瘡、ΔIDS和同種異體移植物排斥。
57.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病選自圖雷特綜合征、帕金森氏病、亨廷頓舞蹈病、癲癇和精神病障礙。
58.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中所述進(jìn)食障礙選自厭食和涉及非必需食品消耗的消耗障礙。
59.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中大麻素受體是CB-2受體。
60.根據(jù)權(quán)利要求59的方法，其中所述化合物對(duì)CB-2受體是選擇性的，其Ki比[CB2/CB1]為至少4∶1。
61.根據(jù)權(quán)利要求59的方法，其中所述大麻素受體介導(dǎo)的狀況是細(xì)胞增殖障礙。
62.根據(jù)權(quán)利要求61的方法，其中所述細(xì)胞增殖障礙是癌。
63.制造Δ8-THC或Δ9-THC類似物的方法，所述方法包括使具有式(II)結(jié)構(gòu)的中間體化合物 與根據(jù)式(IIIa)或式(IIIb)的反應(yīng)物 在有效形成根據(jù)權(quán)利要求1的在C環(huán)的Δ8或Δ9位含有雙鍵的化合物的條件下反應(yīng)。
64.根據(jù)權(quán)利要求63的方法，它還包括使從所述反應(yīng)得到的在R4位具有甲基基團(tuán)的化合物在用醛、羧基或者甲醇有效取代所述甲基基團(tuán)的條件下反應(yīng)。
65.根據(jù)權(quán)利要求63的方法，它還包括使從所述反應(yīng)得到的在R5具有羥基基團(tuán)的化合物在用氫、甲氧基或乙氧基有效取代所述羥基基團(tuán)的條件下反應(yīng)。
66.根據(jù)權(quán)利要求63的方法，它還包括使從所述反應(yīng)獲得的在X位具有酮基基團(tuán)的化合物與烷二醇、烷-二硫醇或1，2-苯基-二硫醇在分別用C(-Y(CH2)mY-)、 或 有效取代代所述酮基基團(tuán)的條件下反應(yīng)。
67.制造Δ6a-10a-THC類似物的方法，所述方法包括使具有式(IV)結(jié)構(gòu)的中間體化合物 與適合的酸在有效形成根據(jù)權(quán)利要求1的在C環(huán)Δ6a-10a位含雙鍵的化合物的條件下反應(yīng)。
68.根據(jù)權(quán)利要求67的方法，其中根據(jù)式(IV)的化合物通過(guò)在有效條件下使根據(jù)式(V)的中間體 與Z-MgI反應(yīng)進(jìn)行制備，其中Z與R2或R3相同。
69.根據(jù)權(quán)利要求68的方法，還包括使根據(jù)式(VI)的化合物 與根據(jù)式(VII)的化合物 在有效形成根據(jù)式(V)化合物的條件下反應(yīng)。
70.根據(jù)權(quán)利要求67的方法，還包括使從所述反應(yīng)得到的在R5位具有羥基基團(tuán)的化合物在用氫、甲氧基或乙氧基有效取代所述羥基基團(tuán)的條件下反應(yīng)。
71.根據(jù)權(quán)利要求67的方法，還包括使從所述反應(yīng)獲得的在X位具有酮基的化合物與烷二醇、烷-二硫醇或1，2-苯基-二硫醇在分別用C(-Y(CH2)nY-)、 或 有效取代所述酮基基團(tuán)的條件下反應(yīng)。
全文摘要
Δ－8－四氫大麻酚、Δ－9－四氫大麻酚和Δ－6a－10a－四氫大麻酚的1’－取代大麻素衍生物，該衍生物對(duì)大麻素受體1－型(CB－1)和/或大麻素受體2－型(CB－2)具有親和力。具有CB－1和/或CB－2受體激動(dòng)劑或拮抗劑活性的化合物可用于治療CB－1或CB－2介導(dǎo)的狀況。
文檔編號(hào)A61K31/4025GK1809552SQ200480017400
公開(kāi)日2006年7月26日 申請(qǐng)日期2004年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月20日
發(fā)明者B·M·摩爾二世, A·M·費(fèi)雷拉, M·柯利施那姆斯 申請(qǐng)人:田納西大學(xué)研究基金會(huì)