專利名稱：具有抗病毒作用的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗病毒作用的藥物組合物。
背景技術(shù)：
病毒引起的疾病是人類的主要傳染病，嚴(yán)重危害人類健康。雖然抗病毒藥物的種類較多，但由于其抗病毒范圍窄，或是因?yàn)樗幬锏亩靖弊饔么蟮戎T多原因，使抗病毒藥物的臨床應(yīng)用受到了極大的限制。
莪術(shù)油是從中藥莪術(shù)中提取的揮發(fā)油，體內(nèi)外試驗(yàn)已證實(shí)其對流感病毒A1、A3、合胞病毒均具有明顯的抗病毒作用，抗病毒范圍廣，且無毒副作用，莪術(shù)油的靜脈滴注制劑被廣泛用于治療小兒肺炎、病毒性肺炎、急性上呼吸道感染、病毒性腸炎及病毒性心肌炎、腦炎等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在上述研究的基礎(chǔ)上，提供一種可具有更理想的廣譜抗病毒作用的藥物組合物。
本發(fā)明具有抗病毒作用的藥物組合物，是以莪術(shù)油和薏苡仁油為有效藥用成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，其中莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比例為1/0.2～1/5。其中，較好的是以莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比例為1/0.5～1/2，并以莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比采用1/0.5～1/1為優(yōu)選。
如上述，在本發(fā)明的上述藥物組合物中，莪術(shù)油是一種已有報(bào)道的具有抗病毒作用的成分。薏苡仁油則是從中藥薏苡仁中提取的揮發(fā)油，目前有報(bào)道和試驗(yàn)表明，其可具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，提供高能量營養(yǎng)、治療心血管系統(tǒng)疾病、抑制惡性腫瘤的作用，已有將其用于對人體結(jié)腸癌、肝癌、肺癌等治療的報(bào)道。本發(fā)明將該兩種從天然藥用原料中提取的有效藥用成分相互配伍組合后，試驗(yàn)結(jié)果表明在抗病毒作用方面可產(chǎn)生出協(xié)同增效等更為滿意的效果。
以上述組成形式的有效藥用成分，與藥物中可以接受的相應(yīng)藥用輔料或載體等輔助添加成分組合，并按相應(yīng)的制藥方法和工藝加工處理，即可制成為相應(yīng)的口服型、注射型或其它可用形式的藥物制劑。例如，與在口服制劑中可以被接受的崩解劑、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、填充劑等常用的輔助添加成份混合后，按相應(yīng)的常規(guī)工藝方法處理，即可制成為片劑、滴丸劑、膠囊劑或適當(dāng)形式的緩釋劑、控釋劑等固體制劑形式的口服藥物；與常用的增溶劑、助溶劑、乳化劑、潤濕劑等表面活性劑、pH調(diào)節(jié)劑、稀釋劑、穩(wěn)定劑、增稠劑等混合，按相應(yīng)的常規(guī)工藝方法處理，即可制成為乳劑、噴霧劑、滴鼻劑等。按注射藥物制劑中允許使用的適當(dāng)溶劑和附加劑配合及相應(yīng)的工藝操作處理后，可以制備成相應(yīng)的乳劑或粉針等肌肉或靜脈形式的注射制劑藥物。
作為本發(fā)明上述藥物有效藥用成分的莪術(shù)油和/或薏苡仁油，其來源除可為市售的商品莪術(shù)油和/或商品苡仁中性油脂外，也可以采用以常規(guī)水蒸氣蒸餾方法從中藥原料莪術(shù)中提取得到的莪術(shù)揮發(fā)油成分，或是以目前常規(guī)的CO2超臨界萃取技術(shù)從中藥原料薏苡仁中提取薏苡仁油成分。
在制備口服藥物制劑時(shí)，一般可以使用上述莪術(shù)油和/或薏苡仁油的粗品油為有效藥用成分，但作為注射藥物制劑應(yīng)當(dāng)對其進(jìn)行精制。其中對莪術(shù)油可按目前已有的莪術(shù)油注射劑的方式進(jìn)行處理外，使薏苡仁油達(dá)到注射用油標(biāo)準(zhǔn)時(shí)可以采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法精制在薏苡仁油中加入10％-20％(w/w)氫氧化鈉溶液，充分?jǐn)嚢柘律郎刂?0-70℃，以中和其中的游離脂肪酸。靜置后分離油液，過濾，反復(fù)加注射用水煮洗，除去已皂化的成分及過剩的堿，至油液澄清為止，分離油液并將其加熱至50-60℃，于攪拌下加入5-10％酸性陶土及0.5-1％活性炭，加熱至80-90℃不斷攪拌30-60分鐘過濾，無水CaCl2等脫水，靜置，過濾，處理得到符合文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)的注射劑用薏苡仁油。
下述相關(guān)的抗病毒試驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明上述的抗病毒藥物，可優(yōu)先作為小兒肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒，急性上呼吸道感染、病毒性腸炎及病毒性心肌炎、腦炎等病毒性疾病等適應(yīng)癥的治療藥物。此外，在被用于對如肺癌、肝癌和結(jié)腸癌等惡性腫瘤的治療上，其也可具有同樣的意義和價(jià)值。
以下通過具體實(shí)施方式
的實(shí)例再對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段做出的各種替換或變更，均包括在本
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1組成注射用莪術(shù)油 50g注射用薏苡仁油50g
注射用豆磷脂10g注射用甘油 25ml加注射用水至1000ml將豆磷脂與預(yù)熱的(80℃)注射用水及甘油混合，于高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以8000轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌3分鐘，反復(fù)三次，制成均勻的磷脂分散液。加入預(yù)熱80℃的莪術(shù)油和薏苡仁油后，于同樣條件下再進(jìn)行三次高速攪拌，使成初乳液。加同樣預(yù)熱的注射用水至1000ml后，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)，在3.089×104kPa(315kg/cm2)壓力下，勻化至油滴粒徑為1μm左右。經(jīng)4號垂熔玻璃漏斗濾過后灌封于10ml安瓿內(nèi)，充氮，熔封，105℃滅菌45分鐘，即為所述的注射乳劑藥物。
實(shí)施例2分別取淀粉120g、乳糖120g、糊精45g、低取代羥丙基纖維素90g混合均勻，備用。另取莪術(shù)油100g和薏苡仁油50g，加至上述輔料中混合均勻，再加2.5％羥丙甲纖維素適量，制成顆粒，干燥，加入羧甲基淀粉鈉9g和硬脂酸鎂4.5g，再次混合均勻。裝入膠囊1000粒，或壓制成1000片并包薄膜衣，即為所述的膠囊劑或片劑。
實(shí)施例3將莪術(shù)油100g和薏苡仁油200g預(yù)熱至80℃，加入到PEG-6000熔融液中，攪拌混勻，在滴丸機(jī)中制成5000粒滴丸，即為所述的丸劑型藥物。
實(shí)施例4將豆磷脂20g與預(yù)熱的(80℃)水、吐溫-80及甘油50ml混合，于高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以8000轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌3分鐘，反復(fù)三次，制成均勻的磷脂分散液。加入預(yù)熱至80℃的莪術(shù)油100g和薏苡仁油50g后，于同樣條件下再進(jìn)行三次高速攪拌，使成初乳液。加同樣預(yù)熱的水至500ml后，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)，勻化至油滴粒徑為5-10μm。分裝，置塑料軟瓶中，每支10ml，即為所述的滴鼻劑。或?qū)⑵渲糜谀蛪喝萜髦?，加閥門、封帽，壓入拋射劑，搖勻，即為所述的噴霧劑。
以上述由莪術(shù)油與薏苡仁油為有效藥用成分組成的不同比例形式的藥物組合物作為本發(fā)明的試驗(yàn)藥物，以病毒唑?yàn)殛栃詫φ账幬铮M(jìn)行了抗病毒作用的藥效學(xué)試驗(yàn)。本發(fā)明實(shí)驗(yàn)藥物中有效藥用成分(莪術(shù)油/薏苡仁油)的選擇比例分別為1/0、1/0.5、1/1、1/2、1/4、0/1，按實(shí)施例1的方法制成注射乳劑，各組試驗(yàn)藥物的濃度以莪術(shù)油計(jì)為0.4g/100ml。
一、實(shí)驗(yàn)方法采用組織細(xì)胞半數(shù)感染量(TCID50)的方法，根據(jù)藥物對細(xì)胞病變的抑制效果，以確定試驗(yàn)藥物對HSV-I和RSV的抗病毒效果。
1.藥液配制用RPMI-1640對試驗(yàn)藥物(4mg/ml)進(jìn)行對倍稀釋，其藥液濃度分別為0.04mg/ml(1∶100)；0.02mg/ml(1∶200)；0.01mg/ml(1∶400)；0.005mg/ml(1∶800)；0.0025mg/ml(1∶1600)。病毒唑的濃度分別為0.062，0.031，0.015和0.008 mg/ml。
2.對Vero細(xì)胞和Hep-2細(xì)胞的最大無毒濃度測定在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的Vero單層細(xì)胞和Hep-2單層細(xì)胞中分別加入不同濃度的試驗(yàn)藥物，置37℃和5％CO2培養(yǎng)箱中96小時(shí)，觀察細(xì)胞病變，測定其對Vero細(xì)胞和Hep-2單層細(xì)胞的最大無毒濃度。
3.對HSV-I病毒致Vero細(xì)胞病變的抑制試驗(yàn)在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的Vero單層細(xì)胞內(nèi)，每孔感染HSV-I 10TCID50(7LgTCID50)病毒液，2小時(shí)后傾去病毒液，每孔內(nèi)再加入不同濃度的試驗(yàn)藥物或病毒唑，培養(yǎng)96小時(shí)后觀察細(xì)胞病變。
4、對RSV病毒致Hep-2細(xì)胞病變的抑制試驗(yàn)在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的Hep-2單層細(xì)胞內(nèi)，每孔感染RSV 10TCID50(6LgTCID50)病毒液，2小時(shí)后傾去病毒液，每孔內(nèi)再加入不同濃度的試驗(yàn)藥物或病毒唑，培養(yǎng)96小時(shí)后觀察細(xì)胞病變。
二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.各試驗(yàn)藥物對Vero細(xì)胞的最大無毒濃度，經(jīng)CPE法測定，均小于0.04mg/ml(1∶100)，在正式藥物試驗(yàn)中，則采用＜0.04mg/ml的藥物進(jìn)行體外抗病毒試驗(yàn)。
2.各試驗(yàn)藥物對HSV-I病毒致Vero細(xì)胞病變的抑制作用，對RSV病毒致Hep-2細(xì)胞病變的抑制作用。試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
表1 不同組成的試驗(yàn)藥物體外抗病毒作用

注“-”表示細(xì)胞無病變；“1+”約25％細(xì)胞發(fā)生病變、“2+”約50％細(xì)胞發(fā)生病變、“3+”約75％細(xì)胞發(fā)生病變，“4+”約100％細(xì)胞發(fā)生病變。
試驗(yàn)藥物組為本發(fā)明藥物組合物，以及單一成分的莪術(shù)油(1/0)或薏苡仁油(0/1)。
上述試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物組各種組成比例的莪術(shù)油/薏苡仁油組合物(1/0.5、1/1、1/2、1/4)在0.01mg/ml濃度時(shí)，對HSV-1和RSV都具有顯著的抑制作用，且強(qiáng)于單獨(dú)使用形式的莪術(shù)油(1/0)。莪術(shù)油的有效抑制濃度為0.02mg/ml，而薏苡仁油(0/1)在所有的試驗(yàn)濃度下基本均無抑制作用。
在上述試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，以莪術(shù)油/薏苡仁油(1/1)為試驗(yàn)藥物進(jìn)一步進(jìn)行了下述對流感病毒所致小鼠肺炎保護(hù)作用的試驗(yàn)。
取健康小鼠140只，隨機(jī)分為病毒唑陽性藥物對照組，本發(fā)明試驗(yàn)藥物莪術(shù)油/薏苡仁油組合物(1/1)的高、低劑量組，單一莪術(shù)油的高、低劑量組，以及模型對照組和正常對照組，每組20只，雌雄各半。取10倍LD50量(10TCLD50)滴鼻感染小鼠肺部，正常對照組吸入生理鹽水，30ul/只，感染后2小時(shí)，分別給予每只小鼠本發(fā)明試驗(yàn)藥物20、40mg/kg(以莪術(shù)油計(jì))，單一莪術(shù)油20、40mg/kg，病毒唑20mg/kg，im，模型對照組、正常對照組則均給予0.5ml生理鹽水，每天給藥3次，連續(xù)給藥5天。從給藥開始連續(xù)觀察15天。每天記錄小鼠感染流感病毒后的死亡數(shù)和死亡時(shí)間，以15天內(nèi)每組動物死亡總數(shù)按以下公式計(jì)算出死亡保護(hù)率和延長生命率死亡保護(hù)率(％)＝(模型組死亡率-實(shí)驗(yàn)組死亡率)；延長生命率(％)＝(實(shí)驗(yàn)組平均生活日數(shù)-模型組平均生活日數(shù))/(模型組平均生活日數(shù))×100％。
試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。小鼠感染病毒后給予高、低劑量的本發(fā)明試驗(yàn)藥物，均能降低動物死亡率，延長平均生活日數(shù)，隨著藥物劑量增加，作用增大，且優(yōu)于同等劑量的莪術(shù)油單用藥物，而模型對照組動物在4天后明顯消瘐，呼吸困難，開始死亡。與模型對照組比較，本發(fā)明藥物的高、低劑量能顯著降低動物死亡率(P＜0.05)，且優(yōu)于病毒唑和莪術(shù)油。
表2 試驗(yàn)藥物對小鼠病毒性肺炎的保護(hù)作用組別 劑量 死亡率 死亡保護(hù)率平均生活日延長生命率(mg/kg) (％) (％) (d) (％)對照組- - -15模型組- 100 -6.4±3.8病毒唑組 204060 10.1 ±4.0*89.1本發(fā)明藥物組 203070 11.3±3.9* 76.6(莪術(shù)油/薏苡仁油＝1/1)401090 13.2±4.6* 106.3204060 9.8±3.1* 53.1莪術(shù)油組403070 11.5±3.3* 79.7與模型組比較*P＜0.05上述試驗(yàn)結(jié)果清楚顯示，在本發(fā)明的上述藥物的兩種有效藥用成分中，莪術(shù)油可具有抗病毒作用，而薏苡仁油則幾無此作用，但采用以莪術(shù)油/薏苡仁油作為有效藥用成分的本發(fā)明藥物組合物，則在綜合的抗病毒作用方面可具有顯著的協(xié)同作用，其結(jié)果明顯優(yōu)于其中有效藥用成分莪術(shù)油的單獨(dú)作用，因而具有令人滿意的開發(fā)前景和價(jià)值。
權(quán)利要求
1.具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是以莪術(shù)油和薏苡仁油為有效藥用成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，其中莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比例為1/0.2～1/5。
2.如權(quán)利要求1所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是所說有效藥用成分莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比例為1/0.5～1/2。
3.如權(quán)利要求2所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是所說有效藥用成分莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比例為1/0.5～1/1。
4.如權(quán)利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是所說的藥物為口服型藥物制劑。
5.如權(quán)利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是所說的藥物為噴霧劑。
6.如權(quán)利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是所說的藥物為滴鼻劑。
7.如權(quán)利要求1至3之一所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，其特征是所說的藥物為注射型藥物制劑。
全文摘要
本發(fā)明為一種具有抗病毒作用的藥物組合物，以莪術(shù)油和薏苡仁油為有效藥用成分，與藥物中可以接受的輔助添加成分共同組成，其中莪術(shù)油/薏苡仁油的重量比例為1/0.2～1/5。該藥物可以制成為具有廣譜抗病毒作用的口服型或噴霧型、滴鼻型或注射型等多種制劑形式?？蓛?yōu)先適用于小兒肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒，急性上呼吸道感染、病毒性腸炎及病毒性心肌炎、腦炎等病毒性疾病等適應(yīng)癥的治療藥物，在用于治療如肺癌、肝癌和結(jié)腸癌等惡性腫瘤上也可具有同樣的意義和價(jià)值。
文檔編號A61K9/12GK1562193SQ20041002211
公開日2005年1月12日 申請日期2004年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月24日
發(fā)明者楊秀清, 陳剛, 周家明 申請人:成都厚發(fā)科技開發(fā)有限公司