專利名稱：燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以燈盞細(xì)辛為原料提取燈盞細(xì)辛有效成分提取物制備的藥物制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
燈盞細(xì)辛，為菊科飛蓬屬植物燈盞花[Erigeron breviseapus(Vant.)Hand.-Mazz]的干燥全草。云南民間習(xí)稱燈盞花、燈盞細(xì)辛、土細(xì)辛，已收載于國家標(biāo)準(zhǔn)。原來的燈盞細(xì)辛提取物產(chǎn)品有益脈康、燈盞細(xì)辛膠囊，均以測定燈盞細(xì)辛總黃酮。燈盞細(xì)辛總黃酮是從燈盞細(xì)辛中分離提取出來的以黃酮類化物為主，主要成分為燈盞花乙素(野黃芩苷)、燈盞花甲素、芹菜素、木犀草素、黃芩素等。從燈盞細(xì)辛中提取分離出的產(chǎn)品有執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為WS3-B-3823-98的燈盞細(xì)辛注射液，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為WS3-B-2410-97的益脈康片，燈盞細(xì)辛膠囊，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為WS3-B-3823-98的燈盞花素及其注射液、片劑、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為WS3-B-3879-98的粉針劑等品種均已為國家標(biāo)準(zhǔn)。燈盞細(xì)辛是一種植物藥，經(jīng)過三十多年的開發(fā)應(yīng)用，該產(chǎn)品已被社會認(rèn)可。目前已有或正在開發(fā)的有片劑、膠囊劑、水針劑、粉針劑等。有關(guān)燈盞細(xì)辛及其提取物的專利申請也是近年醫(yī)藥領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)，已有數(shù)十項(xiàng)專利申請，以上專利著重改變劑型、提高生物利用度和產(chǎn)品穩(wěn)定性等，但是，公告的產(chǎn)品仍存在以下缺陷①沒有將燈盞花素或燈盞細(xì)辛提取物進(jìn)行超細(xì)化處理，只是做了簡單的劑型改變，不能從根本上解決生物利用度問題；②產(chǎn)品技術(shù)含量低，很少進(jìn)行新用途研究開發(fā)。而且，尚未發(fā)現(xiàn)用燈盞花素或燈盞細(xì)辛提取物治療眼科疾病的報(bào)道。燈盞花黃酮由于其溶解性能差、又是酚苷類化合物，其穩(wěn)定性較差，做成液體制劑有一定難度。這一直阻礙了燈盞細(xì)辛提取物，其主要活性成分黃酮類化合物的液體制劑的發(fā)展和臨床應(yīng)用，同時(shí)也制約著其最佳功效的發(fā)揮，因而也一直是藥學(xué)研究要攻克的難關(guān)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種穩(wěn)定性好、無菌、無異物、使用時(shí)無痛、無刺激的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液。
本發(fā)明的另一目的是提供這種燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液的制備方法。
本發(fā)明所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液由燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉、滴眼液藥用輔料和溶劑組成，所含燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉的重量體積百分比為1-40％，余量為含滴眼液藥用輔料的溶劑。
上述的燈盞細(xì)辛提取物為燈盞細(xì)辛的醇提取物；所述的微粉為粒徑小于100μm的超細(xì)化微粉。
上述的滴眼液中燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉的含量可不限于上述范圍，以適于滴眼為度。
上述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液中藥用輔料為pH值調(diào)節(jié)劑、滴眼液等滲調(diào)整劑、滴眼液改善生物利用度的輔料、抗氧劑、助懸增稠劑，均為常規(guī)藥用輔料；所述的溶劑為常規(guī)溶劑，如注射用水。
上述的pH值調(diào)節(jié)劑類有硼酸、硼砂、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、碳酸鈉、醋酸、醋酸鈉等。
上述的滴眼液等滲調(diào)整劑有氯化鈉、硼酸、葡萄糖、硼砂、氯化鉀、甘油等。
上述的滴眼液改善生物利用度的輔料有磷脂、亞油酸、多不飽和脂肪酸、α-亞麻酸、γ-亞麻酸等植物食用或藥用油等。
上述的抗氧劑有焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、抗壞血酸、硫脲等。
上述的滴眼液助懸增稠劑有甲基纖維素(MC)、羥甲基纖維素鈉(CMC-Na)、羥丙甲纖維素(HPMC)、羥丙乙纖維素、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸鈉等；防腐劑有尼泊金、苯扎氯銨、苯扎溴銨、洗必泰、三氯叔丁醇、苯乙醇、硫柳汞、硝酸苯汞等。
上述的藥用輔料均為常規(guī)藥用輔料，制備工藝也可為常規(guī)制備工藝。
所得到的燈盞細(xì)辛有效成分提取物經(jīng)檢測以總黃酮為主，尚含有咖啡?？鼘幩岬榷喾N酚類化合物等。燈盞細(xì)辛有效成分提取物總黃酮主要含有燈盞花乙素(野黃芩苷)、燈盞花甲素、芹菜素、木犀草素、黃芩素等燈盞花黃酮。
本發(fā)明所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液的制備方法由以下步驟組成一、取符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的燈盞細(xì)辛，打成粗粉，過10～20目篩，用體積濃度為60～80％的乙醇提取，合并提取液；二、用澄清劑澄清，過濾，60℃以下溫度濃縮，回收乙醇，濃縮液用聚酰胺樹脂柱吸附酚類化合物，50％～95％的乙醇洗脫，收集65％～95％的洗脫液，濃縮至回收至含固量小于10％時(shí)，又用0.4μm的膜過濾一次，再進(jìn)行氣流式無菌噴霧干燥，控制進(jìn)液量，控制進(jìn)口溫度為75℃～95℃、出口溫度66℃～85℃，使高純提取物粒徑小于100μm，得燈盞細(xì)辛提取物微粉；三、按常規(guī)工藝加入滴眼液藥用輔料及溶劑，得到滴眼液。
上述步驟一中乙醇的加入量為燈盞細(xì)辛的4-7倍(重量)，提取次數(shù)可為多次，如三次；所述的澄清劑為甲殼素、明膠、ZTC天然澄清劑的一種或幾種。
本發(fā)明所述產(chǎn)品及其制備方法必須將燈盞細(xì)辛提取物進(jìn)行超細(xì)化處理，使其粒徑小于100μm，目的是通過增加藥物的體表面積，增加藥物與眼黏膜的接觸，從而提高藥物的生物利用度；另一方面，也可以改善藥物在溶液中的分散狀況，提高美觀性。
本發(fā)明產(chǎn)品具有活血化瘀、改善血液循環(huán)的作用，主要適用于眼底視網(wǎng)膜靜脈阻塞、視網(wǎng)膜病變、視神經(jīng)病變、眼球后退綜合征蛛網(wǎng)膜下腔出血后血管痙攣、青光眼血流等眼科疾病的治療。本發(fā)明為外用滴眼液。
本發(fā)明的藥學(xué)研究及部分藥理研究1、燈盞細(xì)辛提取物滴眼液的穩(wěn)定性取5個(gè)含燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液樣品在室溫下避光保管，放置1、2、3、6、12個(gè)月，按時(shí)檢查，其外觀基本不變，有效成分經(jīng)檢驗(yàn)也未發(fā)生變化。因此，初步認(rèn)為該燈盞細(xì)辛提取物滴眼液的各種處方制得的產(chǎn)品均可達(dá)到1年左右的保質(zhì)期。
穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定和鑒別等參照國標(biāo)益脈康片執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為WS3-B-2410-97及《中國藥典》2000版二部滴眼液的相關(guān)通則。結(jié)果如下

結(jié)果表明本發(fā)明制備的產(chǎn)品，經(jīng)過初步穩(wěn)定性考察，產(chǎn)品質(zhì)量基本穩(wěn)定，可達(dá)1年以上。
2、無菌恢復(fù)性取5個(gè)燈盞細(xì)辛滴眼液樣品，經(jīng)過感官評價(jià)，結(jié)果如下表

應(yīng)用后，檢驗(yàn)表明，燈盞細(xì)辛滴眼液劑，具有較好的無菌恢復(fù)性。
3、活血化瘀作用比益脈康效果好
(1)對大鼠血液粘度的影響雄性SD大鼠60只，體重320～360g，隨機(jī)分為5組，每組12只。正常對照組給予0.5％CMC-Na10ml/kg，陽性對照給予益脈康片40mg/kg，分別給予實(shí)施例1～5滴眼液0.15、0.3、0.6g/kg。各組動物按劑量每日灌胃給藥一次，連續(xù)6天，給藥容積均為10ml/kg。于末次給藥后1h，腹腔注射40mg/kg戊巴比妥鈉麻醉動物，頸動脈取血，用2.7％EDTA抗凝，全血與抗凝劑體積之比為9∶1。部份抗凝血用于測定全血粘度，部份以2000rpm離心后分離血漿測定血漿粘度。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明大鼠給予實(shí)施例1～10滴眼液0.15、0.3、0.6g/kg，可顯著降低200-30S-1切變率下的全血粘度和全血還原粘度，并能明顯縮短紅細(xì)胞電泳時(shí)間，但對紅細(xì)胞壓積和血漿粘度無明顯影響，其作用強(qiáng)度有劑量依賴性。結(jié)果比益脈康好。
(2)對大鼠血凝及血小板聚集的影響雄性SD大鼠75只，295～360g，隨機(jī)分為5組，每組15只。劑量分組及給藥方法同前。于末次給藥后1h，腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉后，頸動脈插管取血，用3.8％枸椽酸鈉抗凝，全血與抗凝劑體積之比為9∶1。1000rpm離心5min制備富血小板血漿(PRP)，3500rpm離心10min制備貧血小板血漿(PPP)。按比濁法測定ADP-2Na誘導(dǎo)的血小板聚集率，ADP的終濃度為6mol/l；按試劑盒方法分別測定TT、PT、APTT及FIB。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明試驗(yàn)樣品能明顯延長TT及APTT時(shí)間，作用呈劑量依賴關(guān)系；對由ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，具有明顯抑制作用，且在一定范圍內(nèi)呈量效關(guān)系。結(jié)果較益脈康片要好。
(3)對小鼠實(shí)驗(yàn)性微循環(huán)障礙的影響取18.5～24.5g小鼠60只，雌雄各半，按性別和體重隨機(jī)分為6組，每組10只。實(shí)驗(yàn)室溫度保持在25±1℃。各組動物每日按劑量灌胃給藥一次，連續(xù)3天。末次給藥后30分鐘，以10％烏拉坦0.15ml/10g體重腹腔注射麻醉動物，固定耳廓，置于放大240倍的微循環(huán)顯微儀下，以合適的毛細(xì)血管(動、靜脈平行，為第三級分支)為觀察對象，按0.1mg/kg的劑量給小鼠腹腔注射鹽酸腎上腺素造成實(shí)驗(yàn)性微循環(huán)障礙，分別采集造型前、造型后5、10、15及20分時(shí)的圖象，測定以下四個(gè)指標(biāo)①血液流態(tài)(流態(tài)分5級停滯為0分；粒流為1分；粒線流為2分；線粒流為3分；線流為4分)；②微動脈管徑(A3)；③微靜脈管徑(V3)；④毛細(xì)血管網(wǎng)計(jì)數(shù)。觀察并記錄各項(xiàng)指標(biāo)的變化情況，以各組給藥前后的變化值進(jìn)行組間u檢驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)樣品能明顯增加鹽酸腎上腺素所致實(shí)驗(yàn)性微循環(huán)障礙小鼠的微動脈及微靜脈管徑，表明其具有明顯改善微循環(huán)的作用，而微循環(huán)改善對眼底視網(wǎng)膜靜脈阻塞、視網(wǎng)膜病變、視神經(jīng)病變、眼球后退綜合征蛛網(wǎng)膜下腔出血后血管痙攣、青光眼血流等眼科疾病有非常好的治療作用，與益脈康片相比有更明顯的作用。
4、視網(wǎng)膜的改善作用選取視網(wǎng)膜病變自愿受試者10名，在醫(yī)生的監(jiān)護(hù)下，試用本實(shí)施例4制得的樣品，用法用量為4次/天，2滴/次，左右眼都用。做好用前和用后的記錄，10天后，進(jìn)行判斷，結(jié)果表明，本發(fā)明產(chǎn)品對視網(wǎng)膜的病變有良好的改善作用，而未見不良反應(yīng)。
本發(fā)明所述的含燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明一、穩(wěn)定性在常溫下燈盞細(xì)辛滴眼液劑放置1年，產(chǎn)品穩(wěn)定可靠，各項(xiàng)指標(biāo)均合格，完全符合眼科制劑及滴眼液劑的要求；二、無菌恢復(fù)性應(yīng)用檢驗(yàn)表明，燈盞細(xì)辛滴眼液劑，具有較好的無菌恢復(fù)性；三、活血化瘀作用比益脈康效果好；四、視網(wǎng)膜的改善作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、燈盞細(xì)辛提取物微粉 85g硼酸 4g
硼砂6.7g硫代硫酸鈉 6g對羥基苯甲酸乙酯1.2g甲基纖維素 11.7g海藻酸鈉8.9g注射用水加至5000ml燈盞細(xì)辛提取物微粉制備取符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的燈盞細(xì)辛，打成粗粉，過10～20目篩，用體積濃度為60％的乙醇提取，按6、5、5倍量的乙醇分別提取三次，合并提取液；用澄清劑甲殼素澄清，過濾，60℃以下溫度濃縮，回收乙醇，濃縮液用聚酰胺樹脂柱吸附酚類化合物，50％～95％的乙醇洗脫，收集65％～95％的洗脫液，濃縮至回收至含固量小于10％時(shí)，又用0.4μm的膜過濾一次，再進(jìn)行氣流式無菌噴霧干燥，控制進(jìn)液量，控制進(jìn)口溫度為75℃～95℃、出口溫度66℃～85℃，使高純提取物粒徑小于100μm，得燈盞細(xì)辛提取物微粉；取上述配方量的硼酸、硼砂、硫代硫酸鈉、對羥基苯甲酸乙酯，溶于熱注射用水中，再加入預(yù)先溶好的甲基纖維素和海藻酸鈉溶液，混均后，加入燈盞細(xì)辛微粉溶解或混勻，濾過，用氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，并用硼酸、硼砂將pH調(diào)至6～8后，以100℃30分鐘流通蒸汽滅菌，無菌分裝即得滴眼液成品。
實(shí)施例2燈盞細(xì)辛提取物微粉360g磷酸二氫鈉4.6g磷酸氫二鈉7.7g亞硫酸鈉 5g苯扎溴銨 2.4g羥甲基纖維素鈉12.5g注射用水加至 5000ml
制備燈盞細(xì)辛提取物微粉，將滴眼液藥用輔料溶解于溶劑注射用水中，加入燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉溶解或混勻，濾過，加入等滲劑，將PH調(diào)至6～8后，以100℃30分鐘流通蒸汽滅菌，無菌分裝即可得滴眼液成品。
實(shí)施例3燈盞細(xì)辛提取物微粉1000g醋酸 1.6g醋酸鈉8.1g維生素C 4.3g山梨酸1.6g聚乙烯醇 10.3g注射用水加至 5000ml制法參照實(shí)施例1或2，可得滴眼液成品。
實(shí)施例4燈盞細(xì)辛提取物微粉1500g碳酸氫鈉 12g硫脲 3.7g山梨酸1.6g對羥基苯甲酸乙酯 3.2g聚乙烯醇 10.3g海藻酸鈉 6.3gγ-亞麻酸 2g注射用水加至 5000ml制法參照實(shí)施例1或2，可得滴眼液成品。
實(shí)施例5燈盞細(xì)辛提取物微粉700g碳酸氫鈉 9g硼酸 6g
硼砂7.9g焦亞硫酸鈉 6.1g山梨酸 2.6g對羥基苯甲酸乙酯2.2g聚乙烯醇12.5g海藻酸鈉6.9g磷脂3g注射用水加至5000ml制法參照實(shí)施例1或2，可得滴眼液成品。
權(quán)利要求
1.一種燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液，其特征在于所述的滴眼液由燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉、滴眼液藥用輔料和溶劑組成，所含燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉的重量體積百分比為1-40％，余量為含滴眼液藥用輔料的溶劑。
2.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液，其特征在于所述燈盞細(xì)辛有效成分提取物為燈盞細(xì)辛的醇提取物。
3.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液，其特征在于所述燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉為粒徑小于100μm的超細(xì)化微粉。
4.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液，其特征在于所述燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液中藥用輔料為pH值調(diào)節(jié)劑、滴眼液等滲調(diào)整劑、滴眼液改善生物利用度的輔料、抗氧劑、助懸增稠劑。
5.如權(quán)利要求4所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液，其特征在于所述的pH值調(diào)節(jié)劑類有硼酸、硼砂、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、碳酸鈉、醋酸、醋酸鈉；所述的滴眼液等滲調(diào)整劑有氯化鈉、硼酸、葡萄糖、硼砂、氯化鉀、甘油；所述的滴眼液改善生物利用度的輔料有磷脂、亞油酸、多不飽和脂肪酸、α-亞麻酸、γ-亞麻酸等植物食用或藥用油；抗氧劑有焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、抗壞血酸、硫脲；所述的滴眼液助懸劑與增稠劑有甲基纖維素、羥甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素、羥丙乙纖維素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸鈉等；防腐劑有尼泊金、苯扎氯銨、苯扎溴銨、洗必泰、三氯叔丁醇、苯乙醇、硫柳汞、硝酸苯汞。
6.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液的制備方法，其特征在于由以下步驟組成一、取符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的燈盞細(xì)辛，打成粗粉，過10～20目篩，用體積濃度為60～80％的乙醇提取，合并提取液；二、用澄清劑澄清，過濾，60℃以下溫度濃縮，回收乙醇，濃縮液用聚酰胺樹脂柱吸附酚類化合物，50％～95％的乙醇洗脫，收集65％～95％的洗脫液，濃縮至回收至含固量小于10％時(shí)，又用0.4μm的膜過濾一次，再進(jìn)行氣流式無菌噴霧干燥，控制進(jìn)液量，控制進(jìn)口溫度為75℃～95℃、出口溫度66℃～85℃，使高純提取物粒徑小于100μm，得燈盞細(xì)辛提取物微粉；三、按常規(guī)工藝加入滴眼液藥用輔料及溶劑，得到滴眼液。
7.如權(quán)利要求6所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液的制備方法，其特征在于步驟一中乙醇的加入量為燈盞細(xì)辛的4-7倍。
8.如權(quán)利要求6所述的燈盞細(xì)辛有效成分提取物滴眼液的制備方法，其特征在于所述的澄清劑為甲殼素、明膠、ZTC天然澄清劑的一種或幾種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種以燈盞細(xì)辛為原料提取燈盞細(xì)辛有效成分提取物制備的藥物制劑及其制備方法。本發(fā)明由燈盞細(xì)辛有效成分提取物微粉、滴眼液藥用輔料和溶劑組成，所含燈盞細(xì)辛提取物微粉的重量體積百分比為1－40％，余量為含滴眼液藥用輔料的溶劑。本發(fā)明所述產(chǎn)品及其制備方法必須將燈盞細(xì)辛提取物進(jìn)行超細(xì)化處理，使其粒徑小于100μm，目的是通過增加藥物的體表面積，增加藥物與眼黏膜的接觸，從而提高藥物的生物利用度；另一方面，也可以改善藥物在溶液中的分散狀況，提高美觀性。本發(fā)明產(chǎn)品具有活血化瘀、改善血液循環(huán)的作用，主要適用于眼底視網(wǎng)膜靜脈阻塞、視網(wǎng)膜病變、視神經(jīng)病變、眼球后退綜合征蛛網(wǎng)膜下腔出血后血管痙攣、青光眼血流等眼科疾病的治療。
文檔編號A61P27/00GK1762404SQ20041007952
公開日2006年4月26日 申請日期2004年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月22日
發(fā)明者郭晉洲, 孫冰, 劉建康 申請人:云南白藥集團(tuán)大理藥業(yè)有限責(zé)任公司