專利名稱：選擇性抑制人體內(nèi)雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素的作用的制作方法
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及人體內(nèi)雌激素的作用。尤其是，本發(fā)明涉及應(yīng)用食用組合物或添加劑選擇性抑制人體內(nèi)雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素的作用，其中所述組合物用一或者多種來自桑類植物體，系統(tǒng)命名為檄樹(Morinda citrifolia L.)的植物的加工產(chǎn)物進(jìn)行配制。
2.背景技術(shù)雌激素或雌甾激素為甾體激素主要由卵巢產(chǎn)生并且負(fù)責(zé)促進(jìn)性欲以及用于發(fā)育以及維持女性性征。人體內(nèi)，雌甾激素在卵巢中形成，也可在腎上腺皮質(zhì)，精巢以及胎兒胎盤單元中形成。雌激素或雌甾激素具有多種功能。例如，它們負(fù)責(zé)雌性第二性征的發(fā)育并且在月經(jīng)周期期間作用于雌性生殖器產(chǎn)生適合于受精，卵子植入以及營養(yǎng)早期胚胎的環(huán)境。
雌激素由稱作芳香酶的酶產(chǎn)生，所述酶屬于存在于身體的不同部分，尤其是若干主要器官內(nèi)的通稱細(xì)胞色素P450的酶復(fù)合物。人體內(nèi)的芳香酶在胎盤，脂肪組織，毛囊，肌肉，骨頭，肝臟以及腦中表達(dá)。在腦內(nèi)，芳香酶在前部以及中基片下丘腦中存在。
芳香酶特異性決定C19雄激素向芳香族C18雌激素甾體的轉(zhuǎn)化。然而，芳香酶也能夠代謝異生素。芳香酶將腎上腺雄激素底物轉(zhuǎn)化成雌激素的能力或功能證明了其成為絕經(jīng)后婦女雌激素的唯一來源。因此，芳香酶的抑制劑被用來治療絕經(jīng)后乳腺癌及其他雌激素依賴的疾病。
只在近來芳香酶抑制劑才開始被認(rèn)為是乳腺癌及其他雌激素依賴的疾病可行的治療選擇。因而，這些的抑制劑的應(yīng)用得以持續(xù)增長。芳香酶抑制劑屬于激素治療的家族，其已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室以及若干臨床試驗(yàn)中顯示可以產(chǎn)生與絕經(jīng)后婦女的乳腺癌有關(guān)的顯著的抗癌活性。芳香酶抑制劑對于顯示出或具有較強(qiáng)雌激素靈敏性的婦女尤其有用或者有效。
已經(jīng)確立并且廣泛相信超過三分之二的乳腺癌的病例對雌激素敏感，因?yàn)樗鼈兡軌蛟谡麄€乳房區(qū)以及超出乳房區(qū)的范圍內(nèi)生成以及增殖。為了應(yīng)答以及預(yù)防這種蔓延，導(dǎo)入芳香酶抑制劑，其降低循環(huán)雌激素在絕經(jīng)后婦女體內(nèi)的含量，因此引起雌激素敏感或雌激素依賴的腫瘤停止生長并且甚至縮小。雌激素敏感的癌癥又名ER+(雌激素-受體陽性的)并且有時稱作黃體酮-受體陽性的(PR+)。
每個癌或腫瘤細(xì)胞具有位于其細(xì)胞膜上的受體(錨定位點(diǎn))。雌激素產(chǎn)生并釋放入體內(nèi)時，與這些細(xì)胞受體結(jié)合。因此，為了確定抑制治療的效力，可以測定每個受體及其與雌激素的結(jié)合效力。這種結(jié)合效力通常稱為“受體狀況”。同時，受體狀態(tài)成為乳腺癌預(yù)后的侵入部分。
許多芳香酶抑制劑抑制受體與雌激素結(jié)合，而其它的芳香酶抑制有效的芳香酶發(fā)揮將雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素的功能。此外，芳香酶抑制劑在絕經(jīng)后更有效地降低雌激素，因?yàn)榻^經(jīng)期兩側(cè)卵巢停止產(chǎn)生雌激素。然而，并不是說體內(nèi)不再產(chǎn)生雌激素。絕經(jīng)后產(chǎn)生的低水平的雌激素是芳香酶將其它天然存在的激素轉(zhuǎn)化成雌激素的結(jié)果。因而，芳香酶抑制劑被開發(fā)成有效阻止芳香酶被用于產(chǎn)生雌激素。結(jié)果，體內(nèi)雌激素水平下降，并且雌激素依賴的腫瘤開始或很可能縮小并脫離。作為對比，絕經(jīng)之前，雌激素主要在卵巢內(nèi)產(chǎn)生，只有少量由芳香酶的過程產(chǎn)生。大量的研究已經(jīng)指出芳香酶抑制劑不能將絕經(jīng)前婦女體內(nèi)雌激素的水平降低到足以影響腫瘤生長的水平。
目前，實(shí)際上只有非常有限量的芳香酶抑制劑在使用并且已經(jīng)由食品藥物管理局批準(zhǔn)。更廣泛應(yīng)用的一些抑制劑是Arimidex，Aromasin以及Femara，其已經(jīng)全部通過若干臨床試驗(yàn)。雖然可有效發(fā)揮預(yù)期的抑制芳香酶的功能，這些抑制劑卻誘導(dǎo)病人體內(nèi)大量不需要的副作用，因此使得用它們進(jìn)行治療的應(yīng)用較不普遍并且不合乎需要。非常有趣的是，這些獲得批準(zhǔn)的用于絕經(jīng)后婦女治療的治療劑包括阻斷腫瘤細(xì)胞表面上雌激素受體的藥物并且或者是可逆的或者不可逆的。然而，它們的副作用包括但是不局限于，出汗，潮熱，疲勞，食欲變化，頭疼，骨頭痛，胸痛，咳嗽，氣短，并且某些病人發(fā)生血凝。
還存在收集雌激素或雌甾激素用于增強(qiáng)人體內(nèi)雌激素水平的技術(shù)。這種技術(shù)包括從懷孕的馬的尿中收集。雖然這些技術(shù)是有效的，但是存在大量副作用，包括類似出汗，潮熱，疲勞，食欲變化，頭疼，骨頭痛，胸痛，咳嗽，氣短，等等的副作用。因此，研究與開發(fā)小組正在努力希望獲得改進(jìn)的收集技術(shù)和/或改進(jìn)的組合物，從而產(chǎn)生較安全應(yīng)用體內(nèi)的雌激素。
因此，雖然目前存在用于抑制雌激素產(chǎn)生以及收集用于體內(nèi)雌激素的技術(shù)，仍然存在包括對諸如出汗，潮熱，疲勞，食欲變化，頭疼，骨頭痛，胸痛，咳嗽氣短等的不合需要的副作用的挑戰(zhàn)。因此，應(yīng)該加強(qiáng)本領(lǐng)域技術(shù)的改進(jìn)，甚至用其它技術(shù)替代現(xiàn)有的技術(shù)。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及人體內(nèi)雌激素的作用。尤其是，本發(fā)明涉及應(yīng)用食用組合物或添加劑從而選擇性抑制人體內(nèi)雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素的作用，其中所述組合物用一或者多種來自印度桑類植物，系統(tǒng)命名為檄樹的植物的加工產(chǎn)物進(jìn)行配制。
本發(fā)明的實(shí)施方案與食用組合物或添加劑有關(guān)，所述組合物或添加劑由桑類植物，系統(tǒng)命名為檄樹(“Morinda citrifolia”)的產(chǎn)品加工而成。檄樹的產(chǎn)品可以來自果實(shí)，葉子，種子，根部或檄樹的任何其它部分。在一個實(shí)施方案中，營養(yǎng)添加劑包括由法屬波利尼西亞的純汁泥重新組成的檄樹果汁。添加劑還可以包括其它的天然果汁，諸如葡萄濃縮原汁，越桔濃縮原汁和/或另一濃縮原汁。在一個實(shí)施方案中，液體提取自檄樹的果實(shí)并且用于產(chǎn)生營養(yǎng)添加劑用于食用。營養(yǎng)添加劑的至少一個實(shí)施方案稱為“Tahitian Noni”并且可以獲自Morinda有限公司，其在5152N.Edgewood Dr.#_100，Provo，UT，84604有主要營業(yè)場所。
在另一實(shí)施方案中，營養(yǎng)添加劑由檄樹的葉子加工而來形成干燥或粉末狀營養(yǎng)添加劑，其可以是例如用于食用的片劑形式。在另一實(shí)施方案中，組合物為透皮乳油的形式，其施加在個體的皮膚的表面。
在本發(fā)明的至少一些實(shí)施方案中，營養(yǎng)添加劑或組合物提供體內(nèi)雌激素作用，但是營養(yǎng)添加劑或組合物比雌激素更溫和因此不具有伴隨的副作用。例如，激素替代治療可以誘導(dǎo)如胸部，子宮和/或卵巢的身體這種區(qū)域內(nèi)雌激素依賴的細(xì)胞的癌癥，營養(yǎng)添加劑的應(yīng)用是優(yōu)選的因?yàn)榕判箿p慢。
營養(yǎng)添加劑或組合物提供了替代起激素替代治療替代物的作用的能力并且較弱，因此如果有高濃度的天然雌激素，它們將減弱天然雌激素的活性并且如果有非常底濃度的天然雌激素，它們將提供雌激素的作用。
在一些實(shí)施方案中，婦女接受液體，干燥膠囊或乳油形式的檄樹葉子，果汁或另一產(chǎn)品的提取物。在一個實(shí)施方案中，個體至少每天食用一克。因此，根據(jù)本發(fā)明的至少一些實(shí)施方案，提供了由個體食用或者使用的營養(yǎng)添加劑，從而提供個體體內(nèi)雌激素的作用，預(yù)防或克服絕經(jīng)開始時出現(xiàn)的諸如潮熱，盜汗，流血，抑郁癥的癥狀。營養(yǎng)添加劑進(jìn)一步預(yù)防或改善骨質(zhì)疏松癥。
有2種細(xì)胞負(fù)責(zé)，稱作成骨細(xì)胞以及破骨細(xì)胞。成骨細(xì)胞細(xì)胞用于骨頭的重塑并且破骨細(xì)胞用于骨質(zhì)的溶解。成骨細(xì)胞的鈣水平應(yīng)該在恒定水平并且骨頭是鈣水平的緩沖物。如果血液中鈣水平減少骨質(zhì)將溶解產(chǎn)生并且提高鈣水平。如果婦女懷孕，胚胎消耗來自血液的大量鈣提取物因?yàn)榕咛ケ仨殬?gòu)建其自身的骨架。并且，因此骨質(zhì)在母親骨架中的周轉(zhuǎn)將增強(qiáng)。在懷孕期間有高水平的雌激素并且雌激素對于這些成骨細(xì)胞細(xì)胞中的這個過程很重要，其對于骨頭重塑很重要并且絕經(jīng)期雌激素水平下降。重塑過程變得較弱并且婦女喪失骨質(zhì)從而患骨質(zhì)疏松癥。因此，本發(fā)明提供了提供了雌激素作用幫助重新補(bǔ)充身體的方法。因此，根據(jù)本發(fā)明至少一些實(shí)施方案，從檄樹，諸如葉子，果汁或檄樹的另一部分加工的產(chǎn)品被用于選擇性提供體內(nèi)的雌激素作用。
在至少一些實(shí)施方案中，通過向體內(nèi)(例如，攝取)導(dǎo)入用一或者多種檄樹加工產(chǎn)物配制或包括其的，安全、預(yù)確定劑量的營養(yǎng)組合物以安全、預(yù)確定的持續(xù)時間，營養(yǎng)添加劑進(jìn)一步抑制芳香酶發(fā)揮將雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素的功能，由此抑制受體與雌激素結(jié)合，并且降低和/或調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生以及降低體內(nèi)雌激素的產(chǎn)量并且通過抑制芳香酶調(diào)節(jié)這種產(chǎn)生，用于治療癌癥，尤其是用于治療雌激素依賴的癌性腫瘤。
在一個實(shí)施方案中，大量檄樹加工產(chǎn)物利用本發(fā)明描述的加工方法以果汁，葉子，果泥果汁或果汁果泥，果肉，植物油，和/或膳食纖維的形式獲得。隨后，將適量的任一的或組合的這些成分與其它成分配制產(chǎn)生配制的營養(yǎng)組合物，從而提供顯著的健康益處并且通過抑制芳香酶參與治療并且提供對癌性細(xì)胞的預(yù)防作用。
本發(fā)明的實(shí)施方案的特征在于用至少一種加工的檄樹產(chǎn)品配制的營養(yǎng)組合物用于抑制哺乳動物體內(nèi)的芳香酶；及其施用方法。
本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)一步包括含有至少一種以其若干形式(優(yōu)選地來自葉子的果汁或粉末形式)之一，根據(jù)需要與其它天然或人造成分配制的檄樹加工產(chǎn)物。優(yōu)選的營養(yǎng)組合物是可以口服或通過靜脈注射施用的液體，其中檄樹的活性成分被吸收到組織中，抑制芳香酶并且降低/調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生。
本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)一步的特征在于通過預(yù)防施用包括至少一種檄樹加工產(chǎn)物作為活性成分的營養(yǎng)組合物抑制芳香酶，并且治療，抑制，預(yù)防以及逆轉(zhuǎn)癌細(xì)胞生長的方法。
雖然本發(fā)明的方法以及過程已經(jīng)證明是尤其適用于選擇性抑制體內(nèi)雌激素產(chǎn)生和/或提供雌激素作用的領(lǐng)域，本領(lǐng)域技術(shù)人員還可以認(rèn)識到所述方法以及過程可被用于多種不同的應(yīng)用，并且以多種不同的形式，產(chǎn)生包括檄樹加工產(chǎn)物的組合物，通過抑制雌激素產(chǎn)生和/或提供溫和的雌激素作用提供選擇性的雌激素控制。
本發(fā)明的這些及其他特征以及優(yōu)點(diǎn)將闡述在下列描述以及附屬權(quán)利要求中，并且會更加顯而易見。所述特征以及優(yōu)點(diǎn)可以通過尤其是附屬權(quán)利要求指出的儀器以及組合物得以實(shí)現(xiàn)和獲得。此外，本發(fā)明的特征以及優(yōu)點(diǎn)如下所述可以從本發(fā)明的實(shí)施中學(xué)習(xí)或者根據(jù)描述而更加顯而易見。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及人體內(nèi)雌激素的作用。尤其是，本發(fā)明涉及應(yīng)用食用組合物或添加劑選擇性抑制人體內(nèi)雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素的作用，其中所述組合物用一或者多種來自印度桑類，系統(tǒng)命名為檄樹的植物的加工產(chǎn)物進(jìn)行配制。
本發(fā)明描述并且特征在于選擇性抑制哺乳動物體內(nèi)雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素的作用以及治療并預(yù)防癌性細(xì)胞生長，以及降低促進(jìn)哺乳動物體內(nèi)雌激素依賴的癌性腫瘤生長的雌激素產(chǎn)生的方法以及制劑，通過預(yù)防施用包括至少一種加工形式的檄樹產(chǎn)品的營養(yǎng)制劑進(jìn)行。
通過將下列更詳細(xì)說明分成幾個部分可以更好地理解本發(fā)明的目前優(yōu)選實(shí)施方案并且更清楚其益處以及優(yōu)點(diǎn)，首先涉及有關(guān)檄樹的一般介紹，包括其來源，處理技術(shù)，以及健康益處，以及產(chǎn)生并生產(chǎn)用作本發(fā)明描述的營養(yǎng)制劑中關(guān)鍵活性成分的檄樹加工產(chǎn)物的方法，其次更詳細(xì)并特異性論述了包括用于提供雌激素作用的檄樹加工產(chǎn)物的制劑和組合物，第三更詳細(xì)并特異性論述包括用于抑制體內(nèi)芳香酶并降低/調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生的檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)制劑和組合物，以及施用這些營養(yǎng)劑抑制雌激素依賴的癌性細(xì)胞生長，增殖，轉(zhuǎn)移以及活力的各種方法。獲得的實(shí)驗(yàn)研究以及結(jié)果的實(shí)例也提供在本發(fā)明中。
因此，下面將本發(fā)明的描述分成三個副標(biāo)題，即“營養(yǎng)添加劑”，“提供雌激素作用”以及“抑制雌激素產(chǎn)生”。副標(biāo)題的使用僅僅是為了讀者的方便并不應(yīng)該理解為對本發(fā)明進(jìn)行限制。
營養(yǎng)添加劑本發(fā)明的實(shí)施方案與營養(yǎng)添加劑有關(guān)，所述添加劑由桑類植物，系統(tǒng)命名為檄樹(“檄樹”)，其是高10m的灌木或者小樹的產(chǎn)品加工而成。葉子相對排列從橢圓形到卵形。在肥厚球狀頭狀花簇中含有白色小花朵。果實(shí)大，肥厚并且呈卵形。成熟時，為乳白色并可食用，但是具有邪雜味以及臭味。該植物土生于東南亞并且在早期傳播到從印度到東波利尼西亞的廣泛地區(qū)。它在野外隨意生長，并且已經(jīng)可以培養(yǎng)在種植園中并且可在小塊土地上小規(guī)模的單獨(dú)生長。檄樹花朵小，白色，3到5個裂片，管狀，芳香并且約1.25cm長?；ǘ浒l(fā)育成由許多融合成卵形，橢圓或者圓塊狀體的小核果組成的復(fù)合果，蠟狀，白色或者淺綠色-白色淺黃色半透明的外殼。果實(shí)在其表面有“眼兒”類似于馬鈴薯。果實(shí)多汁，味苦，暗-黃色或者淺黃色-白色并且含大量紅-褐色，硬的長方形-三角形的有翼2-室果核，每個含四顆種子。
完全成熟的果實(shí)具有類似腐敗乳酪的明顯臭味。雖然一些國家的人將果實(shí)作為食物食用，檄樹植物最普遍的應(yīng)用是作為紅以及黃色染料來源。近來，已經(jīng)有人開始對檄樹植物的營養(yǎng)以及健康價值感興趣，下面將進(jìn)一步進(jìn)行描述。
因?yàn)橄瓨涔麑?shí)的應(yīng)用都不是食用的應(yīng)用，果實(shí)必須經(jīng)過加工使其適于人食用的口味并且包含在營養(yǎng)劑中用于提供雌激素的作用抑制芳香酶以及治療各種癌細(xì)胞。加工的檄樹果汁可以通過將種子以及果皮與成熟檄樹果汁以及果肉分離；由果汁過濾果肉；并且包裝果汁進(jìn)行制備?；蛘?，不用包裝果汁，可以將果汁立即作為另一食品的成分，冷凍或者經(jīng)巴氏滅菌。在一些實(shí)施方案中，果汁以及果肉可以煮成濃湯成為勻質(zhì)的混合物與其它成分混合。其它過程包含冷凍干燥果實(shí)以及果汁。果實(shí)以及果汁可以在產(chǎn)生最終的果汁產(chǎn)品期間重新組成。其它過程包含在食用之前風(fēng)干果實(shí)以及果汁。
本發(fā)明的實(shí)施方案包括來自檄樹葉子的檄樹產(chǎn)品的提取物以及將所述產(chǎn)品用于組合物中以膠囊或者片劑形式用于食用，從而抑制雌激素產(chǎn)生以及提供體內(nèi)的雌激素作用。
本發(fā)明的實(shí)施方案還包括應(yīng)用提取自檄樹植物的果汁和/或果泥果汁的應(yīng)用。在目前產(chǎn)生檄樹果汁的優(yōu)選過程中，果實(shí)或者經(jīng)過手工挑選或者通過機(jī)械設(shè)備挑選。果實(shí)可以在當(dāng)其直徑為至少一英寸(2-3cm)直至12英寸(24-36cm)時采集。果實(shí)優(yōu)選地具有深綠到黃綠色直至白色的色域并且具有中間的彩色層次。收獲以后并且在進(jìn)行任何加工之前徹底地清潔果實(shí)。
從0到14天使果實(shí)陳化或者老化，果實(shí)最適合保藏2到3天。通過將果實(shí)置于設(shè)備中使其不接觸地面進(jìn)行陳化或者老化。優(yōu)選地用布或者網(wǎng)狀材料在陳化期間覆蓋，但是不經(jīng)覆蓋也可以陳化。當(dāng)準(zhǔn)備進(jìn)一步加工時，果實(shí)顏色較淡，為淡綠，淡黃，白色或者半透明顏色。檢查果實(shí)的破損或者是否太過綠并且堅(jiān)硬。從合格的果實(shí)中分離破損以及堅(jiān)硬的綠果實(shí)。
陳化并且老化的果實(shí)優(yōu)選置入塑料襯里的容器中用于進(jìn)一步加工以及運(yùn)輸。老化果實(shí)的容器可以保藏0到30天。大多數(shù)果實(shí)容器加工之前保藏7到14天。在進(jìn)一步的加工之前容器可以任選地儲藏在冷藏條件下。果實(shí)從貯藏容器取出并通過人工或者機(jī)械分離器加工。將種子以及果皮與果汁和果肉分離。
果汁和果肉可以被包裝進(jìn)容器用于儲藏和運(yùn)輸?；蛘?，果汁和果肉可以立即加工成果汁終產(chǎn)品。容器可以儲藏在冷藏，冷凍或者室溫條件下。
檄樹果汁和果肉優(yōu)選地混合成勻質(zhì)混合物，然后可以與其它成分混合，諸如調(diào)味品，甜味劑，營養(yǎng)成分，植物性藥材和顏料。果汁終產(chǎn)品優(yōu)選地加熱并且在至少181(83℃)或者高212(100℃)的溫度進(jìn)行巴氏滅菌。
另一產(chǎn)品是濃縮或者稀釋形式的檄樹果泥以及果泥果汁。果泥基本上為與種子分離的果肉并且不同于本發(fā)明描述的果汁產(chǎn)品。
將每一產(chǎn)品填充并且密封到塑料，玻璃或者可以經(jīng)受加工溫度的另一適合材料的容器中。容器維持在填充溫度或者可以迅速冷卻然后置于運(yùn)輸容器中。運(yùn)輸容器優(yōu)選地用材料包裝并且包裝方式可以保持或者控制最終容器中產(chǎn)品的溫度。
果汁以及果肉可以經(jīng)由通過過濾設(shè)備將果肉與果汁分離而進(jìn)行進(jìn)一步加工。過濾設(shè)備優(yōu)選地包括但是不局限于，離心潷析器，具有從1微米直至2000微米大小的網(wǎng)孔，更優(yōu)選地小于500微米的網(wǎng)式濾器，壓濾機(jī)，反滲透過濾器，以及任何其它標(biāo)準(zhǔn)商用過濾裝置。操作過濾壓力優(yōu)選地為從0.1psig直至約1000psig。流速優(yōu)選地為從0.1g.p.m.直至1000g.p.m.，更優(yōu)選地在5以及50g.p.m之間。洗滌以及過濾濕果肉至少一次并且直至10次從果肉除去所有的果汁。濕果肉通常具有10到40重量百分?jǐn)?shù)的纖維含量。濕果肉優(yōu)選地在最小181(83℃)的溫度下巴氏滅菌然后包裝鐵桶裝用于更進(jìn)一步的加工或者制成高纖維含量的產(chǎn)品。
檄樹加工產(chǎn)物可以同時以膳食纖維形式存在。更進(jìn)一步的，檄樹產(chǎn)品可以從檄樹葉子的提取物(例如粉末浸膏)形式存在。更進(jìn)一步，檄樹加工產(chǎn)物可以油形式存在。檄樹油通常包含若干不同脂肪酸，如甘油三酯，諸如棕櫚酸，硬脂酸，油酸以及亞油酸脂肪酸及其他較少量存在的脂肪酸的混合物。此外，油優(yōu)選地包含抗氧化劑，從而抑制油的腐敗。優(yōu)選使用傳統(tǒng)的食用級抗氧化劑。
檄樹富含天然的成分。例如，天然的成分包含(來自葉子)丙氨酸，蒽醌，精氨酸，抗壞血酸，天冬氨酸，鈣，β-胡蘿卜素，半胱氨酸，胱氨酸，甘氨酸，谷氨酸，糖苷，組氨酸，鐵，亮氨酸，異亮氨酸，甲硫氨酸，煙酸，苯丙氨酸，磷，脯氨酸，樹脂，核黃素，絲氨酸，β-谷甾醇，硫胺素，蘇氨酸，色氨酸，酪氨酸，熊果酸以及纈氨酸；(來自花朵)金合歡素-7-鄰-β-d(+)吡喃葡萄糖苷，5，7-二甲基-芹菜甙元-4′-鄰-β-d(+)-吡喃半乳糖苷，以及6，8-二甲氧基-3-甲基蒽醌-1-鄰-β-鼠李糖基吡喃葡萄糖苷；(來自果實(shí))乙酸，車葉草苷，丁酸，苯甲酸，苯甲醇，1-丁醇，辛酸，癸酸，(E)6-十二碳烯-γ-內(nèi)酯，(Z，Z，Z)-8，11，14-eicosatrienoic酸，反油酸，癸酸乙酯，己酸乙酯，辛酸乙酯，棕櫚酸乙酯，(Z)-6-(乙基硫代甲基)苯，丁香酚，葡萄糖，庚酸，2-庚酮，己醛，己酰胺，己二酸，己酸，1-己醇，3-羥基-2-丁酮，月桂酸，苧烯，亞油酸，2-甲基丁酸，3-甲基-2-丁烯-1-醇，3-甲基-3-丁烯-1-醇，癸酸甲酯，反油酸甲酯，己酸甲酯，甲基-3-甲基硫代-丙酸酯，辛酸甲酯，油酸甲酯，棕櫚酸甲酯，2-甲基丙酸，3-甲基硫代丙酸，肉豆蔻酸，壬酸，辛酸，油酸，棕櫚酸，鉀，東莨菪素，十一烷酸，(Z，Z)-2，5-十一碳二烯-1-醇，以及vomifol；(來自根部)蒽醌，車葉草甙(rubichloric酸)，虎刺素，糖苷，morindadiol，morindine，桑酮，粘性物質(zhì)，nor-damnacanthal，茜根定，茜根定一甲基醚，樹脂，柚木醌二酚，甾醇，以及三羥基甲基蒽醌一甲基醚；(來自根樹皮)茜素，chlororubin，糖苷(戊糖，己糖)，morindadiol，morindanigrine，morindine，桑酮，樹脂狀物質(zhì)，茜根定一甲基醚，以及柚木醌二酚；(來自木頭)蒽棓酚-2，3-二甲基醚；(來自組織培養(yǎng))虎刺素，光澤汀，光澤汀-3-櫻草糖苷，以及桑酮-6β-櫻草糖苷；以及(來自植物)茜素，茜素-α-甲基乙醚，蒽醌，車葉草甙，己酸，morindadiol，桑酮，morindogenin，辛酸以及熊果酸。
近來，如提到的，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多健康價值源于使用含檄樹產(chǎn)品。檄樹的一個好處是它能夠分離并且產(chǎn)生賽洛寧(Xeronine)，其是體內(nèi)具生理活性的相對小的生物堿。賽洛寧實(shí)際上存在于植物，動物以及微生物所有健康的細(xì)胞中。即使檄樹具有可忽略量的游離賽洛寧，但是它含顯著量的賽洛寧前體，稱作前賽洛寧。更進(jìn)一步的，檄樹含惰性形式的酶前賽洛寧酶，其從前賽洛寧釋放賽洛寧。夏威夷大學(xué)的R.M.Heinicke名為“The Pharmacologically Active Ingredient of Noni”的文章指出檄樹是用于分離賽洛寧的最好原料，因?yàn)榍百惵鍖幰约扒百惵鍖幟傅慕Y(jié)構(gòu)阻斷。這些結(jié)構(gòu)阻斷有助于體內(nèi)分離以及產(chǎn)生賽洛寧。必需營養(yǎng)賽洛寧的功能增強(qiáng)四倍。
首先，賽洛寧用來活化小腸中存在的休眠酶。這些酶對有效的分解，平穩(wěn)神經(jīng)以及全部的身體以及情緒活力至關(guān)重要。第二，賽洛寧保護(hù)并且保持蛋白質(zhì)分子的形狀以及柔軟度以便使其通過細(xì)胞壁并且用來形成健壯組織。沒有這些養(yǎng)分進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞不能有效地進(jìn)行工作。沒有前賽洛寧產(chǎn)生賽洛寧，細(xì)胞并且隨后身體將會受損害。第三，賽洛寧有助于細(xì)胞膜氣孔的擴(kuò)大。這種擴(kuò)大可以使大鏈肽(氨基酸或者蛋白)被吸收入細(xì)胞中。如果這些鏈不被利用，他們將變成廢物。第四，由前賽洛寧制成的賽洛寧有助于氣孔擴(kuò)大從而更好吸收養(yǎng)分。
每一組織具有含具有吸收賽洛寧受體位點(diǎn)的蛋白的細(xì)胞。某些蛋白是惰性形式的酶其需要吸收賽洛寧活化。因此通過將體內(nèi)原膠原酶系統(tǒng)轉(zhuǎn)化成特異性蛋白酶，賽洛寧迅速地并且安全地從皮膚除去死亡的組織。其它蛋白與賽洛寧反應(yīng)后成為可能的激素受體位點(diǎn)。因此檄樹使人體感覺良好的作用可能是由于賽洛寧將某些大腦受體蛋白轉(zhuǎn)化成用于幸福激素即內(nèi)啡肽吸收的活性位點(diǎn)引起的。其它蛋白通過腸中，血管及其他身體器官的膜形成氣孔。這些蛋白吸收賽洛寧改變氣孔的形狀因此影響分子通過膜。
因?yàn)樗脑S多好處，檄樹已經(jīng)已知可以對患癌癥，關(guān)節(jié)炎，頭疼，消化不良，惡性腫瘤，骨裂，高血壓，糖尿病，疼痛，感染，哮喘，牙痛，生理缺陷，免疫系統(tǒng)衰竭等的個體提供大量的有益作用。
含檄樹的組合物可以為適合于口服使用，系統(tǒng)施用，注射等的形式。對于口服組合物而言，這種組合物可以例如為片劑，或者糖錠，水或者油懸浮液，可分散性粉劑或者顆粒，乳化劑，糖漿或者酏劑形式存在。設(shè)計(jì)用于口服使用的組合物可以根據(jù)本領(lǐng)域生產(chǎn)檄樹組合物的任一已知的方法制備并且這種組合物可以含一或者多種選自脫硫劑，調(diào)味劑，顏料以及防腐劑的試劑。片劑含與適于片劑生產(chǎn)的無毒藥用賦形劑摻合的檄樹。這些賦形劑可以例如為惰性的稀釋劑，造粒以及崩解劑，粘合劑以及脫模劑。片劑可以是未涂敷的或者可以通過已知的技術(shù)涂敷從而延緩胃腸道內(nèi)分解以及吸收由此提供較長周期的持續(xù)作用。例如，可以采用時間延遲材料諸如單硬脂酸甘油酯或者二硬脂酸甘油酯。
水懸劑含與適于水懸劑生產(chǎn)的賦形劑摻合的檄樹。這種賦形劑為懸浮劑，例如為羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素，羥基-丙基甲基纖維素，海藻酸鈉，聚乙烯-吡咯烷酮，黃蓍樹膠以及阿拉伯樹膠；分散或者潤濕劑可以為天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者氧化烯與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者環(huán)氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物，例如十七碳乙烯-氧化鯨蠟醇，或者環(huán)氧乙烷與來源于脂肪酸的偏酯以及己糖醇的縮合產(chǎn)物諸如聚氧乙烯一油酸山梨糖醇酯，或者環(huán)氧乙烷與來源于脂肪酸的偏酯以及己糖醇酐的縮合產(chǎn)物，例如聚乙烯單油酸山梨醇酐酯。
因此，本發(fā)明的實(shí)施方案選擇性抑制雌激素產(chǎn)生并提供雌激素的作用。在一些實(shí)施方案中，液體或者干提出物包括來自檄樹的產(chǎn)物。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，產(chǎn)物提供于膠囊中有助于食用。在一些實(shí)施方案中，每日至少食用1克只要治療癥狀需要。
提供雌激素作用如上所述，本發(fā)明涉及人體內(nèi)雌激素作用的控制。尤其是，本發(fā)明涉及應(yīng)用食用組合物或添加劑選擇性抑制雌激素產(chǎn)生以及提供人體內(nèi)雌激素的作用，其中所述組合物用一或者多種來自桑類，系統(tǒng)命名為檄樹的植物的加工產(chǎn)物進(jìn)行配制。
植物雌激素為某些存在于植物內(nèi)的化合物，其類似天然雌激素的作用。富含植物雌激素的植物為黑升麻(Black Cohosh)(Cimicifugaracemosa)，大豆(Glycine max)，紅三葉草(Trifolium pratense)以及酒花(humulus lupulus)。我們的數(shù)據(jù)顯示檄樹(果實(shí)以及葉子)還含雌激素的活性。有證據(jù)說明食用富含植物雌激素的食物的婦女很少有與絕經(jīng)有關(guān)的問題。
利用兩個體外分析研究檄樹的乙醇葉浸出物的雌激素的活性。(1.)在分離的雌激素受體α以及-β(ER-α，ER-β)上置換雌激素；以及(2.)誘導(dǎo)Isikawa細(xì)胞(人子宮內(nèi)膜癌)的堿性磷酸酶。使用檄樹(來源于Tahiti)的粉碎干燥葉子的酒精提出物。1ml的提取物代表100μl的葉子為了進(jìn)行雌激素置換，購買重組體ER-α以及ER-β。用氚示蹤的雌二醇飽和受體。添加試驗(yàn)物質(zhì)后測定游離的未結(jié)合的放射性強(qiáng)度。使用Kuiper等人1998.Kuiper GG，Lemmen J G，Carlsson B，Corton J C，Safe S H，van der Saag P T，van der B B以及Gustafsson J A(1998)Interaction of Estrogenic Chemicals and Phytoestrogens with EstrogenReceptor Beta.Endocrinology 139pp 4252-4263的方法。
結(jié)果顯示觀察到來自兩個受體的雌二醇的強(qiáng)置換。置換達(dá)到100％水平，對于植物雌激素是顯著的。葉浸出物與ER-α的親合性比ER-β幾乎高5-倍。
堿性磷酸酶的誘導(dǎo)在雌激素受體的控制下。眾所周知雌二醇對骨重塑具有調(diào)節(jié)功能。堿性磷酸酶為這些過程的關(guān)鍵酶。Ishikawa細(xì)胞被用作研究化合物對雌激素活性的競爭作用的模型(Wober J，Weisswange I and Vollmer G(2002)Stimulation of Alkaline PhosphataseActivity in Ishikawa Cells Induced by Various Phytoestrogens andSynthetic Estrogens.J Steroid Biochem Mol Biol 83pp 227-233)。
檄樹-葉子-提取物對Ishikawa細(xì)胞中的堿性磷酸酶顯示適度但是顯著的誘導(dǎo)作用。最大的效果在0.3ml/ml(表示30mg干燥葉子/ml)實(shí)現(xiàn)。高濃度引起酶誘導(dǎo)的抑制。
因此，在兩個體外分析中驗(yàn)證檄樹的葉子的酒精提出物的雌激素活性，通常被用來研究雌激素的活性。兩個分析都顯示正效應(yīng)。結(jié)果暗示Noni葉子隨治療由缺乏雌激素(絕經(jīng)，卵巢切除)引起的癥狀的應(yīng)用遠(yuǎn)景。
植物雌激素以及雌激素類分子能夠結(jié)合雌激素受體，其隨后模擬細(xì)胞以及組織內(nèi)雌激素的活性。近來，來自大豆植物的異黃酮顯示出與具有健康價值，沒有有害作用的選擇性的雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)相關(guān)的選擇性。健康價值可以包含預(yù)防乳腺癌以及可以引起生長抑制并且有時引起生長抑制體外以及體內(nèi)前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞程序性死亡以及骨質(zhì)疏松癥。
一些植物雌激素?fù)?jù)報道具有抗產(chǎn)雄性征的效果以及抗氧化劑的活性。該機(jī)制包含抑制5α-還原酶，17β-羥甾醇脫氫酶，芳香酶，酪氨酸特異性蛋白激酶以及DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II。雌激素類分子生物活性的一種最好的解釋是植物雌激素是弱的雌激素但是誘導(dǎo)一些不同類型的ER激動劑以及ER拮抗劑活性，為細(xì)胞范圍的以及促進(jìn)劑依賴的，顯示這些弱的雌激素化合物將誘導(dǎo)組織特異性的體內(nèi)ER激動劑或者拮抗劑的活性。
若干研究已經(jīng)證明某些植物雌激素可以抑制酶將雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素，即芳香酶以及17β-羥基甾醇脫氫酶類型1&5而不是其它的酶。如下所述，具有檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)添加劑抑制芳香酶。這種營養(yǎng)添加劑還提供雌激素的作用。
Tahitian Noni果汁比pycnogenol具更高的抗氧化劑特性。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)類似于雌激素起作用但是沒有副作用的化合物可以預(yù)防小鼠體內(nèi)脆骨癥。該發(fā)現(xiàn)可以給因?yàn)榕c激素替代治療(HRT)相關(guān)的癌癥以及心臟病的危險，停止利用HRT但非常需要的年長婦女提供一些幫助以及安慰。
過去用雌激素以及雌激素衍生物的激素替代治療(HRT)被用作抗骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防手段并且在一些國家因?yàn)楦弊饔靡呀?jīng)不允許使用。因此，由于嚴(yán)重的癥狀限制了激素替代治療，但是婦女還愿意利用它們治療她們的輕微癥狀因?yàn)樗齻儾幌矚g這些癥狀。
Tahitian NoniPuree Juice Concentrate(TNPJC)干燥形式被用于評價ICT衍生的未成熟雌性小鼠可能的雌激素激動作用，每日一次口服最大耐受量的4000mg/kg，連續(xù)3日。TNPJC的干燥形式源于RotorVap，加壓并且低溫。
人們發(fā)現(xiàn)4000mg/kg的施用劑量引起子宮濕重(非干重)相對于介質(zhì)組(0.03ma/kg的β-雌二醇3-苯甲酸酯使子宮的濕重增加83％)增加約50％，顯示出可能的雌激素激動活性。還暗示為劑量依賴的方法。
大劑量干燥形式的TNPJC引起增加50％而微小劑量(0.03mg/kg)的雌二醇3-苯甲酸酯引起以上所觀察增重的顯著增加)。
簡要地說，Tahitian Noni-Puree果汁濃縮物的抗芳香酶效果，Tahitian Noni的抗癌，抗氧化劑及其他有益的效果避免了雌激素類化合物的副作用而且在設(shè)計(jì)的劑量具有雌激素類的效果，其可以解釋對絕經(jīng)前后以及絕經(jīng)后婦女的益處諸如預(yù)防骨關(guān)節(jié)炎，骨質(zhì)疏松癥及其他上述的益處。
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，具有檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)添加劑提供溫和的雌激素效果。天然的激素具有非常迅速的周轉(zhuǎn)時間因此通過體內(nèi)過程排放，所以如果為了保證迅速調(diào)節(jié)系統(tǒng)，不得不控制作為激素的調(diào)節(jié)劑，唯一方法是將其除去以便由系統(tǒng)釋放新的激素。因此，如果攝取天然雌激素，這種組分的半衰期非常短。因此，為了提供恒定水平的激素，必須攝取類似天然激素活性的化合物，但是不如此迅速地從系統(tǒng)中除去，因而需要在分子上進(jìn)行一些化學(xué)改變。
例如，類固醇在該系統(tǒng)含1雌激素組并且從血液除去雌激素的天然酶不能轉(zhuǎn)化衍生物，其在體內(nèi)保持較長時間的活性。為進(jìn)行幾天或者幾周的持續(xù)治療，不能使用天然激素，不得不攝取更慢從身體除去的衍生物。因此，可以使用具有檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)添加劑。它起到類似于天然激素的作用并且非常強(qiáng)效。該作用非常強(qiáng)效并且有時超過天然的激素。并且植物雌激素從化學(xué)的觀點(diǎn)不是雌激素但是從生物學(xué)的觀點(diǎn)是雌激素。因?yàn)樗鼈兤鹛峁┐萍に氐淖饔?，它們參與該系統(tǒng)，并且反應(yīng)或者結(jié)果與雌激素類似但是不同。作用較弱-即不具有作用峰值。
在雌激素的情況下，它們還可以拮抗雌激素的作用。因此現(xiàn)在有大量關(guān)于重要的雌激素適合性的討論。食用富含植物雌激素的食物的婦女降低乳腺癌的發(fā)生并且具有較少與絕經(jīng)有關(guān)的問題，這種植物雌激素存在于多種天然食物中，特別是大豆及其他植物。大豆富含植物雌激素并且日本以及中國的婦女食用大量大豆產(chǎn)品。
根據(jù)本發(fā)明的至少一些實(shí)施方案，具有檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)添加劑可以提供于膠囊或者乳油中，諸如透皮或者透粘膜乳油中。
咽下時檄樹加工葉子的吸收率較高。為了發(fā)現(xiàn)雌激素的活性化合物，必須具有某一終點(diǎn)。在體內(nèi)或者細(xì)胞中起作用的雌激素在細(xì)胞內(nèi)存在受體并與受體結(jié)合，并且雌激素以及受體的復(fù)合物與DNA結(jié)合然后引發(fā)某些蛋白的誘導(dǎo)，其后由細(xì)胞產(chǎn)生所述蛋白，這就是作用機(jī)理。因此，可以遵循這些機(jī)制以便發(fā)現(xiàn)雌激素的活性。
首先發(fā)現(xiàn)化合物結(jié)合受體以便捕捉用放射性的天然雌激素受體飽和的受體，然后添加另一化合物到受體，化合物將雌激素從受體釋放，因?yàn)樘烊淮萍に匾约傲硪粋€雌激素競爭物之間在受體位點(diǎn)存在競爭。如果化合物結(jié)合，將釋放雌激素?？梢员砻髟诘谝徊街薪Y(jié)合了，但是不能證明在下一步是否結(jié)合-雌激素受體復(fù)合物是否結(jié)合DNA以及引發(fā)某些蛋白的誘導(dǎo)百分比。
化合物可以與雌激素受體結(jié)合然而不起到雌激素的作用，如果確實(shí)這樣的話將作為拮抗劑起作用。然后它抑制雌激素的作用因?yàn)樗紦?jù)了受體，因此雌激素沒有發(fā)現(xiàn)游離的受體，于是就不能起作用。因此我們尋找的是與受體結(jié)合然后起雌激素作用的化合物。它誘導(dǎo)某些蛋白的作用。因此我們將進(jìn)行兩種分析。首先我們研究與受體的結(jié)合其次尋找作用終點(diǎn)。
檄樹葉子的提取物類似雌激素起作用從而提供雌激素的作用。然而，其作用比天然雌激素弱并且因此不具有副作用。
在激素替代治療期間，缺點(diǎn)是它可以誘導(dǎo)雌激素依賴的細(xì)胞，例如乳房，子宮，卵巢的癌癥，如果用高劑量雌激素治療或者攝取的是源自于天然雌激素但是作用持續(xù)時間較長的合成雌激素，因?yàn)榕判箿p慢。如果用高劑量雌激素治療婦女經(jīng)歷一段時間，大概幾年，然后乳腺癌或者子宮癌或者卵巢癌特別是乳腺癌以及子宮內(nèi)膜癌的出現(xiàn)增加。
因此我們設(shè)法拒絕激素替代治療但是，婦女需要另一種治療方法替代激素替代治療，并且它們較弱，因此這些化合物的重要性在于如果你有高濃度的天然雌激素，就會起到類似拮抗劑的作用，其意味著它們減弱天然雌激素的活性并且如果你有非常底濃度的天然雌激素，它們將起到雌激素的作用，提供雌激素的作用或者具有雌激素的作用。因此意思指幫助婦女不經(jīng)受極端高雌激素濃度或者極低雌激素濃度情況的極限情況。
婦女絕經(jīng)開始，有時持續(xù)流血停止之前通常經(jīng)受的癥狀包含潮熱，盜汗和/或抑郁。它們具有非常強(qiáng)的缺血以及抑郁癥。另一長期效應(yīng)是骨質(zhì)疏松癥因此骨質(zhì)永久改變因此意味著骨質(zhì)疏松并且再次固化。有2種細(xì)胞負(fù)責(zé)，稱作成骨細(xì)胞以及破骨細(xì)胞。成骨細(xì)胞細(xì)胞負(fù)責(zé)骨的重塑，破骨細(xì)胞負(fù)責(zé)骨質(zhì)的溶解，因此是非常重要的，因?yàn)槌晒羌?xì)胞的鈣水平應(yīng)該在恒定水平并且骨是鈣水平的緩沖物。如果血液中鈣水平減少骨質(zhì)將溶解產(chǎn)生并且提高的鈣水平。如果婦女懷孕，胚胎消耗來自血液的大量鈣提取物，因?yàn)榕咛ケ仨殬?gòu)改造其自身的骨架。因此在懷孕期間母親骨架中骨質(zhì)的周轉(zhuǎn)以及雌激素必須提高，有高水平的雌激素并且雌激素對于這些成骨細(xì)胞的這個過程非常重要，所述成骨細(xì)胞對于骨的重塑非常重要并且絕經(jīng)期間雌激素水平開始下降于是重塑過程變得較弱，隨后婦女喪失骨質(zhì)并且患上骨質(zhì)疏松癥。
用酶以及放射性配體結(jié)合分析評價化合物MDA-6(PT#1026431)的活性。本研究中使用的方法來自于最佳化可靠性以及再生性的科學(xué)文獻(xiàn)。比照標(biāo)準(zhǔn)作為每一分析不可分割的部分確保獲得結(jié)果的有效性。在本報告“方法”部分描述的條件下進(jìn)行分析。每一分析的參考文獻(xiàn)在“參考文獻(xiàn)部分”。如果任一這些部分沒有最初伴隨報道要求提供，請與我們聯(lián)系，數(shù)字對應(yīng)任一這些報道部分的打印輸出的數(shù)字。
本發(fā)明出現(xiàn)的IC50值由利用Data Analysis ToolboxTM(MDLInformation Systems，San Leandro，CA，USA)的非線性最小二乘回歸分析確定。本發(fā)明存在的抑制常量(Ki)，Ki值利用Cheng以及Prusoff的公式(Cheng，Y.，Prusoff，W.H.，Biochem.Pharmacol.223099-3108，1973)利用觀察的試驗(yàn)化合物的IC50，用于該分析的放射性配體的濃度，以及配體的Kd的經(jīng)驗(yàn)值(在MDS Pharma Services用實(shí)驗(yàn)方法獲得的)進(jìn)行計(jì)算。本發(fā)明使用的限定競爭性結(jié)合曲線斜率的Hill系數(shù)(nH)利用Data Analysis ToolboxTM進(jìn)行計(jì)算。Hill系數(shù)顯著不同于1.0，可能暗示結(jié)合置換不遵循與單個結(jié)合位點(diǎn)的質(zhì)量作用法則。IC50，Ki和/或nH數(shù)據(jù)的存在沒有平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)時，數(shù)據(jù)不足以定量，并且存在的值(IC50，Ki，nH)應(yīng)該謹(jǐn)慎解釋。
歸納的結(jié)果提供在下表中，用測定的IC50和/或Ki值的效力級系表示。存在的生物化學(xué)分析結(jié)果表示為貫穿報道的特異性結(jié)合或者活性的抑制百分比。所有的其它結(jié)果用分析定量方法的術(shù)語表示。對于初級分析而言，只有由分析標(biāo)準(zhǔn)斷定具有有效響應(yīng)的低濃度顯示在歸納中。適用時，任一第二分析產(chǎn)生滿足重要性標(biāo)準(zhǔn)的最低劑量/濃度，如果無活性，顯示最高的劑量/濃度不滿足重要性標(biāo)準(zhǔn)。除非另有要求，用定量數(shù)據(jù)(例如，IC50±SEM，Ki±SEM以及nH)一式兩份的初級篩選顯示可用于個體需要的分析。采用篩選包時，用半定量分析數(shù)據(jù)(例如，估算的IC50，Ki以及nH)一式兩份的初級篩選顯示適用(4log單位的濃度范圍)；進(jìn)行適用的第二功能分析(30μM)并且只有當(dāng)初級分析的活性在低于初期試驗(yàn)濃度1log單位時＞50％才能確定MEC或者M(jìn)IC。有效響應(yīng)(生物化學(xué)分析中≥50％抑制或者刺激)顯示在下列初級分析中。
*為標(biāo)準(zhǔn)平均誤差，其結(jié)果是基于多個獨(dú)立的測定。
gp＝豚鼠；hum＝人*批料表示相同的分析中同時試驗(yàn)的化合物。
表示滿足顯著性標(biāo)準(zhǔn)的項(xiàng)目t結(jié)果≥50％刺激或者抑制的為粗體。(負(fù)值相應(yīng)于刺激結(jié)合或者酶活性R＝附加的注解136010 Lipozygenase 5-LO來源人PBMN細(xì)胞底物來自PBMNC的內(nèi)源性花生四烯酸介質(zhì)100％H2O預(yù)保溫時間/溫度15分鐘@37℃誘導(dǎo)時間/溫度15分鐘@37℃培養(yǎng)緩沖液HBSS(Hank’s Balanced Salt Solution)
定量方法LTB4的EIA定量顯著性標(biāo)準(zhǔn)≥50％的最大刺激或者抑制226010 Estrogen ER來源人重組體昆蟲Sf9細(xì)胞配體0.5nM3H雌二醇介質(zhì)100％H2O誘導(dǎo)時間/溫度2小時@25℃培養(yǎng)緩沖液10mM Tris-HCl，pH 7.5，10％甘油，1mM DTT，1mg/ml BSA非特異性的配體1μM己烯雌酚Kd0.2nM*Bmax1400pmole/mg蛋白*特異性結(jié)合85％*定量方法放射性配體結(jié)合顯著性標(biāo)準(zhǔn)≥50％的最大刺激或者抑制250600 Leukotriene D4來源Duncan Hartley衍生的豚鼠肺配體0.2nM3H白細(xì)胞三烯D4(LTD4)介質(zhì)100％H2O誘導(dǎo)時間/溫度60分鐘@25℃培養(yǎng)緩沖液50mM Tris-HCl，0.01％BSA，5mM CaCl2，5mMMgCl2，100μg/mL桿菌肽，1mM苯甲基磺酰氟非特異性配體0.1μM白細(xì)胞三烯D4(LTD4)Kd0.2nM*Bmax0.24pmole/mg蛋白*特異性結(jié)合85％*定量方法放射性配體結(jié)合顯著性標(biāo)準(zhǔn)≥50％的最大刺激或者抑制226050 Estrogen ERβ來源人重組體昆蟲Sf9細(xì)胞配體0.5nM3H雌二醇介質(zhì)100％H2O誘導(dǎo)時間/溫度2小時@25℃培養(yǎng)緩沖液10mM Tris-HCl，pH 7.5，10％甘油，1mM DTT，1mg/ml BSA非特異性配體1μM己烯雌酚Kd0.13nM*Bmax3000pmole/mg蛋白*特異性結(jié)合90％*定量方法放射性配體結(jié)合顯著性標(biāo)準(zhǔn)≥50％的最大刺激或者抑制271200 Serotonin 5-HT1B來源Wistar大鼠大腦皮質(zhì)配體10pM125I CYP介質(zhì)100％H2O誘導(dǎo)時間/溫度90分鐘@37℃培養(yǎng)緩沖液50mM Tris-HCl，154mM NaCl，10μM巴吉林，30μM異丙腎上腺素，pH 7.7非特異性配體10μM血清素(5-HT)Kd0.19nM*Bmax0.142pmole/mg蛋白*特異性結(jié)合70％*定量方法放射性配體結(jié)合顯著性標(biāo)準(zhǔn)≥50％的最大刺激或者抑制因此，雌激素受體顯示更大親合性結(jié)合NSAID配體的較強(qiáng)能力。已經(jīng)開發(fā)了許多與激動劑以及拮抗劑混合的配體，并且用于治療絕經(jīng)后婦女。而且，類固醇雌激素不僅在生物體生長中起重要作用而且在某些細(xì)胞的分化，雌雄生殖系統(tǒng)發(fā)揮功能，對成骨細(xì)胞的正效應(yīng)及其活性，心血管以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起重要作用。
如上所述的作用由兩種核內(nèi)蛋白諸如ERα以及ERβ介導(dǎo)。雌激素或者雌激素類分子與核內(nèi)蛋白的結(jié)合引起結(jié)構(gòu)的構(gòu)象變化，其隨后使配體-受體復(fù)合物二聚化，隨后引起基因在它們控制的DNA位點(diǎn)的活化。
文獻(xiàn)中已經(jīng)記載異雌激素，植物雌激素以及合成雌激素能夠與這些雌激素受體結(jié)合，其隨后以特異性方式模擬人雌激素在特定的細(xì)胞以及組織中的活性，諸如眾所周知在生殖系統(tǒng)中的活性。然而，雌激素以及雌激素類分子及其受體可以作用于全身的不同區(qū)域尤其是腦。雌激素以及雌激素類分子起有效神經(jīng)保護(hù)抗氧化劑的作用，其可以活化基因的轉(zhuǎn)錄用于直接或者間接神經(jīng)保護(hù)。
通過這些核蛋白受體起作用的所有化合物可以對某些組織(諸如骨組織)具有刺激作用(激動劑)(其它的情況為拮抗劑)以及在其它組織中(乳房以及子宮癌的情況下)為封閉效應(yīng)(拮抗劑)。一些最近的科學(xué)研究暗示ERα形式比ERβ在調(diào)節(jié)心節(jié)律以及頻率方面更重要。因此已經(jīng)有一些建議考慮選擇性的拮抗劑ERα以便有效地控制心臟的活動。
進(jìn)行試驗(yàn)以在放射性配體結(jié)合分析中評價Tahitian NoniPureeJuice濃縮物的活性從而顯示Tahitian NoniPuree Juice濃縮物&Tahitian NoniJuice對雌激素受體ERα以及ERβ的作用，結(jié)果如下1％Tahitian Noni Puree Juice濃縮物＝99％抑制ERα，IC500.31％1％Tahitian Noni Puree Juice濃縮物＝99％抑制ERβ，IC500.28％2％Tahitian Noni果汁＝20％抑制ERα2％Tahitian Noni果汁＝40％抑制ERβ這些結(jié)果似乎暗示在這些體外研究中Tahitian NoniJuice與Tahitian Noni Puree Juice濃縮物相比分別對雌激素受體ERα以及ERβ有劑量依賴的作用。此外，這些結(jié)果暗示Tahitian NoniJuice以及Tahitian Noni Puree Juice濃縮物對心臟保護(hù)，治療絕經(jīng)后癥狀，骨關(guān)節(jié)炎，乳腺癌，子宮癌以及結(jié)腸癌有好處。
以下論述了檄樹加工產(chǎn)物的雌激素激動劑活性。意味著雌激素是具有許多特性的激素，這種平衡體內(nèi)系統(tǒng)所需的。因此為了將這些特征結(jié)合，人具有神經(jīng)系統(tǒng)以及激素系統(tǒng)并且雌激素尤其可用來使身體生育，意思是指生育嬰孩，并且雌激素有助于每一階段，意思指首先是使婦女被男子吸引，這種雌激素助于她的生長，并且進(jìn)行皮膚變白等等男子所喜歡的改變，并且在體內(nèi)調(diào)節(jié)不同的細(xì)胞，因此每個器官特異于該發(fā)育過程的特定功能，例如在子宮的情況下子宮必須對收集卵敏感然后對其滋養(yǎng)于是當(dāng)胚胎生長血管時必須長出子宮并且滲入胚胎以便對其滋養(yǎng)因此雌激素可以誘導(dǎo)細(xì)胞的長出然后在懷孕期間長出全部的器官，子宮必須增加質(zhì)量，促進(jìn)該器官的細(xì)胞分裂。
乳房是一樣的。嬰兒出生后乳房必須增大以便產(chǎn)奶，因此雌激素也誘導(dǎo)這些細(xì)胞的生長。并且癌癥從細(xì)胞生長開始，但是通常細(xì)胞知道何時停止生長但是有時它們偶然進(jìn)行了突變，于是就不知道何時停止生長，并且誘導(dǎo)細(xì)胞生長的化合物可以幫助癌細(xì)胞形式腫瘤，這就是為什么雌激素提高這些器官的患癌率因?yàn)槠渲械囊粋€規(guī)則就是誘導(dǎo)子宮以及乳房細(xì)胞的生長。還有類似的情況就是肝臟，例如它誘導(dǎo)特定蛋白angiotenzene的合成，所述蛋白angiotenzene用來調(diào)節(jié)血壓以及許多其它的功能。它也調(diào)節(jié)腦內(nèi)的過程用于控制情緒。因此如果有vistral，雌激素使婦女感到愉悅，因?yàn)樗鼈儽仨毦哂蟹e極的情緒生育嬰兒如果有雌激素的vistral，她們常常抑郁。同時，在男子體內(nèi)雌激素也具有一些活性，這種雌激素不是純粹的雌性激素，男子也具有雌激素。并非濃度并且絕經(jīng)后婦女的雌激素濃度降低到男子具有的雌激素的濃度。于是差異消失。
男性通常不用合成雌激素進(jìn)行治療，只有當(dāng)它們患前列腺癌時，因?yàn)槟行郧傲邢俚那傲邢偌?xì)胞中睪丸激素對男性性功能就如同雌激素對女性性功能的作用，尤其是睪丸激素促進(jìn)前列腺的細(xì)胞生長，并且如果有惡性細(xì)胞并且有高水平的睪丸激素，前列腺細(xì)胞就可以長出腫瘤并且產(chǎn)生前列腺癌，睪丸激素以及雌激素是拮抗劑，并且如果用雌激素治療男性就會拮抗睪丸激素并且降低前列腺細(xì)胞的生長。這就是為什么患前列腺癌的男性用雌激素進(jìn)行治療的理由。但是同時他們開始出現(xiàn)雌性特征，乳房增大并且胡須不再生長，因此大量男子不喜歡的癥狀開始出現(xiàn)，但是自身的雌激素不產(chǎn)生這些癥狀因?yàn)樗鼈兤鸱磻?yīng)。因此具有自身的雌激素，男性不經(jīng)受性功能的任何損失或者性征的任何改變。另一方面自身的雌激素決不降低前列腺細(xì)胞的生長并且降低患前列腺癌的危險，可能是男性體內(nèi)表達(dá)自身雌激素的另一益處。
評價試驗(yàn)物質(zhì)TNCONC在ICR衍生的未成熟雌性小鼠可能的雌激素激動作用，每日一次口服最大耐受劑量4000mg/kg，連續(xù)3日。對于TNCONC觀察到由子宮濕重改變顯示的顯著的雌激素激動活性(相對于介質(zhì)治療組增加50％)。每一試驗(yàn)用動物顯示出腸道擴(kuò)大；然而在試驗(yàn)期間沒有觀察到行為變化。推斷4000mg/kg P0的TNCONC在小鼠體內(nèi)顯示顯著的雌激素激動活性。
下列涉及材料以及設(shè)備1.試驗(yàn)物質(zhì)以及劑型-由Morinda，Inc.提供的TNCONC溶于2％Tween 80/0.9％NaCl中。為了試驗(yàn)，每日腹膜內(nèi)施用4000mg/kg的最大耐受量，連續(xù)3日，使用10ml/kg的劑量體積。
2.動物-使用由MDS Pharma Services-Taiwan有限公司提供的雌性ICR小鼠。5只動物的空間分配是29×18×13cm。在使用之前在MDS Pharma Services-臺灣實(shí)驗(yàn)室中將動物飼養(yǎng)在APECR籠中并在控制溫度(22℃-24℃)以及濕度(60％-80％)環(huán)境下培養(yǎng)，12小時的照明黑暗循環(huán)至少一周。自由進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室，保證大鼠(Lab Diet，RodentDiet，PMI Nutrition International，USA)的飲食以及飲用水。通常根據(jù)International Guiding Principles for Biomedical Research InvolvingAnimals(CIOMS Publication No.ISBN 92 90360194，1985)進(jìn)行所有的這些工作，包括飼養(yǎng)，試驗(yàn)以及處置動物，3.化學(xué)藥品-β-雌二醇3-苯甲酸酯(Sigma，USA)，無熱原的Salin(Sinton，Taiwan)以及Tween 80(Wako，Japan)。
4.設(shè)備-動物箱(ShinTeh，R.0.C.)，電子秤0.0001g-9.9999g(R16OP，Sarturius，德國)，玻璃注射器(1ml，0.5ml Mistuba，日本)，皮下注射針(26G×1”，TOP公司，日本)，小鼠口腔針，不銹鋼剪刀(Klappencker.德國)。
以4000mg/kg IP的最大耐受量給一組5ICR衍生的13±1g重的未成熟雌性小鼠連續(xù)3日施用試驗(yàn)物質(zhì)。終劑量后24小時處死動物并測定每一動物的子宮濕重。子宮濕重相對于對照組動物增加50％或更多(≥50％)顯示出可能的雌激素激動劑活性。下列表提供了所進(jìn)行研究的結(jié)果表1方案#531000小鼠的雌激素激動作用
給重13±1g雌性未成熟小鼠IP施用介質(zhì)或者試驗(yàn)物質(zhì)連續(xù)3日。終劑量后24小時處死動物并確定每一動物的子宮濕重。子宮濕重相對于該介質(zhì)治療組動物增加50％或更多(≥50％)(括號中顯示的)顯示出可能的雌激素激動劑活性。注解雌二醇治療組的值可與歷史介質(zhì)對照口服2％吐溫80(子宮濕重為16.5mg)組相比。
因此，如上所述，制備的食用組合物或者添加劑包含一或者多種來自印度桑類植物，系統(tǒng)命名為檄樹的加工產(chǎn)物并用來提供人體的雌激素作用。
抑制雌激素產(chǎn)生下面描述了用于抑制芳香酶以及用于治療并預(yù)防哺乳動物體內(nèi)癌性細(xì)胞生長，以及降低促進(jìn)雌激素依賴的癌性腫瘤生長的哺乳動物體內(nèi)雌激素產(chǎn)生的方法以及制劑，每一通過預(yù)防施用包括至少一種加工形式的檄樹產(chǎn)品的營養(yǎng)制劑進(jìn)行。
本發(fā)明的實(shí)施方案通過提供用印度桑類植物的檄樹配制的營養(yǎng)組合物或者芳香酶抑制劑或者雌激素依賴的癌細(xì)胞治療劑提出了芳香酶抑制劑。檄樹包含在不同載體或者營養(yǎng)組合物值施用于體內(nèi)治療病人。例如，抑制劑可以被咽下，注射導(dǎo)入靜脈內(nèi)，或相反根據(jù)合適并直接的方式內(nèi)在化。
在一個示范性的實(shí)施方案中，本發(fā)明的營養(yǎng)組合物包括一種或者多種檄樹加工產(chǎn)物，存在量介于約0.01和100重量百分比之間，優(yōu)選地介于0.01和95重量百分比之間。以下提供了制劑的若干實(shí)施方案。然而，它們只是示范性的，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到也可以包括其他含有檄樹加工產(chǎn)物的制劑或者組合物。
檄樹加工產(chǎn)物在營養(yǎng)劑中包括至少一種活性成分或者含一或者多種活性成分，諸如五羥黃酮和蕓香苷等，為了實(shí)現(xiàn)抑制芳香酶和降低和調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生，抑制雌激素受體與雌激素的結(jié)合，以及為了實(shí)現(xiàn)對雌激素依賴的癌性細(xì)胞的破壞，尤其是早期雌激素依賴的癌性細(xì)胞。
檄樹加工產(chǎn)物內(nèi)的活性成分可以利用不同的醇或者基于醇的溶液，諸如甲醇，乙醇以及乙酸乙酯及其他基于醇的衍生物利用本領(lǐng)域已知的任一技術(shù)提取。五羥黃酮以及蕓香苷的活性成分的存在量為總制劑或者組合物重量的0.01-10％。這些量也可被濃縮成更高的濃度，其中它們的存在量為從10到100％。
檄樹加工產(chǎn)物可以與不同的其它成分配制產(chǎn)生不同的組合物，諸如營養(yǎng)組合物，局部皮膚組合物等。營養(yǎng)組合物中所用的成分可以是對導(dǎo)入哺乳動物尤其是人的體內(nèi)安全的任何成分，并且可以不同形式存在，諸如液體，片劑，糖錠，水或者油溶液，可分散性粉劑或者顆粒，乳劑，糖漿，酏劑等等。而且，因?yàn)闋I養(yǎng)組合物優(yōu)選口服施用，其可以含有一或者多種選自脫硫劑，調(diào)味劑，顏料，防腐劑及其他藥劑的試劑。
局部皮膚組合物中使用的成分也是在哺乳動物的體內(nèi)內(nèi)在化安全的成分，并且可以不同的形式存在，諸如凝膠劑，洗滌劑，乳油，油膏等等，每一包括一或者多種載體試劑。系統(tǒng)(例如，靜脈內(nèi))施用的制劑的成分也可以包括本領(lǐng)域已知的任何成分。
本發(fā)明進(jìn)一步的特征在于施用營養(yǎng)組合物到哺乳動物抑制芳香酶以及減少和/或調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生的方法。在一個示范性的實(shí)施方案中，所述方法包括下列步驟(a)配制包括部分檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)組合物，所述檄樹加工產(chǎn)物的存在量在約0.01和95重量百分比之間，其中組合物也包括載體，諸如水或者凈化水，并且可以同時包括其它天然的或者人造的成分；(b)施用營養(yǎng)組合物到哺乳動物的體內(nèi)，使得檄樹加工產(chǎn)物充分地內(nèi)在化；(c)重復(fù)上述步驟，次數(shù)滿足可以提供有效量的檄樹加工產(chǎn)物從而抑制芳香酶發(fā)揮將雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素的功能，抑制受體與雌激素結(jié)合，和/或降低和/或調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生。
向體內(nèi)施用營養(yǎng)組合物的步驟優(yōu)選地包括通過若干方式中的一種口服咽下組合物。具體地，營養(yǎng)組合物可以配制成液體，凝膠，固體或者其它的類型，只要可以使組合物迅速地分解和濃縮在結(jié)腸內(nèi)。重要的是應(yīng)該注意施用營養(yǎng)組合物的步驟應(yīng)該以有效的方式進(jìn)行，以便最大濃度的營養(yǎng)組合物被吸收到組織和細(xì)胞中。為了營養(yǎng)組合物起作用，必須充分地內(nèi)在化。一旦充分內(nèi)在化，它就可以通過抑制芳香酶，阻止雌激素與受體的結(jié)合以及降低雌激素產(chǎn)量起作用。
在另一實(shí)施方案中，施用營養(yǎng)組合物的步驟可以包含利用靜脈內(nèi)泵將組合物注入體內(nèi)。這些技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于可以使組合物內(nèi)在化在最有效的位點(diǎn)或者將提供最大營養(yǎng)組合物濃度的區(qū)域，諸如乳腺癌患者的乳房區(qū)。
在一個示范性的實(shí)施方案中，通過每天每2小時攝取1茶匙以及2盎司之間，優(yōu)選地2盎司的營養(yǎng)組合物，或者至少在連續(xù)的基礎(chǔ)上每天兩次施用營養(yǎng)組合物。同樣，營養(yǎng)組合物應(yīng)該空腹攝取，也就是在食用任何食物或者飲料之前至少2小時的時段進(jìn)行。接著，營養(yǎng)組合物就可以主動地抑制芳香酶，由此積極地影響體內(nèi)雌激素依賴的癌性細(xì)胞并且抑制它們的生長。當(dāng)然，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到組合物的量以及使用頻率可根據(jù)不同的個體而有所不同。
下表說明或者表示本發(fā)明包括的一些優(yōu)選的制劑或者組合物。如上所述，它們只是示范性的實(shí)例并不應(yīng)該理解為以任何方式進(jìn)行限制。
制劑1成分重量百分比檄樹果泥果汁或者果汁100％制劑2成分重量百分比檄樹果汁85-99.99％水 0.1-15％制劑3成分重量百分比檄樹果汁85-99.99％非基于檄樹的果汁0.1-15％制劑4成分重量百分比檄樹果汁50-90％水 0.1-50％非基于檄樹的果汁0.1-30％制劑5成分重量百分比檄樹果泥果汁85-99.9％水 0.1-15％制劑6成分重量百分比檄樹果泥果汁85-99.9％非基于檄樹的果汁0.1-15％
制劑7成分重量百分比檄樹果泥果汁50-90％水 0.1-50％非基于檄樹的果汁0.1-30％制劑8成分重量百分比檄樹膳食纖維0.1-30％水 1-99.9％非基于檄樹的果汁1-99.9％制劑9成分重量百分比檄樹膳食纖維0.1-30％水 1-99.9％檄樹果汁或者果泥果汁1-99.9％制劑10成分重量百分比檄樹油 0.1-30％載體介質(zhì)70-99.9％其它成分1-95％制劑11成分重量百分比檄樹產(chǎn)品10-80％載體介質(zhì)20-90％
制劑12成分重量百分比檄樹產(chǎn)品5-80％載體介質(zhì)20-95％制劑13成分重量百分比檄樹油或者油提取物 0.1-20％載體介質(zhì)20-90％制劑14成分重量百分比檄樹果泥果汁或者果汁0.1-80％檄樹油 0.1-20％載體介質(zhì)20-90％制劑15成分重量百分比檄樹果泥果汁濃縮物或者濃縮果汁 100％制劑16成分重量百分比檄樹濃縮果汁或者果泥果汁濃縮物 85-99.99％水 0.1-15％如上所述，在一個示范性的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了導(dǎo)入內(nèi)部組合物或者制劑抑制芳香酶，降低/調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生，抑制雌激素與受體結(jié)合，以及治療，預(yù)防，抑制，破壞以及逆轉(zhuǎn)雌激素-依賴的腫瘤的作用以及癌性區(qū)域，諸如乳房區(qū)內(nèi)癌細(xì)胞生長的方法。本方法主要包括向感染癌性細(xì)胞的哺乳動物體內(nèi)導(dǎo)入體內(nèi)組合物。包括幾種不同成分的體內(nèi)組合物的幾個實(shí)施方案也應(yīng)用本發(fā)明，每一實(shí)施方案包括一或者多種形式的本發(fā)明教導(dǎo)以及解釋的檄樹加工產(chǎn)物以及載體試劑或者介質(zhì)。
在一個優(yōu)選的方法中，通過早晨空腹施用至少一種(1)盎司的上述1到16之一的制劑以及在上床睡覺之前夜間空腹施用至少一(1)盎司的所述制劑，芳香酶得以抑制，雌激素依賴的癌及其生長得以治療，預(yù)防，破壞和/或逆轉(zhuǎn)。在一個不以任何方式限制的實(shí)例中，有益的檄樹被加工成Tahitian Noni果汁，由Morinda，Incorporated of Orem，Utah生產(chǎn)。
在一個示范性的實(shí)施方案中，體內(nèi)的組合物包括下列成分檄樹加工產(chǎn)物，存在量介于約10-80重量百分比之間；以及載體介質(zhì)，存在量介于20-90重量百分比之間。
在該實(shí)施方案中，檄樹加工產(chǎn)物可以包括一或者多種檄樹加工的果汁，加工的檄樹果泥果汁，加工的檄樹膳食纖維，和/或加工的檄樹油提取物產(chǎn)品。
在另一示范性的實(shí)施方案中，體內(nèi)的組合物包括下列成分加工的檄樹果汁或者果泥果汁，存在量介于約0.1-80重量百分比之間；加工的檄樹油存在量介于約0.1-20重量百分比之間；以及載體介質(zhì)存在量介于20-90重量百分比之間。檄樹果泥果汁或者果汁也可以與類似存在濃度的加工檄樹膳食纖維產(chǎn)品一起配制。
根據(jù)本發(fā)明，導(dǎo)入體內(nèi)組合物的特定方法可以包括實(shí)際上將體內(nèi)組合物導(dǎo)入哺乳動物的體內(nèi)用于本發(fā)明所述目的的任一方法。雖然有許多特定的方法，本發(fā)明認(rèn)識到體內(nèi)組合物可以靜脈內(nèi)，透皮，口服或者系統(tǒng)地導(dǎo)入。無論采用何種方法，重要的是要使組合物徹底地內(nèi)在化，使得體內(nèi)組合物，尤其是檄樹及其他活性成分可以有效地抑制芳香酶以及治療所有的雌激素依賴的癌，由此促進(jìn)這種癌的減輕并且隨后抑制以及預(yù)防這種癌，以及可以使所有早期雌激素依賴的癌性細(xì)胞得以破壞。
上述制劑中提及的載體介質(zhì)可以包括所有的能夠被導(dǎo)入哺乳動物的體內(nèi)，而且同時能夠給檄樹加工產(chǎn)物提供載體介質(zhì)的成分。特異性載體介質(zhì)制劑是本領(lǐng)域公知的，不再詳細(xì)描述。載體介質(zhì)的目的如所述是提供體現(xiàn)體內(nèi)組合物內(nèi)檄樹加工產(chǎn)物的工具也就是說能夠被導(dǎo)入體內(nèi)。
下列實(shí)施例闡述并且給出檄樹產(chǎn)品對芳香酶以及雌激素依賴的癌性細(xì)胞的預(yù)防以及治療作用，以及檄樹抗癌性細(xì)胞增殖或者轉(zhuǎn)移的預(yù)防以及治療作用。這些實(shí)施例不以任何方式限制本發(fā)明，僅僅是說明檄樹產(chǎn)品的益處和優(yōu)點(diǎn)以及治療作用。
實(shí)施例一現(xiàn)有的有效治療絕經(jīng)后婦女乳腺癌的技術(shù)包括阻斷或者抑制抑制雌激素受體或者阻斷芳香酶活性的治療。然而，這些治療不能都實(shí)現(xiàn)所述目的。最近利用體外生物測定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以評價Tahitian Noni果泥果汁形式的檄樹的芳香酶抑制以及放射性配體結(jié)合活性。
在本實(shí)驗(yàn)中，人重組細(xì)胞被用作雌激素受體ERα以及ERβ的來源。每一陽性對照酶，己烯雌酚芳香酶以及CYP4502C19均來源于人。
首先研究1％濃度的Tahitian Noni果泥果汁。試驗(yàn)結(jié)果顯示檄樹的活性成分引起或者誘導(dǎo)抑制89％的芳香酶與CYP450 2C19酶受體的結(jié)合，抑制99％芳香酶與雌激素-α酶受體的結(jié)合，以及抑制102％芳香酶與雌激素-β酶受體的結(jié)合。這些結(jié)果似乎暗示檄樹果泥果汁在所使用的濃度對芳香酶以及雌激素受體具有顯著的抑制作用，其與現(xiàn)有的治療技術(shù)相比抑制效果更強(qiáng)。
此外，人們發(fā)現(xiàn)檄樹抑制81％的1A2，89％的2C19，81％的2C9，93％的2D6，以及77％的3A4CYP450酶。
由此，如本發(fā)明所述，本發(fā)明的實(shí)施方案包含人體內(nèi)的雌激素的作用。尤其是，本發(fā)明涉及應(yīng)用食用組合物或添加劑選擇性抑制雌激素產(chǎn)生以及提供人體內(nèi)雌激素的作用，其中所述組合物用一或者多種來自印度桑類，系統(tǒng)命名為檄樹的植物的加工產(chǎn)物進(jìn)行配制。本發(fā)明可以其它特定的形式實(shí)施，只要不背離本發(fā)明的精神或者實(shí)質(zhì)特征。在各個方面描述的實(shí)施方案只是說明性的而非限制性的。因此本發(fā)明的范圍由附屬權(quán)利要求而非上述描述進(jìn)行限制。權(quán)利要求等同含義和范圍內(nèi)的所有改變也包括在權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.選擇性抑制雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素作用的方法，所述方法包括提供備用的具有檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)添加劑。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中的加工產(chǎn)物是下列之一(i)檄樹果汁；(ii)檄樹油提取物；(iii)檄樹膳食纖維；(iv)檄樹果泥果汁；(v)檄樹果泥；(vi)檄樹濃縮果汁；(vii)檄樹果泥果汁濃縮物；以及(viii)檄樹葉提取物。
3.權(quán)利要求2所述的方法，進(jìn)一步包括提供推薦應(yīng)用營養(yǎng)添加劑的步驟，其中推薦應(yīng)用包含下列之一每天消耗一流體盎司的營養(yǎng)添加劑；每天消耗超過一流體盎司的營養(yǎng)添加劑；以及每天消耗小于一流體盎司的營養(yǎng)添加劑。
4.權(quán)利要求3所述的方法，其中推薦的應(yīng)用進(jìn)一步包括在進(jìn)餐之前消耗營養(yǎng)添加劑。
5.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述應(yīng)用包括(i)消耗或者(ii)透皮膚施用之一。
6.權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括利用營養(yǎng)添加劑作為芳香酶抑制劑。
7.選擇性抑制雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素作用的方法，所述方法包括利用營養(yǎng)添加劑形式的檄樹葉子的加工提取物作為芳香酶抑制劑控制體內(nèi)雌激素的產(chǎn)生。
8.權(quán)利要求7所述的方法，進(jìn)一步包括利用加工的提取物提供體內(nèi)的雌激素作用。
9.權(quán)利要求7所述的方法，其中加工的提取物為皮膚用乳油的形式。
10.權(quán)利要求7所述的方法，其中的推薦應(yīng)用包括下列之一每天消耗一流體盎司的營養(yǎng)添加劑；每天消耗超過一流體盎司的營養(yǎng)添加劑；以及每天消耗小于一流體盎司的營養(yǎng)添加劑。
11.權(quán)利要求10所述的方法，其中的推薦應(yīng)用進(jìn)一步包括在進(jìn)餐之前消耗營養(yǎng)添加劑。
12.抑制雌激素產(chǎn)生以及提高人體內(nèi)雌激素水平的營養(yǎng)添加劑，所述添加劑包括檄樹加工產(chǎn)物。
13.權(quán)利要求12所述的營養(yǎng)添加劑，其中的產(chǎn)物是下列之一(i)檄樹葉子；以及(ii)檄樹果汁。
14.抑制發(fā)揮將雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素功能的芳香酶的方法，所述方法包括給哺乳動物導(dǎo)入包括檄樹加工產(chǎn)物的組合物，所述加工產(chǎn)物的存在量在約0.01和100重量百分比之間，所述檄樹加工產(chǎn)物包括活性成分五羥黃酮。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述五羥黃酮的存在量在約0.1和10重量百分比之間。
16.權(quán)利要求14的方法，其中所述檄樹加工產(chǎn)物包括至少下列之一(i)檄樹果汁；(ii)檄樹油提取物；(iii)檄樹膳食纖維；(iv)檄樹果泥果汁；(v)檄樹果泥；(vi)檄樹濃縮果汁；和(vii)檄樹果泥果汁濃縮物。
17.權(quán)利要求14的方法，其中所述檄樹加工產(chǎn)物進(jìn)一步包括蕓香苷作為附加的活性成分，與所述五羥黃酮協(xié)同作用抑制所述芳香酶。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述蕓香苷的存在量在約0.1和10重量百分比之間。
19.權(quán)利要求14的方法，其中所述組合物以下列技術(shù)之一進(jìn)行施用(i)口服；(ii)透皮膚到所述感染區(qū)域；(iii)注射入所述感染區(qū)域；(iv)靜脈內(nèi)；和(v)系統(tǒng)地。
20.抑制哺乳動物體內(nèi)芳香酶和預(yù)防雌激素-依賴的癌性細(xì)胞形成和生長的方法，所述方法包括下列步驟向基于醇的溶液中添加檄樹加工產(chǎn)物；從所述溶液分離和提取所述檄樹加工產(chǎn)物的活性成分；將所述提取的活性成分導(dǎo)入所述哺乳動物，其中所述提取的活性成分抑制，預(yù)防，破壞和逆轉(zhuǎn)所述雌激素依賴的癌性細(xì)胞的作用。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述檄樹加工產(chǎn)物包括至少下列產(chǎn)物之一(i)檄樹加工果汁，和(ii)包括檄樹加工果泥的檄樹加工產(chǎn)物。
22.權(quán)利要求20的方法，其中所述基于醇的溶液主要選自甲醇，乙醇和乙酸乙酯及其他基于醇的衍生物。
23.權(quán)利要求20的方法，其中所述活性成分為五羥黃酮。
24.權(quán)利要求23的方法，其中所述活性成分為與所述五羥黃酮協(xié)同作用的蕓香苷從而抑制所述芳香酶以及預(yù)防所述雌激素依賴的癌性細(xì)胞的形成和生長。
25.權(quán)利要求20的方法，其中所述導(dǎo)入所述提取的活性成分的步驟包括患者每天兩次空腹口服施用2盎司的食品，所述食品包括從所述檄樹加工產(chǎn)物獲得的所述活性成分。
26.權(quán)利要求20的方法，其中所述導(dǎo)入所述提取的活性成分的步驟包括施用局部組合物到所述區(qū)域，所述局部組合物包括從所述檄樹加工產(chǎn)物獲得的所述活性成分。
27.抑制哺乳動物體內(nèi)芳香酶和預(yù)防雌激素-依賴的癌性細(xì)胞形成和生長的方法，所述方法包括下列步驟早晨給所述哺乳動物空腹口服施用至少一盎司的營養(yǎng)制劑，所述營養(yǎng)制劑包括檄樹加工產(chǎn)物；夜間睡覺之前空腹給所述哺乳動物口服施用至少一盎司的所述營養(yǎng)制劑；以及重復(fù)所述每天口服施用步驟直到所述雌激素依賴的癌性細(xì)胞得以破壞。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量為約100重量百分比的檄樹加工果汁。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的水。
30.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
31.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約50-90重量百分比之間的檄樹加工果汁；以及存在量在約0.1-50重量百分比之間的水；以及存在量在約0.1-30重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
32.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量為約100重量百分比的檄樹加工果泥果汁。
33.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果泥果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的水。
34.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果泥果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
35.權(quán)利要求27的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約50-90重量百分比之間的檄樹加工果泥果汁；存在量在約0.1-50重量百分比之間的水；以及存在量在約0.1-30重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
36.權(quán)利要求27的方法，其中所述口服施用的步驟包括口服施用2盎司的所述營養(yǎng)制劑。
37.調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生以及抑制雌激素受體與雌激素結(jié)合能力的方法，所述方法包括下列步驟早晨空腹口服施用至少一盎司包括檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)制劑；以及夜間睡覺之前口服施用至少一盎司的所述營養(yǎng)制劑。
38.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量為約100重量百分比的檄樹加工果汁。
39.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的水。
40.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
41.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約50-90重量百分比之間的檄樹加工果汁；存在量在約0.1-50重量百分比之間的水；以及存在量在約0.1-30重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
42.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量為約100重量百分比的檄樹加工果泥果汁。
43.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果泥果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的水。
44.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約85-99.99重量百分比之間的檄樹加工果泥果汁；以及存在量在約0.1-15重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
45.權(quán)利要求37的方法，其中所述營養(yǎng)制劑包括存在量在約50-90重量百分比之間的檄樹加工果泥果汁；存在量在約0.1-50重量百分比之間的水；以及存在量在約0.1-30重量百分比之間的非基于檄樹的果汁。
46.權(quán)利要求37的方法，其中所述口服施用的步驟包括每天兩次口服施用2盎司的所述營養(yǎng)制劑。
47.抑制哺乳動物體內(nèi)芳香酶和雌激素與雌激素受體結(jié)合能力以治療，預(yù)防，抑制，破壞以及逆轉(zhuǎn)雌激素-依賴的癌性細(xì)胞的作用的方法，所述方法包括下列步驟向所述哺乳動物系統(tǒng)地導(dǎo)入體內(nèi)組合物，所述體內(nèi)組合物包括存在量在約10-80重量百分比之間的檄樹加工產(chǎn)品；以及存在量為約20-90重量百分比之間的載體介質(zhì)。
48.權(quán)利要求47的方法，其中所述檄樹加工產(chǎn)物包括至少下列之一(i)檄樹加工果汁；(ii)檄樹加工果泥果汁；以及(iii)檄樹加工膳食纖維。
49.權(quán)利要求47的方法，其中所述導(dǎo)入體內(nèi)組合物的步驟選自靜脈內(nèi)導(dǎo)入，口服導(dǎo)入以及注射。
50.抑制芳香酶以及調(diào)節(jié)雌激素產(chǎn)生的方法，所述方法包括下列步驟給哺乳動物導(dǎo)入體內(nèi)組合物，所述體內(nèi)組合物包括存在量在約5-80重量百分比之間的檄樹加工產(chǎn)物；以及存在量為約20-95重量百分比之間的載體介質(zhì)。
51.權(quán)利要求50的方法，其中所述檄樹加工產(chǎn)物選自檄樹加工果汁，檄樹加工果泥果汁，檄樹加工膳食纖維，檄樹加工油以及檄樹加工油提取物。
52.權(quán)利要求50的方法，其中所述導(dǎo)入體內(nèi)組合物的步驟包括選自靜脈內(nèi)導(dǎo)入，口服導(dǎo)入，透皮導(dǎo)入以及注射的方法。
53.治療哺乳動物體內(nèi)雌激素-依賴的腫瘤細(xì)胞的芳香酶抑制劑，包括包括至少一種檄樹加工產(chǎn)物的營養(yǎng)組合物。
54.權(quán)利要求53的芳香酶抑制劑，其中所述檄樹加工產(chǎn)物包括至少下列之一(i)檄樹果汁；(ii)檄樹果泥果汁；(iii)檄樹果泥果汁濃縮物；(iv)檄樹濃縮果汁；和(v)檄樹膳食纖維。
55.權(quán)利要求53的制劑，其中所述營養(yǎng)制劑的所述檄樹加工產(chǎn)物進(jìn)一步包括存在量為約0.1以及10重量百分比之間的活性成分五羥黃酮。
56.權(quán)利要求53的制劑，其中所述檄樹加工產(chǎn)物的存在量在約0.01以及100重量百分比之間。
57.權(quán)利要求55的制劑，其中所述檄樹加工產(chǎn)物進(jìn)一步包括蕓香苷作為附加的活性成分與所述五羥黃酮協(xié)同作用治療所述偏頭痛及其相關(guān)癥狀。
58.權(quán)利要求57的制劑，其中所述蕓香苷的存在量在約0.1和10重量百分比之間。
59.權(quán)利要求53的制劑，其中所述營養(yǎng)劑經(jīng)(i)口服，(ii)透皮進(jìn)入所述感染區(qū)域，(iii)靜脈內(nèi)或者(iv)系統(tǒng)地施用。
60.調(diào)節(jié)哺乳動物體內(nèi)雌激素產(chǎn)生的方法，用于治療雌激素依賴的腫瘤，所述方法包括下列步驟向所述哺乳動物系統(tǒng)地導(dǎo)入體內(nèi)組合物，所述體內(nèi)組合物包括存在量在約10-100重量百分比之間的檄樹加工產(chǎn)物。
全文摘要
本發(fā)明提供的實(shí)施方案涉及選擇性抑制人體內(nèi)雌激素產(chǎn)生以及提供雌激素作用。營養(yǎng)添加劑包含檄樹加工產(chǎn)物，用于抑制發(fā)揮將雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素功能的芳香酶，抑制受體與雌激素結(jié)合，以及降低和/或調(diào)節(jié)雌激素以及降低體內(nèi)雌激素的產(chǎn)生的量以及調(diào)節(jié)這種產(chǎn)生。營養(yǎng)添加劑進(jìn)一步提供雌激素的作用。通過導(dǎo)入體內(nèi)(例如，攝取)安全預(yù)確定劑量的用一或者多種檄樹加工產(chǎn)物配制或包括其的營養(yǎng)組合物，安全預(yù)確定的持續(xù)時間，本發(fā)明的方法以及組合物可有效發(fā)揮治療雌激素－依賴的癌，尤其是抑制，破壞以及逆轉(zhuǎn)雌激素依賴的癌性腫瘤的作用。
文檔編號A61K36/746GK1849128SQ200480007911
公開日2006年10月18日 申請日期2004年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月25日
發(fā)明者阿法·凱哈提·帕盧, 王眠影, 蘇晨興, 布雷特·賈斯廷·維斯特, 約翰尼斯·約瑟夫·韋斯滕多爾, 克勞德·賈拉克·詹森, 斯特凡·保羅·斯托里 申請人:諾麗公司