專利名稱：金蒿抗病毒膠囊的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物配置品，特別是屬于一種由中草藥提取物配制的復(fù)方抗病毒中藥制劑。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有的抗病毒藥，作用于病毒的不同復(fù)制周期，抑制病毒的復(fù)制或阻止病毒作用細(xì)胞受體，或通過機(jī)體免疫系統(tǒng)消滅病毒，但都有選擇性不高，抗病毒范圍不廣及易產(chǎn)生耐藥性的缺點。目前公認(rèn)的廣譜效果較好的抗病毒藥有干擾素(interferone)、利巴韋林(ribaririne)、拉米夫啶(lamivudine)，干擾素對乙肝病毒、流感病毒、巨細(xì)胞病毒等感染均有一定療效，用藥后可阻止疾病的發(fā)展，停藥后易復(fù)發(fā)。且有發(fā)燒、頭痛等副作用，價錢也非常昂貴。利巴韋林和拉米夫啶在治療過程中，病毒易產(chǎn)生耐藥性，目前這幾種藥抗病毒的療效也都不太理想。國內(nèi)對苦味葉下珠、苣荬菜、香薷、野菊花、金銀花、柴胡、陳皮、貫葉金絲桃、一枝蒿等中藥、植物藥抗病毒作用的研究證實，它們具有作用強(qiáng)、持久、不易耐藥(多靶點)等特點。貫葉金絲桃(Hypericum perforatum)為新疆維吾爾藥，收載于中華人民共和國衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)《維吾爾藥分冊》，我國分布于華東、西南及西北地區(qū)，其提取物中的活性成分為苯并二蒽酮類(金絲桃素、偽金絲桃素)和黃酮類化合物，能夠滅活包膜病毒、鼠巨細(xì)胞病毒和辛德比病毒、HIV等，可治療丙型肝炎、慢性丙型肝炎及其相關(guān)的病毒性疾病，對肝臟具有保護(hù)作用等，對柯薩奇病毒、流感病毒呼吸道合胞病毒、流感病毒A3、I型單純皰疹病毒也有明顯的抑制作用，還具有抗逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用。一枝蒿(Achillea rupestris L)是傳統(tǒng)維吾爾藥，為蒿屬、菊科多年生草本植物，全世界約有400多種，我國約占1/2，新疆約有70種。植物學(xué)家Besser，W.S(1829)按著它們各自形態(tài)上的親疏關(guān)系和特點，又把它們分為4個不同的組型青蒿組、苦艾組、龍木蒿組、絹蒿組。一枝蒿歸苦艾組，廣泛分布于天山和阿爾泰山，全草含氨基酸、黃酮類、酮酸類、微量生物堿及少量揮發(fā)油，有具有抗細(xì)菌、抗真、抗病毒、抗瘧、驅(qū)蟲、利膽、強(qiáng)心、解毒、止血、擴(kuò)張支氣管、抗腫瘤、抗過敏、以及增強(qiáng)免疫機(jī)能等作用，一枝蒿提取物能夠抑制HBV-DNA的復(fù)制，且對呼吸道常見病毒有明顯的抑制作用，對速發(fā)型過敏反應(yīng)也有抑制作用。一枝蒿除水煎劑這一古老的劑型外，在劑型上現(xiàn)有如下幾種一枝蒿浸膏片，一校蒿注射液，復(fù)方一支蒿感冒沖劑，一枝蒿泡沸劑、一枝蒿總黃酮膠囊等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種治療呼吸道病毒感染的藥物金蒿抗病毒膠囊，它由重量比為1∶1的貫葉金絲桃與一枝蒿全草的提取物組成，即先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30～60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用3∶1的石油醚和乙酸乙脂為洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位苯并二蒽酮類、黃酮類和酮酸的浸膏粉，整理后裝入膠囊即得成品。
金蒿抗病毒膠囊的制備方法按下列步驟進(jìn)行先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30～60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用3∶1的石油醚和乙酸乙脂為洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位苯并二蒽酮類、黃酮類和酮酸的浸膏粉，整理后裝入膠囊即得成品。
金蒿抗病毒膠囊作為制備治療呼吸道病毒感染藥物的應(yīng)用，該膠囊由重量比為1∶1的貫葉金絲桃與一枝蒿全草的提取物組成，即先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30～60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用3∶1的石油醚和乙酸乙脂為洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位苯并二蒽酮類、黃酮類和酮酸的浸膏粉，整理后裝入膠囊即得成品。該藥是用于治療呼吸道病毒感染的廣譜抗病毒中藥。
本發(fā)明為棕黃色粉末，每粒膠囊含160mg，主治呼吸道病毒感染，對柯薩奇病毒B3、B5、副流感病毒、流感病毒A3、呼吸道合胞病毒、單純皰疹病毒等均有明顯的抑制作用，效果強(qiáng)于單一藥材提取物，成人每次口服1粒，每日3次，以10～15日為一個療程。
金蒿抗病毒膠囊原料藥(原料藥28mg＝1g生藥)用高純水配制成50mg/ml的原藥液，陽性對照藥利巴韋林片(湖北紐蘭藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號030302)用高純水配制成10mg/ml的原藥液，按Reed-Muench法計算對人喉癌傳代細(xì)胞HEP-2株培養(yǎng)細(xì)胞(購自中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所)的50％毒性濃度(TC50)和最大無毒濃度(TC0)，試驗結(jié)果(見表1)表1.金蒿抗病毒膠囊對培養(yǎng)細(xì)胞的TC0TC50(mg/ml)藥液 原藥液 TC0TC50金蒿抗病毒膠囊50 1.45 2.50利巴韋林 10 1.80 2.40表2金蒿抗病毒膠囊體外抗病毒實驗藥液 病毒種類 EC50TIHVJ1.20 3.0RSV0.34 10.0金蒿抗病毒膠囊原料CoxB30.45 5.5藥(1.45mg/ml) CoxB50.58 4.5HSV-I 1.18 3.0A30.75 6.5HVJ1.18 3.0RSV0.50 8.0CoxB31.71 3.0利巴韋林CoxB51.30 3.0HSV-I 0.62 5.0A31.78 3.0
表2結(jié)果顯示金蒿抗病毒膠囊原料藥在50mg/ml對呼吸道合胞病毒(RSV)、柯薩奇B族病3，5型(CoxB3、CoxB5)、流感病毒3型(A3)等均有明顯的抑制作用，其EC50分別為0.34、0.45、0.58、0.75mg/ml，治療指數(shù)(TI)分別為10.0、5.5、4.5、6.5，對副流感病毒(HVJ)、單純皰疹病毒(HSV-I)亦有一定的抑制作用，其EC50均分別為1.20、1.18mg/ml，TI均為3。
表3金蒿抗病毒膠囊原料藥與各單味藥提取物抗病毒作用比較(mg/ml)病毒 金蒿膠囊原料藥 金絲桃原料藥 一枝蒿原料藥種類 EC50TI EC50TI EC50TIHVJ1.2 3.0 2.6 4.0 1.40 2.8RSV0.3410.00.58 8.5 0.67 6.5CoxB30.455.5 1.50 1.8 0.37 7.0CoxB50.584.5 0.98 3.0 0.55 4.8HAV-I 1.183.0 3.56 1.2 1.30 2.8A30.756.5 3.09 3.5 0.89 6.8表3結(jié)果表明，在同樣條件下金蒿抗病毒膠囊原料藥比兩個單個藥材提取物抗病毒作用強(qiáng)，EC50劑量小，TI值高。
表4金蒿抗病毒膠囊原料和各單味藥提取物對小鼠肺內(nèi)病毒增殖的影響劑量 檢查陽性(數(shù))陽性率 抑制率組別 n(mg/ml)總數(shù)(％) (％)正常對照組 - 10 210.0 8.0±3.03.8-模型組 - 10 210.0 171.0±10.2 81.4 -利巴韋林組 80.0 10 198.0 75.0±8.9***37.9 56.1415.0 10 197.0 120±12.0**60.9 29.82金蒿膠囊30.0 10 200.0 80.0±9.7***40.0 53.22原料45.0 10 199.0 50.0±4.5***25.1 70.7615.0 10 197.0 145.0±9.9*+73.6 15.20金絲桃原料45.0 10 198.0 108.0±11.0**+54.6 36.8415.0 10 197.0 135.0±14.2*+67.5 21.05一枝蒿原料45.0 10 210.0 75.0±9.1***+35.7 56.14*p＞0.05，**p＜0.05，***p＜0.01 vs 模型組+p＜0.05金絲桃原料藥、一枝蒿原料藥vs金蒿膠囊原料相應(yīng)劑量組。
表4結(jié)果表明，金蒿膠囊原料抑制肺內(nèi)病毒增殖作用明顯強(qiáng)于兩個單味藥材原料藥。
急性毒性試驗金蒿抗病毒膠囊原料配成20％濃度，給4只小鼠(18-22克)灌胃給藥一次，0.4ml/10g，連續(xù)觀察7天，小鼠無一只死亡。說明只能作最大耐受量試驗，選昆明中小鼠20只，體重20.2±1.3，雌雄各半，按0.4ml/10g灌胃給藥一次，連續(xù)觀察7天，小鼠無一只死亡，經(jīng)計算最大耐受量為8.0g/Kg。成人每天口服原料藥0.45g，即0.0075g/kg.d，最大耐受量為成人每天每公斤體重用量1066倍。
大鼠長期毒性試驗金蒿抗病毒膠囊按2.0、4.0、6.0g/Kg.d灌胃給藥，每天一次，每周6天，連續(xù)6個月，臟器系數(shù)、血常規(guī)、血生化與對照組比較無異常，病理組織學(xué)檢查未見異常。結(jié)論金蒿抗病毒膠囊在給藥劑量與時限范圍內(nèi)，對大鼠無明顯毒性。
具體實施例方式
本發(fā)明所用中草藥原料種類貫葉金絲桃為藤黃科植物貫葉金絲桃的干燥全草，為新疆維吾爾藥，我國分布于華東、西南及西北地區(qū)，其提取物中的活性成分為苯并二蒽酮類(金絲桃素、偽金絲桃素)和黃酮類化合物；一枝蒿為蒿屬、菊科多年生草本植物，廣泛分布于天山和阿爾泰山，其全草含氨基酸、黃酮類、酮酸類、微量生物堿及少量揮發(fā)油。
實施例一 先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草100公斤，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用石油醚∶乙酸乙脂為3∶1的洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位苯并二蒽酮類、黃酮類和酮酸的浸膏粉2.8公斤，整理后裝入膠囊即得成品。
實施例二 先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草100公斤，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加50℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用石油醚∶乙酸乙脂為3∶1的洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位苯并二蒽酮類、黃酮類和酮酸的浸膏粉2.8公斤，整理后裝入膠囊即得成品。
實施例三 先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草100公斤，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用石油醚∶乙酸乙脂為3∶1的洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位苯并二蒽酮類、黃酮類和酮酸的浸膏粉2.8公斤，整理后裝入膠囊即得成品。
權(quán)利要求
1.金蒿抗病毒膠囊，其特征在于由重量比為1∶1的貫葉金絲桃與一枝蒿全草的提取物組成，即先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30～60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用石油醚∶乙酸乙脂為3∶1的洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位浸膏粉，整理后裝入膠囊即得成品。
2.金蒿抗病毒膠囊的制備方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30～60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用石油醚∶乙酸乙脂為3∶1的洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位浸膏粉，整理后裝入膠囊即得成品。
3.金蒿抗病毒膠囊作為制備治療呼吸道病毒感染藥物的應(yīng)用，其特征在于由重量比為1∶1的貫葉金絲桃與一枝蒿全草的提取物組成，即先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，過10目篩，加8倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.18～1.22，溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，置索氏提取器中，加30～60℃的石油醚脫脂至無色，棄取醚液，殘渣加醋酸乙酯萃取3次，合并醋酸乙酯液，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用石油醚∶乙酸乙脂為3∶1的洗脫劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、真空干燥，得金蒿有效部位浸膏粉，整理后裝入膠囊即得成品。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療呼吸道病毒感染的藥物金蒿抗病毒膠囊，它由重量比為1∶1的貫葉金絲桃與一枝蒿全草的提取物組成，即先按重量比1∶1稱取貫葉金絲桃和一枝蒿全草，粉碎成粗粉，加8倍量70％乙醇回流提取2次，濾液濃縮至相對密度為1.18～1.22、溫度為60℃的清膏，噴霧干燥為浸膏粉，再置于索氏提取器中，加30℃～60℃的石油醚脫脂，減壓回收醋酸乙酯得油狀物，再加到硅膠柱中，用3∶1的石油醚和乙酸乙脂為洗脫劑洗脫，減壓濃縮、真空干燥為浸膏粉，整理后裝入膠囊即可，成品為棕黃色粉末，每粒膠囊含160mg，主治呼吸道病毒感染，成人每次口服1粒，每日3次，以10～15日為一個療程。
文檔編號A61K9/48GK1583152SQ20041004868
公開日2005年2月23日 申請日期2004年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月9日
發(fā)明者劉發(fā), 邢建國, 馮孝章, 吉騰飛, 崔曉蘭 申請人:新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所