專利名稱：趨化因子受體活性調節(jié)劑雜環(huán)基環(huán)戊基四氫異喹啉和雜環(huán)基環(huán)戊基四氫吡啶并吡啶的制作方法
背景技術：
趨化因子屬于一個家族的小分子量的(70-120個氨基酸)促炎性細胞因子，具有有效的趨化活性。趨化因子是許多不同細胞釋放的趨化性細胞因子，以吸引各種細胞(例如單核細胞、巨噬細胞、T細胞、嗜曙紅細胞、嗜堿細胞和嗜中性白細胞)至炎癥位置(綜述參見Schall，Cytokine，3，165-183(1991)和Murphy，Rev.Immun.，12，593-633(1994))。這些分子最初通過四個保守的半胱氨酸定義，根據(jù)第一對的兩個半胱氨酸的排列分為兩個亞家族。在CXC趨化因子家族(包括IL-8、GROα、NAP-2和IP-10)中，這兩個半胱氨酸被一個氨基酸隔開，而在CC-趨化因子家族(包括RANTES、MCP-1、MCP-2、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β和嗜伊紅粒細胞趨化蛋白)中，這兩個殘基是相鄰的。
α-趨化因子(例如白介素-8(IL-8)、嗜中性白細胞激活蛋白-2(NAP-2)和黑素瘤生長刺激活性蛋白(MGSA))主要趨化嗜中性白細胞的，而β-趨化因子(例如RANTES、MIP-1α、MIP-1β、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)、MCP-2、MCP-3和嗜伊紅粒細胞趨化蛋白)趨化巨噬細胞、單核細胞、T細胞、嗜曙紅細胞和嗜堿細胞(Deng等，Nature，381，661-666(1996))。
趨化因子由許多不同類型的細胞分泌，結合白細胞和其它細胞的特異性G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)(綜述參見Horuk，Trends Pharm.Sci.，15，159-165(1994))。這些趨化因子受體構成GPCR的亞家族，目前，該亞家族包括15個表征的成員和許多孤兒。與混雜趨化劑(例如C5a、fMLP、PAF和LTB4)的受體不同，趨化因子受體在白細胞子集上表達有更高的選擇性。因此，特異性趨化因子的產(chǎn)生提供了募集特定白細胞子集的的機制。
在結合它們的同源配體時，趨化因子受體將細胞內(nèi)信號通過相關三聚G蛋白轉導，導致細胞內(nèi)鈣濃度快速提高。至少有7種結合β-趨化因子或者對其敏感的人受體，具體特征形式如下CCR-1(或“CKR-1”或“CC-CKR-1”)[MIP-1α、MIP-1β、MCP-3、RANTES](Ben-Barruch等，J.Biol.Chem.，270，22123-22128(1995)；Beote等，Cell，72，415-425(1993))；CCR-2A和CCR-2B(或“CKR-2A”/“CKR-2A”或“CC-CKR-2A”或“CC-CKR-2A”)[MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4]；CCR-3(或“CKR-3”或“CC-CKR-3”)[Eotaxin、Eotaxin 2、RANTES、MCP-2、MCP-3](Rollins等，Blood，90，908-928(1997))；CCR-4(或“CKR-4”或“CC-CKR-4”)[MIP-1α、RANTES、MCP-1](Rollins等，Blood，90，908-928(1997))；CCR-5(或“CKR-5”或“CC-CKR-5”)[MIP-1α、RANTES、MIP-1β](Sanson等，Biochemistry，35，3362-3367(1996))；Duffy血型抗原[RANTES、MCP-1](Chaudhun等，J.Biol.Chem.，269，7835-7838(1994))。β-趨化因子還包括嗜伊紅粒細胞趨化蛋白、MIP(“巨噬細胞炎性蛋白”)、MCP(“單核細胞趨化蛋白”)和RANTES(“調節(jié)激活正常T細胞表達和分泌的因子”)。
趨化因子受體(例如CCR-1、CCR-2、CCR-2A、CCR-2B、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CXCR-3、CXCR-4)涉及作為炎性免疫調節(jié)性病癥和疾病(包括哮喘、鼻炎和過敏性疾病)以及自身免疫性病變(例如類風濕性關節(jié)炎)和動脈粥樣硬化的重要介質。在CCR-5基因中32個堿基對純合性缺失的人似乎對類風濕性關節(jié)炎的易感性較小(Gomez等，Arthritis & Rheumatism，42，989-992(1999))。有關嗜曙紅細胞在變應性炎癥的作用的綜述參見Kita，H.等，J.Exp.Med.183，2421-2426(1996)。有關趨化因子在變應性炎癥的作用的綜述參見Lustger，A.D.New England J.Med.，338(7)，426-445(1998)。
一個趨化因子子集是單核細胞和巨噬細胞的有效趨化劑。表征最充分的是MCP-1(單核細胞趨化蛋白-1)，它的主要受體是CCR2。MCP-1是各種物種(包括嚙齒動物和人)的不同細胞類型響應炎癥刺激物而產(chǎn)生的，刺激單核細胞、淋巴細胞子集的趨化性。具體地講，MCP-1的產(chǎn)生與單核細胞和巨噬細胞在炎癥位置浸潤有關。在小鼠進行同源重組使MCP-1或CCR2缺失，導致響應巰基醋酸酯注射和單核細胞增多性李氏菌(Listeria monocytogenes)注射的單核細胞募集顯著減弱(Lu等，J.Exp.Med.，187，601-608(1998)；Kurihara等，J.Exp.Med.，186，1757-1762(1997)；Boring等，J.Clin.Invest.，100，2552-2561(1997)；Kuziel等，Proc.Natl.Acad.Sci.，94，12053-12058(1997))。此外，這些小鼠中單核細胞浸潤到肉芽腫性病變位置的數(shù)量減少，所述病變通過注射血吸蟲(schistosomal)或分枝桿菌抗原誘發(fā)(Boring等，J.Clin.Invest.，100，2552-2561(1997)；Warmington等，Am J.Path.，154，1407-1416(1999))。這些情況表明MCP-1誘導性CCR2激活在使單核細胞募集到炎癥位置中起主要作用，對這種活性的拮抗作用將對免疫反應產(chǎn)生足夠的抑制作用，從而對免疫性炎性疾病和自身免疫性疾病提供有益的治療。
所以，調節(jié)趨化因子受體(例如CCR-2受體)的藥物可用于這樣的病癥和疾病。
另外，募集單核細胞至血管壁的炎性病變位置是致動脈粥樣化斑形成的主要原因。在高膽固醇血癥的血管壁損傷后，MCP-1由內(nèi)皮細胞和內(nèi)膜平滑肌細胞產(chǎn)生、分泌。募集到損傷位置的單核細胞響應釋放的MCP-1，浸潤血管壁后分化為泡沫細胞。幾個研究小組已經(jīng)證實在回交APO-E-/-、LDL-R-/-或Apo B轉基因小鼠的MCP-1-/-或CCR2-/-小鼠(供給高脂肪食物)中主動脈病變大小、巨噬細胞含量和壞死減少(Boring等，Nature，394，894-897(1998)；Gosling等，J.Clin.Invest.，103，773-778(1999))。因此，CCR2拮抗劑可以通過減少單核細胞在動脈壁募集和分化，從而抑制動脈粥樣硬化病變形成以及病理進展。
發(fā)明概述本發(fā)明進一步涉及這樣的化合物它們是趨化因子受體活性調節(jié)劑，可用于預防或治療某些炎性免疫調節(jié)性病癥和疾病、過敏性疾病、特應性病癥(包括變應性鼻炎、皮炎、結膜炎和哮喘)以及自身免疫性病變(例如類風濕性關節(jié)炎)和動脈粥樣硬化。本發(fā)明還涉及包含這些化合物的藥用組合物以及以及這些化合物和組合物在預防或治療涉及趨化因子受體的疾病中的用途。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及下式I化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 式IX選自C、N、O、S和SO2；Y為N或C；R1選自以下基團氫、-C1-6烷基、-C0-6烷基-O-C1-6烷基、-C0-6烷基-S-C1-6烷基、-(C0-6烷基)-(C3-7環(huán)烷基)-(C0-6烷基)、羥基、雜環(huán)、-CN、-NR12R12、-NR12COR13、-NR12SO2R14、-COR11、-CONR12R12和苯基，其中R11獨立選自以下基團羥基、氫、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中R12選自以下基團氫、C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中R13選自以下基團氫、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中R14選自以下基團羥基、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中所述烷基和環(huán)烷基未被取代或者被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(f)C1-3烷基，(g)-O-C1-3烷基，(h)-COR11，(i)-SO2R14，(j)-NHCOCH3，
(k)-NHSO2CH3，(l)-雜環(huán)，(m)＝O，(n)-CN，其中所述苯基和雜環(huán)未被取代或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基和三氟甲基；R2選自以下基團(a)氫，(b)羥基，(c)鹵基，(d)C1-3烷基，其中所述烷基未被取代或者被1-6個獨立選自氟和羥基的取代基取代，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12，(k)-雜環(huán)，(l)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R14，(o)-SO2-NR12R12，(p)＝O，其中R2通過雙鍵與環(huán)連接；在Y為N時，R3為氧或不存在；在Y為C時，R3選自以下基團(a)氫，(b)羥基，
(c)鹵基，(d)C1-3烷基，其中所述烷基未被取代或者被1-6個獨立選自以下的取代基取代氟、羥基和-COR11，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12，(k)-雜環(huán)，(l)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R14，(o)-SO2-NR12R12，(p)硝基；R4選自以下基團(a)氫，(b)C1-6烷基，(c)三氟甲基，(d)三氟甲氧基，(e)氯，(f)氟，(g)溴，(h)苯基；R5選自以下基團(a)C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的，或者被1-6個氟取代，以及任選被羥基取代，(b)-O-C2-6烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(c)-CO-C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(d)-S-C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(e)-吡啶基，它可以是未被取代的或者被一個或多個選自以下的取代基取代鹵基、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(f)氟，(g)氯，(h)溴，(i)-C4-6環(huán)烷基，(j)-O-C4-6環(huán)烷基，(k)苯基，它可以是未被取代的或者被一個或多個選自以下的取代基取代鹵基、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(l)-O-苯基，它可以是未被取代的或者被一個或多個選自以下的取代基取代鹵基、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(m)-C3-6環(huán)烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(n)-O-C3-6環(huán)烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(o)-雜環(huán)，(p)-CN，(q)-COR11；R6選自以下基團(a)氫，(b)C1-6烷基，(c)三氟甲基，(d)氟，
(e)氯，(f)溴；R7選自以下基團不存在(X＝O時)、氫、(C0-6烷基)-苯基、(C0-6烷基)-雜環(huán)、(C0-6烷基)-C3-7環(huán)烷基、(C0-6烷基)-COR11、(C0-6烷基)-(烯基)-COR11、(C0-6烷基)-SO3H、(C0-6烷基)-W-C0-4烷基、(C0-6烷基)-CONR12-苯基和(C0-6烷基)-CONR15-V-COR11，或者在X為O、S或SO2時，R7不存在，其中V為C1-6烷基或苯基，W選自單鍵、-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、-CO2-、-CONR12-和-NR12-，R15可以為氫、C1-4烷基，或者R15通過1-5個碳的接頭連接V的一個碳構成環(huán)，C0-6烷基未被取代或被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-C0-6烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)三氟甲基，(f)-C0-2烷基-苯基，其中所述苯基、雜環(huán)、環(huán)烷基和C0-4烷基未被取代或被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-C0-3-COR11，(g)-CN，
(h)-NR12R12，(i)-CONR12R12，(j)-C0-3-雜環(huán)，或者，所述苯基和雜環(huán)可以與另一個雜環(huán)稠合，另一個雜環(huán)本身可以是未被取代的或者被1-2個獨立選自以下的取代基取代羥基、鹵基、-COR11和-C1-3烷基，其中烯基未被取代或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)C1-3烷基，(d)苯基，(e)雜環(huán)；R8選自以下基團(a)氫，(b)在X為O、S、SO2或N時或者分別連接R7和R10的碳之間為雙鍵時，R8不存在，(c)羥基，(d)C1-6烷基，(e)C1-6烷基-羥基，(f)-O-C1-3烷基，(g)-COR11，(h)-CONR12R12，(i)-CN；或者R7和R8接合在一起構成選自以下的環(huán)(a)1H-茚，(b)2，3-二氫-1H-茚，(c)2，3-二氫-苯并呋喃，(d)1，3-二氫-異苯并呋喃，
(e)2，3-二氫-苯并噻吩，(f)1，3-二氫-異苯并噻吩，(g)6H-環(huán)戊二烯并[d]異噁唑-3-醇，(h)環(huán)戊烷，(i)環(huán)己烷，其中所構成的環(huán)可以是未被取代的或者被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-C0-3-COR11，(g)-CN，(h)-NR12R12，(i)-CONR12R12，(j)-C0-3-雜環(huán)，或者，R7與R9或R8與R10可以結合在一起構成苯環(huán)或雜環(huán)，其中所述環(huán)未被取代或被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-COR11，(g)-CN，(h)-NR12R12，(i)-CONR12R12；
R9和R10獨立選自以下基團(a)氫，(b)羥基，(c)C1-6烷基，(d)C1-6烷基-COR11，(e)C1-6烷基-羥基，(f)-O-C1-3烷基，(g)＝O，這時R9或R10通過雙鍵連接環(huán)，(h)鹵基；n選自0、1和2；虛線為單鍵或雙鍵。
本發(fā)明另一實施方案包括下式Ia化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、Y和n為上文中的定義，R16和R17獨立選自以下基團(a)氫，(b)鹵基，(c)三氟甲基，(d)羥基，(e)C1-3烷基，(f)-O-C1-3烷基，
(g)-C0-3-CO2H，(h)-C0-3-CO2C1-3烷基，(i)-CN，(j)-C0-3-雜環(huán)，或者，R16和R17接合在一起構成與苯環(huán)稠合的雜環(huán)，雜環(huán)本身可以是未被取代的或者被1-2個獨立選自以下的取代基取代羥基、鹵基、-COR11和-C1-3烷基。
本發(fā)明另一實施方案還包括下式Ib化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中虛線為單鍵或雙鍵，R1、R2、R3、R5、R9、R16、R17、Y和n為上文中的定義。
本發(fā)明又一實施方案包括下式Ic化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、R16、R17、Y和n為上文中的定義，H為雜環(huán)。
本發(fā)明另一實施方案包括下式Id化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、R11、Y、W和n為上文中的定義，其中C1-4碳鏈可以是未被取代的或者被1-4個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-C0-6烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)三氟甲基，(f)-C0-2烷基-苯基或者C1-4碳鏈可以包含在C3-7環(huán)烷基環(huán)中。
本發(fā)明的再一實施方案包括下式Ie化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體
其中R1、R2、R3、R5、R9、R16、R17、X、Y和n為上文中的定義；虛線為單鍵或雙鍵；o為1或2；A、B和D可以獨立選自C、N、O或S，在X、A、B、D均為C且o＝2時，構成苯環(huán)，或者在至少X、A、B和D之一為N、O或S而不為C時，構成雜環(huán)。
本發(fā)明又一實施方案包括下式If化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R7、R9、R10、Y和n為上文中的定義；X為N或O，在X為O時，R7不存在。
本發(fā)明另一實施方案包括下式Ig化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R5、R9、R16、R17和Y為上文中的定義，或者R16和R17接合在一起構成與苯環(huán)稠合的雜環(huán)，雜環(huán)本身可以是未被取代的或者被1-2個獨立選自以下的取代基取代羥基、鹵基、-COR11和-C1-3烷基。
本發(fā)明的再一實施方案包括下式Ih化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中虛線為單鍵或雙鍵，R1、R5、R9、R16、R17和Y為上文中的定義。
本發(fā)明的再一實施方案包括下式Ii化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R5、R9、R16、R17和Y為上文中的定義，H為雜環(huán)。
本發(fā)明又一實施方案包括下式Ii化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R5、R9、R11、Y和W為上文中的定義，C1-4碳鏈可以是未被取代的或者被1-4個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-C0-6烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)三氟甲基，(f)-C0-2烷基-苯基。
本發(fā)明另一實施方案包括下式Ik化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 式Ik其中R1、R5、R9、R10和Y為上文中的定義。
本發(fā)明的又一實施方案中，X為C、O或N。
在本發(fā)明另一個實施方案中，X為C或O。
在本發(fā)明另一個實施方案中，R1以下基團-C1-6烷基、-C0-6烷基-O-C1-6烷基和-(C0-6烷基)-(C3-7環(huán)烷基)-(C0-6烷基)，所述烷基和環(huán)烷基未被取代或者被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(f)C1-3烷基，(g)-O-C1-3烷基，(h)-COR11，
(i)-CN，(j)-NR12R12，(k)-CONR12R12。
在本發(fā)明的另一方面，R1選自以下基團(1)-C1-6烷基，它未被取代或者被1-6個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(e)-COR11，(2)-C0-6烷基-O-C1-6烷基-，它未被取代或者被1-6個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)-COR11，(3)-(C3-5環(huán)烷基)-(C0-6烷基)，它未被取代或者被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(e)-COR11。
在本發(fā)明的再一方面，R1選自以下基團(a)C1-6烷基，(b)羥基取代的C1-6烷基，(c)被1-6個氟取代的C1-6烷基。
在本發(fā)明的又一方面，R1選自以下基團
(a)-CH(CH3)2，(b)-CH(OH)CH3，(c)-CH2CF3。
在本發(fā)明的另一方面，R2選自以下基團(a)羥基，(b)氫，(c)＝O，其中R2通過雙鍵與環(huán)連接。
在本發(fā)明的另一方面，R2為氫。
在本發(fā)明的又一方面，在Y為N時，R3不存在或為O(得到N-氧化物)。
在本發(fā)明的又一方面，在Y為N時，R3不存在。
在本發(fā)明的又一方面，在Y為C時，R3選自以下基團(a)氫，(b)鹵基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，其中所述烷基未被取代或者被1-6個獨立選自氟和羥基的取代基取代，(e)-COR11，(f)-CONR12R12，(g)-雜環(huán)，(h)-NR12-SO2-NR12R12，(i)-NR12-SO2-R14，(j)-SO2-NR12R12，(k)-硝基，(l)-NR12R12。
在本發(fā)明的另一方面，在Y為C時，R3為氫。
在本發(fā)明的另一方面，R4為氫。
在本發(fā)明的另一方面，R5選自以下基團
(a)被1-6個氟取代的C1-6烷基，(b)被1-6個氟取代的-O-C1-6烷基，(c)氯，(d)溴，(e)苯基。
在本發(fā)明的另一方面，R5選自以下基團(a)三氟甲基，(b)三氟甲氧基，(c)氯，(d)溴，(e)苯基。
在本發(fā)明的另一方面，R5為三氟甲基。
在本發(fā)明的另一方面，R6為氫。
在本發(fā)明的另一方面，R7為苯基、雜環(huán)、C3-7環(huán)烷基、C1-6烷基、-COR11和-CONH-V-COR11，其中V選自C1-6烷基或苯基，其中所述苯基、雜環(huán)、C3-7環(huán)烷基、C1-6烷基未被取代或被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-COR11，(g)-CN，(h)-雜環(huán)，(i)-CONR12R12。
在本發(fā)明的另一方面，當X不是O時，R7為苯基、雜環(huán)、C1-4烷基、-COR11和-CONH-V-COR11，V選自C1-6烷基或苯基，其中所述苯基、雜環(huán)和C1-4烷基未被取代或被1-3個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)C1-3烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)-COR11，(f)-雜環(huán)。
在本發(fā)明的另一方面，當X為C時，R7選自以下基團
在本發(fā)明的另一方面，在X為C時，R8選自以下基團(a)氫，(b)羥基，(c)-CN，(d)-F。
在本發(fā)明的另一方面，R7和R8可以結合在一起構成選自以下的環(huán)(a)1H-茚，(b)2，3-二氫-1H-茚，其中所構成的環(huán)可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)C1-3烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)-COR11，(f)-雜環(huán)。
在本發(fā)明的另一方面，R9和R10獨立選自以下基團
(a)氫，(b)羥基，(c)-CH3，(d)-O-CH3，(e)＝O(其中R9和/或R10通過雙鍵與環(huán)連接)。
在本發(fā)明又一方面，n＝1或2。
本發(fā)明的代表性化合物包括實施例的化合物以及它們的藥學上可接受的鹽和單獨的非對映異構體。
本發(fā)明化合物至少在環(huán)戊基的1位和3位有兩個不對稱中心?？赡艽嬖谄渌粚ΨQ中心，這取決于分子上不同取代基的性質。所有這樣的不對稱中心將獨立產(chǎn)生兩個旋光異構體，本發(fā)明范圍包括所有可能旋光異構體和非對映異構體的混合物形式以及純凈或部分純凈化合物形式。本發(fā)明化合物一方面的絕對構型是如下的構型，其中環(huán)戊基上的取代基(酰胺單元和胺單元)是順式 本發(fā)明化合物另一方面的絕對構型是如下定向的構型 其中連接胺取代基的碳指定為(R)絕對構型，連接酰胺亞單元的碳可以根據(jù)R1的優(yōu)先級指定為(S)或(R)絕對構型。例如R為異丙基時，則連接酰胺亞單元的碳的絕對立體化學構型將會是(S)，因為酰胺單元和胺單元在環(huán)戊基上優(yōu)先為順式排列。
本領域已知可以通過適當修改本文公開的方法單獨合成非對映異構體和對映異構體或者色譜分離。它們的絕對立體構型可以通過結晶產(chǎn)物或結晶中間體的x射線晶體照相確定，如果需要，結晶產(chǎn)物或結晶中間體也可用包含已知絕對構型的不對稱中心的試劑衍生。
正如本領域熟練技術人員理解的那樣，本文使用的鹵基或鹵素包括氯、氟、溴和碘。
本文使用的“烷基”是指沒有雙鍵或三鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀結構。因此，C1-6烷基是指含有1、2、3、4、5或6個碳的直鏈或直鏈基團，這樣的C1-6烷基特別包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基?！碍h(huán)烷基”是部分或全部構成三個或三個以上原子的環(huán)的烷基。C0或C0烷基是指共價鍵。
本文使用的術語“雜環(huán)”包括以下基團苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、肉啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、吲嗪基(indolazinyl)、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異噁唑基、萘并吡啶基、噁二唑基、噁唑基、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二噁烷、六氫吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并噁唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異噁唑基、二氫異噻唑基、二氫噁二唑基、二氫噁唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲二氧基苯甲酰基、四氫呋喃基和四氫噻吩基以及它們的N-氧化物。
本文使用的術語“藥學上可接受的”是指這樣的化合物、原料、組合物和/或劑型在合理的醫(yī)學判斷內(nèi)，適合與人及動物的組織接觸，而沒有過度的毒性、刺激、過敏反應、或其它問題或并發(fā)癥，具有合理的受益/風險比。
本文使用的“藥學上可接受的鹽”是指將母體化合物修飾制備其酸鹽或堿鹽得到的衍生物。藥學上可接受的鹽的例子包括但不限于堿性殘基(例如胺)的無機酸鹽或有機酸鹽；酸性殘基(例如羧酸)的堿鹽或有機鹽等。藥學上可接受的鹽包括用例如無毒無機酸或有機酸形成的母體化合物的常規(guī)無毒鹽或季銨鹽。舉例來講，這樣的常規(guī)無毒鹽包括無機酸衍生的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、氨基磺酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽等；用有機酸制備的鹽，例如乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乙醇酸鹽、硬脂酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、撲酸鹽、馬來酸鹽、羥基馬來酸鹽、苯基乙酸鹽、谷氨酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、對氨基苯磺酸鹽、2-乙酰氧基苯甲酸鹽、富馬酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙烷二磺酸鹽、草酸鹽、羥乙磺酸鹽等。
本發(fā)明藥學上可接受的鹽可以用包含堿性或酸性部分的母體化合物通過常規(guī)化學方法制備。通常，這樣的鹽可以如下制備使上述化合物的游離酸或游離堿形式與化學計量量的適當堿或酸在水、有機溶劑或兩者的混合物中反應，通常使用非水性介質，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。合適的鹽可參見例如Remington′sPharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418。
利用實施例和此處公開的化合物舉例說明本發(fā)明。
本發(fā)明的具體化合物包括選自以下的化合物實施例的標題化合物以及它們的藥學上可接受的鹽和單獨的非對映異構體。
主題化合物可用于調節(jié)需要這種調節(jié)的患者的趨化因子受體活性的方法，該方法包括給予有效量的化合物。
本發(fā)明涉及前述化合物作為趨化因子受體活性調節(jié)劑的用途。具體地講，這些化合物可用作趨化因子受體(特別是CCR-2)的調節(jié)劑。
本發(fā)明化合物作為趨化因子受體活性調節(jié)劑的效力可以通過本領域已知的方法證實，例如以下文獻公開的趨化因子結合分析法VanRiper等，J.Exp.Med.，177，851-856(1993)，很容易改進用于測量CCR-2結合作用。
CCR-2結合分析中受體親和力如下確定檢測125I-MCP-1結合到不同細胞類型(包括單核細胞、THP-1細胞)內(nèi)源CCR-2受體的抑制作用，或者克隆受體在真核細胞外源表達后檢測125I-MCP-1結合的抑制作用。將細胞懸浮于結合緩沖液(50mM HEPES，pH 7.2，5mMMgCl2，1mM CaCl2和0.50％BSA)，在室溫加入受試化合物或DMSO和125I-MCP-1，放置1h讓其結合。然后用GFB濾膜收集細胞，用含500mM NaCl的25mM HEPES緩沖液洗滌，定量結合125I-MCP-1的細胞。
在趨化性分析中，用缺失T細胞的PBMC進行趨化作用，所述PBMC從靜脈全血或白細胞分離血分離，F(xiàn)icoll-Hypaque離心提純，然后用神經(jīng)氨糖酸苷酶處理的綿羊紅細胞形成玫瑰花結。分離完成后，將細胞用含0.1mg/ml BSA的HBSS洗滌，以1×107細胞/ml懸浮。在暗處、37℃下，將細胞用2μM Calcien-AM(Molecular Probes)熒光標記30min。將標記的細胞洗滌兩次，并以5×106細胞/ml懸浮于RPMI1640(含L-谷氨酰胺、0.1mg/ml BSA，不含酚紅)。將相同培養(yǎng)基稀釋的10ng/ml MCP-1(Peprotech)或者僅僅是培養(yǎng)基加入下部的孔(27μl)。用DMSO或不同濃度的受試化合物預溫育15min后，將單核細胞(150,000細胞)加入濾膜上面(30μl)。將相同濃度的受試化合物或DMSO加入底部孔以防止擴散稀釋。在37℃、5％CO2溫育60min后，撤去濾膜，頂部用含0.1mg/ml BSA的HBSS洗滌除去沒有遷移到濾膜的細胞。確定沒有趨化劑存在下的自發(fā)遷移作用(化學運動性)。
具體地講，下文實施例的化合物在上述分析中具有結合CCR-2受體的活性，通常IC50小于約1μM。這樣的結果表明化合物具有作為趨化因子受體活性調節(jié)劑的內(nèi)在活性。
哺乳動物趨化因子受體提供了干擾或促進哺乳動物(例如人)的嗜曙紅細胞和/或淋巴細胞功能的靶。抑制或促進趨化因子受體功能的化合物尤其可用于治療性調節(jié)嗜曙紅細胞和/或淋巴細胞功能。因此，抑制或促進趨化因子受體功能的化合物可用于治療、預防、改善、控制多種以下疾病或降低其患病風險炎性免疫調節(jié)性病癥和疾病、過敏性疾病、特應性病癥(包括變應性鼻炎、皮炎、結膜炎和哮喘)以及自身免疫性病變(例如類風濕性關節(jié)炎)和動脈粥樣硬化。
例如，可以給予抑制哺乳動物趨化因子受體(例如人趨化因子受體)的一種或多種功能的本發(fā)明化合以抑制(即減輕或預防)炎癥。由此，一種或多種炎性過程(例如白細胞游出、趨化性、胞吐作用(例如酶、組胺的胞吐作用)或炎性介質釋放被抑制。
除了靈長目(例如人)外，許多其它哺乳動物也可根據(jù)本發(fā)明方法治療。例如，還可治療包括但不限于牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、豚鼠、大鼠或其它牛科、羊科、馬科、犬科、貓科、嚙齒動物或鼠科物種的哺乳動物。然而，所述方法還可用于其它物種，例如鳥類(例如雞)。
與炎癥和感染有關的疾病和病癥可以用本發(fā)明化合物治療。在一個實施方案中，所述疾病或病癥是需要抑制或促進淋巴細胞作用以調節(jié)炎癥反應的疾病或病癥。
可以用趨化因子受體功能抑制劑治療的人或其它物種的疾病或病癥包括但不限于炎性或過敏性疾病和病癥，包括呼吸道過敏性疾病例如哮喘(尤其是支氣管哮喘)、變應性鼻炎、過敏性肺病、過敏性肺炎、嗜曙紅細胞性肺炎(例如Loeffler綜合癥、慢性嗜曙紅細胞性肺炎)、延遲型過敏反應、間質性肺炎(ILD)(例如特發(fā)性肺纖維化或與類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、強直性脊柱炎、系統(tǒng)性硬化、Sjogren綜合癥、多肌炎或皮肌炎相關的ILD)；全身性過敏或超敏反應、藥物變態(tài)反應(例如對青霉素、頭孢菌素的變態(tài)反應)、昆蟲蜇刺性過敏；自身免疫性疾病，例如類風濕性關節(jié)炎、銀屑病關節(jié)炎、多發(fā)性硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、重癥肌無力、青少年糖尿?。荒I小球腎炎、自身免疫性甲狀腺炎、貝切特氏綜合征；移植排斥(例如移植術中的排斥)，包括同種異體移植物的排斥或移植物抗宿主??；炎性腸病，例如克羅恩氏病和潰瘍性結腸炎；脊柱關節(jié)?。挥财げ?；銀屑癬(包括T細胞介導性銀屑癬)和炎性皮膚病(例如皮炎、濕疹、特應性皮炎、變應性接觸性皮炎、蕁麻疹)；血管炎(例如壞死性血管炎、皮膚血管炎和過敏性血管炎)；嗜曙紅細胞性肌炎、嗜曙紅細胞性筋膜炎；白細胞浸潤皮膚或器官的癌癥。還可以治療需要抑制不良炎性反應的其它疾病或病癥，包括但不限于再灌注損傷、動脈粥樣硬化、某些血液惡性腫瘤、細胞因子誘導性毒性(例如膿毒性休克、內(nèi)毒素性休克)、多肌炎、皮肌炎。
可以用趨化因子受體功能調節(jié)劑治療的人或其它物種的疾病或病癥包括但不限于免疫抑制(例如患免疫缺陷綜合癥如AIDS或其它病毒感染的個體的免疫抑制，放療、化療、自身免疫性疾病的治療或藥物治療(例如皮質類固醇療法)引起的個體免疫抑制；受體功能先天性缺陷或其它原因的免疫抑制；感染疾病，例如寄生蟲病，包括但不限于蠕蟲感染，例如線蟲(鞭蟲病、蟯蟲病、蛔蟲病、鉤蟲病、類圓線蟲病、旋毛蟲病、絲蟲病)、吸蟲(血吸蟲病、支睪吸蟲病)、絳蟲(包蟲病、絳蟲病、囊尾幼蟲病)、內(nèi)臟的蟲、內(nèi)臟幼蟲移行癥(visceral larva migraines)(例如弓蛔蟲)、嗜曙紅細胞性腸胃炎(例如Anisaki sp.、Phocanema sp.)和皮膚幼蟲移行癥(cutaneous larvamigraines)(巴西鉤口線蟲、犬鉤蟲)。另外，如果預計給予足夠化合物，通過誘導趨化因子受體內(nèi)化使得細胞表面上的受體表達減少或者以導致細胞遷移方向錯誤的方式給予化合物，則可考慮通過增強趨化因子受體功能治療上述炎性、過敏性和自身免疫性疾病。
因此，本發(fā)明化合物可用于治療、預防、改善、控制多種以下疾病或降低其患病風險炎性免疫調節(jié)性病癥和疾病、過敏性疾病、特應性病癥以及自身免疫性病變。在一個特別的實施方案中，本發(fā)明涉及使用主題化合物治療、預防、改善、控制自身免疫性疾病(例如類風濕性關節(jié)炎或銀屑病關節(jié)炎)或降低其患病風險。
在另一方面，本發(fā)明可以用于評價趨化因子受體(包括CCR-2)的推定的具體激動劑或拮抗劑。據(jù)此，本發(fā)明涉及上述化合物在篩選分析的準備和實施中的用途，所述分析用于評價調節(jié)趨化因子受體活性的化合物。例如，本發(fā)明化合物可用于分離受體突變體，受體突變體是尋找更有效化合物的優(yōu)異篩選工具。此外，本發(fā)明化合物可通過例如競爭性抑制作用證實或確定其它化合物與趨化因子受體的結合位點。本發(fā)明化合物還可用于評價趨化因子受體(包括CCR-2)的推定的具體調節(jié)劑。正如本領域所理解那樣，徹底評價以上趨化因子受體的具體激動劑和拮抗劑受制于缺乏可用的非肽酰(抗代謝)化合物，該類化合物對這些受體具有高結合親和力。因此，本發(fā)明化合物是未來用于這些目的的商品。
本發(fā)明進一步涉及制備藥物的方法，所述藥物包含本發(fā)明化合物以及藥用載體或稀釋劑，用于調節(jié)人和動物的趨化因子受體活性。
本發(fā)明進一步涉及使用本發(fā)明化合物治療、預防、改善、控制反轉錄病毒(尤其是皰疹病毒或人免疫缺陷病毒(HIV))感染或降低其感染風險以及治療隨后的病理疾病(例如AIDS)或延遲其發(fā)作。治療AIDS或者預防或治療HIV感染定義為包括但不限于治療各種HIV感染狀態(tài)AIDS、有癥狀或無癥狀的ARC(AIDS相關綜合征)、以及實際或潛在接觸HIV。例如，在懷疑過去由于例如輸血、器官移植、體液交換、咬傷、意外針刺而接觸HTV，或者在外科手術時接觸患者血液后，可用本發(fā)明化合物治療HIV感染。
在本發(fā)明一個方面，主題化合物可用于抑制趨化因子與靶細胞趨化因子受體(例如CCR-2)結合的方法，該方法包括使靶細胞與一定量的化合物接觸，所述量的化合物可有效抑制趨化因子與趨化因子受體的結合。
以上方法治療的患者是需要調節(jié)趨化因子受體活性的哺乳動物例如人，包括男性和女性。本文使用的“調節(jié)”包括拮抗、激動、部分拮抗、反向激動和/或部分激動。在本發(fā)明一方面，調節(jié)是指拮抗趨化因子受體活性。術語“治療有效量”是指主題化合物的用量將引起組織、系統(tǒng)、動物或人的生物學或醫(yī)學反應，這種反應是研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其他臨床醫(yī)師所尋找的。
本文使用的術語“組合物”包括含有特定量特定成份的產(chǎn)品以及以特定量特定成分組合而直接或間接得到的任何產(chǎn)品。“藥學上可接受的”是指載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑其它成分相容，而且不會危害其接受者。
術語“給予”化合物應該理解為將本發(fā)明化合物提供給需要治療的個體。
本文使用的術語“治療”是指治療性及預防性治療上述疾病。
關于在烷基、環(huán)烷基、苯基、雜環(huán)或部分其它化學基團上取代作用的術語“取代的”包括被指定的取代基單取代和多取代，并且在任何指定的化學基團上的所述單取代或多取代應該是化學上所允許的。
應當理解的是分子中某個特定位置的取代基的定義獨立于該取代基在分子中其它位置的定義。所以，例如當R3＝1-5個R12(在別處定義)取代的烷基時，各個R12獨立選自其可能選擇的基團；即各個R12可以與任何其它R12相同或不相同。
術語“任選取代的”包括取代和未取代的。因此，例如任選取代的芳基可能為五氟苯基或苯基。
調節(jié)趨化因子受體活性并由此治療、預防、改善、控制炎性免疫調節(jié)性病癥和疾病(包括哮喘和過敏性疾病)、自身免疫性病變(例如類風濕性關節(jié)炎)和動脈粥樣硬化以及上述病癥或者降低其患病風險的聯(lián)合療法通過本發(fā)明化合物和已知具有這樣效用的其它化合物的聯(lián)合藥物說明。
例如在治療、預防、改善、控制炎癥或降低患炎癥風險中，本發(fā)明化合物可以與抗炎藥或鎮(zhèn)痛藥聯(lián)合應用，例如鴉片激動劑、脂肪氧合酶抑制劑(例如5-脂肪氧合酶抑制劑)、環(huán)加氧酶抑制劑(例如環(huán)加氧酶-2抑制劑)、白介素抑制劑(例如白介素-1抑制劑)、NMDA拮抗劑、一氧化氮抑制劑、一氧化氮合成抑制劑、非甾族抗炎藥或細胞因子抑制性抗炎藥，例如聯(lián)合以下化合物醋氨酚、阿斯匹林、可待因、依那西普(embrel)、芬太尼、布洛芬、消炎痛、酮咯酸、嗎啡、萘普生、非那西汀、吡羅昔康、甾族鎮(zhèn)痛藥、舒芬太尼、舒林酸、替尼達普等。類似地，本發(fā)明化合物可以與以下藥物聯(lián)合應用疼痛緩解劑；增效劑，例如咖啡因、H2-拮抗劑、二甲基硅油、氫氧化鋁或氫氧化鎂；減充血劑，例如苯腎上腺素、苯丙醇胺、偽麻黃堿、羥甲唑啉、腎上腺素(ephinephrine)、萘唑啉、賽洛唑啉、丙己君(propylhexedrine)或左旋脫氧麻黃堿；鎮(zhèn)咳藥，例如可待因、氫可酮、咳美芬、咳必清或右美沙芬；利尿藥；鎮(zhèn)靜性或非鎮(zhèn)靜性抗組胺藥。
同樣地，本發(fā)明化合物還可以與其它藥物聯(lián)合使用，所述其它藥物用于治療/預防/抑制或改善可用本發(fā)明化合物治療的疾病或病癥。這樣的其它藥物可以其常規(guī)用藥途徑和用量與本發(fā)明化合物同時或序貫給藥。本發(fā)明化合物與一種或多種其它藥物同時使用時，通常使用包含這樣的其它藥物和本發(fā)明化合物的組合物。因此，本發(fā)明藥用組合物包括這樣的組合物除了本發(fā)明化合物外，還含有一種或多種其它活性成分。
可以與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的其它活性成分(可以單獨或以同一藥用組合物給藥)的例子包括但不限于(a)VLA-4拮抗劑，例如US5,510,332、WO95/15973、WO96/01644、WO96/06108、WO96/20216、WO96/22966、WO96/31206、WO96/40781、WO97/03094、WO97/02289、WO98/42656、WO98/53814、WO98/53817、WO98/53818、WO98/54207和WO98/58902介紹的拮抗劑；(b)甾族化合物，例如倍氯米松、甲基強的松龍、倍他米松、強的松、地塞米松和氫化可的松；(c)免疫抑制劑，例如環(huán)孢菌素、他克莫司、雷帕霉素和其它FK-506型免疫抑制劑；(d)抗組胺藥(H1-組胺拮抗劑)，例如溴苯那敏、氯苯吡胺、右氯苯那敏、曲普利啶、氯馬斯汀、苯海拉明、二苯拉林、曲吡那敏、羥嗪、甲地嗪、普魯米近、三甲潑拉嗪、阿扎他定、賽庚啶、安他唑啉、非尼臘明、吡拉明、阿司咪唑、特非那定、氯雷他定、地洛他定、西替立嗪、非索非那定、脫碳乙氧基氯雷他定等；(e)非甾族抗哮喘藥，例如β2-激動劑(特布他林、奧西那林、非諾特羅、新異丙腎上腺素、舒喘寧、比托特羅和吡布特羅)、茶堿、色甘酸鈉、阿托品、異丙托溴銨、白細胞三烯拮抗劑(魯司特、孟魯司特、普侖司特、伊拉司特、泊比司特、SKB-106,203)、白細胞三烯生物合成抑制劑(齊留通、BAY-1005)；(f)非甾族抗炎藥(NSAID)，例如丙酸衍生物(阿明洛芬、苯噁洛芬、布氯酸、卡洛芬、聯(lián)苯丁酮酸、非諾洛芬、氟洛芬、氟聯(lián)苯丙酸、布洛芬、吲哚洛芬、酮洛芬、米洛芬、萘普生、奧沙普秦、吡洛芬、普拉洛芬、舒洛芬、噻洛芬酸和硫噁洛芬)、乙酸衍生物(消炎痛、阿西美辛、阿氯芬酸、環(huán)氯茚酸、雙氯芬酸、芬氯酸、芬克洛酸、雙苯噻酸、呋羅芬酸、異丁芬酸、伊索克酸、oxpinac、舒林酸、硫平酸、托美丁、齊多美辛和佐美酸)、芬那酸衍生物(氟芬那酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、尼氟滅酸和托芬那酸)、聯(lián)苯基甲酸衍生物(二氟苯水楊酸和氟苯柳)、昔康類藥物(伊索昔康、吡羅昔康、舒多昔康和替諾昔康)、水楊酸鹽(乙酰水楊酸、柳氮磺胺吡啶)和吡唑啉酮類(阿扎丙宗、芐哌立隆(bezpiperylon)、非普拉宗、莫非布宗、羥基保泰松、苯丁唑酮)；(g)環(huán)加氧酶-2(COX-2)抑制劑；(h)磷酸二酯酶IV型(PDE-IV)抑制劑；(i)趨化因子受體(尤其是CCR-1、CCR-2、CCR-3、CXCR-3和CCR-5)的其它拮抗劑；(j)降膽固醇藥物，例如HMG-CoA還原酶抑制劑(洛伐他汀、辛伐他汀和普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、羅蘇伐他汀以及其它他汀)、螯合劑(消膽胺和考來替泊)、膽固醇吸收抑制劑(依澤替米貝)、煙酸、非諾貝酸衍生物(吉非羅齊、氯貝丁酯、非諾貝特和苯扎貝特)和普羅布考；(k)抗糖尿病藥，例如胰島素、磺酰脲類、雙胍(甲福明)、α-葡糖苷酶抑制劑(阿卡波糖)和格列酮類(曲格列酮和吡格列酮)；(l)β干擾素制劑(β-1α干擾素、β-1β干擾素)；(m)其它化合物(例如5-氨基水楊酸及其前體藥物)、抗代謝藥(例如硫唑嘌呤和6-巰基嘌呤)以及癌癥的細胞毒素性化療藥物。
本發(fā)明化合物與第二種活性成分的重量比例可以是變化的，取決于各個成分的有效劑量。通常，使用各個活性成分的有效劑量。由此舉例來講，當本發(fā)明化合物與NSAID聯(lián)合使用時，本發(fā)明化合物與NSAID的重量比例通常為約1000∶1至約1∶1000，或為約200∶1至約1∶200。本發(fā)明化合物和其它活性成分的組合通常在上述范圍，但是在所有情況下，應當使用各活性成分的有效劑量。
在這樣的聯(lián)合應用中，本發(fā)明化合物和其它活性藥物可以單獨或結合給予。另外，一種成分的給予可以在其它藥物之前、同時或之后給予。
本發(fā)明化合物可以通過如下途徑給予口服、胃腸外(例如肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、ICV、腦池內(nèi)注射或輸注、皮下注射、或者移植)、吸入噴霧、鼻內(nèi)、陰道、直腸、舌下或局部，并且可以單獨或共同配制為包含載體、佐劑和溶媒的合適劑量單位的制劑，所述載體、佐劑和溶媒是常規(guī)無毒的、藥學上可接受的，并且適合各個給藥途徑。除了治療溫血動物(例如小鼠、大鼠、馬、牛、綿羊、狗、貓、猴子等)外，本發(fā)明化合物還可有效用于人。
給予本發(fā)明化合物的藥用組合物可以方便地呈現(xiàn)為劑量單位劑型，可以通過藥學領域公知的任何方法制備。所有方法包括將活性成分與一種或多種輔助成分構成的載體結合。通常，如下制備藥用組合物將活性成分與液體載體、微細固體載體或這兩者均勻、緊密地結合，如果需要，再將產(chǎn)品成形為所需制劑。在藥用組合物中，活性目標化合物的含量足以對疾病的過程或病癥產(chǎn)生所需作用。本文使用的術語“組合物”包括含有特定量特定成份的產(chǎn)品以及以特定量特定成分組合而直接或間接得到的任何產(chǎn)品。
包含活性成分的藥用組合物可以為適合口服的劑型，例如為片劑、糖錠、錠劑、水性或油性混懸劑、可分散的散劑或顆粒劑、乳劑、硬質或軟質膠囊劑、或者糖漿劑或酏劑。口服組合物可以根據(jù)制備藥用組合物領域的任何已知方法制備，為了獲得藥學上美觀、適口的制劑，這樣的組合物可以包含一種或多種選自以下的試劑甜味劑、調味劑、著色劑和防腐劑。片劑包含活性成分和藥學上可接受的無毒賦形劑，所述賦形劑是適合制備片劑的賦形劑。這些賦形劑可以為例如惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯樹膠；潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。片劑可以是無涂層的，或者它們可以通過已知技術涂覆以延遲在胃腸道崩解、吸收，由此提供長期的持續(xù)作用。例如可以使用時間延遲原料(例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯)。它們也可以通過美國專利4,256,108、4,166,452和4,265,874介紹的技術涂覆，形成用于控制釋放的滲透性治療片劑。
口服制劑還可以為硬質明膠膠囊劑，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合；或者為軟質明膠膠囊劑，其中活性成分與水或油性介質(例如花生油、液體石蠟或橄欖油)混合。
水性混懸劑包含活性原料和適合制備水性混懸劑的賦形劑。這樣的賦形劑有懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基-丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤濕劑可以為天然存在的磷脂，例如卵磷脂；烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如硬脂酸聚氧乙烯；環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物，例如十七乙烯氧基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol)；或者環(huán)氧乙烷與偏酯(由脂肪酸和己糖醇衍生)的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯；環(huán)氧乙烷與偏酯(由脂肪酸和己糖醇酐衍生)的縮合產(chǎn)物，例如聚乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。水性混懸劑還可包含一種或多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯)、一種或多種著色劑、一種或多種調味劑以及一種或多種甜味劑(例如蔗糖或糖精)。
可將活性成分懸浮于植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)配制油性混懸劑。油性混懸劑可包含增稠劑，例如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳?例如上述的甜味劑)和調味劑得到適口的口服制劑。這些組合物可以通過加入抗氧劑(例如抗壞血酸)防腐。
可分散的散劑和顆粒劑適合通過加入水制備水性混懸劑，得到活性成分與分散劑或潤濕劑、懸浮劑以及一種或多種防腐劑的混合物。合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑已在上文中舉例說明。還可以包含其它賦形劑，例如甜味劑、調味劑和著色劑。
本發(fā)明藥用組合物還可以為水包油的乳劑形式。油相可以為植物油(例如橄欖油或花生油)或礦物油(例如液體石蠟)或它們的混合物。合適的乳化劑可以為天然存在的樹膠(例如阿拉伯樹膠或黃蓍膠)、天然存在的磷脂(例如大豆、卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如山梨糖醇酐單油酸酯)以及所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯)。乳劑還可以包含甜味劑和調味劑。
糖漿劑和酏劑可以用甜味劑(例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖)配制。這樣的制劑還可以包含鎮(zhèn)痛劑、防腐劑、調味劑和著色劑。
藥用組合物可以為無菌注射水性或油性混懸劑。這種混懸劑可以用上述合適的分散劑或潤濕劑以及懸浮劑根據(jù)已知工藝配制。無菌注射制劑還可以為無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液劑或混懸劑，例如在1，3-丁二醇中的溶液劑。在可接受的溶媒和溶劑中可以使用水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發(fā)油通常用作溶劑或懸浮介質。用于此目的時，可以使用任何溫和的不揮發(fā)油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。另外，脂肪酸(例如油酸)可用于注射制劑。
本發(fā)明化合物還可以栓劑形式直腸給藥。這些組合物可以如下制備將藥物與合適的無刺激賦形劑混合物，所述賦形劑在常溫時為固體，在直腸溫度為液體，因此將在直腸熔化釋放藥物。這樣的原料有可可油或聚乙二醇。
對于局部用藥，使用包含本發(fā)明化合物的乳膏劑、軟膏劑、凝膠劑、溶液劑或混懸劑等。(對于這種應用來說，局部應用應該包括漱口劑和含漱劑)本發(fā)明藥用組合物和方法可以進一步包含上述其它治療活性化合物，這些化合物通常用于治療上述病理疾病。
在治療、預防、改善、控制需要調節(jié)趨化因子受體的疾病或者降低其風險時，適當?shù)膭┝克酵ǔ槊刻旒s0.01-500mg/kg患者體重，可以分為單劑或多劑給藥。劑量水平為每天約0.1至約250mg/kg；或為每天約0.5至約100mg/kg。合適的劑量水平可以為約0.01-250mg/kg/天、約0.05-100mg/kg/天或約0.1-50mg/kg/天。在此范圍內(nèi)，劑量可以為0.05-0.5、0.5-5或5-50mg/kg/天。對于口服給藥，組合物可以為包含1.0-1000mg活性成分、2.0-500、3.0-200、或者1、5、10、15、20、25、30、50、75、100、125、150、175、200、250、300、400、500、600、750、800、900和/或1000mg活性成分的片劑，用于對需要治療的患者調節(jié)癥狀。化合物的用法為每天1-4次，優(yōu)選每天1-2次。
但是，應當理解的是對于任何特定患者的具體劑量水平和給藥頻率可能是不同的，將取決于各種因素，包括所用具體化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性及作用時間長短、患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食、給藥模式和給藥時間、排泄速率、藥物組合、具體疾病的嚴重程度以及患者正在進行的治療。
幾種制備本發(fā)明化合物的方法在以下的流程和實施例中說明。初始原料是市售的、通過已知方法制備的或者按照本文介紹的方法制備。
流程1圖示了用于制備含1，1，3-三取代的環(huán)戊烷骨架的本發(fā)明化合物1-5的一個主要途徑。根據(jù)此途徑，使酮酸1-1(按照流程2A、2B、2C和2D制備)與胺1-2(按照流程3A-G制備)偶合。此反應可以通過不同的方式完成，包括首先用試劑例如乙二酰氯將酸轉化為它的酰氯，然后與胺1-2在堿(例如三乙胺)存在下化合。用例如NaB(OAc)3H或NaBH3CN作為還原劑，使1-3與胺1-4進行還原性胺化反應，得到趨化因子受體調節(jié)劑1-5。化合物1-9(可以根據(jù)流程1介紹的化學過程合成)為立體異構體混合物(Eliel，E.E.，Wilen，S.H.，Stereochemistryof Organic Compounds，John Wiley & Sons，Inc.，New York)。具體地講，獲得的化合物1-5通常為順式異構體和反式異構體的混合物。1-1為單一立體異構體(1-1a)時，只能獲得1-5的2種可能的異構體(順式和反式)；它們可以通過多種方法分離，包括制備型TLC、快速色譜法、MPLC、或HPLC(使用手性固定相的色譜柱)。1-1為外消旋時，能獲得1-5的全部4種可能異構體。它們也可通過HPLC(使用手性固定相的色譜柱)或上述方法的組合分離。外消旋的1-1的合成方法在流程2A中詳細介紹，而手性1-1a的合成方法在流程2B和2C中介紹。
此外，化合物1-5本身可以被修飾而得到新的趨化因子受體調節(jié)劑1-5.1。例如化合物1-5的酯官能團可以水解為相應的羧酸，相應的羧酸也可用作趨化因子受體調節(jié)劑。
流程1 如流程1A所示，可以在多種條件下(包括三乙酰氧基硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉)，將酮-酯1-6用胺1-4還原性胺化形成氨基酯1-7。將酯1-7用烷基化劑(例如烷基氯、烷基溴、烷基碘)在合適堿(例如雙(三甲硅烷基)氨基鋰)存在下烷基化，得到中間體酯1-8。通常，上述轉化形成的酯為1，3-順-和1，3-反-非對映異構體的混合物，可以用柱色譜法分離為兩個相應的非對映異構體。類似的非對映異構體分離也可以在以后實現(xiàn)，在酯1-8水解性裂解得到相應的酸1-9后進行。水解很容易在常規(guī)條件(包括氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀)于室溫至高溫下完成，這取決于酯基團及取代基R1的性質?？梢岳庙樖?非對映異構體酸比其反式差向異構體的溶解性小，用不同的溶劑結晶分離這些非對映異構體。
然后在標準酰胺鍵形成性反應條件下，包括碳化二亞胺試劑(例如DCC、EDC)以及催化劑(例如DMAP、HOAT或HOBT)，用酸1-9和四氫異喹啉衍生物1-2制備式1-5化合物。
流程1A 中間體1-3還可以通過手性HPLC拆分得到1-3a和1-3b(流程1B)。然后可制備得到順/反異構體1-5a和1-5b。
流程1B 流程2A圖示了用于制備中間體1-1和中間體1-6的一個主要途徑。根據(jù)此途徑，在標準條件下酯化3-氧代環(huán)戊烷甲酸(2-1)(可以用以下的已知方法合成)(Stetter，H.，Kuhlman，H.，Liebigs Ann.Chim.，1979，944))。R18為叔丁基時，可以如下制備相應的酯1-6使合適的醇，在此例中為叔丁醇，與酸2-1在硫酸存在下反應?？梢酝ㄟ^許多方式實現(xiàn)2-1中氧代基團的保護(Greene，T.，Wuts，P.G.M.，ProtectiveGroups in Organic Chemistry，John Wiley & Sons，Inc.，New York，NY 1991)?？捎迷噭┰姿崛柞ピ诤线m的溶劑(例如二氯甲烷和甲醇)中于酸性催化劑存在下引入特別合適的二甲縮醛保護基團?；蛘?，R18為甲基時，可以用原甲酸三甲酯和酸性催化劑(例如對甲苯磺酸)將酸2-1直接轉化為2-3。在合適堿(例如二異丙基氨基鋰)存在下，用烷基化劑(例如烷基氯、烷基溴或烷基碘)烷基化酯2-3得到中間體2-4。2-4的酯保護基團可以用許多方法脫去，這取決于酯的性質。甲酯(R18＝甲基)可以在酸或堿存在下于室溫或高溫水解，而叔丁酯(R18＝叔丁基)在酸性條件下很容易裂解。在這些條件下，二甲縮醛保護被同時脫去得到1-1。
流程2A 中間體1-1可以通過不同的方法(包括流程2B和2C介紹的方法)制備為單一的立體異構體(1-1a)。根據(jù)流程2B，外消旋的1-1可以轉化為它的芐基酯。有許多方法可以實現(xiàn)這種酯化，其中一種是先用例如乙二酰氯將1-1轉化為相應的酰氯，然后用芐基醇在堿(例如三乙胺)存在下處理。外消旋的芐基酯2-5可以通過手性制備型HPLC分離得到單一立體異構體2-5a?？梢酝ㄟ^多種方法脫去芐基得到手性酮酸1-1a。一種便利的方法是在催化劑例如Pd/C存在下進行氫化。
流程2B 根據(jù)流程2C，手性酮酸中間體1-1a可以用市售光學純氨基酸2-6制備。羧酸基團的保護可以通過多種方法實現(xiàn)。R18為甲基時，用甲醇在酸催化劑(例如HCl)存在下處理完成酯化。用Boc2O處理以保護2-7的胺基團。用烷基化劑(例如烷基氯、烷基溴或烷基碘)在適當堿(例如雙(三甲硅烷基)氨基鋰)存在下立體選擇性烷基化酯2-8得到中間體2-9。在催化劑(例如Pd/C)存在下氫化得到2-10。根據(jù)R18基團在標準條件下水解酯獲得2-11。例如R18為甲基時(甲酯)，可以用堿(例如氫氧化鈉、氫氧化鋰或氫氧化鉀)處理完成水解，可加熱或不加熱。Boc保護基團可以在標準酸性條件(用含HCl的溶劑(例如二噁烷)或者用TFA)下脫去?？梢酝ㄟ^多種方法氧化2-12得到1-1a(如果組成的R1是非手性的，則1-1a為單一立體異構體，如果組成的R1有一個手性中心，則1-1a為立體異構體的混合物)，包括依次用NBS、甲醇鈉處理的方法。
流程2C 按照2D所示流程，在強堿(例如二異丙基氨基鋰)存在下用酯2-3(R18為芐基或叔丁基)得到的烯醇化物可以與醛(R1aCHO)或酮(R1aR2aCO)反應，得到合適羥基烷基取代的中間體2-4.1。所得羥基可以用不同方法保護，包括用醋酸酐在堿(例如三乙胺)存在下處理得到中間體2-4.2。再次在適合具體保護基團的條件下脫去酯保護基團。在為叔丁酯(R18為叔丁基)時，在酸性條件下脫去保護。后者通常也引起縮醛保護基團的裂解，酮酸1-1.1可用一鍋法由此制備?？梢园凑涨笆龇椒?略微變化以適應1-1.1中保護的羥基)轉化為最終趨化因子活性調節(jié)劑1-9。
流程2D 胺1-2可以用流程3A-3G所示的多種方法制備。5-氮雜四氫異喹啉片段可以根據(jù)MarCoux，J-F.等(J.Chem.Lett.，2000，2(15)，2339-2341)的文獻方法制備?；蛘?，它可以如流程3A所示方法制備。將化合物3-1(通常從市場購買獲得)溴化(Br2，AcOH)得到3-2。金屬鹵素交換(NaH，叔丁基鋰)后用DMF處理，得到醛3-3?？捎眉姿徕c、羥胺鹽酸鹽和甲酸將醛基轉化為腈。所得腈3-4可以用三氯氧化磷處理得到2-氯吡啶3-5?？捎帽岫榛サ拟c鹽置換氯基。用氫和Raney Ni還原3-6的腈基伴隨環(huán)化，獲得化合物3-7。根據(jù)不同的酯用不同的方法進行脫羧反應。在流程3A的情況下，用TFA對叔丁酯進行脫羧作用得到3-8。還原反應(BH3)，然后用Boc2O保護所得胺得到3-9，可以方便地提純3-9?？梢杂枚喾N方法脫去Boc保護基團得到1-2a，包括用無水HCl在二噁烷或部分其它溶劑中處理的方法。
流程3A 1-2a類化合物還可以根據(jù)流程3B制備。市售3-10可以用甲基碘在堿(例如K2CO3)存在下甲基化得到3-11。與保護的哌啶酮在NH3/甲醇存在下進行環(huán)加成反應，獲得5-氮雜四氫異喹啉3-12(R10c可以是不同的保護基團，例如芐基或苯甲酰基)。用氫和催化劑(例如Pd/C)氫化化合物3-12的硝基得到3-13。形成重氮鹽后與硫酸加熱，得到5-氮雜-7-羥基四氫異喹啉3-14。根據(jù)R10c的不同性質而用不同的方法脫去保護基團R10c。在R10c為芐基時，可以在HCl和催化劑(例如Pd/C)存在下氫化。在R10c為苯甲酰基時，可以通過加熱濃HCl溶液水解?？梢杂肂oc2O在3-15上方便地引入Boc保護基團得到3-16。然后可以結合不同的R10d得到醚化合物(參見流程3C)。最終，用HCl或TFA脫去所得化合物3-17的Boc保護基團，得到1-2b。或者，化合物3-14本身可以轉化為醚化合物(根據(jù)流程3C)?？梢匀缟纤雒撊ニ妹?-18的R10c，轉化為化合物3-19。
流程3B 流程3B中的5-氮雜-7-羥基四氫異喹啉3-14和3-16可以轉化為不同的醚化合物(參見流程3C)?？梢杂猛榛u和堿(例如K2CO3、NaOH或NaH)制備烷基醚，得到化合物3-19和3-22。三氟甲基醚可以如下制備開始生成乙黃原酸甲酯(NaH，CS2；MeI)，然后依次用1，3-二溴-5，5-二甲基乙內(nèi)酰脲(或NBS)和HF/吡啶溶液處理得到3-20。芳基醚可以用許多方法制備，包括與芳基硼酸在醋酸銅(II)和三乙胺存在下反應的方法，得到化合物3-21。
流程3C 化合物1-2c(R5為鹵化物(IVc))可以根據(jù)流程3D制備。化合物3-13可以根據(jù)典型方法通過重氮鹽轉化為鹵化物3-22?；蛘撸梢允褂眠m當保護的哌啶酮的已知環(huán)加成反應。脫去保護基團R10c可以通過前述方法完成。
流程3D 此外，在結合為高級中間體后，片段1-2c可以被進一步修飾以制備含7-芳基-5-氮雜四氫異喹啉的類似物。這可以如下完成使5-氮雜-7-鹵基四氫異喹啉中間體與芳基硼酸(或芳基錫烷)偶合，通過過渡金屬催化劑例如Pd(OAc)2調節(jié)。
流程3E-3G圖示四氫異喹啉胺組分的制備方法。結合為1-5酰胺部分的四氫異喹啉通常在不同位置包含一個或兩個取代基。這些化合物大部分不能購買得到，但是可以通過合成得到，流程3F和3G展示了代表性的合成例子。
流程3E圖示了合成簡單四氫異喹啉(1-2d)的例子。根據(jù)此流程，將市售4-三氟甲基苯基乙腈(3-23)在Ra-Ni存在下氫化得到相應的胺(3-24)，然后用三氟醋酸酐與所述胺反應。所得酰胺(3-25)用甲醛在硫酸存在下處理得到環(huán)狀化合物(3-26)，將其進一步轉化為四氫異喹啉(1-2d)。
流程3E 許多5-取代的四氫異喹啉也可用3-26制備(流程3F)。在5位碘化得到中間體3-28。在鈀(0)催化條件下轉化為氰基化合物(3-29)后，酰胺裂解為胺3-30，可以將3-30通過兩個步驟以高收率轉化為氨基酯1-2e。碘化合物3-28也可如實驗部分所示轉化為其它化合物。還可以在裝配最終骨架(1-5)后，修飾這些取代基以制備新的1-5.1類趨化因子調節(jié)劑(參見流程1)。一個修飾例子是水解甲酯(1-2e的)制備相應的甲酸(參見實施例)。
流程3F 雜環(huán)的7-取代四氫異喹啉可以利用市售四氫異喹啉獲得。如流程3G所示，將四氫異喹啉(3-32)用硝酸鉀在濃硫酸存在下硝化。將7-硝基-四氫異喹啉3-33用三氟醋酸酐處理以保護胺，然后將所得酰胺用10％鈀碳在50psi氫壓力下氫化獲得苯胺衍生物3-34。堿水解獲得7-氨基取代的四氫異喹啉(3-35)，它可用于其它CCR2拮抗劑或四氫異喹啉衍生物的合成。將3-35用氯甲酸芐基酯在有機堿(例如三乙胺或二異丙基乙胺)存在下保護，獲得氨基甲酸酯3-37。此中間體可以用于制備四唑和取代的四唑(例如1-2g)。將中間體3-37用三氟醋酸酐處理生成三氟乙?；Ｗo的酰胺，然后將其如下轉化為三氟甲基取代的四唑使其與三苯基膦在回流加熱下反應15h，然后與疊氮化鈉在DMF中于室溫反應。用10％鈀碳在氫氣氛下氫化獲得雜環(huán)取代的四氫異喹啉1-2g。
或者，3-34可以如下直接衍生為三唑3-36與N，N-二甲基甲酰胺連氮(N，N-dimethylformamide azine)在催化量酸(例如甲苯磺酸)存在下加熱至回流24-48h。此中間體的堿性水解獲得胺組分1-2f。
流程3G 結合到本發(fā)明化合物酰胺部分的四氫異喹啉的其它例子以及它們的合成方法在實驗部分進一步介紹。
胺1-4由不同的來源獲得。大部分是市售的，部分是文獻已知的并可以根據(jù)公開的方法制備，部分按照本文介紹的方法制備。由于它們的結構和制備方法是多種多樣的，在此部分只介紹兩個流程；可以在實驗部分找到胺1-4的不同合成方法。流程4A展示了一種合成4-芳基取代的哌啶的方法。烯醇三氟甲基磺酸酯4-1(根據(jù)Wustrow，D.J.，Wise，L.D.，Synthesis，(1991)，993-995制備)可以與硼酸4-2按照Wustrow和Wise介紹的方法偶合。4-3中烯烴的氫化可以用氫在催化劑(例如Pd(OH)2/C)存在下實現(xiàn)。脫去Boc保護基團可以用標準酸性條件(例如HCl的二噁烷溶液或TFA/DCM)實現(xiàn)，獲得哌啶1-4.1。
流程4A 流程4B展示了合成胺1-4的另一個例子。首先將市售醇(4-5)用甲烷磺酰氯磺?；玫街虚g體4-6，然后用四唑直接取代得到雜芳基哌啶4-7。在標準條件下脫去Boc保護基團，得到胺鹽酸鹽4-8。
流程4B 流程5圖示了合成趨化因子受體調節(jié)劑的另一種主要途徑。根據(jù)此途徑，使用肽偶合試劑(例如EDC)使中間體2-11(流程2C介紹的)與胺1-2(流程1介紹的)縮合得到5-1。將Boc保護基團在標準條件下(例如含HCl的溶劑，例如二噁烷)脫去，然后在還原劑(例如三乙酰氧基硼氫化鈉)存在下，用二醛5-3處理所得胺5-2，導致雙重還原性烷基化，伴隨環(huán)化得到1-5.2。與流程1一樣，進一步修飾(例如水解1-5.2的酯基團)可以得到新的趨化因子受體調節(jié)劑1-5.3。
流程5 流程6圖示了一種制備二醛5-3的方法。根據(jù)此途徑，依次用例如臭氧、甲硫醚處理使環(huán)烯6-1氧化性裂解，得到二醛。或者，二醛5-3用中間體臭氧化物6-2替代，6-2可以直接用于雙重還原性胺化反應，得到1-5.2。
流程6 在某些情況下，為了促進反應或者避免不需要的反應產(chǎn)物，可以調整上述反應流程的順序。以下實施例僅用于進一步舉例說明，并不是對本發(fā)明公開內(nèi)容的限制。
通常用旋轉蒸發(fā)器在減壓下濃縮溶液?？焖偕V法使用硅膠(230-400目)。MPLC是指中壓液相色譜法，除非另有說明，否則使用硅膠固定相。除非另有說明，否則NMR光譜用CDCl3溶液獲得。偶合常數(shù)(J)單位為赫茲(Hz)?？s寫三乙胺(TEA)，N，N-二異丙基乙胺(DIEA)，飽和水溶液(sat′d)，室溫(rt)，小時(h)，分鐘(min)。
以下的代表性方法用于制備下文實施例中使用的化合物，可以替代下文實施例使用的不能購買得到的化合物。
在某些情況下，為了促進反應或者避免不需要的反應產(chǎn)物，可以調整上述反應流程的順序。以下實施例僅用于進一步舉例說明，并不是對本發(fā)明公開內(nèi)容的限制。
通常用旋轉蒸發(fā)器在減壓下濃縮溶液?？焖偕V法使用硅膠(230-400目)。除非另有說明，否則NMR光譜用CDCl3溶液獲得。偶合常數(shù)(J)單位為赫茲(Hz)?？s寫三乙胺(TEA)，N，N-二異丙基乙胺(DIEA)，飽和水溶液(sat′d)，室溫(rt)，小時(h)，分鐘(min)。
以下的代表性方法用于制備下文實施例中使用的化合物，可以替代下文實施例使用的不能購買得到的化合物。
中間體1 步驟A 將4-三氟甲基苯基乙腈(10g，49mmol)的乙醇(100mL)和氫氧化銨(20mL 29.3％水溶液)溶液用Raney鎳(1g)氫化16h。通過硅藻土過濾除去催化劑，將濾液蒸發(fā)至干。將純殘余物滴加到冷(0℃)三氟醋酸酐(25mL，180mmol)，在0℃攪拌所得混合物30min。將反應混合物傾在冰(250mL)上，攪拌所得混合物30min，然后過濾移出沉淀，風干得到白色固體產(chǎn)物(13.4g，90％)。
步驟B 步驟A產(chǎn)物(13.4g，44.0mmol)和多聚甲醛(2g，50mmol)的混合物中一次性加入濃硫酸(90mL)和冰醋酸(60mL)的混合物，在室溫攪拌所得混合物16h。將反應混合物傾在冰和水(1L)的混合物上，用乙酸乙酯(3×150mL)萃??；合并的乙酸乙酯層用水(3×500mL)、飽和碳酸氫鈉(200mL)和飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾后真空蒸發(fā)。殘余物用二氧化硅柱色譜法提純(用10％Et2O/己烷洗脫)得到產(chǎn)物(8.29g，60％)。
步驟C 步驟B制備的三氟乙酰胺(8.29g，26.0mmol)的乙醇(200mL)溶液中加入碳酸鉀(20g，150mmol)的水(50mL)溶液，回流攪拌所得混合物1h。旋轉蒸發(fā)除去乙醇，將水(150mL)加入殘余物。用CH2Cl2(3×100mL)萃取，合并的二氯甲烷層用飽和氯化鈉(100mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾后真空蒸發(fā)得到產(chǎn)物(5.2g，91％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝1.81(1H，br s)，2.84(2H，d，J＝6.0Hz)，3.15(2H，t，J＝6.0Hz)，4.05(2H，s)，7.19(1H，d，J＝8.0Hz)，7.27(1H，s)，7.37(1H，d，J＝8.0Hz)。
中間體2 步驟A 5-三氟甲基-2-吡啶醇(51.0g，307mmol)和乙酸鈉(26.2g，319mmol)的冰醋酸(200mL)溶液中加入溴(16.7mL，325mmol)，將所得混合物在80℃加熱2.5h。讓反應物冷卻至室溫，然后減壓蒸發(fā)。殘余物用飽和碳酸氫鈉溶液中和，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。合并有機層，用硫酸鎂干燥，過濾，真空蒸發(fā)獲得74.45g(98.7％)粗產(chǎn)物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(d，J＝2.6Hz，1H)，7.89(m，1H)。
步驟B 在氮氣氛下，將取代的吡啶(步驟A，48.8g，202mmol)分為小批量加入NaH(8.9g，220mmol)的無水THF(500mL)懸浮液。在中間體加入完畢后，冷卻反應混合物至-78℃，用注射器滴加叔丁基鋰(260mL，444mmol)。在攪拌5min后，緩慢加入DMF(50mL，707mmol)以維持溫度低于-50℃。然后將所得混合物攪拌10h，讓其升至室溫?；旌衔镉?N HCl猝滅，然后用乙酸乙酯(1000mL)稀釋。分離出有機層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空蒸發(fā)。所需產(chǎn)物從乙酸乙酯和己烷析出，過濾獲得淺褐色固體(28.55g，73.8％)。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ10.13(s，1H)，8.21(s，2H)。
步驟C 將步驟B的中間體(18g，95mmol)、甲酸鈉(7.1g，105mmol)、羥胺鹽酸鹽(7.3g，110mmol)和甲酸(150mL)的混合物在室溫攪拌2h，然后回流過夜。冷卻反應混合物，在室溫靜置7天。將反應物傾入水中，用乙酸乙酯(3x)萃取。合并的有機層用水(2x)、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮獲得所需褐色粉末狀產(chǎn)物(17.84g，89.8％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.37(d，J＝2.7Hz，1H)，8.19(q，J＝0.7Hz，0.3？？/Hz，1H)。
步驟D 三氯氧化磷(13.4mL，144mmol)和苯醌(8.7mL，73.4mmol)的混合物中加入步驟C的產(chǎn)物(24.6g，131mmol)，將所得混合物回流3h。冷卻反應物至100℃，然后緩慢加入水(70mL)。進一步冷卻混合物至室溫，用飽和碳酸氫鈉溶液小心中和。水層用乙酸乙酯(3x)萃取，合并有機層，用硫酸鎂干燥，過濾，真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用快速色譜法提純獲得(23.5g，87.0％)所需化合物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.88(d，J＝2.0Hz，1H)，8.26(d，J＝2.5Hz，1H)。
步驟E 在氮氣氛下，用注射器向NaH(7.8g，200mmol)的THF(100mL)懸浮液滴加丙二酸叔丁酯甲酯(20mL，120mmol)的無水THF(100mL)溶液。攪拌反應混合物0.5h，然后用注射器緩慢加入步驟D制備的中間體(20.1g，97.6mmol)的THF(200mL)溶液。在室溫攪拌反應物過夜，然后用氯化銨飽和溶液猝滅。分離出有機層，水層用乙酸乙酯(3x)萃取。合并的有機層用水(3x)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空蒸發(fā)?？焖偕V法獲得31.76g(94.6％)所需純凈產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.03(d，J＝1.5Hz，1H)，8.25(d，J＝2.0Hz，1H)，5.25(s，1H)，3.86(s，3H)，1.52(s，9H)。
步驟F 將Raney Ni(1g)和步驟E產(chǎn)物(18.2g，52.9mmol)的乙醇(130mL)懸浮液置于Parr裝置，在40psi氫化過夜。懸浮液通過硅藻土過濾，真空蒸發(fā)濾液獲得16.35g(97.8％)粗產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.83(s，1H)，7.89(s，1H)，7.82(s，1H)，4.83(d，J＝16Hz，1H)，4.72(s，1H)，4.49(d，J＝16Hz，1H)，1.45(s，9H)。
步驟G 步驟F產(chǎn)物(16g，51mmol)的DCM(60mL)混合物中加入TFA(30mL)，在室溫攪拌所得混合物0.5h。減壓蒸發(fā)溶液，將殘余物溶于DCM。緩慢加入飽和碳酸氫鈉溶液中和混合物，移出有機層。水溶液用DCM(4x)萃取，然后合并所有有機層，用硫酸鈉干燥，過濾，真空蒸發(fā)獲得10.42g(95.2％)所需產(chǎn)物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.81(s，1H)，7.78(s，1H)，7.30(s，1H)，4.63(s，2H)，3.90(s，2H)。
步驟H 步驟G產(chǎn)物(18.0g，83.3mmol)的THF(50mL)溶液中加入1.0M甲硼烷的THF溶液(417mL，420mmol)，在室溫攪拌所得溶液過夜。減壓蒸發(fā)溶液，然后將殘余物用1％HCl/MeOH溶液處理，將所得混合物在50℃加熱過夜，以分解甲硼烷絡合物。用酸的甲醇溶液重復處理兩次以確保消除甲硼烷絡合物。將此反應粗產(chǎn)物立即用于下一反應。
將以上粗產(chǎn)物(83.3mmol，假定100％轉化)和DIEA(43mL，250mmol)的DCM溶液用二碳酸二叔丁酯(36.4g，167mmol)處理，所得混合物在室溫攪拌過夜。溶液用飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水洗滌。合并水層，再用DCM(2x)洗滌。然后用硫酸鈉干燥合并的有機層，過濾，蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物用快速色譜法和MPLC提純獲得(11.89g，47.2％，最后兩個步驟)黃色固體。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.69(s，1H)，7.66(s，1H)，4.67(s，2H)，3.79(t，J＝6.0Hz，2H)，3.08(t，J＝5.5Hz，2H)，1.51(s，9H)。
步驟I 將步驟H的產(chǎn)物(11.89g)用4M HCl的二噁烷溶液處理。在室溫攪拌溶液2h，然后真空蒸發(fā)獲得黃色粉末狀中間體2(10.85g，99％)。LC-MS C9H10F3N2[M+H+]計算值202.07，實測值203.0。
中間體3 步驟A 將3-氧代環(huán)戊烷-甲酸甲酯(20g，160mmol)和原甲酸三甲酯(85mL，780mmol)的甲醇溶液用催化量對甲苯磺酸(3.00g，15.6mmol)處理，在室溫攪拌所得溶液4h。減壓蒸發(fā)溶劑，然后將殘余物溶于乙醚(600mL)。溶液用飽和碳酸氫鈉(2×200mL)、水(150mL)和鹽水(200mL)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，然后如前所述蒸發(fā)溶劑?？焖僦V法提純(洗脫劑25％乙醚/戊烷)獲得21.52g(73％)所需澄清油狀產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.68(s，3H)，3.21(d，J＝9.9Hz，6H)，2.89(p，J＝8.5Hz，1H)，2.14-2.05(m，2H)，2.02-1.80(m，4H)。
步驟B 火焰干燥的500mL圓底燒瓶中裝入150mL無水THF，然后在氮氣氛下用丙酮/干冰浴冷卻至-78℃。用注射器將二異丙基胺(19.2mL，137mmol)加入冷卻的溶劑，然后緩慢加入2.5M正丁基鋰的己烷溶液(55mL，140mmol)。在攪拌5min后，用注射器滴加步驟A的甲基縮酮中間體3(21.52g，114.4mmol)的50mL THF溶液，在-78℃攪拌所得混合物2h。然后用注射器滴加2-碘丙烷(34.3mL，343mmol)，攪拌所得混合物過夜，讓其緩慢升至室溫。用10％檸檬酸溶液猝滅反應物，分離有機物。水層用乙醚(3×150mL)萃取，合并所有的有機物，用無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用快速柱(flask column)提純(洗脫劑20％乙醚/戊烷)獲得16.74g(64％)所需產(chǎn)物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.69(s，3H)，3.18(d，J＝20.5Hz，6H)，2.57(d，J＝13.9Hz，1H)，2.29-2.20(m，1H)，1.90(p，J＝6.8Hz，1H)，1.88-1.80(m，2H)，1.69-1.61(m，2H)，0.89(dd，J＝11.9Hz，6.8Hz，6H)。
步驟C 將酯(中間體3步驟B介紹的，16.7g，72.7mmol)的乙醇(30mL)溶液用5M NaOH(55mL)處理，將所得混合物加熱至回流3天。然后冷卻混合物至室溫，用濃鹽酸酸化。減壓蒸發(fā)有機溶劑，水層用DCM(5×100mL)萃取。合并有機萃取液，用無水硫酸鎂干燥，過濾，真空蒸發(fā)獲得粗制的黃色油狀3-氧代環(huán)戊烷甲酸(11.07g，90％)。1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.70(d，J＝18.1Hz，1H)，2.44-2.39(m，1H)，2.30-2.15(m，2H)，2.14(dd，J＝18.1，1.0Hz，1H)，2.06(p，J＝6.9Hz，1H)，1.98(m，1H)，0.98(dd，J＝11.4，6.9Hz，6H)。
步驟D 方法A酸(中間體3步驟C介紹的，2.00g，11.8mmol)的DCM(50mL)溶液中加入乙二酰氯(1.54mL，17.6mmol)，然后加入2滴DMF。在室溫攪拌溶液80min，然后減壓蒸發(fā)。將殘余物溶于DCM(2mL)，用注射器加入到準備的中間體1(2.36g，11.8mmol)和三乙胺(2.13mL，15.3mmol)的DCM(40mL)溶液。在室溫攪拌所得混合物18h，然后用水(25mL)猝滅。分離有機物，用1N HCl、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用MPLC提純(洗脫劑60％乙酸乙酯/己烷)獲得中間體3(3.18g，77％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝7.3Hz，1H)，7.39(s，1H)，7.29(d，J＝7.7Hz，1H)，4.81(m，2H)，3.93(m，1H)，3.82(m，1H)，2.94(m，3H)，2.54(m，1H)，2.43(d，J＝8.5Hz，1H)，2.32(m，2H)，2.26(p，J＝6.6Hz，1H)，2.16(m，1H)，0.93(dd，J＝19.7Hz，6.8Hz，6H)。LC-MS C19H23F3NO2計算值353.16，實測值[M+H+]354.25。
方法B將步驟C制備的酸中間體3(1.0g，5.9mmol)、中間體1(1.18g，5.88mmol)、DMAP(71mg，0.59mmol)、N，N-二異丙基乙胺(1.02mL，5.88mmol)和二氯甲烷(20mL)的混合物用1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC，2.25g，11.7mmol)處理，在室溫攪拌過夜。反應混合物用二氯甲烷(30mL)稀釋，用水(2×20mL)、鹽水(1×30mL)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)溶劑。MPLC提純(洗脫劑60％乙酸乙酯/己烷)獲得純凈化合物1.08g(52％)。LC-MS C19H23F3NO2計算值353.16，實測值[M+H+]354.25。
中間體4 酸(中間體3步驟C介紹的，540mg，3.20mmol)的DCM(50mL)溶液中加入乙二酰氯(0.834mL，9.60mmol)，然后加入2滴DMF。在室溫攪拌溶液80min，然后減壓蒸發(fā)。將殘余物溶于DCM(2mL)，用注射器加入準備的中間體2(880mg，3.20mmol)和三乙胺(0.820mL，6.50mmol)的DCM(20mL)溶液。在室溫攪拌所得混合物18h，然后用水(25mL)猝滅。分離有機物，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，然后蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用MPLC提純(用階段梯度洗脫劑0-70％乙酸乙酯/己烷)獲得中間體2(720mg，64％)。ESI-MS計算值C18H21F3N2O2354.16；實測值355(M+H)中間體5 通過手性分離將中間體4拆分為它的單獨的對映異構體，采用配備制備型ChiralPak AD柱的HPLC。如下完成分離每次注射100mg，洗脫劑采用25％異丙醇和75％庚烷，流速9mL/min。
中間體6 步驟A 方法A將3-氧代-環(huán)戊烷甲酸(Stetter，H.，Kuhlmann，H.Liebigs Ann.Chem.，1979，7，944-9)(5.72g，44.6mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液用N，N′-二異丙基-O-叔丁基-異脲(21.2mL，89.3mmol)處理，在室溫攪拌反應混合物過夜。濾除沉淀N，N′-二異丙基脲，真空濃縮濾液，蒸餾提純殘余物(bp125-129℃，18mmHg)獲得4.74g(58％)純凈產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.02(p，J＝7.8Hz，1H)，2.05-2.50(m，6H)，1.45(s，9H)。13C NMR(125MHz，CDCl3)δ217.00，173.47，80.99，41.88，41.14，27.94，26.57。
方法B2L圓底RBF中裝入無水硫酸鎂(113g，940mmol)，加入二氯甲烷(940mL)。在攪拌下，將懸浮液用濃硫酸(12.5mL，235mmol)處理，然后在15min內(nèi)加入3-氧代-環(huán)戊烷甲酸(30.1g，235mmol)。在攪拌15min后，加入叔丁醇(87g，1.2mol)。用塞子封閉反應容器以助保留異丁烯，在室溫攪拌72h。通過硅藻土墊濾出固體，將濾液體積減至約500mL，用飽和碳酸氫鈉溶液(2×150mL)洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機相，過濾，減壓蒸餾除去溶劑(180mmHg)。粗產(chǎn)物通過蒸餾提純獲得39.12g(90％)純凈產(chǎn)物。
步驟B 將3-氧代環(huán)戊烷甲酸叔丁酯(11.54g，62.64mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液用原甲酸三甲酯(41.4mL，251mmol)在對甲苯磺酸(400mg)存在下處理，在室溫攪拌48h。將黑色反應混合物傾在飽和碳酸氫鈉溶液上，粗產(chǎn)物用二氯甲烷萃取。用無水硫酸鎂干燥合并的有機萃取液，真空除去溶劑，蒸餾提純粗產(chǎn)物(bp.104℃，4mmHg)獲得12.32g(85％)所需產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.21(s，3H)，3.20(s，3H)，2.80(m，1H)，2.10-1.80(bm，6H)，1.46(s，9H)。13C NMR(125MHz，CDCl3)δ174.9，111.2，80.3，67.8，49.2，42.5，37.4，33.8，28.3，22.0。
步驟C 火焰干燥的500mL圓底燒瓶中裝入100mL無水THF，然后在氮氣氛下用丙酮/干冰浴冷卻至-78℃，用注射器將二異丙基胺(7.9mL，56mmol)加入冷卻的溶劑，然后緩慢加入2.5M正丁基鋰的己烷溶液(22.6mL，56.45mmol)。在攪拌5min后，用注射器滴加縮醛(中間體6步驟B介紹的，10.0g，43.4mmol)的50mL THF，在-78℃攪拌所得混合物2h。然后用注射器滴加乙醛(7.3mL，130mmol)，在-78℃攪拌所得混合物2h。將混合物傾入10％檸檬酸溶液(300mL)中猝滅反應物，然后用二氯甲烷(2×150mL)萃取。合并有機物，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。在反應或后續(xù)處理時，部分縮醛水解為酮，因此，將粗制的混合物直接用于下一步驟無需再提純。
步驟D 將粗制的中間體(中間體6步驟C介紹的，56.45mmol，假設步驟C轉化率100％)用10％三氟乙酸的二氯甲烷溶液處理，在室溫攪拌所得混合物過夜。真空濃縮反應物，然后用水稀釋，用二氯甲烷萃取。合并有機物，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸發(fā)獲得8.04g(83％)粗產(chǎn)物，直接使用無需再提純。
步驟E 酸(中間體6步驟D介紹的，300mg，1.74mmol)、中間體2(486，1.74mmol)、HOAt(237mg，1.74mmol)、N，N-二異丙基乙胺(0.606mL，3.48mmol)和二氯甲烷(15mL)的混合物用1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC，667mg，3.48mmol)處理，在室溫攪拌5天。反應混合物用二氯甲烷(30mL)稀釋，用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，真空蒸發(fā)溶劑。通過制備型板(洗脫劑100％乙酸乙酯)提純獲得中間體6260mg(42％)。
中間體7
步驟A 將2-氟-4-三氟甲基苯基乙腈(10g，49mmol)的乙醇(100mL)和氫氧化銨(20mL 29.3％水溶液)溶液利用Raney鎳(1g)氫化16h。通過硅藻土過濾除去催化劑，將濾液蒸發(fā)至干。將純殘余物滴加到冷(0℃)三氟醋酸酐(25mL，180mmol)，在0℃攪拌所得混合物30min。將反應混合物傾在冰(250g)上，攪拌所得混合物30min，然后過濾移出沉淀，風干得到白色固體產(chǎn)物(13.4g，90％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝3.02(2H，t，J＝7.0Hz)，3.66(2H，q，J＝6.6Hz)，6.44(1H，brs)，7.34(2H，m)，7.41(1H，d，J＝7.8Hz)。
步驟B 步驟A產(chǎn)物(13g，44mmol)和多聚甲醛(2.0g，48mmol)的混合物中一次性加入濃硫酸(90mL)和冰醋酸(60mL)的混合物，在室溫攪拌所得混合物16h。將反應混合物傾在冰和水(1L)的混合物上，用乙酸乙酯(3×150mL)萃??；合并的乙酸乙酯層用水(3×500mL)、飽和碳酸氫鈉(200mL)和飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾后真空蒸發(fā)。殘余物用二氧化硅柱色譜法提純(用10％Et2O/己烷洗脫)得到產(chǎn)物(8.29g，60％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝3.01(2H，m)，3.91和3.97(2H，t，J＝6.2Hz)，4.83和4.88(2H，s)，7.21-7.28(3H，m)。
步驟C 步驟B制備的三氟乙酰胺(8.3g，26mmol)的乙醇(200mL)溶液中加入碳酸鉀(20g，150mmol)的水(50mL)溶液，回流攪拌所得混合物1h。減壓除去乙醇，將水(150mL)加入殘余物，用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并的二氯甲烷層用飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾后真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(5.2g，91％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝1.74(1H，br s)，2.78(2H，d，J＝6.0Hz)，3.17(2H，t，J＝6.0Hz)，4.05(2H，s)，7.04-7.14(3H，m)。
中間體8 步驟A 將三頸圓底燒瓶裝上加液漏斗和冷凝器，加入鋅粉(2.45g，37.4mmol)，用火焰干燥。在冷卻后，用氮氣凈化系統(tǒng)，加入6mL THF，然后加入1，2-二溴乙烷(0.298mL，3.46mmol)。將混合物用加熱槍加熱至劇烈回流，回流攪拌～30s(觀測到氣體逸出)，然后冷卻至室溫。重復加熱、冷卻兩次。然后加入氯代三甲基硅烷(0.402mL，3.17mmol)，在室溫攪拌混合物20min。在約1min內(nèi)加入N-叔丁氧基羰基-4-碘-哌啶(已知的Billotte，S.Synlett(1998)，379.，8.97g，28.8mmol)的15mL THF溶液。在50℃攪拌反應混合物1.5h，然后冷卻至室溫。其間，在氮氣氛下將三-2-呋喃基膦(267mg，1.15mmol)和三(二亞芐基丙酮)-二鈀(0)氯仿加合物(298mg，0.288mmol)的混合物溶于6mLTHF，在室溫攪拌15min，加入有機鋅溶液。然后加入2-溴嘧啶(5.50g，34.6mmol)的58mL THF和20mL N，N-二甲基乙酰胺溶液。將反應混合物加熱至80℃，攪拌3.5h，然后冷卻至室溫，攪拌36h。通過硅藻土過濾反應混合物，濾餅用乙酸乙酯洗滌。濾液進一步用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。水層再次用乙酸乙酯萃取，合并有機層，用水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次。有機相用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后濃縮。用快速色譜法提純(二氧化硅，階段梯度25％乙酸乙酯/己烷，40％乙酸乙酯/己烷，60％乙酸乙酯/己烷，80％乙酸乙酯/己烷，100％乙酸乙酯)獲得4.92g純凈4-(2-嘧啶基)-哌啶產(chǎn)物(65％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.70(d，J＝5.0Hz，2H)，7.16(app t，J＝4.5Hz，1H)，4.24(br s，2H)，3.05(m，1H)，2.89(br m，2H)，2.01(br d，J＝13Hz，2H)，1.84(dq，J＝4.5，12.5Hz，2H)，1.49(s，9H)。
步驟B 將步驟A制備的N-叔丁氧基羰基哌啶(4.64g，17.6mmol)溶于4NHCl的二噁烷溶液(50mL)，在室溫攪拌2.25h。濃縮反應混合物獲得4.16g哌啶鹽酸鹽(100％)，不需要再提純。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.95(d，J＝5.5Hz，2H)，7.60(t，J＝5.0Hz，1H)，3.53(dt，J＝13，3.5Hz，2H)，3.35(tt，J＝4.0，11.0Hz，1H)，3.20(brt，J＝13.8Hz，2H)，2.30(br d，J＝14.0Hz，2H)，2.11-2.20(m，2H)；ESI-MS C9H13N3的計算值163；實測值164(M+H)。
中間體9 此中間體按照用于中間體8的方法制備，但是用4-溴嘧啶替代2-溴嘧啶。LC-MS C9H13N3計算值163.28，實測值[M+H]+64。
中間體104-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶鹽酸鹽 步驟A4-羥基哌啶-1-甲酸叔丁酯 向4-羥基哌啶(60.8g)的二氯甲烷(500mL)攪拌溶液非常緩慢地加入二碳酸二叔丁酯(19g，0.55mol)的二氯甲烷(500mL)溶液。在加入后，加入耗時1h，在室溫攪拌所得混合物5h。然后將混合物用飽和NaHCO3、3N HCl和鹽水洗滌，干燥，然后蒸發(fā)得到稠油狀4-羥基哌啶-1-甲酸叔丁酯(90g)。
步驟B4-[(甲基磺?；?氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 在0℃，向4-羥基哌啶-1-甲酸叔丁酯(21.1g，100mmol)和三乙胺(22mL)的二氯甲烷(250mL)攪拌溶液中緩慢加入甲烷磺酰氯(9.0mL，1.1eq.)。再攪拌所得混合物1h，在此期間形成白色固體。然后將混合物用3N HCl洗滌，用Na2SO4干燥，然后蒸發(fā)得到白色固體4-[(甲基磺酰基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(29.2g)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.92-4.87(m，1H)，3.75-3.69(m，2H)，3.34-3.28(m，2H)，3.05(s，3H)，2.01-1.94(m，2H)，1.87-1.78(m，2H)。
步驟C4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶鹽酸鹽在室溫向4-[(甲基磺?；?氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.9g，21mmol)和1，2，4-三唑(1.8g，25mmol eq.)的DMF攪拌溶液中加入氫化鈉(60％分散于礦物油，1.0g，25mmol)。在60℃攪拌混合物5天，TLC證實沒有剩下初始甲磺酸酯。將混合物傾入冰水中，用乙酸乙酯(3x)萃取。干燥有機層，蒸發(fā)，用二氧化硅快速柱提純(用0-10％甲醇/乙酸乙酯洗脫)得到白色固體4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。然后將固體用氯化氫的二噁烷(4N，10mL)處理2h。然后將混合物蒸發(fā)除去大部分二噁烷得到白色固體，將其用乙酸乙酯洗滌得到所需4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶鹽酸鹽(5.55g)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ10.00(s，1H)，8.97(s，1H)，5.10-5.00(m，1H)，3.63-3.58(br.d，2H)，3.33-3.26(br.d，2H)，2.50-2.30(m，4H)。
以下中間體10-16按照類似于中間體10的方法制備，使用4-[(甲基磺酰基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯和合適的雜環(huán)。
中間體114-(1H-吡唑-1-基)哌啶鹽酸鹽 用吡唑按照中間體10的方法制備。
中間體124-(1H-咪唑-1-基)哌啶鹽酸鹽 用咪唑按照中間體10的方法制備1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.18(s，1H)，7.86(s，1H)，7.65(s，1H)，4.9-4.8(隱藏在CD3OD峰下，1H)，3.61-3.61(br.d.，2H)，3.33-3.26(m，2H)，2.49-2.45(br.d，2H)，2.39-2.28(m，2H)。
中間體134-(1H-1，2，3-三唑-1-基)哌啶鹽酸鹽 用1，2，3-三唑按照中間體10的方法制備。
4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)哌啶鹽酸鹽1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.77(s，1H)，8.54(s，1H)，5.26-5.19(m，1H)，3.65-3.59(m，2H)，3.37-3.29(m，2H)，2.60-2.54(m，2H)，2.50-2.39(m，2H)。
中間體144-(2H-1，2，3-三唑-2-基)哌啶鹽酸鹽 用1，2，3-三唑按照中間體10的方法制備。
4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)哌啶鹽酸鹽1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.72(s，2H)，4.94-4.87(m，1H)，3.54-3.48(m，2H)，3.28-3.22(m，2H)，2.46-2.32(m，4H)。
中間體154-(1H-四唑-1-基)哌啶鹽酸鹽 用四唑按照中間體10的方法制備。
4-(1H-四唑-1-基)哌啶鹽酸鹽1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.77(s，1H)，5.30-5.23(m，1H)，3.58-3.53(m，2H)，3.35-3.29(m，2H)，2.58-2.2.52(m，2H)，2.48-2.38(m，2H)。
中間體164-(2H-四唑-2-基)哌啶鹽酸鹽 用四唑按照中間體10的方法制備。
4-(2H-四唑-2-基)哌啶鹽酸鹽1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.32(s，1H)，5.08-5.00(m，1H)，3.61-3.57(m，2H)，3.33-3.28(m，2H)，2.52-2.47(m，2H)，2.42-2.32(m，2H)。
中間體17 用5-甲基四唑按照中間體10的方法制備。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ5.08-5.00(m，1H)，3.61-3.57(m，2H)，3.33-3.28(m，2H)，2.52-2.47(m，2H)，2.42-2.32(m，2H)，1.68(s，3H)。
中間體18
步驟A 將羥基胺鹽酸鹽(8.26g，119mmol)和三乙胺(16.6mL，119mmol)在50mL DMSO中混合。過濾懸浮液以除去三乙胺鹽酸鹽，濾餅用THF洗滌。將濾液部分濃縮除去THF。然后將市售1-叔丁氧基羰基-4-氰基哌啶(5.0g，24mmol)加入以上DMSO溶液，在75℃攪拌所得反應混合物3h，然后在室溫攪拌過夜。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌。水層再次用乙酸乙酯萃取，合并的有機層用水洗滌四次，用鹽水洗滌一次。用無水硫酸鎂干燥有機層，過濾，然后濃縮得到3.51g產(chǎn)物。
步驟B 將步驟A中間體(1.02g，4.19mmol)的20mL THF溶液用硫羰基二咪唑(897mg，5.03mmol)處理，隨后觀測到氣體釋放和放熱。在室溫攪拌反應混合物1h，然后轉移到硅膠#60(20g)的180mL 5∶1CHCl3/甲醇懸浮液中。在室溫攪拌反應混合物5天，然后過濾，濃縮。MPLC提純(二氧化硅，50％乙酸乙酯/己烷)獲得143mg噻二唑酮。
Boc中間體1H NMR(500MHz，CD3OD)δ4.16(m，2H)，2.86(t，J＝11.5Hz，2H)，2.77(tt，J＝4.0，11.0Hz，1H)，1.98(dd，J＝2.0，13.0Hz，2H)，1.73(dq，J＝4.5，12.0Hz，2H)，1.47(s，9H)。
將Boc中間體(139mg，0.487mmol)溶于4N HCl/二噁烷(5mL)，在室溫攪拌1.5h。濃縮反應混合物得到94.3mg哌啶鹽酸鹽產(chǎn)物。
中間體194-(1H-吡唑-3-基)哌啶 步驟A4-(1H-吡唑-3-基)吡啶4-乙?；拎?75mL，0.68mol)和甲酸乙酯(109mL)的無水苯(1L)混合物中加入甲醇鈉(73g)，將所得混合物回流18h。冷卻混合物，從粘性固體(在反應中形成)傾析出苯。將粗產(chǎn)物溶于水(700mL)，加入肼二鹽酸鹽，在室溫攪拌所得混合物2h。加入5N NaOH溶解混合物。過濾移出沉淀，干燥得到4-(1H-吡唑-3-基)吡啶(35g)。
步驟B1-芐基-4-(1H-吡唑-3-基)-1，2，3，6-四氫吡啶4-(1H-吡唑-3-基)吡啶(9.6g)的2-丙醇(60mL)熱(80℃)溶液中加入芐基溴(20mL，2.5eq.)，回流加熱所得混合物10min。在冰浴中冷卻后，過濾沉淀，再用2-丙醇洗滌，風干。在0℃將固體懸浮于乙醇，在30min內(nèi)分幾批加入硼氫化鈉(13g)，再次攪拌混合物30min。小心加入水猝滅反應物，蒸發(fā)除去乙醇，殘余物在二氯甲烷和水間分配。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，然后蒸發(fā)得到1-芐基-4-(1H-吡唑-3-基)-1，2，3，6-四氫吡啶(16g)。
步驟C4-(1H-吡唑-3-基)哌啶將1-芐基-4-(1H-吡唑-3-基)-1，2，3，6-四氫吡啶溶液(16g)用鈀碳(10％，1g)在40psi下氫化過夜。通過硅藻土過濾除去催化劑，蒸發(fā)濾液。NMR證實產(chǎn)物為1-芐基-4-(1H-吡唑-3-基)-哌啶(16g)。
1-芐基-4-(1H-吡唑-3-基)-哌啶(16g)和甲酸(30mL)的乙醇(400mL)溶液中加入鈀碳(10％，2g)，在室溫攪拌所得混合物過夜。過濾除去催化劑，蒸發(fā)濾液。通過加入二碳酸二叔丁酯(2eq.)和三乙胺(1.5eq.)的二氯甲烷溶液提純產(chǎn)物，得到Boc保護的中間體。蒸發(fā)后通過二氧化硅柱色譜法提純(用20-40％乙酸乙酯/己烷洗脫)，得到純凈4-(1H-吡唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。然后將Boc中間體用HCl的甲醇溶液處理，得到4-(1H-吡唑-3-基)哌啶鹽酸鹽(3.5g)。因為形成二-Boc產(chǎn)物而損失原料，沒有收集二-Boc產(chǎn)物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(s，2H)，3.48(br.d，J＝13Hz，2H)，3.28-3.20(m，1H)，3.13(br.t，J＝13Hz，2H)，2.23(br.d，J＝14Hz，2H)，1.97-1.85(m，2H)。
中間體20 步驟A 向4-溴苯乙胺氫溴酸鹽(25g，89mmol)、吡啶(36mL，445mmol)和CH2Cl2(100mL)的冷(0℃)混合物滴加三氟醋酸酐(18.8mL，133mmol)。在加入完畢后，在室溫攪拌混合物48h，然后傾在冰(500g)上。混合物用CH2Cl2(4×100mL)萃取，合并的二氯甲烷層用1N HCl(4×100mL)、飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾后真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(26.13g，100％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝2.86(2H，t，J＝7.1Hz)，3.59(2H，q，J＝6.6Hz)，6.57(1H，br s)，7.09(2H，d，J＝8.5Hz)，7.43(2H，d，J＝8.5Hz)。
步驟B 步驟A產(chǎn)物(26g，88mmol)和多聚甲醛(5.6g，130mmol)的混合物中一次性加入濃硫酸(130mL)和冰醋酸(195mL)的混合物，在室溫攪拌所得混合物17h。將反應混合物傾在冰/水(1.5L)上，用乙酸乙酯(3×300mL)萃取，合并的乙酸乙酯層用水(2×600mL)、飽和NaHCO3(300mL)和飽和NaCl(150mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾后真空蒸發(fā)。將殘余物溶于乙醇(450mL)，加入碳酸鉀(60g，434mmol)的水(150ml)溶液。將混合物加熱至回流1h，冷卻，然后真空蒸發(fā)。將水(500mL)加入殘余物，用CH2Cl2(3×300mL)萃取；合并的二氯甲烷層用水(500mL)、飽和氯化鈉(150mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮。殘余物用二氧化硅柱色譜法提純(用含0.5％NH4OH的5％CH3OH/CH2Cl2洗脫)得到產(chǎn)物(10g，54％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝1.77(1H，br s)，2.77(2H，d，J＝6.0Hz)，3.11(2H，t，J＝6.0Hz)，3.97(2H，s)，6.95(1H，d，J＝8.0Hz)，7.15(1H，s)7.23(1H，dd，J＝1.2和8.2Hz)。
中間體21 順式外消旋物步驟A 在氮氣氛下，3-環(huán)戊烯-1-甲酸(Org.Synth.75，p195-200，1998)(31.5g，281mmol)的無水N，N-二甲基甲酰胺(300mL)溶液中加入碳酸鉀(97g，710mmol)和碘甲烷(35mL，560mmol)。在室溫攪拌所得混合物16h，然后傾入水(1L)中，用乙醚(3×400mL)萃取。合并的乙醚層用水(3×500mL)、飽和NaCl(200mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，得到34g(96％)。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ5.64(s，2H)，3.68(s，3H)，3.11(五重峰，J＝8.5Hz，1H)，2.63(d，J＝8.3Hz，4H)。
步驟B 在氮氣氛下，向二異丙基胺(34.4mL，250mmol)的無水四氫呋喃(250mL)冷(-78℃)溶液中緩慢加入正丁基鋰(100mL 2.5M的己烷溶液，250mmol)，在-78℃攪拌所得混合物10min。此混合物中加入3-環(huán)戊烯甲酸甲酯(25.8g，200mmol)，再攪拌15min后，加入2-碘丙烷(41mL，410mmol)，在-78℃攪拌混合物30min，然后讓其升至+4℃，在該溫度靜置72h。將反應混合物傾入5％檸檬酸(700mL)中，用乙醚(3×300mL)萃取。合并的乙醚層用水(2×500mL)、飽和NaCl(1×100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。殘余物通過真空蒸餾(50℃；5mmHg)提純獲得28.9g(86％)產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ5.54(s，2H)，3.67(s，3H)，2.85(d，J＝15.1Hz，2H)，2.30(dd，J 14.9Hz，2H)，2.07(t，J＝6.6Hz，1H)，0.82(d，J＝6.6Hz，6H)。
步驟C 在氮氣氛下，用雙頭針向硼烷-甲硫醚(20mL，200mmol)的無水四氫呋喃(100mL)冷(0℃)溶液加入步驟B制備的環(huán)戊烯酯(28.9g，172mmol)溶液。在加入完畢后，在室溫攪拌反應混合物20h。在冰浴中冷卻混合物，滴加氫氧化鈉(60mL 3N溶液，181mmol)，然后加入30％過氧化氫(65mL)，在40℃攪拌所得混合物1h。將混合物傾入水(600mL)中，用乙醚(3×200mL)萃取，合并的乙醚層用水(3×500mL)、飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。殘余物用二氧化硅柱色譜法提純(用20％EtOAc/己烷洗脫)得到18.5g(58％)產(chǎn)物。
步驟D 在氮氣氛下，向乙二酰氯(55mL，110mmol)的無水二氯甲烷(300mL)(-78℃)溶液滴加二甲亞砜(15.5mL，219mmol)，在-78℃攪拌所得混合物10min。用雙頭針向此混合物加入步驟C產(chǎn)物(18.5g，100mmol)的無水二氯甲烷(100mL)溶液。在-78℃攪拌反應混合物15min，然后加入三乙胺(69mL，500mmol)，讓所得混合物在2h內(nèi)升至室溫。反應混合物用水(500mL)、飽和NaCl(150mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮，得到18g產(chǎn)物，產(chǎn)物直接用于下一步無需再提純。
步驟E 在氮氣氛下，步驟D制備的環(huán)戊酮(18g，98mmol)的無水1，2-二氯乙烷(500mL)溶液中加入4-(4-氟苯基)哌啶鹽酸鹽(25g，120mmol)、二異丙基乙胺(20.4mL，116mmol)、三乙酰氧基硼氫化鈉(112g，531mmol)和4分子篩(粉末狀10g)。在室溫攪拌混合物48h，然后用二氯甲烷(500mL)稀釋，通過硅藻土過濾。濾液用飽和碳酸氫鈉溶液(500mL)、水(500mL)、飽和NaCl(200mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮得到28g(82％)產(chǎn)物。產(chǎn)物直接用于下一步無需再提純。
步驟F1-異丙基-3-(4-(4-氟苯基)哌啶-1-基)環(huán)戊烷甲酸 步驟E制備的環(huán)戊烷甲酯(28g，81mmol)的乙醇(500mL)溶液中加入氫氧化鉀(30g，540mmol)的水(100mL)溶液，回流加熱所得混合物18h。真空濃縮冷卻的混合物以除去乙醇，將水(200mL)加入殘余物?；旌衔镉靡颐?3×200mL)萃取，加入濃鹽酸中和水層?；旌衔镉?/1氯仿/2-丙醇(3×150mL)的混合物萃取，合并的有機萃取液用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮。殘余物中加入丙酮(70mL)，將混合物短暫加熱至回流，然后在+5℃靜置16h。將丙酮從白色固體傾析除去，干燥余下的固體，得到11.5g(43％)產(chǎn)物，它是順式和反式異構體的混合物(10∶1)。
ESI-MS C20H28FNO2的計算值333；實測值334(M+H)。
中間體22 將2，5-二甲基-3-吡咯啉(3.128g，32.19mmol)溶于三乙胺(8.97mL，64.4mmol)，冷卻至0℃。滴加芐氧甲酰氯(10.11mL，70.83mmol)的最小量的二氯甲烷溶液。緩慢加熱反應混合物至室溫，攪拌48h。反應物用飽和碳酸氫鈉溶液(150mL)猝滅，然后將有機層用飽和碳酸氫鈉溶液(2×100mL)和鹽水(1×100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。通過硅膠快速柱色譜法提純(用5％EtOAc/己烷至10％EtOAc/己烷的梯度溶劑系統(tǒng))，以52％收率獲得中間體1(3.844g)。ESI-MSC14H17NO2計算值231.29，實測值232(M+H)。
中間體23 方法A步驟A 將(1S)-(+)-2-氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(10.3g，94.4mmol)、乙酸乙酯(200mL)和10％Pd/C(0.5g)的混合物在室溫氫化。在24h后，過濾反應混合物，蒸發(fā)剩下10.4g(100％)產(chǎn)物，將其溶于250mL甲醇和HCl(12M，6mL)。在室溫攪拌所得混合物，直到反應完成(72h)。蒸發(fā)甲醇，然后高真空干燥，獲得乳白色固體標題化合物(16.0g，96％)。1H NMR(500MHz，D2O)δ3.70(s，3H)，3.01(m，1H)，2.38(m，1H)，2.16-1.73(m，6H)。
步驟B 在室溫向步驟A中間體(10.2g，56.8mmol)的無水二氯甲烷(200mL)懸浮液加入二苯基甲亞胺(10.2g，56.8mmol)，攪拌所得混合物24h。過濾反應混合物，蒸發(fā)濾液剩下黃色油狀物，用乙醚(100mL)研磨，過濾后蒸發(fā)。將此操作重復兩次以確保產(chǎn)物沒有氯化銨雜質。將所得油狀物充分真空干燥獲得標題化合物(18.03g，＞100％)，不需要再提純。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.5-7.18(m，10H)，3.75(m，1H)，3.7(s，3H)，2.78(m，1H)，2.26-1.71(m，6H)。
步驟C 二異丙基氨基鋰溶液(在-78℃，用二異丙基胺(7.7g，76mmol)和正丁基鋰(30.4mL，2.5M的己烷溶液，76mmol)在四氫呋喃(120mL)溶液中制備)中加入步驟B的酯(18.0g，58.6mmol)。攪拌所得暗紅色溶液20min，然后用2-碘丙烷(14.9g，88.0mmol)猝滅。將反應混合物在3h內(nèi)逐步加熱至0℃，在此溫度再保持3h。反應物用水猝滅，用乙酸乙酯萃取。有機層用水、鹽水洗滌，干燥(無水硫酸鎂)，濃縮獲得油狀物。粗制Schiff堿(20.0g)的四氫呋喃(100mL)溶液中加入HCl(5.0mL，12M)。在室溫攪拌所得反應混合物3h。在除去所有揮發(fā)分后，將鹽酸鹽溶于二氯甲烷(250mL)，加入飽和碳酸氫鈉溶液(250mL)和二碳酸二叔丁酯(26.0g，1.4Eq.)。將所得混合物在室溫劇烈攪拌過夜。分離出有機層，用水、鹽水洗滌，干燥(無水硫酸鎂)，濃縮獲得油狀物?？焖僦V法提純(洗脫劑己烷/乙酸乙酯19∶1)得到所需產(chǎn)物(4.91g，30％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)4.79(br，1H)，4.01(m，1H)，3.71(s，3H)，2.18-1.60(m，6H)，1.44(s，9H)，0.87(d，J＝6.9Hz，3H)，0.86(d，J＝6.9Hz，3H)。
步驟D
步驟C的酯(4.91g，17.2mmol)的甲醇(100mL)溶液中加入LiOH(3.6g，85mmol)的水(20mL)和四氫呋喃(10mL)溶液。將所得混合物在80℃加熱直到反應完成(18h)。真空除去甲醇，將粗產(chǎn)物用水/乙酸乙酯(200mL，1∶4)溶解，冷卻至0℃。將混合物酸度調節(jié)至pH 6。分離出乙酸乙酯層，用水、鹽水洗滌，干燥(無水硫酸鎂)，濃縮獲得油狀物?？焖僦V法提純(洗脫劑己烷/乙酸乙酯1∶1+2％AcOH)得到中間體11(3.9g，84％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)11.36(br，1H)，6.49(br，1H)，4.83(m，1H)，3.71(s，3H)，2.30-1.55(m，6H)，1.46(s，9H)，0.94(d，J＝6.9Hz，3H)，0.933(d，J＝6.9Hz，3H)。
方法B步驟A 通過典型方法將市售(1R，4S)-4-氨基環(huán)戊-2-烯-1-甲酸轉化為它的甲酯鹽酸鹽。
步驟B 步驟A的胺(6.31g，35.5mmol)的丙酮(40mL)和水(20mL)懸浮液中分批加入固體NaHCO3(6.6g，78mmol)。在5min后，加入二碳酸二叔丁酯(8.5g，39mmol)的丙酮(60mL)溶液，在室溫攪拌反應混合物。在3h后，真空除去丙酮，殘余物在乙醚(500mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(120mL)間分配。乙醚層進一步用NaHCO3水溶液(1×100mL)、鹽水(1×100mL)洗滌，用無水Na2SO4干燥，濃縮，用快速色譜法提純(15％乙酸乙酯/己烷)獲得產(chǎn)物(7.25g，85％)。
步驟C 在-78℃，向雙(三甲硅烷基)氨基鋰(10.4g，62.1mmol)的四氫呋喃(100mL)溶液在10min內(nèi)加入步驟B的中間體(6.71g，27.8mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液。在-78℃攪拌所得溶液30min，然后一次性加入異丙基碘(3.3mL，33mmol)。讓反應物升至-25℃，在此溫度保持過夜。然后將反應物用飽和氯化銨水溶液(250mL)猝滅。分離出有機層，水層進一步用乙醚(3×100mL)萃取。合并的有機層用鹽水(1×100mL)洗滌，用無水Na2SO4干燥，過濾，濃縮，用快速色譜法提純(5-10％乙酸乙酯/己烷)得到澄清油狀產(chǎn)物(5.66g，72％)(順/反＝4.3/1)。1H NMR(500MHz，CDCl3)順式異構體δ5.79(s，2H)，4.75(m，1H)，3.72(s，3H)，2.28-2.20(m，2H)，2.0(dd，J＝15,4Hz，1H)，1.45(s，9H)，0.85(d，J＝6.6Hz，3H)，0.81(d，J＝7Hz，3H)。
步驟D 步驟C產(chǎn)物(1.6g，5.7mmol)的四氫呋喃(50mL)、甲醇(50mL)和水(10mL)溶液中加入LiOH一水化合物(400mg)，將反應物加熱至回流過夜，直到TLC顯示完全反應為止。真空除去有機溶劑，水層用乙醚(1x)洗滌，然后用濃HCl緩慢酸化直到pH達到4。所得懸浮液用CH2Cl2(3x)萃取。用無水硫酸鎂干燥合并的有機層，過濾，濃縮得到黃色泡沫狀固體產(chǎn)物(兩種順/反異構體的混合物)(1.5g)。在加熱下將此固體溶于乙酸乙酯(2mL)，用己烷(50mL)稀釋得到澄清溶液。讓此溶液緩慢冷卻至室溫1h，然后在冰箱維持-25℃過夜。反式異構體與部分所需順式異構體一起結晶(總共500mg)。收集母液，濃縮得到標題化合物(1g，66％，僅有順式異構體)。1H NMR(500MHz，CDCl3)順式異構體δ5.80(m，2H)，4.80(m，1H)，2.40-2.20(m，2H)，2.15-2.0(m，1H)，1.5(m，9H)，1.0-0.8(m，3H)。
步驟E 步驟D產(chǎn)物(1g)的乙醇(30mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)，所得混合物用Parr裝置在50 lb氫壓力下攪拌過夜?；旌衔锿ㄟ^硅藻土過濾，真空濃縮獲得標題化合物(1g，99％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)11.36(br，1H)，6.49(br，1H)，4.83(m，1H)，3.71(s，3H)，2.30-1.55(m，6H)，1.46(s，9H)，0.94(d，J＝6.9Hz，3H)，0.933(d，J＝6.9Hz，3H)。
中間體24 步驟A 將中間體2(4.6g，16mmol)和中間體23(4.0g，14mmol)首先與甲苯(3×50mL)共沸蒸餾干燥，置于高真空下30min。在氮氣氛下，依次加入4-二甲基氨基吡啶(1.08g，8.60mmol)、無水二氯甲烷(40mL)和二異丙基乙胺(7.0mL，40mmol)。在中間體溶解后，加入溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸鹽(6.80g，14.3mmol)，隨后立即加入二異丙基乙胺(7.0mL，40mmol)。在室溫攪拌反應混合物過夜，然后用飽和NaHCO3猝滅。水層再次用二氯甲烷(3×50mL)洗滌，合并有機層，用硫酸鈉干燥，過濾，真空蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用快速色譜法提純(階段梯度0-60％，乙酸乙酯/己烷)獲得黃色泡沫狀產(chǎn)物(4.80g，74％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.72(s，1H)，7.70(s，1H)，4.88(br d，J＝17.0Hz，1H)，4.78(d，J＝17.6Hz，1H)，4.04-3.84(m，2H)，3.52(br s，1H)，3.12(br t，J＝5.6Hz，1H)，2.32-2.06(m，3H)，1.98-1.70(m，4H)，1.64-1.54(m，1H)，1.44(s，9H)，0.92-0.82(m，6H)。LC-MS C23H32F3N3O3計算值455.24，實測值[M+H]+456.2。
步驟B 將步驟A產(chǎn)物(1.2g，2.6mmol)溶于4M HCl/二噁烷(50mL)，在室溫攪拌所得溶液1h。真空蒸發(fā)反應混合物獲得白色粉末狀產(chǎn)物(904mg，97％)。LC-MS C18H24F3N3O計算值355.20，實測值[M+H]+356.2。
中間體25 步驟A 燒瓶中加入中間體23(1.1g，4.0mmol)、中間體1(0.944g，4.00mmol)、溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸鹽(1.85g，4.00mmol)、DMAP(0.29g，2.4mmol)、DIEA(2.77mL，16mmol)和DCM(20mL)。在氮氣氛下攪拌所得混合物36h。將全部混合物應用到硅膠柱上，用20％EtOAc/己烷洗脫。獲得的所需Boc-酰胺為樹膠狀固體(1.5g，82％)。ESI-MS C24H33F3N2O3的計算值454；實測值455(M+H)。
步驟B 將步驟A的Boc氨基酰胺用10mL 4N HCl/二噁烷處理1h。蒸發(fā)反應混合物，真空干燥產(chǎn)物。獲得黃色固體中間體25(1.2g)。ESI-MSC19H25F3N2O的計算值354；實測值355(M+H)。
中間體26 步驟A 裝有中間體1(10g，50mmol)的燒瓶中加入30mL 70％硝酸。在0℃冷卻混合物，在30min內(nèi)加入30mL濃硫酸。在室溫攪拌所得溶液過夜，傾入冰-水混合物中，在0℃用固體LiOH-H2O調節(jié)至pH＞10。在劇烈攪拌下，加入二碳酸二叔丁酯(21.8g，100mmol)的500mLDCM溶液。攪拌混合物30min，分離出有機層，水層用DCM(2×200mL)萃取。合并的萃取液用水(500mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用快速色譜法提純(硅膠，20％EtOAc/己烷)獲得白色固體標題化合物(17.0g，98％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，7.62(s，1H)，4.72(s，2H)，3.67(t，J＝6.0Hz，2H)，3.13(t，J＝6.0Hz，2H)，1.49(s，9H)。
步驟B 將以上步驟A的中間體(17.0g)溶于100mL 4M HCl/二噁烷，攪拌1h，蒸發(fā)，真空干燥。獲得白色固體中間體26。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.75(s，1H)，8.00(s，1H)，2.58(s，2H)，3.57(t，J＝6.0Hz，2H)，3.42(t，J＝6.0Hz，2H)。
中間體27 步驟A 燒瓶中加入中間體27(1.10g，4.00mmol)、中間體23(1.15g，4.00mmol)、溴-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸鹽(1.85g，4.00mmol)、DMAP(0.29g，2.4mmol)、DIEA(2.7mL，16mmol)和DCM(20mL)。在氮氣氛下攪拌所得混合物36h。將全部混合物應用到硅膠柱上，用20％EtOAc/己烷洗脫獲得樹膠狀固體標題化合物(1.5g，75％)。ESI-MSC24H32F3N3O5計算值499；實測值500(M+H)。
步驟B 將以上步驟的偶合產(chǎn)物(1.5g)用10mL 4N HCl/二噁烷處理1h，蒸發(fā)，高真空干燥獲得黃色固體標題化合物(1.2g)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.20(s，1H)，7.95(寬峰，1H)，4.98(s，2H)，4.00(dd，2H)，3.90(t，2H)，3.68(m，1H)，3.45(m，3H)，3.20(s，2H)，2.15-2.50(m，3H)，1.80-2.10(m，2H)，1.80(m，2H)，0.90(m，6H)。ESI-MS的計算值C19H24F3N3O3399；實測值400(M+H)。
中間體28 步驟A 向N-三氟乙?；?7-三氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉(中間體1步驟B，6.0g，20mmol)、NIS(6.9g，30mmol)和TFA(15mL)的攪拌混合物滴加濃硫酸(1.5mL)。形成大量固體。在室溫攪拌混合物過夜，傾入冰-水混合物中，用乙酸乙酯(3x)萃取。合并的有機相用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物用硅膠提純(用10％EtOAc/己烷洗脫)。合并的部分用飽和NaHSO3洗滌，用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，真空干燥獲得白色固體標題化合物(5.0g)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(d，J＝2.5Hz，1H)，7.42(d，j＝3.0Hz，1H)，4.85，4.79(ss，2H)，3.95，3.90(tt，J＝1.5，1.5Hz，2H)，2.97(m，2H)。ESI-MSC12H8F6INO計算值423；實測值424(M+H)。
步驟B 碘化合物(步驟A，4.2g，10mmol)、氰化鋅(2.3g，20mmol)、四-三苯基膦(phosphene)鈀(0)絡合物(0.4g)和50mL DMF的混合物用氮氣凈化幾次，然后在85℃、氮氣氛下加熱過夜。LC-MS證實完全轉化。過濾除去不溶性物質。將濾液用水稀釋，用乙酸乙酯(3x)萃取。合并乙酸乙酯層，通過硅藻土過濾，然后用水洗滌，用硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。殘余物用硅膠提純(用10％EtOAc/Hex洗脫)獲得白色固體標題化合物(2.5g)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(d，J＝2.1Hz，1H)，7.65(d，J＝2.6Hz，1H)，4.91，4.86(ss，2H)，4.00(m，2H)，3.25(m，2H)。ESI-MS C13H8F6N2O的計算值323；實測值323(M+H)。
步驟C 將步驟B的酰胺中間體(500mg，1.55mmol)、碳酸鉀(1.5g)、乙醇(20mL)和水(0.5mL)的混合物在80℃加熱直到TLC證實完全裂解。蒸發(fā)溶劑，用水稀釋，用DCM(3x)萃取，用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，然后真空干燥。獲得白色固體標題產(chǎn)物(0.41g)。ESI-MS C11H9F3N2計算值226；實測值227(M+H)。
步驟D 將以上步驟C的氰基中間體(1.9g，8.5mmol)與50mL濃HCl水溶液回流48h。LC-MS證實完全水解。冷卻混合物至室溫，過濾收集所得沉淀，用濃aq.HCl洗滌。在高真空干燥后獲得所需產(chǎn)物的鹽酸鹽(1.75g，73％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.80(s，1H)，4.51(s，2H)，3.55(m，4H)。LC-MS C11H10F3NO2計算值245，實測值[M+H]+246。
步驟E 以上步驟D的氨基酸鹽酸鹽(1.75g，6.25mmol)的50mL甲醇懸浮液中緩慢加入乙酰氯純?nèi)芤?5mL)。將所得混合物回流直到LC-MS證實完全酯化(～3h)，然后蒸發(fā)溶劑，高真空干燥獲得白色固體標題化合物(1.85g，100％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)8.19(s，1H)，7.82(s，1H)，4.50(s，2H)，3.94(s，3H)，3.53(s，4H)。
LC-MS C12H12F3NO2計算值259，實測值[M+H]+260。
中間體29
方法A步驟A 將H2SO4(conc.，15.3g，8.30mL，156mmol)滴加到硫酸鎂(75g，620mmol)的DCM(650mL)劇烈攪拌懸浮液。攪拌混合物0.5h，然后加入已知的環(huán)戊酮-3-甲酸酯(20.0g，156mmol)，接著加入叔丁醇(58g，780mmol)。將反應容器緊密地密封，在室溫攪拌混合物過夜。第二天早晨再加入30mL叔丁醇。再次將反應容器緊密地密封，攪拌反應混合物過周末。反應混合物通過硅藻土過濾。濾液用2N NaOH洗滌。水層再次用DCM洗滌。合并有機層，依次用水、鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后濃縮獲得19.9g(69％)3-氧代環(huán)戊烷甲酸叔丁酯。反應進程通過TLC監(jiān)測，采用50％乙酸乙酯/己烷，用茴香醛染劑染色(SM和產(chǎn)物染上紫色)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)3.02(p，J＝7.8Hz，1H)，2.05-2.50(m，6H)，1.45(s，9H)。13C NMR(125MHz，CDCl3)217.00，173.47，80.99，41.88，41.14，27.94，26.57。
步驟B 3-氧代環(huán)戊烷甲酸叔丁酯(19.8g，107mmol)的1∶1DCM/甲醇(150mL)溶液中依次加入原甲酸三甲酯(46.8mL，428mmol)、TsOH·H2O(～0.5g)。在室溫攪拌反應混合物2h。然后再加入TsOH·H2O(～0.25g)，攪拌反應混合物過夜。在室溫濃縮反應混合物，將所得殘余物溶于乙醚，依次用飽和碳酸氫鈉溶液、鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥乙醚層，過濾，然后濃縮。用快速色譜法提純(二氧化硅，15％乙酸乙酯/己烷)得到22.2g(90％)3，3-二甲氧基環(huán)戊烷甲酸叔丁酯。1H NMR(500MHz，CDCl3)3.21(s，3H)，3.20(s，3H)，2.80(m，1H)，2.10-1.80(bm，6H)，1.46(s，9H)。13C NMR(125MHz，CDCl3)174.9，111.2，80.3，67.8，49.2，42.5，37.4，33.8，28.3，22.0。
步驟C 在10min內(nèi)，向LDA(1.5M的環(huán)己烷溶液，41mL，61mmol)的THF(150mL)冷(-78℃)溶液滴加3，3-二甲氧基環(huán)戊烷甲酸叔丁酯(9.37g，40.7mmol)的25mL THF溶液。在-78℃攪拌所得混合物30min，然后滴加2-碘丙烷(16.3mL，163mmol)。在攪拌10min后，讓反應混合物升至室溫。在攪拌過夜后，將反應混合物用乙醚稀釋，用鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥乙醚層，過濾，然后濃縮。在真空儲存粗產(chǎn)物過夜，用MPLC提純(二氧化硅，20％乙酸乙酯/己烷)得到8.32g 1-異丙基-3，3-二甲氧基環(huán)戊烷甲酸叔丁酯(75％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.21(s，3H)，3.18(s，3H)，2.56(appd，J＝14Hz，1H)，2.26(m，1H)，1.78-1.89(m，3步驟D 將1-異丙基-3，3-二甲氧基環(huán)戊烷甲酸叔丁酯(8.32g，30.5mmol)溶于4N無水HCl/二噁烷(50mL)，加入水(10mL)。在室溫攪拌反應混合物過夜，然后濃縮。將殘余物溶于DCM，用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后濃縮得到5.44g 1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸(直接使用無需提純)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.70(d，J＝18.1Hz，1H)，2.44-2.39(m，1H)，2.30-2.15(m，2H)，2.14(dd，J＝18.1，1.0Hz，1H)，2.06(p，J＝6.9Hz，1H)，1.98(m，1H)，0.98(dd，J＝11.4，6.9Hz，6H)。
步驟E 將1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸(5.44g，32.0mmol)的DCM(75mL)冷(0℃)溶液依次用乙二酰氯(8.36mL，95.9mmol)、3滴DMF處理。讓反應混合物升至室溫，攪拌1.75h。然后濃縮反應混合物，真空儲存30min。將所得酰氯溶于DCM(75mL)，冷卻至0℃，依次用芐基醇(8.28mL，80.0mmol)、三乙胺(8.92mL，64.0mmol，滴加)處理。然后加入約100mg DMAP，加熱反應混合物至室溫，攪拌2h。反應混合物用DCM稀釋，用1N HCl溶液、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機層，過濾，然后濃縮。MPLC提純(二氧化硅，50％乙酸乙酯/己烷)得到6.11g(73％)1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸芐基酯。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ7.36(m，5H)，5.17(d，J＝2.5Hz，2H)，2.85(d，J＝18.5Hz，1H)，2.48(m，1H)，2.29(dd，J＝10.0，3.0Hz，1H)，1.98-2.23(m，3H)，1.93(m，1H)，0.95(m，6H)。通過手性HPLC拆分外消旋產(chǎn)物用chiralcel OD柱，用15％2-丙醇/己烷洗脫(100mg/注射；用編程的Gilson HPLC系統(tǒng)完成)。獲得2.11g所需較快洗脫的異構體(1S)-1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸芐基酯。
步驟F 將(1S)-1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸芐基酯(1.27g，4.88mmol)與Pd/C(10％Degussa，500mg)在20mL甲醇中混合，在氫氣氛下(氣罐)攪拌2h。反應僅進行了一部分(～30％轉化)，因此過濾反應混合物，另外加入Pd/C(500mg)，在氫氣氛下攪拌混合物5h。由于反應現(xiàn)已接近完成，通過硅藻土過濾反應混合物，濃縮獲得704mg(1S)-1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸，無需進一步提純。注意因為在手性分離后獲得的酯肯定因雜質而中毒，所以使用了大量催化劑。這是該特定樣品的特殊情況。通常催化劑的用量少很多。1H NMR與以上外消旋酸一致(步驟D)。
方法B (1S，3R)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-異丙基環(huán)戊烷甲酸(7.46g，27.5mmol)的二噁烷(10mL)溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(30mL)。在室溫攪拌反應混合物2h，然后真空濃縮得到相應的氨基酸鹽白色固體。然后將此固體溶于CH2Cl2(100mL)，加入固體NaHCO3(7.0g，82.5mmol)。在冷卻至0℃后，將NBS(20.0g，110mmol)的CH2Cl2(200mL)溶液在4h內(nèi)緩慢加入反應物。在加入后，將反應物真空濃縮至干，然后溶于乙醇(100mL)。乙醇溶液中加入NaOMe(4.45g，82.5mmol)，將反應物加熱至回流。回流1h后，將反應物冷卻至0℃，加入2N硫酸水溶液(50mL)。在室溫攪拌混合物1h，然后真空濃縮至約60mL。剩下的混合物在水(150mL)和乙酸乙酯(100mL)間分配。水層進一步用乙酸乙酯萃取兩次。合并有機層，用無水硫酸鎂干燥，濃縮，用快速色譜法提純(二氧化硅，乙酸乙酯/己烷)得到(1S)-1-異丙基-3-氧代環(huán)戊烷甲酸(3.00g，64％)。
中間體30 反式外消旋物步驟A 4-[3-(乙氧基羰基)苯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(48g，220mmol)的氯仿(900mL)攪拌溶液中加入氧化釕(IV)水合物(6.0g，45mmol)，然后加入高碘酸鈉(150g，700mmol)的水(900mL)溶液。在室溫攪拌所得不均勻反應混合物11天，然后通過硅藻土短柱過濾。將有機層移出，水層用DCM萃取兩次。合并的有機層用10％硫代硫酸鈉的水溶液洗滌兩次，用鹽水洗滌一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮。產(chǎn)物用快速色譜法提純(硅膠，20％EA/己烷)得到22.5g(64.8mmol)4-[3-(乙氧基羰基)苯基]-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(29％)。
ESI-MS C19H25NO5計算值347.17；實測值370.1(M+Na)步驟B 將雙(三甲硅烷基)氨基鉀(14g，71mmol)與300mL THF在1000mL火焰干燥的圓底燒瓶中混合，將所得混合物冷卻至-78℃。將溶于150mL THF的4-[3-(乙氧基羰基)苯基]-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(22.5g，64.8mmol)通過加液漏斗緩慢加入混合物，在-78℃攪拌所得反應混合物30min。然后滴加甲基碘(12.1mL，195mmol)，將反應混合物在-78℃攪拌4h，然后將其加熱至室溫過夜。用飽和氯化銨猝滅反應物，用乙醚萃取3次。合并的乙醚層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，然后減壓濃縮。產(chǎn)物用快速色譜法提純(10-20％EA/己烷)得到6.1g反式外消旋物4-[3-(乙氧基羰基)苯基]-3-甲基-2-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(26％)。
ESI-MS C20H27NO5計算值361.19；實測值384.25(M+Na)。
步驟C 將步驟B的產(chǎn)物(6.1g，17mmol)溶于4.0M HCl/二噁烷，在室溫攪拌2h，然后減壓濃縮得到所需橙色固體產(chǎn)物，在下一步中直接使用無需再提純。
ESI-MS C15H19NO3計算值261.14；實測值262.1(M+H)。
步驟D 反式外消旋物將以上步驟的產(chǎn)物(全部數(shù)量～17mmol)溶于THF(100mL)，滴加2.0M甲硼烷-甲硫醚的THF溶液(31mL，62mmol)。在室溫攪拌所得溶液4h，然后在4℃儲存72h。減壓除去溶劑，將所得殘余物溶于0.5M HCl(水溶液～38％)的乙醇溶液。將溶液加熱至50℃，攪拌4h。除去溶劑，重復以上操作以確保硼烷絡合物分解。除去溶劑，產(chǎn)物用MPLC提純(0-15％(10％NH4OH/MeOH)/DCM)得到所需產(chǎn)物，純度為80％。將粗產(chǎn)物溶于DCM(100mL)，用二碳酸二叔丁酯(2.95g，13.5mmol)、二異丙基乙胺(2.30mL，13.5mmol)和DMAP(10mg)處理。在室溫攪拌所得反應混合物過夜，然后用DCM稀釋，用1N飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，減壓濃縮。中間體用MPLC提純(0-40％EA/己烷)。將所得無色油狀物溶于4.0M HCl/二噁烷，在室溫攪拌所得反應混合物1.5h。濃縮反應混合物至干得到2.13g(7.52mmol)所需鹽酸鹽。
ESI-MS C15H21NO2計算值247.16；實測值248.15(M+H)
實施例1 中間體3(150mg，0.425mmol)、4-乙氧甲?；哙?125mg，0.425mmol)和DCM(25mL)的溶液中加入分子篩(4)和NaBH(OAc)3(450mg，2.12mmol)。在室溫攪拌反應混合物18h，然后通過硅藻土過濾，用飽和NaHCO3稀釋，用DCM(3x)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機層，用制備型TLC(3/96.7/0.3，MeOH/DCM/NH4OH)提純獲得實施例1(220mg，97.8％)。LC-MS C27H38F3N2O3[M+H+]計算值495.28，實測值495.25。
許多化合物用不同的胺按照實施例1的方法制備。在下表中總結這些化合物。
表1(實施例2-6)
實施例7 將實施例1產(chǎn)物(185mg，0.349mmol)、5N NaOH(200μL，1.04mmol)和MeOH(5mL)的混合物在60℃加熱3h，然后加入4N HCl/二噁烷溶液中和堿。濃縮反應物溶液，用反相HPLC提純獲得實施例7(115mg，65.7％)。LC-MS C25H34F3N2O3[M+H+]計算值467.24，實測值467.35。
實施例8-12用實施例2-6作為初始原料按照實施例7的方法制備。在下表中總結這些化合物。
表2(實施例8-12)
實施例13
中間體4(50mg，0.14mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入1-乙氧基羰基哌嗪(23mg，0.14mmol)。在加入粉末狀4分子篩(25mg)后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(180mg，0.84mmol)，攪拌反應混合物過夜?；旌衔镉枚燃淄橄♂專蔑柡吞妓釟溻c水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮。粗產(chǎn)物用制備型TLC(7/92.3/.7，甲醇/二氯甲烷/氫氧化銨)提純獲得實施例13，為4種非對映異構體的混合物(55mg，79％)。LC-MSMW計算值496.27，實測值497.3。
許多化合物按照實施例13的方法制備，其中用不同的哌嗪替代1-乙氧基羰基哌嗪。這些化合物(全部制備為4種非對映異構體的混合物)在下表中總結。
表3(實施例14-16)
實施例17 中間體4(50mg，0.14mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入4-苯甲?；哙}酸鹽(32mg，0.14mmol)和N，N-二異丙基乙胺(73μL，0.42mmol)。在加入4粉末狀分子篩(25mg)后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(180mg，0.84mmol)，攪拌反應混合物過夜?；旌衔镉枚燃淄檩腿。锰妓釟溻c洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮。粗產(chǎn)物用制備型TLC(7/92.3/.7，甲醇/二氯甲烷/氫氧化銨)提純獲得實施例17(30mg，43％)，為4種非對映異構體的混合物。
ESI-MS計算值MW527.28，實測值528.25。
實施例18 將中間體4(176mg，0.5mmol)、螺接哌啶(為HCl鹽，115mg，0.6mmol)、DIEA(100mg，0.8mmol)、分子篩(4，200mg)、三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，1.0mmol)和二氯甲烷(10mL)的混合物攪拌過夜。用飽和碳酸鈉水溶液猝滅反應物。通過硅藻土過濾除去固體。粗產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中，用制備型TLC(1000微米，10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM)提純。獲得為順式和反式外消旋異構體混合物的標題化合物(155mg，63％)。LC-MS C26H35F3N4O2計算值492；實測值493(M+H)。
C.ZHOU實施例19 中間體5(50mg，0.14mmol)和哌啶(28μL，0.28mmol)的DCM(10mL)攪拌溶液中加入4粉末狀分子篩(50mg)和三乙酰氧基硼氫化鈉(150mg，0.71mmol)。在室溫攪拌所得溶液3天，然后通過硅藻土過濾，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，然后減壓濃縮得到粗制的油狀物，用制備型TLC(0.5％NH4OH/4.5％MeOH/95％DCM)提純得到16mg無色固體，為2種非對映異構體的混合物。向小部分游離堿加入2N HCl的乙醚溶液，轉化為它的鹽酸鹽。
ESI-MS C23H32F3N3O計算值423.25；實測值424(M+H)。
幾個其它實施例根據(jù)實施例19介紹的方法制備，但是用不同取代的哌啶作為胺組分替代哌啶。表4列出了這些實施例。
表4(實施例20-28)
實施例29和實施例30 將實施例22制備的游離堿產(chǎn)物(55mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用25％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽?；厥?7mg較快洗脫的非對映異構體(實施例29)和20mg較慢洗脫的非對映異構體(實施例30)。
實施例29ESI-MS C26H36F3N3O3的計算值495.27；實測值496(M+H)。
實施例30ESI-MS C26H36F3N3O3的計算值495.27；實測值496(M+H)。
實施例31 將實施例29(10mg，0.018mmol)溶于甲醇(1mL)和THF(1mL)的混合物，用氫氧化鋰一水化合物(5mg，0.12mmol)的水(1mL)溶液處理。在室溫攪拌所得溶液18h，然后減壓濃縮。產(chǎn)物用反相HPLC(C18，20-100％MeCN/H2O)提純，通過加入2N HCl的乙醚溶液轉化為鹽酸鹽，得到6.8mg產(chǎn)物(70％)。
ESI-MS C24H32F3N3O3的計算值467.24；實測值468(M+H)。
實施例32 將實施例30(10mg，0.018mmol)溶于甲醇(1mL)和THF(1mL)的混合物，用氫氧化鋰一水化合物(5mg，0.12mmol)的水(1mL)溶液處理。在室溫攪拌所得溶液18h，然后減壓濃縮。產(chǎn)物用反相HPLC提純(C18，20-100％MeCN/H2O)，通過加入2N HCl的乙醚溶液轉化為鹽酸鹽，得到3.8mg產(chǎn)物(39％)。
ESI-MS C24H32F3N3O3的計算值467.24；實測值468(M+H)。
實施例33 實施例30(15mg，0.026mmol)的THF(2mL)溶液中加入三乙基硼氫化鋰(1.0M的THF溶液，150μL，0.15mmol)。在室溫18h后，再次加入三乙基硼氫化鋰(100μL)，攪拌所得混合物24h，然后減壓濃縮。將所得殘余物溶于DCM，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、1N HCl水溶液和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機層，過濾，依次用2N HCl/乙醚、己烷處理，減壓濃縮得到1.5mg所需產(chǎn)物的鹽酸鹽(11％)。
ESI-MS C24H34F3N3O2的計算值453.26；實測值454(M+H)。
實施例34和實施例35 將實施例20制備的游離堿產(chǎn)物(60mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用25％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽?；厥?6mg較快洗脫的非對映異構體(實施例34)和17mg較慢洗脫的非對映異構體(實施例35)。
實施例34ESI-MS C25H35F3N4O2的計算值480.27；實測值481(M+H)。
實施例35ESI-MS C25H35F3N4O2的計算值480.27；實測值481(M+H)。
實施例36和實施例37 將實施例22制備的游離堿產(chǎn)物(54mg)拆分為2個含兩種非對映異構體的混合物，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用13％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽。回收33mg較快洗脫的非對映異構體(實施例36)和10mg較慢洗脫的非對映異構體(實施例37)。
實施例36ESI-MS C26H36F3N3O3的計算值495.27；實測值496(M+H)。
實施例37ESI-MS C26H36F3N3O3的計算值495.27；實測值496(M+H)。
實施例38-41 將實施例24制備的游離堿產(chǎn)物(40mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用20％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽。回收15mg較快洗脫的非對映異構體(實施例38)、1.5mg非對映異構體2(實施例39)、7mg非對映異構體3(實施例40)以及6mg最慢洗脫的非對映異構體(實施例41)。
實施例38ESI-MS C24H34F3N3O的計算值437.27；實測值438(M+H)。
實施例39ESI-MS C24H34F3N3O的計算值437.27；實測值438(M+H)。
實施例40ESI-MS C24H34F3N3O的計算值437.27；實測值438(M+H)。
實施例41ESI-MS C24H34F3N3O的計算值437.27；實測值438(M+H)。
實施例42-46 將實施例25制備的游離堿產(chǎn)物(40mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用20％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽。拆分所有6種非對映異構體，但是使重疊流出的峰2和峰6混合在一起，得到4種純非對映異構體和一個含兩種非對映異構體的混合物。
實施例42峰1ESI-MS C25H36F3N3O的計算值451.28；實測值452(M+H)。
實施例43峰2/6ESI-MS C25H36F3N3O的計算值451.28；實測值452(M+H)。
實施例44峰3ESI-MS C25H36F3N3O的計算值451.28；實測值452(M+H)。
實施例45峰4ESI-MS C25H36F3N3O的計算值451.28；實測值452(M+H)。
實施例46峰5ESI-MS C25H36F3N3O的計算值451.28；實測值452(M+H)。
實施例47和實施例48 將實施例27制備的游離堿產(chǎn)物(20mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用25％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽?；厥?mg較快洗脫的非對映異構體(實施例47)和6mg較慢洗脫的非對映異構體(實施例48)。
實施例47ESI-MS C23H32F3N3O2的計算值439.24；實測值440(M+H)。
實施例48ESI-MS C23H32F3N3O2的計算值439.24；實測值440(M+H)。
實施例49 中間體5(50mg，0.14mmol)和嗎啉(25μL，0.28mmol)的DCM(10mL)攪拌溶液中加入4粉末狀分子篩(50mg)和三乙酰氧基硼氫化鈉(150mg，0.71mmol)。在室溫攪拌所得溶液3天，然后通過硅藻土過濾，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，然后減壓濃縮得到粗制油狀物，用制備型TLC(0.5％NH4OH/4.5％MeOH/95％DCM)提純得到57mg無色固體，為2種非對映異構體的混合物。向小部分游離堿加入2N HCl的乙醚溶液，轉化為它的鹽酸鹽。
ESI-MS C22H30F3N3O2的計算值425.23；實測值426(M+H)。
幾個其它實施例根據(jù)實施例49介紹的方法制備，但是用不同的取代嗎啉作為胺組分替代嗎啉。表5列出了實施例。
表5(實施例50-53) 實施例53和實施例54 將實施例50制備的游離堿產(chǎn)物(60mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用20％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽?；厥?6mg較快洗脫的非對映異構體(實施例53)和27mg較慢洗脫的非對映異構體(實施例54)。
實施例53ESI-MS C24H34F3N3O2的計算值453.26；實測值454(M+H)。
實施例54ESI-MS C24H34F3N3O2的計算值453.26；實測值454(M+H)。
實施例55和實施例56 將實施例52制備的游離堿產(chǎn)物(48mg)拆分為它的單獨非對映異構體，采用配置ChiralCel OD柱的HPLC，用25％乙醇/己烷洗脫。通過加入2N HCl的乙醚溶液，將各個化合物轉化為相應的鹽酸鹽?；厥?8mg較快洗脫的非對映異構體(實施例53)和23mg較慢洗脫的非對映異構體(實施例54)。
實施例55ESI-MS C23H30F3N3O2的計算值437.23；實測值438(M+H)。
實施例56ESI-MS C23H30F3N3O2的計算值437.23；實測值438(M+H)。
實施例57 中間體5(50mg，0.14mmol)和吡咯烷(23μL，0.28mmol)的DCM(10mL)攪拌溶液中加入4粉末狀分子篩(50mg)和三乙酰氧基硼氫化鈉(150mg，0.71mmol)。在室溫攪拌所得溶液3天，然后通過硅藻土過濾，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，然后減壓濃縮，得到粗制油狀物，用制備型TLC提純(0.5％NH4OH/4.5％MeOH/95％DCM)得到15mg較快流出的非對映異構體和35.5mg較慢流出的異構體，兩種異構體均為無色固體。向小部分游離堿加入2N HCl的乙醚溶液，轉化為它的鹽酸鹽。
頂部ESI-MS C22H30F3N3O的計算值409.23；實測值410(M+H)。
底部ESI-MS C22H30F3N3O的計算值409.23；實測值410(M+H)。
幾個其它實施例根據(jù)實施例57介紹的方法制備，但是用不同的取代吡咯烷作為胺組分替代吡咯烷。表6列出了實施例。
表6(實施例58-62)
實施例63 將中間體3(55mg，0.15mmol)、(1S，4S)-(-)-2-(4-氟苯基)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷(為HBr鹽，85mg，0.3mmol)、DIEA(65mg，0.5mmol)、分子篩(4，250mg)、三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，1.0mmol)和二氯甲烷(5mL)的混合物攪拌過夜。用飽和碳酸鈉水溶液猝滅反應物。通過硅藻土過濾除去固體。粗產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中，用制備型TLC(1000微米，5％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM)提純。獲得為順式和反式外消旋異構體混合物的標題化合物(75mg，95％)。LC-MSC30H35F4N3O的計算值529；實測值530(M+H)。
實施例64 將中間體3(55mg，0.15mmol)、(1S，4S)-(-)-2-(2-甲基)-2，5-二氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷(為馬來酸鹽，100mg，0.3mmol)、DIEA(65mg，0.5mmol)、分子篩(4，250mg)和三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，1.0mmol)的二氯甲烷(5mL)混合物攪拌過夜。用飽和碳酸鈉水溶液猝滅反應物。通過硅藻土過濾除去固體。粗產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中，用制備型TLC(1000微米，5％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM)提純。獲得為順式和反式外消旋異構體混合物的標題化合物(52mg，66％)。LC-MS C31H38F3N3O的計算值525；實測值526(M+H)。
實施例65 步驟A 將54g(0.29mol)(2-氨基噻唑-4-基)乙酸乙酯和50g(0.276mol)二苯基甲亞胺的純混合物在190℃攪拌5h，然后在室溫冷卻，用100mL二氯甲烷稀釋。將全部混合物轉移到硅膠柱上，用20％EtOAc/己烷洗脫。獲得淺黃色固體標題化合物(70g，69％收率)。1H MR(300MHz，CDCl3)δ1.26(t，3H)，3.74(s，2H)，4.15(q，2H)，6.87(s，1H)，77.25-7.86(m，10H)；質譜(NH3-CI)m/z 351(M+1)。
步驟B 在室溫，向步驟A的35g(0.10Mol)Schiff堿酯、順-1，3-二氯-2-丁烯(13mL，0.11Mol)和500mL DME的混合物中分批加入固體NaH(60％油，10.0g，0.25Mol)。攪拌所得混合物2天，傾入2000mL冰-水中，用1500mL乙醚萃取。乙醚層用水(3×500mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。FC(硅膠，5％EtOAc/己烷)獲得油狀標題化合物(24g，59％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)1.20(t，3H)，2.87(d，2H)，3.19(d，2H)，4.14(q，2H)，5.29(s，2H)，6.71(s，1H)，7.26-7.81(m，10H)。質譜(NH3-CI)m/z 403(M+1)。
步驟C 將24.0g(0.059mol)步驟B的環(huán)戊烯Schiff堿溶于100mL 4NHCl/二噁烷。在1h后，加入1.8mL水。攪拌混合物3h，蒸發(fā)至干。將殘余物溶于100mL CH2Cl2，加入15mL DIEA。將全部混合物傾倒在硅膠柱上，用20％EtOAc/己烷洗脫除去二苯甲酮，然后用40％EtOAc/己烷洗脫得到淺黃色固體標題化合物(12.0g，85％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.19(t，3H)，2.79(d，12H)，3.15(d，2H)，4.13(q，2H)，5.66(s，2H)，5.82(寬峰，2H)，6.19(s，1H)。
步驟D 將12g(50mmol)步驟C的氨基噻唑、28g(130mmol)二碳酸二叔丁酯、0.6g DMAP和250mL DCM的混合物攪拌過夜，然后蒸發(fā)。在硅膠快速色譜法提純(10％EtOAc/己烷)后，獲得黃色油狀標題化合物(21.0g，96％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.18(t，3H)，1.49(d，18H)，2.88(d，2H)，3.18(d，2H)，4.13(q，2H)，5.65(s，2H)，6.83(s，1H)。質譜(NH3-CI)m/z 439(M+1)。
步驟E 在-78℃，向13.1g(30.0mmol)步驟D的酯的50mL無水乙醚溶液滴加BH3.DMS的THF溶液(14mL，24mmol)。撤去冷卻浴，在室溫攪拌混合物3h，用250mL DCM稀釋，加入25g乙酸鈉和55gPCC。攪拌混合物過夜。將全部混合物應用到硅膠柱，依次用10％EtOAc/己烷、30％EtOAc/己烷洗脫。獲得兩種組分。較快洗脫的異構體(黃色油狀物，6.0g)被鑒定為標題化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)1.21(t，3H)，1.50(s，18H)，2.33(t，2H)，2.42-2.70(m，2H)，2.78-3.10(dd，2H)，4.18(q，3H)，6.88(s，1H)。質譜(NH3-CI)m/z 455(M+1)。
步驟F 以上的較慢洗脫的組分被證實為標題化合物(樹膠狀物質，1.80g)。1H NMR(300MHz，CDCl3)(t，3H)，1.46(s，9H)，2.27(3，2H)，2.38-2.62(m，2H)，2.64-3.00(dd，2H)，4.11(q，2H)，6.66(s，1H)。質譜(NH3-CI)m/z 355(M+1)。
步驟G 在室溫，將步驟F的1.40g(4.00mmol)酮酯和0.82g(13mmol)氫氧化鋰一水化合物在20mL MeOH和2mL水溶液中的混合物攪拌過夜。將全部混合物應用到硅膠柱，用10％MeOH/CH2Cl2洗脫。真空蒸發(fā)獲得淺黃色固體。獲得1.30g蓬松固體標題產(chǎn)物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ(t，9H)，2.10-3.20(m，8H)，6.60(s，1H)。
步驟H 將步驟G制備的酮酸(1.0g，3.0mmol)、中間體1(為HCl鹽，0.66g，3.0mmol)、EDC(0.95g，5.0mmol)和二氯甲烷(10mL)的混合物攪拌2天?；旌衔镉枚燃淄橄♂?，用1N aq.HCl洗滌，用硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(1500微米，10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM)，獲得黃色固體標題產(chǎn)物(0.52g，34％)。
LC-MS C25H27F3N2O4S的計算值508；實測值509(M+H)。
步驟I 將步驟H產(chǎn)物(510mg，1.0mmol)與TFA(10mL)混合30min。除去TFA，殘余物用制備型TLC提純(10％[aq.NH4OH/MeOH1/9]/DCM)獲得所需白色固體產(chǎn)物(223mg，55％)。LC-MSC20H19F3N2O2S的計算值408；實測值409(M+H)。
步驟J 將步驟I的產(chǎn)物(210mg，0.50mmol)、嗎啉(440mg，5.0mmol)、分子篩(4，500mg)和三乙酰氧基硼氫化鈉(420mg，2.0mmol)的二氯甲烷(15mL)的混合物攪拌過夜。用飽和碳酸鈉水溶液猝滅反應物。通過硅藻土過濾除去固體。粗產(chǎn)物萃取到二氯甲烷中，用制備型TLC提純(1000微米，10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM)。獲得為順式和反式外消旋異構體混合物的標題化合物(200mg，84％)。LC-MSC24H28F3N3O2S的計算值479；實測值480(M+H)。
實施例66 將中間體3(70mg，0.20mmol)、順-2，6-二甲基嗎啉(23μL，0.20mmol)、分子篩(4μL，200mg)、三乙酰氧基硼氫化鈉(210mg，0.99mmol)和DCM的混合物攪拌5天。反應混合物用DCM稀釋，過濾，用sat.aq.NaHCO3、水和鹽水洗滌。DCM層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘余物用制備型TLC提純(1000微米)(用3％[aq.NH4OH/MeOH1/9]/DCM展開)獲得為游離堿的最終標題化合物。用4N HCl/二噁烷處理生成相應的鹽酸鹽(62.2mg)。ESI-MS C25H35F3N2O2的計算值452.27；實測值453(M+H)。
用HPLC(AD柱，5％EtOH/己烷)將非對映異構體分離為一個含兩種順式非對映異構體的混合物和兩個單一的非對映異構體。
實施例67 實施例68用中間體3和(1S，4S)-(+)-2-氮雜-5-氧雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷鹽酸鹽按照實施例66的方法制備。將順式和反式異構體用制備型TLC拆分(4/95.6/0.4，MeOH/DCM/NH4OH)。頂部斑點ESI-MSC24H31F3N2O2的計算值436.23；實測值437(M+H)。底部斑點ESI-MS C24H31F3N2O2的計算值436.23；實測值437(M+H)。
實施例68 實施例68用哌啶和中間體3按照實施例49的方法制備。ESI-MSC24H33F3N2O的計算值422.25；實測值423(M+H)。
實施例69 將中間體22(563mg，2.43mmol)溶于二氯甲烷，冷卻至-78℃。將臭氧通入溶液中直到出現(xiàn)持續(xù)的藍色。然后使氮氣通過溶液直到藍色消失。將Na2SO4加入以上攪拌溶液。將反應混合物過濾到裝有中間體23的燒瓶。將二氯甲烷(20mL)、三乙胺(136μL，0.974mmol)和NaB(OAc)3H(929mg，4.38mmol)加入反應燒瓶。在室溫、氮氣氛下攪拌反應混合物2h，然后用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液(2×100mL)和鹽水(1×100mL)洗滌。有機層用硫酸鎂干燥，過濾，然后濃縮。將粗產(chǎn)物分為三批，裝載到三個離子交換柱。用40％MeOH/己烷(100mL)沖洗除去雜質。然后將所需產(chǎn)物用30％2N NH3的MeOH溶液從色譜柱洗脫，再用二氯甲烷稀釋。實施例69(131mg，0.223mmol，46％收率)用制備型TLC提純(用32％EtOAc/hex)。然后將非對映異構體通過制備型TLC分離(用45％EtOAc/hex)(頂部異構體20mg，0.034mmol，7％收率；中部異構體45mg，0.076mmol，16％收率；底部異構體54mg，0.092mmol，19％收率)。ESI-MSC32H41F3N4O3計算值586.69，實測值587(M+H)。
幾種其它的哌嗪和高哌嗪根據(jù)實施例69的相同方法制備。表7總結了這些化合物。
表7(實施例70-72)
實施例73 以上化合物用中間體5和4，5，6，7-四氫-1H-吡唑并[4，3-]吡啶按照實施例49的方法制備。ESI-MS C24H30F3N5O的計算值461.24；實測值462(M+H)。
實施例74 以上化合物用中間體5和1，4-二氮雜庚環(huán)-5-酮按照實施例49的方法制備。ESI-MS C23H31F3N4O2的計算值452.24；實測值453(M+H)。
實施例75 以上化合物用中間體5和2，3，4，5-四氫-1，4-苯并吖庚因按照實施例57的方法制備。頂部斑點ESI-MS C27H32F3N3O2的計算值487.24；實測值488(M+H)。底部斑點ESI-MS C27H32F3N3O2的計算值487.24；實測值488(M+H)。
實施例76 將碳載鈀催化劑(頂部6mg，中部18mg，底部20mg)加入分別裝有實施例70三種非對映異構體之一的三個燒瓶(頂部29.6mg，中部89.9mg，底部102.3mg)。將混合物溶于MeOH(3-6mL)，反應容器中反復通入氫氣。在室溫、氫氣氛下攪拌反應物4.5h，然后通過Acrodisc針筒過濾器(用0.45μm PTFE膜)。將化合物76(頂部異構體16.0mg，0.0354mmol，71％收率；中部異構體42.7mg，0.0943mmol，62％收率；底部異構體34.5mg，0.0762mmol，44％收率)用制備型TLC分離(用10％[NH4OH/MeOH(1∶9)]/二氯甲烷溶劑系統(tǒng))。ESI-MS C24H35F3N4O計算值452.56，實測值453(M+H)。
實施例77 將實施例76(TLC的中部立體異構體，11mg，0.024mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，冷卻至0℃。將氯甲酸乙酯(5μL，0.05mmol)、三乙胺(10μL，0.07mmol)和催化量DMAP(1-2mg)加入反應燒瓶。將反應物加熱至室溫，在氮氣氛下攪拌2h。此后，用DCM稀釋反應物，用飽和碳酸氫鈉溶液(1×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，然后濃縮。實施例77(4.2mg，0.0080mmol，33％收率)通過制備型TLC提純(用2％[NH4OH/MeOH(1∶9)]/二氯甲烷溶劑系統(tǒng))。ESI-MS C27H39F3N4O3計算值524.62，實測值525(M+H)。
實施例78 將實施例76(TLC的中部立體異構體，11mg，0.024mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，冷卻至0℃。將醋酸酐(11μL，0.12mmol)、三乙胺(23μL，0.17mmol)和催化量DMAP(1-2mg)加入反應燒瓶。在氮氣氛下，將反應物加熱至室溫，攪拌2.5h。然后將反應物用DCM稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液(1×25mL)和鹽水(1×25mL)洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，然后濃縮。實施例78(5.3mg，0.011mmol，45％收率)通過制備型TLC提純(用2％[NH4OH/MeOH(1∶9)]/二氯甲烷溶劑系統(tǒng))。ESI-MS C26H37F3N4O2計算值494.59，實測值495(M+H)。
實施例79 將二氯甲烷(2-3mL/燒瓶)加入三個分別裝有實施例77的三種非對映異構體的燒瓶(頂部16mg，0.035mmol，中部11mg，0.023mmol，底部14mg，0.031mmol)。將異氰酸甲酯(頂部21μL，0.35mmol，中部14μL，0.23mmol，底部19μL，0.31mmol)加入各個反應容器。將各反應物攪拌3h，濃縮后用制備型TLC(2％[NH4OH/MeOH(1∶9)]/二氯甲烷溶劑系統(tǒng))分離實施例79(頂部異構體12.8mg，0.0251mmol，72％收率；中部異構體10.4mg，0.0204mmol，89％收率；底部異構體11.1mg，0.0218mmol，70％收率)。ESI-MS C26H38F3N5O2計算值509.61，實測值510(M+H)。
實施例80 步驟A 將順-羥基-D-脯氨酸(2.98g，22.7mmol)的甲醇(20mL)溶液用亞硫酰氯(1.78mL，24.4mmol)處理，在室溫攪拌1h。然后將反應混合物加熱至65℃過夜。蒸發(fā)揮發(fā)分得到粗制的甲酯(4.0816g)，將其溶于二氯甲烷(50mL)，加入二異丙基乙胺(9.59mL，55.1mmol)。冷卻反應混合物至0℃，用注射器加入純氯甲酸芐基酯(3.71mL，26.0mmol)。在0℃攪拌30min后，撤去冷卻浴。將反應物傾入檸檬酸水溶液(10％，50mL)中猝滅，將產(chǎn)物萃取到二氯甲烷。合并的有機相再次用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，真空除去溶劑。粗產(chǎn)物用快速色譜法提純(硅膠，乙酸乙酯∶己烷/4∶6)獲得4.0717g(69％)純凈產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.35m(5H)，5.21(d，J＝12.6Hz，2H)，5.10(d，J＝13Hz，1H)，5.06(d，J＝12.35Hz，1H)，4.45(m，2H)，3.80(s，3H)，2.35(m，1H)，2.15(m，1H)。
步驟B 將前一步驟的醇(2.63g，9.42mmol)和二異丙基乙胺(3.28mL，18.8mmol)的二氯甲烷40mL溶液冷卻至-78℃，用注射器加入三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷酯(2.596mL，11.30mmol)。在-78℃攪拌反應混合物2h，傾在50mL飽和碳酸氫鈉溶液上猝滅。分離出有機相，用硫酸鎂干燥，真空除去揮發(fā)分。殘余物(6.0g)進一步用柱色譜法提純(硅膠，乙酸乙酯∶己烷/1∶4)獲得2.8355g(76％)純凈產(chǎn)物。1HNMR(500MHz，CDCl3)7.35m(5H)，5.20(m＝2H)，4.45(m，2H)，3.70(m，4H)，3.45(m，1H)，2.23(m，2H)0.87(bs，9H)，0.05(m，6H)。
步驟C 在0℃，將前一步驟的酯(2.83g，7.19mmol)的THF(10mL)溶液用硼氫化鋰(250mg，11.5mmol)處理，在室溫攪拌反應混合物72h。然后用乙醚稀釋，用水和1M磷酸溶液洗滌。干燥合并的有機萃取液(硫酸鈉)，真空除去溶劑。粗產(chǎn)物進一步用柱色譜法提純(硅膠，乙酸乙酯∶己烷/3∶7)獲得1.5636g(60％)純凈產(chǎn)物。LC MSC19H31NO4Si計算值365.20，實測值366.25[M+H]+。
步驟D 將前一步驟的醇(1.56g，4.27mmol)和二異丙基乙胺(1.49mL，8.53mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液用甲烷磺酰氯(496μL，6.41mmol)在0℃處理。攪拌冷的反應混合物15min，然后在室溫攪拌30min。用二氯甲烷稀釋，用水洗滌，用硫酸鎂干燥。真空除去溶劑，獲得的粗產(chǎn)物立即用于下一步驟。LC MSC20H33NSO6Si計算值443.18，實測值444.25[M+H]+。
步驟E 將前一步驟的TBS-乙醚(1.82g，4.10mmol)的THF(50mL)溶液用四丁基氟化銨(4.51mL，1M THF溶液)處理。在室溫攪拌反應混合物直到LC MS分析顯示完全除去TBS基團(約15min)。然后冷卻反應混合物至0℃，加入氫化鈉(180mg，60％懸浮液，45.1mmol)。在室溫連續(xù)攪拌24h。將反應物傾在水上猝滅，粗產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯。真空除去溶劑，粗產(chǎn)物用快速色譜法提純(二氯甲烷∶乙醚/7∶3)獲得595mg(59％)所需產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CDCl3)7.38(m，5H)，5.30(m，2H)，4.52(m，2H)，3.80(m，2H)，3.40(m，2H)，1.70(m，2H)。
步驟F 將前一步驟的CBZ-胺(590mg，2.53mmol)的乙醇(30mL)溶液在Pd/C(142mg，10％)存在下于氣罐壓力氫化。LC監(jiān)測反應中初始原料的消失和甲苯的消失。濾除催化劑，蒸發(fā)濾液至干，剩下321mg(94％)所需產(chǎn)物。
步驟G 將中間體3(120mg，0.340mmol)、前一步驟的胺鹽酸鹽(46mg，0.34mmol)、二異丙基乙胺(60μL，0.34mmol)和4分子篩(碾碎的，360mg)的二氯乙烷(10mL)溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉處理，在室溫攪拌24h。將反應物傾在飽和碳酸氫鈉溶液上猝滅，粗產(chǎn)物用二氯甲烷萃取。真空除去揮發(fā)分，制備型TLC(乙酸乙酯∶乙醇∶氫氧化銨90∶8∶2)處理得到純凈產(chǎn)物(118mg，80％)。LC MSC24H31N2F3O2計算值436.23，實測值437.20[M+H]+。
實施例81
中間體21(150mg，0.43mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入EDC(414mg，2.16mmol)、HOAt(59mg，0.43mmol)和中間體1(87mg，0.43mmol)，在室溫攪拌所得混合物4天。用水猝滅反應物，用20mL二氯甲烷稀釋。分離出有機層，水層用DCM(2×20mL)萃取。合并有機物，用硫酸鈉干燥，過濾后減壓蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(洗脫劑10％甲醇∶89.5％二氯甲烷∶0.5％NH4OH)獲得40mg(17％)純凈的所需終產(chǎn)物，為兩種順式異構體的混合物。LC-MS C30H36N2OF4計算值516.28，實測值[M+H]+517。
實施例82 將嘧啶基哌啶鹽酸鹽(中間體8)(67mg，0.34mmol)與中間體4(100mg，0.28mmol)、三乙胺(46μL，0.35mmol)、4粉末狀分子篩(100mg)在DCM中混合。在室溫15min后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(240mg，1.13mmol)，攪拌所得混合物3天，然后通過硅藻土過濾，用DCM稀釋，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，減壓濃縮得到粗制油狀物，用制備型TLC提純(硅膠，0.3％NH4OH/2.7％MeOH/97％DCM)得到110mg無色油狀物。通過ChiralPak AD柱HPLC(用30％異丙醇/己烷洗脫)拆分各個非對映異構體得到2種單一非對映異構體和一個含2種其它非對映異構體的混合物。
第一個峰10mgESI-MS C28H35F3N4O的計算值500.28；實測值504(M+H)。
第二個峰11mgESI-MS C28H35F3N4O的計算值500.28；實測值504(M+H)。
第三個峰7.0mg ESI-MS C28H35F3N4O的計算值500.28；實測值504(M+H)。
實施例83-91 幾種其它實施例按照實施例82的類似方法制備，使用不同的哌啶中間體。以下是這些實施例(83-91)。

實施例92 此產(chǎn)物按照實施例81的類似方法制備，但是中間體21用市售4-氰基-4-苯基哌啶替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑5％甲醇∶94.5％DCM∶0.5％NH4OH)獲得實施例92，為4種異構體的混合物。LC-MS C31H36F3N3O計算值523.28，實測值[M+H]+524。
實施例93 此產(chǎn)物按照實施例81的類似方法制備，但是中間體21用市售4-苯基哌啶替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10％甲醇∶89.5％DCM∶0.5％NH4OH)獲得實施例93，為4種異構體的混合物。LC-MSC30H37F3N2O計算值498.29，實測值[M+H]+499。
實施例94
步驟A 環(huán)戊酮甲酸(中間體3步驟C的)(2.3g，14mmol)的二氯甲烷(70mL)溶液中加入乙二酰氯(1.8mL，21mmol)，然后加入2滴DMF。在室溫攪拌溶液80min，然后減壓蒸發(fā)。將殘余物溶于DCM(20mL)，用注射器加入準備好的中間體3(3.0g，14mmol)和三乙胺(2.1mL，15mmol)的DCM(50mL)溶液。在室溫攪拌所得混合物18h，然后用水(25mL)猝滅。分離有機物，用1N HCl、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后蒸發(fā)。殘余物用Biotage Flash40提純(洗脫劑40％乙酸乙酯/60％己烷)獲得2.2g(43％)標題化合物。
步驟B 將步驟A的產(chǎn)物(200mg，0.54mmol)、市售4-氟苯基哌啶鹽酸鹽(120mg，0.54mmol)、二異丙基乙胺(94μL，0.54mmol)和碾碎的分子篩(4，100mg)的二氯甲烷(10mL)溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(343mg，1.60mmol)處理，在室溫攪拌過夜。用飽和碳酸氫鈉(10mL)猝滅反應物，用10mL DCM稀釋。分離出有機層，水溶液用二氯甲烷(2×5mL)洗滌。合并有機物，用無水硫酸鈉干燥，過濾后蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(洗脫劑8％乙醇∶90％乙酸乙酯∶2％NH4OH)獲得兩種異構體，分別是未知絕對立體構型的較高洗脫的異構體(25mg，5％)和較低洗脫的異構體(37.2mg，7.6％)。LC-MS C30H35N2OF5計算值534.28，實測值[M+H]+535。
實施例95 此產(chǎn)物按照實施例94的類似方法制備，但是4-氟苯基哌啶鹽酸鹽用中間體9替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑90％乙酸乙酯∶8％乙醇∶2％NH4OH)獲得450mg(66％)標題產(chǎn)物，為4種異構體的混合物。LC-MS C28H34N4OF4計算值518.27，實測值[M+H]+519。
幾種其它實施例按照實施例94的類似方法制備，其中采用不同的哌啶中間體。以下是這些實施例(96-104)。

實施例105 中間體21(150mg，0.43mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入EDC(170mg，0.86mmol)、HOAt(59mg，0.43mmol)和中間體21(91mg，0.43mmol)，在室溫攪拌所得混合物3天。用水猝滅反應物，用20mL二氯甲烷稀釋。分離出有機層，水層用DCM(2×20mL)萃取。合并有機物，用硫酸鈉干燥，過濾后減壓蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(洗脫劑7％乙醇∶92％二氯甲烷∶1.0％NH4OH)獲得121mg(50％)所需終產(chǎn)物，為兩種順式異構體的混合物。LC-MS C29H36BrFN2O計算值526.28，實測值[M+H]+527和[(M+2)+H]+529。
實施例106 實施例105(100mg，0.210mmol)、苯基硼酸(30mg，0.23mmol)、甲苯(1.4mL)和MeOH(0.6mL)溶液中加入Na2CO3(80mg，0.74mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(8mg，0.01mmol)的H2O(0.4mL)溶液。將反應混合物在高壓管中于80℃加熱12h，然后通過硅藻土過濾，濃縮至干。濃縮物用DCM稀釋，用1N NaOH溶液(3x)洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑5/94.5/0.5，MeOH/DCM/NH4OH)獲得實施例106(63.3mg，63.3％)，為2種順式異構體混合物。LC-MS C35H41FN2O計算值524.29，實測值[M+H]+525.4。
實施例107 此產(chǎn)物按照實施例106的類似方法制備，但是苯基硼酸用4。吡啶基硼酸替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10/89/1.0，MeOH/DCM/NH4OH)獲得實施例107，為兩種順式異構體的混合物。LC-MS C34H40FN3O計算值525.26，實測值[M+H]+526.3。
實施例108 此產(chǎn)物按照實施例106的類似方法制備，但是苯基硼酸用3-吡啶基硼酸替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10/89/1.0，MeOH/DCM/NH4OH)獲得實施例108，為兩種順式異構體的混合物。LC-MS C34H40FN3O計算值525.26，實測值[M+H]+526.3。
實施例109 此產(chǎn)物按照實施例106的類似方法制備，但是苯基硼酸用2-吡啶基硼酸替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10/89/1.0，MeOH/DCM/NH4OH)獲得實施例109，為兩種順式異構體的混合物。LC-MS C34H40FN3O計算值525.26，實測值[M+H]+526.3。
實施例110 步驟A 冰冷濃硫酸中滴加1，2，3，4-四氫異喹啉(23mL，170mmol)，然后以溫度上升不超過5℃的速率加入硝酸鉀(18.8g，186mmol)。在加入完畢后，在室溫攪拌混合物18h，然后傾在冰(700g)和NH4OH(150mL)的攪拌混合物上。混合物用CHCl3(3×300mL)萃取。合并的CHCl3層用飽和NaCl(200mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮。將殘余物溶于乙醇(130mL)，在冰浴冷卻下加入濃鹽酸(22mL)。過濾除去沉淀，用甲醇重結晶得到產(chǎn)物(12.45g，34％)；1H NMR500MHz(DMSO-d6)δ＝3.13(2H，t，J＝6.2Hz)，3.35(2H，t，J＝6.2Hz)，4.35(2H，s)，7.50(1H，d，J＝8.5Hz)，8.07(1H，dd，J＝2.3和8.5Hz)，8.19(1H，d，J＝2.3Hz)10.02(2H，brs)。
步驟B 步驟A產(chǎn)物(12g，58mmol)、吡啶(23.7mL，293mmol)的無水CH2Cl2(50mL)冷(0℃)懸浮液中滴加三氟醋酸酐(12mL，87mmol)，在室溫攪拌所得混合物18h。將反應混合物傾在冰(500g)上，用CH2Cl2(4×150mL)萃取。合并的二氯甲烷層用1N HCl(4×100mL)、飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾后真空蒸發(fā)得到產(chǎn)物(15.92g，89％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝3.07(2H，m)，3.91和3.94(2H，t，J＝6.2Hz)，4.85和4.88(2H，s)，7.36(1H，dd，J＝8.7和11.9Hz)，8.07(1H，dd，J＝2.3和8.5Hz)，8.01-8.08(2H m)。
步驟C 在50psi下，將步驟B產(chǎn)物(16g，58mmol)的乙醇(200mL)溶液在Parr裝置中通過PtO2氫化，直到停止吸收氫。通過硅藻土過濾除去催化劑，真空濃縮濾液得到產(chǎn)物(14.2g，100％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝2.84(2H，t，J＝5.7Hz)，3.35(2H，br s)，3.80和3.84(2H，t，J＝6.0Hz)，4.64和4.69(2H，s)，6.45(1H，d，J＝10.0Hz)，6.57(1H，td，J＝2.4和8.5Hz)，6.95(1H，d，J＝8.5Hz)。
步驟D 步驟C產(chǎn)物(2.0g，8.7mmol)的甲苯(50mL)溶液中加入N，N-二甲基甲酰胺連氮(2.3g，16mmol)和一刮勺端的甲苯磺酸，回流加熱所得混合物24h。真空濃縮混合物，殘余物在CH2Cl2(50mL)和水(50mL)間分配。分離出有機層，用飽和碳酸氫鈉(25mL)和飽和NaCl(25mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。殘余物用CH2Cl2(4mL)研磨，過濾，干燥得到產(chǎn)物(1.0g，39％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)＝3.05(2H，t，J＝5.7Hz)，3.90和3.95(2H，t，J＝6.0Hz)，4.83和4.89(2H，s)，7.20(1H，d)，7.26(1H，t)，7.38(1H，t)8.45(2H，s)。
步驟E 步驟D產(chǎn)物(1.0g，3.4mmol)的乙醇(50mL)溶液中加入碳酸鉀(2.3g，17mmol)的水(10mL)溶液，回流加熱所得混合物90min。真空濃縮冷反應混合物，固體殘余物用CH2Cl2(3×10mL)萃取。真空蒸發(fā)合并的CH2Cl2層，殘余物用二氧化硅柱色譜法提純(用含0.5％NH4OH的10％CH3OH/CH2Cl2洗脫)得到產(chǎn)物(550mg，82％)；1H NMR500MHz(CDCl3)δ＝2.69(1H，br s)，2.85(2H，t，J＝5.9Hz)，3.17(2H，t，J＝6.0Hz)，4.07(2H，s)，7.20(1H，d，J＝1.8Hz)，7.14(1H，dd，J＝1.8和8.0Hz)，7.23(1H，d，J＝8.0Hz)，8.43(2H，s)。
步驟F 此產(chǎn)物按照實施例81的類似方法制備，但是中間體1用步驟E產(chǎn)物替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10％甲醇∶89.5％DCM∶0.5％NH4OH)獲得實施例30，為兩種順式異構體的混合物。LC-MSC31H38FN5O計算值515.31，實測值[M+H]+516。
實施例111
步驟A 實施例110步驟C制備的三氟乙酰胺(7.5g，31mmol)的乙醇(200mL)溶液中加入碳酸鉀(17g，120mmol)的水(50mL)溶液，回流加熱所得混合物90min。真空濃縮冷反應混合物，將殘余物用水(200mL)稀釋?；旌衔镉肅H2Cl2(3×100mL)萃取。合并的CH2Cl2層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮得到產(chǎn)物(3.76g，83％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝2.69(2H，t，J＝6.0Hz)，3.11(2H，t，J＝6.0Hz)，3.45(2H，br s)，3.92(2H，s)，6.36(1H，d，J＝2.3Hz)，6.52(1H，dd，J＝2.3和8.0Hz)，6.89(1H，d，J＝8.0Hz)。
步驟B 步驟A產(chǎn)物(3.76g，25.4mmol)的四氫呋喃(100mL)溶液中加入三乙胺(4.24mL，30.5mmol)、氯甲酸芐基酯(4.0mL，28mmol)，在室溫攪拌所得混合物4h。將乙酸乙酯(100mL)加入反應混合物，整體用水(250mL)、5％檸檬酸溶液(150mL)、飽和碳酸氫鈉(150mL)和飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮得到產(chǎn)物(7.2g，100％)。
步驟C 在冰浴冷卻下，步驟B產(chǎn)物(7.2g，25mmol)和吡啶(5.1mL，64mmol)的CH2Cl2(150mL)溶液中加入三氟醋酸酐(5.38mL，38.1mmol)，在室溫攪拌所得混合物5h。將混合物傾在冰(150g)上，用CH2Cl2(4×100mL)萃取。合并的二氯甲烷層用1N HCl(4×75mL)、飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾后蒸發(fā)。將殘余物溶于CCl4(200mL)，加入三苯基膦(10g，38mmol)，回流加熱所得混合物15h，冷卻，真空濃縮。將殘余物溶于無水N，N-二甲基甲酰胺(150mL)，將此溶液加入疊氮化鈉(1.65g，25.4mmol)的無水N，N-二甲基甲酰胺(75mL)溶液，在室溫攪拌所得混合物3h。將反應混合物傾入水(500mL)中，用Et2O(3×100mL)萃取。合并的Et2O層用水(2×250mL)、飽和NaCl(100mL)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。殘余物用二氧化硅柱色譜法提純(用10％EtOAc/己烷至20％EtOAc/己烷梯度洗脫)得到產(chǎn)物(3.4g，33％)；1H NMR 500MHz(CDCl3)δ＝2.99(2H，br m)，3.80(2H，t，J＝6.0Hz)，4.75(2H，s)，5.21(2H，s)，7.20-7.45(8H，m)。
步驟D 在通入氮氣下，步驟C產(chǎn)物(3.4g，8.4mmol)的甲醇(100mL)溶液)中加入10％鈀碳(500mg)，在氫氣罐下攪拌所得混合物5h。通過硅藻土過濾除去催化劑，真空蒸發(fā)濾液得到產(chǎn)物(2.2g，97％)；1H NMR500MHz(CDCl3)δ＝2.33(1H，brs)，2.91(2H，t，J＝6.0Hz)，3.19(2H，t，J＝6.0Hz)，4.08(2H，s)，7.14(1H，d，1.8Hz)，7.22(1H，dd，J＝1.8和8.2Hz)，7.31(1H，d，J＝8.2Hz)。
步驟E
此產(chǎn)物按照實施例81的類似方法制備，但是中間體1用步驟D產(chǎn)物替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10％甲醇89.5％DCM0.5％NH4OH)獲得實施例31，為兩種順式異構體的混合物。LC-MSC31H36F3N6O計算值584.29，實測值[M+H]+585。
實施例112 此產(chǎn)物按照實施例81的類似方法制備，但是中間體1用市售6，7-二乙氧基-四氫異喹啉替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑5％乙醇∶94％DCM∶1.0％NH4OH)獲得實施例32，為兩種順式異構體的混合物。LC-MS C33H45FN2O3計算值536.34，實測值[M+H]+537。
實施例113 步驟A 此產(chǎn)物按照中間體1的類似方法制備，但是2-氟-4-三氟甲基苯基乙腈用3，4-二-氟甲基苯基乙腈替代。LC-MS C9H9F2N計算值169.07，實測值[M+H]+170.1步驟B 此產(chǎn)物按照實施例81的類似方法制備，但是中間體1用步驟A產(chǎn)物替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑6％乙醇∶93％DCM∶1.0％NH4OH)獲得實施例33，為兩種順式異構體的混合物。LC-MSC29H35F3N2O計算值484.27，實測值[M+H]+485。
實施例114 此產(chǎn)物按照實施例82的類似方法制備，但是中間體8用市售4-羥基-4-苯基哌啶替代。粗產(chǎn)物用制備型TLC提純(洗脫劑10％甲醇∶89％DCM∶1.0％NH4OH)獲得實施例114，為4種異構體的混合物。LC-MS C30H37F3N2O2計算值514.28，實測值[M+H]+515。
實施例115和116 實施例115 實施例116將中間體5(100mg，0.22mmol)、4-氟苯基哌啶鹽酸鹽(57mg，0.26mmol)、二異丙基乙胺(45μL，0.26mmol)和碎分子篩(4，50mg)的二氯乙烷(5mL)溶液用三乙酰氧基硼氫化鈉(233mg，1.10mmol)處理，在室溫攪拌過夜。用飽和碳酸氫鈉(10mL)猝滅反應物，用10mLDCE稀釋。分離出有機層，水層用二氯甲烷(2×5mL)洗滌。合并有機物，用無水硫酸鈉干燥，過濾后蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(洗脫劑0.5％NH4OH∶5％MeOH∶94.5％CH2Cl2)獲得72.3mg(63％)終產(chǎn)物，為兩種非對映異構體的混合物。用制備型ChiralCel OD柱HPLC完成分離，利用15％乙醇和85％己烷洗脫劑洗脫，流速9mL/min。獲得不需要的反式異構體(35mg，50％)和所需順式異構體(25mg，36％)?？偸章?6％。兩種產(chǎn)物的LC-MSC29H35N3OF4計算值517.28，實測值[M+H]+518.3。
實施例1151H NMR(第1種異構體，不需要)(500MHz，CDCl3)δ8.73(s，1H)，7.69(s，1H)，7.20(app dd，J＝5.5，8.6Hz，2H)6.98(app t，J＝8.6Hz，2H)，[4.88(d，J＝17.5Hz，1H)，4.80(d，J＝17.5Hz，1H)(ABx q)]4.05-3.96(m，1H)，3.88(app dt，J＝5.9，13.1Hz，1H)，3.27(br d，J＝11.4Hz，1H)，3.12(brt，J＝5.6Hz，3H)，2.83(dd，J＝5.7，11.9Hz，1H)，2.52-2.44(m，1H)，2.43-2.34(m，1H)，2.16-1.95(m，6H)，1.86-1.74(m，4H)，1.45(br t，J＝10.0，3H)，1.03(d，J＝6.6Hz，3H)，0.83(d，J＝6.6Hz，3H)。
實施例1161H NMR(第2種異構體，所需的)(500MHz，CDCl3)δ8.72(s，1H)，7.69(s，1H)，7.19(app dd，J＝5.5，8.6Hz，2H)6.98(app t，J＝8.6Hz，2H)，[4.94(br s，1H)，4.69(br d，J＝17.6Hz，1H)(ABx q)]4.05-3.80(m，1H)，3.20-3.08(m，4H)，2.68(dd，J＝6.6，12.8Hz，1H)，2.52-2.43(m，2H)，2.28(dd，J＝7.3，12.8Hz，1H)，2.14-2.00(m，3H)，1.97-1.87(m，2H)，1.83(br d，J＝12.8Hz，2H)1.75(br d，12.4Hz，2H)，1.56-1.48(m，1H)，1.42-1.34(m，1H)，1.01(d，J＝6.5Hz，3H)，0.80(d，J＝6.6Hz，3H)。
實施例117 將嘧啶基哌啶鹽酸鹽(中間體8，133mg，0.564mmol)與中間體5(100mg，0.282mmol)、DIEA(240μL，1.40mmol)和4粉末狀分子篩(200mg)在DCM中混合。在室溫15min后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(300mg，1.41mmol)，攪拌所得混合物3天，然后通過硅藻土過濾，用DCM稀釋，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥有機層，過濾，減壓濃縮得到粗制油狀物，用制備型TLC提純(硅膠，0.5％NH4OH/4.5％MeOH/95％DCM)得到126mg無色油狀物。通過HPLC拆分順/反異構體(采用ChiralPak OD柱，用20％乙醇/己烷洗脫)得到57mg反式異構體和45mg順式異構體。
第一個峰57mgESI-MS C27H34F3N5O的計算值501.27；實測值502(M+H)。
第二個峰45mgESI-MS C27H34F3N5O的計算值501.27；實測值502(M+H)。
實施例118-129 幾種其它實施例按照實施例117的類似方法制備，其中采用不同的哌啶中間體。以下是這些實施例(118-129)。

實施例130
步驟A 此酮通過拆分外消旋的中間體6獲得，其中采用ChiralCel OD制備柱，用15％乙醇/己烷洗脫，9.0mL/min。在類似分析條件下(1.0mL/min)，較快洗脫的對映異構體的保留時間是11.25min。LC MSC17H19F3N2O3計算值356.13，實測值357.05[M+H]+。
步驟B 最終化合物用本實施例步驟A中較快洗脫的酮和中間體10按照實施例19的方法合成。相應的順式-和反式-非對映異構體的混合物通過制備型TLC分離。LC MS C24H31F3N6O2計算值492.25，實測值493.30[M+H]+。
實施例131 本化合物用實施例130步驟A制備的酮和中間體9按照實施例19的方法合成。LC MS C26H32F3N5O2計算值503.25，實測值504.25[M+H]+。
實施例132 步驟A 此酮按照中間體6介紹的方法合成，但是在中間體6步驟C中用甲氧基甲基氯替代乙醛。相應的對映異構體通過ChiralCel OD制備柱HPLC(洗脫劑己烷∶乙醇/85∶15，9.0mL/min)分離。LC MSC26H32F3N5O2計算值503.25，實測值504.25[M+H]+。
步驟B 最終化合物用步驟A的酮和4-(4-氟苯基)哌啶按照實施例19的方法制備。相應的異構體通過制備型TLC(洗脫劑乙酸乙酯∶乙醇∶氫氧化銨/90∶9∶1)獲得。LC MS C26H32F3N5O2計算值503.25，實測值504.70[M+H]+。
實施例133 步驟A 2-(三氟甲基)丙烯酸(20.0g，143mmol)和芐基醇(14.8mL，142mmol)的DCM(150mL)混合物中分批加入EDC(40.93g，214.2mmol)。攪拌反應混合物2h，用DCM稀釋，用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘余物用快速柱色譜法提純(硅膠，5％EtOAc/己烷)獲得粘性油狀產(chǎn)物(13.7g，42％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.36-7.43(m，5H)，6.78(d，1H)，6.48(d，1H)，5.32(s，2H)。
步驟B 在氮氣氛下，火焰干燥的燒瓶中加入乙酸2-[(三甲硅烷基)甲基]-2-丙烯-1-基酯(12.18mL，57.35mmol)和實施例52步驟A的中間體(13.2g，57.4mmol)和四(三苯基膦)鈀(0)(13.3g，11.5mmol)的THF(200mL)。將反應混合物回流過夜，用DCM(150mL)稀釋，過濾，然后濃縮。殘余物用快速柱色譜法提純(硅膠，100％己烷-2.5％EtOAc/己烷-5％EtOAc/己烷)獲得產(chǎn)物(11.68g，71.7％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.42(m，5H)，5.23(s，2H)，4.93(m，2H)，3.03(m，1H)，2.78(m，1H)，2.36-2.52(m，3H)，2.12-2.24(m，1H)。
步驟C 將步驟B產(chǎn)物(11.6g，40.8mmol)的DCM(150mL)溶液冷卻至-78℃，通入氮氣至飽和。將臭氧通入反應混合物直到溶液變成藍色，然后將三苯基膦(12.8g，49.0mmol)加入混合物。攪拌反應混合物過夜，然后減壓蒸發(fā)。殘余物用快速柱色譜法提純(硅膠，30％EtOAc/己烷)獲得標題化合物(8.49g，72.7％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.42(m，5H)，5.26(s，2H)，2.92(m，1H)，2.65(m，1H)，2.35-2.54(m，4H)。
步驟D 步驟C中間體(1.00g，3.49mmol)的乙醇(60mL)溶液中加入Pd-C(10％，100mg)。將反應混合物加入Parr振蕩器，在50lb H2壓力下振蕩1.5h。溶液用甲醇稀釋，通過硅藻土過濾，然后真空蒸發(fā)獲得黃色油狀酸(692mg，100％)。LC-MS C7H7F3O3計算值196.03；實測值197(M+H)。
步驟E 步驟D產(chǎn)物(684mg，3.49mmol)、EDC(2.01g，10.5mmol)、中間體2(916mg，3.84mmol)和DCM(30mL)的混合物中加入DIEA(670μL，3.84mmol)，在室溫攪拌所得溶液過夜。反應混合物用DCM稀釋，用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾后真空蒸發(fā)。殘余物用柱色譜法提純(硅膠，50％EtOAc/己烷)獲得標題化合物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.75(s，1H)，7.71(s，1H)，4.86(d，J＝5.5Hz，2H)，3.91-4.08(m，2H)，3.18(t，J＝5.0Hz，2H)，2.98(s，2H)，2.64-2.85(m，2H)，2.43-2.56(m，2H)。LC-MS C16H14F6N2O2的計算值380.10；實測值381(M+H)。
步驟F 步驟E化合物(100mg，0.263mmol)、4-苯基哌啶鹽酸鹽(52mg，0.26mmol)、分子篩(4，180mg)、DIEA(46μL，0.26mmol)和DCM(5mL)的混合物中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(167mg，0.789mmol)，在室溫攪拌所得混合物過夜。用DCM稀釋反應物，通過硅藻土過濾，減壓蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(1000微米，洗脫劑0.4％NH4OH水溶液∶4％MeOH∶95.6％DCM)獲得為游離堿的順式-和反式-異構體的混合物。順式-和反式-異構體通過制備型手性HPLC(手性OD柱，洗脫劑5％EtOH/己烷)分離獲得終產(chǎn)物，為所需順式異構體的標題化合物。用4N HCl/二噁烷處理生成鹽酸鹽(20.4mg)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.74(s，1H)，7.70(s，1H)，7.20-7.35(m，5H)，4.85(m，2H)，3.99(m，2H)，3.14-3.24(m，5H)，2.46-2.56(m，3H)，2.02-2.22(m，5H)，1.70-1.91(m，5H)。LC-MS C27H29F6N3O的計算值525.22；實測值526(M+H)。
實施例134 步驟A 在-78℃，向環(huán)已烷(15mL)的100mL二氯甲烷攪拌溶液通入臭氧直到出現(xiàn)淺藍色。通過氮氣流除去過量臭氧，然后加入60mL甲硫醚。讓混合物靜置過夜，用硫酸鈉干燥。低真空除去溶劑和DMS。粗產(chǎn)物直接用于下一步驟無需再提純。
步驟B 將中間體27(135mg，0.3mmol)、步驟A的1，6-己烷-二醛(～100mg)、分子篩(4，50mg)、DIEA(130mg，1.0mmol)的DCM(10mL粗產(chǎn)物)的混合物攪拌5min。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(424mg，2.0mmol)。攪拌所得混合物2h，用Na2CO3飽和水溶液猝滅，過濾，用DCM洗滌。分離濾液，水溶液用DCM萃取。合并的DCM層用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC提純(1000微米)(用10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM展開)獲得為游離堿的標題化合物終產(chǎn)物。用4M HCl/二噁烷處理形成鹽酸鹽(42mg)。ESI-MS C25H34F3N3O3的計算值481；實測值482(M+H)。
實施例135 將實施例134(35mg)、Pd/C(5％，5mg)和甲醇(20mL)的混合物在Parr裝置上氫化1h。過濾除去催化劑。蒸發(fā)濾液獲得白色固體標題產(chǎn)物(32mg)。ESI-MS C25H36F3N3O的計算值451；實測值452(M+H)。
實施例136 步驟A 在-78℃，向環(huán)庚烯(5mL)的50mL二氯甲烷攪拌溶液通入臭氧直到出現(xiàn)淺藍色。通過氮氣流除去過量臭氧，然后加入20mL甲硫醚。讓混合物靜置過夜，用硫酸鈉干燥。低真空除去溶劑和DMS。粗產(chǎn)物直接用于下一步驟無需再提純。
步驟B
將中間體27(135mg，0.3mmol)、步驟A的1，7-庚烷-二醛(～100mg)、分子篩(4，50mg)、DIEA(130mg，1.0mmol)和DCM(10mL粗產(chǎn)物)的混合物攪拌5min。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(424mg，2.0mmol)。攪拌所得混合物2h，用Na2CO3飽和水溶液猝滅，過濾，用DCM洗滌。分離濾液，水溶液用DCM萃取。合并的DCM層用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC(1000微米)(用10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM展開)提純獲得為游離堿的標題化合物終產(chǎn)物。用4M HCl/二噁烷處理形成鹽酸鹽(50mg)。ESI-MSC26H36F3N3O3的計算值485；實測值486(M+H)。
實施例137 步驟A 將5-降冰片烯-2-甲酸(5.4g，40mmol)、芐基醇(4.3g，40mmol)、EDAC.HCl(9.5g，50mmol)、DIEA(5.2g，40mmol)稱量加入燒瓶。加入50mL二氯甲烷。攪拌混合物過夜，用2M aq.HCl、水和碳酸鈉飽和水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物用MPLC(10％EtOAc/己烷)提純。獲得為外型和內(nèi)型異構體混合物的標題化合物(5.2g)。
步驟B 在-78℃，向5-降冰片烯-2-甲酸芐基酯(1.2g，5mmol)的50mL二氯甲烷攪拌溶液通入臭氧直到出現(xiàn)淺藍色。通過氮氣流除去過量臭氧，然后加入20mL甲硫醚。讓混合物靜置過夜，用硫酸鈉干燥。低真空除去溶劑和DMS。粗產(chǎn)物直接用于下一步驟無需再提純。
步驟C 中間體27(86mg，0.2mmol)、步驟B的二-醛酯(～200mg)、分子篩(4，500mg)、DIEA(130mg，1.0mmol)和DCM(10mL粗制物)的混合物攪拌5min。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(420mg，2.0mmol)。攪拌所得混合物2h，用Na2CO3飽和水溶液猝滅，過濾，用DCM洗滌。分離濾液，水溶液用DCM萃取。合并的DCM層用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC(1000微米)(用10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM展開)提純獲得為游離堿的標題化合物終產(chǎn)物。用4N HCl/二噁烷處理生成相應的鹽酸鹽(62mg)。ESI-MSC34H40F3N3O5的計算值627；實測值428(M+H)。
步驟D 將步驟C氨基酯(60mg)、Pd/C(5％，100mg)和甲醇(20mL)的混合物用Parr裝置在50lb氫氣氛下氫化1h。過濾除去催化劑。蒸發(fā)濾液，殘余物用制備型TLC(用甲醇展開)提純獲得白色固體標題產(chǎn)物(18mg)。ESI-MS C27H36F3N3O的計算值507；實測值508(M+H)。
實施例138 步驟A 將中間體26(為鹽酸鹽，1.2g，4.0mmol)、中間體23(1.1g，4.0mmol)、PyBrOP(1.9g，4.0mmol)、DMAP(0.29g，2.4mmol)、DIEA(2.8mL，16mmol)和10mL二氯甲烷的混合物在室溫攪拌過夜。將全部混合物應用到硅膠柱，用20％乙酸乙酯/己烷洗脫。獲得白色固體標題化合物(1.7g，83％)。LC-MS C26H35F3N2O5計算值512，實測值[M+H-100]+413。
步驟B 將以上步驟A的酰胺(1.7g，3.3mmol)與20mL 4M HCl/二噁烷混合。攪拌所得溶液1h，蒸發(fā)，高真空干燥獲得白色固體標題產(chǎn)物(1.45g，100％)。LC-MS C21H27F3N2O3計算值412，實測值[M+H]+413。
步驟C 將以上步驟B的中間體(140mg，0.30mmol)、戊二醛(50％H2O，120mg，0.60mmol)、分子篩(4，1500mg)、DIEA(52mg，0.40mmol)和DCM(10mL)的混合物攪拌5min。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，1.00mmol)。攪拌所得混合物1h，用Na2CO3飽和水溶液猝滅，過濾，用DCM洗滌。分離濾液，水溶液用DCM萃取。合并的DCM層用硫酸鈉干燥，然后蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC(1000微米)(用10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM展開)提純獲得為游離堿的標題化合物終產(chǎn)物。用4N HCl/二噁烷處理生成相應的鹽酸鹽(80mg)。ESI-MS C26H35F3N2O3的計算值480；實測值481(M+H)。
實施例139
將實施例138(45mg，0.090mmol)、氫氧化鋰一水化合物(50mg)，水(0.1mL)和甲醇(1.0mL)的混合物在室溫攪拌過夜，將全部混合物裝載到制備型TLC上，用甲醇展開。獲得白色固體標題化合物(34mg)。LC-MS C25H33F3N2O3計算值466，實測值[M+H]+467。
實施例140 將實施例138步驟B的中間體(140mg，0.30mmol)、實施例136步驟A的1，6-己烷二醛(～100mg)、分子篩(4，500mg)、DIEA(130mg，1.00mmol)和DCM(20mL)的混合物攪拌5min。然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(424mg，2.00mmol)。攪拌所得混合物1h，用Na2CO3飽和水溶液猝滅，過濾，用DCM洗滌。分離濾液，水溶液用DCM萃取。合并的DCM層用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物用制備型TLC(1000微米)(用10％[aq.NH4OH/MeOH 1/9]/DCM展開)提純獲得為游離堿的標題化合物終產(chǎn)物。用4M HCl/二噁烷處理生成相應的鹽酸鹽(75mg)。ESI-MS C27H37F3N2O3的計算值494；實測值495(M+H)。
實施例141 將實施例140(20mg，0.04mmol)、氫氧化鋰一水化合物(50mg)、水(0.1mL)和甲醇(1.0mL)的混合物在室溫攪拌過夜，將全部混合物裝載到制備型TLC上，用甲醇展開。獲得白色固體標題化合物(15mg)。LC-MS C26H35F3N2O3計算值480，實測值[M+H]+481。
實施例142 步驟A 中間體29(190mg，1.1mmol)的1mL二氯甲烷攪拌溶液中加入乙二酰氯(2M，0.70mL，1.4mmol)的二氯甲烷溶液，然后加入恒量DMF。在室溫攪拌混合物30min。然后真空蒸發(fā)除去溶劑和過量試劑。將殘余物溶于1mL二氯甲烷，加入中間體2(295mg，1.00mmol)和DIEA(260mg，2.0mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中。攪拌反應物2h.。將全部混合物裝載到制備型TLC板(1000微米)，用10％MeOH/DCM展開。獲得黃色固體標題化合物(300mg)。LC-MSC21H24F3NO4計算值411，實測值[M+H]+412。
步驟B 將以上步驟A的酮(300mg，0.73mmol)、4-氟苯基哌啶鹽酸鹽(214mg，1.00mmol)、DIEA(129mg，1.00mmol)、分子篩(4，500mg)、三乙酰氧基硼氫化鈉(212mg，1.00mmol)和10mL二氯甲烷的混合物在室溫攪拌過周末，用碳酸鈉飽和水溶液猝滅，用二氯甲烷萃取，用制備型TLC(1000微米，用10％MeOH/DCM洗脫)提純。獲得標題化合物的順式和反式異構體混合物(270mg)。LC-MSC32H38F4N2O3計算值574，實測值[M+H]+575。
實施例143 將實施例142(22mg，0.04mmol)、氫氧化鋰一水化合物(30mg)和MeOH/H2O(9/1，0.5mL)的混合物在60℃攪拌2h，將全部混合物裝載到制備型TLC板，用甲醇展開。獲得白色固體標題化合物(12mg)。LC-MS C31H34F4N2O3計算值560，實測值[M+H]+561。
實施例144 步驟A 將中間體29(100mg，0.588mmol)溶于DCM(20mL)，依次用乙二酰氯(153μL，1.76mmol)和DMF(1滴)處理。在室溫攪拌所得溶液2h，然后濃縮至于，高真空干燥30min。將所得殘余物溶于DCM(5mL)，滴加到中間體1(177mg，0.882mmol)的DCM(5mL)和三乙胺(5mL)攪拌溶液中。在室溫攪拌所得反應混合物過夜，然后用DCM稀釋，用碳酸氫鈉、1N HCl水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾，然后減壓濃縮得到230mg所需粗產(chǎn)物，直接用于下一步無需再提純。
步驟B 將前一步驟的產(chǎn)物(115mg，0.326mmol)、3-哌啶-4-基苯甲酸乙酯鹽酸鹽(131mg，0.489mmol)、DIEA(83μL，0.49mmol)、分子篩(4，100mg)、三乙酰氧基硼氫化鈉(346mg，1.63mmol)和10mL二氯甲烷的混合物在室溫攪拌過周末，用碳酸氫鈉飽和水溶液猝滅，用二氯甲烷萃取，用制備型TLC提純(硅膠，用40％THF/己烷洗脫)。獲得標題化合物的順式和反式異構體混合物(200mg)。LC-MSC33H41F3N2O3的計算值570.3；實測值[M+H]+571.6。用ChiralCelOD柱(用10％乙醇/己烷洗脫)拆分各個立體異構體峰1LC-MS C33H41F3N2O3的計算值570.3；實測值[M+H]+571.6。
峰2LC-MS C33H41F3N2O3的計算值570.3；實測值[M+H]+571.6。
實施例145 將實施例144峰2(80mg，)、氫氧化鋰一水化合物(30mg)和EtOH/H2O(4/1，4mL)的混合物在室溫攪拌過夜。產(chǎn)物用反相HPLC提純，用常見方法轉化為鹽酸鹽。獲得白色固體標題化合物(45mg)。LC-MS C31H37F3N2O3計算值542.28；實測值[M+H]+543。
實施例146 將實施例144峰1(78mg，)、氫氧化鋰一水化合物(30mg)和EtOH/H2O(4/1，4mL)的混合物在室溫攪拌過夜。產(chǎn)物用反相HPLC提純，用常見方法轉化為鹽酸鹽。獲得白色固體標題化合物(49mg)。LC-MS C31H37F3N2O3計算值542.28；實測值[M+H]+543。
實施例147 實施例147按照實施例144的方法制備，但是用中間體30替代3-哌啶-4-基苯甲酸乙酯鹽酸鹽。所得4種立體異構體用手性色譜法分離。
實施例148 實施例148按照實施例145的方法制備，但是用實施例147的一種立體異構體替代實施例144的一種產(chǎn)物。
實施例149 實施例149按照實施例145的方法制備，但是用實施例147的一種立體異構體替代實施例144的一種產(chǎn)物。
實施例150 實施例150按照實施例145的方法制備，但是用實施例147的一種立體異構體替代實施例144的一種產(chǎn)物。
實施例151 實施例151按照實施例145的方法制備，但是用實施例147的一種立體異構體替代實施例144的一種產(chǎn)物。
權利要求
1.一種下式I的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 式I其中X選自C、N、O、S和SO2；Y為N或C；R1選自以下基團氫、-C1-6烷基、-C0-6烷基-O-C1-6烷基、-C0-6烷基-S-C1-6烷基、-(C0-6烷基)-(C3-7環(huán)烷基)-(C0-6烷基)、羥基、雜環(huán)、-CN、-NR12R12、-NR12COR13、-NR12SO2R14、-COR11、-CONR12R12和苯基，其中R11獨立選自以下基團羥基、氫、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中R12選自以下基團氫、C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中R13選自以下基團氫、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中R14選自以下基團羥基、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、芐基、苯基和C3-6環(huán)烷基，所述烷基、苯基、芐基和環(huán)烷基可以是未被取代的或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基，其中所述烷基和環(huán)烷基未被取代或者被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(f)C1-3烷基，(g)-O-C1-3烷基，(h)-COR11，(i)-SO2R14，(j)-NHCOCH3，(k)-NHSO2CH3，(l)-雜環(huán)，(m)＝O，(n)-CN，其中所述苯基和雜環(huán)未被取代或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代鹵基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基和三氟甲基；R2選自以下基團(a)氫，(b)羥基，(c)鹵基，(d)C1-3烷基，其中所述烷基未被取代或者被1-6個獨立選自氟和羥基的取代基取代，(e)-NR12R12(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12，(k)-雜環(huán)，(l)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R14，(o)-SO2-NR12R12，(p)＝O，其中R2通過雙鍵與環(huán)連接；在Y為N時，R3為氧或不存在；在Y為C時，R3選自以下基團(a)氫，(b)羥基，(c)鹵基，(d)C1-3烷基，其中所述烷基未被取代或者被1-6個獨立選自以下的取代基取代氟、羥基和-COR11，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12，(k)-雜環(huán)，(l)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R14，(o)-SO2-NR12R12，(p)硝基；R4選自以下基團(a)氫，(b)C1-6烷基，(c)三氟甲基，(d)三氟甲氧基，(e)氯，(f)氟，(g)溴，(h)苯基；R5選自以下基團(a)C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的，或者被1-6個氟取代，以及任選被羥基取代，(b)-O-C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(c)-CO-C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(d)-S-C1-6烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(e)-吡啶基，它可以是未被取代的或者被一個或多個選自以的取代基取代鹵基、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(f)氟，(g)氯，(h)溴，(i)-C4-6環(huán)烷基，(j)-O-C4-6環(huán)烷基，(k)苯基，它可以是未被取代的或者被一個或多個選自以下的取代基取代鹵基、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(l)-O-苯基，它可以是未被取代的或者被一個或多個選自以下的取代基取代鹵基、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(m)-C3-6環(huán)烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(n)-O-C3-6環(huán)烷基，其中烷基可以是未被取代的或者被1-6個氟取代，(o)-雜環(huán)，(p)-CN，(q)-COR11；R6選自以下基團(a)氫，(b)C1-6烷基，(c)三氟甲基，(d)氟，(e)氯，(f)溴；R7選自以下基團氫、(C0-6烷基)-苯基、(C0-6烷基)-雜環(huán)、(C0-6烷基)-C3-7環(huán)烷基、(C0-6烷基)-COR11、(C0-6烷基)-(烯基)-COR11、(C0-6烷基)-SO3H、(C0-6烷基)-W-C0-4烷基、(C0-6烷基)-CONR12-苯基和(C0-6烷基)-CONR15-V-COR11，或者在X為O、S或SO2時，R7不存在，其中V為C1-6烷基或苯基，其中W選自單鍵、-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、-CO2-、-CONR12-和-NR12-，其中R15可以為氫、C1-4烷基，或者R15通過1-5個碳的接頭連接V的一個碳構成環(huán)，其中所述C0-6烷基未被取代或被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-C0-6烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)三氟甲基，(f)-C0-2烷基-苯基，其中所述苯基、雜環(huán)、環(huán)烷基和C0-4烷基未被取代或被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-C0-3-COR11，(g)-CN，(h)-NR12R12，(i)-CONR12R12，(j)-C0-3-雜環(huán)，或者，所述苯基和雜環(huán)可以與另一個雜環(huán)稠合，另一個雜環(huán)本身可以是未被取代的或者被1-2個獨立選自以下的取代基取代羥基、鹵基、-COR11和-C1-3烷基，其中烯基未被取代或者被1-3個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)C1-3烷基，(d)苯基，(e)雜環(huán)；R8選自以下基團(a)氫，(b)在X為O、S、SO2或N時或者分別連接R7和R10的碳之間為雙鍵時，R8不存在，(c)羥基，(d)C1-6烷基，(e)C1-6烷基-羥基，(f)-O-C1-3烷基，(g)-COR11，(h)-CONR12R12，(i)-CN；或者R7和R8接合在一起構成選自以下的環(huán)(a)1H-茚，(b)2，3-二氫-1H-茚，(c)2，3-二氫-苯并呋喃，(d)1，3-二氫-異苯并呋喃，(e)2，3-二氫-苯并噻吩，(f)1，3-二氫-異苯并噻吩，(g)6H-環(huán)戊二烯并[d]異噁唑-3-醇，(h)環(huán)戊烷，(i)環(huán)己烷，其中所構成的環(huán)可以是未被取代的或者被1-5個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-C0-3-COR11，(g)-CN，(h)-NR12R12，(i)-CONR12R12，(j)-C0-3-雜環(huán)，或者，R7與R9或R8與R10可以結合在一起構成苯環(huán)或雜環(huán)，其中所述環(huán)未被取代或被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)羥基，(d)C1-3烷基，(e)-O-C1-3烷基，(f)-COR11，(g)-CN，(h)-NR12R12，(i)-CONR12R12；R9和R10獨立選自以下基團(a)氫，(b)羥基，(c)C1-6烷基，(d)C1-6烷基-COR11，(e)C1-6烷基-羥基，(f)-O-C1-3烷基，(g)＝O，這時R9或R10通過雙鍵與環(huán)連接，(h)鹵基；n選自0、1和2；虛線為單鍵或雙鍵。
2.權利要求1的化合物，其為具有式Ia結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、Y和n為權利要求1中的定義，R16和R17獨立選自以下基團(a)氫，(b)鹵基，(c)三氟甲基，(d)羥基，(e)C1-3烷基，(f)-O-C1-3烷基，(g)-C0-3-CO2H，(h)-C0-3-CO2C1-3烷基，(i)-CN，(j)-C0-3-雜環(huán)，或者，R16和R17接合在一起構成與苯環(huán)稠合的雜環(huán)，雜環(huán)本身可以是未被取代的或者被1-2個獨立選自以下的取代基取代羥基、鹵基、-COR11和-C1-3烷基。
3.權利要求1的化合物，其為具有式Ib結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中虛線為單鍵或雙鍵，R1、R2、R3、R5、R9、R16、R17、Y和n為權利要求1中的定義。
4.權利要求1的化合物，其為具有式Ic結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、R16、R17、Y和n為權利要求1中的定義，H為雜環(huán)。
5.權利要求1的化合物，其為具有式Id結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、R11、Y、W和n為權利要求1中的定義，其中所述C1-4碳鏈可以是未被取代的或者被1-4個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-C0-6烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)三氟甲基，(f)-C0-2烷基-苯基或者所述C1-4碳鏈可以包含在C3-7環(huán)烷基環(huán)中。
6.權利要求1的化合物，其為具有式Ie結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R9、R16、R17、X、Y和n為權利要求1中的定義；虛線為單鍵或雙鍵；o為1或2；A、B和D可以獨立選自C、N、O或S，在X、A、B、D均為C且o＝2時，它們構成苯環(huán)，或者在至少X、A、B和D之一為N、O或S而不為C時，它們構成雜環(huán)。
7.權利要求1的化合物，其為具有式If結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R2、R3、R5、R7、R9、R10、Y和n為權利要求1中的定義；X為N或O，在X為O時，R7不存在。
8.權利要求1的化合物，其為具有式Ig結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R5、R9、R16、R17和Y為權利要求1中的定義，或者R16和R17接合在一起構成與苯環(huán)稠合的雜環(huán)，雜環(huán)本身可以是未被取代的或者被1-2個獨立選自以下的取代基取代羥基、鹵基、-COR11和-C1-3烷基。
9.權利要求1的化合物，其為具有式Ih結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中虛線為單鍵或雙鍵，R1、R5、R9、R16、R17和Y為上文中的定義。
10.權利要求1的化合物，其為具有式Ii結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R5、R9、R16、R17和Y為上文中的定義，H為雜環(huán)。
10.權利要求1的化合物，其為具有式Ij結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 其中R1、R5、R9、R11、Y和W為上文中的定義，其中所述C1-4碳鏈可以是未被取代的或者被1-4個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-C0-6烷基，(d)-O-C1-3烷基，(e)三氟甲基，(f)-C0-2烷基-苯基。
11.權利要求1的化合物，其為具有式Ik結構的化合物或者其藥學上可接受的鹽或單獨的非對映異構體 式Ik其中R1、R5、R9、R10和Y為上文中的定義。
12.權利要求1的化合物，其中R1選自以下基團-C1-6烷基、-C0-6烷基-O-C1-6烷基和-(C0-6烷基)-(C3-7環(huán)烷基)-(C0-6烷基)，所述烷基和環(huán)烷基未被取代或者被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(f)C1-3烷基，(g)-O-C1-3烷基，(h)-COR11，(i)-CN，(j)-NR12R12，(k)-CONR12R12。
13.權利要求1的化合物，其中R1選自以下基團(l)-C1-6烷基，它未被取代或者被1-6個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(e)-COR11，(2)-C0-6烷基-O-C1-6烷基-，它未被取代或者被1-6個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)三氟甲基，(c)-COR11，(3)-(C3-5環(huán)烷基)-(C0-6烷基)，它未被取代或者被1-7個獨立選自以下的取代基取代(a)鹵基，(b)羥基，(c)-O-C1-3烷基，(d)三氟甲基，(e)-COR11。
14.權利要求13的化合物，其中R1選自以下基團(a)C1-6烷基，(b)羥基取代的C1-6烷基，(c)被1-6個氟取代的C1-6烷基。
15.權利要求14的化合物，其中R1選自以下基團(a)-CH(CH3)2，(b)-CH(OH)CH3，(c)-CH2CF3。
16.一種藥用組合物，該組合物包含惰性載體和權利要求1的化合物。
17.一種調節(jié)哺乳動物趨化因子受體活性的方法，該方法包括給予有效量的權利要求1的化合物。
18.一種治療、改善、控制或減輕炎性免疫調節(jié)性病癥或疾病的方法，該方法包括給予患者有效量的權利要求1的化合物。
19.一種治療、改善、控制或減輕類風濕性關節(jié)炎的方法，該方法包括給予患者有效量的權利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中R
文檔編號A61K31/44GK1805965SQ200480016537
公開日2006年7月19日 申請日期2004年4月14日 優(yōu)先權日2003年4月17日
發(fā)明者G·布托拉, S·D·戈布爾, A·帕斯特納克, 楊立虎, 周昌友, C·R·莫耶斯 申請人:麥克公司, 默克.夏普-道姆公司