專利名稱：一種魚金凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種魚金凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
魚腥草為三白草科蕺菜屬植物蕺菜Houttuyniacordata Thunb的干燥地上部分，味辛、性涼，具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋等功效，用于肺癰吐膿，痰熱喘咳，熱痢，熱淋，癰腫瘡毒。金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera japocina thumb.、紅腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、山銀花Lonicera confuse DC.或花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd.的干燥花蕾或帶初開的花，又名忍冬、雙花，味甘、寒，為臨床常用中藥，具清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效，主治癰腫疔瘡，喉痹，丹毒，熱毒血痢，風(fēng)熱感冒，溫病發(fā)熱。魚金注射液(WS3-B-3263)由魚腥草和金銀花兩味組成，具清熱解毒功效，用于熱毒雍盛而致的上呼吸道感染、支氣管肺炎、病毒性肺炎、化膿性疾病、婦科炎癥與手術(shù)后發(fā)熱。該注射液療效確切，抗菌范圍廣，抗病毒能力強(qiáng)，毒副反應(yīng)小，在臨床中應(yīng)用廣泛。
魚腥草的主要有效成分為揮發(fā)油，金銀花的主要有效成分為揮發(fā)油和綠原酸，魚金注射液(WS3-B-3263)采用水蒸氣蒸餾法提取有效成分，該方法未能保留金銀花中的重要抗菌活性成分綠原酸，同時(shí)由于揮發(fā)油類成分易氧化、性質(zhì)不穩(wěn)定，對(duì)注射液的穩(wěn)定性有一定的影響，魚腥草揮發(fā)油由于含癸酰乙醛具有強(qiáng)烈魚腥氣味，使其注射液制劑和應(yīng)用受到一定限制。近年來報(bào)道，藥劑學(xué)上新型輔料HP-β-環(huán)糊精能與多種化合物形成包合物，可增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性，提高溶解度及溶出度，降低藥物揮發(fā)性，掩蓋不良?xì)馕丁?br> 專利(申請(qǐng)?zhí)?2139416)“一種魚金制劑及其制備方法”采用蒸餾法提取物和水醇法提取物制備制劑，該專利采用常規(guī)的蒸餾法提取魚腥草、金銀花揮發(fā)油類成分，提取時(shí)間長，溫度高，得率較低，該專利采用水醇法提取水溶性物質(zhì)，所得提取物含雜質(zhì)多，綠原酸類成分損失大，制備注射制劑比較困難。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，本發(fā)明采用微波萃取法提取魚腥草、金銀花中的揮發(fā)油成分，用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合，藥渣再用微波萃取法提取有效成分，并用大孔樹脂進(jìn)行分離純化，包合物、提取物與藥用輔料混合制備成凍干粉針劑。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
一.工藝制法(1)取魚腥草、金銀花粉碎，過20-40目篩，放入微波萃取器中，加入2-3倍量己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油，備用；(2)藥渣加10-15倍量水，浸潤后繼續(xù)用微波萃取，設(shè)定其中微波功率500W，頻率2450MHz，提取溫度100℃，輻射時(shí)間30min，提取液過濾，濃縮至藥液藥材為1∶1，濾液上已處理好的大孔吸附樹脂柱吸附，用2-4倍柱體積的水洗脫后，再用3-5倍柱體積40％-50％乙醇水溶液洗脫，取40％-50％乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到提取物。
(3)取魚腥草、金銀花揮發(fā)油，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合HP-β-環(huán)糊精，以20ml/g-30ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草、金銀花萃取物HP-β-環(huán)糊精＝1∶8-12的比例(v/g)加入魚腥草、金銀花萃取物，攪拌時(shí)間120-180分鐘，取出冷藏20小時(shí)，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時(shí)，得到魚腥草、金銀花揮發(fā)油包合物；
(4)本發(fā)明的制劑的處方為揮發(fā)油包合物27-39重量份，提取物4-4.5重量份，藥用輔料62-86重量份；(4)取上述包合物、提取物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至5.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
微波萃取是利用微波能來提高萃取率的一種最新發(fā)展起來的新技術(shù)。它的原理是在微波場中，吸收微波能力的差異使得基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使得被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離，進(jìn)入到介電常數(shù)較小、微波吸收能力相對(duì)差的萃取劑中；微波萃取具有設(shè)備簡單、適用范圍廣、萃取效率高、重現(xiàn)性好、節(jié)省時(shí)間、節(jié)省試劑、污染小等特點(diǎn)。
本發(fā)明采用微波提取法提取藥物的有效成分，選擇性好，提取效率高，所得到的提取物雜質(zhì)少，簡化了工藝步驟，制得的凍干粉有效成分含量高且具有較好的溶解性、穩(wěn)定性。藥理實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的魚金凍干粉針劑具有更好的藥理作用。
二.制劑的檢測分析1.制劑中甲基正壬酮的測定1.1實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明魚金凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)市售魚金注射液(西安黃河制藥有限公司)1.2實(shí)驗(yàn)方法將本發(fā)明凍干粉針劑用注射用水溶解成與市售魚金注射液含生藥量相同的溶液，按照魚金注射液(標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS3-B-3263)中的檢測分析項(xiàng)的檢測方法采用氣相色譜法進(jìn)行檢測分析。結(jié)果見表1表1 各組制劑的甲基正壬酮含量比較

2.制劑中綠原酸的含量測定2.1儀器與試藥Waters高效液相色譜儀器(600泵，2487檢測器)，Millinium32色譜處理軟件；樣品1本發(fā)明魚金凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)，樣品2市售魚金注射液(西安黃河制藥有限公司)，樣品3(按專利申請(qǐng)?zhí)枮?2139416的方法制備)，綠原酸對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所)；2.2實(shí)驗(yàn)方法取樣品，參照《中國藥典》2000版一部金銀花項(xiàng)下綠原酸的含量測定方法進(jìn)行測定，結(jié)果見表2表2各組制劑的綠原酸含量比較

/為不含綠原酸結(jié)論通過上述檢測分析實(shí)驗(yàn)我們可以得知本發(fā)明魚金凍干粉針劑的有效成分綠原酸含量明顯提高，充分說明本發(fā)明的工藝比原工藝有顯著的提高，有實(shí)際意義。
三.提取物中綠原酸的檢測分析1.實(shí)驗(yàn)藥物提取物1(按本發(fā)明制備工藝制備，廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)提取物2(按專利申請(qǐng)?zhí)枮?2139416的提取方法制備)2.實(shí)驗(yàn)方法取提取物，參照《中國藥典》2000版一部金銀花項(xiàng)下綠原酸的含量測定方法進(jìn)行測定，結(jié)果見表3表3各組提取物的綠原酸含量比較

結(jié)論通過上述檢測分析實(shí)驗(yàn)我們可以得知本發(fā)明提取物的的有效成分綠原酸含量和純度都明顯提高，充分說明本發(fā)明有實(shí)際意義。
四.微波萃取法和水蒸氣蒸餾法提取工藝的比較實(shí)驗(yàn)方法取過30目篩魚腥草40g，金銀花20g置敞口容器中，加入150ml己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450W，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油；另取相同量魚腥草、金銀花，加9000ml水，浸泡2小時(shí)后用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，結(jié)果見表5表5 微波萃取法和水蒸氣蒸餾法提取工藝的比較

由以上對(duì)比實(shí)驗(yàn)可知微波萃取法與水蒸氣蒸餾法比較，具有提取溫度低，提取時(shí)間短，成本低，提取率高的特點(diǎn)，充分說明本發(fā)明具有實(shí)際意義。
五.藥理實(shí)施例抑菌作用研究1.實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明魚金凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)市售魚金注射液(西安黃河制藥有限公司)。
2.實(shí)驗(yàn)菌種金黃葡萄球菌，大腸桿菌，枯草桿菌，青霉菌，黑曲霉，啤酒酵母菌上述菌種均由北京大學(xué)微生物教研室提供。
3.實(shí)驗(yàn)方法濾紙片法測定抑菌作用取直徑6mm的濾紙片，放入藥物中浸泡16h，120℃下濕熱滅菌備用.將上述供試菌液各取0.5ml與相應(yīng)固體培養(yǎng)基，在超凈工作臺(tái)內(nèi)制成含菌平板，取含浸出汁的濾紙片貼在含菌平板上，每皿貼5片，每菌做3次重復(fù)，細(xì)菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，測定24h、48h后濾紙片的抑菌圈大小，比較抑菌效果見表6最低抑菌濃度(Mic)測定配制上述菌種分別所需的培養(yǎng)基，準(zhǔn)確量取9ml分裝試管，準(zhǔn)確加入8％、4％、2％、1％、0.5％、0.25％藥物系列濃度溶液1ml，配成系列培養(yǎng)基，120℃高壓濕熱滅菌，冷藏后每系列接種一個(gè)菌種，每系列做3次重復(fù)，細(xì)菌置37℃、霉菌及酵母菌置27℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，觀察菌種生長情況，以完全沒有菌生長的最低濃度為最低抑菌濃度，見表7表6 對(duì)供試菌種的抑制效果

表7 最低抑制濃度

結(jié)論通過上述藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的魚金凍干粉針劑與市售魚金注射液比較具有更好的藥理作用。
六.制備實(shí)施例實(shí)施例1(1)取魚腥草4000g、金銀花2000g粉碎，過30目篩，放入微波萃取器中，加入2.5倍量己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油，備用；(2)藥渣加10倍量水，浸潤后繼續(xù)用微波萃取，設(shè)定其中微波功率500W，頻率2450MHz，提取溫度100℃，輻射時(shí)間30min，提取液過濾，濃縮至藥液∶藥材為1∶1，上已處理好的D101大孔吸附樹脂柱吸附，用3倍柱體積的水洗脫后，再用4倍柱體積45％乙醇水溶液洗脫，取45％乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到提取物40g。
(3)取魚腥草、金銀花揮發(fā)油，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合HP-β-環(huán)糊精，以20ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草、金銀花萃取物∶HP-β-環(huán)糊精＝1∶8的比例(v/g)加入魚腥草、金銀花萃取物，攪拌時(shí)間120分鐘，取出冷藏20小時(shí)，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時(shí)，得到魚腥草、金銀花包合物270g；(4)本發(fā)明的制劑的處方為包合物270g，提取物40g，甘露醇為620g；(5)取上述包合物、提取物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，加活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至5.0-7.0，0.22um微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得500支。
實(shí)施例2(1)取魚腥草4000g、金銀花2000g粉碎，過20目篩，放入微波萃取器中，加入2倍量己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油，備用；
(2)藥渣加15倍量水，浸潤后繼續(xù)用微波萃取，設(shè)定其中微波功率500W，頻率2450MHz，提取溫度100℃，輻射時(shí)間30min，提取液過濾，濃縮至藥液∶藥材為1∶1，上已處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱吸附，用2倍柱體積的水洗脫后，再用3倍柱體積40％乙醇水溶液洗脫，取40％乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到提取物42g。
(3)取魚腥草、金銀花揮發(fā)油，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合HP-β-環(huán)糊精，以30ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草、金銀花萃取物∶HP-β-環(huán)糊精＝1∶12的比例(v/g)加入魚腥草、金銀花萃取物，攪拌時(shí)間180分鐘，取出冷藏20小時(shí)，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時(shí)，得到魚腥草、金銀花包合物380g；(4)本發(fā)明的制劑的處方為包合物380g，提取物42g，乳糖為840g；(5)取上述包合物、提取物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至5.0-7.0，0.22um微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得500支。
實(shí)施例3(1)取魚腥草380g、金銀花190g粉碎，過40目篩，放入微波萃取器中，加入2-3倍量己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油，備用；(2)藥渣加12倍量水，浸潤后繼續(xù)用微波萃取，設(shè)定其中微波功率500W，頻率2450MHz，提取溫度100℃，輻射時(shí)間30min，提取液過濾，濃縮至藥液∶藥材為1∶1，上已處理好的D101大孔吸附樹脂柱吸附，用2倍柱體積的水洗脫后，再用5倍柱體積50％乙醇水溶液洗脫，取50％乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到提取物4.3g。
(3)取魚腥草、金銀花揮發(fā)油，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合HP-β-環(huán)糊精，以25ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草、金銀花萃取物∶HP-β-環(huán)糊精＝1∶10的比例(v/g)加入魚腥草、金銀花萃取物，攪拌時(shí)間140分鐘，取出冷藏20小時(shí)，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時(shí)，得到魚腥草、金銀花包合物30g；(4)本發(fā)明的制劑的處方為包合物30g，提取物4.3g，蔗糖為69g；(5)取上述包合物、提取物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至5.0-7.0，0.22um微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得50支。
實(shí)施例4(1)取魚腥草420g、金銀花210g粉碎，過30目篩，放入微波萃取器中，加入3倍量己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油，備用；(2)藥渣加12倍量水，浸潤后繼續(xù)用微波萃取，設(shè)定其中微波功率500W，頻率2450MHz，提取溫度100℃，輻射時(shí)間30min，提取液過濾，濃縮至藥液∶藥材為1∶1，上已處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱吸附，用3倍柱體積的水洗脫后，再用5倍柱體積45％乙醇水溶液洗脫，取45％乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到提取物4.5g。
(3)取魚腥草、金銀花揮發(fā)油，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合HP-β-環(huán)糊精，以20ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草、金銀花萃取物∶HP-β-環(huán)糊精＝1∶10的比例(v/g)加入魚腥草、金銀花萃取物，攪拌時(shí)間160分鐘，取出冷藏20小時(shí)，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時(shí)，得到魚腥草、金銀花包合物39g；(4)本發(fā)明的制劑的處方為包合物39g，提取物4.5g，甘露醇為86g；(5)取上述包合物、提取物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至5.0-7.0，0.22um微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得50支。
權(quán)利要求
1.一種魚金凍干粉針劑，其特征在于它是由魚腥草、金銀花揮發(fā)油HP-β-CD包合物27-39重量份、魚腥草、金銀花提取物4-4.5重量份和藥用輔料62-86重量份制備而成。其特征還在于藥物有效成分采用微波萃取法進(jìn)行提取。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚腥草凍干粉針劑的制備方法，其特征包括以下步驟(1)取魚腥草、金銀花粉碎，過20-40目篩，放入敞口容器中，加入2-3倍量己烷，充分浸潤，進(jìn)行微波輻射萃取，設(shè)定其中微波功率625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s，濾取己烷萃取物，真空蒸發(fā)，得魚腥草、金銀花揮發(fā)油，備用；(2)藥渣加10-15倍量水，浸潤后繼續(xù)用微波萃取，設(shè)定其中微波功率500W，頻率2450MHz，提取溫度100℃，輻射時(shí)間30min，提取液過濾，濃縮至藥液藥材為1∶1，上已處理好的大孔吸附樹脂柱吸附，用2-4倍柱體積的水洗脫后，再用3-5倍柱體積40％-50％乙醇水溶液洗脫，取40％-50％乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到提取物。(3)取魚腥草、金銀花揮發(fā)油，采用飽和水溶液法用HP-β-環(huán)糊精進(jìn)行包合HP-β-環(huán)糊精，以20ml/g-30ml/g的比例加水，加熱溶解，冷至室溫，按照魚腥草、金銀花萃取物HP-β-環(huán)糊精＝1∶8-12的比例(v/g)加入魚腥草、金銀花萃取物，攪拌時(shí)間120-180分鐘，取出冷藏20小時(shí)，抽濾，濾渣常溫下干燥36小時(shí)，得到魚腥草、金銀花包合物；(4)取上述包合物、提取物和藥用輔料混合，加注射用水溶解，活性炭吸附，過濾，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至5.0-7.0，微孔濾膜過濾，灌裝，冷凍干燥，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求1，2所述的藥用輔料為甘露醇或乳糖或蔗糖的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于進(jìn)行微波輻射萃取魚腥草、金銀花揮發(fā)油時(shí)微波功率為625W，頻率2450MHz，提取溫度40℃，輻射時(shí)間80s。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于進(jìn)行微波輻射萃取魚腥草、金銀花水提物時(shí)微波功率為500W，頻率2450MHz，提取溫100℃，輻射時(shí)間30min
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，大孔吸附樹脂為非極性或弱極性。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，大孔吸附樹脂優(yōu)選為AB-8或D101型。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，大孔吸附樹脂洗脫的乙醇濃度優(yōu)選為44-46％。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種魚金凍干粉針劑及其制備方法，其特征在于用微波萃取法從中藥魚腥草、金銀花中提取得到魚腥草、金銀花的有效成分，其中魚腥草、金銀花揮發(fā)油經(jīng)HP－β－環(huán)糊精包合，提高了揮發(fā)油的穩(wěn)定性、溶解度，提取物用大孔樹脂進(jìn)行分離純化，揮發(fā)油、提取物與藥用輔料混合，制備成凍干粉針劑。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的魚金凍干粉針劑，具有更強(qiáng)的藥理作用。
文檔編號(hào)A61P31/12GK1616057SQ20041008024
公開日2005年5月18日 申請(qǐng)日期2004年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月28日
發(fā)明者張平 申請(qǐng)人:張平